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antivirales

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ANTIVIRALES 
01 de NOVIEMBRE DE 2012 
Vet. SABRINA GALDO NOVO  SGALDONOVO@FVET.UBA.AR 
Que es un antiviral? 
 Droga que bloquea la replicación viral o/y 
reduce la patogénesis del agente 
infecciosos. 
 
Como manejo una infección viral? 
Defensa 
inmune del 
individuo 
Vacunas Drogas 
Respuesta innata y adaptativa 
LAS VACUNAS MOVILIZAN EL 
SISTEMA INMUNE 
Atenuado 
Inactivado 
Subunidades 
PREVENCIÒN TRATAMIENTO 
+ 
Condiciones previas 
- Alta especificidad  seguridad 
 
 
 
 
- Baja toxicidad 
+ < acción mutagénica, carcinogénica teratogénica 
 
PARASITO 
INTERNO 
ENZIMAS = 
O AL 
HUESPED ˜ 
- Potencia  eficiencia 
 
 
Condiciones previas 
Condiciones previas 
• Potencia  eficiencia 
 
 
0% 
 
 
 
Eficiencia 
 
 
 
 
100% 
Tener en cuenta: dosis adecuada!! 
- Buena solubilidad y biodisponibilidad 
 
 
- Dosificación y costo conveniente 
 
Ej. HIV entra adiriendose a CD4r 
 
Proteína CD4 hipótesis de bloqueo de entrada 
Vida media muy baja 
Necesidad de cantidades incompatibles al haber tantos receptores 
El virus también se fusiona a la célula evitando ese mecanismo de entrada 
 
Condiciones previas 
Figure 1. HIV-1 (top) infects a macrophage cell (bottom) via binding of 
viral protein gp120 to cell-surface molecule CD4 and to co-receptor 
CCR5, poising gp41 for membrane fusion (BBC 2007). 
http://thurj.org/wp-content/uploads/2011/01/thurj3-1-atreya-f1.jpeg
Curso de la enfermedad  no útil para híper 
agudas 
 
 
Sintomatología  
 + tardo en identificar 
 + tarde doy el antiviral 
 - utilidad 
 
Localización viral vs. Difusión de la droga Ej. BHE 
 
 
LIMITANTES 
Evaluación 
In vitro  SCREENING EN CELULAS: 
% DE INHIBICION – CITOTOXICIDAD – ESPECIFICIDAD 
– ej. hepatitis b, c y papiloma no crecen bien in vitro. 
– fiebre hemorrágica  no económico  bioseguridad 
 
 
 
 
In vivo  Índice terapéutico 
- No hay modelo animal para hepatitis c 
 
LIMITANTES 
Cytotoxic 
effect of 
cisplatin on 
HT1080 cells. 
http://www.springerimages.com/Images/MedicineAndPublicHealth/1-10.1007_s00418-006-0183-4-0 
Posibles blancos antivirales 
• Interacción virus-célula, 
ingreso. 
• Desensamblaje. 
• Síntesis de DNA/RNA. 
• Síntesis proteica. 
• Modificaciones post-
traduccionales. 
• Ensamble y liberación. 
 
 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– ACYCLOVIR: 
HERPESVIRUS 
 
ESPECIFICO – NO TOXICO (PRODROGA) – EFICAZ 
 
NUCLEOSIDO SIMIL GUANOSINA - TERMINADOR DE CADENA 
 
 
 
DERIVADOS: 
VALACYCLOVIR (VALTREX®) 
FAMICICLOVIR (FAMVIR®) 
GUANOSINA ACYCLOVIR 
– GANCICLOVIR (CYTOVENE®) 
 
CITOMEGALOVIRUS 
(CON AMENAZA DE VIDA NEUMONIA COLITIS RETINITIS 
O VIH + / INMUNOSUPRIMIDOS) 
 
 
ALGO TOXICO 
 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– RIVAVIRIN (VIRAZOLE®) 
USO PARTICULAR 
 Aerosol en infantes con RSV (v. resp sincicial) – LASSA VIRUS – 
HANTAVIRUS – HEPATITIS B O C CON IFN 
 DISTEMPER – BoHV – PIF – CALICIVIRUS – INFLUENZA – IP3 
 
CITOTOXICO – MUTAGENICO 
(FALTA LICENCIA EN PAISES – USO CONTROVERTIDO) 
 
ANALOGO NUCLEOSIDICO 
COMPITE CON INOSINA MONOFOSFATO DESHIDROGENASA 
INHIBE INICIO DE POLIMERASAS DEP DE RNA 
INTERFIERE CON EL CAPPING DE mRNA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– ZIDOVUDINA AZT 
AZT DEBE SER 
FOSFORILADO POR 3 
KINASAS CELULARES A 
DIFERENCIA DEL 
ACICLOVIR (Primera P 
dada por HSV-1 TK). 
ORAL 
HIV 
 
Reduce número de 
algunos leucocitos en 
sangre, anemia y 
trastornos 
musculares. sola o en 
combinación con 
otros antivíricos, 
daño en hígado y 
acidosis láctica 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– FOSCARNET (FOSCAVIR®, TRISODIUM®, PHOSPHONAFORMATE®) 
 
HERPESVIRUS – VIRUS DE HEPATITIS B - HIV 
 
ALGO TOXICO SI SE DA EV 
SE ACUMULA EN TEJIDO OSEO Y ES NEFROTOXICO 
 
 
INHIBIDOR NO COMPETITIVO, NO NUCLEOSIDICO 
INTERFIERE EN SITIO DE ADHESION DE LA POLIMERASA VIRAL 
Y RT DE HIV. SE INCORPORA EN EL DNA 
“Mechanism of action of foscarnet against viral polymerases” Clyde S. Crumpacker, M.D. 
Dept of Infectious Diseases, Beth Israel Hospital, and the Dept of Medicine, Harvard Medical School, Boston, 
Massachusetts, USA. 7 June 2004. 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– NEVIRAPINE Y TIBO (TETRAHIDROIMIDAZOBENZODIAZEPINONE) 
 
INHIBIDOR DE LA TRANCRIPTASA REVERSA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
- NEVIRAPINE Y TIBO 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– AMANTADINA (SYMMETREL®) 
INFLUENZAVIRUS TIPO A 
 
ACTUA EN M2 
NO ENTRAN H+ 
NO CAMBIA LA HA NO SE EXPONE EL PEP. FUSION 
(TIPO B NO PRODUCE M2) 
 
NO TOXICO – DENTRO DE LAS 48 HS – MUTANTES 
 
TAMBIEN ACTUA EN SISTEMA NERVIOSO  
PARKINSON 
 
Influenza A 
DERIVADOS: 
RIMANTADINA – NO CRUZA BHE – 
SOLO INFLUENZA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– ZANAMIVIR - OSELTAMIVIR 
 
INFLUENZAVIRUS TIPO A Y B 
 
BLOQUEAN LA FUNCION DE LA NEURAMINIDASA 
NO REMUEVEN EL AC. SIALICO LOS VIRUS GEMAN DE LA 
CELULA PERO SIGUEN ADHERIDOS 
NO INFECTA 
 
 
NO TOXICO – INHALACION(ZANAMIVIR) ORAL (OSELTAMIVIR) 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– ZANAMIVIR - OSELTAMIVIR 
 
INHIBEN LA NEURAMINIDASA 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
Comparación de un sitio de clivaje de la proteasa de 
HIV con un inhibidor péptido mimético. 
Toward a live microbial microbicide for HIV: 
Commensal bacteria secreting an HIV fusion 
inhibitor peptide. PNAS, 2005. 
Poliproteina 
Gag-Pol 
A Natural substrate of the HIV-1 protease 
B Protease inhibitor Ro 31-8959 
– INHIBIDORES DE PROTEASA Y FUSION 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
http://www.pnas.org/content/102/34/11993/F1.large.jpg
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
vacunación de 1ml con 50UI 
IFN por día durante 7 días 
con 7 días de descanso 
durante 6 meses 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
Human IFN-a strengthens instead the 
immune response to viral 
infections, with a significant modulation of 
important cytokines like IL-1, 
IL-5, IL-6, IL-8, GM-CSF. 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– Que es in miRNA?? 
Pequeño mRNA endógeno que 
 regula la expresión de genes 
 
 
- Como se descubrió? 
1993 lee, feinbaum & ambros 
Gen lin-4 NO CODIFICA PARA PROTEINA SOLO PEQUEÑOS RNA 
3`UTR complementario con el lin-14 (prot. Nuclear que promueve el 
avanze al proximo estadio larval) 
Lo destruye 
 
 
miRNAs en todos los organismos  miRBase microrna.sanger.oc.uk 
Clivando al mRNA >plantas 
Reprimiendo la traducción 
del mRNA > mamiferos 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
miRNA (micro) 
Moléculas de doble cadena (˜21-25 
nt). Provienen de transcriptos 
endógenos con estructuras hairpin. 
Complementariedad variable con la 
secuencia blanco. 
siRNA (small interfering) 
Provienen de Moléculas de dsRNA 
(˜21-23 nt). Por DICER Respuesta 
ante un dsRNA foraneo. 
Complamentariedad totalcon la 
secuencia blanco. 
risc 
risc 
RISC: RNA induced silencing complex  complejo de 
silenciamiento inducido por RNA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA El gen 3D codifica para la RNA pol dependiente 
de RNA. Sintetiza un RNA- que se dobla el 
mismo formando una especie de templado 
primer que lo elonga el producto del gen 3d 
para formar dimeros de RNA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
SE PURIFICARON LOS 
PLASMIDOS CON MINIPREP Y 
SE SECUENCIARON 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA 
El sistema reportero fue un plasmido con el 
gen 3D entero con GFP 
+ 
Purificacion del virus y del RNA con KIT 
RT Y OBTENCION DE CDNA 
AMPLIFICACION CON PRIMERS DE 3D 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA 
CLONADO DE AMPLIFICACION EN KpnI Y XbaI EN pcDNA3.1- 
CT-GFP vector 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA 
TRANSFORMADO DE E. COLI COMPETENTES CON CALOR 
CHEQUEO DE SECUENCIACION 
CELULAS BHK 21 TRANSFECTADAS CON LIPOFECTAMINA 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
– siRNA 
BHK-21 cells were co-transfected in 
triplicate with Lipofectamine 
2000 and Opti-MEM I Reduced Serum 
Medium 
0.2 μg of reporter plasmid p3D-GFP and 
0.5 μg of each miRNA expression 
plasmid. 
Four miRNA expression plasmids 
were able to significantly silence 
the expression of the reporter 
plasmid 
Terminadores de cadena 
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos 
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos 
Moléculas solubles 
siRNA 
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
ANTIVIRALES POTENCIALES 
Agentes químicos 
Nuevas tecnologías 
Veterinary microbiology 
 By Dwight C. Hirsh, Nigel James Maclachlan, Richard L. Walker 
(Blackwell publishing, 2004) 
Droga Tópico 
Sistémic
o Posibles usos veterinarios 
Aciclovir + + Herpes 
Amantadin
a + Profilaxis de Influenza equina 
2-desoxi-D-
Glucosa + Herpes 
Foscarnet + + Herpes 
Ganciclovir + Citomegalovirus 
Idoxuridina + Herpes 
Interferon + 
Herpes felino, leucemia felina, peritonitis 
infecciosa felina 
Metisazona + Vaccinia bovina o pseudo cowpox 
Rivavirina 
 
+ + Influenza, parainfluenza, herpes bovino, distemper 
canino, peritonitis infecciosa felina, calcivirus 
felino 
Vidarabina + + Herpes canino 
Zidovuidina + 
Virus de la leucemia felina, anemia infecciosa 
equina, VIF 
Potenciales aplicaciones en medicina veterinaria 
ESTRATEGIAS PARA NUEVOS TARGETS 
ANTIVIRALES 
Probar drogas para tratamientos de 
cáncer 
 
Prueba de baterías de drogas y luego se 
evalúa su mecanismo de acción 
PERSPECTIVAS FUTURAS 
 Búsqueda de nuevos blancos 
 Diseño de nuevas drogas 
 Inhibidores de proteasas 
 Oligonucleótidos antisentido 
DISEÑO DE NUEVAS DROGAS 
DRACO 
DOBLE ACCION 
DETECTOR DE dsRNA 
Ej. PKR SE AUTOFOSFORILA Y 
FOSFORILA elf-2α QUE 
INHIBE LA TRADUCCION DE 
TODAS LAS PROTEINAS 
APOPTOSIS COMPLEJO DE 
SEÑALAMIENTO APOPTOTICO 
Ej. FADD o Apaf-1 QUE SE 
ACTIVAN Y TRANSACTIVAN 
OTRAS CASPASAS. 
ESTRATEGIAS 
VIRALES: 
- BLOQUEO DE PROT. DE 
SEÑALAMIENTO 
- SECUESTRO DE dsRNA 
- INTERFERENCIA CON DOMINIOS 
QUE RECONOCEN dsRNA 
-BLOQUE DE PRECURSORES DE 
CASCADA APOPTOTICA Ej. 
PPA BLOQUEA CASP 3 
POX BLOQUEA CASP 1 Y 8 
BIBLIOGRAFIA 
-PRINCIPLES OF VIROLOGY, FLINT, S.J., CAP 19 
-The New England Journal of Medicine. “drug therapy”. www.nejm.org, February 
18, 2011.Copyright © 1999 Massachusetts Medical Society. 
-Fenner`s veterinary Virology, fourth edition, part II 
-Papers en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ 
-US FOOD AND DRUG ADMINISTRATION http://www.fda.gov/ 
-
http://www.who.int/csr/disease/swineflu/frequently_asked_questions/swin
eflu_faq_antivirals/es/index.html 
-J of Gral Virol (1994), 75, 945 948. Role of virion M2 protein in influenza virus 
uncoating: specific reduction in the rate of membrane fusion between virus and 
liposomes by amantadine. S. A. Wharton, 
 
-sgaldonovo@fvet.uba.ar 
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
http://www.who.int/csr/disease/swineflu/frequently_asked_questions/swineflu_faq_antivirals/es/index.html
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siRNA & miRNA literature: 
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BIBLIOGRAFIA EXTRA 
sgaldonovo@fvet.uba.ar

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