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Cromatografia Liquida De Alta Resolucion
Equipo 6
Generalidades
Usos, características y aplicaciones
Generalidades
Es un tipo de cromatografía en columna utilizada frecuentemente en bioquímica y química analítica.
Esta técnica es considerada una de las técnicas de purificación más versátiles y confiables.
Separa los componentes de una mezcla basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre las sustancias analizadas y la columna cromatográfica.
Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase móvil. 
La fase móvil actúa de portador de la muestra.
Tipos de cromatografía
01
01
Cromatografía de fase normal
La cromatografía de fase normal (NP-HPLC) se caracteriza por separar los compuestos sobre la base de su polaridad. Esta técnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil apolar, y se utiliza cuando el compuesto de interés es bastante polar. 
Fases estacionarias
 silica tratada con RMe2SiCl, donde la R es una cadena alquil tal como C18H37 o C8H17. 
Diol
NH2
Carbonato de calcio
2018
02
La HPLC de fase inversa (RP-HPLC) consiste en una fase estacionaria apolar y una fase móvil de polaridad moderada. El tiempo de retención es mayor para las moléculas de naturaleza apolar, mientras que las moléculas de carácter polar eluyen más rápidamente.
El tiempo de retención aumenta con la adición de disolvente polar a la fase móvil y disminuye con la introducción de disolventes más hidrofóbicos. La cromatografía de fase reversa es tan utilizada que a menudo se lo denomina HPLC sin ninguna especificación adicional. 
Cromatografía de fase inversa (o reversa)
03 Cromatografía líquida de alta eficacia en condiciones desnaturalizantes
Tambien conocida como DHPLC, Se trata de un método que se emplea para el rastreo de mutaciones que permite detectar la presencia de variaciones en el ADN aunque no se determinan específicamente cuáles.
El procedimiento consiste en desnaturalizar na muestra que contenga tanto el ADN problema como un ADN control, que no es más que el mismo ADN problema pero en su versión silvestre o normal. Luego se procede a renaturalizar Luego se procede a renaturalizar.
Fase móvil y estacionaria
la fase móvil es un líquido (bien un solvente puro o una mezcla de varios solventes) que fluye a través de una columna que contiene la fase fija. La fase estacionaria es un sólido tanto física como químicamente inerte. 
Our Statistics
Mars
Saturn
Saturn is composed mostly of hydrogen
Venus
Venus has a beautiful name
Despite being red, Mars is a cold place
10%
04 Cromatografía líquida de rendimiento ultraalto
La cromatografía líquida de rendimiento ultraalto (UHPLC) es una variante de la HPLC que utiliza partículas más pequeñas para mejorar el rendimiento cromatográfico y requiere presiones más altas. 
Tanto la HPLC como la UHPLC pueden utilizarse para la cromatografía líquida, pero el equipo necesario para realizar cada técnica es diferente y cada una tiene ventajas diferentes. La menor longitud de columna supone que la cromatografía líquida de rendimiento ultraalto proporciona una resolución superior que la HPLC tradicional.
Ventajas de HPCL
El HPLC es un proceso automático que toma sólo unos pocos minutos para producir resultados. 
Los resultados obtenidos son de una alta resolución y son fáciles de leer.
Desventajas
Es difícil de detectar coelución (dos compuestos que escapan de la tubería a la vez) con HPLC, lo que puede dar a la categorización de compuesto incorrecto. 
Existe un alto costo para el equipo necesario para llevar a cabo HPLC. 
Debido a la velocidad del proceso, el equipo tiene una baja sensibilidad a algunos compuestos.
Aplicaciones de las hpcl
La cromatografía líquida de alto rendimiento tiene una amplia gama de aplicaciones en los campos de la bioquímica, química analítica, productos farmacéuticos, ciencia forense, investigación alimentaria y otras áreas. Por ejemplo, la HPLC también se utiliza en las pruebas de sustancias prohibidas en atletas.