Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 1 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete UNIDAD 6. LA CÉLULA,UNIDAD ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL 1. LA TEORÍA CELULAR La teoría celular es la parte fundamental y más relevante de la Biología que explica la constitución de la materia viva a base de células y el papel que tienen estas células en la constitución de la materia viva. A la teoría celular se llegó gracias a una serie de avances científicos que fueron ligados a la mejora de la calidad de los microscopios. En 1665, el científico inglés, Robert Hooke, examinando una laminilla de corcho al microscopio, observó que estaba formada por pequeñas cavidades poliédricas a las que denominó células, del latín cellula=celdilla. Por esta circunstancia, se le considera como el descubridor de la célula. Antony Van Leeuwenhoek (1632-1723), coetáneo de Hooke, realizó detalladas observaciones de las células animales y vegetales e incluso descubrió el mundo de los microorganismos, protozoos y bacterias, utilizando un microscopio simple de una sola lente que él mismo construyó. Pero hasta que no se dispuso de buenos microscopios ópticos, a principios del siglo XIX, no se descubrió que todos los seres vivos, tanto animales como vegetales, están formados por células. Este principio es el que desarrolla la Teoría Celular que se atribuye al botánico Matthias J. Schleiden (1838) y al zoólogo Theodor Schwann (1839) quienes formulan los dos primeros postulados de la dicha teoría: La célula es la unidad morfológica de todos los seres vivos: todos los organismos están formados por una o más células. La célula es la unidad fisiológica de los organismos: la célula puede realizar todos los procesos metabólicos para mantenerse con vida. En 1858, Virchow completó la teroría celular con su célebre principio omnis cellula e cellula, es decir, toda célula proviene de otra célula preexistente, que se convirtió en el tercer postulado. En 1889, August Weismann amplió la información de Virchow desde un punto de vista evolutivo resaltando que hay una continuidad ininterrumpida entre las células actuales (y los organismos que ellas componen) y las células primitivas que aparecieron por primera vez sobre la Tierra hace 3500 millones de años. La prueba del origen común de todas las células actuales reside en la semejanza de su composición y de sus estructuras. La teoría celular fue debatida a lo largo del siglo XIX, pero fue Louis Pasteur el que, con sus experimentos sobre la multiplicación de los microorganismos unicelulares, dio lugar a su aceptación rotunda y definitiva. Santiago Ramón y Cajal logró unificar todos los tejidos del cuerpo en la teoría celular, al demostrar que el tejido nervioso está formado por células. Su teoría, denominada "doctrina de la neurona", explicaba el sistema nervioso como un conglomerado de unidades independientes. Pudo demostrarlo gracias a las técnicas de tinción de su coetáneo Camillo Golgi, quien perfeccionó la observación de células mediante el empleo de nitrato de plata, logrando identificar una de las células nerviosas. Cajal y Golgi recibieron por ello el premio Nobel en 1906. El concepto moderno de la Teoría Celular se puede resumir en los siguientes principios: Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 2 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete Todos los seres vivos están formados por células o por sus productos de secreción. La célula es la unidad estructural de la materia viva, y una célula puede ser suficiente para constituir un organismo. Las funciones vitales de los organismos ocurren dentro de las células, o en su entorno inmediato, controladas por sustancias que ellas secretan. Cada célula es un sistema abierto, que intercambia materia y energía con su medio. En una célula caben todas las funciones vitales, de manera que basta una célula para tener un ser vivo (que será un ser vivo unicelular). Así pues, la célula es la unidad fisiológica de la vida. Todas las células proceden de células preexistentes, por división de éstas (Omnis cellula ex cellula). Es la unidad de origen de todos los seres vivos. Cada célula contiene toda la información hereditaria necesaria para el control de su propio ciclo y del desarrollo y el funcionamiento de un organismo de su especie, así como para la transmisión de esa información a la siguiente generación celular. Así que la célula también es la unidad genética. Como la mayor parte de las células no son visibles a simple vista, su descubrimiento y estudio ha ido ligado al desarrollo de las técnicas de observación que estudiaremos al final del tema. 2. ORGANIZACIÓN CELULAR Las células pueden, como hemos reseñado en el punto anterior, realizar las tres funciones vitales (nutrición, relación y reproducción) y son las formas más elementales de vida. Además, son capaces de mantener un ambiente interno relativamente constante (homeostasis). Toda unidad de nivel inferior carece del atributo vital. Poseen una individualidad propia que las caracteriza como unidades vitales. La defensa de la individualidad de la célula se argumenta principalmente en el hecho de que ésta es el resultado de una organización que obedece a la diferenciación de sus estructuras y no a una simple reunión de unidades menores. 2.1 Morfología, tamaño y longevidad de las células. Su forma y tamaño variable en función de su grado de especialización, edad, estado funcional, de si son libres o forman tejidos… (alargadas, prismáticas, redondeadas, estrelladas, sin forma fija, los micoplasmas miden 0,1 micras, las bacterias entre 5-10 micras, hay algas unicelulares de hasta 10 cm. La célula más grande conocida es el ovocito de avestruz aunque las prolongaciones axonales de las neuronas de algunos cetáceos pueden medir varios metros. Existe una restricción al tamaño celular que viene determinada por la relación entre superficie/volumen celular. La relación superficie/volumen celular se Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 3 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete considera como uno de los factores que podrían regular el comienzo de la división celular. Cuanta más pequeña es una célula esférica, mayor es la relación entre su superficie y su volumen, y viceversa. Teniendo en cuenta que la entrada de nutrientes se realiza a través de la superficie celular para luego distribuirse en el interior, dicha relación es importantísima. Una célula de gran volumen tiene un superficie de entrada de nutrientes proporcionalmente menor a una célula pequeña, además éstos han de recorrer una distancia interior mayor para ser distribuidos. Esta podría ser una razón por la cual pocas células maduras adoptan la forma esférica, siendo más bien aplanadas o irregulares. Se ha visto también que dentro de una estirpe celular, las más maduras poseen una relación superficie/volumen menor que las jóvenes, lo que es indicativo del inicio de su división. Por otro lado, el aumento del volumen celular no conlleva el aumento del volumen el núcleo ni de su dotación genética. Puesto que un mayor volumen implica más reacciones metabólicas y más enzimas, y éstas vienen codificadas por los genes del núcleo, podría suceder que una vez alcanzado determinado volumen celular el núcleo fuera incapaz de producir las enzimas necesarias para el adecuado funcionamiento celular, induciéndose su división. En las células eucariotas la relación entre el volumen del núcleo y el volumen del citoplasma sin el núcleo se llama relación nucleoplaasmática (RNP). El grado de madurez de la cromatina también es indicativode la cercanía de la división celular. Una cromatina extendida facilita la transcripción del ADN, lo que indica que la célula está en plena actividad metabólica. Por el contrario, una cromatina compactada indicaría que la división celular está próxima. En los organismos pluricelulares adultos, no todos las células tienen la capacidad de dividirse, tal es el caso de las células musculares estriadas humanas y las neuronas (aunque ciertos tipos de neuronas cerebrales se ha descubierto recientemente que si pueden hacerlo). Todas las células de un organismo no se dividen a la misma velocidad. Algunas, como las epiteliales y las de la médula ósea, lo hacen activamente mientras otras se dividen más lentamente. Durante la vida de una célula sus orgánulos se renuevan constantemente. Las células mueren tras un determinado número de divisiones para mantener el buen funcionamiento del organismo, en un proceso inducido fisiológicamente denominado apoptosis o suicidio celular programado. 2.2. Estructura de las células. La utilización del microscopio permitió a los biólogos diferenciar dos tipos de células: las eucariotas y las procariotas. Entre ambas hay diferencias estructurales muy importantes, pero a pesar de ello, los mecanismos moleculares básicos que rigen la vida en los dos tipos de células son los mismos, lo que implica que proceden de un antecesor común conocido como LUCA o Last Universal Cellular Ancestor. Todos los tipos celulares que conocemos se encuadran dentro de uno de estos dos grupos de células, diferentes en función de su grado de complejidad y organización, aunque poseen en común una membrana plasmática que las aísla del medio externo, un sistema genético director del funcionamiento celular formado por uno o varios cromosomas y un citoplasma en el que diferenciamos el citosol o medio interno líquido y los orgánulos celulares. También cabría hablar de la existencia de un sistema metabólico encargado del funcionamiento de la célula. Los virus, junto con otras formas acelulares, como los priones o los plásmidos, quedan fuera de esta clasificación y serán objeto de estudio en un tema específico. En el caso de los virus, la ausencia de metabolismo propio hace que no sean considerados organismos vivos sino “materia viva”. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 4 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete 2.2 Estructura de la célula procariota Se caracteriza en general por ser más pequeña (1-10 micras) y tener menor complejidad organizativa. No existen grados de complejidad y son relativamente simples desde el punto de vista citológico. Poseen una simple membrana plasmática de naturaleza lipoproteica, semejante a la de eucariotas aunque carece de colesterol y, rodeando a la membrana, una pared bacteriana constituida por péptidoglucano (polímero de N-acetilglucosamina y ácido N-acetilmurámico) que también se denomina capa de mureína. En casi todos los patógenos la pared bacteriana está rodeada por la llamada cápsula bacteriana o capa mucosa, con un papel regulador del intercambio de sustancias y de defensa ante anticuerpos y la fagocitosis. La membrana plasmática puede invaginarse para formar mesosomas que contienen diferentes moléculas como enzimas respiratorios y otras que regulan la duplicación del ADN. Algunos investigadores consideran a los mesosomas artefactos derivados de las técnicas microscópicas. El ADN bacteriano es doble hélice, circular o enrollado, bicatenario, asociado a proteínas similares a histonas, proteínas no histónicas y ARN y constituye una región llamada nucleoide, carente de membrana nuclear. Las bacterias pueden presentar pequeños fragmento de ADN circular extracromosómico denominados plásmidos, de gran importancia en ingeniería genética. Las células procariotas carecen de la mayor parte de los orgánulos celulares que encontramos en las eucariotas, excepto ribosomas para la síntesis proteica cuyo coeficiente de sedimentación es de 70 S. Algunas pueden presentar clorosomas que realizan la fotosíntesis anoxigénica, o tilacoides similares a los de los cloroplastos de células vegetales que realizan la fotosíntesis oxigénica (las cianobaterias); carboxisomas con enzimas que les permiten incorporar CO2 (RuBisCo); vesículas gaseosas psra su flotabilidad; inclusiones de reserva y de residuos metabólicos, y algunas especies poseen magnetosomas con cristales de magnetita para orientarse. Algunas bacterias poseen flagelos. Metabólicamente encontramos células procariotas tanto autótrofas como heterotrofas; tanto quimiótrofas como fotótrofas. Se distinguen dos tipos de células procariotas: las bacterias verdaderas (Eubacterias) y las Arqueobacterias, las cuales presentan algunas características diferentes a las primeras. Por ejemplo, su pared celular está compuesta por pseudopeptidoglicano; su membrana plasmática carece de ácidos grasos que son sustituidos por hidrocarburos ramificados; al igual que en células eucariotas, su ADN está asociado a histonas, además presenta intrones y varias enzimas ARN polimnerasas (en bacterias sólo hay una). Morfológicamente las bacterias pueden ser redondeadas (cocos), alargadas (bacilos) y onduladas (espirilos). Agruparse en cadenas (estrepto...), racimos (estafilo...) y sarcinas. (Las cianobacterias tienen forma globosa, los micoplasmas de pera y las clamidias de huevo frito). Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 5 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete 2.3. Estructura de la célula eucariota Son generalmente de mayor tamaño (10-100 micras) y más complejas en su estructura y funcionamiento que las procariotas. Poseen estructuras subcelulares organizadas, limitadas por membranas o sin membrana, con funciones específicas: los orgánulos. La célula eucariota posee varios componentes principales: Membrana plasmática. La membrana separa el citoplasma del medio externo. Su naturaleza es lipoproteica. Los lípidos permiten que la membrana se comporte como una barrera aislante entre el medio externo e interno, mientras que las proteínas se encargan de la entrada y salida de sustancias mediante diferentes mecanismos. La célula animal posee membranas de secreción como el glucocálix, (formado por oligosacáridos unidos a proteínas y lípidos de membrana, es imprescindible para su buen funcionamiento y está implicado, entre otras cosas, en el reconocimiento celular). Sistema endomembranoso. Los sistemas de membrana constituyen el retículo endoplasmático el cual llega a comunicarse con la membrana nuclear. Podemos diferenciar entre el retículo endoplasmático liso (relacionado con la biosíntesis de lípidos, entre otras funciones) y el retículo endoplasmático rugoso (implicado en la síntesis y glucoxilación de las proteinas). El aparato de Golgi (el gran organizador molecular de la célula) se considera una parte especializada del retículo. Citoplasma, formado por el hialoplasma, el morfoplasma y el citoesqueleto. - El hialoplasma es el citoplasma fundamental, líquido, también llamado citosol. - El morfoplasma lo constituyen los elementos formes (los orgánulos). Estos pueden ser membranosos, como las mitocondrias y cloroplastos (relacionados con la producción de energía), los lisosomas (implicados en la digestión celular), las vacuolas, vesículas e inclusiones (almacenamiento de sustancias), peroxisomas, glioxisomas, etc. Orgánulos no membranosos son los ribosomas con coeficiente de sedimentación 80 S (biosíntesis proteica) y el centrosoma (relacionado con la división celular y con la formación de cilios y flagelos). - El citoesqueleto está formado por microfilamentos de actina y miosina, microtúbulos de tubulina y filamentos intermedios de diferentecomposición química (vimentina...). Núcleo, es el centro director del metabolismo celular. Rodeado de una doble membrana similar a la plasmática que presenta poros para el intercambio de sustancias. Su aspecto varía según la célula esté en interfase o en división. Durante la interfase el núcleo posee membrana nuclear lipoproteica, doble, que lo separa del citoplasma y en su interior se localiza el ADN en forma de cromatina (ADN junto a proteínas histónicas). También encontramos uno o varios nucléolos y el carioplasma o jugo nuclear. Cuando la célula está en división, la membrana nuclear desaparece y el ADN se reorganiza y condensa formando los cromosomas. Modelos de células eucariotas Dentro de las células eucariotas podemos diferenciar entre la célula animal, de hongos y la vegetal. Aunque su morfología y tamaño puede variar en función de que se trate de organismos unicelulares o pluricelulares con tejidos especializados, su estructura es prácticamente idéntica aunque con ciertas diferencias. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 6 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete La célula animal presenta formas más variadas, está adaptada a la nutrición heterótrofa: Carece de pared celular de celulosa. Algunas segregan mucopolisacáridos y proteínas que forman la matriz extracelular. Presentan vesículas para almacenar sustancias. Su núcleo está en posición central Poseen un centrosoma con dos centriolos (diplosoma). Algunas tienen cilios o flagelos, otras pueden emitir pseudópodos. El glucógeno es el polisacárido de reserva energética. La célula de los hongos es similar a la animal pero: Presentan pared celular de quitina, no de celulosa, sin plasmodesmos (comunicaciones intercelulares). En las hifas de ciertos hongos varios núcleos celulares comparten un mismo citoplasma al no existir membrana plasmática (organización cenocítica). Algunos tipos de hongos pueden tener gametos flagelados (poco frecuente). La célula vegetal suele tener forma prismática o poligonal, está adaptada a la nutrición autótrofa fotosintética: Posee pared celular de celulosa. En las células vegetales el citoplasma establece una relación de continuidad entre células vecinas a través de los plasmodesmos (perforaciones de la pared celulósica). Presentan una gran vacuola central que mantiene el núcleo desplazado. Su centrosoma carece de centriolos. Posee plastos algunos de los cuales tienen clorofila y otros pigmentos fotosintéticos. Carece de cilios y flagelos. El polisacárido de reserva energética es el almidón. 2.4. El origen de la célula eucariota (eucariogénesis) Se denomina eucariogénesis al complejo proceso que condujo al origen de los eucariontes. La idea general considera que los eucariontes tienen un origen procariota, toda vez que los procariontes son organismos más simples y relacionados con el origen de la vida, sin embargo no hay acuerdo sobre los procesos que implicaron la aparición de la primera célula eucariota. En 1964 se hizo popular la hipótesis autógena de Meyer-Abich que postulaba que es posible que los orgánulos y el núcleo celular habrían evolucionado a partir de invaginaciones de la membrana plasmática. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 7 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete En 1977, Carl Woese y G. Fox se basan en el análisis de secuencias moleculares del ARN ribosomal y establecen el sistema de los tres dominios para postular que los eucariontes, al igual que bacterias y arqueas, descienden de progenotes o protobiontes en los albores del origen de la vida, por lo que tienen una antigüedad de más de 3.000 millones de años. De este tronco común de organismos llamado LUCA, del inglés Last Universal Cellular Ancestor, surgirían en la evolución las células procarióticas (sin núcleo diferenciado) que comprenderían las arqueobacterias (dominio Archaea) y las eubacterias (dominio Bacteria). Posteriormente aparecerían las células eucarióticas (dominio Eukaria) ya dotadas de núcleo. Según la hipótesis de Neomura de Cavalier-Smith, hace 900 millones de años apreció una comunidad de células llamada Neomura cuyos integrantes se caracterizaban por tener una pared de glucoproteinas segregada al exterior en lugar de peptidoglicano. Además presentaban histonas alrededor de las cuales se enrrollaba el ADN. Según esta hipótesis se originaron dos vías evolutivas: la de las aqueobacterias (dominio Archaea) y la de las células eucariotas (dominio Eukaria). Actualmente se piensa que la célula eucariótica proviene de una rama evolutiva de la procariótica que evolucionó hacia un tipo celular de mayor tamaño denominado célula urcariota. Según la teoría endosimbionte propuesta en 1967 por la bióloga estadounidense Lynn Margulis, también conocida como endosimbiosis seriada, la aparición de las células eucariotas o eucariogénesis es consecuencia de la sucesiva incorporación simbiogenética por parte del urcariota de diferentes procariotas de vida libre que originarían las células de los cuatro reinos restantes (protoctista, fungi, vegetal y animal). Los elementos procarióticos podrían haber penetrado en el urcariota hospedante posiblemente mediante fagocitosis como una presa ingerida o como un parásito. Durante ese tiempo, los elementos y el hospedante pudieron desarrollar una interacción mutua benéfica que se convirtió más tarde en una obligatoria simbiosis. Inicialmente el urcariota perdió su pared, aumentando de tamaño lo que requirió la presencia de estructuras proteicas que mantuvieran la estructura o citoesqueleto (microtúbulos) y que permitieran el movimiento y la fagocitosis. Al asociarse a bacterias espiroquetas aparecerían los cilios y flagelos. Al hacerlo a otras, los peroxisomas, orgánulos eliminadores de radicales oxidantes característicos de la nueva atmósfera oxidativa. Por simbiosis con bacterias aerobias se originarían las mitocondrias, orgánulos de tamaño similar a bacterias que contienen ribosomas 70S, ADN, ARN y se dividen en dos. Su asociación con cianobacteriass, únicas bacterias que realizan la fotosíntesis oxigénica, bien pudo originar los cloroplastos, orgánulos que también poseen ribosomas 70S, ADN, ARN y que se dividen igual que las cianobacterias. El origen del núcleo no está nada claro, pero pudiera derivar de la asociación con arqueobacterias ya que estas poseen un único cromosoma circular asociado a histonas, formando nucleosomas y ciertos genes contienen intrones como en las eucariotas. Sin embargo, ni peroxisomas ni flagelos/cilios tienen material genético propio lo que cuestiona algunos aspectos de dicha teoría. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 8 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete TABLA COMPARATIVA ENTRE LA CÉLULA PROCARIOTA Y LA EUCARIOTA Característica Procariota Eucariota Organismos Eubacterias y arqueobacterias. Protoctistas, hongos, plantas y animales. Tamaño celular De 1 a 10 µm De 10 a 100 µm Membrana nuclear No Sí ADN Una molécula de ADN circular. Presentan plásmidos (ADN extracromosómico). Varias moléculas lineales asociadas a histonas. Mitocondrias y cloroplastos contienen ADN circular. Nucleolos No Sí Ribosomas 70S 80S Sistema endomembrfanoso No Sí Orgánulos Ribosomas (algunas especies presentan carboxisomas, clorosomas u otros). Núcleo, ribosomas, Golgi, RE, mitocondrias, cloroplastos,... Citoesqueleto No Sí Pared celular Sí, formada por peptidoglucano Solo células vegetales (celulosa) y hongos (quitina) Endocitosis y exocitosisNo Sí Locomoción Flagelo bacteriano Cilios y flagelos Pili y fimbrias Si No Metabolismo Aeróbico y anaeróbico Generalmente aeróbico División celular Por simple bipartición Mitosis Organización Unicelulares Unicelular y pluricelulares Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 9 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete CUADRO RESUMEN DE LOS ORGÁNULOS CELULARES Y SUS FUNCIONES Orgánulo celular Estructura y composición Función Membrana plasmática Está formada por una bicapa de fosfolípidos en la que están inmersas diversas proteínas. Controla el intercambio de sustancias entre la célula y el medio. Posee proteínas receptoras que transmiten señales desde el exterior al interior. Núcleo Está rodeado por una doble membrana que presenta poros que permiten la comunicación entre el núcleo y el citoplasma. En su interior destacan la cromatina y el nucléolo. Es el orgánulo director de la célula ya que contiene el ADN celular, o sea, de la información genética para realizar las funciones celulares. Es también responsable de la división de la célula. en el nucléolo se fabrican los ribosomas. Retículo endoplasmático (RE) Está formado por una compleja red de membranas que forman sáculos aplanados y túbulos que se extienden por todo el citoplasma. Puede ser liso o rugoso. Su función está relacionada con la síntesis y transporte de lípidos y proteínas de muchos orgánulos, así como de las proteínas que son segregadas al exterior. Ribosomas Son pequeños orgánulos formados por RNA y proteínas. Se pueden encontrar libres en el citosol o unidos a las membranas del RE. Son los responsables de la síntesis de proteínas. Complejo de Golgi Está formado por un conjunto de cisternas aplanadas y apiladas de las que se desprenden pequeñas vesículas cargadas de sustancias. Secreción celular. Formación, a partir de las vesículas, de orgánulos celulares, tales como lisosomas y vacuolas. Mitocondrias Son orgánulos energéticos presentes en todas las células eucarióticas. Están rodeadas por dos membranas, la cavidad interna se denomina matriz y contiene muchas enzimas, ADN, ARN y ribosomas. En ellas tiene lugar la respiración celular, proceso que consiste en la oxidación de la materia orgánica para obtener energía mediante la cual las células llevan a cabo todas sus funciones. Lisosomas Son vesículas provistas de enzimas digestivas. Se encargan de digerir sustancias alimenticias y orgánulos celulares dañados. Peroxisomas Son vesículas que contienen enzimas oxidativos. Llevan a cabo reacciones que generan y destruyen peróxico de hidrógeno. Centrosoma En la célula animal está formado por dos órganos cilíndricos llamados centriolos (diplosoma). La célula vegetal carece de centriolos. Organiza el citoesqueleto e interviene en la forma y el movimiento de las células; también interviene en la división celular. Pared celular Es exclusiva de las células vegetales. Está formada por celulosa y es una gruesa cubierta situada sobre la superficie externa de la membrana plasmática. Protege y da forma a las células vegetales. A veces, la celulosa se impregna de otras sustancias y la pared se hace impermeable o aumenta su rigidez. Cloroplastos Son orgánulos energéticos exclusivos de las células vegetales. Están rodeados por dos membranas concéntricas. El espacio interno, llamado estroma, contiene un medio acuoso con numerosas enzimas, ADN, ARN y ribosomas; también contiene membranas internas donde se encuentra la clorofila. Son los encargados de realizar la fotosíntesis, proceso mediante el cual la energía luminosa absorbida por la clorofila se emplea para transformar materia inorgánica en materia orgánica. Vacuolas Son grandes vesículas que pueden llegar a ocupar hasta el 90% del volumen celular. Son típicas de las células vegetales. Almacenan gran variedad de sustancias (nutritivas, productos de desecho, pigmentos,...). A veces funcionan como lisosomas. Intervienen en los procesos osmóticos. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 10 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete 3. INSTRUMENTOS Y TÉCNICAS DE ESTUDIO DE LAS CÉLULAS. Desde la segunda mitad del siglo XVII en que Hooke y Leeuwenhoek realizaron las primeras observaciones de células al microscopio, se ha avanzado mucho en el conocimiento de la morfología y fisiología celular. Esto ha sido posible gracias a la ayuda de una serie de métodos de trabajo cada vez más precisos y específicos. 3.1 Estudios morfológicos: microscopía óptica y electrónica. Salvo algunas excepciones, la mayor parte de las células sólo pueden verse con ayuda de un microscopio. Por eso, el conocimiento de la célula empezó con la microscopía óptica, la cual todavía hoy en día es un instrumento esencial, junto con la mucho más reciente microscopía electrónica. En 1590, el holandés Janssen utilizó un sistema de dos lentes para ampliar imágenes y construyó el primer microscopio óptico compuesto. En estos instrumentos, una de las dos lentes, llamada objetivo, se coloca muy cerca del objeto a observar y su efecto es una imagen invertida y aumentada; el segundo juego de lentes, llamado lente ocular, se coloca a una distancia tal que su efecto sea el aumento del tamaño de la imagen invertida, multiplicando el efecto de la lente objetivo. A finales del siglo XIX, se avanzó mucho en el conocimiento de las características internas de las células gracias al empleo de colorantes, que proporcionan el contraste suficiente para hacer visibles las estructuras celulares. Sin embargo, el perfeccionamiento del microscopio óptico tenía como límite el llamado poder de resolución, es decir, la distancia mínima a la que pueden estar dos puntos para que se les vea separados. Este límite depende de la longitud de onda de la luz con que se ilumina el objeto. Para los microscopios ópticos que trabajan con luz visible, la resolución máxima que se puede obtener es de 0.2 µm (500 veces superior al poder de resolución del ojo humano). El ojo humano posee un poder de resolución de más o menos 0'1 mm, es decir 100 μ (o micrómetros). La mayoría de las células eucarióticas miden entre 10 y 30 μ (unas 3 ó 10 veces menos que el poder de resolución del ojo) y las células procarióticas aún son menores. El problema del poder de resolución es teóricamente distinto al del aumento. El microscopio óptico permite aumentos de entre 1000-2000. Aún así, aunque es posible agrandar una imagen tanto como se desee proyectándola por ejemplo sobre una pantalla, nunca lograremos diferenciar al microscopio óptico dos objetos que estén separados menos de 0.2 µm; dichos objetos se verán como uno solo. La observación de células y tejidos al microscopio óptico requiere que las muestras se dejen atravesar por la luz, lo que obliga a la realización de cortes finos. Además, para observar los orgánulos celulares, generalmente transparentes, es necesario que exista un contraste óptico entre ellos, lo que se consigue mediante el empleo de colorantes. Al microscopio óptico podemos observar células vivas o células muertas fijadas y coloreadas. Se pueden observar células vivas sin someterlas a ningún tipo de manipulación, manteniéndolas durante su estudio en el medio adecuado. Con mayor frecuencia se necesita utilizar colorantes denominados vitales, que no dañan a las células y permiten visualizar algunas de sus estructuras. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 11 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete Entre estos colorantes están el azul de metileno, el verde Jano, rojo neutro, etc. Sin embargo, en la mayoría de los casos se trabaja con preparaciones permanentes. Para eso, en primer lugar, las células han de ser tratadas con un fijador que las inmovilice y las mate. Los fijadores son productos químicos capaces de penetrar rápidamente en las células sin alterar morfológicamente sus estructuras (formaldehído, etanol, ácido acético, por ejemplo). Un agente físico que pude utilizarse con este fin es el calor. Después de la fijación, los tejidos deben ser cortados en finas secciones con un micrótomo, máquina con una cuchilla muy afilada y que funciona de forma similar a un cortafiambres. Dado que generalmente los tejidos son blandos y frágiles, antes de la obtención de los cortes es necesario incluirlos en un medio de soporte para endurecerlos. El medio más utilizado es la parafina. En algunos casos, la muestra se endurece por congelación y se corta con un micrótomo especial. El siguiente paso es la tinción, para lo cual se utilizan colorantes que se fijan selectivamente sobre los diferentes orgánulos celulares. Para ser observadas al microscopio, las secciones teñidas se colocan sobre un portaobjetos cubiertas con un cubreobjetos. Muchas veces al someter a las células a estos procesos, se producen sin querer diversos "artefactos", que de alguna manera, pueden falsear los resultados obtenidos. Actualmente existen microscopios ópticos especiales que permiten visualizar estructuras en células vivas sin necesidad de ningún tipo de manipulación. Se trata de microscopios de contraste de fases, de interferencia y de campo oscuro. Una de las principales ventajas de estos microscopios es que se pueden observar las células en acción y estudiar los movimientos intracelulares que se producen en procesos como la mitosis. El microscopio electrónico fue inventado por el alemán Ernest Ruska en la década de los años 30 y utiliza electrones en lugar de fotones para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar ampliaciones hasta 5000 veces más potentes que los mejores microscopios ópticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles". Existen diferentes tipos de microscopios electrónicos, siendo dos los principales: a) Microscopio electrónico de transmisión (MET). El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de electrones dirigido hacia el objeto cuya imagen se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra. Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar la imagen de un objeto hasta un millón de veces y su poder de resolución es de 4 angstroms. En otros aspectos, el MET presenta problemas técnicos especiales. La principal dificultad es que los electrones tienen un poder de penetración muy pequeño. Como resultado, si se desea ver un detalle intracelular es preciso realizar secciones extremadamente finas de la muestra. Mediante un instrumento denominado ultramicrotomo el espécimen se corta en delgadas secciones con un grosor no superior a 0,1 µm. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 12 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete ATP-sintetasas b) Microscopio electrónico de barrido (MEB). Los electrones no atraviesan el material sino chocan y se recogen en una pantalla de TV. Permite ver superficies en tres dimensiones. Los electrones se acompañan de otros procedentes de la muestra (emisión secundaria) lo que permite estudiar la composición química de algunas partes. Su poder de resolución es menor que el del microscopio electrónico de transmisión, entre 3 y 20 nm y consigue unos 200.000 aumentos. Micrfoscopio fuerza atómica (AFM). Desarrollado a partir del “microscopio de efecto túnel” que permite formar una imagen de cada uno de los átomos sobre una superficie de metal, el microscopio de fuerza atómica (AFM) es un instrumento mecano-óptico capaz de detectar fuerzas del orden de los piconewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su topografía mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cónica. El microscopio de fuerza atómica ha sido esencial en el desarrollo de la nanotecnología, para la caracterización y visualización de muestras a dimensiones nanométricas. Con las técnicas de AFM es posible trabajar a escala nanométrica, 0'000000001 m, eso nos permite ver estructuras 1000 veces más pequeñas que una bacteria, y 10000 veces más pequeñas que las células del epitelio bucal. Esto supone poder ver las moléculas, incluso los átomos, y más sorprendente aún "pescar" moléculas en una muestra y extraerlas de su entorno. Las técnicas de AFM permiten trabajar en medio líquido o fisiológico y por lo tanto observar la interacción de la muestra con otras moléculas. Ahora podemos ver en detalle cómo interaccionan un antígeno y un anticuerpo; en un futuro se podrá ver paso a paso cómo interacciona un medicamento con una célula enferma. Las técnicas de AFM han permitido fotografiar lo que hasta ahora eran modelos informáticos. Biología 2º Bachillerato La célula, unidad estructural y funcional 13 departamento de biología y geología IES Bachiller Sabuco - Albacete Estudio bioquímico de la célula. Para conocer la composición y la función de los orgánulos y otros componentes celulares se separan y aíslan las diferentes estructuras de la célula mediante fraccionamiento celular y después se estudian mediante métodos bioquímicos y métodos mixtos, microscópico-bioquímicos. Los pasos son: Se realiza un homogeneizado del tejido a estudiar mediante tratamientos químicos o físicos que rompan las células, como por ejemplo, choque osmótico o trituración. Este proceso debe hacerse con la mayor suavidad posible con el fin de que ese rompa la membrana plasmática pero queden intactos orgánulos tales como el núcleo, las mitocondrias, los lisosomas, los peroxisomas y el complejo de Golgi. El homogeneizado se disuelve en una solución salina o de azúcar (normalmente sacarosa). A continuación, se separan los diferentes componentes del homogeneizado, en función de su densidad, mediante un instrumento llamado ultracentrífuga. Primero el homogeneizado se somete a centrifugación a baja velocidad separándose los orgánulos más densos (núcleos) en el precipitado y los menos densos en el sobrenadante (mitocondrias, ribosomas…); el sobrenadante se decanta para ser sometido de nuevo a centrifugación a mayor velocidad y así sucesivamente se obtienen una serie de fracciones en los diversos precipitados que contiene los distintos orgánulos celulares. Para saber qué orgánulos tiene cada precipitado, se utilizará el microscopio electrónico. Dependiendo de las características de la centrifugación, entre 500 y 1000 g durante 10 minutos se observan núcleos y cloroplastos, de 10000 – 20 000 durante 30 minutos mitocondrias y lisosomas y a 100.000 g durante 90 minutos el retículo endoplasmático rugoso y ribosomas. Marcadores radiactivos. Autorradiografía. Cualquier molécula puede "marcarse" incorporándole uno o más isótopos radiactivos. La radiación que emiten los núcleos de estos átomos permite detectar la molécula marcada y seguir sus movimientos. De esta forma, si se introduce en una célula un compuesto orgánico que contenga átomos radiactivos, se puede seguir su paso a través de los orgánulos celulares y estudiar sus funciones. Entre los isótopos radiactivos usados en biología están: 14C, 3H, 32P y 35S. La técnica, denominada autorradiografía, se utiliza para localizar las sustancias marcadas radiactivamente en secciones de células enteras o de tejidos, aunque más que la localización estática de un compuestoslo que interesa son sus desplazamientos a nivel intracelular y tisular. El proceso consiste en lo siguiente: las células vivas se exponen durante un tiempo, generalmente breve, a un compuesto radiactivo, transcurrido el cual dicho compuesto se elimina del medio. Las células así marcadas se fijan sobre un porta, se recubren con una fina capa de una emulsión fotográfica y se dejan en la oscuridad durante unos días, tras los cuales se revela la emulsión y se observa al microscopio. La radiactividad emitida impresiona la placa fotográfica, por lo que al revelar la película aparecen manchas oscuras que determinan la posición de la sustancia "marcada". Cultivos celulares. La mayoría de la células, tanto animales como vegetales, sobreviven, se dividen en incluso se diferencian en un medio de cultivo en condiciones adecuadas. Luego, las células se pueden utilizar para visualizarlas al microscopio o para analizarlas bioquímicamente. El interés por el cultivo de células y tejidos tiene importantes aplicaciones en el campo de la biología experimental, Medicina, Veterinaria, Agricultura, etc. Los cultivos de células y tejidos han permitido conocer el proceso de la mitosis, los movimientos celulares, la respuesta de la célula frene a sustancias tóxicas, bacterias, virus, etc. También se pueden estudiar los efectos de la adición o eliminación al medio de cultivo de moléculas específicas tales como hormonas o factores de crecimiento. Uno de los avances más importantes en los cultivos de tejidos ha sido la puesta a punto de la técnica de aislamiento de clones, que consiste en hacer cultivos procedentes de una única célula esta técnica es muy útil para diversos estudios genéticos.
Compartir