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Biología

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO

FACULTAD DE CIENCIAS

ANÁLISIS DE LAS CARACTERÍSTICAS
HISTOLÓGICAS Y NEUROLÓGICAS EN UN
MODELO EXPERIMENTAL DE TRAUMATISMO
CRANEOENCEFÁLICO EN RATA INMADURA

T E S I S

QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE:
Bióloga

P R E S E N T A :

MARÍA FERNANDA CALZADA REYES

DIRECTOR DE TESIS:
M. en C. ADÁN PEREZ ARREDONDO

Ciudad Universitaria, Cd. Mx., 2018

UNAM – Dirección General de Bibliotecas
Tesis Digitales
Restricciones de uso

DERECHOS RESERVADOS ©
PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL

Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal
del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México).
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mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro,
reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el
respectivo titular de los Derechos de Autor.

1. Datos del alumno
Calzada
Reyes
María Fernanda
5548509690
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Ciencias
Biología
412016495
2. Datos del tutor
Maestro en Ciencias
Adán
Pérez Arredondo
3. Datos del sinodal 1
Doctor en Ciencias
Ricardo
Noguera Solano
4. Datos del sinodal 2
Doctora en Ciencias
Ma. de la Luz
Navarro Angulo
5. Datos del sinodal 3
Doctora en Ciencias
Marina
Martínez Vargas
6. Datos del sinodal 4
Doctor en Ciencias
Francisco
Estrada Rojo
7. Datos del sinodal 4
Maestro en Ciencias
Adán
Pérez Arredondo
8. Datos del trabajo escrito
Análisis de las características histológicas y neurológicas en un
modelo experimental de traumatismo craneoencefálico en rata
inmadura.
65PP.
2018

Esta tesis se llevó a cabo bajo la dirección del M. en C. Adán
Pérez Arredondo en el Laboratorio de Neuroendocrinología del
Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, UNAM.

Este trabajo fue apoyado por el proyecto PAPIIT IN223417.

Calzada-Reyes 2018

“Future belongs to those who believe
in the power of their dreams.”

-Unkwnown

Calzada-Reyes 2018

Agradezco especialmente a mis sinodales por su paciencia y dedicación al
desarrollo y revisión de este trabajo.
Dra. María de la Luz Navarro Angulo sin usted nada de esto sería posible,
gracias por darme la oportunidad de ser parte del laboratorio y abrirme las
puertas al increíble mundo de la neurociencia.
Dr. Ricardo Noguera Solano, por su paciencia, dedicación y sabiduría.
Porque ha estado presente desde el inicio hasta el final de esta aventura
académica. Gracias a usted la filosofía de la ciencia siempre será mi primer
amor.

Dr. Francisco Estrada Rojo, sin usted no hubiera sido posible terminar este
trabajo, gracias por la guía y compañía en esos días largos que parecían no
tener fin.

Dra. Marina Martínez Vargas por la infinita paciencia y enseñanzas
académicas.
A mi tutor M. en C. Adán Pérez Arredondo.
Gracias a los integrantes del laboratorio de Neuroendocrinología de la
Facultad de Medicina por su invaluable ayuda y apoyo: Rich Tapia, Teresita,
Alejandro, Toño.

Quiero hacer una mención especial a los sujetos experimentales, sin los
cuales este trabajo no hubiera sido posible. Con la esperanza de poder
prescindir de ellos en un futuro no tan lejano.

Calzada-Reyes 2018

Agradecimientos personales
A mi Tato siempre, por ser mi compañera, mejor amiga, mamá y hermana,
por darme la dicha de ser tía y ser el mejor ejemplo que pude tener, te amo.

A Itzayana por ser la luz y motivación de mi vida.
A Tata por tu paciencia, amor y apoyo incondicional; por tus enseñanzas
académicas y de vida. Te amo, tiíta.
A René, gracias por ser mi compañero de juegos y mi contrincante favorito en
luchitas. Te amo, pá.
A mi mejor amigo y hermano, por quedarse cuando todos decidieron irse, por
siempre estar, por tu paciencia y tu infinita capacidad para desesperarme y
hacerme reír (al mismo tiempo). Te amo, Dani.
A Pieter por creer y apostar en mí. Dank je wel, meneer!
A los Luévano: Elvira, Miguel, Gali, Eve, Gris, Mati, Ale, Debbie y Perrito. Por
todo el amor que irradian y comparten conmigo, por abrirme las puertas de su
casa y por siempre hacerme sentir amada y parte de la familia, los amo.
A Fandy y Elías, los amo muchachos.
A Choche y Paty (conejita) por su amor y compañía, son una gran parte de mi
vida.
A Don Silvano, Chelito, Mamá Toña y Papá Rafil.
A Antoon y Gudrun Debeuf por las increíbles oportunidades que me han
brindado. Dank je wel!
A Paikita y Bob, por enseñarme el amor incondicional y ser los mejores
compañeros de vida.
A ti, Fer, por nunca rendirte aun cuando no se ve salida. Por este y muchos
logros más. ¡Si se pudo!
ÍNDICE

ABREVIATURAS 9
RESUMEN 10
1. ANTECEDENTES 11
1.1. Generalidades del traumatismo craneoencefálico 11
1.2. Epidemiología del TCE 12
1.3. Características del TCE pediátrico 13
1.3.1. Aspectos neuroanatómicos en pediatría 14
1.3.2. Clasificación del TCE 15
1.4. Mecanismos fisiopatológicos del TCE 19
1.4.1. Lesión primaria 19
1.4.2. Lesión secundaria 20
1.5. Abordaje experimental del TCE pediátrico 21
1.5.1. Comparación de las etapas del desarrollo entre humanos y sujeto
experimental 21
1.5.2. Modelos experimentales de TCE pediátrico 23
1.5.3 Clasificación y evaluación del TCE en modelos experimentales 27
2.JUSTIFICACIÓN 31
3.PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 31
4.PREGUNTA DE INVESTIGACIÓN 32
5.OBJETIVOS 32
5.1. Objetivo general 32
5.2. Objetivos particulares 32
6.HIPÓTESIS 33
7.MÉTODOS 33
7.1. Sujeto experimental 33
7.2. Ubicación del estudio 33
7.3. Variables del estudio 33
7.4. Diagrama de procedimiento general 33
7.5. Traumatismo craneoencefálico 36
7.6. Evaluación neurológica 37
7.6.1. Escala NSS 37
7.6.2. Escala de Hunter 37
7.7. Procesamiento de las muestras biológicas y técnicas histológicas 38
7.7.1.TTZ 38
7.7.2.Violeta de cresilo 39
7.8.Análisis estadístico e interpretación de los datos 42
8.CONSIDERACIONES ÉTICAS 42
9.RESULTADOS 42
10. DISCUSIÓN 50
8

Calzada-Reyes 2018

10.1. Modificaciones del peso corporal e ingesta de alimento 50
10.2. Cambios neuroconductuales 51
10.3. Cambios histológicos en corteza motora e hipocampo 53
11.CONCLUSIONES 56
12. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 57

Índice de figuras

Figura 1. Alineamiento aproximado de las etapas de desarrollo entre especies
diferentes en una escala de tiempo arbitraria 22
Figura 2. Principales modelos de TCE 25
Figura 3. Modelo de traumatismo craneoencefálico 36
Figura 4. Corte coronal de cerebro de rata, con acercamiento a corteza
motora primaria M1 40
Figura 5. Corte coronal de cerebro de rata, con acercamiento a región CA1
hipocampo 41
Figura 6. Corte coronal de cerebro con tinción vital TTZ 46
Figura 7. Microfotografías de M1 y CA1 tomadas a 40x 48

Índice de tablas

Tabla 1. Escala de evaluación para apertura ocular en ECG 16
Tabla 2. Escala de evaluación para respuesta verbal en ECG 17
Tabla 3: Escala de evaluación para respuesta motora en ECG 17
Tabla 4: Exploración física con evaluación de ECG 18
Tabla 5: Resumen de los principales modelos utilizados para TCE 24
Tabla 6: Resumen de los modelos experimentales de TCE 26
Tabla 7. Escala NSS 29
Tabla 8. Escala de Hunter 30

Índice de gráficosGráfico 1. Ingesta de alimento pre y post TCE 43
Gráfico 2. Ingesta de agua pre y post TCE 44
Gráfico 3. Diferencia de peso pre y post TCE 44
Gráfico 4. Escala de Hunter 45
Gráfico 5. Escala NSS 46
Gráfico 6. Conteo celular en M1 y CA1 47

Calzada-Reyes 2018

Abreviaturas

µm micras
CA1 región CA1 de hipocampo
CTRL control
DPN días post natales
ECG Escala de coma de Glasgow
M1 corteza motora primaria
NSS NeurologicalSeverity Score (Escala de severidad neurológica)
PSI pounds per square inch (libras por pulgada cuadrada)
TCE traumatismo craneoencefálico
TTZ cloruro de trifenil-tetrazolio

Calzada-Reyes 2018

Resumen

El traumatismo craneoencefálico representa un problema de salud pública, no
solo en México sino en todo el mundo, por su contribución a las tasas de
mortalidad y discapacidad, encontrándose en el primer lugar como causa de
muerte entre los escolares y en la población en edad productiva. Las
estadísticas clínicas muestran que la respuesta fisiológica de un individuo
depende de la edad a la que se sufre el TCE.
El uso de modelos experimentales permite reproducir total o parcialmente un
TCE para una mejor comprensión y estudio de los procesos fisiológicos y
patológicos que de él deriven. A pesar de que se ha demostrado que la
manera en que se desarrolla el TCE en la población pediátrica difiere de lo
que sucede en la población adulta, los modelos experimentales pediátricos
son aún limitados.
En este trabajo se desarrolló un modelo experimental pediátrico en el que se
analizaron las características histológicas y neuroconductuales en ratas
Wistar de 21-23 días de edad, a partir de un TCE de diferentes intensidades
(20, 40 y 60 psi).
El efecto neuroconductual del TCE se evaluó a través de la escala de Hunter
y la escala NSS. A nivel morfológico se analizó el daño en el tejido a través
de la técnica de violeta de cresilo y se realizó conteo celular en dos áreas
específicas del cerebro (corteza motora primaria M1 y la región CA1 de
hipocampo). Además, se evaluaron las modificaciones en el peso corporal y
en la ingesta de comida y agua 24 horas antes y después del TCE. Los
resultados de ambas pruebas neuroconductuales realizadas post TCE
mostraron diferencias significativas entre los grupos 40 y 60 con respecto al
grupo control. El conteo celular mostró diferencias significativas entre los
sujetos del grupo control y el grupo 60 en el lado ipsilateral de M1, así como
en CA1 del lado contralateral; en CA1 del lado ipsilateral hubo también
diferencias significativas entre los grupos 40 y 60 contra el control. En
conjunto los resultados muestran que la intensidad del daño provocado se
correlaciona con el puntaje obtenido en las pruebas neuroconductuales y lo
observado en el conteo celular.
11

Calzada-Reyes 2018

1. Antecedentes
1.1. Generalidades del traumatismo craneoencefálico
Menon y colaboradores definieron en 2010 el traumatismo craneoencefálico
(TCE) como una alteración de la función cerebral o cualquier otra evidencia
de patología cerebral causada por una fuerza externa. El TCE representa un
problema de salud pública en todo el mundo, al ser una de las causas más
comunes de morbilidad y mortalidad entre la población pediátrica y adulta
joven (Corrigan et al, 2010; Stambrook et al, 1990).

La Organización Mundial de la Salud prevé que el TCE será catalogado como
una de las principales causas de muerte y discapacidad para el año 2020
(Stambrook et al, 1990).

Las lesiones que se desarrollan como consecuencia de las fuerzas que
interactúan durante un TCE, son el resultado de la alteración del cráneo,
cerebro y vasos sanguíneos. La incidencia global de TCE se estima en 939
casos por 100 000 personas. Lo que significa que aproximadamente 69
millones de personas sufren un TCE anualmente (Dewan et al, 2018). Entre
las causas más comunes de TCE están los accidentes de tránsito con
aproximadamente un 75% y afecta más a los jóvenes menores de 25 años,
motociclistas y personas que manejan en estado de ebriedad (SSA, 2014;
Mayén et al, 2008).

Las alteraciones fisiológicas y cognitivas dependen de diversos factores,
entre ellos: tipo de lesión, edad y severidad de la lesión. La respuesta
fisiológica de un individuo depende de la edad a la que se sufre el TCE; la
mortalidad aumenta con la severidad del trauma y con la edad (Corrigan et al,
2010).
La utilización de sujetos experimentales permite reproducir total o
parcialmente un TCE para una mejor comprensión y estudio de los procesos
fisiológicos y patológicos resultantes. A pesar de que la mayoría de las
lesiones cerebrales ocurren en niños y adultos jóvenes una gran parte de los
12

Calzada-Reyes 2018

modelos experimentales existentes se han centrado en adultos. Por lo que se
vuelve importante desarrollar modelos de investigación sobre el TCE en la
población pediátrica.

1.2. Epidemiología del TCE

El TCE es uno de los trastornos neurológicos más graves a nivel mundial. Se
estima que, en Estados Unidos, cada siete segundos ocurre un TCE y cada
cinco minutos fallece una persona por esta causa (Levin et al, 1987). En
México, el TCE es la tercera causa de muerte con 35,567 defunciones y con
una mortalidad de 38.8 por cada 100 mil habitantes; el TCE en niños ocupa el
2do lugar en ingresos de urgencia, de los cuales el 20% resulta con
discapacidades significativas (Gennarelli, 1993).
Cada año, alrededor de 30,000 niños sufren discapacidad permanente como
consecuencia de un TCE severo. Se estima que el 8% de las muertes en el
mundo son a causa de accidentes, de las cuales 40% o más se asocian a
traumatismo craneoencefálico, esta cifra se incrementa en la edad pediátrica
después del primer año de vida; el TCE es la causa principal de muerte,
patologías y discapacidad en niños y lactantes, entre las que destacan:
secuelas cognitivas, epilepsia e incapacidad física (Adams et al, 1989;
Rockhill et al, 2010; Ewing-Cobbs et al, 2004; Ducker, 1982). La incidencia
del TCE pediátrico en países industrializados es de 200 casos por cada 100
mil niños al año, de los cuales se consideran graves alrededor del 7% de los
casos (Langlois, 2006).

La relación entre hombres y mujeres que sufren TCE es de 3:1 (Stambrook et
al, 1990; Adams et al, 1989) mientras que en niños es de 2:1 (Duhaime y
Rindler, 2015). Las causas de TCE varían con la edad, en el caso de los
niños menores de 2 años es por maltrato o caídas, entre los 2 y 10 años
accidentes de tránsito, caídas y accidentes de bicicleta y los mayores de 10
años deportes, accidentes de tránsito y bicicleta. Dentro del hogar, las caídas
representan el 37% de los casos y de estas las causas principales son caída
13

Calzada-Reyes 2018

de cama, escaleras y de la azotea (Gómez, 2004; Heladia, 2003; Benito,
2007; RepoVigEpi, 2008). Las caídas accidentales de diferentes alturas son
la primera causa de muerte por accidentes. El hogar es el sitio en donde
ocurren con mayor frecuencia los accidentes, seguidos por la vía pública, las
escuelas y los lugares de recreo (Paredes, 2000; Garduño, 2008).
La mayor tasa de mortalidad es para adolescentes de entre 15 y 19 años
(19.2/100,000 por año) seguidos de niños menores de 4 años (5/100,000).
Más de 16,000 niños mueren a causa de distintos tipos de lesiones de las
cuales aproximadamente el 80% son traumatismos craneoencefálicos
(Duhaime y Rindler, 2015).

1.3. Características del TCE pediátrico

Al igual que los adultos, los niños pueden sufrir lesiones craneales de
cualquier tipo como consecuencia de un TCE, hematomas intracraneales,
hemorragia subaracnoidea, lesiones en cerebelo y tallo cerebral y daño
axonal difuso, entre otros(Guzmán, 2008; Pellegrino,2010).Las secuelas
causadas por TCE en niños incluyen disfunciones cognitivas, motoras,
motivacionales y/o conductuales (Ducker, 1982). Los déficits en funciones
motoras y cognitivas son más severos en niños menores a 4 años
comparados con niños de mayor edad.

El costo económico del manejo del TCE pediátrico es mayúsculo. Según los
Centros para el control y prevención de enfermedades en Estados Unidos, el
costo hospitalario promedio es de más de $56,000 dólares por admisión
(Centers for Disease Control and Prevention, 2012). Aunque se desconocen
los costos terapéuticos a largo plazo, se estima que son altos. Resulta aún
más difícil estimar la pérdida de productividad (en años) que deriva de
traumatismos moderados y leves, que al ser los más frecuentes son
causantes de déficits más sutiles que solo son evidentes en años posteriores
del desarrollo (Duhaime y Rindler, 2015).

Calzada-Reyes 2018

Se ha documentado ampliamente que la población pediátrica, muestra
respuestas únicas al TCE en comparación con adultos traumatizados
similarmente. Estudios epidemiológicos han demostrado que incluso entre la
población pediátrica se pueden encontrar subgrupos definidos por la
incidencia, género, causas del TCE, mortalidad, tipos de lesiones y secuelas
(Gennarelli, 1993). En grupos de menor edad se presentan patrones de lesión
casi exclusivos, este tipo de lesiones ocurren durante etapas determinadas
del desarrollo infantil, dentro de las cuales se encuentran: fracturas de tipo
“ping-pong”, fracturas diastásicas y/o con desgarramiento dural, lesiones
cérvico-medulares, hematomas subdurales e inflamación cerebral (Duhaime y
Rindler, 2015).

1.3.1. Aspectos neuroanatómicos en pediatría

Comparativamente con el resto de la población, los pacientes pediátricos
presentan con mayor frecuencia lesión intracraneal, en especial cuanto
menor sea el paciente (Miller et al, 1996); además de una respuesta distinta
ante la lesión y un pronóstico diferente para igual grado de lesión cerebral
debido a consideraciones anatómicas y fisiopatológicas especiales (López et
al, 2011). Estas consideraciones anatómicas están relacionadas con los
procesos de crecimiento y desarrollo, como, por ejemplo, en el cráneo de un
recién nacido los huesos no están fusionados a nivel de las suturas y están
hechos de tejido fibroso fuerte y elástico (Stocchetti et al, 2010). Los huesos
de la bóveda craneal se originan por un proceso de osificación membranosa y
están unidos por tejido conectivo denso que constituye las suturas
(Bustamante et al, 2010), esto permite al cráneo una mayor deformidad y
plasticidad para absorber las fuerzas que se ejercen sobre él (Pinto et al,
2012), entre los 12 y 18 meses de edad los huesos se fusionan por completo
los que resulta en la pérdida de estas propiedades (Stocchetti et al, 2010).

Otras características físicas particulares en los niños que se relacionan con el
TCE son que poseen una cabeza desproporcionalmente más grande en
15

Calzada-Reyes 2018

comparación con el tamaño de su cuerpo, células del cerebro menos
mielinizadas y por tanto más vulnerables (Murillo y Muñoz, 1995).

A los 5 años el cerebro alcanza el 90% de su peso definitivo y el cráneo
funciona eficazmente como protección hacia los riesgos más frecuentes
(golpes de baja velocidad). La división del contenido intracraneal en
compartimentos, previene los movimientos potencialmente dañinos del
encéfalo que acompañan a los traumatismos leves y moderados. Sin
embargo, el carácter inflexible del cráneo y los tabiques intracraneales
contribuirán en algunos casos a la lesión cerebral, por lo que, aunque el
cráneo ejerce una función protectora al cerebro, en ocasiones puede ser que
ésta estructura sea la causante del daño, como en las contusiones por
contragolpe (Kelly y Luce, 1993).

Comprender que existen diferencias fisiológicas no solo entre niños y adultos,
si no entre niños de distintos grupos de edad es fundamental para el
diagnóstico adecuado del TCE, puesto que estas diferencias afectan
directamente la susceptibilidad y la respuesta al trauma. Existen diferencias
que causan confusión cuando se realiza la interpretación de estudios
imagenológicos, especialmente aquellas que se relacionan con la
hipodensidad cerebral lo que algunas veces resulta en un diagnóstico
exageradamente pesimista. Tal es el caso del contenido de agua del cerebro
en infantes, el cual es de aproximadamente un 90% mientras que en adultos
es de 75%, así como el proceso de mielinización, el cual aumenta durante la
niñez, pero no se completa sino hasta la tercera o cuarta década de vida
(Duhaime y Rindler, 2015).

1.3.2. Clasificación del TCE

En cuanto a severidad y grado de disfunción neurológica, el TCE se clasifica
en leve, moderado y grave de acuerdo al puntaje que se obtenga con la
Escala de Coma de Glasgow (ECG), esta evalúa tres tipos de respuesta:
apertura ocular, respuesta verbal y respuesta motora resultando en una
16

Calzada-Reyes 2018

sumatoria de 15 puntos en las tres pruebas para una persona sin TCE; para
cada tipo de respuesta se plantea una evaluación según el grado de
severidad. El puntaje disminuye conforme la severidad es mayor. Un TCE
leve en dicha escala tiene un valor de 14-15 puntos, aunque puede tener
hemorragias o contusiones intracraneales severas; por otro lado, un trauma
de severidad moderada da como resultado un puntaje de 9-13; y un
traumatismo severo es cuando se obtiene un puntaje menor o igual a 8
puntos, lo que pone en riesgo inminente la vida por lo que el sujeto tiene que
ser hospitalizado para intervenciones quirúrgicas inmediatas sobre todo
cuando se sospecha de la existencia de una fractura en la base del cráneo
(CENAVECE, 2008).

El proceso de elucidar el perfil de una lesión cerebral tomando en cuenta
tanto los síntomas como las características fisiológicas, es de suma
importancia para evaluar la bondad de ajuste y así obtener la esencia de una
escala de evaluación neuropsiquiátrica (Wile et al, 2010). Cuando se
presentan trastornos cognitivos posteriores a un TCE estas pruebas son de
gran ayuda tanto para el diagnóstico, tratamiento y rehabilitación del paciente
(Kosaka, 2006).

A continuación, se muestra la evaluación de los tres tipos de respuesta de la
ECG.

Tabla 1: Escala de evaluación para apertura ocular en ECG.
Respuesta Descripción Valor
Espontánea Abre los ojos espontáneamente 4 puntos
Al hablarle Hay apertura al estímulo verbal
(cualquier frase)
3 puntos
Al dolor No abre los ojos con estímulos
anteriores, solo con estímulos dolorosos
2 puntos
Ninguna No abre los ojos ante ningún estímulo 1 punto
17

Calzada-Reyes 2018

Tabla 2: Escala de evaluación para respuesta verbal en ECG.
Respuesta Descripción Valor
Orientada En tiempo, lugar y persona 5 puntos
Confusa Puede estar desorientado en tiempo,
lugar, persona, o en todos, tiene
capacidad de mantener una
conversación, sin embargo, no
proporciona respuestas precisas
4 puntos
Palabras inapropiadas Usa palabras que tienen poco o ningún
sentido, las palabras pueden decirse
gritando, esporádicamente o
murmurando
3 puntos
Sonidos incomprensibles Hace sonidos ininteligibles (quejidos o
gemidos)
2 punto
Ninguno No emite sonidos ni habla 1 punto

Tabla 3: Escala de evaluación para respuesta motora en ECG.
Respuesta Descripción Valor
Obedece órdenes Sigue órdenes, inclusive si hay debilidad 6 puntos
Localizada Se intenta localizar o eliminar los
estímulos dolorosos
5 puntos
De retirada Se aleja de estímulos dolorosos o puede
flexionar el brazo hacia la fuente de
dolor, pero no localizar/eliminar la
fuente del dolor
4 puntos
Flexión anormal Flexión anormal y aducción de los
brazos, además de extensión de
miembros pélvicos con flexión plantar(posición de decorticación)
3 puntos
Extensión anormal Aducción y rotación interna de las
extremidades superiores e inferiores
(descerebración)
2 puntos
Ninguna No hay respuesta, aún con estímulo
doloroso
1 punto

Se han desarrollado un gran número de herramientas para una poder llevar a
cabo una evaluación neurológica adecuada en niños. La ECG se encuentra
modificada para poder aplicarse en distintos rangos de edad como lactantes,
niños en edad preescolar, escolar y lactantes (Tabla 4) (Cruz et al,1992; Prins
y Hovda, 2003).
18

Calzada-Reyes 2018

Aunque la ECG es de gran utilidad para la evaluación de adultos, cuando se
realiza a bebés y niños resulta problemática puesto que utiliza algunas
medidas que no toman en cuenta cambios normales en el desarrollo infantil
(Simpson y Reilly, 1982; Raimondi y Hirschauer, 1984). A pesar de las
modificaciones, estas escalas continúan presentando desafíos al incluir
términos ambiguos y subjetivos (tipo de llanto) así como evaluaciones
conductuales que no aplican para niños menores de 4 años, los cuales se
encuentran en una etapa pre verbal, donde además de las limitaciones
verbales tienen miedo y no cooperan con el evaluador dentro del ambiente
Tabla 4. Exploración física con evaluación de ECG.
PUNTAJE LACTANTE PREESCOLAR ESCOLAR ADOLESCENTE
Apertura ocular: al hablarle o al tacto
4 Espontánea Espontánea Espontánea Espontánea
3 Al hablarle Al hablarle Al hablarle Al hablarle
2 Al dolor Al dolor Al dolor Al dolor
1 Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta
Respuesta motriz: al hablarle o al tacto
6 Adecuada al
hablarle
Adecuada al
hablarle
Adecuada al hablarle Adecuada al hablarle
5 Al estímulo
cutáneo
Al estímulo
cutáneo
Al estímulo cutáneo Al estímulo cutáneo
4 Defensa al dolor Defensa al dolor Defensa al dolor Defensa al dolor
3 Flexión anormal Flexión anormal Flexión anormal Flexión anormal
2 Extensión anormal Extensión anormal Extensión anormal Extensión anormal
1 Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta
Respuesta verbal: al hablarle o al tacto
5 Sonríe-arrulla-
gorjea
Sonríe-habla Oraciones adecuadas Orientada y
conversa
4 Llora
apropiadamente
Llora-balbucea Frases adecuadas Desorientada-
Confusa
3 Grita llanto
inadecuado
Grita llanto
inadecuado
Palabras inadecuadas Palabras
inadecuadas
2 Quejido-gruñe Quejido-gruñe Sonidos inespecíficos Sonidos inespecíficos
1 Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta Sin respuesta
19

Calzada-Reyes 2018

hospitalario, aun cuando ya tienen habilidades lingüísticas desarrolladas
(Duhaime y Rindler, 2015; Tatman et al, 1997; Kirkham et al, 2008).

1.4. Mecanismos fisiopatológicos del TCE

Se sabe que la intensidad, sitio, duración y dirección de la energía mecánica
ejercida, así como el impacto que esto tiene sobre las estructuras craneales,
determinan la magnitud del daño provocado por un TCE (Mass et al, 2008).
Si bien una gran proporción de las lesiones se producen en el momento
mismo del impacto, muchas otras se desarrollan con posterioridad al
accidente, dejando un periodo variable de tiempo para una potencial
intervención terapéutica. Ambos mecanismos de daño están estrechamente
interrelacionados y derivan en la lesión del tejido nervioso. Esta
secuencialidad temporal de las lesiones se aplica a todos los grados de
severidad del TCE (leve, moderado y grave), los cuales se asocian con algún
tipo de daño estructural neuronal. Aunque los mecanismos del traumatismo
pueden ser muy variados, los procesos fisiopatológicos resultantes son
similares (Pellegrino, 2010).
Los daños iniciales se conocen como lesión primaria, mientras que los
eventos posteriores que contribuyen al daño se conocen como lesión
secundaria (Gennarelli, 1993; Garduño, 2008). El diagnóstico y tratamiento
oportuno de estas lesiones es de gran importancia para poder identificar
anomalías fisiológicas que precisen atención urgente y así establecer un
pronóstico adecuado para el paciente.

1.4.1. Lesión primaria

La lesión primaria es el daño directo causado por el impacto físico o por los
mecanismos de aceleración-desaceleración. Es responsable de todas las
lesiones nerviosas y vasculares que aparecen inmediatamente después de la
agresión mecánica (Murillo y Muñoz, 1995). Este tipo de lesión contempla
daños como: contusión cortical, laceración cerebral, fractura de cráneo, lesión
20

Calzada-Reyes 2018

axonal, contusión del tallo, desgarro dural o venoso, etc. (Ducker, 1982); es
irreversible y la única intervención que permite es la prevención del TCE.

1.4.2. Lesión secundaria

Aunque se desarrolla como consecuencia de la lesión primaria, la lesión
secundaria se manifiesta después de un intervalo de tiempo variable luego
del evento traumático (Pellegrino, 2010). Las principales consecuencias de
esta lesión son: excitotoxicidad, apoptosis, estrés oxidativo, daño axonal e
inflamación; también se pueden presentar sangrados, edemas, hiperemia,
trombosis y otros procesos fisiopatológicos secundarios (Ducker 1982; Miller
et al, 1996; Kochanek et al, 2017). En comparación con la lesión primaria este
tipo de lesión es potencialmente reversible mediante una terapia adecuada
(Nestler et al, 2000).

La isquemia cerebral es posiblemente el mecanismo más importante en la
producción de lesiones secundarias. Se ha demostrado que frecuentemente
los traumatismos se acompañan de hemorragia subaracnoidea y que entre
mayor sea ésta, peor es el pronóstico (Murillo y Muñoz, 1995).

En general, independientemente del origen, intracraneal o sistémico, los
mecanismos lesionales secundarios operan en un entorno que se ha vuelto
más vulnerable a la agresión (Kelly y Luce, 1993). Existen factores
dependientes de la edad que son de suma importancia en la evolución de la
lesión secundaria en población pediátrica, como el desarrollo de
neurotransmisores y neurotrofinas, mielinización, apoptosis, gliogénesis,
sinaptogénesis y reorganización sináptica; además de diferencias en la
respuesta biomecánica al traumatismo que, si bien no han sido ampliamente
estudiadas, son elementos fundamentales en el desarrollo de enfermedades
crónico degenerativas como consecuencia del TCE (Kochanek et al, 2017).

El tratamiento y pronóstico de los pacientes con TCE ha mejorado gracias a
la introducción de nuevas técnicas clínicas que permiten un mayor énfasis
21

Calzada-Reyes 2018

sobre la lesión secundaria, sin embargo, aún no existe un tratamiento eficaz
para detener o limitar este tipo de lesiones.

La comprensión de la fisiopatología del TCE es fundamental para desarrollar
posibles terapias que sean de utilidad no sólo en el tratamiento de lesiones
físicas sino también para el tratamiento y prevención de secuelas
conductuales y cognitivas. Al ser una patología heterogénea y compleja, el
estudio del TCE se ha hecho a través de modelos experimentales. Mediante
éstos ha sido posible estudiar las alteraciones ocurridas a nivel celular y
molecular y se consideran la mejor herramienta para el estudio de los
mecanismos subyacentes a las lesiones cerebrales traumáticas, sin embargo,
la investigación utilizando modelos pediátricos de TCE es aún muy limitada
(Prieto et al, 2009).
1.5. Abordaje experimental del TCE pediátrico
1.5.1. Comparación de las etapas del desarrollo entre humanos y
sujeto experimental

Estudios epidemiológicos han revelado que incluso entre la población
pediátrica hay diferencias en la incidencia de TCE en género, causas, tipo de
lesiones sufridas y mortalidad dentro de las subdivisiones de edad (Prins y
Hovda, 2003).

La edad del paciente al momento de la lesión es un factor que permanece
como vaticinador de la recuperación de la función seguida a un TCE, por lo
que, en el desarrollo de un modeloexperimental de traumatismo
craneoencefálico, además de tomar en cuenta la severidad, es fundamental
asociar la edad correspondiente en las etapas del desarrollo humano con la
edad posnatal de los animales utilizados en el modelo experimental para
lograr una semejanza fisiológica general (Prins y Hovda, 2003; Kilb, 2012).

Para el estudio del TCE en pediátrico, se han utilizado ratas de entre 7 y 21
días de edad (Kochanek et al, 2017). La vulnerabilidad dependiente de la
22

Calzada-Reyes 2018

edad se subordina al modelo experimental utilizado, pero varía según la
fisiopatología del tipo de lesión (Duhaime y Rindler, 2015). Estudios con
diversos sujetos experimentales han demostrado que la inflamación cerebral
es dependiente de la etapa de maduración en la que se encuentre el sujeto
(Duhaime et al, 2003). Algunos investigadores han comentado que los
modelos experimentales con roedores presentan vulnerabilidades potenciales
debido a los cambios metabólicos que resultan del desarrollo de los sujetos
(Prins y Hovda, 1998). Asociar la edad humana con la del sujeto experimental
es básico para el desarrollo de un modelo de TCE pediátrico. Romijn y
colaboradores establecieron en 1991 que los días 7 al 12 posnatal en
roedores corresponden, aproximadamente, a la etapa neonatal del humano
(Romijn et al, 1991). Mientras que McCutcheon y Marinelli en 2009
establecieron que la etapa de pubertad en roedores se alcanza a partir del
día posnatal 28 y hasta el 45 (McCutcheon y Marinelli, 2009); para poder
establecer una comparación, según la Organización Mundial de la Salud, en
humanos la pubertad abarca aproximadamente de los 10 a los 15 años.

Es de suma importancia tener en cuenta que es la maduración del cerebro, y
no la edad cronológica del sujeto la que determina una mejora en la
recuperación de un TCE, sin embargo, la edad cronológica sirve como un
Figura 1. Alineamiento aproximado de las etapas de desarrollo entre especies diferentes en una escala de tiempo
arbitraria. Las edades aproximadas comparables con el nacimiento en humanos se marcan con azul, las marcadas con
cruz representan la etapa de pubertad y las líneas diagonales el intervalo de la adolescencia (Kilb, 2012).

rata (días)
23

Calzada-Reyes 2018

parámetro de referencia establecido para conocer la etapa del desarrollo en
que se encuentra el cerebro. Como se menciona anteriormente, una
comparación del desarrollo cerebral entre especies, en este caso humano y
rata es fundamental para el desarrollo de un modelo experimental idóneo que
permita una mejor comprensión y estudio de las oportunidades de optimizar
la recuperación de la función después de la lesión (Prins y Hovda, 2003).

1.5.2. Modelos experimentales de TCE pediátrico

Para poder comprender los modelos experimentales que se han utilizado en
el estudio del TCE es fundamental definir el concepto de modelo. Un modelo
es una representación de la realidad que facilita su comprensión y manejo
(Quintanilla, 1992).

La idea de que los tratamientos en la clínica deben reflejar de forma objetiva
los resultados de la investigación científica ha sido un concepto central en el
manejo del TCE (Duhaime y Rindler, 2015).

Según el método experimental descrito por Del Cañizo y colaboradores en
2008, para considerar algo como cierto debe repetirse de forma sistemática;
sin embargo, en la práctica clínica esto no es posible, así que, para la
investigación de procesos fisiopatológicos complejos debemos recurrir a
modelos experimentales. La investigación médica se basa fundamentalmente
en tres fuentes de conocimiento: en primer lugar, el hombre enfermo que es
la fuente natural del conocimiento en la clínica; en segundo lugar, el cadáver,
que es la fuente de conocimiento de la anatomía patológica; por último, el
animal de experimentación que es la fuente del conocimiento de la
fisiopatología (Del Cañizo et al, 2008).

El uso de animales como modelos experimentales representa el nivel más
alto en la escala de complejidad y por tanto el modelo más próximo a las
condiciones reales (Del Cañizo et al, 2008). Para el desarrollo de modelos
experimentales que permitan recrear condiciones patológicas humanas, es
24

Calzada-Reyes 2018

esencial entender los mecanismos de estos procesos fisiopatológicos. Prieto
y colaboradores consideran un modelo experimental de TCE adecuado
cuando cumple los siguientes criterios: la fuerza mecánica usada para inducir
el daño es controlable y cuantificable; la lesión cerebral es reproducible y
simula adecuadamente los daños morfológicos, fisiológicos, bioquímicos y/o
conductuales observados en la clínica (Prieto et al, 2009).

Prins y Hovda presentaron en 2003 una revisión de los 4 principales modelos
utilizados para TCE en ratas de entre 17-28 días (post natales) de edad, los
cuales son: percusión lateral de fluidos, impacto cortical controlado, modelo
de caída libre de Marmarou para un TCE cerrado, y el modelo de caída libre
de Feeney para un TCE abierto (Prins y Hovda, 2003). Estos modelos se
resumen en la tabla siguiente (Tabla 5).

Tabla 5: Resumen de los principales modelos utilizados para TCE.
Modelo Edad
sujeto
Características Tipo de lesión Gravedad
Percusión
lateral de
fluidos
17,28
DPN y
adultos
Mediante la inyección
rápida de un impulso de
fluido en el espacio
epidural, se genera un
movimiento cerebral
difuso.
Según la severidad:
daño axonal difuso,
hemorragia
subaracnoidea y/o
contusión cerebral.
Leve, moderado y
grave
Caída libre de
Marmarou
para un TCE
cerrado.
17 DPN Este modelo utiliza una
placa metálica sobre la
que impacta la pesa que
se deja caer, además de
ayudar a evitar fractura
craneal.
Conmoción
cerebral.
Depende del peso que
se deje caer:
moderado (75g/2m),
grave(100g/2m),
ultrasevero (150g).
Caída libre de
Feeney.
26-32
DPN
Se hace una incisión al
cuero cabelludo de la rata
para exponer el cráneo,
sobre el cual se hace un
trépano que permita a la
pesa impactar a la dura
madre.
Contusión cerebral. Depende del peso o la
distancia de la que se
deje caer la pesa.
Impacto
cortical
controlado
17 DPN En este modelo se
cambia la caída libre de
una pesa por un pistón
neumático que, de igual
forma, penetra la dura
madre.
Contusiones focales. Al variar la
profundidad y la
velocidad del pistón se
genera un rango de
severidad en las
lesiones.
25

Calzada-Reyes 2018

En los modelos anteriormente mencionados, se reportan metodologías que
toman en cuenta severidad y tipo de daño causado, así como respuestas
fisiológicas al trauma, pero dejan de lado las secuelas cognitivas.

En la siguiente tabla (Tabla 6) se resumen los principales modelos reportados
en la literatura que además del tipo de daño y severidad, toman en cuenta las
respuestas fisiológicas al trauma y secuelas cognitivas. Estas últimas se
evalúan a través de diferentes pruebas neurológicas.

A)
B)
C)
Figura 2: Principales modelos de TCE.
A) Modelo de percusión lateral de fluídos.
B) Modelo de caída libre de Marmarou para TCE
cerrado. C) Modelo de caída libre de Feeney. D)
Modelo de impacto cortical controlado.

D)
26

Calzada-Reyes 2018

Tabla 6. Resumen de los modelos experimentales de TCE.

Como se observa en los modelos presentados, la edad es una de las
variables primordiales para el desarrollo de un modelo experimental de TCE
adecuado.

A pesar de que la mayoría de las lesiones cerebrales ocurren en niños y
adultos jóvenes y que las estadísticas clínicas muestran que los niños
responden de forma diferente al TCE que los adultos, la mayoría de los
modelos experimentales existentes se han centrado en adultos; es hasta
recientemente que los modelos deTCE se han caracterizado y clasificado
según la edad del sujeto, el tipo de daño y la severidad del traumatismo
(Prins y Hovda, 2003); sin embargo, no se ha podido establecer un modelo
que englobe todas las complejidades que se encuentran involucradas en un
TCE humano. En conjunto con estas limitaciones, existen desafíos únicos
para el desarrollo de un modelo de TCE pediátrico como las diferencias que
existen entre adultos y niños en las causas celulares, moleculares y
funcionales de la lesión secundaria (Kochanek et al, 2017).
Autor
Sujeto
experimental
Edad
(DPN)
Características del
modelo
Gravedad
Pruebas
neurológicas
Raghupathi
et al, 2007.
Rata Wistar 11, 17 Impacto con pistón
neumático a 3mm
sobre corteza parietal
entre bregma y lamda.
Velocidad: 5metros/s.
Incisión, posterior
sutura.
Moderado Laberinto de
Morris
Adelson et
al, 2001.
Rata Sprague-
Dawley
17 Caída libre 2m, pesa de
150g. Incisión línea
media sagital,
periostio. Disco
metálico 10mm entre
bregma y lambda.
Cama de espuma.
Severo Laberinto de
Morris
Adelson et
al,
1996.
Rata Sprague-
Dawley
17 Caída libre 2m, pesa de
75,100 y 125g sobre
disco metálico en
cráneo. Incisión,
posterior sutura. TCE
resultante: difuso.
Moderado
y severo.
Tiempo de
recuperación del
impacto, habilidad
de escape,
apertura ocular,
reflejo cola,
reflejocorneal.
Mychasiuk
et al, 2014.
Rata Wistar 21 Pesa de 150g. Sin
incisión. Cama de
papel aluminio.
Leve Barra de equilibrio.
27

Calzada-Reyes 2018

Si la población pediátrica tiene o no una mayor susceptibilidad a sufrir
consecuencias más severas post TCE en distintas etapas del desarrollo sigue
siendo una incógnita, sin embargo, se sabe que el tipo de traumatismo, la
severidad y la edad son los factores que determinan la magnitud de las
secuelas (físicas, conductuales y/o emocionales) que se presentarán a largo
plazo (Duhaime y Rindler, 2015).

En términos de la selección de edad para el estudio del traumatismo
craneoencefálico pediátrico y la correcta extrapolación a un modelo
experimental, se debe tener en cuenta la madurez cerebral para poder
asociarla a un grupo de edad cronológica y así lograr tener un panorama
claro sobre la respuesta cerebral al traumatismo en los distintos rangos de la
edad pediátrica en humanos (Prins y Hovda, 2003).

1.5.3 Clasificación y evaluación del TCE en modelos experimentales

La clasificación del TCE en humanos está basada en la valoración clínica y
se lleva a cabo a través de la Escala de Coma de Glasgow (ECG), la cual se
centra en medir el nivel de conciencia/inconsciencia, lo cual resulta una
herramienta útil para determinar la severidad de la disfunción cerebral. Esta
escala se puede modificar para poder aplicarse en distintos rangos de edad
como niños y lactantes (Greenberg y Coma, 2010; De Villegas y Salazar,
2008). El propósito la prueba es detectar posibles déficits neurológicos y
cognitivos en los individuos que hayan sufrido de un TCE en comparación
con personas sin trauma.
Para los modelos experimentales, existen diversas formas de clasificación de
TCE, toman en cuenta el daño provocado para determinar la gravedad del
mismo, considerando las limitaciones del modelo animal.

Se han publicado distintas escalas observacionales como la escala de Hunter
y NSS, diseñadas para evaluar la funcionalidad post TCE en modelos
experimentales, sin embargo, la heterogeneidad de esta fisiopatología en
28

Calzada-Reyes 2018

cuanto al sitio, severidad y sintomatología representa un desafío para el
desarrollo de una evaluación conductual eficaz. A la par, es de gran
importancia que los resultados que se obtengan de las evaluaciones
neurológicas en modelos experimentales puedan cuantificarse eficiente,
objetiva y confiablemente (Yarnell et al, 2016).

En los modelos experimentales de caída libre la severidad se mide de
acuerdo con el peso y la distancia desde la que se deja caer, en conjunto con
los puntajes obtenidos en las diversas pruebas neuroconductuales (Adelson
et al, 1996).

Puesto que en animales no hay forma de evaluar una respuesta verbal, en los
modelos experimentales se utilizan otras escalas de evaluación neurológica
como la Escala de severidad neurológica (NSS) y la escala de Hunter, las
cuales se describen a continuación (Muñana-Rodriguez y Ramírez-Elías,
2015).

1.5.3.1. Escala de severidad neurológica (NSS)

Presentada por primera vez por Shohami en 1986 y modificada por Stahel et
al. en el 2000; recibe el nombre de “Neurological severity scale” o NSS por
sus siglas en inglés, en español se denomina escala de severidad
neurológica (Shohami et al., 1995; Stahel et al, 2000). Yarnell y
colaboradores presentaron en 2016 una modificación llamada “Revised
Neurobehavioral Severity Scale” NSS-R por sus siglas en inglés (Yarnell et al,
2016).

La escala utilizada en este trabajo es la presentada por Stahel en el 2000 y
consiste en una serie de pruebas continuas que evalúan de forma específica
y estandarizada la coordinación motriz, equilibrio y reflejos sensoriomotores
en roedores que, se piensa, son resultado de cambios en el funcionamiento
neurológico (Yarnell et al, 2016; Hamm, 2001; Mahmood et al., 2001).
29

Calzada-Reyes 2018

La prueba consiste en 10 parámetros clínicos individuales que incluyen
pruebas de función motora, atención y comportamiento fisiológico; donde se
da un punto por cada prueba fallida y ningún punto (cero) por realizarla; las
pruebas siguen un orden específico diseñado para disminuir interferencias
(Stahel et al, 2000; Yarnell et al, 2016). El puntaje máximo en esta prueba es
de 10 puntos e indica disfunción cerebral severa al fallar todas las pruebas.
Es utilizada para evaluar de forma fácil y confiable la respuesta motora y
sensorial de los roedores, posterior a diversos tipos de TCE.

Tabla 7: Escala NNS. Tomada de Stahel et al., 2000.
Prueba Descripción Éxito Fracaso
Salir de círculo Habilidad e iniciativa para salir de un círculo de 30 cm
de diámetro (tiempo límite: 3 minutos)
0 1
Mono/Hemiparesia Paresia de miembros superiores/inferiores del lado
contra lateral
0 1
Caminar en línea recta Atención, iniciativa y habilidad motora de caminar en
línea recta una vez puesto en el piso
0 1
Reflejo de sobresalto Reflejo innato; el ratón rebotará en respuesta a un
aplauso fuerte
0 1
Comportamiento de
búsqueda
Comportamiento fisiológico como signo de “interés” en
el ambiente
0 1
Barra de equilibrio Habilidad para mantener el equilibrio en una barra de 7
mm de ancho durante por lo menos 10 segundos
0 1
Balance en rodillo Habilidad para mantener el equilibrio en una barra
redonda de 5 mm de diámetro durante por lo menos 10
segundos
0 1
Caminar en barra: 3 cm Habilidad para cruzar una barra de 30 cm de largo y 3
cm de ancho
0 1
Caminar en barra: 2 cm Misma tarea que la anterior, subiendo la dificultad en
una barra de 2 cm de ancho
0 1
Caminar en barra: 1 cm Misma tarea, mayor dificultad: barra de 1 cm de ancho 0 1
Puntaje máximo 0 10

1.5.3.2. Escala de Hunter

La escala de Hunter fue presentada por Rogers y colaboradores en 1997 bajo
el nombre de protocolo de SHIRPA, se desarrolló con el propósito de
caracterizar variaciones fenotípicas en ratones transgénicos a través de un
perfil funcional y conductual (Rogers et al, 1997). Modificada por Hunter y
colaboradores en el 2000 se adicionaron una serie de pruebas que
proporcionaran más información conductual y funcional para evaluar los
30

Calzada-Reyes 2018

efectos a corto plazo de una isquemia focal en modelos de ratón y de rata
para realizar un análisis comprensivo del sujeto (Hunter et al, 2000). La
Escala de Hunter ha sido utilizada en modelos de TCE para medir cambios
conductuales y motores. Esta escala consisteen 10 pruebas, a través de las
cuales se evalúan las condiciones generales de la rata (pelaje, postura,
comportamiento) y habilidades motoras; el puntaje máximo es de 21 puntos.

Tabla 8: Escala de Hunter. Tomada de Hunter et al., 2000 (Modificada).
Prueba Descripción Puntaje rata normal
Colocación de la
pata
El animal se coloca sobre un borde, se
jala cada extremidad y cada que
regresa la extremidad al borde es 1
punto.
4 puntos
Reflejos correctos El animal se coloca en posición supina
sobre la palma de la mano, si regresa a
su posición inicial se da 1 punto.
1 punto
Barra horizontal Las patas delanteras del animal se
colocan sobre una barra dependiendo
si el animal sube una o ambas
extremidades, si solo cuelga o se cae
varía el puntaje.
3 puntos si sube ambas extremidades
2 puntos si sube solo una extremidad
1 punto si solo se cuelga
0 puntos si se cae
Plataforma
inclinada
Se coloca al animal con la cabeza hacia
abajo sobre una plataforma inclinada.
3 si tarda máx. 15 s En rotar
2 si tarda entre 15 y 30 s
1 más de 30 s
0 si cae o permanece con cabeza
hacia abajo
Rotación El animal se sostiene de base de la cola
y rotar en contralateralmente a la
dirección que se le rota. (Dirección
manecillas de reloj y contrario)
1 punto por cada lado que rote al
contrario (2 en total)
Alcanzamiento
visual de las patas
delanteras
Capacidad del animal para alcanzar un
borde con patas delanteras cuando se
sostiene de torso/cola.
1 punto por cada colocación exitosa
de patas delanteras sobre el borde (2
en total)
Circulación Observar al animal si gira o no en
círculos.
1 punto no gira en círculos
0 puntos gira en círculos

Reflejo
contralateral
Reflejo al tocar el lado
derecho/izquierdo del animal
1 punto sin reflejo
0 puntos con reflejo
Motilidad Movimiento del animal 2 puntos motilidad normal
1 punto balanceo y no fijo
0 puntos inmóvil
Condiciones
generales
Aspecto físico general,
comportamiento
2 puntos buena condición de pelaje,
alerta
1 punto desaliñado, pelaje sucio, postura
encorvada y agresivo
0 puntos delgado, débil y con poco tono
muscular

Calzada-Reyes 2018

Aunque el principal propósito de esta evaluación es un análisis a corto plazo,
es de gran utilidad como guía para la estimación de las diferentes tasas de
recuperación a través del tiempo en un largo plazo (Hunter et al, 2000).

La importancia del TCE pediátrico ha sido recientemente reconocida sobre
todo por el vínculo que se ha establecido entre el TCE y el desarrollo de
distintas enfermedades neurodegenerativas como una de las principales
consecuencias a largo plazo.
La investigación preclínica que se ha llevado a cabo específicamente en este
campo es aún muy limitada por lo que el desarrollo de nuevas terapias
traslacionales a partir de la elaboración de modelos experimentales de TCE
pediátrico es indiscutiblemente necesario.

2. Justificación

El TCE representa un problema de salud, no sólo en México sino en todo el
mundo, por su contribución a las tasas de mortalidad y discapacidad,
encontrándose en el primer lugar como causa de muerte en preescolares y
escolares entre 1 y 15 años. La naturaleza e intensidad, así como la atención
recibida son de suma importancia para poder establecer un pronóstico
adecuado.

3. Planteamiento del problema

La severidad, la sintomatología y la heterogeneidad del TCE pediátrico son
factores que complican no sólo una adecuada evaluación neurofuncional,
sino también el desarrollo de un modelo experimental fiable que refleje de
forma objetiva las características y secuelas neuroconductuales de esta
fisiopatología en la clínica.
Es necesario el desarrollo de modelos experimentales de TCE pediátrico
debido a que su escasez es evidente en la literatura. Los existentes no
32

Calzada-Reyes 2018

consideran la variación en la gravedad, el daño a las estructuras cerebrales,
ni las alteraciones neurológicas que pudieran presentarse como
consecuencia. El desarrollo de modelos experimentales permitirá un mayor
entendimiento de los procesos fisiopatológicos involucrados en el TCE
pediátrico.

4. Pregunta de investigación

¿Se correlacionan las características histológicas y neurológicas que se
presentan en un modelo experimental de TCE en rata inmadura?

5. Objetivos

5.1. Objetivo general
Analizar las características morfológicas, metabólicas y neuroconductuales
resultantes de un traumatismo craneoencefálico, de diversas intensidades, en
un modelo de rata inmadura.
5.2. Objetivos particulares
1.- Describir las modificaciones peso corporal e ingesta de comida y agua
resultantes de un traumatismo craneoencefálico, en un modelo de rata
inmadura.

2.- Describir los cambios neuroconductuales consecuencia de un traumatismo
craneoencefálico mediante escalas ad hoc, en un modelo de rata inmadura.

3.- Describir los cambios histológicos a nivel de corteza motora primaria M1 y
región CA1 de hipocampo que se presentan como consecuencia de un
traumatismo craneoencefálico en un modelo de rata inmadura.

Calzada-Reyes 2018

6. Hipótesis

Si las ratas inmaduras (21 a 23 días) muestran características histológicas,
metabólicas y neuroconductuales que dependen de la intensidad del TCE a
que son sometidas, entonces se puede considerar válido el uso de este
modelo de TCE a nivel pediátrico.

7. Métodos

7.1. Sujeto experimental
Para este proyecto se utilizaron ratas machos de la cepa Wistar, de 21-23
días de edad. Se mantuvieron con agua y alimento ad libitum y un ciclo de
luz-oscuridad 12:12.

7.2. Ubicación del estudio
Laboratorio de neuroendocrinología, Departamento de Fisiología, Facultad de
Medicina, UNAM.

7.3. Variables del estudio
Dependientes: Escala de Hunter, Escala NSS, cambios histológicos, peso e
ingesta de agua y de alimento.
Independiente: intensidad del TCE

7.4. Diagrama de procedimiento general

Se dividió a los sujetos experimentales en 4 grupos: control, grupo 2, 3 y 4.
Cada uno con una n=10.
El primer día se evaluó con ambas escalas neuroconductuales (Hunter y
NSS) a todos los grupos; se realizó medición de peso, alimento y agua; 24
34

Calzada-Reyes 2018

horas después se realizó medición de peso, alimento y agua y posterior a
esta se llevó a cabo el TCE (para grupos 2, 3 y 4). Se administró hidrato de
cloral al 6% vía intraperitoneal a los 4 grupos y se realizó el TCE de la
siguiente manera: grupo 2: TCE con 20 psi a 4 mm de profundidad; grupo 3:
TCE con 40 psi a 4 mm de profundidad; grupo 4: TCE con 60 psi a 4 mm de
presión.

El tercer y último día se realizó la medición de peso, alimento y agua y
posterior a esta se evaluó a los 4 grupos con las escalas neuroconductuales
de Hunter y NSS. Se administró pentobarbital sódico 6.3% para el punto final
humanitario. Posteriormente se obtuvo el tejido y se prosiguió con el
procesamiento de las muestras biológicas y la realización de las técnicas
histológicas.

Para TTZ se extrajo el tejido y se realizó el procedimiento mencionado en el
punto 7.7.1. Se realizó esta tinción con el objetivo de observar cambios de
coloración en el tejido sobre la zona en que se realizó el traumatismo, según
la gravedad del impacto, la zona presentará una coloración pálida signo de
que sufrió una alteración metabólica, en este caso, isquemia. Para la técnica
de violeta de cresilo se extrajo el tejido y se realizó el procedimiento
mencionado en el punto 7.7.2. El objetivo de esta tinción es que, al teñirse los
núcleos celulares, se pueda realizar conteo celular además de observar
posibles cambios morfológicos en las células de la zona donde se realizó el
traumatismo.

Calzada-Reyes 2018

Técnicas histológicas
n=4

TTZ

Se evaluó a todos los grupos con escala conductualde daño
neurológico (Hunter et al. 2000) y escala NSS (Stahelet al.2000).
Medición de peso, alimento y agua.
CTRL 20 40 60
Día 3
Se aplicó hidrato de cloral 6% como
anestésico a todos los grupos.
Medición de peso, alimento y agua.
CTRL 20 40 60
Sin TCE.
TCE con 20 psi a
4 mm de
profundidad.
TCE con 40 psi a
4 mm de
profundidad.
TCE con 60 psi a
4 mm de
profundidad.
Se evaluó a todos los grupos con escala conductual de daño
neurológico (Hunter et al. 2000) y escala NSS (Stahelet al.2000).
Medición de peso, alimento y agua.
Día 2: TCE
Ratas Wistar macho (21 DPN)
Ciclo luz/oscuridad: 12/12
n=10
Día 1
Grupo control Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4
Violeta de cresilo

Calzada-Reyes 2018

7.5. Traumatismo craneoencefálico

El TCE se llevó a cabo mediante un modelo de traumatismo cerrado, para
esto se utilizó un pistón neumático que se ajustó a las libras de presión y
profundidad deseada para el experimento.
Se anestesió al sujeto experimental con hidrato de cloral 6%. Una vez
anestesiado, se rasuró la cabeza para posteriormente realizar un corte en la
piel rasurada con la finalidad de exponer el cráneo. Se colocó y aseguró al
sujeto experimental en el aparato estereotáxico. Se utilizó el atlas de Paxinos
y Watson para rata como guía para localizar la zona en dónde se realizó el
traumatismo, en este caso corteza motora izquierda (coordenadas L=-2 y P=
1.4). Una vez localizada la zona se realizó el traumatismo con el pistón
neumático, al cual se ajustaron las libras de presión con las que se realizó el
traumatismo, dependiendo del grupo experimental: 20 PSI, 40 PSI ó 60 PSI,
se ajustó la profundidad a 4mm.

Figura 3. Modelo de traumatismo craneoencefálico. A) Proceso de anestesia
a sujeto. B) Sujeto montado en estereotáxico.
C) Sujeto con cráneo expuesto. D) Sujeto recibiendo TCE con pistón neumático.
A)

C)
B) D)
37

Calzada-Reyes 2018

7.6. Evaluación neurológica
A pesar de que los modelos experimentales en roedores nos proveen
información acerca de las consecuencias tanto funcionales como biológicas
de un TCE, el éxito de la investigación traslacional depende de la selección
adecuada de evaluaciones conductuales sensibles, confiables y
reproducibles.
Es de suma importancia evaluar los efectos conductuales del TCE a través de
pruebas consistentes que permitan calificar los cambios que ocurren como
respuesta a las diversas manipulaciones de la lesión, lo que permita a
investigadores de diversos laboratorios comparar sus resultados y evaluar así
la efectividad de los tratamientos propuestos.
Las pruebas neuroconductuales son fundamentales para una mejor
comprensión y evaluación del daño posterior a un TCE.

7.6.1. Escala NSS

Diseñada para evaluar el estado funcional de las ratas, posterior a un TCE,
esta prueba está compuesta por 10 pruebas, cada una con una duración
de<1 minuto. El tiempo total de la prueba es de 5 minutos por sujeto
experimental. Al ser una prueba breve y concisa, no es necesario agregar
tiempos de descanso entre las pruebas. Esta prueba se realizó 24 horas
previas y 24horas posteriores al TCE.

7.6.2. Escala de Hunter

Esta escala evalúa reflejos motores y aspectos tanto visuales como
espaciales; consiste en 10 pruebas con valores que van de los 2 a los 4
puntos (según la prueba) dando como total 21 puntos para un sujeto sin TCE.
Esta prueba se realizó 24 h previas y 24 h posteriores al TCE.

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7.7. Procesamiento de las muestras biológicas y técnicas histológicas
La naturaleza inespecífica de la sintomatología del TCE agravado por las
diferentes causas ha hecho que la aproximación diagnóstica y pronostica
sean casi un desafío. Por lo que los esfuerzos de investigación han sido
enfocados en la identificación de biomarcadores y análisis histológicos que
reflejen la severidad de la lesión cerebral (Plog et al, 2015). Estos análisis
histológicos se realizan ex vivo.

7.7.1. TTZ

Para evaluar el tejido cerebral dañado por isquemia y su área de penumbra
se utiliza el cloruro de trifenil-tetrazolio (TTZ). Introducido por primera vez en
1958 como una tinción para detectar daño miocárdico por isquemia (Shuzo et
al, 2001). Esta tinción permite una evaluación confiable con un procesamiento
histológico mínimo (Mathews et al, 2000); su mecanismo de acción permite
identificar tejido dañado por falta de oxígeno, resultando en un tono pálido,
esto debido a la interacción con la enzima deshidrogenasa presente en el
complejo I de la cadena de transporte de electrones de la mitocondria. Por lo
tanto, se teñirá de un tono rojizo el tejido donde exista metabolismo celular,
es decir, respiración, mientras que el tejido donde no haya respiración
(hipóxico), es decir, tejido dañado (en este caso como consecuencia de un
TCE) presentará un color blanco (sin tinción).

Se administró pentobarbital sódico 6.3% a los sujetos para posteriormente
decapitarlos. Posterior al punto final humanitario, se extrajo el cerebro y se
realizaron cortes de aproximadamente 2 mm de grosor. Estos se sumergieron
en 2 ml de TTZ 2% y se incubaron a 37°C durante 30 minutos. Al terminar el
tiempo de incubación, el TTZ 2% se desechó y cada corte se enjuagó con 2
ml de paraformaldehído 4%, el cual, además de fijar el tejido, detiene la
interacción del TTZ con éste.

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7.7.2. Violeta de cresilo

La violeta de cresilo es un colorante acidófilo comúnmente utilizado para
tinciones generales del sistema nervioso, reacciona con los grupos fosfato de
los ácidos nucleicos, lo que resulta en la tinción de núcleos celulares y
retículo endoplásmico rugoso. Esta tinción proporciona un panorama general
de la distribución, tamaño y morfología de las neuronas, por lo que es uno de
los métodos más utilizados para el estudio citoarquitectónico. Al teñirse las
neuronas presentes en el tejido, permite obtener información sobre el
tamaño, afinidad tintorial y grado de empaquetamiento de los somas
neuronales en las distintas estructuras del sistema nervioso central.

Con el tejido cerebral previamente extraído y congelado, se realizaron cortes
coronales de 20 µm los cuales fueron montados en portaobjetos silanizados,
se dejaron secar 24 horas y posteriormente se deshidrataron durante 1 noche
en alcohol absoluto.

Para la tinción con violeta de cresilo, se sumergieron las laminillas durante 30
minutos en violeta de cresilo con ácido acético, posteriormente se realizó un
tren de 4 alcoholes: 2 de alcohol 96%, 2 de alcohol absoluto y previo a la
colocación del cubreobjetos se aclararon las laminillas con xilol para facilitar
la aplicación del adhesivo Permount.

Para determinar la cantidad de neuronas por área cerebral (corteza motora
primaria M1 (Figura 4) y región CA1 de hipocampo (Figura 5), se realizó
conteo celular en dos campos diferentes por tres personas cegadas e
independientes. El criterio utilizado para determinar el conteo o no de las
células fue la presencia de borde celular con núcleo de cara abierta (tinción
del nucléolo y delimitación del núcleo en citoplasma (Figura 7).

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Figura 4. Corte coronal de cerebro de rata, con acercamiento a corteza
motora primaria M1. Imagen de corte tomada del atlas de Paxinos y
Watson, 1986. Microfotografìa de M1 tomada a 10x, tinción violeta de
cresilo.
41

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Figura 5. Corte coronal de cerebro de rata, con acercamiento a
región CA1 hipocampo. Imagen de corte tomada del atlas de Paxinos
y Watson, 1986. Microfotografía de CA1 tomada a 10x, tinción violeta
de cresilo.
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42

Calzada-Reyes 2018

7.8. Análisis estadístico e interpretación de los datos
Para la validación y consistencia de los datos se realizó limpieza de estos,
verificando toda inconsistencia directamente con la fuente de información
original (hojas de cotejo).

Para el cumplimiento de los objetivos se realizaron frecuencias simples y se
mostraron las estimaciones siguientes: media aritmética y error estándar.
Para el análisis de las distintas intensidades de impacto del TCE, se realizó
comparación para más de dos muestras mediante el estadístico de contraste
de análisis de la varianza (ANOVA) de dos vías para categorías ordenadas
y/o la prueba de Kruskal-Wallis.

Para la realización de los contrastes a posteriori se utilizó la prueba de Tukey.
Se definió como criterio estadístico, un nivel de significancia de p<0.05 para
considerar las diferencias como relevantes.

8. Consideraciones éticas

El manejo de los sujetos experimentales se llevó a cabo de acuerdo con las
recomendaciones establecidas por el comité de ética local en cumplimiento
de la Norma Oficial Mexicana (NOM 062-ZOO-0199) para el cuidado y uso de
los animales de laboratorio.

Los sujetos experimentales se anestesiaron previamente a cualquier
procedimiento doloroso.

9. Resultados

Se muestran los resultados de las comparaciones entre el estado basal y 24
horas post TCE con relación a la ingesta de alimento (Gráfico 1), consumo de
agua (Gráfico 2) y variación de peso (Gráfico 3).
No se observaron diferencias estadísticamente significativas en estas
variables.
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Gráfico 1. Ingesta de alimento pre y post TCE. Las barras representan la
media + error estándar del alimento ingerido por los sujetos experimentales 24
h pre y post trauma. No se observan diferencias significativas. ANOVA de 2
vías; efecto del TCE (F1,98 = 2.444, P = 0.1212); efecto de la intensidad del
TCE (F3, 98 = 2.214, P = 0.0912).
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Gráfico 2. Ingesta de agua pre y post TCE. Las barras representan la media
+ error estándar del consumo de agua de los sujetos experimentales 24 h pre
y post trauma. No se observan diferencias significativas. ANOVA de 2 vías;
efecto del TCE (F1,98 = 0.03431, P = 0.8534); efecto de la intensidad del TCE
F3, 98 = 1.513, P = 0.2160).
Gráfico 3. Diferencia de peso pre y post TCE. Las barras representan la
media + error estándar del incremento de peso corporal de los sujetos
experimentales 24 h pre y post trauma. No se observan diferencias
significativas. ANOVA de 2 vías; efecto del TCE (F1,98 = 1.241, P = 0.2680);
efecto de la intensidad del TCE F3,98= 5.537, P=0.0015)

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Se realizaron dos pruebas neuroconductuales: escala de Hunter (Gráfico 4) y
escala NSS (Gráfico 5), 24 horas previas al TCE y 24 horas post TCE. En
ambas pruebas se observaron diferencias significativas al comparar al grupo
control con los grupos de 40 y 60 psi.

En la escala de Hunter (Gráfico 4), se encontró que los grupos de 40 y 60 psi
presentaron un mayor deterioro neuroconductual al obtener una menor
puntuación en la evaluación post TCE en comparación con la obtenida 24
horas antes. Así mismo, se observan diferencias significativas entre la
puntuación de la prueba post TCE de ambos grupos (40 y 60) contra la del
grupo CTRL.

Con relación a la escala NSS (Gráfico 5) se encontró un mayor deterioro
neuroconductual en los grupos de 40 y 60 comparados con el grupo control y
su basal de 24 horas previas al TCE. Una puntuación mayor en esta escala
es indicativa de un mayor daño.

Gráfico 4. Escala de Hunter. Las barras representan la media + error estándar del
puntaje obtenido en la escala de Hunter pre y post TCE. Se observan diferencias
significativas entre el grupo CTRL y los grupos de 40 y 60 a las 24 horas post TCE.
Kruskal- Wallis=16.96, P = 0.0007)*P<0.05.

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En la figura 6 se muestra una fotografía de un corte de cerebro con la tinción
vital de TTZ, no se observaron cambios en ninguno de los tres grupos
experimentales comparados contra el control.

Gráfico 5. Escala NSS. Las barras representan la media + error estándar del
puntaje obtenido en la escala NSS pre y post TCE. Se observan diferencias
significativas entre el grupo CTRL comparado con los grupos de 40 y 60 24 horas
post TCE. Kruskal- Wallis=6.090, P = 0.0004)*P<0.05.

Figura 6. Corte coronal de cerebro con tinción vital
TTZ.
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Con respecto al análisis histológico, este se realizó a través de un conteo
celular (Gráfico 6) sobre cortes de 20 micras teñidos con violeta de cresilo.
Se observó una tendencia a la disminución en el número de células integras,
lo que representa un mayor daño en la zona de la corteza motora primaria
(M1) ipsilateral y en la región CA1 del hipocampo ipsi y contralateral, en todos
los grupos de 20, 40 y 60, comparados con el grupo CTRL. Se presentaron
diferencias significativas entre el grupo CTRL y el grupo de 60 en el conteo
celular de la M1 ipsilateral, así como en la región CA1 contralateral. También
se encontraron diferencias significativas en la región CA1 ipsilateral entre el
grupo control comparado con los de 40 y 60.

Gráfico 6. Conteo celular en corteza motora primaria M1 y CA1 del hipocampo.
Las barras representan la media + error estándar del total de células contadas en
cada zona. Se observan diferencias significativas entre el grupo CTRL y 60 enM1
ipsilateral y en CA1 contralateral; así mismo se observan diferencias
significativas en CA1 ipsilateral en la comparación del grupo control con los
grupos de 40 y 60. ANOVA de 1 vía.M1 ipsiF3, 20 = 6.114, P=0.0040; M1 contra
ipsiF3, 20 = 1.721, P=0.1950; CA1 ipsiF3, 20 = 8.571, P=0.007; CA1 contra F3, 20 =
3.845, P=0.0253. *P<0.05.

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A continuación (Figura 7) se muestran microfotografías representativas de las
áreas M1 de corteza cerebral y CA1 de hipocampo de los cortes de cerebro
de rata con la tinción de violeta de cresilo.

Calzada-Reyes 2018

Figura 7. Microfotografìas de M1 y CA1 tomadas a 40x. Se muestran las dos áreas de interés para el
conteo celular. A.1) M1 de CTRL B.1) CA1 de CTRL A.2) M1 de 20 B.2) CA1 de 20 A.3) M1 de 40 B.3)
CA1 de 40 A.4) M1 de 60 B.4) CA1 de 60.
A.1
A.2
A.3
A.4
B.1
B.2
B.3
B.4
50

Calzada-Reyes 2018

10. Discusión

El TCE en la población pediátrica se asocia además de la mortalidad y
morbilidad inherente, con el desarrollo de enfermedades crónicas
neurodegenerativas, por lo que se necesita del desarrollo de modelos
adecuados que representan las condiciones en este grupo de la población
para ofrecer nuevas terapias de tratamiento o terapias neuroprotectoras
efectivas en el TCE (Kochanek et al, 2017; Robertson et al, 2007).

Las aportaciones que se pueden hacer con el desarrollo de estos modelos de
TCE pediátrico resultan muy relevantes, puesto que a través de los análisis
neuroconductuales e histológicos se obtiene una mayor comprensión de los
posibles mecanismos involucrados en los procesos fisiopatológicos a corto y
largo plazo (Kochanek et al, 2017; Yarnell et al, 2016). Por tanto, el presente
trabajo se enfocó en cubrir un área de oportunidad para el avance de las
investigaciones en este tema, siguiendo protocolos ya establecidos acerca de
la correspondencia de la edad de los modelos experimentales con relación a
las etapasde desarrollo del ser humano (Kilb, 2012).

10.1. Modificaciones del peso corporal e ingesta de alimento

Los resultados obtenidos en este trabajo mostraron que las ratas inmaduras
que fueron traumatizadas no presentaron una variación significativa en la
ingesta de agua y alimento y por tanto tampoco en el peso corporal, a las 24
horas post TCE. Adelson y colaboradores reportaron que un su modelo de
TCE cerrado, las ratas inmaduras mostraron una disminución en la actividad
motora y en el peso corporal, comparado con el grupo control, durante las
primeras 72 horas y que estas mismas ratas con TCE mantuvieron una
ganancia de peso menor durante los siguientes treinta días (Adelson et al,
2000). Hallazgos similares a los de Adelson se han reportado en modelos de
TCE de rata adulta, las cuales pierden peso a las 24 horas post TCE por una
disminución en el consumo de alimento y agua (Estrada et al, 2018; Martínez
et al, 2014). La diferencia de los datos observados puede radicar en que los
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Calzada-Reyes 2018

distintos modelos de inducción de TCE, incluyendo la gravedad de la lesión,
ocasionan disfunciones motoras diversas que pueden impedir que la rata se
alimente y beba agua, lo que se ve reflejado en el peso corporal. El deterioro
nutricional afecta el peso corporal y del cerebro (al reducir la densidad
neuronal) a largo plazo, por lo que se debe de considerar el impacto de la
nutrición posterior al TCE (Winick, 1983; Adelson et al, 2000).

La edad en la que se trató a los sujetos experimentales (21 a 23 DPN) resulta
ser una fase crucial en el desarrollo de la rata. Los mamíferos altriciales se
alimentan solamente de la leche materna, una vez en la edad adulta, ingieren
independientemente alimentos sólidos. La etapa intermedia entre estos dos
procesos es el destete y es de suma importancia para la sucesión a la etapa
adulta en los mamíferos (Sengupta, 2013). Los roedores criados
artificialmente son destetados y separados de su madre al día postnatal 21
día en que comienza la maduración sexual (Sengputa, 2012). En un sentido
estricto, el proceso de destete involucra una reorganización en el desarrollo
del comportamiento ingestivo, puesto que las ratas ahora deciden
independientemente la cantidad y frecuencia de ingesta de alimento
(Sengputa, 2013). Este proceso de destete también podría estar influyendo
en la conducta de ingesta posterior al TCE.
10.2. Cambios neuroconductuales

Los resultados posteriores a un TCE varían por el mecanismo de lesión, la
región cerebral afectada y por el grupo etario al que pertenece el sujeto
(Pérez, 2018); en general, mientras menor edad tenga el sujeto que sufre el
TCE, el resultado es peor y esto puede representar parte de los mecanismos
de respuesta y de daño frente al TCE (Adelson et al, 2013). Una de las
razones para la realización de este trabajo fue la obtención de un modelo de
TCE en rata inmadura que pudiera representar mejor la gama de alteraciones
presentes en la población pediátrica y que permitiera su evaluación
comparativa a través de escalas probadas en otros trabajos y de esta forma
lograr hacer inferencias dirigidas al contexto clínico del paciente pediátrico
con TCE.
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Calzada-Reyes 2018

Las escalas empleadas en este trabajo permiten evaluar el déficit sensorial,
motor y de atención, como un reflejo de las alteraciones que podrían
presentarse a nivel de sistema nervioso central (Yarnell et al, 2016; Hamm,
2001; Mahmood et al., 2001; Hunter et al, 2000). Se usaron las escalas NSS
y de Hunter para determinar la presencia de alteraciones neuroconductuales
en los grupos experimentales. Los resultados obtenidos en las evaluaciones
realizadas post TCE con ambas pruebas, demostraron un mayor deterioro
neuroconductual en los grupos de TCE de 40 y 60, comparados contra el
grupo control. Adelson y colaboradores reportaron, con evaluaciones de barra
de equilibrio y de plano inclinado, que las ratas inmaduras sometidas a TCE
grave presentaban un deterioro motor significativo a las 24 horas post TCE
comparado con los controles y que estas diferencias eran observables hasta
los 10 días post TCE (Adelson et al, 1997; Adelson et al, 2000).

Mychasiuk y colaboradores evaluaron una serie de pruebas
neuroconductuales en un modelo de rata inmadura con TCE moderado y
reportaron que a las 24 horas post TCE se presentó déficit en las pruebas de
barra de equilibrio y laberinto elevado; mientras que a las 48 horas se
encontró déficit en las pruebas de campo abierto y reconocimiento de objetos
(Mychasiuk et al, 2014).

El deterioro neuroconductual se asocia frecuentemente con lesiones en la
corteza cerebral y daño de regiones del hipocampo, entre otras lesiones y
procesos fisiopatológicos (edema cerebral, modificaciones en la perfusión
cerebral, cambios en la concentración de neurotransmisores, alteraciones del
metabolismo cerebral y activación de respuestas inmunológicas) (Kochanek
et al, 2017; Mychasiuk et al, 2014; Adelson et al, 2013; Huh et al, 2007;
Robertson et al, 2007; Adelson et al, 2000)

Los resultados obtenidos en este trabajo son comparables con los reportados
en la literatura y tienen la ventaja de ser las observaciones de tres grados
distintos de intensidad en el trauma, lo que se relaciona con el trauma leve,
moderado y grave. La mayoría de los estudios publicados se han centrado en
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Calzada-Reyes 2018

el trauma grave, seguidos del moderado y es escasa la literatura que aborda
los modelos de rata inmadura sobre los tres niveles de gravedad (Adelson et
al, 2013) y más aún sobre el TCE leve o la concusión. Esta reportado que los
pacientes con TCE leve pueden llegar a deteriorarse como consecuencia de
los mecanismos de lesión secundaria y que no necesariamente todos los
pacientes con TCE presentaran alguna manifestación clínica temprana de
daño neurológico, a esta entidad se le conoce como trauma de cráneo menor
y está asociada principalmente con el TCE leve o la concusión cerebral y un
mal pronóstico clínico (Homer y Kleinman, 1999; Pérez, 2018).

Ambas escalas, Hunter y NSS, permitieron observar diferencias
estadísticamente significativas que demuestran que las repercusiones
conductuales y motoras observadas se relacionan directamente con la
intensidad del TCE. La integración de pruebas que evalúen otros parámetros
enriquecerá el estudio del TCE a través de este modelo y permitirán obtener
datos más cuantificables y precisos (Semple et al, 2016).

10.3. Cambios histológicos en corteza motora e hipocampo

Como se mencionó anteriormente, las estructuras cerebrales que
frecuentemente se asocian con lesiones post TCE son la corteza cerebral y el
hipocampo. En este trabajo se realizó el análisis de estas estructuras a través
del conteo celular en cortes teñidos con violeta de cresilo y se realizó una
observación del tejido cerebral (cortes coronales de aproximadamente 2
milímetros de grosor) con tinción de TTZ para comprobar la existencia de
lesiones por isquemia.
Se sabe que la isquemia es uno de los principales mecanismos de lesión
secundaria; el TTZ es una técnica útil para la detección de daño isquémico
temprano (Shuzo et al, 2001). En este trabajo no se encontraron diferencias
entre los grupos experimentales comparados contra el control, con relación a
la presencia de isquemia. Biagas y colaboradores demostraron que, posterior
a un TCE, la respuesta cerebrovascular es diferente según la edad,
reportaron que las 24 horas post TCE se presenta un incremento del flujo
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Calzada-Reyes 2018

sanguíneo cerebral en las ratas inmaduras y disminuye en las ratas ancianas.
La hiperemia se presentó durante los primeros tres días y en algunas
regiones del cerebro de las ratas inmaduras persistió hasta por 7 días post
TCE. Estos hallazgos pueden estar relacionados con procesos