Asociacion-de-los-polimorfismos--762-y-A1513C-del-gen-P2X7-en-pacientes-con-arteritis-de-Takayasu-positivos-para-Mycobacterium-tuberculosis

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1 
 FACULTAD DE QUÍMICA 
 
 
Asociación de los polimorfismos -762 y A1513C del gen P2X7 en 
pacientes con arteritis de Takayasu positivos para Mycobacterium 
tuberculosis. 
 
 
T E S I S 
QUE PARA OBTENER EL TITULO DE 
QUIMICA FARMACEUTICO BIOLOGICA 
 
PRESENTA: 
MARÍA DEL MAR DE LA CRUZ PÉREZ 
 
 
 
 
 
MEXICO D.F 2013 
 
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO 
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2 
JURADO ASIGNADO: 
 
PRESIDENTE: Profesor: Francisco Javier Plasencia de la Parra 
VOCAL: Profesor: Enrique Ortega Soto 
SECRETARIO: Profesor: Ricardo Gamboa Ávila 
1er. SUPLENTE: Profesor: Martha Patricia Coello Coutiño 
2° SUPLENTE: Profesor: Tzvetanka Dimitrova Dinkova 
 
 
SITIO DONDE SE DESARROLLÓ EL TEMA: 
INSTITUTO NACIONAL DE CARDIOLOGÍA “IGNACIO CHÁVEZ” 
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA 
 
 
ASESOR DEL TEMA: RICARDO GAMBOA ÁVILA ____________________ 
 
SUSTENTANTE (S): MARÍA DEL MAR DE LA CRUZ PÉREZ 
___________________ 
 
 
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I 
 
 
ÍNDICE 
 
 
 
Resumen………………………………………………………………................ 
 
1 
Introducción……………………………………………………………………… 
 
3 
Marco teórico……………………………………………………………………. 4 
Definición de la arteritis de Takayasu…………………………………………. 4 
Historia de la arteritis de Takayasu…………………………………………….. 4 
Incidencia de la arteritis de Takayasu…………………………………………. 5 
Características clínicas de la arteritis de Takayasu………………………….. 5 
Clasificación de la arteritis de Takayasu………………………………………. 7 
Diagnóstico de la arteritis de Takayasu………………………………………. 8 
Etiología de la arteritis de Takayasu…………………………………………… 10 
Tuberculosis………………………………………………………………………. 11 
Características clínicas de la tuberculosis…………………………………….. 13 
Diagnóstico de la tuberculosis………………………………………………….. 14 
Patogénesis de la tuberculosis…………………………………………………. 15 
La respuesta de la inmunidad innata a las micobacterias…………………... 17 
Inmunidad adaptativa: interacciones de Mycobacterium tuberculosis 
en el granuloma…………………………………………………………………… 
 
18 
Reactivación de Mycobacterium tuberculosis……………………………….. 20 
Gen P2X7…………………………………………………………………………. 20 
Receptor P2X7…………………………………………………………………... 21 
Agonistas del receptor P2X7………………………………………………….. 23 
Antagonistas del receptor P2X7………………………………………………... 23 
Permeabilidad de la membrana a través del receptor P2X7………………... 24 
Muerte celular y el receptor P2X7…………………………………………….. 25 
Polimorfismo 1513A/C…………………………………………………………. 26 
Polimorfismo -762T/C…………………………………………………………... 
 
26 
Planteamiento del problema………………………………………………… 
 
27 
Objetivo general y específico………………………………………………… 
 
28 
Hipótesis. ………………………………………………………………………… 
 
28 
Diseño experimental 
Descripción………………………………………………………………………… 29 
Definición de la población……………………………………………………….. 29 
Tamaño de la muestra…………………………………………………………… 30 
Metodología………………………………………………………………………. 30 
Análisis estadístico………………………………………………………………. 
 
34 
Resultados……………………………………………………………………….. 
 
34 
Discusión…………………………………………………………………………. 45 
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II 
 
Conclusión……………………………………………………………………….. 
 
53 
Referencias bibliográficas…………………………………………………….. 
 
54 
Anexos 
Anexo 1: Técnica de obtención de ADN en muestras embebidas en 
parafina…………………………………………………………………………….. 
 
59 
Anexo 2: Procedimiento para ajustar la concentración de ADN…………….. 61 
Anexo 3: Reactivos para la amplificación de ADN por PCR………………… 62 
Anexo 4: Gel de acrilamida al 8%, preparación y condiciones 
de la corrida de electroforesis…………………………………………………… 
 
63 
Anexo 5: Tinción de plata para gel de acrilamida al 8%................................ 64 
 
 
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1 
RESUMEN 
 
La Arteritis de Takayasu es una enfermedad poco estudiada que presenta una 
mayor frecuencia en países como Japón, India y México. Su etiología es 
desconocida y se ha asociado a factores genéticos, enfermedades de tipo 
autoinmune y tuberculosis, entre otras. 
La relación que se ha encontrado entre de la arteritis de Takayasu y la 
tuberculosis se basa en que en ambas enfermedades existe un proceso 
inflamatorio progresivo, por lo que se ha propuesto que a una infección por una 
micobacteria, que se mantiene en estado latente precede al proceso 
inflamatorio en la arteritis de Takayasu. Un posible vínculo entre estas 
enfermedades es el gen P2X7 que codifica para un receptor (P2X7) de 
membrana expresado en diversas células entre ellas monocitos y macrófagos. 
El receptor P2X7 interviene en el proceso inflamatorio y la muerte de 
microorganismos intracelulares por medio de la apertura de canales 
dependientes de ATP, por donde fluye calcio, sodio y potasio, lo cual 
desencadena a su vez la cascada de caspasas y señales para el proceso de 
apoptosis. Los polimorfismos A1315C y -762T/C del gen P2X7 se han 
asociado en algunas poblaciones a la pérdida de función del receptor P2X7. 
El objetivo del presente trabajo fue analizar la relación entre los polimorfismos 
del gen P2X7 (1513 y -762) en tejido aórtico de pacientes positivos para la 
secuencia de inserción de Mycobacterium tuberculosis IS6110 y con arteritis de 
Takayasu. 
Se analizaron las frecuencias genotípicas y alélicas de pacientes con: arteritis 
de Takayasu (AT) (n=33), Tuberculosis (TB) (n=30); y el grupo control: con 
pacientes diagnosticados con aterosclerosis (At) (n=69) que sirvió como grupo 
control en el manejo de la muestra. 
El ADN se obtuvo de biopsias de aorta conservadas en parafina. Se realizaron 
las genotipificaciones mediante la técnica de reacción en cadena de la 
polimerasa, PCR (FRLP) para el polimorfismo -762T/C, mientras que para el 
polimorfismo A1513C se llevo a cabo por la técnica de PCR en tiempo real. 
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2 
Los análisis estadísticos que se realizaron para los polimorfismos A1513C y -
762 del gen P2X7, fueron los siguientes: a) comparación de las frecuencias 
alélicas y genotípicas por grupo, utilizando todas las muestras, b) utilizando 
sólo las muestras que dieron positivo al gen IS6110 especifico para M. 
tuberculosis, las frecuencias genotípicas fueron comparadas por grupo y 
analizadas con respecto al grupo control y c) finalmente empleando sólo 
muestras positivas para la secuencia de inserción IS6110 se analizó el tipo de 
tuberculosis por genotipo y grupo. Los resultados que se consideraron 
estadísticamente significativos fueron aquellos con valor de p ≤0.05. 
Los resultados obtenidos de los análisis estadísticos siguiendo el orden del 
párrafo anterior fueron: 
a) Para el SNP 1513A>C, la comparación del genotipoAA vs AC fue 
significativa para todos los grupos: TB y aterosclerosis. En la evaluación del 
SNP -762 se obtuvo que el genotipo TT vs TC tuvo significancia en los 
grupos de AT y aterosclerosis. 
b) En el análisis con muestras +IS6110, el genotipo AA del polimorfismo 
A1513C tuvo diferencias significativas en el grupo control y en TB. La 
evaluación del genotipo AA del SNP 1513A>C para los grupos de AT y TB 
respecto al grupo control fue significativa. También el genotipo TT del SNP 
-762 presentó significancia en la comparación de los grupos AT y TB con el 
grupo control. 
c) Se observó una significancia para el polimorfismo A1513C al comparar el 
total de muestras con TB pulmonar con genotipo AA (29.3%) contra el total 
de Tb pulmonar con genotipos AC+CC (12.1%). 
En la población estudiada el genotipo AA del polimorfismo 1513 en las 
enfermedades de AT y TB representó riesgo para el desarrollo de las 
enfermedades mencionadas, y el polimorfismo -762 el genotipo TT representó 
riesgo a padecer arteritis de Takayasu y tuberculosis. 
 
 
 
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3 
INTRODUCCIÓN 
La arteritis de Takayasu (AT) es una enfermedad que afecta a las grandes 
arterias, como la aorta y sus ramas con un proceso inflamatorio crónico que 
desencadena complicaciones como aneurismas y la muerte. Este padecimiento 
es difícil de diagnosticar en su inicio. La etiología de ésta enfermedad se 
desconoce, aunque se ha asociado a cuestiones genéticas, enfermedades 
autoinmunes y a tuberculosis (TB). 
La AT y la tuberculosis comparten un proceso inflamatorio como parte de la 
respuesta inmune. La AT en su primera etapa se caracteriza por el desarrollo 
de granulomas al igual que la tuberculosis, los granulomas recién formados 
están integrados por fagocitos mononucleares inmaduros rodeados por las 
células efectoras linfocíticas incluyendo células T; CD4+ y CD8+. Al fallar esta 
respuesta inmune en el caso de la tuberculosis ocurre la diseminación de la 
micobacteria y en la AT ocurre un proceso inflamatorio vascular en la capa 
adventicia que se caracteriza por infiltración de células B y T, habiendo casos 
de formación de nódulos con células B en el centro, y células T y células 
detríticas hacia la periferia. 
El receptor P2X7 es expresado en diferentes células entre las que destacan 
macrófagos, este receptor es activado por ATP provocando la apertura de 
canales que permiten la entrada de calcio y como consecuencia promueve la 
apoptosis y con ello la liberación de la interleucina madura (IL-1b), además de 
promover la activación de las metaloproteasas de la membrana, generando la 
expresión de l-selectina (CD62L), tanto en linfocitos como en monocitos, 
activando la cascada de caspasas. Este receptor es codificado por el gen 
P2X7, el cual presenta varios polimorfismos de los cuales, se ha reportado en 
diversos estudios que los polimorfismos 1513A/C y el -762T/C pueden estar 
implicados en la pérdida de la función del receptor. 
Existen estudios que muestran la asociación de los polimorfismos antes 
mencionados con la tuberculosis, en donde los alelos mutantes de ambos 
polimorfismos pueden estar implicados con la susceptibilidad a esta 
enfermedad. 
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4 
Como ya se menciono anteriormente los polimorfismos 1513A/C y el -762T/C 
están relacionados con TB a su vez la tuberculosis se ha asociado a la 
tuberculosis, por lo tanto conocer la asociación de estos polimorfismos con la 
arteritis de Takayasu nos pueden dar un indicio para conocer la etiología de la 
misma. 
MARCO TEORÍCO 
Definición de Arteritis de Takayasu 
La Arteritis de Takayasu (AT) fue definida por el American Collage of 
Rheumatology (ACR) como una vasculopatía crónica inflamatoria idiopática de 
las grandes arterias elásticas, cuyo resultado son cambios oclusivos o 
ectásicos, principalmente en la aorta y sus ramas inmediatas (tronco 
braquicefálico, las arterias carótidas, subclavias, vertebrales y renales), así 
como también las arterias coronarias y pulmonares.1 
Historia de la enfermedad de Takayasu 
La primera descripción de la enfermedad de Takayasu fue hecha en 1830 por 
Rokushu Yamamoto. Describió a un hombre de 45 años con fiebre, ausencia 
de pulso, pérdida de peso y falta de aire, que murió en su 11º año de 
seguimiento. En 1905, Mikito Takayasu, profesor de oftalmología, describe a 
una mujer de 21 años con peculiares malformaciones arteriovenosas. A pesar 
de que Takayasu no indica que otras arterias estaban involucradas, en el 
debate que siguió, dos oftalmólogos, Onishi y Kagoshima, describen hallazgos 
oculares similares, junto con la ausencia del pulso radial2. 
Algunos médicos, por lo tanto, insisten en denominar este padecimiento como 
"enfermedad de Takayasu-Onishi". Poco después, varios casos fueron 
reportados en Japón, incluyendo un informe en 1939 por Yasuzo Shinmi que 
utilizó por primera vez el término "arteritis de Takayasu” al referirse al caso 
de una paciente de 28 años de edad, que se queja de delirio y es hospitalizada 
en el Departamento de Psiquiatría de la Universidad de Tokio el 27 de Octubre 
de 1939. El examen médico de esta paciente, cuenta y describe que los pulsos 
radiales de la arteria braquial y la arteria carótida no eran palpables. Después 
de una semana de hospitalización falleció. El informe de la autopsia, señaló 
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5 
que el paciente había sufrido de panarteritis de aorta, carótida interna y 
externa, las arterias subclavia y axilar. La paciente murió de cerebromalacia y 
congestión pulmonar3. 
Más tarde, Kunio Oohta vuelve a examinar este caso e informó a la Sociedad 
Patológica de Japón en 1940, haciendo hincapié en que los cambios 
inflamatorios no sólo se limitan a la capa media, sino también en la íntima y la 
adventicia de las arterias, lo que equivale a panarteritis. Oohta también señaló 
por primera vez que las arterias pulmonares estaban involucradas en la arteritis 
de Takayasu3. 
En 1948 se describen las características clínicas: la falta de pulso, anastomosis 
coronaria en los vasos de la retina, que se acentúa en el seno carotideo como 
reflejo característico de esta condición mórbida. También se difunde un 
artículo sobre la enfermedad de Takayasu en países occidentales a través del 
American Heart Journal escrito por Caccamize y Whiteman4. En 1951, las 
características clínicas de la enfermedad de Takayasu se resumieron en un 
diario Inglés bajo el nombre de enfermedad sin pulso5. 
En 1975, la investigación del Comité del Departamento de Salud y Bienestar 
de Japón propuso el uso de "arteritis de Takayasu” en memoria del autor del 
primer reporte acerca del padecimiento, Mikito Takayasu3. 
 
Incidencia de la Arteritis de Takayasu 
La arteritis de Takayasu tiene una incidencia de 1.2-2.6 millones por año6. La 
Arteritis de Takayasu es una vasculopatía rara que afecta principalmente a 
mujeres jóvenes, que se encuentran entre los 20 y 30 años de edad5, teniendo 
una relación mujer: hombre de 9:17; siendo la tercera vasculitis más frecuente 
en la infancia después de la purpura de Henoch Schonlein y la enfermedad de 
Kawasaki8. Es más frecuente en Oriente principalmente en Japón, sureste de 
Asia, India y México5. 
Su incidencia no es tan frecuente en Europa, Estados Unidos y Canadá. En 
África es bastante rara, excepto en Sudáfrica. En India y en Sudáfrica la TA 
compromete en forma más frecuente la aorta abdominal; por ello en estos 
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6 
casos hay hipertensión arterial, isquemia y se describe la forma aneurismática. 
En Latinoamérica, en México, Brasil y Colombia es la vasculitis más 
frecuente10, (ver tabla 1). 
País México Brasil Chile C. Rica Argentina Venezuela Colombia 
N° de 
casos 
413 83 15 4 1 4 114 
Tabla 1. Comparación de los casos de TA en algunos países de Latinoamérica, (recopilación 
de casos reportados en artículos hasta el año 2007) tomado de Ochoa Carlos (2009)10. 
Características Clínicas de la Arteritis de Takayasu (AT) 
La AT es una enfermedad inflamatoria granulomatosa segmentaria y parcial de 
las tres capas de la aorta y sus ramas principales6, que provoca estenosis en 
las arterias medianas y de gran tamaño, debido a que afecta generalmente 
el arco aórtico y sus ramas. Esta enfermedad está caracterizada por 
fibroproliferación de la íntima de la aorta, grandes vasos, las arterias 
pulmonares arterias pulmonares y las arterias renales que lleva a la estenosis 
segmentaria, oclusión, dilatación y aneurisma en los vasos. Un término 
alternativo, aortoarteritis idiopática o no específica se ha utilizado para describir 
el espectro de las anomalías vasculares asociadas con esta condición6. 
Se describen dos fases o etapas de la AT. Una temprana, que se caracteriza 
por síntomas sistémicos inflamatorios inespecíficos (fiebre, sudoración 
nocturna, artralgias, mialgias, pérdida de peso y anemia), la patología en la 
aorta y ramas durante esta primera etapa consiste en cambios granulomatosos 
en la media y la adventicia. 
La segunda fase está dada por un proceso inflamatorio vascular activo 
localizado, caracterizado por dolor en el área afectada y aparición de signos y 
síntomas de insuficiencia circulatoria en la región afectada. El proceso 
inflamatorio se caracteriza en la capa adventicia con infiltración de células B 
y T, habiendo casos de formación nódulos con células B en el centro, células 
T y células detríticas en la periferia5, además se observan cambios en la capa 
media con células de Langerhans y necrosis central de fibras de células de 
músculo liso6. Este proceso de la enfermedad continúa, a tasas variables, a 
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7 
una etapa esclerótica, con hiperplasia de la capa íntima, degeneración de la 
capa media y fibrosis en la capa adventicia, que puede comprometer la luz del 
vaso. La aorta y arterias involucradas desarrollan estrechamiento segmentario, 
que da lugar a manifestaciones clínicas de isquemia. 
Cuando se desarrolla la estenosis aparecen los hallazgos más característicos: 
disminución o ausencia de pulsos, soplos, hipertensión arterial, síntomas 
neurológicos, insuficiencia cardíaca congestiva, hipertensión pulmonar, 
etcétera. 
El compromiso vascular suele ser múltiple y las arterias afectadas más 
frecuentemente son las subclavias, las carótidas, las vertebrales y las renales. 
El compromiso cardíaco por estenosis u oclusión de la circulación coronaria se 
presenta en 9% a 10% de los pacientes como infarto de miocardio o muerte 
súbita1. 
Clasificación de la Arteritis de Takayasu 
Existen varias clasificaciones de esta enfermedad, en este trabajo se hace 
referencia a la presentada en la conferencia de la arteritis de Takayasu de 
1994. Esta clasificación está basada en la región anatómica en la que se 
presenta el daño y se distinguen cinco tipos diferentes (ver figura 1 y tabla 2). 
Este sistema es útil debido a que hace una comparación de las 
características del paciente de acuerdo a los vasos involucrados y ayuda a 
planear la cirugía5. 
 
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8 
 
Figura 1. Clasificación angiográfica de la arteritis de Takayasu. Se muestra la localización de 
la lesión y el tipo al que pertenece. Tomado de Hahn Deirdré, et al. (1998)11. 
Tipo Vaso involucrado 
I Ramas del arco aórtico 
IIa Aorta ascendente, arco aórtico y sus ramas 
IIb Aorta ascendente, arco aórtico y sus ramas, aorta torácica 
descendente. 
III Aorta torácica descendente, aorta abdominal y/o arterias 
renales. 
IV Aorta abdominal y/o arterias renales 
V Características combinadas de los tipos IIb y IV. 
*Cuando se involucran las arterias coronarias o pulmonar deben ser 
designadas como C (+) o P (-). 
Tabla 2. Clasificación angiográfica de la arteritis de Takayasu5. 
 
Diagnóstico de la arteritis de Takayasu 
La arteritis de Takayasu es un padecimiento crónico recurrente y puede cursar 
de forma asintomática en un 10% de los casos. El Colegio Americano de 
Reumatología definió los criterios diagnósticos para la arteritis de Takayasu en 
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9 
19901, pero fueron insuficientes para diagnosticar con precisión, por lo que 
fueron modificados en el año de 1996 por Sharma y colaboradores. El 
diagnóstico de la AT bajó estos criterios se hace basándose en signos y 
síntomas clínicos, datos de laboratorio y hallazgos angiográficos, (ver tabla 3). 
Para poder diagnosticar la arteritis de Takayasu se requiere la presencia de: 
a) 2 criterios mayores; b) 1 criterio mayor y 2 menores, y c) 4 criterios menores. 
A pesar de esto, la frecuente inespecificidad analítica hace que el diagnóstico 
final dependa en gran medida de los estudios de imagen12 (ver tabla 3). 
Criterios diagnósticos de Ishikawa modificados por Sharma et al (1996) 
Criterios mayores (de más de un mes de 
duración) 
Criterios menores 
Claudicación de las extremidades 
ausencia de pulsos 
palpitaciones 
amaurosis fugaz 
dolor en cuello 
fiebre 
visión borrosa 
síncopes 
disnea 
Elevación de la velocidad de sedimentación 
globular mayor 20 mm/h. 
Carotidina (sensibilidad en arteria carótida) 
Hipertensión arterial 
Regurgitación aórtica 
Tabla 3. Criterios diagnósticos de la arteritis de Takayasu realizados por Ishikawa 
modificados por Sharma et al (1996)12. 
La arteriografía es indispensable para el diagnóstico y seguimiento de la AT. 
Sin embargo, su capacidad está limitada a la detección de cambios en el 
diámetro luminal típicos de la etapa tardía de la enfermedad. Con este método 
no se ponen de manifiesto la presencia de inflamación vascular y el 
engrosamiento parietal, característicos de etapas más tempranas. El 
reconocimiento en la fase pre-estenótica permitiría iniciar el tratamiento en un 
estadio potencialmente reversible. 
Últimamente se ha utilizado la tomografía con emisión de positrones (PET) que 
permite la identificación temprana de todos los vasos afectados, los cuales 
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10 
muestran, debido a la actividad inflamatoria, un aumento de la captación de la 
F18-desoxiglucosa. Es posible de este modo el diagnóstico precoz de la 
enfermedad y el seguimiento de la respuesta terapéutica dado que la captación 
disminuye con la remisión. 
No existe el diagnóstico de laboratorio debido a la falta de 
marcadores séricos específicos para la enfermedad de AT en la 
actualidad, tampoco existe ninguna prueba serológica conocida capaz 
de suplantar el análisis histopatológico vascular en la determinación de activos 
debido a la inflamación. En algunos estudios de laboratorio, los resultados 
podrían variar por ejemplo: la concentración de Proteína C 
reactiva podría presentar valores elevados y la velocidad de sedimentación 
globular puede ser acelerada, pero su correlación con la actividad de la 
enfermedad no es clara13. El recuento sanguíneo completo muestra anemia 
normocítica/normocrómica,en el 50% de los pacientes. El factor reumatoide es 
elevado en el 15% de los pacientes, algunos pacientes muestran niveles 
elevados de transaminasas, hipoalbuminemia y hipergammaglobulinemia6. 
Etiología de la arteritis de Takayasu 
La causa de la enfermedad de Takayasu es desconocida; pero se ha asociado 
con diversos factores como anormalidades inmunológicas inespecíficas tales 
como hipergammaglobulinemia o autoanticuerpos que son frecuentemente 
encontrados en pacientes con AT. También han sido descritas asociaciones 
ocasionales con otras enfermedades autoinmunes7. 
Recientemente, se encontró una correlación de la inflamación con los niveles 
séricos de citocinas como la interleucina (IL) - 6 y RANTES (regulador en la 
activación, de células T normales expresadas y secretadas) con la actividad de 
la enfermedad de Takayasu14. 
Una predisposición genética ha sido asociada a AT basada en su distribución 
étnica y geográfica. Los intentos para relacionarlos con genes HLA (del inglés 
Human Leucocyte Antigen) clase II han conducido a asociaciones débiles y 
variables nada concluyentes7. Mientras que para HLA de clase I se ha 
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11 
encontrado un aumento en la expresión en el tejido de aorta con arteritis de 
Takayasu en comparación con la expresión en el tejido de aorta normal. 
Está relación con la arteritis de Takayasu con HLA-I se basa en que las células 
T reconocen los antígenos por sus receptores en asociación con antígenos del 
complejo mayor de histocompatibilidad (MHC, del inglés: Major 
Histocompatible Complex). Por otra parte, interacciones célula-célula en la 
respuesta inmune se cree que son mediadas por moléculas de adhesión 
expresadas tanto en células inmunes y células diana. 
También se ha asociado este padecimiento a la liberación de perforina, 
proteína liberada por parte de células NK que se ha encontrado aumentada en 
estudios histopatológicos de aorta con AT13. Por otra parte se sospecha de la 
asociación con la proteína de choque térmico de 65 kDa con la enfermedad 
de Takayasu. 
Existen estudios donde se reporta que se le encuentra asociada a la infección 
tuberculosa, esta asociación ha sido documentada en México por Lupi, 
Sánchez, Robles y Reyes13. Su asociación con la tuberculosis (TB) fue descrita 
por primera vez hace unos 50 años, basado en la presencia de células gigantes 
tipo Langerhans y granulomas similares a los encontrados en lesiones por 
tuberculosis. Esta asociación es común en zonas endémicas de TB. Ambas 
enfermedades presentan lesiones similares crónicas inflamatorias y en 
ocasiones también granulomas provisionales en las paredes arteriales15. 
Tuberculosis 
La tuberculosis es una enfermedad crónica que afecta principalmente los 
pulmones pero puede afectar a otras partes del cuerpo como los nódulos 
linfáticos, huesos, articulaciones, riñones y también puede causar meningitis. 
Es causada por un conjunto bacteriano Mycobacterium, género perteneciente 
a la familia Mycobacteriaceae que se integra por Mycobacterium tuberculosis 
(MTB), M. bovis, M. africanum, M. canetti y M. microti, siendo la primera de 
ellas el agente causal más común, las demás también pueden causar 
tuberculosis, pero estas especies no suelen hacerlo en individuos sanos. 
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12 
Mycobacterium tuberculosis fue descubierta por Robert Koch que la aisló en 
1882, por ello también MTB es conocido como el bacilo de Koch. Es una 
bacteria ácido-alcohol-resistente, aerobia estricta, su crecimiento está 
subordinado por la presencia de oxígeno. Es muy resistente al frío, la 
congelación y la desecación y por el contrario muy sensible al calor, la luz solar 
y la luz ultravioleta. Su replicación es muy lenta (se divide en periodos de 16 a 
20 hrs.) y ante circunstancias adversas puede entrar en estado latente, 
pudiendo retrasar su multiplicación desde algunos días hasta varios años. 
El reservorio natural del M. tuberculosis es el hombre, tanto el sano infectado 
como el enfermo. Se estima que un tercio de la población mundial ha tenido 
contacto con esta bacteria, y que sólo una baja proporción de las personas 
infectadas desarrollan la enfermedad16. 
Existen registros de la tuberculosis en China de hace 2300 años de antigüedad, 
en India hace 3300 años y el ácido desoxirribonucleico (ADN) de 
Mycobacterium tuberculosis se ha encontrado en momias egipcias que 
vivieron hace ya 5400 años. A pesar de que es una enfermedad muy antigua 
siguen habiendo casos en la actualidad, esto se debe a diferentes causas: la 
resistencia desarrollada por MTB a diversos antimicrobianos, la propagación 
de la infección por personas infectadas que no desarrollan la enfermedad y 
que migran a otros lugares. Se estima que para el año 2050 habrá 5 
millones de muertes por tuberculosis a nivel mundial17. 
En México la información preliminar de la Plataforma Única de Tuberculosis 
del año 2007 señala que se registró una tasa de 16.3 por cada 100 mil 
habitantes de TB en todas sus formas (17 143 casos nuevos). Del total de 
casos notificados en 2007, la forma más frecuente fue la TB pulmonar, al 
registrarse una tasa de 13.5 (14 422 casos nuevos) 18. Ver figura 2. 
 
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13 
 
Figura 2. Gráfica incidencia de TB pulmonar en los años 2000-2007 en México. Tomado de 
Epidemiologia (SINAVE; 2008)18. 
Características clínicas de la Tuberculosis. 
Comúnmente los síntomas de la tuberculosis se dividen en dos: TB primaria 
y reactivación de la TB. Los síntomas que caracteriza a la tuberculosis 
primaria son: tos, fiebre, pérdida de apetito, también puede haber silbidos 
debido a la compresión bronquial por los ganglios linfáticos inflamados y signos 
de neumonía. Las complicaciones inmediatas incluyen la bronconeumonía, 
derrame pleural y enfermedad diseminada. Las complicaciones intermedias 
incluyen diversas formas de enfermedades pulmonares y las complicaciones 
tardías son las bronquiectasias. 
Sin embargo, la mayoría de las infecciones primarias pasan desapercibidas y 
la infección permanece latente por muchos años, la reactivación de la 
enfermedad primaria se da en la vejez o en un estado de salud 
inmunosuprimido o inmunocomprometido apareciendo como una tos crónica a 
veces con hemoptisis (presencia de sangre en el esputo), malestar general y 
pérdida de peso. La fiebre y sudores nocturnos son frecuentes. 
 
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14 
Diagnóstico de Tuberculosis 
Generalmente la forma inactiva de tuberculosis pulmonar, que es la forma más 
común es asintomática en un inicio, pero cuando aumenta el grado de 
severidad y su extensión, aparecen algunos síntomas como tos, expectoración, 
disnea y con menos frecuencia, hemoptisis. La hemoptisis puede ocurrir ante 
una tuberculosis activa o inactiva y lo más común es la presencia de estrías de 
sangre en la expectoración. La hemoptisis masiva es poco común. 
Cuando hay sospecha de que pueda existir un caso positivo de tuberculosis, el 
diagnóstico con la prueba bacteriológica es la primera opción. La baciloscopia 
se hace en serie de tres, las muestras a analizar pueden ser de origen 
respiratorio (esputo normal o inducido, lavado bronquial y broncoalveolar, 
biopsia, s endoscópicas o quirúrgicas,) o no respiratorias (orina, LCR, sangre y 
médula ósea en inmunodeprimidos, punciones aspirativas y biopsias. 
La confirmación de tuberculosis se hace mediante radiografíade tórax, aunque 
no existe un patrón radiológico característico los hallazgos más frecuentes son: 
cavernas en lóbulos superiores, condensaciones pulmonares [neumónicas], 
derrame pleural, imagen miliar o de mijo, ensanchamiento mediastinal y 
cavernas en lóbulos inferiores (frecuentes en inmunosuprimidos) 19. 
Un diagnóstico positivo se establece con al menos una baciloscopia positiva en 
una serie de tres; sin embargo, un resultado negativo, no excluye el diagnóstico 
de tuberculosis19, ver Figura 3. 
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15 
. 
Figura 3. Mapa conceptual que muestra el proceso para el diagnóstico por medio de 
baciloscopia de Tuberculosis. Tomado de García (2006)19. 
Patogénesis de M. tuberculosis: etapas de la infección 
La infección por M. tuberculosis se puede dividir en tres etapas separadas 
entre sí, ver figura 4. En la primera etapa, individuos se infectan por vía aérea, 
las personas infectantes eliminan bacilos a partir de aerosoles (tos, 
expectoración) y la capacidad infectante depende del número de bacilos 
inhalados y de la susceptibilidad del huésped. Dentro de los pulmones, lugar 
que infecta principalmente MTB, reside en células fagocíticas como los 
macrófagos alveolares y células dendríticas, o alternativamente, en monocitos 
en sangre periférica donde se reproduce muy lentamente (lo cual es 
característico de las micobacterias), aunque se piensa generalmente que los 
macrófagos proporcionan una barrera efectiva contra la infección inicial por M. 
tuberculosis, ésta ha desarrollado numerosas estrategias que le permiten 
sobrevivir y establecer su residencia inicial en las células. Estas incluyen 
mecanismos para reducir la acidificación dentro del fagosoma, modificar el 
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16 
tráfico de éste, y alterar la asociación de varias proteínas de membrana del 
organelo16. 
El curso de infección durante la segunda etapa es principalmente dictado por la 
respuesta inmune adquirida del hospedero. Es en esta etapa de la infección en 
donde el organismo del individuo produce suficientes linfocitos sensibilizados, 
entonces los bacilos de TB son rodeados por cuatro capas celulares [células 
epitelioides, células gigantes, linfocitos (sensibilizados) y fibroblastos], para 
impedir que continúen su multiplicación, es decir, la formación del granuloma. A 
esta respuesta del hospedero se le conoce como primoinfección o lesión 
granulomatosa y representa el principal mecanismo del organismo para 
“controlar a las micobacterias” (ante su casi imposibilidad de erradicarlas) 20. 
La tercera y etapa final de la infección se caracteriza por la reactivación del 
bacilo de la tuberculosis en estado latente, y el inicio posterior de la infección 
aguda secundaria en el huésped16. 
 
 
Figura 4. Muestra las etapas de la infección por M. tuberculosis y los eventos representativos 
de cada una de ellas16. 
 
 
 
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17 
La respuesta de la Inmunidad Innata a las micobacterias 
La primera etapa (fig. 5) comienza con la entrada del microorganismo al 
cuerpo y activar la respuesta inmune innata, las primeras células que 
intervienen son los macrófagos y las células detríticas que contienen 
receptores de reconocimiento a patógenos (PRR) que se unen a moléculas 
conservadas en bacterias denominados patrones moleculares asociados a 
patógenos (PAMP). Una vez que los macrófagos han reconocido algún PAMP, 
proceden a fagocitarlo. 
La fagocitosis tiene diferentes variantes pero la que más se ha observado en 
las infecciones con M. tuberculosis es la fagocitosis convencional que consiste 
en que la membrana celular del macrófago o célula detrítica, en este caso, se 
torna en forma de dos dedos simétricos o pseudópodos que rodean el 
organismo, resultando en una vacuola llamada fagosoma o endosoma. La 
mayoría de los fagosomas se fusionan con los lisosomas dando lugar a un 
fagoliosoma. 
La fusión fagolisosomal se regula por la interacción de moléculas Rab 7 y 
proteínas lisosomales, este proceso es importante no sólo para matar, sino 
también para la eliminación de los organismos muertos y la generación de 
fragmentos proteolíticos del patógeno para el reconocimiento de las células T. 
Sin embargo, MTB evita la acidificación y previene la fusión fagolisosomal, 
debido a que las micobacterias tienen un factor que desactiva a Rab7. 
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18 
 
Figura 5. Esquema representativo de la respuesta inmune innata en presencia de 
micobacterias. 
Inmunidad adaptativa: Interacciones de Mycobacterium tuberculosis en 
el granuloma 
El principal mecanismo utilizado por el hospedero para el control del 
crecimiento de M. tuberculosis durante la infección persistente, y el límite del 
crecimiento bacilar y difusión a los sitios adicionales de infección, es la 
formación de granulomas. Los granulomas son agregados organizados de las 
células inmunes que rodean a los focos de tejidos infectados16. Los granulomas 
recién formados están integrados por fagocitos mononucleares inmaduros 
rodeados por las células efectoras linfocítica incluyendo células T; CD4 + y 
CD8 +. 
El modelo común de un granuloma tuberculoso humano describe un área de 
necrosis central, que proporciona la fuente nutricional para micobacterias 
persistentes, rodeado por un muro denso de leucocitos para la prevención de la 
propagación de micobacterias. La infiltración de leucocitos también contribuye 
al deterioro masivo de los tejidos afectados. Cuanto más se agranda el 
granuloma, la necrosis se expande a expensas de las capas de células que lo 
rodean21. 
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19 
Dentro de los granulomas, es generalmente como se cree que M. tuberculosis 
debe adaptarse a un gran ambiente dinámico. En primer lugar, a gran parte de 
los alrededores tejido calcificado o necrótico. En segundo lugar, el interior del 
granuloma se piensa que es carente o contienen bajos niveles de oxígeno. En 
tercer lugar, se cree que los granulomas contienen altas concentraciones de 
dióxido de carbono, y poseen mayores niveles de ácidos orgánicos alifáticos y 
enzimas hidrolíticas. Por último, la activación de los macrófagos y de otras 
células efectoras inmunes que rodean el granuloma liberando numerosos 
compuestos antimicrobianos16 (figura 6). 
 
Figura 6. Esquema en donde se muestran las estructuras que forman los granulomas y la 
respuesta inmune. Macrófagos (Mo), células epiteloides (E), en el centro del granuloma se 
encuentran las micobacterias, entonces se activan las células epiteloides para presentar 
antígenos a las células T y producir una variedad de citocionas y quimiocinas, o para matar 
las células infectadas y micobacterias intracelulares. Las quimiocinas reclutan células 
adicionales de la circulación sanguínea al sitio de infección primaria. IFN-γ activa los 
macrófagos y otras células presentadoras de antígenos para matar las bacterias intracelulares 
a través de intermediarios reactivos del oxígeno (ROI) o intermediarios reactivos del nitrógeno 
(RNI). Células T CD4 + y Mo producen TNF-α y la linfotoxina-α 3 (LTα 3), que se requiere para 
la formación de la pared que rodea el granuloma. En el centro del granuloma, el bajo nivel de 
oxígeno forma un ambiente hostil para micobacterias. Las células T CD8 + liberan granulisina 
y perforina a causa de la detecciónde antígenos extraños a través del TCR. Tomado de 
Ulrichs Timo y Kaufamann Stefan (2006)20. 
 
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20 
Reactivación de Mycobacterium tuberculosis 
Los mecanismos de los que se vale M. tuberculosis para entrar en latencia se 
desarrollan después de la respuesta inmune adaptativa, esto es cuando la 
concentración de oxigeno disuelto disminuye hasta el 1% presentándose una 
interrupción abrupta en la síntesis de ADN y de ARN. También los bacilos 
reducen la síntesis de proteínas, se vuelven resistentes a varios fármacos 
incluyendo isoniacida y rifampicina, e inducen la expresión de numerosos 
productos de genes que (i) permiten la utilización de fuentes alternas de 
energía (como el ciclo del citrato para permitir el metabolismo de los lípidos 
abundantes en el centro necrótico de granulomas), (ii) estabilizan y protegen 
productos celulares esenciales y (iii) el sitio iniciador que regula los genes 
mediadores de la respuesta de adaptación16. 
Cuando las micobacterias encuentran un ambiente propicio para su desarrollo, 
es decir, que el sujeto infectado está inmunosuprimido, entonces se dará la 
reactivación de las micobacterias, se reproducirán nuevamente y se 
diseminarán. 
Gen P2X7 
El gen P2X7 pertenece a la familia de genes P2XR, que está conformada por 
siete miembros (P2X1-7). Este gen ha sido encontrado en mamíferos y en 
ovíparos, pero no en invertebrados22. 
El gen P2X7 tiene un tamaño de 53 kb con 13 exones y ha sido asignado a la 
región cromosómica 12q2423, que codifica para un polipéptido de 595 
aminoácidos de largo, (receptor P2X7), este receptor se expresa en la 
membrana celular y se activa principalmente por adenosin -5’-trifosfato (ATP) 
29, en diversos tipos de células desde las neuronas, macrófagos, células 
dendríticas, los fibroblastos, linfocitos y células endoteliales24. 
Los polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) son variaciones de una 
secuencia de ADN que ocurren cuando un solo nucleótido en la secuencia es 
diferente de la normal en al menos 1% de la de la población. Cuando los SNPs 
ocurren dentro de un gen, crean diferentes variantes, o alelos, del gen25. El 
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21 
gen P2X7 es altamente polimórfico y hay 32 variantes, dependiendo del 
aminoácido alterado. 
Receptor P2X7 
El receptor P2X7 pertenece a la familia de receptores P2X (P2XR) 
dependientes de ATP (la activación del P2X7 requiere una 
concentración casi milimolar de ATP26), que funciona como canales 
permeables y no selectivos a iones como al Na+, K+ y Ca2+. Las respuestas 
en los tejidos se basa en su capacidad de actuar directamente sobre los 
conductos para la entrada de Ca2+ o indirectamente como activadores de 
los canales de Ca2+ dependientes de voltaje25. 
Los receptores P2X son canales de triméricos compuestos por subunidades 
proteícas codificadas por siete genes diferentes P2XR (nombrados P2X1 hasta 
P2X7, según el orden de clonación) expresados en mamíferos y algunos 
vertebrados. 
Los receptores P2XR comparten una estructura similar que comprende dos 
segmentos transmembranales, un bucle extracelular que contiene 10 cisteínas 
esparcidas homogéneamente, residuos conservados de lisina y de glicina y 
tres sitios de N-glicosilación (Asn-X-Ser/Thr), y intracelularmente posee un 
grupo amino y un grupo carboxilo terminales seguido por un tramo largo (a 
partir de Phe188 a Val321) formando seis hojas antiparalelas β24, 25, ver figura 
7. 
Los dominios del amino y carboxilo-terminal de P2X7 (AA 352 Y 595) son de 
mayor tamaño que en otros miembros del subtipo P2X. El dominio C-terminal 
es crucial para la formación de poros P2X7, transducción y señalización, pues 
estudios sugieren que P2X7 puede funcionar como un sistema de señalización 
complejo al interactuar con diversas proteínas intracelulares. 
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22 
 
Figura 7. Esquema del receptor P2X7, se pueden observar los dominios intracelulares 
amino terminal y carboxiterminal. Tomado de Suran L. Fernando, et al. (2005)27. 
La región C-terminal también contiene sitios putativos para la interacción con 
lipopolisacáridos, dominios SH2 y de α-actina28. Se han encontrado 
similitudes entre la región de hojas β y el dominio catalitico de clase II de la 
sintetasa aminocil-tRNA sintetasas. Estas hojas β son parecidas a residuos que 
comprenden el sitio de unión a ATP, desde la sustitución de dos aminoácidos 
comprendidos en la región, Lys193 y Lys31129. 
Los receptores P2X7 mediados por cambios en las concentraciones 
intracelulares de potasio conducen a la activación de la caspasa-1 y la rápida 
maduración y la liberación de la citocina pro-inflamatoria IL-1β. El aumento de 
la concentración de IL-1β a su vez, provoca la inducción de óxido nítrico 
sintasa, enzima ciclooxigenasa-2 y el factor de necrosis tumoral (TNF-α). La 
activación de la caspasa-3 también ha sido relacionada con la activación del 
receptor P2X7 y su posible asociación con los mecanismos citotóxicos, 
incluyendo la formación de los poros. Los inhibidores de la caspasa 1 y 3 
bloquean eficazmente a la activación de P2X728. 
 
 
 
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23 
Agonistas del receptor P2X7 
Una exposición prolongada a agonistas conduce a la formación de grandes 
poros en la membrana de la célula. El 2, 3 - (benzoil-4-benzoil)-
ATP (BzATP) estimula al receptor P2X7 de manera más potente que el ATP, 
sin embargo no es un agonista selectivo para P2X7, sino también para otros 
receptores P2X. El ADP (adenosin difosfato) y AMP (adenosin monofosfato) 
son agonistas muy débiles en el receptor P2X7. Sin embargo, después de una 
breve exposición al ATP, la eficacia de ADP y AMP aumenta (aunque siguen 
siendo débiles en comparación con el ATP), esto ha hecho suponer que una 
breve estimulación inicial con ATP provoca un cambio más prolongado en el 
receptor, que posteriormente altera su capacidad para discriminar entre ATP, 
ADP y AMP22. 
Antagonistas de receptor P2X7 
Existen cinco tipos de bloqueadores (Figura 8), uno de ellos son los iones. El 
calcio, magnesio, zinc, cobre, y todos los protones inhiben la generación de 
ATP, disminuyendo la concentración de ATP al orden de micromoles, siendo 
insuficiente la concentración de ATP el receptor es bloqueado. El bloqueo del 
receptor es independiente del voltaje. El segundo tipo son los receptores 
similares a P2X7 como la surimina, PPADS y el inhibidor más potente es el 
azul brillante G, en concentraciones nanomolares. 
El tercer grupo contiene dos grandes cationes orgánicos calmidazolium (en 
concentración 10 nM), y KN-62. Calmidazolium bloquea también otros canales 
iónicos incluyendo los canales dependientes de nucleótidos cíclicos. 
Calmidazolium {1 - [bis (4-clorofenil) metil] -3 - [2 - (2,4-diclorofenil) -2 - (2,4-
dichlorophenylmethoxy)-etil]-1Himidazolium} tiene un núcleo imidazolinio 
cargado, rodeado por cuatro restos clorobencenos. KN-62 es una piperazina 
[4-[2-[(5-isoquinolinilsulfonil)] metilamino-3-oxo-3-(4-fenil-1-piperazinil) 
propiléster fenilol] utilizado como un inhibidor de calcio/calmodulina-
dependiente la proteína quinasa tipo II (CaM quinasa II). 
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24 
La cuarta clase de antagonistas P2X7 es el 17-β-estradiol, se ha reportado que 
bloquea las corrientes de BzATP. El último, antagonista es unanticuerpo 
monoclonal22. 
 
Figura 8. Estructura molecular de los antagonistas del receptor P2X7. Tomado de North R. Alan 
(2002)22. 
Permeabilidad de la membrana plasmática a través del receptor P2X7. 
La permeabilidad de este receptor se ha estudiado mediante el uso de 
colorantes como el etidio y YO-PRO-1, debido a sus propiedades fluorescentes 
además que se intercalan en los ácidos nucleicos, dando así una medida 
directa de su entrada en las células22. 
El ATP es el ligando para P2X7 receptor ionotrópico24, después de la 
activación del receptor se abre un canal catiónico de manera reversible que 
permite el influjo de Na+, Ca2+ y eflujo de K+, provocando la inducción de la 
apoptosis y la liberación de interleucina madura (IL)-1β, respectivamente. La 
estimulación sostenida con dosis mayores de ATP o la estimulación repetida 
con pulsos secuenciales de ATP, induce la formación de un poro permeable a 
grandes moléculas de peso molecular (100-457 Da), como N-metil-D-glutamina 
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25 
(NMDG). Genera en linfocitos B y T un poro con un tamaño molecular de poco 
más de 300 Da24 (Figura 9). 
 
Figura 9. Apertura de canales a través del receptor P2X7 dependiente de ATP; A: La unión de 
P2X7 con ATP, provoca la apertura del canal por unos milisegundos, lo que provoca un cambio 
conformacional en el canal al paso de iones pequeños; B: primero se abre el canal para iones 
pequeños, después de una exposición prolongada de ATP, el receptor activado puede unirse a 
otra proteína (aún no identificada) que provoque la apertura de canales que permitan el paso 
de cationes más grandes e inclusive de tintes fluorescentes22. 
Muerte celular y el receptor P2X7 
La estimulación de P2X7 puede conducir a la apoptosis o necrosis de 
macrófagos infectados y células epiteliales a través de un proceso que requiere 
activación por la fosfolipasa D (PLD), dando lugar a la fusión de lisosomas y 
vacuolas, y la acidificación de las vacuolas, así como la producción de especies 
reactivas de oxígeno (ROS). La inhibición de la señalización P2X7 parece ser 
crítico para propagación de algunas infecciones, ya que la muerte celular 
mediada por P2X7 tiene un mayor impacto en el desarrollo de patógenos 
intracelulares que la muerte de la célula huésped inducida a través de otros 
receptores de superficie25(figura 10). 
 
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26 
 
Figura 10. Esquema que ilustra la intervención del receptor P2X7 activado por ATP; 1) En el 
desarrollo de apoptosis medida por la fosfolipasa D y por las sustancia reactivas de oxígeno 
(ROS) que desencadenan en la fagocitosis de las micobacterias, 2) por otro lado al haber 
ATPasas el proceso de apoptosis por P2X7 se interrumpe lo cual desencadena la diseminación 
de la micobaceria24. 
Polimorfismo 1513A/C 
En el polimorfismo del gen P2X7, 1513A/C, el residuo 496 (Glu496 a Ala) 
cambia de ácido glutámico a alanina, debido a un cambio de nucleótidos de 
una adenina a citosina30, en una zona conservada del carboxilo terminal del 
gen. Este polimorfismo presenta una frecuencia alélica de 14-18% en las 
poblaciones caucásicas23. 
Esta región está implicada en las interacciones proteína-proteína, que incluyen 
sitios de unión a lipopolisacáridos bacterianos, así como la unión a α-actina. 
Este polimorfismo es de origen natural, y la pérdida de su función causa la 
incapacidad para desencadenar la formación de poros e inducción de la 
apoptosis22. Diferentes estudios han demostrado que la homocigosis para el 
alelo C (C/C) lleva a la casi completa pérdida de la función P2X729 y alrededor 
del 50% de reducción en los individuos heterocigotos. En esta pérdida de 
función es probable que se bloquee la unión de ATP al dominio extracelular del 
receptor24. 
Polimorfismo -762 T/C 
Es un SNP en la región promotora del gen P2X7 en el nucleótido de la posición 
-762 (C/T) se ha descrito que tiene un asociación protectora contra 
tuberculosis29, en la población de Gambia se ha reportado que el genotipo CC 
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27 
está asociado a la disminución de la susceptibilidad a tuberculosis (P=0.027, 
OR= 0.545, IC del 95%= 0.318 – 0.934)31, en un reporte en población mestiza 
mexicana no se encontró asociación con la TB, y aunque aún no es clara la 
manera en que este polimorfismo confiere protección, se cree que tiene que 
ver en la regulación de expresión de este gen en diferentes poblaciones23. 
Planteamiento del problema 
Debido al desconocimiento de la etiología de la arteritis de Takayasu, y al 
avance silencioso de esta enfermedad que puede desencadenar 
complicaciones serias que llevan a la muerte, es necesario realizar estudios 
que relacionen y analicen las posibles causas del padecimiento, con el fin de 
tener datos más completos que contribuyan a la comprensión de la 
enfermedad. 
Por otro lado, se sospecha que la tuberculosis pueda estar implicada en la 
etiología de AT debido a la presencia de infección tuberculosa en los pacientes 
con arteritis de Takayasu. Un posible vínculo que explique la probable relación 
entre la tuberculosis y la arteritis de Takayasu es el gen P2X7, el cual codifica 
para un receptor llamado P2X7 que está involucrado en la regulación de 
diversas funciones tales como: la liberación de interleucinas proinflamatorias y 
la respuesta inmune a bacterias intracelulares, entre otras. Sin embargo este 
receptor puede sufrir pérdida de función al ser codificado por los 
polimorfismos 1513A/C y el polimorfismo -762T/C de la región promotora. 
Si el receptor P2X7 disminuye o pierde su función a causa de la variación 
genética de los polimorfismos antes mencionados, esto conllevaría a una 
mayor susceptibilidad a infecciones a través de Mycobacterium tuberculosis y 
esto aunado a otros factores puede estar condicionando, a la aparición de la 
arteritis de Takayasu. Por lo tanto, el conocer si existe asociación entre los 
polimorfismos antes mencionados con la presencia del gen IS6110 que está 
presente en Mycobacterium tuberculosis y la enfermedad de Takayasu, nos 
puede ayudar a conocer más de esta enfermedad, al aclarar si los 
polimorfismos genéticos del gen P2X7 están relacionados como un factor de 
riesgo o bien de protección a la enfermedad. 
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28 
OBJETIVOS 
Objetivo General: 
Estudiar la frecuencia de los polimorfismos 1315A/C y -762T/C, del gen P2X7 
en pacientes con arteritis de Takayasu con presencia de M. tuberculosis, 
compararlos con pacientes con tuberculosis y pacientes con aterosclerosis 
(grupo control), y analizar si existe asociación entre los polimorfismos con la 
arteritis de Takayasu y tuberculosis. 
Objetivos Específicos: 
 Determinar la frecuencia del polimorfismo del gen P2X7 en la región 
promotora (posición -762) en pacientes con arteritis de Takayasu, 
pacientes con tuberculosis y el grupo control (un grupo de sujetos con 
aterosclerosis). 
 Determinar la frecuencia del polimorfismo A1513C del gen P2X7 en 
individuos mexicanos con arteritis de Takayasu, tuberculosis y 
aterosclerosis. 
 Comparar las frecuencias alélicas y genotípicas de los polimorfismos 
estudiados de los pacientes con arteritis de Takayasu y los pacientes 
con tuberculosis con respecto al grupo control. 
 Analizar la presencia del gen IS6110 específico para M. tuberculosis en 
todos los grupos de estudio. 
 Determinar la susceptibilidad de riesgo/protección de los polimorfismosestudiados del gen P2X7 con la arteritis de Takayasu y TB en una 
muestra de la población mexicana. 
Hipótesis 
Las frecuencias de los polimorfismos serán diferentes en los grupos de arteritis 
de Takayasu y tuberculosis con respecto al grupo de aterosclerosis. Con base 
a las frecuencias genotípicas de estos polimorfismos, se pudiera hacer una 
asociación de cierto genotipo como un factor de susceptibilidad o de protección 
a padecer estas enfermedades en nuestra población de estudio. 
 
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29 
DISEÑO EXPERIMENTAL 
Descripción. 
Se realizó un estudio retrospectivo de tipo genético, transversal a 
conveniencia por casos y controles, con un muestreo no probabilístico de casos 
consecutivos. Se buscaron y confrontaron hallazgos de expedientes obtenidos 
del departamento de patología con expedientes clínicos para elegir casos y 
controles. (Revisado por la Dra. Ma. Elena Soto López reumatóloga experta del 
Instituto Nacional de Cardiología). 
Definición de la población 
Nuestra población de estudio constó de pacientes mexicanos diagnosticados 
con arteritis de Takayasu (AT) por el servicio de Reumatología del Instituto 
Nacional de Cardiología “Dr. Ignacio Chávez”. La clasificación clínica fue 
definida de acuerdo al Colegio Americano de Reumatología (ACR; del inglés 
American College of reumatology), en cinco subgrupos de acuerdo a la 
localización del daño. 
Además la población se integró con muestras de individuos mexicanos con 
tuberculosis, estos fueron confirmados por el diagnostico de la autopsia, el 
expediente clínico con la historia clínica de la enfermedad tuberculosa, tiempo 
de evolución del padecimiento y lugar donde fue tratado, cultivos (baciloscopia) 
y biopsia según el caso de confirmación de tuberculosis, además de la 
sintomatología y hallazgo del daño cardiovascular por el cual llego a este 
Instituto especializado. 
Para el grupo control se estudiaron individuos mexicanos diagnosticados con 
aterosclerosis. En los pacientes con aterosclerosis se tomó en cuenta el reporte 
consignado por el patólogo de aterosclerosis con fibrosis en pared arterial, en 
la capa íntima y media y se analizaron los datos clínicos, historia clínica, tipo de 
estudios solicitados durante su estancia, hallazgos cardiovasculares, tiempo 
de evolución con el padecimiento y co-morbilidades. 
 
 
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30 
Tamaño de la muestra 
Un total de 30 pacientes con Tb, 33 pacientes arteritis de Takayasu y el grupo 
control integrado por 69 pacientes con aterosclerosis. 
Metodología 
Selección de las muestras de aorta. Se buscaron reportes de casos con AT, TB 
y aterosclerosis en el archivo de Patología con la descripción clínica y 
patológica completa. En aquellos casos que se contaba con tejidos de aorta 
conservados en parafina, fueron presentados a dos patólogos expertos, 
quienes evaluaron las condiciones del tejido, tipo de procesamiento y 
almacenamiento. 
En los casos con AT se buscaron los criterios clínicos con los que se llegó al 
diagnóstico clínico y reporte de angiografía. Se definió el tipo de arteritis 
Takayasu de acuerdo a la Clasificación de Hata et al (1997)32. 
Criterios de Inclusión: 
Aquellos casos de AT que cumplieran más de 4 criterios de acuerdo a ACR y la 
confirmación por estudio de imagen; además que los bloques de tejido aórtico 
hubieran sido procesados con la misma técnica, que el material fuera de 
suficiente y de pureza adecuada. 
Se eliminaron aquellos en los que no se logró obtener suficiente material para 
el procesamiento y extracción de ADN y cuando no se encontraron los 
expedientes clínicos para evaluar en forma similar para cada grupo. 
Extracción de ADN 
La extracción del ADN de tejidos embebidos en parafina de los grupos con AT, 
TB y aterosclerosis, se obtuvo utilizando un kit comercial (Illustra Nucleón 
Genomic, GE Healthcare) según las indicaciones del fabricante. Brevemente, 
se utilizó 20-30 micras de tejido en parafina contenidos en un tubo de 1.5 ml, se 
cubrió con xileno para desparafinar el tejido, se incubó 2 minutos. Se centrifugó 
y se removió el xileno. El tejido se re-hidrató con lavados con etanol al 100%, al 
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31 
75%, al 50% y por último al 25%. Posteriormente se agregó proteinasa K y se 
realizó la extracción del ADN con la resina Nucleón. (Anexo 1) 
El ADN se cuantificó en un espectrofotómetro a 260nm y se realizó el ajuste 
para concentrar el ADN a 200ng/µL y a 10ng/µL, (anexo 2). El ADN obtenido se 
almaceno a -70°C hasta su utilización. 
Determinación genotípica. 
La presencia de Mycobacterium tuberculosis en las muestras se confirmó a 
través de la secuencia de inserción IS6110 específica para identificar a M. 
tuberculosis y a M. bovis, esta secuencia tiene una gran sensibilidad en PCR33, 
su presencia y número de copias varía entre cepas de M. tuberculosis y M. 
bovis, este fragmento se encuentra en mayor frecuencia y se repite más veces 
en M. tuberculosis34, 35 (figura 11). 
 
Figura 11. Amplificación del gen IS6110 de M. tuberculosis en gel de acrilamida al 10% teñido 
en nitrato de plata. Carril 1: marcador de peso molecular. Carril 2: amplificado para el gen de 
inserción IS6110 (123 pb). Carril: 3 y 4 DNA de M. tuberculosis tomado de una línea celular 
H3Rv (control positivo). 
Mediante la amplificación de esta secuencia, utilizando los siguientes 
cebadores: IS6110 Forward (5’-CCTGCG AGC GTA GGC, GTC GG-3’) y 
IS6110 Reverse (5´-CTC GTC CAG CGC TTC GG-3’) de acuerdo a Negi et al, 
200736, se utilizó un marcador de peso molecular de 132pb. 
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32 
El control positivo se obtuvo de cadenas extraídas de líneas celulares de 
Mycobacterium tuberculosis HRv37, provenientes del Departamento de biología 
celular del Instituto Nacional de Cardiología. 
El sitio polimórfico de la región promotora (posición -762) se determinó por 
medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, del inglés Polimerase 
Chain Reaction) mediante una variante, alelo específico o PCR anidada. Los 
reactivos para la amplificación por PCR se pueden ver en el (anexo 3). Las 
condiciones: las temperaturas y el número de ciclos son iguales para las dos 
PCR de las que consta este ensayo, los primers o iniciadores para cada una de 
las PCR se muestran en la figura 12. 
 
 
 
Fig. 12 Condiciones específicas para PCR anidada para la determinación del polimorfismo 
genético -762. 
La amplificación del producto respectivo de la PCR anidada se determinó 
mediante electroforesis en gel de poliacrilamida o PAGE (del inglés Poli-
Acrilamide Gel Electroforesis) al 8%, la preparación del gel y las condiciones 
de corrida del gel se muestra en el (anexo 4), que fue revelado por tinción de 
plata, ver Anexo 5, dando como resultado bandas de 184 pb que corresponde 
al alelo T (alelo silvestre) y una banda de 102 pb correspondiente al alelo C 
(alelo mutante) (fig. 13). 
 
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33 
 
 
Figura 13. Gel de acrilamida al 10%, teñido en nitrato de plata. Se observan las bandas para el 
gen -762. Carril 1, 7 y 9 (TT), carril 2 (marcador de peso molecular X174RF DNA/Hae III), carril 
3,4, 6 (TC), carril 8 (CC). 
Para la amplificación del polimorfismo A1315C se realizó mediante el ensayo 
de genotipificación Taqman 5´exonucleasa en un sistema de PCR en tiemporeal, de acuerdo a las instrucciones del fabricante (Applied Biosystems, Foster 
City, USA). Cada SNP (alelo y genotipo) fue definido manual y 
automáticamente con el programa de discriminación alélica (7300 System SDS 
Software® by Applied Biosystems). 
 
 
 
Figura 14. Discriminación alélica con la técnica de PCR en tiempo real. 
Alelo B 
Alelo A Heterocigoto 
 1 2 3 4 5 6 7 8 9 
PB 
281
234
194 
118 
72 
PB 
285 
184 
102 
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34 
Análisis Estadístico. 
Las frecuencias tanto alélicas como genotípicas de los polimorfismos -762 y 
A1315C del gen P2X7 se obtuvieron por conteo directo. La significancia de las 
diferencias entre los grupos fueron determinados usando Mantel-Haenzel chi-
squared analysis, combinado con tablas de contingencia de 2 x 2 usando 
EPISTAT software de estadística (Versión 5.0; USD incorporado en 1990, 
Stone Mountain Georgia). Prueba de Fisher se utilizó, si las cantidades en 
cualquier celda de la tabla de contingencia fue menor que cinco. El riesgo 
relativo con intervalos de confianza (IC) del 95% se calculó como el cociente de 
probabilidad. La significancia estadística fue aceptada con un valor de alfa de 
≤ 0,05. 
 
RESULTADOS: 
De un total de 57560 autopsias revisadas (la figura 14, representa la muestra 
de autopsia), se detectaron 181 casos que cumplieron los criterios de inclusión; 
de estos, 2 fueron eliminados debido a que las muestras no fueron preservadas 
adecuadamente, en 13 casos el tejido aórtico no fue suficiente para la 
obtención de ADN, en 24 no había información clínica y/o de laboratorio 
disponible, 10 más presentaron múltiples co-morbilidades y 6 habían 
presentado enfermedad tuberculosa antes de su admisión hospitalaria. 
El tamaño de muestra final fue de 132 tejidos de aorta, esta muestra se dividió 
en dos grupos de estudio y un grupo control interno. Treinta muestras 
correspondieron a tuberculosis (TB), 33 de arteritis de Takayasu (AT) de 
acuerdo a los criterios de ACR y 69 a aterosclerosis (At) que pertenecen al 
grupo control interno (tabla 4). El control interno se realizó con el fin de tener 
un grupo que representara las condiciones del manejo de la muestra. 
 
 
 
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35 
 
 
 
 
Tabla 4. Pacientes estudiados divididos por enfermedad. 
 
La edad al momento del diagnóstico para las enfermedades Tb, AT y At fueron 
22 ± 13, 22 ± 13 y 57 ± 10 (P= 0.0001), respectivamente; el nivel 
socioeconómico fue similar entre los pacientes con AT y Tb, mientras que el 
grupo de aterosclerosis tuvo una tendencia de media a alta aunque sin 
diferencias significativas entre los grupos. 
 
Figura 14. Representan la muestra de autopsia constituida por el corazón, la aorta y los 
riñones. El prolapso de la válvula aórtica, el engrosamiento y la irregularidad de la aorta en 
sus diversos segmentos, con una notable constricción de las arterias renales. El lado 
derecho muestra un primer plano de la aorta y de las arterias renales, con 
engrosamiento evidente de sus paredes. 
 N % 
Control Aterosclerosis 69 52.3 
Tuberculosis 30 22.7 
Arteritis de Takayasu 33 25 
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36 
El dañó histológico de los tejidos fue analizado por un especialista en 
patología experta en morfometría, quien evaluó la presencia de fibrosis y de 
infiltrado inflamatorio (ver tabla 5). 
 
Localización aortica n Takayasu Tuberculosis Aterosclerosis P 
Sin lesion aortica (%) 9 9 (30) NS 
Aorta ascendente (%) 9 5 (15.1) 0 (0) 4 (5.8) NS 
Aorta descendente (%) 7 0 (0) 2 (6.6) 5 (7.2) NS 
 Aorta abdominal (%) 51 7 (21.2) 9 (30) 35 (50.7) 0.001 
En toda la trayectoria 
aortica (%) 
56 21 (63.6) 10 (33.3) 25 (36.3) 0.001 
Total 132 33 30 69 NS 
Capa aortica dañada n 
Intima n (%) 81 9 (27) 13(43.3) 59 (85.5) 0.001 
Media n (%) 8 2 (6) 1 (3.3) 5 (7.2) NS 
Adventicia n (%) 22 17 (52) 2 (6.6) 3 (4.3) 0.001 
Todas las capas n (%) 9 5 (15) 2 (6.6) 2 (2.9) 0.024 
Ninguna n (%) 12 0 12 (40) 0 NS 
Tabla 5. Sitios de localización de daño en aorta. 
Se analizaron un total de 59 mujeres y 73 hombres de los cuales para el grupo 
de tuberculosis fueron 10 mujeres y 20 hombres, para el grupo de Takayasu, 
fueron 16 mujeres y 17 hombres y para el grupo de aterosclerosis fueron 33 
mujeres y 36 hombres. (Gráfica 1) 
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37 
Gráfica 1. Pacientes divididos por género y enfermedad (%). 
De acuerdo a la clasificación de Hata et al,(tabla 2) los pacientes con arteritis 
de Takayasu, el 75 % fueron del tipo V, de los cuales, el 33% presentaron 
involucramiento en las arterias coronarias y pulmonar, el 21% con 
características combinadas con el grupo IIb y IV (una persona con este tipo de 
AT falleció por tuberculosis), 12% con el tipo V comprometiendo únicamente 
la arteria coronaria, y el 9 % con el tipo V con arteria pulmonar involucrada; 
mientras que el 6% con el tipo IV involucrando a las arterias coronaria y 
pulmonar, el 6% tipo IV con arteria coronaria involucrada, el 6% con tipo IIa con 
daño en arteria pulmonar y coronaria, el 3%con el tipo II b con ambas arterias 
involucradas y el restante 3% con tipo I involucrando a la arteria coronaria. 
De los casos estudiados con tuberculosis, el sitio de infección más frecuente 
fue en el pulmón con 78.8%, el sitio más afectado en la tuberculosis 
extrapulmonar fue el riñón con un 9% de incidencia. 
Al hacer una revisión de los 3 grupos de estudio en relación al tipo de 
tuberculosis reportada se encontró que en el grupo de tuberculosis predominó 
el tipo de Tb pulmonar (53.3%) (P= 0.0001). Para el grupo de Takayasu el 
42% no presentó tuberculosis, mientras que el resto predominó la Tb 
extrapulmonar (P= 0.003). Finalmente, para el grupo de aterosclerosis, el 
86.9% no presentó ningún tipo de tuberculosis y el 13.04% de las muestras 
tuvo enfermedad tuberculosa. (Ver tabla 6 y gráfica 2) 
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
TUBERCULOSIS TAKAYASU ATEROSCLEROSIS
FEMENINO
MASCULINO
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38 
 TUBERCULOSIS TAKAYASU ATEROSCLEROSIS 
 N % N % N % 
NINGUNO 0 0.0 14 42.4 60 86.9 
PULMONAR 16 53.3* 5 15.1 3 4.3 
EXTRAPULMONAR 9 30.0 12 36.3** 6 8.7 
AMBAS 2 6.7 2 6.1 0 0.0 
MILIAR 3 10.00 0 0 0 0.0 
Total 30 100.00 33 100 69 100 
Tabla 6. Relación entre el tipo de tuberculosis identificada y el grupo de pacientes de estudio. * 
P= 0.0001 vs. Tipo de lesión del mismo grupo. ** P= 0.003 vs. Tipo de lesión del mismo grupo. 
Gráfica 2. Pacientes divididos por enfermedad de acuerdo a la ubicación de la tuberculosis. 
Se realizó la comparación entre genotipos en cada grupo de estudio para los 
SNP's del gen P2X7, (ver Tabla 7) obteniéndose resultados estadísticamente 
significativos. 
El grupo de tuberculosis para el SNP 1513A/C el genotipo AA representó el 
66.60%, con una diferencia significativa con respecto al genotipo AC con 33.3% 
0.00
10.00
20.00
30.00
40.00
50.00
60.00
70.00
80.00
90.00
TUBERCULOSIS
TAKAYASU
ATEROSCLEROSIS
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39 
y 0% en CC (P= 0.020, OR= 4.0, IC al 95%= 1.36-11.55).En este grupo no se 
encontraron datos significativos en el análisis del polimorfismo -762. 
En el grupo de Takayasu la frecuencia del genotipo1513 AA fue de 63.64%, 
con una diferencia significativa con respecto a 1513 AC con porcentaje de 
30.3% (pC= 0.013, OR: 4.02, IC del 95%: 1.45-11.1) y también hubo 
significancia con respecto a genotipo CC (6%). En el mismo grupo, pero del 
polimorfismo -762 el alelo TT (76.6%) tuvo una diferencia estadísticamente 
significativa al comparar vs. TC (26.6%) y con CC (6.6%), (TT vs TC; pC= 
0.0006, OR= 7.18, IC del 95%= 2.41-21.31). 
En el grupo control (aterosclerosis) la comparación entre los genotipos AA 
(53.6%) contra AC (30.4%) y CC (15.9%) del SNP 1513, fue significativa ( AA 
vs AC; pC=0.043, OR=2.2, 95% CI= 1.08-4.47). En el mismo grupo el 
comportamiento del polimorfismo -762, dio significancia a la evaluación de TT 
vs TC (pC=0.0003, OR: 7.36, IC del 95%: 1.8-7.16), el genotipo TT tuvo una 
frecuencia de 63.7%. 
 
POLIMORFISMO A 1 5 1 3 C 
 Tuberculosis Takayasu Aterosclerosis 
 N % N % N % 
AA 20 66.66* 21 63.64* 37 53.62* 
AC 10 33.33 10 30.30 21 30.43 
CC 0 0 2 6.06 10 15.94 
A 50 83.30 52 78.70 95 68.80 
C 10 16.60 14 21.30 43 31.10 
 
POLIMORFISMO -762 
TT 17 56.67+ 23 76.6+ 44 63.37+ 
TC 11 36.66 8 26.6 22 31.88 
CC 2 6.67 2 6.6 3 4.35 
T 45 75 54 81.80 110 79.70 
C 15 25 12 18.20 28 20.21 
Tabla 7. Frecuencias alelicas y genotípicas para los polimorfismos A1513C y -762 de las 
muestras de estudio, *P<0.05 = AA vs AC y CC; + P<0.05 = TT vs TC y CC. 
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40 
Considerando sólo las muestras que dieron positiva a la secuencia IS6110 
específica para M. tuberculosis, el número de individuos con presencia de 
Mycobacterium tuberculosis para cada grupo fue: tuberculosis 23 (76.6%), 
Takayasu 21 (63.6%) y aterosclerosis 17 (24.6%). Posteriormente, se calculó 
las frecuencias para ambos polimorfismos divididos de acuerdo a la presencia 
o no del gen de inserción IS6110, en los tres grupos de estudio (tabla 8). 
Los siguientes análisis se realizaron utilizando sólo las frecuencias de las 
muestras positivas a IS6110. A) Se evaluaron las frecuencias genotípicas en 
cada grupo en ambos polimorfismos. Los resultados para el polimorfismo 
1513A/C fueron: de la comparación de genotipos AA vs CC del grupo de 
aterosclerosis (P= 0.045, OR= 4.17, IC del 95%=1.10-14.55), para el mismo 
polimorfismo pero en el grupo de tuberculosis los genotipos de AA vs AC 
mostraron significancia (pC= 0.033, OR= 3.75, IC del 95%= 1.22-11.39). Para 
el polimorfismo -762 en este mismo análisis, no hubo datos estadísticamente 
significativos. 
B) Se compararon las frecuencias entre los grupos de estudio en relación al 
grupo control. En el polimorfismo 1513A/C se encontró una diferencia 
significativa entre el genotipo AA del grupo de Takayasu (33.3%) vs el grupo 
control (15.9%) (P= 0.004) y del genotipo AA del grupo de Tuberculosis 
(53.3%) con respecto al grupo de aterosclerosis (P= 0.003). En el polimorfismo 
-762 el genotipo TT de Takayasu vs aterosclerosis tuvo una diferencia 
significativa (P= 0.004) así como el genotipo TT de tuberculosis contra el 
genotipo TT del grupo control (P= 0.0006). 
 
 
 
 
 
 
 
 
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41 
 IS6110 ATEROSCLEROSIS TAKAYASU TUBERCULOSIS 
POLIMORFISMO A1513C 
G
EN
O
TI
PO
 
 
AA 
POSITIVO n (%) 11 (15.9)δ 11(33.3) 16 (53.3)δ 
NEGATIVO n (%) 26 (37.7) 10(30.3) 4 (13.3) 
TOTAL 37 (53.6) 21 (63.6) 20 (66.6) 
 
AC 
POSITIVO n (%) 3 (4.3) 9 (27.3)* 7(23.3)* 
NEGATIVO n (%) 18 (26.1) 1 (3) 3 (10) 
TOTAL 21 (30.4) 10 (30.3) 10 (33.3) 
 
CC 
POSITIVO n (%) 3 (4.3) 1 (3.0) 0 
NEGATIVO n (%) 8 (11.6) 1 (3.0) 0 
TOTAL 11 (15.9) 2 (6.0) 0 
POLIMORFISMO -7 6 2 
G
EN
O
TI
PO
 
TC
 
 
TT 
POSITIVO n (%) 10 (14.5) 16(48.5)* 13 (43.3)* 
NEGATIVO n (%) 34 (49.2) 7 (21.2) 4 (13.3) 
TOTAL 44 (63.7) 23 (69.7) 17 (56.6) 
 
TC 
POSITIVO n (%) 6 (8.7) 5 (15.1) 9(30) 
NEGATIVO n (%) 16 (23.2) 3 (9.1) 2 (6.6) 
TOTAL 22 (31.9) 8 (24.4) 11 (36.6) 
 
CC 
POSITIVO n (%) 1 (1.4) 0 0 
NEGATIVO n (%) 2 (2.9) 2 (6.1) 2 (6.6) 
TOTAL 3 (4.3) 2 (6.1) 2 (6.6) 
 
Tabla 8: frecuencias de los SNP´s divididos en positivos y negativos a la frecuencia de 
identificación de M. tuberculosis. δP<0.05 vs AC y CC positivos para IS6110 y *P<0.05 vs 
aterosclerosis positivos a IS6110. 
 
Evaluación de la asociación entre polimorfismos de P2X7 y el tipo de la 
tuberculosis. 
Se analizaron las frecuencias genotípicas de los dos SNP´s del gen P2X7, de 
acuerdo a la localización o sitio de la tuberculosis. Debido al bajo número de 
sujetos homocigotos para 1513C y -762C, éstos se unieron a los sujetos 
heterocigotos para su análisis (tabla 9). En esta tabla observó una significancia 
para el polimorfismo 1513A/C al comparar el total del grupo de TB pulmonar 
con genotipo AA (29.3%) contra el total de TB pulmonar con genotipos AC+CC 
(12.1%) (pC = 0.05, OR = 2.6, IC del 95%= 1.05 a 6.59). 
 
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42 
 
Tipo de Tb 
Tuberculosis 
 n (%) 
Takayasu 
n (%) 
Aterosclerosis 
(control) n (%) 
Total 
n (%) 
PO
LI
M
O
RF
IS
M
O
 A
 1
51
3C
 
G
en
ot
ip
o 
A
A
 Tb pulmonar 11 (36.6) 4 (21.0) 2 (22.2) 17 (29.3)* 
Tb Extrapulmonar 5 (16.6) 5 (26.3) 3 (33.3) 13 (22.4) 
Ambas 1 (3.3) 1 (5.3) 0 (0) 2 (3.4) 
Miliar 3 (10) 0 (0) 0 (0) 3 (5.2) 
G
en
ot
ip
oA
C
+C
C
 Tb pulmonar 5 (16.6) 1 (5.3) 1 (11.1) 7 (12.1) 
Tb Extrapulmonar 4 (13.3) 7 (36.8) 3 (33.3) 14 (24.1) 
Ambas 1 (3.3) 1 (5.3) 0 (0) 2 (3.4) 
Miliar 
0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 
TOTAL 30 (100) 19 (100) 9 (100) 58 (100) 
PO
LI
M
O
RF
IS
M
O
 -7
62
 
G
en
ot
ip
o 
TT
 
Tb pulmonar 9 (30) 5 (26.3) 2 (22.2) 16 (27.6) 
Tb Extrapulmonar 4 (13.3) 7 (36.8) 3 (33.3) 14 (24.1) 
Ambas 2 (6.6) 2 (10.5) 0 (0) 4 (6.9) 
Miliar 2 (6.6) 0 (0) 0 (0) 2 (3.4) 
G
en
ot
ip
oT
C
+ 
C
C
 Tb pulmonar 7 (23.3) 0 (0) 1 (11.1) 8 (13.8) 
Tb Extrapulmonar 5 (16.6) 5 (26.3) 3 (33.3) 13 (22.4) 
Ambas 0 (0) 0 (0) 0 (0) 0 (0) 
Miliar 1 (3.3) 
 
0 (0) 
 
0 (0) 
 
1 (1.7) 
 
TOTAL 30 19 9 58 
Tabla 9: frecuencias de los polimorfismos del gen P27 positivos para la secuencia de inserción, 
según el tipo de tuberculosis diagnosticada. *pC= 0.05 Vs AC+CC Tb pulmonar. 
 
Además se encontraron diferencias aunque sin significancia estadística como: 
en el SNP 1513 del grupo de Takayasu, con genotipo AA (26.3%) tuvo menor 
frecuencia que los genotipos AC+CC (36.8%) para tuberculosis extrapulmonar. 
Mientras que el polimorfismo -762, en el total de TB pulmonar genotipo TT 
(27,6%) fue más frecuente con respecto a los genotipos CT + CC (13,8%) del 
mismo tipo de tuberculosis. Por último de manera general para ambos SNP´s 
el grupo de tuberculosis tuvo las frecuencias más altas en TB pulmonar, en 
tanto el grupo de Takayasu encontró los porcentajes elevados en TB 
extrapulmonar, este comportamiento también lo presentó el grupo control 
(aterosclerosis). 
 
También se investigó las frecuencias de estos polimorfismos en diversas 
poblaciones para sujetos con tuberculosis (tabla 10), así como para los grupos 
control (tabla 11), en la revisión bibliográfica que se hizo todos los grupos 
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control son individuos sanos a diferencia con este trabajo en donde el grupo 
control son muestras con aterosclerosis; esta búsqueda se realizó con el fin de 
comparar la carga genética en distintas