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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA CARRERA DE BIOLOGÍA Efecto de Rhizophagus intraradices y la composta vegetal, en la producción de Albahaca (Ocimun basilicum L.), bajo condiciones de invernadero, en Texcoco Estado de México. TESIS QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE BIÓLOGO PRESENTA: NATHALIE MONTIEL AYALA DIRECTOR DE TESIS: Biól. Elvia García Santos ASESORA: M. en C. Patricia Rivera García Mexico D.F Octubre 2014 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. AGRADECIMIENTOS Al pueblo de México, quién a través de la Universidad Nacional Autónoma de México y la Facultad de Estudios Superiores Zaragoza, me han brindado la oportunidad de formarme profesionalmente y pertenecer a una gran institución. A la M. en C. María de Jesús Sánchez Colín†, por compartir sus conocimientos conmigo y confiar en éste trabajo. A la M. en C. Patrícia Rivera García y a la Biól. Elvia García Santos, por la dirección y paciencia a lo largo del presente trabajo, así como por su confianza y amistad. Al M. en C. Ramiro Ríos Gómez, a la Dra. Esther Matiana García Amador y a la M en C. Bárbara Susana Luna Rosales, por sus observaciones y sugerencias en la revisión de ésta tesis. A mis tíos Germán y Noé por las facilidades en la colecta y traslado del suelo. Al profesor Armando Cervantes Sandoval, por el apoyo y la confianza brindados para la culminación de éste trabajo. Al coach Miguel Victoria por todo su apoyo y amistad durante éste tiempo en la FES. A los compañeros de la carrera de biología, del equipo de atletismo y del laboratorio de biología de suelos, por su apoyo y todos los momentos compartidos. ¡Muchas gracias a todos! II Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM DEDICATORIA A mis papás Andrea Ayala Paúl† y Antonio Montiel Ramírez por todo el apoyo, carino y confianza brindados, por enseñarme a salir adelante independientemente de los obstáculos. A mi abue María Ramírez López, por ser un gran ejemplo en mi vida, por todo su apoyo y por ser como una segunda madre. A mi hermana Mireya, por apoyarme siempre, y por que ahora se que no habrá tiempo ni distancia que nos separe. A mis lindos sobrinos Gerardo y David, por ser una motivación más en la familia, y por todo el cariño. A familiares que siempre nos han apoyado y están con nosotros en momentos dificiles y también en momentos lindos. A mis amigos por ser parte de mi familia, por todo su apoyo y por enseñarme el verdadero sentido de la palabra amistad. III Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Índice Índice de gráficas .................................................................................................................... VI Índice de cuadros .................................................................................................................. VII Resúmen .................................................................................................................................. 1 INTRODUCCIÓN ........................................................................................................................ 2 Capítulo I. Aspectos generales del suelo ................................................................................... 5 1.1 ¿Que es el suelo? ........................................................................................................................ 5 1.2 Propiedades físicas, químicas y biológicas del suelo ............................................................... 5 1.3 Relación suelo- planta ................................................................................................................. 9 1.3.1 Utilización de sustratos ........................................................................................................... 9 1.3.2 Plantas medicinales .............................................................................................................. 10 1.3.3 Importancia de las plantas medicinales .................................................................................. 10 1.3.4 Ocimun basilicum L. .............................................................................................................. 11 1.3.4.1 Descripción botánica y taxonómica .................................................................................. 11 1.3.4.2 Necesidades medio ambientales en Ocimun basilicum L . ................................................. 12 1.3.4.3 Uso e importancia económica .......................................................................................... 13 Capítulo II. Biofertilizantes ...................................................................................................... 15 2.1 Definición .................................................................................................................................. 15 2.2 Características de los biofertilizantes ......................................................................................... 15 2.3 Tipos de biofertilizantes ............................................................................................................ 16 2.4 Hongos Micorrízicos Arbusculares (HMA) .................................................................................. 17 2.4.1 Generalidades de los HMA. ................................................................................................... 19 2.4.2 Beneficios e importancia de los HMA .................................................................................... 20 2.5 Abonos orgánicos ...................................................................................................................... 21 2.5.1 Generalidades ...................................................................................................................... 21 2.5.2 Abonos orgánicos sólidos...................................................................................................... 22 2.5.2.1 Composta ........................................................................................................................ 22 2.5.2.2 Vermicomposta ............................................................................................................... 23 2.5.2.3 Composta tipo Bokashi ................................................................................................... 24 2.5.3 Abonos orgánicos líquidos .................................................................................................... 24 2.6 Ventajas y desventajas del uso de biofertilizantes ..................................................................... 25 OBJETIVOS ..........................................................................................................................28 IV Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Justificación ............................................................................................................................ 29 Hipótesis ................................................................................................................................ 30 Método .................................................................................................................................. 31 Discusión general ................................................................................................................... 48 CONCLUSIONES ...................................................................................................................... 51 Bibliografía ............................................................................................................................. 53 Webgrafía ............................................................................................................................... 60 V Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Índice de figuras Figura 1. Ocimun basilicum L., (inflorescencias y flores)…………………………….. 12 Figura 2. Clasificación de Glomeromycota 2013……………………………................ Figura 3 . Ubicación del terreno y el invernadero……………………………………… 19 31 Figura 4. Análisis de suelo………………………………………………………………… 33 Figura 5 Pruebas de germinación ……………..………………………………………. 34 Figura 6. Plantas de albahaca, días después del transplante…………………………… 34 Figura 7. Plantas de Ocimun basilicum L., antes de la cosecha…………………………………… Figura 8 . Siembra de semillas en vasos……………………………………………………. 43 Figura 9. Plantas de Ocimun basilicum L, T1, T2, T3 y T4………..………………… 45 Figura 10. Plantas de Ocimun basilicum L. divididas por tratamientos……………….. 46 Figura 11. Esporas de Glomus sp. , encontradas en la parcela de Texcoco…………….. 50 Figura 12. Estructuras fúngicas de hongos micorrízicos arbusculares observadas en raíces de Ocimun basilicum L…………………………………………………………. 52 VI Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Índice de gráficas Gráfica 1. Diferencias en el % de Germinación en las semillas.…………………… 38 Grafica 2. Altura de la planta en T1, T2, T3 y T4…..……………………………….. 39 Grafica 3. Diámetro del tallo en T1, T2,T3 y T4. ..………………………………….. 39 Gráfica 4. Número de hojas en T1, T2,T3 y T4……………………………………… 40 Gráfica 5. Número de inflorescencias T1, T2,T3 y T4………………………………. 40 Gráfica 6. Número de botones en T1, T2,T3 y T4…………………………………… 41 Gráfica 7. Número de flores en T1, T2,T3 y T4…………………………………….. 41 Gráfica 8. Peso fresco de la planta, en T1, T2,T3 y T4……………………………... 42 Gráfica 9. Peso seco de la planta, en T1, T2,T3 y T4………………………………. 42 Gráfica 10. Peso de la raíz en T1, T2,T3 y T4………………………………………. 43 Gráfica 11. Longitud de raíz en T1, T2,T3 y T4……………………………………. 43 Gráfica 12. Número de esporas en el suelo, en T1, T2,T3 y T4…………………....... 44 Gráfica 13. % de colonización en la raíz, en T1, T2,T3 y T4……………………….. 44 Gráfica 14. % de vesículas en la raíz, en T1, T2,T3 y T4……………………………. 47 Gráfica 15. % de arbúsculos en el raíz, en T1, T2,T3 y T4………………………….. 47 VII Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Índice de cuadros Cuadro 1. Métodos para la evaluación de las propiedades físicas y químicas de suelo……..……………………………………………………………………………. 32 Cuadro 2. Resultados del análisis de suelo con y sin composta………………............ 37 Cuadro 3. Diferencias estadísticas entre los tratamientos T1, T2,T3 y T4 en altura de la planta………………………………………………………………………………. 39 Cuadro 4. Diferencias estadísticas entre los tratamientos T1, T2, T3 y T4 en el diámetro del tallo…………………………………………….……………………….. 39 Cuadro 5. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el número de hojas…………………………………………………………… 40 Cuadro 6. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el número de inflorescencias………………………………………………… 40 Cuadro 7. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el número de botones………………………………………………………….. 41 Cuadro 8 Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el número de flores……………………………………………………………. 41 Cuadro 9.Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el peso fresco…………………………………………………………………. 42 Cuadro 10. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el peso seco……………………………………………………………………. 42 Cuadro 11. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1, T2, T3 y T4 en el peso de raíz………………………………………………………………. 43 Cuadro 12. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1, T2, T3 y T4 en longitud de raíz………………………………………………………………. 43 Cuadro 13. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el número de esporas…………………………………………………………. 44 Cuadro 14. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el % de colonización micorrízica……………………………………………... 44 Cuadro 15. Diferencias estadísticas significativas entre los tratamientos T1,T2, T3 y T4 en el % de vesículas…………………………………………………………….. 47 Cuadro 16. Diferencias estadísticas entre los tratamientos T1, T2,T3 y T4 en el % de arbúsculos en la raíz…………………………………………….……………............. 47 1 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Resúmen En el presente trabajo se evaluó el efecto de la inoculación de Rhizophagus intraradices y la aplicación de composta en la producción de albahaca (Ocimun basilicum L.) con el fin de maximizar su rendimiento en un cultivo ubicado en San Diego Texcoco, para lo cual como primera actividad se realizó un análisis de suelo con y sin composta, de acuerdo a las técnicas de la NOM-021-RECNAT-2000. Se aplicaron cuatro tratamientos incluyendo un testigo, suelo con y sin composta, y la inoculación de Rhizophagus intraradices. En las plantas se evaluaron las siguientes variables: altura, número de hojas, diámetro del tallo, inflorescencias, botones, flores, longitud y peso de la raíz, número de esporas y % de colonización de raíz. Como resultado se obtuvo que el suelo trabajado mejoró sus propiedades físicas, químicas y biológicas con la adición de composta, ya que presentó un alto porcentaje de materia orgánica, un pH neutro, mayor espacio poroso y retención de humedad. Además el tratamiento 4 (composta + Rhizophagus intraradices) fué el mejor para la mayoría de las variables medidas, seguido por T2 (composta) y T3 (Rhizophagus intraradices), los cuales dieron resultados favorables superando al testigo. Se demostó que el uso de biofertilizantes es buena opción para aumentar la producción de albahaca y mejorar las propiedades del suelo Por lo que se puede concluir que la combinación de composta y Rhizophagus intraradices es una buena alternativa de cultivo para ésta zona de Texcoco. 2 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM INTRODUCCIÓN Actualmente el manejo del suelo en la agricultura ha provocado una disminución de su fertilidad, debido principalmente a la modernización del campo, que promueve el uso de agroquímicos y maquinaria agrícola, (Hernández y Vázquez., 2007: 49) donde el desarrollo óptimo de los cultivos requiere una elevada aplicación de fertilizantes químicos y pesticidas, lo que implica no solo un costomonetario, sino que también contaminan suelo y agua, generando graves problemas ambientales y de salud pública. Además éstos procesos agrícolas inciden sobre el componente microbiano afectando la biodiversidad y densidad de las poblaciones implicadas, dando como resultado tanto a mediano como a largo plazo, la pérdida de la fertilidad de los suelos y su progresiva pauperización (Lucas, 2011: 1). Debido a esto, es importante promover practicas de agricultura sustentable que reduzcan ésta contaminación y mejoren las condiciones del suelo (Millaleo y col. 2006:27), evitando también la pérdida de su fertilidad. Una alternativa a éste problema es el uso de biofertilizantes, donde el manejo de microorganismos benéficos, facilitan la asimilación de nutrimentos por la planta, formando poblaciones que permanecen en el suelo a lo largo del cultivo y aún después que se terminó el ciclo (Nieto y col., 2010: 70). Un ejemplo son los Hongos Micorrizicos Arbusculares (HMA), que tienen un gran valor para las plantas, ya que se asocian con aproximadamente un 87% de especies, muchas de ellas son de cultivo agrícola. Éstos permiten que las plantas se adapten con mayor facilidad a situaciones adversas, se desarrollen mejor o aumenten su producción (Sánchez, 2005: 43), además de su efecto directo en la nutrición de las plantas, inducen cambios fisiológicos que comprenden un aumento en la taza fotosintética y la redistribución del carbono fijado en mayor proporción hacia las raíces (Blanco y Salas, 1997: 58). Por otro lado los abonos orgánicos como la composta mejoran las características del suelo y no contienen agroquímicos con efectos residuales, por lo tanto no causan ningún efecto negativo en la salud humana (Nieto y col., 2010: 70), así el uso de estos productos benefician las propiedades físicas, químicas y biológicas del suelo, ya que el valor que le proporciona la materia orgánica ofrece grandes ventajas que difícilmente pueden lograrse con los fertilizantes inorgánicos. 3 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM El hombre ha buscado en la flora de su hábitat, de forma empírica, medicamentos contra las enfermedades que le aquejan, así son conocidos desde la antigüedad múltiples ejemplos de especies medicinales que hoy tienen vigencias absolutas (Soler y Porto 1997: 30), actualmente la demanda por plantas aromáticas y medicinales con altos contenidos de aceites esenciales es alta, ya que juegan un papel importante, debido a su uso como materia prima en la industria farmacéutica, cosmética y alimentaria, además presentan ventajas en el control de malezas, reciclaje de nutrimentos y uso de áreas improductivas (Pacheco y Pohlan, 2005: 207). La alta demanda ha propiciado mayor interés por su cultivo, el cual demanda altos rendimientos de material vegetal. Es así como los biofertilizantes han demostrado ser una alternativa para el cultivo de plantas aromáticas y medicinales, ya que además de dar buenos resultados en el rendimiento, mejoran la calidad del suelo. Un ejemplo de éstas plantas es Ocimun basilicum L. conocida comúnmente en México como albahaca, ya que es un cultivo de importancia económica global, con una producción mundial anual de 100 toneladas de aceites esenciales sintetizados y almacenados en tricomas glandulares especializados, ubicados en diversas estructuras de la planta (flores, semillas, brotes, tallos y semillas) con una calidad que depende de factores externos (climáticos y agronómicos) e internos del cultivo (variedad, edad de la planta y órgano utilizado) (Chirinos y col., 2009: 29). Es una planta herbácea, que alcanza una altura de 30-50 cm, con flores de color blanco o purpúreo (Benito y Chiesa, 2000: 20). Dadas las propiedades medicinales, aromáticas, ornamentales y melíferas, entre otras el cultivo de albahaca ha adquirido cierto interés en el mundo. Su esencia se utiliza en la industria de la perfumería y cosméticos, así como aromatizante de vinagre, vegetales en conserva y mostaza (Jerez y col., 2004: 30). El uso de biofertilizantes en la producción de plantas medicinales ya ha sido estudiada, como lo realizó Milanés y col. (2005) al utilizar composta vegetal y humus de lombriz en la producción de Calendula officinalis L. y Matricaria recurita L., donde la composta mostró mejorar las características del suelo y de los cultivos, mejorando características como: altura, peso seco y fresco de las plantas. Otro trabajo es el reportado por Khalil y col. (2000) en el cual estudiaron la respuesta de una planta medicinal Dodonaea viscosa L. a la inoculación con 5 gramos de hongos micorrízicos arbusculares (HMA), mas raíces colonizadas por diferentes cepas de micorriza y fertilización química, donde los HMA produjeron altos rendimientos de biomasa aérea en comparación a las plantas testigo y semejantes resultados a la fertilización química. 4 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Por su parte Jerez y col. (2004) reportaron que plantas de Ocimun basilicum L. inoculadas con 10 gramos de Glomus clarum más materia orgánica, presentaron mayor altura y producción de biomasa, en comparación a plantas no micorrizadas. Castro (2012) utilizó Rhizophagus intraradices en sorgo, con lo que se favoreció la altura y el peso fresco de las plantas inoculadas, además de contener un alto porcentaje de colonización micorrízica, lo cual la hace muy competitiva con los hongos micorrízicos nativos. La combinación de hongos micorrízicos arbusculares, y vermicomposta, en la producción de albahaca, ya ha sido estudiada por Hernández (2013), donde ésta combinación ayudó a mejorar las características agronómicas y la vermicomposta dió mayor número de hojas y peso foliar en las plantas. Con la finalidad de estudiar el efecto de los hongos micorrízicos arbusculares en sistemas agrícolas, en particular con plantas medicinales, en el presente trabajo se utilizó un inóculo de Rhizophagus intraradices, en un cultivo de albahaca (Ocimun basilicum L.) ubicado en la localidad de San Diego Texcoco, estado de México. Para lo cual se usaron tres diferentes tratamientos con composta, Rhizophagus intraradices y la combinación de ambos, más un testigo. Donde la combinación de Rhizophagus intraradices más 10% composta vegetal, mejoró las características agronómicas de albahaca, que se reflejaron al aumentar la producción de éste cultivo y a la vez se mejoraron las propiedades del suelo dando así una alternativa de cultivo en ésta zona de Texcoco. 5 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Capítulo I. Aspectos generales del suelo 1.1 ¿Que es el suelo? El suelo se considera la parte más superficial de la corteza terrestre. Representa la interfase entre la parte biológica, hidrológica, litológica y atmosférica de nuestro planeta, y constituye el soporte de la mayor parte de la vida sobre la tierra, y ofrece una extraordinaria complejidad y variabilidad. Lo que parece un simple material mineral relativamente homogéneo, contiene un increíble número de organismos, así como cantidades variables de aire y agua (De la Rosa, 2008: 53). El suelo un sistema complejo y dinámico, que forma parte integral de ecosistemas. De ésta forma, participa en los procesos propios de los ecosistemas naturales, tales como el intercambio de energía, movimiento y transformación del agua, carbono, nutrimentos, dinámicas tróficas de la biodiversidad (Robertson y Grande, 2006, citados en De la Rosa, 2008: 55). Sus propiedades físicas, químicas y biológicas, regulan la disponibilidad de nutrimentos así como su transferencia, la forma en que los aprovechan las plantas, y representa uno de los aspectos claves del reciclaje de estos, la actividad microbiana del suelo (Ferrera y Alarcón, 2001: 3). Por otro lado según Barea (1991) un suelo fértil, se define como aquel que suministra nutrimentos en cantidades adecuadas y balanceadas,para satisfacer los requerimientos de crecimiento en plantas durante sus etapas de desarrollo. 1.2 Propiedades físicas, químicas y biológicas del suelo La fertilidad del suelo se puede considerar desde tres puntos de vista: i) Características físicas, ii) Químicas, iii) Biológicas. La combinación e interacción de éstas características producen cambios significativos en los ciclos biogeoquímicos del suelo y en la disponibilidad de los nutrimentos para las plantas (Guerra, 2008: 192). Los componentes del suelo se pueden agrupar en cuatro elementos básicos: i) Elementos minerales. Los cuales representan normalmente la mitad del volumen del suelo, aunque aparenten constituir la totalidad del mismo, estos elementos se encuentran en diferente tamaño y suelen ser clasificados, de mayor a menor, como arena, limo o arcilla. La 6 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM composición mineral del suelo determina sus propiedades físicas y es condicionado por las formas de vida presentes (De la Rosa, 2008: 55). ii) Material orgánico del suelo. Presentado por material vivo compuesto por raíces de plantas, microorganismos y fauna del suelo; además incluye cortezas, raíces muertas y sustancias húmicas. La materia orgánica está compuesta por residuos no descompuestos o parcialmente descompuestos de animales, plantas y el tejido de microorganismos vivos y muertos, los cuales dan forma, protegen y mantienen el propio suelo. Es un componente fundamental de la buena estructura del suelo, incrementa la retención del agua, es la principal fuente de alimento de los microorganismos y proporciona una protección mecánica a la superficie * ; contiene cerca del 5% de nitrógeno total, pero también contiene otros elementos esenciales para las plantas, tales como fósforo, magnesio, calcio, azufre y micronutrimentos (Julca y col., 2006: 50). iv) Aire. El aire del suelo está localizado en un laberinto de poros, separado por los sólidos del suelo, el contenido y la composición dependen en gran medida de las relaciones suelo-agua. Siendo una mezcla de gases, el aire se mueve por los poros del suelo no ocupados por el agua (Buckman y col., 1991; 14), cuanto mayor es el espacio poroso, más grande será su capacidad para retener agua (De la Rosa, 2008: 55). iii) Agua. Representa normalmente un cuarto del volumen del suelo, aunque la cantidad excata puede variar grandemente en función de la estación del año y del tipo del suelo. El agua del suelo contiene los nutrimentos en una forma disponible para las plantas. La raíz puede absorber los nutrimentos sólo en forma disuelta (FAO, 2002: 15). Las plantas absorben todos los nutrimentos de la solución del suelo, por lo que éste debe contener los elementos necesarios, las formas utilizables de éstos y las concentraciones óptimas para el desarrollo normal de las plantas. Para lo cual según la FAO (2002) se dividen en dos categorías (referente a la cantidad de nutrimentos que necesitan las plantas): Macronutrimentos. Son aquellos que las plantas utilizan en grandes cantidades, y se clasifican en primarios y secundarios. Los primeros son el nitrógeno, fósforo, y potasio. Los secundarios son calcio, magnesio y azufre a quienes las plantas también los absorben en cantidades considerables. * Ibid, p.211 7 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Micronutrimentos o microelementos. Son aquellos que son utilizados por las plantas superiores en muy pequeñas cantidades, su rango de provisión óptima es muy pequeño. Son parte de sustancias claves en el crecimiento de la planta, siendo comparables con las vitaminas en la nutrición humana, estos elementos son el hierro, manganeso, cobre, zinc, boro, molibdeno y cloro. El nitrógeno (N), por ejemplo está disponible para las plantas en diferentes formas que incluyen el molecular, amoniaco (NH3) volátil y el N mineral (NOɜ¯ y NH4) y orgánico, la mayoría de los organismos vivos son incapaces de utilizarlo directamente, y es necesario que sea fijado para poderlo utilizar (Lampkin, 2001: 56). El crecimiento de las plantas depende, entre otros factores, de un adecuado suplemento de nitrógeno, para sintetizar aminoácidos, proteínas, ácidos nucléicos y otros constituyentes necesarios para su desarrollo (Sánchez y col., 2006: 188) y en la elaboración del rendimiento. Un buen suministro de nitrógeno para la planta es importante también para la absorción de otros nutrimentos (FAO, 2002: 8). El fósforo (P), tiene una función básica en las reacciones enzimáticas que dependen de la fosforilación donde se libera la energía para el funcionamiento bioquímico o para realizar otro trabajo (Ferrera y Alarcón, 2001 9), juega un papel importante en la transferencia de energía y es indispensable para la diferenciación de las células y para el desarrollo de los tejidos que forman los puntos de crecimiento de la planta. El potasio (K), activa más de 60 enzimas, por ello juega un papel vital en la síntesis de carbohidratos y de proteínas, aumenta la tolerancia a la sequía, heladas y salinidad. Las plantas bien provistas de potasio sufren menos enfermedades (FAO, 2002: 8). El azufre presente en la materia orgánica proviene de residuos vegetales, animales y microbianos que se incorporan al suelo; consiste en una parte importante de proteínas y sus derivados, la mayor parte del azufre potencialmente mineralizable se encuentra en la formación del ácido fulvico, del ácido húmico y en algunas huminas. La deficiencia de éste elemento provoca la atrofia y el amarillamiento de los cultivos (Fitz, 1996: 159). 8 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM El calcio es necesario como nutrimento vegetal, modifica los valores de pH al reducir el número de iones H+ en circulación, la mayoría de las plantas crecerán con éxito solo en una gama limitada de pH, generalmente por encima de 6 (Lampkin, 2001: 78). El magnesio es el constituyente central de la clorofila y el calcio es esencial para el crecimiento de las raíces y como constituyente del tejido celular de las membranas (FAO, 2002: 9). El magnesio forma pare de los procesos enzimáticos y es necesario para la síntesis de la clorofila. La deficiencia de magnesio se manifiesta como un amarillamiento, clorosis muy marcada, pérdida de color verde en la totalidad del área entre las nervaduras (Fitz, 1996: 160). Por otro lado, el papel específico de los diversos micronutrimentos en la planta no es aún bien conocido, no obstante la escasa información existente sugiere que varios micronutrimentos tales como el cobre, hierro y molibdeno son efectivos como trasportadores de electrones en sistemas enzimáticos. Otros elementos como el silicio, vanadio y sodio parecen ayudar al desarrollo de ciertas especies. Sin embargo a pesar de ser requeridos en cantidades muy pequeñas, estos elementos son tan importantes como los macronutrimentos (Buckman y Brady, 1991: 477), ya que todos los nutrimentos son necesarios en pequeñas o en grandes cantidades y cumplen una función específica en el crecimiento de la planta. Además, el suelo contiene una gran cantidad de organismos diferentes, que varían tanto en tamaño como en función. Sin embargo todos ellos tienen una misión importante en la movilización de los nutrimentos edáficos. En la parte inferior de la escala están los microorganismos, como las algas, protozoos, hongos y bacterias. Ascendiendo en la escala de tamaño se hallan los nemátodos, saltarines (colémbolos), pequeños artrópodos y lombrices. Los microorganismos edáficos descomponen los restos orgánicos vegetales para liberar su energía y sus nutrimentos en forma de iones inorgánicos, que pueden asimilar las plantas (Lampkin, 2001: 19). La actividad biológica del suelo permite la transformación y liberación de los nutrimentos quese encuentran en formas no disponibles para las plantas. Estas complejas interacciones permiten que el suelo, los ciclos biogeoquímicos se den en forma contínua y simultánea a través de las transformaciones de la materia orgánica principalmente por efecto de la actividad microbiana (Ferrera y Alarcón, 2001: 4). Hay otros organismos que no se alimentan directamente de materia orgánica viva ni muerta, pero establecen fuertes relaciones simbióticas con otros organismos vivos, dentro de éste grupo cabe destacar a las bacterias pertenecientes al género Rhizobium y hongos micorrízicos 9 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM arbusculares. Su principal característica es que obtienen la energía necesaria en forma de compuestos de carbono, intercambiándola por algún otro nutrimento que ellos mismos son capaces de fabricar (Lampkin, 2001: 21), éstos microorganismos presentan ventajas ecológicas con respecto a los de vida libre ya que están exentos de fenómenos de competencia microbiana por sustratos metabolizables (Azcón, 2000: 4). 1.3 Relación suelo- planta El suelo proporciona los nutrimentos necesarios para las plantas en la forma química adecuada y en una proporción que le permita utilizarlos. Las plantas toman los nutrimentos principalmente en forma de iones cargados eléctricamente (NOɜˉ, H2PO4 ˉ). El suelo tiende a funcionar como un banco para estos iones, aunque también los debería facilitar en la medida que sean requeridos (Lampkin, 2001: 52). La supervivencia y productividad de las plantas determina su capacidad para adaptarse a diferentes medios. Ésta adaptación es resultado de la interacción entre las raíces y los componentes bióticos y abióticos del suelo (Pinton y col., 2001: 3). Las raíces de las plantas cumplen una función importante en relación con el ecosistema particular que crean alrededor de sí, llamado rizósfera. Ésta se forma de los tejidos vivos exteriores de la raíz y las partículas minerales del suelo que están en contacto con ellas. Las raíces de las plantas exudan una mezcla de sustancias denominada mucílago, que contiene nutrimentos y energía utilizable por los microorganismos edáficos (Lampkin, 2001: 56). En la rizósfera, ocurre un intercambio de sustancias nutritivas mediante un complejo de interacciones entre plantas y los organismos del suelo. Cada una de las diferentes especies de plantas favorecen el desarrollo de un tipo específico de vida y las raíces de las plantas también tienen una población particular de microorganismos con los que interactúa (Kolmans y Vázquez, 1999, citados en Castro 2012: 4), la asociación entre los microorganismos y las raíces, puede ser dañina, neutral o benéfica (Sánchez, 2000: 11). 1.3.1 Utilización de sustratos De acuaerdo a Pastor (1999) el término “sustrato” se refiere a todo material sólido diferente del suelo que puede ser natural o sintético, mineral u orgánico y que colocado en contenedor, de forma pura o mezclado, permite el anclaje de las plantas a través de su sistema radicular. 10 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM El cultivo de plantas en sustrato presenta diferencias sustanciales respecto del cultivo de plantas en suelo, ya que al cultivar en contenedor las características de éste resultan decisivas en el correcto crecimiento de la planta y se produce una clara interacción entre las características del contenedor (altura, diámetro, etcétera.) y el manejo del complejo planta- sustrato El sustrato sirve como soporte para la vida de la planta, entre sus funciones está el proporcionar un componente sólido, un líquido y un gaseoso, debido a sus características químicas, físicas y biológicas; además de participar en el proceso de nutrición de la planta (Chable, 2007: 21). Algunas de las características de los sustratos pueden ser: -Características físicas: Baja densidad aparente, alta porosidad y aireación, alta retención de agua, estabilidad estructural. - Características químicas: Alta capacidad de intercambio catiónico, pH ligeramente ácido a neutro 5.5 a 7, alto contenido de nutrimentos. -Características biológicas: Contenido de materia orgánica, libre de plagas y enfermedades. Además de bajo costo, fácil disponibilidad y manejo (mezclado, desinfección, entre otros). Los sustratos más utilizados en México son turba, tezontle, piedra pómex, agrolita, polvo de coco, corteza de pino, aserrín, composta y vermicomposta (García y col., 2001: 249) 1.3.2 Plantas medicinales Una planta medicinal es todo aquél vegetal que en uno o más de sus órganos sintetiza o almacena productos denominados principios activos. Puede servir como medicamento (parte de la planta medicinalmente utilizada como medicamento) que alivie el desequilibrio orgánico generado por una enfermedad (De la Rosa, 2009: 6). Las plantas medicinales son aquellos vegetales que elaboran principios activos que ejercen una acción farmacológica beneficiosa o perjudicial para el organismo vivo (Quesada, 2008: 21). 1.3.3 Importancia de las plantas medicinales Las plantas aromáticas y medicinales en los últimos años han tenido un gran interés mundial debido a su uso como materia prima en el área farmacéutica, industrial, cosmetológica y alimentaria. No obstante; sus elevados precios, la demanda internacional se ha incrementado. Las plantas aromáticas con altos contenidos en aceites esenciales han tenido especial interés 11 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM como fuentes de materias, como complemento en la medicina tradicional y costumbres populares de las regiones productoras, (Pacheco y col., 2005: 207) además poseen ciertas ventajas tales como que son mas baratas y menos tóxicas, como medicamento preventivo ayudan a enfermarse con menor frecuencia; como condimento en la industria alimentaria y casera; en la elaboración de cosméticos; en la agricultura se utilizan como barreras vivas; para la elaboración de extractos como insecticidas y fungicidas (Quesada, 2008: 21). 1.3.4 Ocimun basilicum L. 1.3.4.1 Descripción botánica y taxonómica Familia: Lamiaceae o Labiatae, género Ocinum el cual está representado por más de 150 especies y tiene una amplia distribución geográfica por todas las regiones de clima tropical y subtropical. Es un importante grupo de plantas aromáticas que contienen aceites esenciales ricos en diferentes constituyentes, como linalol, geraniol, citral, alcanfor, eugenol, timol (Sánchez y col., 2000: 187). Ocimun basilicum L. Nombre común: Albahacar, albahaca, albaka (náhuatl). Hierba anual, aromática, glabra o un poco pubescente de 30 a 50 cm de altura: tallo verde a menudo purpúreo, cuadrado; hoja simple, opuesta, verde o a menudo purpúrea, aromática, ovalada de 2.5 a 5 cm de largo, glabra o un poco pubescente, margen entero o dentado, peciolada; inflorescencia: racimo ventilado, moderadamente densa: flor cigomórfica; caliz verde teñido de púrpura, campanulado, 2-labiado, labio inferior con 4 dientes; corola blanca o teñida de púrpura 2- labiada, labio superior con 4 lóbulos, labio inferior cóncavo, de 0.7 a 1 cm de largo, usualmente más corto que el cáliz; 4 estambres externos; fruto 4 nuececillas, ovoides o subglobosas con cáliz persistente, reflexo (Linares y col., 1996; 28) (figura 1). Pertenece a las familia de la labiadas es un representante del género que se obtiene de extensiones cultivadas para su comercialización en diferentes partes del mundo. Se le atribuye propiedades antisépticas, antiinflamatorias, atiespasmódiocas y analgésicas (Sánchez y col., 2000: 188). Su centro de origen es Asia menor, no obstante está ampliamente distribuida en cultivo, sobre todo, por los países mediterráneos. Originaria de regiones cálidas de Asia y África. Persia e India Occidental (Fundación Alfonso Martín, 1999: 274). En México Ocimun basilicum L. es 12 Facultad de Estudios SuperioresZaragoza UNAM una especie introducida que se cultiva en todo el país, sobre todo a nivel doméstico (CONAFOR, 2010: 12). Figura 1. Ocimun basilicum L. a: Inflorescencia, b: Flor 1.3.4.2 Necesidades medio ambientales en Ocimun basilicum L . Uno de los aspectos más importantes en la producción de plantas medicinales es alcanzar altos rendimientos de material vegetal y elevados contenidos de principios activos, lo que depende tanto de factores internos de la planta, como de aquellos relacionados con el crecimiento de la especie, los referidos a la recolección y también a las condiciones climáticas del lugar en donde se lleva a cabo el cultivo, por lo que es fundamental contar con prácticas de manejo capaces de modificarse de acuerdo a sus requerimientos, lo que implica la adopción de técnicas y métodos que posibiliten rendimientos con alta calidad (Acosta, 2003). a b 13 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM La albahaca es una planta muy sensible a las heladas, no las resiste, se desarrolla bien entre los 15 y 25°C y a media sombra. Requiere suelos ricos, fertilizados, secos y bien drenados, también lugares soleados y abrigados ya que es muy sensible al frío. Es empleada para el control de la erosión de los suelos y es tolerable a inundaciones (Gómez y Tovar, 2008; 14). Altitudinalmente se sitúa desde el nivel del mar hasta los 1000 m.s.n.m., al aumentar la altitud, disminuye el rendimiento en aceites esenciales. Se localiza en áreas con climas cálido, semicálido, semiseco, seco, muy seco y templado. Es cultivada en huertos familiares y está asociada a bosques tropicales caducifolio, subperennifolio y perennifolio, matorral xerófilo, pastizal y bosques de encino y de pino (medicinatradicionalmexicana.unam.mx) La cosecha se debe realizar lo más cercano posible a la plena floración, por que en ese momento se presenta el mayor contenido de aceites esenciales (Fundación Alfonso Martín, 1999: 274). 1.3.4.3 Uso e importancia económica El más amplio uso medicinal que se hace de esta planta es para el dolor de estómago, así como para otros desórdenes digestivos tales como cólico del recién nacido, vómito y empacho (medicinatradicionalmexicana.unam.mx); se hacen ramos de limpia y se unta con alcohol para el aire (Linares y col., 1996: 28). Es utilizada en problemas ginecológicos como trastornos menstruales (hemorragia abundante en posparto), en casos de amenorrea y esterilidad femenina, baños para después del parto y aborto. Se utiliza en procesos inflamatorios tales como los de matriz, anginas, intestinales y estomacales, además en infecciones bucales, de la piel, vejiga, riñones, entre otros problemas. Para el tratamiento de todos estos padecimientos, se reporta en la estructura más usada son hojas y flor, ya sea desecadas o frescas y su infusión la forma de preparación más común; pero también pueden ser las ramas fermentadas en alcohol. Además se extrae el aceite esencial ya que éste poseé propiedades estimulantes, antiespasmódicas, digestivas, y propiedades antifúngicas, antibacterianas y repele insectos (Benito y Chiesa, 2000:20). Los resultados de estudios experimentales demuestran que la planta posee actividad antibiótica, antihelmíntica y antiulcerígena, lo que pone de manifiesto la efectividad de la planta en varias de sus aplicaciones terapéuticas tradicionales, ya que las partes aéreas de la planta contienen un aceite esencial constituido principalmente de mono y sesquiterpenos, derivados de fenilpropano y ácidos orgánicos sencillos. http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=dolor%20de%20estómago http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=cólico%20del%20recién%20nacido http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=empacho http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=parto http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=esterilidad%20femenina http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=baño%20para%20después%20del%20parto http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=aborto http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=anginas 14 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Por todo esto la albahaca, es una planta que tiene importancia económica y cuyos aceites esenciales localizados principalmente en las flores, son usados en la industria de perfumería para aromatizar cosméticos y perfumes finos; en la alimenticia como saborizante y condimento; además en productos farmacéuticos como estimulante, antiespasmódico, antialopécico, entre otros. Varios investigadores han reportado la actividad inhibitoria de los aceites esenciales provenientes de ella. (Acosta y col, 2003), la actividad antibiótica que ejerce su aceite esencial, así como sus extractos clorofórmico, metanólico y acuoso sobre microorganismos patógenos ha sido plenamente evidenciada en múltiples estudios. Bacterias como Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomona aeruginosa, los hongos, Candida albicans, Trichoderma viridens y diversas especies de Aspergillus y Fusarium son particularmente susceptibles (medicinatradicionalmexicana.unam.mx). La albahaca es un cultivo de importancia económica global, con una producción mundial anual de 100 toneladas de aceites esenciales sintetizados y almacenados en tricomas glandulares especializados, ubicados en diversos órganos de la planta (flores, semillas, brotes, tallos y semillas) con una calidad que depende de factores externos (climáticos y agronómicos) e internos del cultivo (variedad, edad de la planta y órgano utilizado) (Chirinos y col., 2009: 29). 15 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Capítulo II. Biofertilizantes 2.1 Definición Los biofertilizantes también llamados abonos biológicos están basados en microorganismos que promueven y benefician la nutrición y el crecimiento de las plantas, generalmente son hongos y bacterias, que se asocian de manera natural a las raíces de las plantas (Chirinos y col., 2006), cuya acción facilita la asimilación de nutrimentos por la planta, formando poblaciones en el suelo a lo largo del cultivo y manteniéndolas aún después de terminado el ciclo del cultivo. (Nieto y col., 2010: 70). Proporcionan la solubilización del fósforo que se encuentra en compuestos inorgánicos insolubles, y presentan efectos contra patógenos mediante la secreción de antibióticos o por mecanismos de parasitismos (biotrópico y necrotrópico), además de facilitar la traslocación y aprovechamiento de los nutrimentos del suelo y fijar nitrógeno atmosférico (Ferrera y Alarcón, 2001: 16). Ferrera y Alarcón (2001), mencionan que productos como los obtenidos del composteo, se pueden utilizar como biofertilizante, ya que además de aumentar el contenido de macronutrimentos como el nitrógeno (N), fósforo (P), potasio (K), calcio (Ca) y magnesio (Mg) y los micronutrimentos tales como el hierro (Fe), zinc (Zn), manganeso (Mn), y cobre (Cu); así como la capacidad de intercambio catiónico (CIC) (Luna 2012), mejoran las propiedades físicas del suelo y aportan sustancias húmicas que participan como mejoradores de suelos con problemas de fertilidad y su aplicación en plantas, puede contribuir en la estimulación o inhibición del crecimiento y desarrollo vegetal. Además de mejorar la actividad biológica ya que actúan como soporte y alimento de microorganismos, que de acuerdo a Moreno (2008), la población microbiana es un indicador de la fertilidad del suelo. Así la alta cantidad de materia orgánica y los nutrimentos son los elementos importantes que hacen que la composta pueda ser utilizada como biofertiliazante. . 2.2 Características de los biofertilizantes La estabilidad del sistema suelo-planta depende no solo de la raíz vegetal (tamaño, morfología y fisiología) sinotambién de la microbiota asociada a ella, la cual afecta la eficiencia de la captación de nutrimentos y de la química del medio (Azcón, 2000: 4), por lo que en la 16 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM actualidad el manejo de microorganismos benéficos ha tenido un gran auge, de tal forma que se ha planteado la elaboración de productos biológicos con fines de uso en la agricultura. En el ámbito microbiológico, la selección de los microorganismos es esencial para que se favorezca su expresión benéfica, de tal modo que se debe considerar la mejor combinación (compatibilidad) posible entre la planta-bacteria / planta-hongo, con el fin de manifestar el mayor beneficio por efecto de la simbiosis (Ferrera y Alarcón, 2000: 16). La respuesta de los biofertlilizantes varía considerablemente dependiendo de los microorganismos, del tipo de suelo, las especies de plantas y las condiciones ambientales. Los microorganismos aplicados deben competir con una microflora nativa mejor adaptada a condiciones ambientales adversas, incluyendo falta de humedad en el suelo, alta salinidad y pH extremos, que pueden disminuir rápidamente la población de cualquier especie microbiana introducida. La utilización de cepas nativas de microorganismos en la elaboración de biofertilizantes tiene mayor posibilidad de efectividad en el campo, por estar adaptados a las condiciones del suelo de cada región (Armenta y col., 2010: 51). El proceso de selección es fundamental y se deben tomar en cuenta ciertas características de las cepas antes de ser inoculadas tales como las mencionadas por Ferrera y Alarcón (2001): Eficiencia en su capacidad aún cuando se presenten diversas condiciones ambientales. Que las cepas microbianas posean una alta capacidad competitiva contra especies nativas. Que el manejo de medios sólidos y líquidos permita tanto el crecimiento y supervivencia de las cepas. Que posean una alta capacidad de supervivencia en el suelo. Que la estabilidad de las cepas se mantenga durante el tiempo de almacenamiento del inoculante. Tener suficiente cantidad de propágulos viables. Evitar la presencia de microorganismos indeseables, como patógenos. 2.3 Tipos de biofertilizantes Los microorganismos utilizados en los biofertilizantes se clasifican dentro de dos grupos: 17 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM i) Aquellos que tienen la capacidad de sintetizar sustancias que promueven el crecimiento de la planta, fijando nitrógeno atmosférico, solubilizando hierro y fósforo inorgánico y mejorando la tolerancia al estrés por sequía, salinidad, metales tóxicos y exceso de pesticidas por parte de la planta. En ésta clasificación se tienen a los microorganismos simbióticos tales como bacterias del género Rhizobium, los Hongos Micorrízicos Arbúsculares (HMA) y los de vida libre o no simbióticos. ii) Los que son capaces de disminuir o prevenir los efectos de deterioro de microorganismos patógenos. Puede haber microorganismos que puedan estar en los dos grupos, que además de promover el crecimiento de la planta inhiben los efectos de microorganismos patógenos (Armenta y col., 2010: 51). Por otro lado están los abonos orgánicos, los cuales son ricos en nutrimentos, su aplicación en las plantas es factible y económicamente redituable. Su efecto se traduce en la estimulación del crecimiento y productividad de los cultivos (Ferrera y Alarcón, 2000: 15), además al combinarlos con algunos microorganismos como los mencionados anteriormente, han demostrado tener una buena respuesta, por lo que se han adoptado como estrategia en el suministro de nutrimentos en diferentes cultivos. 2.4 Hongos Micorrízicos Arbusculares (HMA) Los HMA son una asociación simbiótica mutualista entre raíces de plantas superiores y ciertos grupos de hongos del suelo. Estos hongos dependen de la planta para el suministro de carbono, energía y de un nicho ecológico, a la vez que capturan nutrimentos (especialmente los poco móviles como el fósforo); además, les imparten otros beneficios tales como: estimulación de la taza fotosintética, ajustes osmóticos cuando hay sequía, aumento de la fijación de nitrógeno por bacterias simbióticas o asociativas, incremento de resistencia a plagas, tolerancia a estrés ambiental, mejoramiento de la agregación del suelo y mediación en muchas de las acciones e interacciones de la microflora y microfauna, que ocurren en el suelo, alrededor de la raíces (Bethlenfalvay y col.,1992, citados en Blanco y col., 1997: 56). Los HMA se dividen en tres principales grupos: 1. Ectomicorrizas: Son asociaciones entre hongos Basidiomycetos, Zigomicetos y Ascomicetos con algunas especies de gimnospermas y angiospermas, los cuales forman un manto de varias 18 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM capas de hifas alrededor de la raíz llamada Red de Hartig, las hifas penetran de manera intercelular en el cortex o epidermis de la raíz . 2. Ectendomicorrizas. Presentan características de las ecto y endomicorrízas. 3. Endomicorrizas, Se desarrollan dentro de las células del cortex de la raíz (intracelular) o bien entre célula y célula (intercelular) de la raíz, de éstas se distinguen la ericoide, orquideoide y micorriza arbúscular (Sánchez, 2005: 17). Los hongos micorrízicos arbúsculares (HMA) son microorganismos cosmopolitas que forman asociaciones ecológicamente mutualistas que se establecen entre la gran mayoría de las plantas y un selecto grupo de hongos clasificados en la división Glomeromycota, particularmente en el orden Glomerales, el cual comprende aproximadamente 200 especies descritas (Alarcón, 2008: 20). Estos hongos son simbiontes obligados y se asocian con angioespermas, gymnoespermas y esporofitos de pteridófitas (Read, 2000: 3), la colonización de la raíz por estos hongos beneficia a la planta de varias maneras, por ejemplo incrementando la captura de nutrimentoss, resistencia a la sequía y protección contra patógenos (Leigh y col., 2009: 199), es por ello que tienen un gran valor para las plantas, ya que se asocian aproximadamente con un 87% de especies y muchas de ellas son de cultivo agrícola (Sánchez, 2005: 43). Los últimos sistemas de clasificación de los HMA, se basan en la secuencia de la subunidad pequeña de ARN ribosomal (SSU rDNA), como la clasificación propuesta por Schüβler y Walter (2010) donde existen 11 familas y 17 géneros con aproximadamente 220 especies descritas. La cual ha sido reciente modificada por Redecker y col., 2013 (Figura 2). 19 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Figura 2. Clasificación de Glomeromycota 2013, Redecker y col. 2013 2.4.1 Generalidades de los HMA. La simbiosis de los HMA se caracteriza por ser la parte mas activa de las estructuras de absorción de la planta, y es altamente efectiva en la captación de nutrimentos y agua del suelo. La planta aporta azúcares (glucosa y fructosa principalmente) para satisfacer los requerimientos de carbono por los hongos y éstos transfieren nutrimentos inorgánicos del suelo que repercuten en el aumento de la capacidad de crecimiento y adaptación de las plantas a las condiciones del sitio (Ferrera y Alarcón, 2001; 13). En dicha asociación, el hongo forma arbúsculos, que son estructuras donde se realiza el intercambio de carbono y fósforo entre el hongo y la planta. Algunos hongos micorrízicos forman vesículas en el micelio interno, las cuales son estructuras de reserva del hongo (Cuenca y col., 2007; 23). El micelio extrarradical de estos hongos ha mostrado ser capaz de captar muy 20 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM eficazmente nutrimentos, en especial el fósforo, nitrógeno y algunos otros elementos esenciales para la planta (Bago y col., 2000; 80). Los hongos micorrízicos arbusculares de una comunidad vegetal madura constituyen una malla que interconecta lasraíces de las plantas mediante una densa y extensa red de hifas, las cuales, por un lado, crecen a lo largo del cortex radical, en el interior de raicillas finas y por otro lado, las hifas externas se expanden en el sustrato; estas últimas son alargadas, dimórficas y están compuestas de una pared tosca, irregular y gruesa; asimismo, las hifas del suelo son capaces de producir células auxiliares y esporas de cubierta múltiple (Martínez y Martínez, 2009: 5). 2.4.2 Beneficios e importancia de los HMA Los hongos formadores de micorrizas arbusculares constituyen una asociación multifuncional con las plantas, cuyos beneficios van más allá de los aspectos nutricionales. Los HMA son considerados como un recurso biológico, cuyo manejo además de los efectos sobre la productividad vegetal, genera beneficios ambientales al mejorar las condiciones físicas, químicas y biológicas del suelo. (Sosa y col., 2006, 43). Los HMA son las formas más importantes en la micotrofía, con la distribución global, además de ser fundamentales en la estructura y diversidad de la vegetación. Son determinantes en la cubierta vegetal en todos los ecosistemas, lo cual se refleja es su ubicuidad en la biota edáfica y en su participación directa en los procesos esenciales en la interface suelo-planta (Monroy y col., 2009 citado en Castro, 2012: 9). El manejo agrícola de los cultivos, conlleva varios problemas ambientales entre los que destaca la excesiva aplicación de fertilizantes químicos que terminan contaminando los cuerpos de agua y causando su eutrofización. La adición de fertilizante sin un análisis previo de las condiciones del suelo, puede conducir a un desbalance iónico de los mismos, con los consiguientes problemas para las plantas que viven en dicho suelo y las micorrizas asociadas (Cuenca y col., 2007: 24). La simbiosis micorrízica arbúscular es interesante desde el punto de vista morfológico, ecológico, taxonómico y fisiológico. También es importante por los efectos que tiene en la biología de la planta y en los procesos involucrados en la nutrición, promoción del crecimiento, fisiología y otros beneficios directos e indirectos (Alarcón, 2008: 93). Gracias al uso eficiente que hacen las plantas micorrizadas de los nutrimentos del suelo, permiten ahorrar fertilizantes químicos y reducir por consiguiente los problemas de contaminación que el suelo excesivo de fertilizantes conlleva. Por otra parte, las plantas micorrizadas son capaces de hacer un mejor uso de fertilizantes orgánicos, ya sea por la producción de fosfatasas 21 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM proveniente de los hongos mismos o por la asociación de las hifas de los HMA y los microorganismos que participan en la mineralización de la materia orgánica.(Cuenca y col. 2007; 23). Los inóculos de hongos micorrízicos arbusculares, pueden estar formados con diferentes propágulos infectivos capaces de formar nuevas asociaciones micorrízicas, tales como esporas, micelio extraradical y raíces infectadas por HMA. En el caso de Rhizophagus intraradices (antes Glomus intraradices), es una especie de micorriza arbuscular, ampliamente usada en la agricultura, ya que se puede encontrar en la mayoría de los suelos. Se ha observado que Rhizophagus intraradices es una cepa muy competitiva y presenta mejores resultados al ser comparados con otras cepas, en porcentaje de colonización, peso seco, nitrógeno total y fósforo en plantas inoculadas con ésta especie, tal como lo menciona Toussaint y col. (2007), donde la albahaca es inoculada con tres diferentes cepas Glomus. caladunium, Glomus. mosseae y Rhizophagus intraradices, esta última cepa presentó un mayor % de colonización micorrízica, y en consecuencia un mayor porcentaje de fósforo en plantas y una respuesta semejante a las otras cepas en el peso seco de la planta. Kapoor y col. (2007) encontraron en la variable altura de Artemisia annua L., que la fertilización fosfatada y la inoculación de HMA tuvo un efecto positivo significativo, respecto a las plantas testigo. Leigh y col. (2009), demostraron que Rhizophagus intraradices presenta mayor % de colonización que Glomus hoi al ser inoculada en P. lanceolada y Trifolium repens L., además de mayor cantidad de nitrógeno y fósforo, en la segunda fase del experimento. Además se ha demostrado que los HMA, son importantes en la remediación de suelos por los efectos benéficos que proporciona tal como la inmovilización de metales en la raíz, Vargas (2013), menciona que girasol inoculado con Rhizophagus intraradices incrementó la adsorción de plomo en comparación a los tratamientos no micorrizados. 2.5 Abonos orgánicos 2.5.1 Generalidades Se considera un abono orgánico todo material de origen animal o vegetal que se utilice principalmente para mejorar las características del suelo, como fuente de vida y donador de nutrimentos del suelo, incluye materiales de origen orgánico utilizados para la fertilización de cultivos o como mejoradores de suelos (Pérez y col., 2008: 11). Entre los abonos orgánicos más 22 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM conocidos están la Composta, el Bokashi y la Lombricomposta, pero también son comúnmente utilizados las aplicaciones de gallinaza y otros desechos vegetales frescos, como la pulpa de café, entre otros (Soto y Meléndez, 2004: 91). Las enmiendas orgánicas varían en su composición química de acuerdo al proceso de elaboración, duración del proceso, actividad biológica y tipos de materiales que se utilicen (Meléndez, 2003; Pérez y col., 2008: 12). Según Leblanc y col. (2007), la calidad de un abono orgánico se determina a partir de su contenido nutrimental y de su capacidad de prever nutrimentos a un cultivo. Este contenido está directamente relacionado con las concentraciones de éstos en los materiales utilizados para su elaboración. 2.5.2 Abonos orgánicos sólidos 2.5.2.1 Composta La composta es un polímero equivalente al humus natural, resultante de la descomposición controlada de la materia orgánica. Una ampliación de este término incluye a los materiales orgánicos e inorgánicos que se obtienen para la descomposición y humificación de residuos agrícolas y agroindustriales mediante la acción de microorganismos aerobios (Valverde y col., 2004: 14). El proceso de compostaje se basa en la actividad de los microorganismos: bacterias, hongos y actinomicetos que viven en la materia orgánica y que son responsables de su descomposición. Para que estos microorganismos puedan desarrollar tal actividad, se necesitan ciertas condiciones óptimas de temperatura, humedad y oxigenación (Rodríguez y col, 2006; Luna, 2012: 25). El objetivo principal del uso de composta es suministrar los minerales en la nutrición inorgánica a los cultivos. La mineralización de la materia orgánica permite la liberación de minerales los cuales se absorben fácilmente por las plantas y favorecen la eliminación de patógenos, que podrían estar en la materia orgánica fresca y causar daño al cultivo. Se recomienda mantenerla a temperaturas relativamente altas, 60-80°C para asegurar que reduzcan los microorganismos patógenos (Gómez y Tovar, 2008: 29). De acuerdo a Hargreaves y col. 23 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM (2008), la calidad de las enmiendas orgánicas dependerá del origen de la materia prima, de las cantidades utilizadas y del procedimiento de compostaje, asimismo, su efectividad también dependerá de las propiedades físicas, químicas y biológicas del suelo donde sean aplicadas. Algunas ventajas de la composta: Rico en macro y micronutrimentos. Su contenido de coloides facilitan el intercambio catiónico planta-suelo, resultando una mejor absorción de nutrimentos por la planta. Fija los fertilizantes de origen químico en la superficie de sus partículas frenando su lixiviación, lo que permite reducirla aplicación de nutrimentos al cultivo al menos en 25%. Ayuda a la formación de partículas del suelo, mejorando así su agregación, capilaridad, aireación, grado de humedad, drenaje y sirve de freno a la erosión. Contienen microorganismos fijadores de nitrógeno y otros, que facilitan la absorción por las plantas del fósforo y el potasio contenidos en el suelo. Es un producto que puede ser almacenado. Su volumen es muy inferior al de los residuos que lo originaron, lo que facilita su transportación. 2.5.2.2 Vermicomposta La vermicomposta es un preparado orgánico de actividad anaeróbica de la flora intestinal de las lombrices sobre residuos vegetales, animales y lodos. El proceso tiene una duración de 70 a 90 días (Gómez y Tovar, 2008: 19), en la cual ciertos tipos de lombrices de tierra, como Eisenia foetida, Eisenia andrei y Lumbricus rubellus, transforman los residuos orgánicos en un subproducto estable denominado “vermicomposta”. Los residuos de la ganadería son una fuente de alimento común para las lombrices, aunque los residuos de los supermercados, los biosólidos (lodos de aguas negras), la pulpa de papel y de la industria de la cerveza, también se han utilizado en el proceso de vermicomposteo (Chable, 2007: 22). Las principales diferencias entre el compostaje y la producción de humus de lombriz consisten en que, el segundo constituye un producto de más calidad que la composta y se obtiene mediante transformaciones realizadas por anélidos seleccionados, mientras que la composta la ejecutan microorganismos. No obstante, la composta es mas fácil de producir, requiere menos fuerza de trabajo y es por tanto menos costosa. (Valverde y col., 2004: 15) 24 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM 2.5.2.3 Composta tipo Bokashi Según Soto (2003), el Bokashi es una mezcla de cereales, plantas oleaginosas y harinas de origen animal fermentados con variados microorganismos (bacterias, levaduras, actinomicetos y hongos del género Aspergillus y Penicillium). Es un abono orgánico de origen japonés que se produce en un tiempo más corto que la composta. Éste abono es una receta japonesa basada en volteos frecuentes y temperaturas por debajo de los 45-50°C, hasta que la actividad microbiana reduce al disminuir la humedad del material. Se considera un proceso de compostaje incompleto (Gómez y Tovar, 2008; 19), en donde se busca estimular las poblaciones microbianas en el abono mezclando materias primas de partícula pequeña como granza, gallinaza, carbón picado, suelo, entre otros, humedeciéndolas solamente al inicio y secando mediante volteos frecuentes, hasta estar listo en una o dos semanas (Soto y Meléndez, 2004: 92). El objetivo principal de Bokashi es activar y aumentar la cantidad de microorganismos benéficos en el suelo, pero también, se pretende nutrir el cultivo y suplir alimentos (materia orgánica) para los organismos del suelo (Gómez y Tovar, 2008: 29). 2.5.3 Abonos orgánicos líquidos Los caldos trofobióticos son preparados orgánicos producto de la fermentación anaeróbica (parcialmente de tipo alcohólico) de estiércol fresco y de bovino y agua natural enriquecidos con minerales. Las fermentaciones en condiciones anaeróbicas incompletas liberan una serie de moléculas parcialmente degradadas que son las que finalmente constituyen los nutrimentos en los abonos. Según Vargas y Peña (2003), estos abonos pueden clasificar como: Caldo súper cuatro. Es un preparado que tiene como base el estiércol fresco de bovino, agua pura y una fuente de carbohidratos para su fermentación. Fermentación anaeróbica de boñiga de poligástricos. Es un preparado producto de la fermentación de jugos gástricos de animales, como bovinos o caprinos, en ausencia de aire se puede considerar como un subproducto de biogás. Purines e hidrolatos: Son preparados orgánicos con base en plantas medicinales y aromáticas y en algunos casos con residuos de animales y maleza. 25 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Caldo tipo agroplus: Es un caldo de microorganismos mantenidos en un medio líquido contenido en recipientes de materiales inertes y alimentados con un sustrato natural a partir de proteína animal y vegetal. Caldo M4 o agroplus sin oxígeno: Es un preparado orgánico con una serie de microorganismos especializados en la transformación de la materia orgánica y el aporte de algunos nutrimentos. Caldo M3 o agroplus con oxígeno: Este caldo requiere de una cepa generada con microorganismos específicos como las bacterias fotosintetizadoras, proteína vegetal, lactobacilos y melaza. 2.6 Ventajas y desventajas del uso de biofertilizantes El uso de biofertilizantes representa una importante alternativa para limitar el uso de fertilizantes químicos, reduciendo su negativo impacto ambiental y económico y mejorando la productividad de los cultivos. Son componentes vitales en los sistemas sustentables, ya que constituyen medios económicamente atractivos y ecológicamente aceptables para reducir los insumos externos, como son el uso de fertilizantes químicos, y mejorar la cantidad y calidad de los recursos internos, aquellos que están presentes en el suelo, mediante la utilización de microorganismos debidamente seleccionados por los centros de investigación relacionados con la agricultura, tomando en cuenta su alta eficiencia e inocuidad, además pueden ser generados a partir de recursos locales y tener carácter endógeno (Chirinos y col., 2006: 29). De ésta manera se puede optimizar la actividad de los microorganismos y que esto se traduzca en mayores ganancias para el agricultor y mejoras al ambiente (Armenta y col., 2010: 54). Otro aspecto importante de resaltar sobre la aplicación de estos productos es su excelente potencial de uso en los procesos relacionados con la recuperación y rehabilitación de suelos marginales y escaso potencial productivo por su limitada fertilidad (Ferrera y Alarcón, 2001: 15). Por su parte los productos derivados del composteo se pueden considerar una solución a la problemática planteada en explotaciones agrícolas y forestales, ya que en suelos cultivables la adición de enmiendas orgánicas se utiliza entre otras cosas para mejorar la fertilidad y las propiedades del suelo, tales como la agregación, capacidad de retención de agua y efecto residual de herbicidas y productos fitosanitarios (Millaleo y col., 2007: 27). Una ventaja que presentan los fertilizantes inorgánicos, es que son de 20 a 100 veces más concentrados de elementos básicos como nitrógeno, fósforo y potasio, comparados con abonos 26 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM orgánicos, pero si éstos se toman en un inicio como un complemento a la fertilización química se evitará tener pérdidas en la producción de cultivos y a la vez se podrá tener una visión de sustituir el uso de fertilizantes químicos a mediano o largo plazo, dependiendo de la respuesta que se tenga sobre el cultivo. Por lo que el uso de biofertilizantes, puede hacerse inicialmente como un complemento a la fertilización química, y posteriormente disminuir la fertilización, ya que si se cambia el uso de fertilizantes químicos por el uso de biofertilizantes, sin antes tomar en cuenta las condiciones del suelo y la respuesta que presenta el cultivo al ser tratado con ciertos microorganismos, se corre el riesgo de tener pérdidas de producción en los cultivos. En trabajos como el reportado por Khalil y col. (2000), quienes estudiaron la respuesta de Dondonea viscosa L. inoculada con diferentes cepas de micorriza arbuscular y fertilización química, bajo condiciones de invernadero, las micorrizas produjeron altos rendimientos de biomasa aérea, semejante a la fertilización química y en comparación a las plantas testigo, es decir que la micorriza arbúscular suple de manera favorable la fertilización fosfatada.Klironomos y col. (2002), observaron que de las ocho monocepas que ellos usaron en su experimento Rhizophagus intraradices presenta mayor % de colonización, tanto al usar sólo esporas, como al usar otros propágalos como hifas extraradicales y raíces infectadas. En los trabajo realizados por Sánchez y col. (2008) y Castro (2012), en trigo y sorgo respectivamente, Rhizophagus intraradices no mostró efectos positivos sobresalientes. Por lo que es importante destacar que se ha demostrado que no todos los hongos son capaces de colonizar la raíz con propágulos tales como esporas, micelio extraradical y raíces infectadas por HMA, ya que existen evidencias como las que presentaron Klironomos y Miranda (2002), de las diferentes estrategias de colonización entre las familias y géneros de micorriza arbuscular. Es por eso que la respuesta de los HMA, depende también de la planta hospedera, las condiciones del suelo, entre otros factores para obtener resultados satisfactorios. Jerez y col. (2004) mencionan que las plantas que recibieron inoculación micorrízica resultaron tener mayor altura que las no micorrizadas en Ocimun basilicum L.. Existen otros trabajos como el que presentó Hernández (2013) en albahaca, utilizando un sustrato y un inóculo de HMA, la respuesta no es muy favorable en las características agronómicas, pero al combinarlo con vermicomposta o utilizando solo vermicomposta los resultados son favorables, y menciona que los HMA favorecieron el desarrollo radical y la vermicomposta favoreció el desarrollo de la parte aérea de la planta. 27 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM En diferentes experimentos se ha comprobado que se tienen mejores resultados cuando la micorriza arbúscular es combinada con algún otro biofertilizante o fertilización química, como lo menciona Sánchez y col., (2000) que HMA junto con Azospirillum brasilense favorecieron el rendimiento de grano seco en tres genotipos de maíz. Aguas 2000 demostró la interacción entre el nivel de vermicomposta y la inoculación micorrízica, en el área foliar y peso seco, donde se obtuvieron incrementos con 12% de vermicomposta y la inoculación de Glomus spp Zac-19, sin embargo los resultados dependen de factores como el tipo de suelo, planta hospedera, biofertilizante usado, entre otros. 28 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL Evaluar el efecto de la inoculación de Rhizophagus intraradices y la aplicación de composta en la producción de albahaca (Ocimun basilicum L.) para maximizar su rendimiento en un suelo de Texcoco Estado de México, bajo condiciones de invernadero. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: Determinar las propiedades físicas y químicas del suelo con y sin composta. Analizar el efecto de Rhizophagus intraradices y la aplicación de composta sobre las características agronómicas y la producción de albahaca. Estimar el % de colonización micorrízica, en plantas de albahaca de los diferentes tratamientos, para conocer el comportamiento de Rhizophagus intraradices y los hongos micorrizicos nativos sobre el cultivo de albahaca. Cuantificar el número de esporas para conocer el efecto de Rhizophagus intraradices, los hongos micorrizicos nativos y la composta vegetal sobre la producción de albahaca. Comparar los tratamientos con composta y la inoculación de Rhizophagus intraradices, con el fin de determinar el mejor tratamiento en la cultivo de albahaca. 29 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Justificación Actualmente, en comunidades de Texcoco Estado de México las prácticas tradicionales de agricultura se han ido perdiendo, ya que la agricultura se ha visto influenciada por la modernización del campo, que promueve el uso de agroquímicos y maquinaria agrícola, donde se requiere una elevada aplicación de fertilizantes químicos y pesticidas, lo que implica no solo un costo monetario, sino que contaminan suelo y agua. Además la especialización de los cultivos en algunos productos comerciales, ha hecho poco diverso el sector agrícola de ésta zona, por lo que es importante buscar cultivos alternativos para diversificar el sector agrícola haciéndolo mas competitivo. A nivel mundial, el cultivo de plantas medicinales ha tenido un gran interés en los últimos años debido a su uso como materia prima en la industria farmacéutica, cosmetológica y alimentaría. A pesar de ésto, el cultivo de estas plantas medicinales en México, aún no es muy difundido y son pocos los trabajos que se hacen en relación a plantas medicinales y biofertilizantes. Por lo que es importante generar proyectos que promuevan el cultivo de plantas medicinales de manera ecológica, pero a la vez generan un alto rendimiento, ya que a pesar de que demandan altos rendimientos de material vegetal, el uso de pesticidas y fertilizantes químicos no es recomendable ya que contaminan suelo y agua. Por otra parte el rendimiento de material vegetal se puede incrementar con la utilización de Hongos Micorrizico Arbusculares los cuales facilitan nutrimentos a las plantas, especialmente los poco móviles como nitrógeno y fósforo. Asimismo los abonos orgánicos aumentan la fertilidad del suelo y su actividad biológica, pero no dañan el ambiente. Por lo que se considera que la inoculación de hongos micorrizicos arbusculares y la composta pueden ser una buena opción para alcanzar altos rendimientos de material vegetal en Ocimun basilicum L., donde a la vez se vean mejoradas las propiedades físicas y químicas del suelo. Además, el cultivo de ésta planta puede ser una alternativa para diversificar el sector agrícola de ésta zona. 30 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Hipótesis Al inocular con Rhizophagus intraradices y composta vegetal cultivos de albahaca (Ocimun basilicum L.), se verá incrementado el rendimiento del material vegetal de ésta planta. 31 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM Método Localización de la zona de muestreo El trabajo de campo se realizó en la comunidad de San Diego, municipio de Texcoco, Estado de México localizada en la zona oriente del Valle de México. El muestreo, se efectuó en una parcela de ésta comunidad, situada entre el meridiano 98° 51’ 49.90’’ de Longitud Oeste y el paralelo 19° 29’ 31.36’’ de Latitud Norte, a una altitud de 2298 m. (Figura 3). Para evaluar las propiedades del suelo, se realizó un muestreo en zig-zag obteniendo muestras a una profundidad de 20 cm de la capa arable de la parcela, eligiendo al azar un punto de partida en el área seleccionada del terreno (una hectárea). Figura 3 . Zona de muestreo a) Ubicación del terreno y el invernadero (Google earth, 2014), b) Parcela. En total se obtuvieron 15 submuestras, las cuales se mezclaron para obtener una muestra compuesta de la cual se tomaron 2 kg de suelo, que se trasladaron al laboratorio para su análisis A partir de los mismos puntos de muestreo, se obtuvieron 140 kg de suelo para el establecimiento de las unidades experimentales en invernadero. El suelo se colocó en bolsas de polietileno negro con capacidad de 5 kg, a catorce bolsas se les colocó suelo de la parcela, y a otras catorce se les adicionó 10% de composta. A partir de las muestras de suelo colectadas y de las macetas con composta, se tomaron 500 g de cada una, para realizar el conteo de esporas de acuerdo al método de tamizado y decantado en húmedo citado por Ferrera y col., 1993. a b N 32 Facultad de Estudios Superiores Zaragoza UNAM El resto del suelo se secó al aire sin exposición directa a los rayos solares, una vez seco se tamizó con una malla de 2 mm de diámetro para realizar las determinaciones físicas y químicas (Cuadro 1, Figura 4): Cuadro 1. Métodos para la evaluación de las propiedades físicas y químicas de suelo. Figura 4. Análisis de
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