Estudio-aero-biologico-de-la-micobiota-en-el-aire-de-Ciudad-Universitaria-UNAM-Mexico

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Aprendiendo Biologia

23/7/2022

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Biología

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO

FACULTAD DE CIENCIAS

ESTUDIO AERO-BIOLÓGICO DE LA
MICOBIOTA EN EL AIRE DE
CIUDAD UNIVERSITARIA, UNAM-MÉXICO

T E S I S

QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE:
B I Ó L O G A

P R E S E N T A :

JULIETA VEGA AVILA

DIRECTOR DE TESIS
DRA. LAURA ROSIO CASTAÑON OLIVARES

Ciudad Universitaria, Cd. Mx., 2019

UNAM – Dirección General de Bibliotecas
Tesis Digitales
Restricciones de uso

DERECHOS RESERVADOS ©
PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL

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del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México).
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mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro,
reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el
respectivo titular de los Derechos de Autor.

Hoja de Datos del Jurado
1. Datos del alumno
Vega
Avila
Julieta
55 13 37 29 29
Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Ciencias
Biología
311043851

2. Datos del asesor
Castañón
Olivares
Laura Rosio

3. Datos del sinodal 1
Dr
Sigfrido
Sierra
Galván

4. Datos del sinodal 2
M en C
Guadalupe
Vidal
Gaona

5. Datos del sinodal 3
Dra
Edith
Sánchez
Paredes

6. Datos del sinodal 4
Biól
Elva
Bazán
Mora

7. Datos del trabajo escrito
Estudio aero-biológico de la micobiota
en el aire de Ciudad Universitaria, UNAM-México
65 p.
2019

DEDICATORIA

A mi familia por su paciencia y apoyo incondicional

A Misael por cada momento que paso a mi lado apoyándome y ayudándome

A la doctora Laura Castañón por siempre tenerme paciencia, ayudarme en todo, siempre
creer en mí, brindarme su amistad y apoyo

AGRADECIMIENTOS

A la Universidad Nacional Autónoma de México y a la Facultad de Ciencias por
permitirme descubrir, aprender y conocer el mundo de la ciencia y todos los roles que juega
en la vida.

A la Facultad de Medicina y al laboratorio de Micología por permitirme y brindarme el
apoyo para realizar este proyecto de investigación.

A mi directora de Tesis la doctora Laura Rosio Castañón Olivares, por su apoyo
incondicional y paciencia para que este trabajo se llevara a cabo a pesar de todas las
dificultades presentadas.

Al geógrafo Enrique Reyes Lira por su total ayuda y disposición en la realización de todo el
proyecto.

A la universidad y sus instituciones que me prestaron su apoyo e instalaciones

Al programa de Apoyo a Proyectos de Investigación e Innovación Tecnológica (PAPIIT)
por la beca que me otorgo en el proceso mediante el proyecto IN211115 denominado
“Estudio eco-epidemiológico en dos zonas endémicas de coccidioidomicosis en México
(Valle de las Palmas, Baja California y Caborca, Sonora)”

CONTENIDO

RESUMEN 6

INTRODUCCIÓN
Aerobiología 7
Bioaerosoles 8
Climas 10
Área de estudio 11
Muestreadores 12
Impacto en la salud 14
Espectrometría de masas 18

ANTECEDENTES 20

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 22

JUSTIFICACIÓN 23

OBJETIVOS 24

MATERIALES Y MÉTODOS 25

RESULTADOS 33

DISCUSIÓN 57

CONCLUSIONES 59

PERSPECTIVAS 61

LITERATURA CITADA 62

RESUMEN

La aerobiología es la ciencia encargada del estudio de las partículas y los microorganismos
suspendidos en la atmósfera, entre los cuales se encuentran los hongos. Los géneros
fúngicos más frecuentemente reportados en estudios aerobiológicos son Alternaria,
Cladosporium, Penicillium y Aspergillus. La presencia, cantidad y diversidad de los hongos
en la atmósfera depende de varias características ambientales como la cercanía a la fuente
productora, altura y clima.
Este trabajo tuvo como objetivo conocer e identificar la diversidad de hongos presentes en
diferentes puntos del campus de la Universidad Nacional Autónoma de México en la
Ciudad de México.
Se muestrearon 16 diferentes puntos en Ciudad Universitaria (C.U.), con una extensión de
7.3 km
2
. La toma de muestras de aire, se realizó con un equipo automatizado de tipo
ciclónico marca Burkard® que consiste en un carrusel con ocho tubos Eppendorf
colectando muestras en estos viales a una velocidad de 16.5 L/min; las cuales fueron
cultivadas en agar dextrosa Sabouraud. Los hongos aislados, se identificaron por medio del
estudio de la morfología macroscópica y de estructuras microscópicas, además del uso de
un método espectrométrico para la identificación de proteínas. Se realizó una encuesta a
estudiantes universitarios para tratar de estimar empíricamente, la asociación entre las
esporas de hongos en el aire de C.U. y la presencia de alergias en las personas.
Se encontraron seis diferentes géneros fúngicos: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium,
Penicillium, Monilia, Rhodotorula y colonias constituidas de formaciones miceliares que
no producen esporas (micelio estéril).
Los resultados obtenidos muestran poca diversidad fúngica en el aire de C.U., pero es un
primer paso para posteriormente, investigar el impacto que tiene la presencia de éstos
hongos en la salud de las personas que estudian y trabajan en este campo universitario.

INTRODUCCIÓN

Aerobiología y los microorganismos suspendidos

El estudio de los microorganismos del aire se inicia en el siglo XIX pero fue hasta 1930
cuando el científico Meier describe y acuña por primera vez el termino aerobiología de una
manera simple como los microorganismos transportados de manera pasiva en el ambiente.
En 1975 el científico Pathirane describe de manera más dinámica a la aerobiología que
comprende liberación, retención, dispersión, deposición e incidencia atmosférica de polen y
esporas
1
; actualmente la aerobiología se puntualiza como “la disciplina que se encarga del
estudio de los organismos vivos aerotransportados, definiéndola de manera integral y
dinámica como una ciencia multidisciplinaria que comprende la liberación, retención,
dispersión, deposición e incidencia atmosférica de los organismos y partículas biológicas
en la atmósfera, así como su repercusión en el entorno”.
2

La aerobiología ha ido cubriendo cada vez más campos y aplicaciones científicas,
necesitando de la cooperación de diversas áreas de conocimiento (medicina, física,
botánica, zoología, ecología, etc.) y dentro de esta disciplina se definen diferentes campos
siendo uno de ellos la aeromicrobiología, que estudia losmicroorganismos transportados
por el aire, una de las ramas que estudia la variación temporal y espacial de esporas y
propágulos fúngicos, así como la influencia de los factores que afectan dichas variaciones
se le denomina aeromicología.
1

La relación de los hongos con el aire y la atmósfera tiene repercusiones muy importantes ya
que estos organismos son causantes de enfermedades alérgicas e infecciosas en el humano
y otras especies animales. En medicina, los estudios aeromicológicos tienen un interés
especial en el terreno epidemiológico ya que el aislamiento de los microorganismos a partir
del aire, nos indica la distribución y diversidad de agentes biológicos que pudieran resultar
dañinos para otros organismos.
3

Bioaerosoles

Se estima que del 5-50% del número total de partículas en la atmosfera, son aerosoles
biológicos primarios (por sus siglas en inglés primary biological aerosols PBA’s) que
miden > 0.2 µm de diámetro, estos PBA’s pueden ser variados como bacterias, ácaros,
pólenes, virus, esporas de hongos, quistes de protozoarios, huevos de helmintos,
fragmentos de biopelículas.
Por lo anterior, los bioaerosoles se definen como contaminantes de procedencia biológica y
están constituidos por partículas de todo tipo, desde microorganismos completos, en
fragmentos o moléculas de tamaño grande (por ejemplo proteínas, azucares o lípidos).
4

Para detectar, recuperar y caracterizar específicamente los bioaerosoles dentro de una
población mixta de partículas en el aire, es importante conocer algunas de sus propiedades.
Los bioaerosoles comparten ciertas características que les permiten ser detectados y
categorizados como partículas biológicas, y también tienen especificidades que permiten la
diferenciación. Por razones epidemiológicas y ecológicas, las categorías principales y más
estudiadas de bioaerosoles son el polen, los hongos, las bacterias y los virus.
4

Hongos

Los hongos son microorganismos eucariontes unicelulares o multicelulares, es decir, tienen
una organización intracelular compleja con un núcleo bien delimitado que contiene su
material genético y varios tipos de organelos. Probablemente aparecieron hace 1.5 billones
de años y alrededor de 100.000 especies han sido descritas.
5

Los hongos son organismos ubicuos en el medio ambiente: en plantas, suelo, animales,
agua, interiores, exteriores, etc. La mayoría de ellos son saprófitos significa que viven en
organismos muertos como plantas o animales en descomposición y en sustancias orgánicas,
como alimentos, papel, y telas. Por lo tanto, la presencia de hongos en el aire tiene muchas
consecuencias epidemiológicas, agrícolas y ecológicas, así como impactos meteorológicos.
5

La clasificación de hongos reportados más frecuentemente en el ambiente
6
:

Microorganismos y su repercusión en el ambiente

Los microorganismos pueden llegar a ser capaces de crear estructuras especializadas que
les ha permitido resistir y sobrevivir en el aire. Son capaces de dispersarse en diferentes
ambientes gracias a las corrientes de aire, las cuales se encargan de recoger los
microorganismos presentes en un lugar y ser aerotransportados y depositados en otros
sitios.
7

Son capaces de dispersarse en ambientes exteriores e interiores gracias a estas corrientes de
aire, las cuales se encargan de recoger estos microorganismos presentes en otros ambientes
naturales como el suelo, el agua, las plantas. Además, algunas actividades industriales,
comerciales, sociales y de movilidad vial han contribuido a la producción de desechos
biológicos, físicos y químicos, emitiendo material particulado ayudando a la dispersión de
éstos.
7

Se han realizado investigaciones que han demostrado la presencia de microorganismos
bacterianos y fúngicos en el aire los cuales pueden causar patologías en plantas, en
animales y en el ser humano; tal es el caso de Staphylococcus aureus, Pseudomonas sp.,
Aspergillus spp., Fusarium sp., entre otros. Según lo anterior, se han reportado
Reino: Fungi
Phylum:
Ascomycota
Subphylum:
Pezizomycotina
Clase:
Dothideomycetes
Orden:
Pleosporales

Familia:
Pleosporaceae

Género:
Alternaria
Orden:
Capnodiales
Familia:
Davidiellaceae

Género:
Cladosporium
Clase:
Eurotiomycetes
Orden:
Eurotiales
Familia:
Trichocomaceae
Género:
Aspergillus
Género:
Penicillium
Clase:
Leotiomycetes
Orden:
Helotiales
Familia:
Sclerotiniaceae

Género:
Monilia
Phylum:
Basidiomycota
Subphylum:
Pucciniomycotina
Clase:
Microbotryomycetes
Orden:
Sporidiobolales
Familia:
Sporidiobolaceae

Género:
Rhodotorula
10

enfermedades como asma, bronquitis, pulmonías, neumonías que afectan especialmente las
vías respiratorias y otras patologías como infecciones cutáneas.
7

Clima

El clima está determinado por diferentes factores, entre los que se encuentran la altitud
sobre el nivel del mar, la latitud geográfica, las diversas condiciones atmosféricas y la
distribución existente de tierra y agua. Por su temperatura; se encuentran en México dos
tipos de clima: el cálido y el templado, dependiendo la humedad: húmedo, subhúmedo y
seco. En la Ciudad de México (Fig. 1) el clima predominante es el templado subhúmedo.
8

Figura 1. Mapa de la república y ampliación de la ciudad de México.
9

La importancia de los efectos de elementos como vegetación, suelo, relieve y otros
instalados a la mano del hombre como son: la presencia y ubicación de los edificios, la
11

pavimentación, la deforestación y otros, todos estos factores propician que dentro de una
misma región climática exista una diversidad de microclimas denominándose como área
mesoclimática.
3
Este es el caso del campus Ciudad Universitaria, UNAM (C.U.) cuyo
medio físico no es igual al de las zonas contiguas, el clima de la C.U (Fig.2), como en la
Ciudad de México, es de tipo templado subhúmedo, tiene una extensa área verde y un
amplio bosque de recreación. La delegación Coyoacán tiene los niveles de ozono más altos
los cuales se registran en concentraciones de más de 100 puntos IMECA; es una región
húmeda y con mayor frecuencia de nublados en la estación lluviosa, la precipitación
alcanza un promedio anual de 900 a 1,100 mm.
5

Figura 2. Ubicación de Ciudad Universitaria en la Ciudad de México y diferentes climas
8

Flujo de aire en Ciudad de México

La dirección del aire en la Ciudad de México es predominantemente norte-sur y de
aproximadamente 50 km en el sentido este-oeste. La Ciudad se encuentra rodeada por
montañas hacia el sur-este y sur mientras que por el norte y norte-este las elevaciones son
menores.
10

Muestreadores de aire

Los microorganismos pueden ser transportados rápidamente, en forma de bioaerosoles, a
través de grandes distancias con el movimiento del aire que representa el mejor camino de
dispersión. Existieron diferentes propósitos para el estudio del aire (enfermedades,
epidemias), fue así que los primeros investigadores iniciaron con métodos muy simples
para su estudio por ejemplo el que consistía en explorar el aire con un portaobjetos con un
líquido viscoso como la glicerina, el aeroscopio sustituyó con ventaja a estos métodos
antiguos.
11

A principios del siglo XIX se diseñaron los primeros sistemas de muestreo volumétrico del
aire. El bacteriólogo francés Pierre Miquel (1850-1922) desarrolló el primer colector capaz
de succionar un volumen de 20 litros de aire por hora, realizando el primer muestreo largo
y periódico de la atmósfera con métodos volumétricos, concluyendo que el número de
microbios en el aire variaba enormemente en el mismo sitio a diferentes horas, estaciones o
altitud. Miquel muestreó en diferentes lugares del mundo el contenido de esporas de hongosen el aire y estableció los parámetros de variación estacional y diaria de éstos.
Posteriormente a partir de este evento, varios autores empezaron a desarrollar sistemas y
diseños experimentales mejor formulados y para poder llegar a resultados que dieran un
avance al conocimiento de la Medicina y el efecto del aire en la salud.
12

May en 1945 desarrolló un captador en cascada en cuatro fases, mientras que poco después
Hirst 1952 inventó y describió el captador volumétrico automático de muestreo continuo.
11
. Su importancia de este último radica en varios aspectos como la frecuencia de muestreo
13

de aire, eficiencia de recolección (que por lo general varía con el tamaño de las partículas),
el consumo de energía, la duración del período de la muestra, el período en que se pueden
dejar sin vigilancia y la facilidad de procesamiento de las muestras, sin dejar de mencionar
que en la actualidad sigue siendo el método más utilizado para estudios polínicos y de
esporas en ambientes exteriores.
13

El captador volumétrico de succión, basado en el principio del impacto que consta de un
orificio de entrada, de un soporte circular, sobre el que quedan adheridas las partículas. El
soporte circular se encuentra conectado a un reloj que posibilita el movimiento y que cada 2
mm representa 1 hora. Este captador es el más utilizado en los estudios aerobiológicos.
13

En el cuadro 1 se muestra un resumen de los método más utilizados para efectuar un
muestreo de aire.

Cuadro 1. Principales métodos de muestreo de aire.
13

TIPOS SUBTIPOS EJEMPLOS
De precipitación Gravimétrica
Portaobjetos
Placas de Petri
Captador Durham
Captador Tauber
De impacto
Succión Hirst
Cascada Andersen
Inerciales Rotorod
Ciclónicos Burkard
De filtración
Filtros sólidos
Captador Cour
Filtros de fibra
Filtros por membrana
Filtros por cassete
Medios líquidos
Captador McLeod
Multi-Stage liquid impinger

Muestreadores de precipitación
 Ventaja: Son muy simples y fáciles de utilizar, ya que solo se colocan en el medio
ambiente y por gravedad las partículas caen en la placa.
 Desventajas: No se pueden calcular concentraciones. Sólo dan una idea de la
presencia y abundancia de las partículas.
14

Muestreadores de impacto
 Ventajas: Con estos equipos ya se pueden calcular concentraciones, y se puede
obtener más concentración de partículas.
 Desventajas: Tienen el inconveniente de conseguir que la corriente de aire que entra
al muestreador sea igual al flujo de aire aspirado por el motor.
Muestreadores de filtración

 Ventajas: Son fáciles de utilizar como los de precipitación, solo que cambia la cinta
o el porta objetos por una matriz liquida.
 Desventajas: Radica en que su eficacia varía con la velocidad del viento y no es
posible conocer las concentraciones polínicas diarias.

Muestreadores de tipo ciclónico.

Dentro de este tipo, destaca el Burkard®, el equipo succiona 16.5 L/min e integra un
carrusel con ocho tubos Eppendorf de 1.5 mL en los cuales se depositan partículas menores
a 1 µm.

Su funcionamiento se basa en que las masas de aire son forzadas a moverse en trayectorias
de rotación en espiral y las partículas resultan discriminadas por la fuerza centrífuga
generada. Colecta las partículas suspendidas con un flujo de aire de 16.5 L/min a través de
una placa perforada con 100 orificios. Se recomienda el uso de este equipo para la colecta
de partículas < 5 µm de diámetro, con una eficiencia mayor al 95%.

Impacto en la salud

Los bioaerosoles en ambientes externos e internos se han relacionado con diferentes
enfermedades incluyendo infecciones, toxicidad e hipersensibilidad. La cantidad de estos
bioaerosoles presentes en el ambiente y en los suelos hace que el impacto en la salud varía
de ser inocuos, a potencialmente infectantes o a patógenos definitivos. Las enfermedades
por estos bioaerosoles se han reportado en ambientes internos y se ha comprobado que hay
enfermedades que se generan directamente por el contacto de las partículas; sin embargo,
no se puede explicar de la misma manera con los ambientes externos.
4

Hay diferentes factores que influyen en el impacto de estas partículas en la salud como: el
tamaño, la naturaleza química, la concentración, el tamaño de estas partículas y el tipo de
penetración en el tracto respiratorio el sistema inmune del posible afectado.
14

Las partículas se clasifican en diferentes subcategorías de acuerdo a su diámetro y la región
del tracto respiratorio donde se depositan. Las partículas que miden de 100-200 μm se
depositan únicamente en el tracto respiratorio superior y se consideran inhalables, las
partículas que miden aproximadamente 10 μm de diámetro tienen una deposición en las
vías relacionadas con la laringe y bronquiolos, finalmente las partículas menores o iguales a
3.5 μm de diámetro son depositadas en las terminales de los bronquiolos, los alveólos.
15

Diferentes organizaciones europeas como Réseau National de Surveillance Aérobiologique
(RNSA) y la Sociedad de Aerobiología Europea han observado que hay una estacionalidad
en la presencia de pólenes y de esporas de hongos en el otoño. Asimismo han reportado
esporas fúngicas con alto potencial alergénico de Alternaria, Cladosporium y algunos de la
familia Aspergillaceae, conclusión obtenida derivada de un estudio llevado a cabo con un
muestreador de tipo Hirts y con ayuda de microscopia. La RNSA hace muestreos
periódicos para identificar la asociación entre la presencia de hongos en el ambiente, la
aparición de casos alérgicos y la evolución e intensidad de síntomas alérgicos
(conjuntivitis, rinitis, asma, síntomas cutáneos).
4

Alérgenos fúngicos

Los hongos causantes de alergias principalmente pertenecen los phyla de Ascomycota y
Basidiomycota, el tamaño de las esporas varía entre 2 y 3 µm (Cladosporium, Aspergillus y
Penicillium) hasta 160 µm (Helminthosporium). El tamaño promedio se encuentra entre 2 y
10 µm, pero también se han encontrado esporas de 500 µm (Alternaria longissima).
Los mecanismos inmunológicos relacionados con alergias son de hipersensibilidad de los
tipos I, II, III y IV. El espectro de síntomas alérgicos causados por estas reacciones es muy
16

amplio, como rinitis, asma, dermatitis atópica (AD) y micosis broncopulmonares alérgicas
(ABPA).
Los géneros de hongos causantes de alergias más importantes son Alternaria, Aspergillus,
Bipolaris, Candida, Cladosporium, Epicoccum y Phoma para los Ascomycota; mientras
que Calvatia, Coprinus, Ganoderma, Pleurotus y Psilocybe son los géneros más
prominentes de Basidiomycota.
16

Alternaria
Entre los hongos asociados con trastornos alérgicos esta es una de las especies más
encontradas, predominantemente en el ambiente exteriores. La incidencia de sensibilización
en atópicos varía entre 3,6 y 39,4% dependiendo de la zona climática y la población
analizada. Se han identificado 13 alérgenos de A. alternata, la mayoría de estos alérgenos
son proteínas de mantenimiento intracelular.
16

Cladosporium
Las esporas aerotransportadas de C. herbarum son causa importante de alergia fúngica y se
pueden encontrar tanto en interiores como en exteriores. Se han identificado 14 alérgenos,
mientras que siete de ellos se han clonado como proteínas recombinantes, todos estos
alérgenos con una prevalencia de alrededor del 20%.
16

Aspergillus
Crece al aire libre en vegetación en descomposición o en interiores (por ejemplo, en
sistemas de aire acondicionado) y tiene la capacidad de liberar grandes cantidades de
pequeñas conidiosporas de 2–3 µm. Las especies en donde se han relacionado hasta 40
alérgenos en A. fumigatus.
16

Penicillium
Las especies de este género se han descrito como hongos comunes en interiores,
Penicillium puede causar asma atópicaen personas sensibles después de la inhalación de
17

sus esporas. Diferentes estudios mostraron que 80-93% de los asmáticos muestran una
reactividad de IgE a las serinas proteasas de 32 a 34 kDa de P. citrinum y P.
chrysogenum.
16

Rhodotorula
Rhodotorula mucilaginosa es una de las especies de levadura más frecuentemente
encontradas en nuestro medio ambiente. Algunas de las proteínas aisladas s ha observado
que tienen reacciones cruzadas con otras proteínas fúngicas y se ha observado una
sensibilidad del 21,4% en los pacientes.
16

Espectrometría de masas en micología

La espectrometría de masas (EM) en su formato MALDI-TOF (matrix- assisted laser
desorption ionization time-of-flight) ha provocado una revolución en los laboratorios de
microbiología clínica aportando rapidez y seguridad en las identificaciones microbiológicas
de los aislamientos clínicos. La identificación de las especies se realiza mediante estudios
enzimáticos, bioquímicos y estudios morfológicos en el caso de los hongos filamentosos.
Se ha utilizado con gran éxito en la identificación de levaduras, hongos filamentosos y
dermatofitos.

Para la identificación de los hongos diferentes investigadores han trabajado en la elección
del protocolo de extracción y de la matriz más adecuado, para solucionar todos estos
factores de variabilidad se han estandarizado las condiciones de crecimiento y preparación
de la muestra para los hongos filamentosos con el fin de construir unos “perfiles fúngicos”
y luego compararlos con las bibliotecas de MALDI-TOF.
17

Alanio y sus colaboradores en 2010 desarrollaron un simple y rápido protocolo que consiste
en depositar el material superficial (una mezcla en agua de las esporas y el micelio,
conidióforos recogidos de la superficie de las colonias del hongo filamentoso) directamente
sobre la placa de MALDI TOF sin subcultivar o preparar la colonia. El resultado fue una
18

correcta identificación en el 98,6% (138 de 140 aislados de Aspergillus) con el 100% de
especificidad.
18

Espectrometría de masas

Proteómica es el estudio a gran escala de la estructura y función de las proteínas. Las
técnicas proteómicas actuales, entre las cuales se encuentra la desorción/ionización láser
asistida por matriz e identificando iones por tiempo de vuelo, MALDITOF por sus siglas en
inglés, permiten confirmar la presencia o ausencia de una o más proteínas concretas e
inclusive identificar, con alta precisión mediante la comparación de datos almacenados en
bases específicas de datos de proteínas, al microorganismo asociado a las mismas.
19

MALDITOF es una técnica de análisis cualitativo, que básicamente comprende lo
siguiente
20
:
 Una fuente (matriz) para ionizar la muestra (analito) mediante una co-cristalización.
La matriz debe tener las siguientes características: fuerte absorción de radiación a la
longitud de onda del láser, buena capacidad de mezcla con el analito, baja
temperatura de sublimación.
20
 El uso de pulsos cortos de láser para dar lugar a la excitación e ionización del analito.
 El área irradiada, se calienta dando lugar a la desorción de los iones de fase sólida a
fase gaseosa
 Los iones se separan de acuerdo con su masa y su carga, por lo que el sistema debe
estar acoplado a un analizador de masas que mide muy precisamente el tiempo de
vuelo de cada ión, desde que son acelerados por el láser hasta que se impactan en el
detector.
 Un detector que reciba a los iones separados y como resultado produzca un espectro
específico para cada analito, que para su identificación, se compara con una base de
datos pre-existente.
19

Figura 3. Espectrometría de masas

ANTECEDENTES

Los hongos y sus estructuras de reproducción asexual y sexual están en el aire: levaduras,
conidios, esporangiosporas, ascosporas y basidiosporas, que se originan principalmente de
vegetación viva o muerta; las especies y concentración de estos propágulos en el aire varían
dependiendo de la hora del día, la estación del año, las condiciones ambientales, la
localización geográfica y la proximidad de sus fuentes productoras. Gran cantidad de estas
estructuras permanecen vivas suspendidas en el aire y son responsables de algunas
enfermedades en plantas, animales y en el humano.
21

El número de esporas en el aire en zonas templadas (urbanas, agrícolas o forestales) puede
variar entre 5,000 a 20,000 esporas/m
3
con predominio de ascosporas y basidiosporas, de
éstas últimas principalmente del tipo teliosporas. Por su parte, los hongos conidiales
contribuyen con gran cantidad de esporas en las regiones desérticas, cálido-húmedas,
estepas y sabanas.
21

Méndez-Romero y Casas-Rincón 1968 en Maracaibo, Venezuela utilizando el método de
precipitación gravimétrica en 768 cajas de Petri, muestrearon el aire de cuatro diferentes
hospitales y el género aislado con alta frecuencia fue Aspergillus.
22

En 1986 López Martínez y colaboradores llevaron a cabo un estudio aerobiológico para
conocer la diversidad de hongos en el aire de la Ciudad de México. Utilizando la técnica de
precipitación en cajas de Petri (exposición por 10 minutos), muestrearon el aire de la ciudad
e identificaron con alta frecuencia hifomicetos de los géneros Alternaria y Penicillium. El
estudio menciona que las delegaciones Xochimilco y Coyoacán fue donde se observaron las
frecuencias más bajas de aislamientos.
23

Calderón y colaboradores en 1995, efectuaron un estudio aerobiológico de ambientes
intramuros y extramuros, en delegación Coyoacán, utilizando dos marcas de equipos
colectores de aire, Andersen® y Burkard®. Reportaron a los géneros Alternaria,
Cladosporium y Penicillum en gran concentración.
24

En 2013 Rocha-Estrada y colaboradores utilizaron un colector volumétrico tipo Hirst, para
muestrear el aire del campus Ciudad Universitaria en Monterrey, centro neurálgico de la
Universidad Autónoma de Nuevo León. El colector fue ubicado en un sitio distante a la
influencia de plantas arbóreas aproximadamente 20 metros y se colocó a una altura de 16.5
metros sobre el nivel del suelo. Se identificaron esporas de Alternaria, Cladosporium y
Curvularia.
21

En ese mismo año Rosique Gil y colaboradores hicieron un estudio en Villahermosa,
Tabasco, utilizando un muestreador de impacto en cascada de seis etapas, Andersen®. El
equipo fue colocado a 10 metros de altura sobre el nivel del piso. Se recuperaron esporas de
Alternaria, Cladosporium, Monilia y Aspergillus siendo este último género, el más
abundante.
25

En el año del 2014 Maldonado y colaboradores en León, Guanajuato, efectuaron un
muestreo para conocer la calidad del aire en dos medios hospitalarios, utilizando el equipo
Millipore Air Tester, Merck® y aislando en alta frecuencia Fusarium y Penicillium.
5

En Colombia, Méndez-Puentes en 2015 colaboradores realizaron con dos equipos de
muestreo diferentes (sedimentación en placa y un bioimpactador M Air T de Millipore) el
muestreo de aire que se llevó a cabo en la zona urbana de la ciudad de Neiva, durante el
periodo de la época de sequía y de lluvias, para observar diferencias, el género aislado de
mayor frecuencia fue Aspergillus sp. y en menor frecuencia Aureobasidium sp.
Concluyendo que en la época de sequía había mayor carga de microorganismos y el uso del
bioimpactador refleja mejores resultados que el otro método.
26
22

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Internacionalmente, los estudios aeromicológicos se han incrementado debido a la
importancia de los hongos en el desarrollo de la agricultura y la medicina. De esos estudios
las especies reportadas en el aire se agrupan en 80 géneros, dentro de los cuales destacan:
Alternaria, Aspergillus, Botrytis, Cladosporium, Curvularia, Epicoccum, Fusarium,
Helminthosporium,Mucor y Penicillum, todos ellos organismos que potencialmente
pueden ser especies responsables de causar enfermedades.

La Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que 300 millones de personas en el
mundo son afectadas por asma y otros millones más por rinitis alérgica. México reporta la
rinitis alérgica (RA) en más de 36 millones de personas y la dermatitis atópica con
prevalencia que va en aumento y pueda afectar al 5% o 7% de la población general.

Las diferencias climáticas en la Ciudad de México entre el noreste, centro y sur favorecen
la existencia de un microclima en C.U. debido, a la presencia en esta zona de vegetación
natural, amplios jardines, construcciones de poca altura, poca contaminación, mayor
humedad, temperaturas bajas, nubosidad frecuente y buena ventilación.

A pesar de la difusión de la aerobiología, existen escasos estudios relacionados con la
presencia de hongos en el aire. Ciudad Universitaria es un lugar con variantes ambientales,
desde zonas muy urbanizadas hasta lugares muy poco perturbados, que permiten la
ubicación de diferentes hábitats, por lo que identificar a los hongos existentes en el aire,
permitirá conocer la diversidad y su distribución en este lugar.

JUTIFICACIÓN

En los ecosistemas, existen condiciones que son derivadas de las relaciones que se
establecen entre diferentes seres vivos, bajo ese escenario, se conoce que las alergias
respiratorias causadas por hongos y algunas micosis pulmonares, son adquiridas mediante
la inhalación de estructuras fúngicas suspendidas en el aire. Para conocer el impacto de la
micobiota contenida en los aerosoles en la presencia de enfermedad de las personas que
frecuentan C.U., es necesario conocer la diversidad micótica presente en éste singular
ambiente.

OBJETIVOS

General

 Cultivar, identificar y registrar la micobiota prevalente en el aire del campus
Ciudad Universitaria, UNAM.

Particulares

 Ubicar los puntos de muestreo.

 Biotipificar fenotípicamente los hongos aislados.

 Identificar proteínas fúngicas potenciales productoras de alergia.

 Investigar las diferencias, en cuanto a géneros, en los sitios muestreados.

 Conocer la presencia de alergias en algunos alumnos desde su entrada al
campus.

MATERIALES Y MÉTODOS

Lugares de estudio.

Las muestras fueron tomadas en aquellos lugares que cumplieron las siguientes tres
condiciones: una altura máxima de 15 m sobre el nivel del suelo, acceso a la azotea y
seguridad de la integridad del equipo de muestro.

Con la aplicación Google Earth®, se cuadriculó el área correspondiente a Ciudad
Universitaria (Fig. 4). Teóricamente, las medidas de los cuadrantes se escogieron
dependiendo de las áreas que abarcaran edificios (facultades, escuelas, institutos, oficinas
administrativas, etcétera). Se determinaron 100 cuadrantes y Mediante un Método Aleatorio
Simple se establecieron 30 sitios para el muestreo.

Posteriormente, se hizo una visita física, a cada uno de los sitios seleccionados para
discriminar aquellos sitios que no cumplieran con las condiciones establecidas.

Para tener acceso a los lugares del muestreo, se solicitó a la Secretaría Administrativa de la
Facultad de Medicina, intercediera con cada una de las administraciones de los edificios en
los cuales se colocaría el equipo para obtener las muestras de aire (Fig. 5).

La Secretaría Administrativa de la Facultad de Medicina, solicitó los permisos para ingresar
el equipo de aire, a cada uno de los responsables administrativos de los edificios en donde
se colocaría el equipo de muestreo de aire (Fig. 6). La confirmación de la anuencia de las
autoridades fue registrada mediante un documento escrito o por vía telefónica.

Figura 4. Área de Ciudad Universitaria. Indica los lugares escogidos de muestreo por
método aleatorio.
27

Figura 5. Carta de solicitud para acceso a los lugares de muestreo.
28

Figura 6. Ejemplo de una de las cartas enviadas a las facultades, institutos y centros de
investigación.
29

Colector de aire
Se utilizó un equipo volumétrico tipo ciclónico Burkard®

Figura 7. Muestreador tipo ciclón utilizado marca Burkard®.

Tiempos

Se efectuó el muestreo durante los meses de septiembre a noviembre del año 2016. Cada
día fue tomada la muestra de 24 h de un punto seleccionado diferente. Las muestras de aire
se mantuvieron guardadas a 4°C hasta su análisis.

Cultivo

Cada muestra obtenida del aire, se re-suspendió en 1000 µl de PBS estéril de donde se
realizaron diluciones 1:10, 1:100 y 1:1000 y se sembraron 20 µl de cada una de las
soluciones en agar dextrosa Sabouraud, BD® (ADS) por estría de aislamiento. Las
muestras cultivadas fueron revisadas diariamente.

Purificación

De cada una de las colonias crecidas en las placas de Petri, se tomó una muestra y fueron
nuevamente resembradas en ADS para efectuar su aislamiento y purificación.

Identificación

Una vez purificada cada colonia, se procedió a la identificación por morfología efectuando
microcultivos, tinciones y comparando las observaciones con manuales para hongos
anamórficos. Mediante este procedimiento, la identificación se hizo a nivel de género y en
algunos casos a nivel de especie.

MALDI-TOF

Para corroborar la identificación morfológica y conocer la presencia de proteínas de
superficie que pudieran relacionarse con procesos alérgicos, se llevó a cabo un ensayo
proteómico en algunas de las colonias obtenidas, utilizando la técnica de MALDI-TOF. Se
tomaron 250 mg de la colonia a analizar y se suspendieron en 5 ml de solución salina
isotónica estéril, se homogenizó mediante vórtex. Al día 0, 3 y 7, se tomaron 5µl de la
solución (analito) en cada ocasión. Para la cristalización de cada analito, se utilizaron dos
matrices: ácido alfa-ciano-4-hidroxicinámico (CHCA) y ácido sinapínico (SA).
Las muestras fueron colocadas en la placa de MALDI-TOF (Bruker Daltonics®) y los
espectros obtenidos fueron comparados con una base de datos preestablecida, para
identificar las proteínas.
31

Registro de las condiciones meteorológicas

Para conocer el estado del ambiente en los días de muestreo y descartar diferencias
significativas (debido a que los muestreos no fueron efectuados en un mismo mes), se
investigaron las siguientes variables meteorológicas: temperatura máxima, temperatura
mínima, precipitación y velocidad del viento, cuyos valores fueron obtenidos a partir de los
registros de dos estaciones, Centro de Ciencias de la Atmósfera y Colegio de Ciencias y
Humanidades Sur, ambas pertenecientes a la red patrocinada por el Programa de Estaciones
Meteorológicas del Bachillerato Universitario (PEMBU).
27
Se efectuó una evaluación estadística para conocer si había diferencias significativas entre
los meses del muestreo y asociar los resultados a la presencia de los hongos.

Impacto en la salud

Se realizó una encuesta, mediante un cuestionario de 10 preguntas (Fig. 7), aplicada en 50
estudiantes. El cuestionario incluyó preguntas relacionadas con datos demográficos y con
características clínicas asociadas a hipersensibilidad (alergias) durante su estancia en C. U.

CUESTIONARIO ALERGIAS EN CIUDAD UNIVESITARIA

Datos demográficos

1. Nombre:

2. Edad (en años):

3. Sexo: M F

4. Facultad dónde estudia o trabaja:

5. Tiempo (en años) asistiendo a Ciudad Universitaria: <2 3-4 <5

Datos clínicos

6. ¿Sabe si padece algún tipo de alergia?: SI NO

7. ¿De qué tipo?: RESPIRATORIAGÁSTRICA CUTÁNEA

8. Si padece alergias respiratorias ¿fue diagnosticado antes o después de su ingreso a
Ciudad Universitaria?: ANTES DESPUÉS

9. ¿Han aumentado la frecuencia o severidad de los signos o síntomas (enrojecimiento
de ojos, fluido nasal, estornudos, ojos llorosos, dolor de ojos, congestión nasal,
dolor de cabeza, etcétera) desde que asiste a Ciudad Universitaria? SI NO

10. ¿Sabe si su alergia es debida a algún hongo? SI NO

Figura 8. Cuestionario realizado a alumnos de la UNAM
33

RESULTADOS

Posterior a la visita física a cada uno de los sitios seleccionados, se observó que solo 16
sitios cumplían con las condiciones establecidas.

La Secretaría Administrativa de la Facultad de Medicina, solicitó los 16 permisos para
ingresar el equipo de aire a las siguientes facultades, institutos y centros del campus, en los
cuales se efectuó el muestreo en los días señalados entre paréntesis:

1. Centro de Ciencias de la Atmósfera (19 de septiembre)
2. Escuela Nacional de Trabajo Social (21 de septiembre)
3. Instituto de Investigaciones en Matemáticas Aplicadas y en Sistemas (IIMAS)
(26 de septiembre)
4. Instituto de Investigaciones Biomédicas (28 de septiembre)
5. Filmoteca (5 de octubre)
6. Centro de Exposiciones y Congresos (6 de octubre)
7. Centro Nacional de Prevención de Desastres (CENAPRED) (10 de octubre)
8. Unidad de Posgrado (12 octubre)
9. Facultad de Ciencias (13 de octubre)
10. Facultad de Arquitectura (17 de octubre)
11. Dirección General del Deporte Universitario (DGDU) (19 de octubre)
12. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia (20 de octubre)
13. Facultad de Derecho (24 de octubre)
14. Instituto de Investigaciones Jurídicas (26 de octubre)
15. Facultad de Odontología (27 de octubre)
16. División de Estudios de Posgrado e Investigación (DEPeI) en Odontología (7
de noviembre)

Se aislaron los siguientes géneros de hongos: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium,
Penicillum, Monilia, Rhodotorula y colonias con micelio estéril (cuadro 3).
34

CUADRO 3. RESULTADOS OBTENIDOS DE LOS 16 SITIOS MUESTREADOS
Muestra/
Sitio
Alternaria Aspergillus Cladosporium Penicillium Micelio estéril Rhodotorula Monilia
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16

Frecuencia en orden descendente: Monilia (15), Alternaria (13), Cladosporium (10), Rhodotorula (9), Penicillium (8) y Aspergillus (3)
Ausencia

Presencia
35

IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA

Alternaria chlamydospora (Mouchacca, 1973)
28

Figura 9. Colonia de apariencia vellosa en agar dextrosa Sabouraud a los tres días de
crecimiento. El color de la colonia madura va del verde olivo al marrón-negro y es cubierta
comúnmente por un vello blanco.
36

Figura 10. Examen microscópico (100x), teñido con azul lactofenol, mostrando micelio
septado y conidios multicelulares de color marrón (dematiáceo). El micelio es septado y los
conidios con septos transversales y longitudinales (dictioconidios). Conidióforos de
medidas 150µ de largo por 3-6 µ de ancho y de color café.

Aspergillus japonicus (Saito, 1906)
29

Figura 11. Colonia en agar extracto de malta, con tres días de crecimiento y pueden crecer
de 7-8 cm en 10 días. Apariencia granular en el centro y velloso en la periferia. Presenta
surcos radiales y zonación: la colonia madura es color de marrón obscuro a negro y la
colonia joven presenta vello color blanco.
38

Figura 12. Examen microscópico (100x) teñido con azul lactofenol mostrando conidióforos
hialinos, delgados, cenocíticos, vesículas (20-30µ) rodeadas por métulas, fiálides y conidios
(cabeza aspergilar biseriada). Conidióforos de entre 500-1000 µ por 5-10µ.
39

Aspergillus parasiticus (Speare, 1912)
29

Figura 13. Colonia en agar extracto de malta con cinco días de crecimiento y pueden llegar
a medir de 5-6 cm en 10 días. Aspecto aterciopelado que cubre la caja es una colonia plana
aterciopelada de color verde-amarillo, con las orillas blancas.
40

Figura 14. Examen microscópico (100x) teñido con azul lactofenol mostrando conidióforos
hialinos, vesículas (20-35µ) rodeadas por métulas, fiálides y conidios (cabeza aspergilar
uniseriada). Conidióforos de entre 300-700 µ por 10-12µ.

Cladosporium cladosporioides (Fres de Vries, 1952)
30

Figura 15. Colonia en agar dextrosa Sabouraud con seis días de crecimiento. Apariencia
aterciopelada, con surcos radiales y transversales y ligero abultamiento en el centro.
Presenta zonación: la colonia madura es color verde-olivo a marrón obscuro (hongo
dematiáceo) y la parte joven está representada por la coloración más clara en la periferia.
42

Figura 16. Examen microscópico (100x) teñido con azul lactofenol en donde se observan
hifas tabicadas con conidióforos (350µm) diferenciados, a partir de los cuales emergen
conidios (2-5 µ) unicelulares, ovalados dispuestos en cadenas lineales y ramificadas.
43

Penicillium sp.

Figura 17. Colonia en agar dextrosa Sabouraud de dos días de crecimiento. Aspecto de
polvoso ha aterciopelado de color verde-azul y zonación. La colonia es plana y uniforme en
su elevación.
44

Figura 18. Examen microscópico (100x) teñido con azul lactofenol en donde se aprecian
conidióforos gruesos, hialinos, septados, con ramas bifurcadas, bi- y tri-verticiladas,
fiálides y conidios.
45

Monilia sp.

Figura 19. Colonia en agar dextrosa Sabouraud de dos días de crecimiento con aspecto
flocoso (mucho aire entre la masa micelial), pero al tacto da la impresión de ser polvosa. Su
color va del blanco al rosado-salmón.
46

Figura 20. Examen microscópico (100x) teñido con azul lactofenol, mostrando hifas
hialinas, septadas.
47

Rhodotorula sp.

Figura 21. Colonias levaduriformes en agar dextrosa Sabouraud de un día de crecimiento,
lisas o con poca elevación, de aspecto suave, cremoso y con pigmento de rosado a rojo-
anaranjado por la presencia de pigmentos carotenoides.

Figura 22. (100x) tinción azul de algodón, donde se pueden observar células levaduriformes
de forma esférica a alargada.

Colonias con micelio estéril

Figura 23. Colonias desarrolladas en agar dextrosa Sabouraud. A. Colonia aterciopelada
con surcos y elevaciones y B. Colonia vellosa en el centro y granular en la periferia. Los
hongos formadores de estas colonias, microscópicamente no mostraron ningún tipo de
fructificación que ayudara a la identificación.
50

Condiciones meteorológicas

Los valores registrados de las variables meteorológicas, en los meses en que se llevó a cabo
la toma de muestras, se encuentran anotados en el cuadro 2, donde se observar las cuatro
variables para los dos centros Centro de Ciencias de la Atmósfera (CCA) y del Colegio deCiencias Humanidades plantel Sur (CCHS).

Para conocer si existían o no diferencias significativas en los tres meses de muestreo,
primero se aplicó la prueba de normalidad Kolmogorov-Smirnov, a través de la cual se
dedujo que la estadística a utilizar debía ser no paramétrica debido a que los valores de
(p<0.05) fueron menores y si había diferencias significativas por lo que se optó por la
prueba U de Mann-Whitney debido a que las variables no se comportan de manera normal.
Los datos obtenidos se muestran en los cuadros 3,4 y 5.
El análisis reveló diferencias significativas (p<0.05) entre septiembre-octubre en las
variables: temperatura mínima, precipitación y velocidad del viento. En septiembre-
noviembre las diferencias significativas se aprecian en las temperaturas máxima y mínima y
por último en octubre-noviembre hay diferencias significativas en todos los parámetros; sin
embargo, los datos registrados muestran que la presencia de Alternaria, Monilia,
Rhodotorula y colonias con micelio estéril, siempre fue frecuente ya que estuvieron
presentes durante el periodo de muestreo. Géneros como Aspergillus, Cladosporium y
Penicillium sólo se registraron en los meses de septiembre y octubre.

Cuadro 2. Condiciones meteorológicas tomadas en dos estaciones
Estaciones y meses/variables
CCA CCH
Sep Oct Nov Sep Oct Nov
Temperatura máxima (°C) 26.0 26.1 25.4 25.8 25.7 25.4
Temperatura mínima (°C) 11.1 8.0 5.7 10.3 7.1 5.6
Precipitación pluvial (mm) 118.2 14.8 63.2 1.6 0 62.3
Velocidad del viento (m/s) y
dirección
0.8
NW
1.0
NW
0.7
NW
1.1
NW
1.4
NW
1.1
NW
Red PEMBU 2017
51

Cuadro 3. Prueba de U Mann-Whitney para Septiembre-Octubre
Estadísticos de prueba

Temperatura
Máxima
Temperatura
mínima
Precipitación
Pluvial
Velocidad del
viento
U de Mann-Whitney 1704.500 757.500 1086.000 1140.000
W de Wilcoxon 3657.500 2710.500 3039.000 2970.000
Z -.797 -5.648 -4.967 -3.701
Sig. asintótica (bilateral) .426 .000 .000 .000

Cuadro 4. Prueba de U Mann-Whitney para Septiembre-Noviembre
Estadísticos de prueba
a

Temperatura
Máxima
Temperatura
mínima
Precipitación
Pluvial
Velocidad del
viento
U de Mann-Whitney 802.000 161.000 1642.000 1540.500
W de Wilcoxon 2632.000 1991.000 3472.000 3370.500
Z -5.239 -8.604 -.909 -1.367
Sig. asintótica (bilateral) .000 .000 .363 .172

Cuadro 5. Prueba de U Mann-Whitney para Octubre-Noviembre
Estadísticos de prueba
a

Temperatura
Máxima
Temperatura
mínima
Precipitación
Pluvial
Velocidad del
viento
U de Mann-Whitney 1105.000 688.500 1261.000 1007.500
W de Wilcoxon 2935.000 2518.500 3214.000 2837.500
Z -3.867 -6.001 -4.111 -4.378
Sig. asintótica (bilateral) .000 .000 .000 .000

DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS

ESPECTROMETRÍA POR MALDI-TOF

El ensayo fue realizado en los géneros identificados morfológicamente como Alternaria,
Aspergillus, Penicillium y Cladosporium. En todos los casos los ensayos efectuados para la
identificación de proteínas en los días 0 y 3 del crecimiento de los hongos, no emitió
ninguna señal que pudiese ser registrada en ninguna de las dos matrices utilizadas. En las
figuras 21, 22, 23 y 24, se muestran los resultados obtenidos en las matrices en donde se
obtuvo algún registro.

Figura 24. Utilizando la matriz CHCA, se observa la emisión de tres picos con diferentes
pesos moleculares (KDa) del medio acuoso al día ocho del crecimiento de Alternaria.

Figura 25. Utilizando la matriz CHCA, se observa la emisión de cinco picos con diferentes
pesos moleculares (KDa) del medio acuoso al día ocho del crecimiento de Aspergillus.

Figura 26. Utilizando la matriz SA, se observa la emisión de cuatro picos con diferentes
pesos moleculares (KDa) del medio acuoso al día ocho del crecimiento de Penicillium.

Figura 27. Utilizando la matriz SA, se observa la emisión de cuatro picos con diferentes
pesos moleculares (KDa) del medio acuoso al día ocho del crecimiento de Cladosporium.

Cuestionario alergias en Ciudad Universitaria

Todos los encuestados respondieron de manera completa el cuestionario aplicado. Los
resultados se muestran en el cuadro 7.

Cuadro 7. Datos demográficos de 50 participantes en la encuesta

Sexo Edad (años) Facultad Tiempo
(años)
Femenino Masculino 22-
25
26-
29
30-
32
1 2 3 4 5 6 <2 3-
4
>5
42 8 45 4 1 44 2 1 1 1 1 0 31 19
1. Ciencias
2. Filosofía y Letras
3. Contaduría y Administración
4. Veterinaria y Zootecnia
5. Química
6. Medicina

De los 50 encuestados 32 respondieron no padecer ningún tipo de alergia. Los 18 restantes,
se distribuyeron de la siguiente manera: ocho con alergias respiratorias, cinco gástricas y
cinco cutáneas. Asimismo, de los ocho referidos con alergia respiratoria, tres contestaron
que su diagnóstico fue hecho antes de su ingreso a C. U. y de ellos solo dos mencionaron
que sus signos y síntomas se exacerbaron a partir de su ingreso.
Por otra parte cinco dijeron que sus problemas alérgicos iniciaron posterior a su ingreso a
C.U Los datos anteriores nos muestran que de 50 personas que asisten a C.U., en solo siete
de ellas (14%) hay relación entre sus signos y síntomas de alergia con el ambiente aéreo de
C.U.
Finalmente solo dos personas refirieron tener el antecedente de que su alergia respiratoria
era causada por hongos, pero desconocían a qué agente lo eran.

DISCUSIÓN

Comparando los datos obtenidos en nuestro estudio, con investigaciones similares
efectuadas previamente por otros autores, llama la atención la baja diversidad en cuanto a
los géneros aislados e identificados, presentados en el ambiente aéreo de C. U. Lo anterior
puede ser debido a que solo se hizo un muestreo probablemente con más muestreos se
pudieran haber observado más diversidad, o comparando estaciones del año, o tal vez
colocando el muestreador a diferentes alturas pudiéramos hacer una comparación de la
diversidad a diferentes alturas. También pudo a ver sido un factor importante el tipo de
muestreador utilizado debido a que este discrimina partículas por su tamaño, tal vez con
otro método de muestreo habríamos podido observar y comparar los géneros y si había más
diversidad o no.

Los estudios alergológicos, han demostrado que los principales géneros fúngicos causantes
de alergias respiratorias son Alternaria, Cladosporium, Penicillium y Aspergillus, géneros
cuya presencia fue consistente durante todo el periodo de muestreo; sin embargo, el género
aislado con mayor frecuencia fue Monilia, hongo reportado también como muy común en
el aire. Monilia es un hongo que principalmente afecta plantas esto puede estar relacionado
con su presencia en todos los sitios muestreados y que Ciudad Universitario, en su mayor
parte del campus tiene presencia de diferentes géneros de árboles y esto puede indicarnos
que este tan presente.

En la encuesta llevada a cabo a los estudiantes resulto que solo el 14% de los estudiantes
presentan las alergias de tipo respiratorio y que se agravaron aún más a su entrada al
campus; esto puede ser comparado con varios estudios en los cuales han encontrado que se
difiere en los valores de porcentaje un estudio multicentrico europeo apoyado por el
Subcomité de Aerobiología de la Academia Europea de Alergología menciona que el 9.5%
de los pacientes sospechan de alergia respiratoria sensibilizado a Alternaria y/o
Cladosporium y en otros países como España (20%) y Portugal (3%) fluctúan en los
porcentajes. Por medio de las pruebas de hipersensibilidad cutánea a nivel mundial se ha
podido sugerir que van desde 3-10%. La encuesta llevada a cabo nos podría indicarque fue
58

alta la prevalencia de los estudiantes con alergias respiratorias y que los hongos
suspendidos en la atmosfera de la Ciudad Universitaria pudiesen estar relacionados con que
se aumentaran sus signos y síntomas.

Un caso singular se presentó en el aire del Instituto de Investigaciones Biomédicas donde a
partir de la muestra de aire solo se obtuvo exclusivamente el crecimiento de la levadura
Rhodotorula. (sub-microambiente). En lo correspondiente a Aspergillus y Penicillium, se
conoce que su presencia en el ambiente es muy común que se puede hallar con una
probabilidad del 50%. Por lo que en el estudio es muy evidente la poca frecuencia con la
que fueron aislados. Las dos grupos del genero Aspergillus aislados presentes fueron A.
flavus y A. niger

Respecto a las diferencias significativas en las condiciones ambientales, los resultados
obtenidos muestran que éstas no influyeron en la presencia de los géneros aislados. Los
hongos son organismos con gran adaptabilidad, por lo que no es difícil encontrarlos en
cualquier ambiente.

Los experimentos realizados con ayuda del MALDI-TOF no fueron los esperados debido a
que hubieron varias causas por las cuales no pudo llegarse a una identificación, la primera
situación pudo ser la solubilidad de las muestras ya que utilizamos la solución salina para
suspender a los hongos y esta no fue la adecuada por las cargas que presentan sus
componentes además de la proporción de la muestra no fue la adecuada, la segunda y
considerando los tipos de matriz que existen para llevar a cabo los estudios de MALDI-
TOF, se ha encontrado que se debe conocer el tipo de proteína que se quiere identificar para
poder hacer la elección gracias a las guías para elegir la mejor matriz sin embargo hay
estudios en los cuales se utilizan mezclas de las matrices para poder obtener un mejor
espectro. Uno de los puntos también muy importantes es la energía de colisión que se usó
en los experimento y por ultimo podemos mencionar a los contaminantes que son muy
importantes en este tipo de estudios en las mismas guías de MALDI-TOF se mencionan las
cantidades máximas que puede recibir la muestra para poder hacer una lectura correcta sin
que haya la interferencia.
59

CONCLUSIONES

Ciudad Universitaria presenta diferencias ambientales que implican el establecimiento de
diversos hábitats. Respecto a la función, dentro del ecosistema; qué nivel de asociación
existe entre los hongos en el aire y la perturbación artificial provocada por la actividad
humana. No se ha llevado a cabo un estudio aeromicológico en Ciudad Universitaria de la
Universidad Nacional Autónoma de México; el propósito de esta investigación es la
actualización y conocimiento nuevo de la biota del aire, en específico de la micobiota.

Los hongos contaminantes al ser ubicuos y que se transportan (por esporas o conidios) a
través del aire, actúan de una manera similar a los pólenes, es decir, como alérgenos; por
tanto, suelen provocar cuadros alergia; de ahí que resulte de vital importancia conocer la
diversidad fúngica alergológica en Ciudad Universitaria y ver si posteriormente se puede
relacionar con presencia de alergias en estudiantes en la universidad y en diferentes épocas
del año y ver si hay un aumento representativo en alguna estación del año.

Las esporas que más se encuentran el aire de Ciudad Universitaria Cladosporium y
Alternaria se pudieron recuperar en todos los sitios muestreados y en mayor proporción que
los otros cuatro géneros, además de poder aislar a Monilia en todos los sitios muestreados.
Los resultados de este estudio pude servir como base en investigaciones posteriores para
determinar algún otro factor predisponente a las enfermedades respiratorias o cutáneas, o
concentraciones de esporas en el ambiente en la Ciudad Universitaria, UNAM.

Los diferentes estudios que se han realizados en los bioaerosoles se han desarrollado para
servir como posibles herramientas de alerta temprana para personas alérgicas, así como
para los asmáticos porque la Organización Mundial de la Salud (2000) considera que los
hongos transportados por el aire constituyen un riesgo para la salud.

El presente trabajo es un primer paso para posteriormente precisar la influencia de la
aerobiología y ecología microbiana en la salud humana.

El estudio de proteómica por MALDI-TOF puede ser muy útil para diversos estudios sin
embargo concluimos que para este proyecto pudo ser mejor otro tipo de técnica.

PERSPECTIVAS

Hoy en día diferentes áreas tienen interés en la micología, la metagenómica y la biología
molecular son algunas de ellas. Cabe resaltar que en diferentes estudios de muestreo de aire
se pueden obtener muchas especies de hongos gracias a estas tecnologías y sus bases de
datos que se actualizan todos los días.

Este estudio puede ser ampliado gracias a este tipo de estudios ya que muchos de los
hongos presentes en el aire no son cultivables en los medios que se conocen para hongos,
sin embargo eso no quiere decir que no estén en el ambiente.

Estudios de pruebas intradérmicas u otros estudios de tipo epidemiológicos nos podrían
llevar a una conclusión de la relación de los hongos con las enfermedades alergénicas y su
repercusión en el entorno en el campus de Ciudad Universitaria.

LITERATURA CITADA

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Portada
Contenido
Resumen
Introducción
Antecedentes
Planteamiento del Problema
Justificación
Objetivos
Materiales y Métodos
Resultados
Discusión
Conclusiones
Perspectivas
Literatura Citada