Asociacion-de-la-frecuencia-de-expresion-de-eotaxina-y-la-cantidad-de-eosinofilos-en-mucosa-nasal-de-sujetos-con-rinitis-alergica-persistente-expuestos-y-no-expuestos-a-tabaquismo

Vista previa del material en texto

SU:UIIDAU '( ~OllOAR I OAO ~OClAt 
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO 
PROGRAMA DE GRADUACION OPORTUNA 
DIVISION DE ESTUDIOS DE POSGRADO 
FACULTAD DE MEDICINA 
INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL 
CENTRO MEDICO NACIONAL LA RAZA 
UMAE HOSPITAL GENERAL 
"DR. GAUDENCIO GONZALEZ GARZA" 
ASOCIACION DE LA FRECUENCIA DE EXPRESiÓN DE 
EOTAXINA y LA CANTIDAD DE EOSINOFILOS EN MUCOSA 
NASAL DE SUJETOS CON RINITIS ALÉRGICA PERSISTENTE 
EXPUESTOS Y NO EXPUESTOS A TABAQUISMO. 
MODALIDAD DE GRADUACION QUE PARA OPTAR POR EL GRADO 
DE ESPECIALISTA EN: 
OTORRINOLARINGOLOGIA y CIRUGIA DE CABEZA Y 
CUELLO 
PRESENTA: 
Dra. Eulalia Beatriz Flores Rojas 
TUTOR: 
Dra. Bertha Beatriz Montaña Velázquez. 
MEXICO, DF. NOVIEMBRE 2014 
 
UNAM – Dirección General de Bibliotecas 
Tesis Digitales 
Restricciones de uso 
 
DERECHOS RESERVADOS © 
PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL 
 
Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal 
del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). 
El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea 
objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para 
fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo 
mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, 
reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el 
respectivo titular de los Derechos de Autor. 
 
 
 
@{;;¡c6tú~cY~ 
@{;;¡c6tú6~ (}lb ~ timnjJeP ineo=~. 
@{;;¡c 6tú ~h de6ttjJ~ incam6cd!e 
[f5J5'ou¡ae 6Wb6tú aJ~ 1W 1Úú6ú=6ich }06i6!e la ~ de mi efJedaIidad mecIica. 
2 
[ID 
IMSS 
ASOCIACION DE LA FRECUENCIA DE EXPRESiÓN DE EOTAXINA y 
LA CANTIDAD DE EOSINOFILOS EN MUCOSA NASAL DE SUJETOS 
CON RINITIS ALÉRGICA PERSISTENTE EXPUESTOS Y NO 
EXPUESTOS A TABAQUISMO 
DRA. LUZ ARCELlA CAMPOS NAVARRO 
DIRECTORA DE EDUCACION E INVESTIGACION EN SALUD 
DRA. LUZ ARCELlA CAMPOS NAVARRO 
PROFESORA TITULAR DEL CURSO DE OTORRINOLARINGOLOGIA y CIRUGIA DE CABEZA Y 
CUELLO 
DR. SIL VIO JURADO HERNANDEZ 
JEFE DE SERIVIO DE OTORRINOLARINGOLOGIA y CIRUGIA DE CABEZA Y CUELLO 
DRA. BERTHA BEATRIZ MONTAÑO VELAZQUEZ 
OTORRINOLARINGOLOGIA y CIRUGIA DE CABEZA Y CUELLO 
ASESORA 
DRA. EULALIA BEATRIZ FLORES ROJAS 
RESIDENTE DE CUARTO AÑO DE OTORRINOLARINGOLOGIA y CIRUGIA DE CABEZA Y CUELLO 
3 
[ID 
IMSS 
ASOCIACION DE LA FRECUENCIA DE EXPRESiÓN DE EOTAXINA y 
LA CANTIDAD DE EOSINOFILOS EN MUCOSA NASAL DE SUJETOS 
CON RINITIS ALÉRGICA PERSISTENTE EXPUESTOS Y NO 
EXPUESTOS A TABAQUISMO 
INVESTIGADOR PRINCIPAL: 
Dra. Bertha Beatriz Montaño Velázquez 
beamont 2000@yahoo.com.mx 
Médico Adscrito al Servicio de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello, HG 
CMN La Raza, IMSS. 
Tel: 57245900, ext. 23446. 
COLABORADORES: 
Dr. Silvio Jurado Hernández 
silviojurado@yahoo.com.mx 
Médico Adscrito al Servicio de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello, HG 
CMN La Raza, IMSS. 
Tel. 57245900, ext. 23446 
Dra. EIsa Acosta Jiménez 
elsa acosta25@hotmail.com 
Anatomopatóloga, Servicio de Patología Centro Médico Nacional La Raza, IMSS. 
Tel. 57 24 59 00 
Dr. Francisco García Vázquez (participación intelectual) 
momoxco@hotmail.com 
Área Inmunohistoquimica Departamento de Patología. Instituto Nacional de Pediatría 
Tel. 10845515, 10840900 ext. 1119. 
Ora Kathrine Jáuregui Renaud (participación intelectual). 
kathrine.jauregui@imss.mx 
Investigador Titular C. Unidad Investigación Médica en Otoneurología, IMSS. 
Tel5627 6900 ext. 21221 
INVESTIGADOR TESISTA 
Dra. Eulalia Beatriz Flores Rojas 
ebeatrizfr@hotmail.com 
Residente de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello 
Servicio de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello, HG CMN La Raza, IMSS. 
Tel. Tel: 57245900, ext. 23446. 
4 
Carta Dictamen 
MÉXlCO Dirección de Prestaciones Médicas Unidad de Eoocación, Investillacilln y Palmeas de Salud 
Coordinación de Investigación en Salud 
Página 1 de 1 
ti] 
IMSS 
"2014. AIIo de OclaVlo paz', 
Dictamen de Autorizado 
Comité Local de Investigación y Ética en Investigación en Salud 3502 
HOSPITAL GENERAL DR. GAUDENCIO GONZALEZ GARZA. CENTRO MEDICO NACIONAL LA RAZA. D,F. NORTE 
FECHA 01/07/2014 
DRA. BERTHA BEATRIZ MONTAñO VELAZQUEZ 
PRESENT ,E 
Tengo el agrado de notificarle, que el protocolo de investigación con título: 
ASOCIACION DE LA FRECUENCIA DE EXPRESIÓN DE EOTAXINA y LA CANTIDAD DE 
EOSINOFILOS EN MUCOSA NASAL DE SUJETOS CON RINITIS ALÉRGICA PERSISTENTE 
EXPUESTOS Y NO EXPUESTOS A TABAQUISMO 
que sometió a consideración de este Comité Local de Investigación y Ética en Investigación en 
Salud, de acuerdo con las recomendaciones de sus integrantes y de los revisores, cumple con la 
calidad metodológica y los requerimientos de Ética y de investigación, por lo que el dictamen es 
A U T O R 1 Z A D O, con el número de registro institucional: 
ATENTAMENTE 1~/~7/ ( 
f ' [lb"" 
Núm. de Registro 
R- 2014-3502-86 
DR. (A). GUILLJR!:!l~: A REYNA 
preSidente/ Comité Local d¡' Investigación y Ética en Investigación en Salud No, 3502 
IMSS 
S[C;U RIDAD Y SOl IDARI DM) SOCIA! 
---_._-_._------
5 
CONTENIDO 
Páaínas 
RESUMEN 7 
ANTECEDENTES 8 
PREGUNTA DE INVESTIGACiÓN 14 
HIPOTESIS 14 
OBJETIVO 14 
TIPO Y DISEÑO DEL ESTUDIO 14 
MATERIAL Y METODOS 15 
RESULTADOS 20 
DISCUSION 24 
CONCLUSIONES 25 
REFERENCIAS 26 
ANEXOS 
Anexo 1 30 
Anexo 2 31 
Anexo 3 32 
6 
RESUMEN 
ANTECEDENTES. Evidencia experimental ha confirmado la relación entre la exposlclon a 
alérgenos y la producción de Eotaxina. No obstante se conoce que el humo de tabaco puede 
exacerbar la respuesta alérgica nasal e incrementa el número de eosinófilos en individuos con 
rinitis alérgica, se conoce poco sobre su influencia en la expresión de Eotaxina y su posible 
interacción diferencial con las diferentes Eotaxinas. 
OBJETIVOS. 
Medir y comparar la expresión proteica de Eotaxina-1 (inmunohistoquimica) con la cantidad de 
eosinófilos (inmunohistoquimica) en la mucosa nasal de pacientes con rinitis alérgica expuestos 
y no expuestos a humo de tabaco. 
MATERIAL Y METODOS: Estudio transversal analitico, prospectivo. Después de la 
autorización del protocolo de estudio y con el consentimiento informado, se invitó a participar a 
24 pacientes con diagnóstico de rinitis alérgica persistente, 13 expuestos y 11 no expuestos a 
humo de tabaco. Se registraron sus caracteristicas demográficas y clinicas, se les aplicó el 
cuestionario de la Encuesta Nacional de Adicciones 2008 y se obtuvo una muestra de orina 
para la cuantificación de cotinina (quiomioluminiscencia competitiva) ajustada a la 
concentración de creatinina (método colorimétrico de Jaffe), la cual se codifico y se congeló a -
70 oC hasta completar las muestras para su análisis. El punto de corte para determinar la 
exposición o no a humo de tabaco fue de > 21.8 ng/mg. En el mismo dia, se obtuvo una 
muestra de mucosa nasal del cornete inferior, mediante raspado con cureta (Rhinoprobe 
Arlington Scientific Inc Arlinton, Tx). Las muestras de mucosa nasal se colocaron en 
portaobjetos (Superfrost plus, Shandon, Pittsburg) y se fijaron con acetona durante 10 minutos 
a temperatura ambiente. Al completar la recolección de muestras se efectuó la evaluación 
morfológica del epitelio de la mucosa nasal para identificar eosinófilos por morfologia e 
inmunohistoquimica, en el servicio de patologia del HG La Raza, asi como para identificar la 
presencia de Eotaxina-1 mediante inmunohistoquimica. Las evaluaciones se realizaron de 
manera cegada a la procedencia de las muestras y previa estandarización de los 
procedimientos. 
ANALlSIS ESTADISTICO: Se realizó estadistica descriptiva de acuerdo a la distribución de los 
datos con medidas de tendencia central y de dispersión asi como estadistica analitica de 
acuerdo a la distribución de los datos, con prueba t de Student y con r de Pearson, ANOVA y 
ANCOVA con nivel de significancia de 0.05. 
RESULTADOS: Los grupos fueron similares en la edad, el peso, el indicede masa corporal. La 
relación hombre/mujer fue inversa en ambos grupos. El tiempo de evolución fue menor en 
pacientes expuestos a humo de tabaco. La cantidad de Eotaxina-1 en el grupo de los 
pacientes expuestos a humo de tabaco fueron mayores que en el grupo de no expuestos (p< 
0.01). Se identificó una correlación de los niveles de Eotaxina-1 con el numero de cigarrillos 
expuestos de manera pasiva (Pearson 0.47, p<0.05). 
CONCLUSION. La exposición a humo de tabaco de manera pasiva se relaciona a un 
incremento en los niveles de Eotaxina-1 asi como de la cantidad de eosinófilos, en pacientes 
con rinitis alérgica persistente. 
7 
ANTECEDENTES 
Rinitis Alérgica 
La rinitis alérgica es un proceso inflamatorio de la mucosa nasal mediado por la 
inmunoglobulina IgE en respuesta a uno o más alérgenos, que se caracteriza por la 
presencia de estornudos, prurito nasal, obstrucción nasal y rinorrea (1,2). Se clasifica en 
intermitente o persistente, de acuerdo a la temporalidad de las manifestaciones clínicas (3): 
es intermitente cuando se manifiesta en menos de 4 días a la semana y menos de 4 
semanas, en tanto que es persistente si se manifiesta por más de 4 días a la semana 
durante todo el mes, con persistencia de las manifestaciones más de 9 meses al año. A su 
vez se clasifica en leve y moderada-severa (4-6). 
En la fisiopatogenia de la rinitis alérgica participa un componente genético de manera 
importante, el cual consiste en la tendencia a desarrollar una respuesta inmune en la que 
participan la IgE, los mastocitos y linfocitos Th2. En sujetos susceptibles la exposición a 
proteínas fecales de ácaros, cucarachas, pelo de gato, perro, pólenes y otros lleva a la 
presentación del alérgeno por células presentadoras de antígeno a los linfocitos T CD4+, los 
cuales liberan las interleucinas IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13, entre otras citocinas TH2. 
Estas citocinas promueven la producción de IgE específicas para estos alérgenos. Las 
células plasmáticas producen IgE, mientras que las células cebadas, eosinófilos y otras 
células captan IgE. Una vez que el paciente se ha sensibilizado a los alérgenos, la 
exposición subsecuente activa una cascada de eventos que dan como resultado síntomas 
de rinitis alérgica. La respuesta alérgica que se desarrolla puede ser dividida en dos fases: 
una fase inmediata o temprana, en minutos luego de la exposición al alérgeno y los 
estornudos, que se caracteriza por prurito y rinorrea y puede ocurrir algún grado de 
congestión nasal, y una fase tardía en la que tiende a predominar la congestión nasal, en 
ésta los mediadores liberados por los eosinófilos tales como la proteína básica mayor, 
proteína catiónica de los eosinófilos y leucotrienos provocan daño al epitelio, llevando a la 
enfermedad alérgica crónica (7-13). 
Para efectuar el diagnóstico de la rinitis alérgica se consideran la historia clínica, las pruebas 
cutáneas, la concentración de IgE específica en suero (que permite identificar alérgenos 
específicos), la eosinofilia y la presencia de eosinófilos en moco nasal con métodos de 
obtención como el raspado con cureta (14-17). En los pacientes con rinitis alérgica 
intermitente los alérgenos principales suelen ser pólenes, mientras que en los pacientes con 
rinitis alérgica persistente suelen ser polvos y ácaros (17-19) Y de éstos los alérgenos más 
frecuentes identificados en pacientes que habitan en la región norte de la zona metropolitana 
de la ciudad de México son Dermatophagoides sp, polvo casero, gato y perro, entre otros 
(19). 
8 
Tabaco y enfermedad alérgica 
El humo de tabaco afecta la fisiología nasal e influye en los problemas respiratorios. La 
exposición ambiental al tabaco parece estar asociada con enfermedades de las vías 
respiratorias superiores e inferiores tales como el asma y un mayor riesgo de ciertos 
cánceres (20, 21). 
Estudios en adultos muestran que el humo de tabaco puede exacerbar la respuesta alérgica 
nasal (22). En la respuesta alérgica, la exposición a humo de tabaco puede prolongar la vida 
media de los eosinófilos, además de aumentar su producción (23), lo que se ha sugerido que 
se debe a factores como la producción de factores de sobrevida como la IL-5 (24), factores 
de crecimiento como IL-4, mediadores inflamatorios como los cisteinil-Ieucotrienos (25) y 
Eotaxina (26) entre otros. 
En varios modelos animales y en seres humanos, se han descrito varios efectos de la 
exposición al humo del tabaco sobre la respuesta inmune (27-29). Se ha documentado que 
el número de eosinófilos se incrementa ante la exposición a humo de tabaco, sin embargo, 
aún hay escasa información sobre el posible mecanismo. Los niños sin enfermedad aparente 
que son expuestos al humo de tabaco tienen aumento en el número de eosinófilos tanto en 
la mucosa nasal como en sangre, a diferencia de los no expuestos (21). Congruente con el 
hallazgo experimental en expuestos a humo de cigarro diluido (6 cigarrillos durante una 
hora/día por 14 días), en los que se produjo reactividad de la vía aérea, asociada a un 
aumento de eosinófilos en la mucosa (22). 
En un estudio se identificó en la mucosa nasal de niños y adolescentes con rinitis alérgica 
persistente de 25 pacientes fumadores y 25 pacientes no fumadores, un aumento del 
número de eosinófilos en los pacientes que estuvieron expuestos al humo del tabaco de 
forma activa, con una proporción más alta de cotinina/creatinina, apoyan una asociación 
entre la exposición al humo del tabaco y la atracción de eosinófilos en los pacientes con 
enfermedad alérgica de las vías respiratorias superiores (30). Los estudios en pacientes con 
enfermedad alérgica como el asma han demostrado que la estimulación de los eosinófilos en 
las vías respiratorias con la IL-5 y Eotaxina son importantes en la inflamación asociada a la 
respuesta alérgica, así como que el tabaquismo influye en el cambio de la inflamación de las 
vías respiratorias de asmáticos, mediante la estimulación de la producción de Eotaxinas (26). 
Exposición a humo de tabaco 
La exposición a humo de tabaco puede ser activa o pasiva. En la identificación de la 
exposición a humo de tabaco puede utilizarse la medición de sus metabolitos y 
cuestionarios. De los más de 4,700 compuestos identificados en el humo de tabaco, la 
nicotina es uno de los principales productos, se absorbe por el tracto respiratorio, la mucosa 
oral y la piel, se metaboliza en su mayor parte en el hígado y el resto en pulmón y riñones 
principalmente como cotinina. La medición de la cotinina en orina permite evaluar de manera 
confiable la exposición a humo de tabaco; una concentración >21 .8ng de cotinina por 
miligramo de creatinina permite identificar que los sujetos están expuestos al humo del 
tabaco (27) . 
9 
Cabe mencionar que para la localización de moléculas proteicas, receptores o todo aquello 
susceptible de ser antígeno en secciones de tejido se utiliza la inmunohistoquímica (IHQ), 
definida como la identificación de un constituyente de tejido in situ por medio de reacción 
antígeno anticuerpo, etiquetado por una marca microscópicamente visible (31-35). 
Eotaxinas y su relación con los eosinófilos 
las quimocinas son citocinas quimotácticas que juegan un papel central en la respuesta 
inmune e inflamatoria debido a la atracción y activación de los leucocitos, a través de 
receptores transmembranales acoplados a proteínas G. las quimocinas se dividen en cuatro 
familias (CXCl, CCl, Cl Y CX3Cl) en base a la posición de uno o dos residuos de cisteína 
localizados cerca del amino terminal. En la familia de las quimocinas CXCl los dos residuos 
de cisteína se encuentran separados por un aminoácido, mientras que en las CCl, los dos 
residuos de cisteína se encuentran adyacentes. las quimocinas Cl poseen un solo residuo 
de cisteína mientras que la familia CX3Cl posee tres aminoácidos entre las dos cisteínas. 
Dentro de la familia CCl, se encuentran tres péptidos con actividad quimotáctica específica 
para eosinófilos conocidas comoEotaxina-1, Eotaxina-2 y Eotaxina-3. De acuerdo a la nueva 
nomenclatura de las quimocinas, estas citocinas se clasificaron como CCl11 (Eotaxina-1), 
CCl24 (Eotaxina-2) y CCl26 (Eotaxina-3). Por su acción especifica sobre los eosinófilos, se 
ha propuesto que las Eotaxinas sean importantes en el proceso inflamatorio alérgico ya que 
son selectivas para la quimiotaxis de eosinófilos mediante la activación del receptor de 
quimiocinas CC3 (CCR3). 
la Eotaxina 1 se identificó por primera vez como el quimio-atrayente de eosinófilos 
dominante en un modelo de cobayos en la inflamación alérgica de las vías respiratorias, 
promoviendo tanto el reclutamiento de eosinófilos local para el pulmón y, en cooperación con 
la interleucina 5 (Il - 5), la rápida movilización de los eosinófilos y sus progenitores de la 
médula ósea. En la patogénesis del asma, la Eotaxina-1 está implicada en la fase temprana 
del reclutamiento de eosinófilos inducida por alérgeno, mientras que la Eotaxina-2 y la 
Eotaxina-3 están asociadas con la consiguiente persistencia inflamatoria eosinofílica 
inducida por alérgeno. 
las Eotaxinas, ejercen sus efectos a través del receptor CCR3 (derivado de "chemokine CC 
receptor-3"). Este receptor se expresa principalmente en eosinófilos y basófilos aunque 
también pueden encontrarse cantidades mínimas en otros tipos celulares como: células 
dendríticas, linfocitos Th2, células epiteliales, mastocitos y tejidos embrionarios responsables 
de células hematopoyéticas. El CCR3 es un receptor promiscuo ya que además de servir 
como receptor para las Eotaxinas también media los efectos de otras quimocinas entre las 
que se encuentran: RANTES (CCl-5), MCP-2 (CCl18), MCP-3 (CCl7), MCP-4 (CCl13) Y 
HCC-2 (MIP-5). las Eotaxinas sin embargo, activan específicamente CCR3 mientras que las 
otras quimocinas activan otros receptores adicionales. Una vez que el ligando (quimocina) se 
une con su receptor, ocurre una serie de cambios bioquímicos como activación de proteínas 
Gi, incremento en el tránsito de la concentración de calcio intracelular, activación de la vía 
Protein-Cinasa-Mitógeno Activada (MAP), una rápida y prolongada internalización del 
receptor en un compartimiento endocítico compartido con el receptor de transferrina, 
10 
polimerización de actina y cambios asociados con la respuesta quimotáctica. Una vez que 
los eosinófilos han migrado al sitio de inflamación, estas células contribuyen al proceso 
inflamatorio a través de la liberación de proteasas tóxicas (proteína básica mayor, proteína 
catiónica eosinofílica), mediadores de la inflamación (Ieucotrienos) y radicales de oxígeno. 
El proceso de reclutamiento de los eosinófilos desde la circulación sanguínea involucra una 
serie de procesos separados, primero una adhesión al endotelio y migración transendotelial 
que son dependientes de la expresión de moléculas de adhesión, y posteriormente 
migración a través de la matriz extracelular hacia el sitio de inflamación alérgica dependiente 
de estímulos quimotácticos (36). 
Eotaxina-1 /ccI11 
la Eotaxina-1 /CCl 11 fue aislada en 1994 en los lavados bronco alveolares de cobayos 
alérgicos expuestos a reto alergénico y asociada a la infiltración de eosinófilos. la Eotaxina-
1 /CCl 11 humana tiene 58% de homologa con la Eotaxina-1 /CCl 11 de cobayos. En 1996 se 
describió el gen que codifica para la Eotaxina-1 /CCl 11 humana. los efectos sobre los 
eosinófilos incluye quimotaxis, migración transendotelial, inducción y liberación de especies 
reactivas de oxígeno, inducción de la movilización de Ca2+, polimerización de actina, alta 
regulación de C011 b, degranulación y liberación de Il-4 y lTC4 sintetasa. la Eotaxina-
1 /CCl 11 coopera con la Il-5, la Il-5 estimula la liberación y diferenciación de los eosinófilos 
en la médula ósea, entre tanto la Eotaxina-1/CCl11 dirige la migración de estas células 
circulantes a su destino local. Alcanzan concentraciones máximas a las 4 horas y declinan a 
las 24 horas. la neutralización del efecto de Eotaxina-1/CCl11 inhibe el reclutamiento de 
eosinófilos. la Il-4 en combinación con TNF-alfa induce la producción de formas truncadas 
de Eotaxina-1 /CCl 11. Está involucrada en enfermedades respiratorias alérgicas tales como 
asma bronquial y rinitis alérgica (36, 37). la administración de Eotaxina-1 /CCl 11 en aerosol 
induce un flujo de eosinófilos en las vías aéreas de ratones. En cambio, ratones deficientes 
en Eotaxina-1 /CCl 11 no sólo muestran una disminución del reclutamiento de eosinófilos 
sino que también están protegidos de cambios inflamatorios inducidos por el reto alergénico 
(38). 
Yakamoto y cols en 2003 estudiaron el esputo bronquial de pacientes asmáticos, fumadores 
y no fumadores. El principal hallazgo de este estudio es que los niveles de Eotaxina-1 
mediante ELlSA en el esputo y suero aumentaron en los fumadores y en pacientes 
asmáticos, en comparación con los no fumadores. Asimismo, observó los niveles de 
Eotaxina elevados en el esputo obtenido de los fumadores, sin eosinofília pero con la 
inflamación de las vías respiratorias de neutrófilos. Estos hallazgos sugieren que el nivel 
elevado de Eotaxina no siempre induce la acumulación de eosinófilos en el esputo y 
sugieren que la Eotaxina tiene un papel en la fase temprana de la eosinofilia, mientras que la 
Il-5 está involucrada en la fase tardía de la eosinofilia (39). 
la Eotaxina-1/CCl11 ha sido identificada por PRC-RT en células de la mucosa nasal 
mediante cepillado de sujetos con rinitis alérgica encontrando una mayor cantidad que en 
sujetos sin rinitis (en 11-1g de CONA 1350 (546-7832) vs 572 (104-960), respectivamente) (40). 
Se ha identificado la presencia de Eotaxina-1 con inmunohistoquimica en pacientes con 
11 
poliposis nasal y en secreciones detectadas por ELlSA y que se correlacionó con la 
presencia de eosinófilos (41) . También se ha identificado los niveles de Eotaxina 1-CCL 11 
por ELlSA en lavados nasales obtenidos antes y 30 minutos después de la exposición al 
alérgeno de sujetos con rinitis alérgica alcanzando una concentración de 9 pg/ml (EE:':.1) 
hasta 24 pg/ml (EE:t:4) (42). Que coincide también con los niveles de Eotaxina 1-CCL 11 por 
ELlSA en lavados nasales obtenidos antes y a los 15 minutos, 1 hora, 5 horas y 24 horas 
después de la exposición al alérgeno de sujetos con rinitis alérgica alcanzando una 
concentración de 6.93 (1.28-10.36); 15 minutos 2.79 (0.000-7.19); 1 hora 7.60 (2.93-14.61), 
5 horas 14.20 (8.22-28.41) Y 24 horas 17.49 (3.21-31.38), además que encontraron una 
correlación positiva entre los niveles de Eotaxina y la cantidad de eosinófilos a las 5 horas 
luego de la exposición al alérgeno de (r=0.583; p=0.031) y a las 24 horas (r=0.378, p=0.026) 
(37). 
Goo Min y cols en 2007, en ratones expuestos a humo de tabaco y alérgenos OVA 
observaron un aumento significativo de los niveles de expresión de Eotaxina-1 en el epitelio 
de las vías respiratorias, lo que se asoció con un aumento en el número de eosinófilos 
peribronquiales, así como un aumento en el número de células peribronquiales que expresan 
TGF-beta 1 (43) . En un estudio realizado en sujetos con asma fumadores en el esputo 
tuvieron una mayor concentración de Eotaxina-1 que los no fumadores asmáticos (44). 
Eotaxina-2/ccI24 
La Eotaxina-2/CCL24 fue identificada en 1997 a partir del ADNc derivado de monocitos 
humanos activados. Posee una potente actividad quimotáctica para eosinófilos y fue llamada 
entonces Eotaxina-2/CCL24. El gen que codifica para esta citocina está localizada en el 
cromosoma 7q11.23. La Eotaxina-1 y la Eotaxina-2 son funcionalmente similares, pero son 
estructuralmente diferentes; únicamente existe entre ellas un 35% de identidad a nivel de su 
secuencia de aminoácidos y difieren completamente en la región aminoterminal. Los efectos 
in vitro de la Eotaxina-2/CCL24 sobre los eosinófilos incluyen quimotáxis, migración 
transendotelial y un rápido incremento en el flujo de Ca+2. Además, activan a los basófilos 
induciendo la liberaciónde histamina y L TC. Una característica de la Eotaxina-2/CCL24 es 
su habilidad para inducir la separación rápida de la molécula de adhesión VCAM-1 de los 
eosinófilos, lo cual aumenta la adhesión de estas células a la albúmina sérica bovina en 
condiciones estáticas como de flujo. La inyección intradérmica de Eotaxina-2 a monos 
rhesus induce el reclutamiento de eosinófilos en el sitio de inyección. Se ha encontrado que 
el reto pulmonar alergénico a ratones sensibilizados induce un incremento local de la 
expresión de Eotaxina-2/CCL24. Además la sobreexpresión transgénica de IL-4 en pulmón 
induce la expresión de esta citocina. 
Existe evidencia de que la Eotaxina-2/CCL24 juega un papel prominente en el proceso 
inflamatorio alérgico (36). Se ha identificado la presencia de Eotaxina-2 con 
inmunohistoquimica en pacientes con poliposis nasal y en secreciones detectadas por 
ELlSA, lo que se relacionó con la presencia de eosinófilos (41). La Eotaxina-2/CCL24 ha 
sido identificada por PCR-RT en células de la mucosa nasal mediante cepillado, en mayor 
cantidad en sujetos con rinitis alérgica que en sujetos sin rinitis (40). En un estudio realizado 
12 
en sujetos con asma y fumadores, el número y el porcentaje de eosinófilos y neutrófilos en 
esputo se relacionó con las concentraciones de Eotaxina-2 (44). 
Eotaxi na -3/ccI26 
La Eotaxina-3/CCL26 fue identificada simultáneamente por dos grupos independientes, 
encontrando 32 y 34% de identidad en su estructura química con Eotaxina-1 y Eotaxina-2 
respectivamente. Esta citocina se encuentra constitutivamente expresada en corazón y 
ovario. Los efectos de la Eotaxina 3/CCL26 sobre los eosinófilos incluyen quimotaxis, 
transmigración celular y movilización del flujo de Ca+2, además activa a los basófilos. Sin 
embargo, Eotaxina-3/CCL26 es 10 veces menos potente que las otras dos Eotaxinas. Por 
otro lado, la Eotaxina-3/CCL26 muestra diferencias en su perfil de expresión y especificidad 
celular en comparación con Eotaxina-1 y Eotaxina -2. Por ejemplo, las citocinas IL-4 y TNF-
alpha inducen la expresión de Eotaxina-1/CCL26 en fibroblastos dérmicos. En cambio, 
aunque IL-4 estimula a estas células a expresar Eotaxina-3, TNF-alfa no tiene este efecto 
(36). Se ha identificado la presencia de Eotaxina-3 con inmunohistoquimica en pacientes con 
poliposis nasal y en secreciones detectadas por ELlSA y que se correlacionó con la 
presencia de eosinófilos (41). 
La Eotaxina-3/CCL26 ha sido identificada por PCR-RT en células de la mucosa nasal 
mediante cepillado en mayor cantidad en sujetos con rinitis alérgica que en sujetos sin rinitis 
(en 1IJg de CONA 1350 (546-7832) vs 572 (104-960) (40). En un estudio realizado en sujetos 
con asma fumadores, con asma no fumadores, sanos fumadores y no fumadores los niveles 
de etoaxina-3 en el esputo se encontraron por debajo del límite de detección (44). 
Estudios en seres humanos han mostrado que el humo de tabaco puede exacerbar la 
respuesta alérgica nasal. Se ha identificado que el número de eosinófilos se incrementa ante 
la exposición a humo de tabaco, principalmente de manera activa en pacientes con rinitis 
alérgica, sin embargo, no se ha documentado el mecanismo de esta relación. La relación 
entre la exposición a alérgenos y la producción de Eotaxinas está confirmada. Sin embargo, 
la influencia de factores ambientales como el humo de tabaco en la producción de Eotaxina y 
la cantidad de eosinófilos en la mucosa nasal es escasa. Tampoco se conoce si existe 
alguna influencia diferenciada de la exposición al humo de tabaco sobre las diferentes 
Eotaxinas (Eotaxina-1, Eotaxina-2, y Eotaxina-3). En estudio con fines de tesis se midió la 
Eotaxi na -1 . 
Los resultados de este estudio son importantes para conocer mejor la fisiopatogenia de la 
respuesta alérgica en pacientes adultos con rinitis alérgica persistente y permite sustentar 
estudios clínicos más específicos para este grupo de pacientes. 
13 
PREGUNTA DE INVESTIGACION 
En pacientes con diagnóstico de rinitis alérgica persistente habitantes de la Zona 
Metropolitana de la Ciudad de México, de 6 a 21 años de edad, expuestos (activo o pasivo) y 
no expuestos de manera habitual a humo de tabaco: 
¿Cuál es la diferencia en la expresión proteica de Eotaxina-1 y de la cantidad de eosinófilos 
en la mucosa nasal de pacientes adultos con rinitis alérgica expuestos y no expuestos a 
humo de tabaco? 
HIPÓTESIS 
En pacientes con diagnóstico de rinitis alérgica persistente, de 6 a 21 años de edad, 
expuestos y no expuestos a humo de tabaco: 
La cantidad de expresión proteica de Eotaxina-1 es mayor y la cantidad de eosinófilos es 
mayor * en la mucosa nasal de pacientes adultos con rinitis alérgica expuestos y no 
expuestos a humo de tabaco. 
* Monlaño-Velázquez BB, el al. Inlluence 01 exposure lo lobacco cigaretle smoke on lhe eosinophil counl in lhe 
nasal mucosa 01 young palienls wilh perennial allergic rhinilis. Rhinology 2013; 51: 253-258 (31). 
OBJETIVOS 
En pacientes con diagnóstico de rinitis alérgica persistente habitantes de la Zona 
Metropolitana de la Ciudad de México, de 6 a 21 años de edad, expuestos (activo o pasivo) y 
no expuestos de manera habitual a humo de tabaco: 
Medir y comparar la expresión proteica de Eotaxina-1 (inmunohistoquímica) con la cantidad 
de eosinófilos (inmunohistoquímica) en la mucosa nasal de pacientes adultos con rinitis 
alérgica expuestos y no expuestos a humo de tabaco. 
TIPO Y DISEÑO DEL ESTUDIO 
Estudio Clínico 
Diseño Transversal, comparativo y prolectivo. 
14 
MATERIAL Y METODOS 
1. Sujetos participantes. 
Después de la autorización del protocolo de estudio por las Comisiones Institucionales de 
Investigación Científica y de Ética en Investigación con Núm. De Registro R-2014-3502-86, 
con el consentimiento informado de los padres y el asentimiento de los pacientes (Anexos 1), 
aceptaron participar en el estudio 29 niños y adolescentes con diagnóstico por primera vez 
de rinitis alérgica persistente. Todos acudieron para su atención por primera vez, al Servicio 
de Alergia e Inmunología Clínica de la Unidad Médica de Alta Especialidad "Antonio Fraga 
Mouret" en el Centro Médico Nacional La Raza, IMSS. 
El muestreo de pacientes se efectuó de forma consecutiva, para todos los pacientes que 
reunieron los criterios de selección. Ninguno mostró evidencia de infección, sinusitis, otitis 
media, pólipos nasales, anormalidades anatómicas, enfermedades sistémicas, enfermedad 
pulmonar incluyendo asma, rinitis alérgica estacional, rinitis vasomotora; en el caso de las 
mujeres en ningún caso hubo embarazo y, en su caso, la participación no fue durante la 
menstruación. En la historia clínica y por interrogatorio se verificó que durante los 3 meses 
previos a la participación en el estudio, ningún paciente hubiera recibido inmunoterapia o 
tratamiento con corticosteroides (nasales o sistémicos), cromolín, antiinflamatorios ni 
antileucotrienos. 
No se incluyeron en el estudio a 4 pacientes que mostraron incongruencia entre la 
información sobre exposición a humo de tabaco que proporcionaron mediante cuestionario y 
la concentración urinaria de cotinina/ creatinina. 
Las características generales de los 24 participantes se describen a continuación: 
- 13 pacientes con exposición reciente a tabaco, confirmada por la concentración urinaria de 
cotinina/creatinina, con edad de 7 a 21 años, 5 hombres y 8 mujeres; con respuesta positiva 
en pruebas cutáneas a 1 a 8 alérgenos (mediana de 3) (Tabla 1). 
- 11 pacientes sin exposición reciente a humo de tabaco, confirmada por la concentración de 
cotinina/ creatinina en orina, con edad de 6 a 17 años, 9 hombres y 2 mujeres; con 
respuesta positiva en pruebas cutáneas a 1 a 8 alérgenos (mediana de 4) (Tabla 1). 
11. Descripción General del Estudio 
Después de la estandarización de los procedimientos, dos médicos alergólogos 
seleccionaron a los candidatos a participar y les efectuaron las pruebas cutáneas 
complementarias necesarias para el diagnósticodiferencial pertinente en cada caso. A todos 
se les efectuaron pruebas cutáneas de alergia con un panel de 36 alérgenos inhalables 
(AllerStand, Ciudad de México, México), de acuerdo a la Guías IRC, 1994. Una vez 
confirmado el diagnóstico, se invitó a los pacientes que reunieron los criterios de selección a 
15 
participar en el estudio. Entonces se registraron las características demográficas y clínicas 
de los pacientes que decidieron participar. A continuación se les administraron los siguientes 
cuestionarios: 
1. Ficha de Identificación y el "Cuestionario de frecuencia e intensidad de los síntomas 
nasales en niños con rinitis alérgica persistente", validado en español (Anexo 2) (30, 
48). 
2. El "Cuestionario modificado de la Encuesta sobre Tabaquismo en Jóvenes 
Mexicanos", en su versión corta validada en español (Anexo 3) (49,50). 
En el mismo día en que se administraron los cuestionarios, se recolectó una primera muestra 
de orina. Las muestras fueron codificadas y congeladas a -70 oC. Una vez que se completo 
la recolección de muestras de todos los participantes, se realizó la determinación en bloque 
de la concentración de cotinina en orina, mediante inmunoensayo por quiomioluminiscencia 
competitiva de fase sólida para cotinina (Metabolites of Nicotine; OPC, La Garenne-Colobes, 
France; Inmunolite 1000;OPC, Los Angeles CA, USA), Y de concentración de creatinina en 
orina por el método colorimétrico de Jaffe (Clinical Chemestry IL Test tm Spinreact; Sant 
Esteve de Bas, Spain; Express Plus, Bayer; Tarrytown NY, USA). Con los resultados de 
estas pruebas se determinó la concentración urinaria de cotinina ajustada a la concentración 
de creatinina ([cotinina]/[creatinina]). El punto de corte para determinar la exposición o no 
exposición al humo de tabaco fue de >21 .8ng/mg (27). 
Un investigador, cegado a las respuestas obtenidas en los cuestionarios, realizó la 
rinoscopia anterior a todos los participantes. El mismo investigador obtuvo una muestra de la 
mucosa nasal del cornete inferior, mediante raspado con cureta, (Rhinoprobe Arlington 
Scientific Inc, Arlinton, Tx). Las muestras de mucosa nasal se colocaron en portaobjetos 
(Superfrost plus, Shandon, Pitlsburg) y se fijaron con acetona durante 10 minutos a 
temperatura ambiente. Al completar la recolección de muestras se efectuó la evaluación 
morfológica del epitelio de la mucosa nasal para identificar a los eosinófilos por morfología e 
inmunohistoquímica, así como para identificar la cantidad de expresión proteica de 
Eotaxina-1, mediante inmunohistoquímica y anticuerpo antiEotaxina-1. 
111. Procedimientos 
Cuestionarios 
A cada participante se le administraron de manera directa, siempre sin observadores ni 
acompañantes y por entrevista guiada por cuestionario, en el siguiente orden: 1. 
Cuestionario de frecuencia e intensidad de los síntomas nasales, 2. Cuestionario modificado 
de la Encuesta sobre Tabaquismo en Jóvenes Mexicanos. 
El cuestionario de frecuencia e intensidad de los síntomas nasales (30, 48), permite 
identificar la presencia de obstrucción nasal, estornudos, prurito y rinorrea. La severidad de 
cada síntoma se califica como ausente (O), leve (1), moderado (2), o severo (3). La 
puntuación total del cuestionario se calcula como la suma de la puntuación de cada síntoma, 
16 
con un máximo posible de 12 puntos. En un estudio previo se aplicó este cuestionario en 25 
niños con rinitis alérgica persistente de la misma Institución de Salud, observando un 
coeficiente de correlación intraclase de 0.93 (IC 95%, 0.85-0.97), con repetibilidad de 96% y 
un coeficiente de repetibilidad de 2 puntos. 
El cuestionario modificado de la Encuesta sobre Tabaquismo en Jóvenes (49,50), mostró 
una consistencia mayor al 95% en adolescentes de 13 y 15 años de edad en un estudio 
realizado en México, incluida la Ciudad de México. En preparación para el presente estudio, 
se administraron las 13 preguntas sobre el consumo de tabaco y la convivencia con 
fumadores a 20 niños con rinitis alérgica persistente, 
En pacientes de 7 a 21 años de edad (5 hombres y 8 mujeres), en quienes se identificó 
adecuadamente la exposición a humo de tabaco en el 100% de los expuestos, en 
congruencia con la concentración de cotinina/creatinina en orina. 
Determinación de cotinina en orina 
Previa instrucción a cada paciente, se obtuvieron muestras de 20 mi en frasco estéril. Las 
muestras se congelaron a _20 0 C hasta su análisis. Una vez descongeladas previa 
calibración, se efectuó inmunoensayo por quimioluminiscencia competitiva de fase sólida 
para cotinina (Metabolites of Nicotine; OPC, La Garenne-Colobes, France) (Inmunolite 1000; 
OPC, Los Angeles CA, USA) Y por el método de colorimétrico de Jaffé para creatinina 
(Clinical Chemestry IL Test tm Spinreact; Sant Esteve de Bas, Spain) (Express Plus, Bayer, 
Tarrytown NY, USA). Los resultados se registraron en ng/mg. Para la determinación de 
cotinina en orina se realizó en el Laboratorio de Aplicación de Isótopos y Metrología, SA de 
C.V., con la técnica de quimioluminiscencia en el equipo (Inmunolite 1000; OPC, Los 
Angeles Cal, NJ, USA) previa calibración. Las muestras se procesaron en bloque con el kit 
(Metabolites of Nicotine; OPC, La Garenne-Colobes, France). Se elaboraron las curvas 
estándar de cotinina y de los controles positivo y negativo. La técnica utiliza una fase sólida 
que consiste en una esfera de poliestireno recubierta con anticuerpos policlonales de conejo 
anti-cotinina, a la cual se agregaron 20 1-11 de orina del paciente, y se incubaron junto con la 
enzima de fosfatasa alcalina. Luego se lavó y se centrifugó. Nuevamente se incubó con el 
sustrato quimioluminiscente, y la enzima para que realice su actividad catalítica. La señal 
emitida de la reacción se mide en un fotomultiplicador. La lectura de la cotinina se realizó 
con referencia a la curva estándar en ng/ml. 
Obtención y procesamiento de muestras de la mucosa nasal 
Una vez que se describió el procedimiento al paciente, en posición sedente sobre un sillón 
para exploración otorrinolaringológica, con el tronco y la cabeza erguidos, se efectuó 
limpieza suave de las cavidades nasales. Bajo visión directa, con iluminación con lámpara 
frontal y espéculo, se efectuó raspado con cureta de la mucosa nasal de la parte media del 
cornete inferior (Rhinoprobe, Arlington Scientific Inc, Arlington, Texas): se colocó la cureta 
sobre la mucosa de la porción media del cornete inferior y con presión suave de la punta se 
deslizó hacia el exterior, 2 o 3 mm en dos ocasiones. 
El procesamiento de las muestras, se efectuó realizando directamente un frotis. Cada 
muestra obtenida se transfirió a un portaobjetos (Superfrost plus, Shandon, Pitlsburg), se 
17 
dejó secar a temperatura ambiente de 3 a 5 minutos y posteriormente se fijó con acetona a 
4°C durante 10 minutos. 
Cuantificación de eosinófilos y Eotaxina-1 
Las mediciones se efectuaron en el Laboratorio de Patología del Centro Medico Nacional La 
Raza. Para la determinación de la cantidad de eosinófilos y cantidad de Eotaxina-1, se 
realizó la inmunohistoquímica con el anticuerpo monoclonal de ratón anti-proteína básica 
mayor de eosinófilos (MBP), clona BMK13, 1 :25 asi como inmunohistoquímica con el 
anticuerpo Eotaxina-1/CCL 11 (Eotaxin antibody, EPR5825, chemokine (C-C mtif) ligand 11, 
rabbit monoclonal antibody GeneTex Irving, California, USA), Eotaxina-2/CCL24 (Human 
CCL24/Eotaxin-2/MPIF _2 antibody, polyclonal Gotal IgG, AF343, R&D Systems, 
Minneapolis, USA), Eotaxina-3/CCL26 (Human CCL26/Eotaxin-3 antibody, polyclonal Gotal 
IgG, AF343, R&D Systems, Minneapolis, USA) (Chemicon International) 
Las muestras teñidas fueron fotografiadas en un microscopio de fluorescencia y campo claro 
(Olympus, BX51 , Japan) con el objetivo de 40X en 12 campos calibrados al azar. Se 
identificó la cantidad de expresión de las Eotaxinas de acuerdo a la positividad. Luego un 
observador previa estandarización (BF) y sin conocer si las muestras pertenecían algrupo 
de expuestos y no expuestos realizaron el conteo de las células positivas con los 
marcadores. 
Antes de comenzar el estudio se estandarizaron las mediciones por inmunohistoquímica en 
3 muestras de mucosa nasal de sujetos sin enfermedad de nariz ni senos para-nasales. 
En cuanto a la lectura de laminillas, en 3 muestras de mucosa nasal, el coeficiente de 
correlación intraclase de las mediciones efectuadas por 2 observadores independientes, en 
dos ocasiones fue de ri: 0.98 
Los frotis se hidrataron a partir de alcohol absoluto anhidro hasta agua destilada, se bloqueo 
la actividad de peroxidasa endógena con H202 al 0.9% medio acuoso, terminada esta se 
incubó a temperatura ambiente por 90 minutos con el anticuerpo monoclonal de raton anti-
proteína básica mayor de eosinófilos (MBP), clona BMK13, 1 :25 (Chemicon International), se 
incubó con el anticuerpo secundario biotinilado y con el complejo Estreptavidina/Peroxidasa 
por 30 minutos c/u del kit comercial Mouse/Rabbit Imunodetector with HRP DAB, catalogo 
BSB0005 (BIOSB Inc. Santa Barbara CA. USA), se visualizó la reacción monitoreando al 
microscopio con el sustrato 3,3'-deaminobencidina-H202 catalogo (Dako Corporation, 
Carpinteria Calif. USA). Al final se realizó un lavado con agua destilada, se fotografiaron y se 
continúo con la segunda reacción. En todo el proceso se realizaron lavados con PBS por 4 
minutos entre cada reacción. Una vez que se fotografiaron las muestras, se realizo un lavado 
con TBS y se continúo con la segunda reacción de inmunohistoquímica. 
Se realizó el desenmascaramiento de epítopes por el método de microondas/olla de presión 
durante 5 minutos con la solución de citratos (mmunolDNA retriever with citrate, marca BIO 
SB, Cal. BSB 0021), se dejaron enfriar a temperatura ambiente, se continuó con lavados con 
agua destilada durante 30 segundos, posteriormente con TBST por 4 minutos, se incubo por 
45 minutos con anticuerpo anticuerpo Eotaxina-1/CCL 11 (Eotaxin antibody, EPR5825, 
18 
chemokine (C-C mtif) ligand 11, rabbit monoclonal antibody GeneTex Irving, California, USA) 
dilución 1 :50, simultáneamente, posteriormente se incubó con el anticuerpo secundario 
biotinilado y con el complejo Estreptavidina/Fosfatasa Alcalina por 30 minutos c/u del kit 
comercial Super Sensitive IHQ Detección system Cat HK331 (BioGenex Laboratories, CA 
USA), se visualizo la reacción monitoreando al microscopio con el sustrato Nueva fucsina 
(New Fuchsin Substrate Pack, cat HK183-5k, BioGenex Laboratories, CA USA). Al final se 
realizó un lavado con agua destilada, contratinción con hematoxilina de Gill y diferenciación 
con NH40H 0.37 M. Lavado en dos ocasiones con agua destilada, deshidratación con 
alcoholes de gradación creciente hasta alcohol absoluto. Secado a temperatura ambiente, 
montaje con cubreobjetos, resina Entellan y fotografía. Dobles o triples tinciones 
simultáneamente. 
IV. Procesamiento de Datos 
Los resultados de cada una de las determinaciones se registraron en la hoja de recolección 
de datos. Después se concentró la información en una hoja de cálculo (Excel 2000, 
Microsoft, Palo Alto) para efectuar su análisis estadístico mediante el programa computado 
SPSS (Statsof, Tulsa). El calculó del tamaño de muestra se efectuó para estimar la 
diferencia entre dos medias, el cálculo para el tamaño de la muestra de acuerdo a la 
diferencia de medias en la cantidad de eosinófilos de la mucosa nasal de los expuestos a 
humo de cigarro vs no expuestos para una diferencia de 11, Y desviación estándar de 15, 
(31) con un nivel de confianza bilateral de 0.95 y una precisión de 0.2. 
V. Aspectos Estadísticos. 
El análisis estadístico se realizó de acuerdo con la distribución de datos, que fue corroborada 
con la prueba de Kolmogorov-Smirnov, con un nivel de significancia estadística de 0.05. Se 
utilizaron las pruebas siguientes, que se acotan en el apartado de Resultados: "t" de Student 
para muestras independientes, "t" para proporciones, r de Pearson, ANOVA, ANCOVA. 
19 
RESULTADOS 
La edad, tiempo de evolución clínica de la rinitis, peso, índice de masa corporal, relación 
hombre/mujer o el número de alérgenos positivos identificados con las pruebas de prick 
cutáneas fueron similares en el grupo de expuestos y de no expuestos a humo de tabaco 
(p>O.1). 
Tablal. Características de los 24 pacientes y de las pruebas cutáneas para un panel de 36 
alérgenos inhalables en pacientes con rinitis alérgica persistente. 
Exposición a humo de NO Exposición a humo de 
tabaco (n=13) tabaco (n=l1) 
Características de los pacientes n (D.E.) n (D.E.) 
Edad (años) 
¡MC (kg/m 2) 
Sexo (razón 
Femenino/Masculino) 
Duración de la Rinitis (años) 
Alérgenos 
Dermatophagoides.sp 
Polvo casero 
Cucaracha 
Gato 
Fraxinus angustifolia 
Lolium persistente 
Cynodon daetylon 
Ligustrum vulgare 
Plumas 
Sehinus molle 
Aspergillus fumigatus 
Candida albieans 
Holeus halepense 
13.23 (3) 
22.48 (44) 
6.1/3.8 
2.84 (1.72) 
n (%) 
9 (18%) 
8 (16%) 
7 (14%) 
6 (12%) 
5 (10%) 
4 (8%) 
3 (6%) 
2 (4%) 
2 (4%) 
1 (2%) 
1 (2%) 
1 (2%) 
1 (2%) 
11.27 (3) 
20.0 (33) 
1.8/8.1 
4 (3) 
n (%) 
9 (21.95%) 
8 (19.51%) 
7 (17.07%) 
5 (12.19%) 
5 (12.19%) 
1 (2.68%) 
3 (7.31%) 
1 (2.68%) 
1 (2.68%) 
1 (2.68%) 
0(0%) 
0(0%) 
0(0%) 
IMC. Indice de masa corporal. n. Promedio D.E. Desviación Estándar. Frecuencia %. Porcentaje. 
Una respuesta positiva a polen se asoció siempre a Wla respuesta positiva a otros alérgenos. 
El grupo de pacientes no expuestos a humo de tabaco se encontraban entre los 6 y 17 años, 
y el grupo de los pacientes expuestos a humo de tabaco entre los 7 y 17 años de edad 
(Tabla 1.) 
20 
El grupo de participantes expuestos a humo de tabaco, estuvieron expuestos durante los 2 
dias anteriores a su evaluación, los 13 pacientes del grupo reportaron solo tabaquismo 
pastVo_ 
El grupo de los pacie<ltes no expuestos a humo de tabaco refieren nunca haber estado 
expuesto a humo de tabaco durante el ultimo año y los dos illtimas dí",,_ 
Los pacientes del grupo de exposición a humo de tabaco así como los del grupo de no 
expuestos, fueron clasifICados por lo médicos Alergólogos en rinitis alérgica persistente 
moderada_ 
Los síntomas na .... les que se iltern>garon en el cuestionario del mismo nombre así como el 
grado de obstrucción na .... 1 en el grupo de pacientes expuestos y 00 expuestos a humo de 
tabaco se expresan en la figura 1 y 2, en donde se observa un mayor grado de obstrucción 
nasal de predominio en los expuestos a humo de tabaco, siendo estadísticamente 
significativa_ Observando que los síntomas na~les el que predomina es el prurito na .... 1 en 
pacientes expuestos a humo de tabaco_ 
No""" ........ 
"-
F9nl1_ Grwdo el< OboInocción nasol 
Con respecto a la cantidad de eosinófilos de la mucosa nasal (PBME) cuando se comparó a 
los dos grupos de pacientes expuestos y no expuestos a humo de tabaco, el grupo de 
expuestos presentó una mayor cantidad de eosinófilos, (media de 318.23, DE 710.53 vs 
23.72, DE 50.70) (Prueba t student, p<0.05). Sin embargo, en el análisis multivariado no se 
identificó (ANOVA, p>0.05). En la figura 3 se identifica la cantidad de eosinófilos de mucosa 
nasal de expuestos y no expuestos a humo de tabaco. 
Al analizar la cantidad de Eotaxina-1 en las muestras de células de la mucosa nasal en el 
grupo de los pacientes expuestos y no expuestos a tabaquismo, se encontró que las 
concentraciones de Eotaxina-1 fueron mayores en el grupo de expuestos (expuestos 447.15, 
DE 249 vs No Expuestos 5.63, DE 8.99), la cual fue significativamente significativa (ANOVA, 
p< 0.01). En la figura 4 y figura 5, se muestra la expresión de Eotaxina-1 en sujeto expuesto 
y no expuesto así como las cantidades de expresión en ambos grupos, respectivamente. 
Se identificó una correlación de los niveles de Eotaxina-1 con el numero de cigarrillos 
expuestos de manera pasiva (Pearson 0.47, p<0.05). 
En relación a la edad, sexo, peso e IMC no influenciaron en los nivelesde Eotaxina-1 en los 
sujetos expuestos (ANCOVA). 
Figura 3. Expresión positiva a Eotaxina-1 en un paciente expuesto a humo de tabaco (A) y en no 
expuesto a humo de tabaco (B) 
22 
Figura 4. Expresión positiva a Proteína Básica Mayor Eosinofilica en paciente expuesto a humo de 
tabaco (A) y no expuesto (B). 
1000,00 
--
800,00 
~ 
Z 
S 
600 ,00 
O 
L6.I 
400 ,00 
200 ,00 1 
23¿8 
,00 
1,00 2,00 
PACIENTES EXPUESTOS PACIENTES NO EXPUESTOS 
Figura 5. Cantidad de Eotaxina-1 en mucosa nasal en pacientes expuestos y no expuestos a humo 
de tabaco. 
23 
DISCUSION. 
los resultados de este estudio muestran que en nlnos y jóvenes con rinitis alérgica 
persistente, la exposición al humo de tabaco incrementa los niveles de Eotaxina-1 en la 
mucosa nasal así como la cantidad de eosinófilos. los niveles de Eotaxina-1 presentes en 
pacientes con rinitis alérgica persistente pacientes expuestos a humo de tabaco fueron 
mayores que en los pacientes no expuestos a humo de tabaco. 
Se ha identificado la posible participación del humo de tabaco en niños con rinitis alérgica en 
la severidad de los síntomas en los que puede estar influenciada por el incremento de los 
eosinófilos, y el mecanismo aún no se ha establecido, y se ha propuesto la posible 
participación de la eotaxina (30) debido a que se encarga de incrementar su migración a los 
órganos blanco como se ha identificado en otros estudios (31,37,38). la evidencia muestra 
que la Eotaxina-1 /CCl 11 coopera con la Il-5, la Il-5 estimula la liberación y diferenciación 
de los eosinófilos en la médula ósea, entre tanto la Eotaxina-1/CCl11 dirige la migración de 
estas células circulantes a su destino local (37). Gonzalo y cols. en 2003 reportan que la 
administración de Eotaxina-1 /CCl 11 en aerosol induce un flujo de eosinófilos en las vías 
aéreas de ratones. En cambio, ratones deficientes en Eotaxina-1/CCl11 no sólo muestran 
una disminución del reclutamiento de eosinófilos sino que también están protegidos de 
cambios inflamatorios inducidos por el reto alergénico (38). Existen pocos estudios del efecto 
del humo de tabaco en la eotaxina en sujetos con rinitis alérgica (30). 
Se ha identificado la presencia de eotaxina en lavados nasales. Hagan y cols. en el 2001 
identifico los niveles de Eotaxina 1-CCl11 por ELlSA en lavados nasales obtenidos antes y a 
los 15 minutos, 1 hora, 5 horas y 24 horas después de la exposición al alérgeno de sujetos 
con rinitis alérgica alcanzando una concentración menor a la inicial la cual va teniendo 
incremento progresivo durante las mediciones a los 15 minutos, 1 hora, 5 horas, llegando a 
ser casi el doble de la inicial a las 24 hrs. de la exposición al alérgeno, además que 
encontraron una correlación positiva entre los niveles de Eotaxina y la cantidad de 
eosinófilos a las 5 horas luego de la exposición al alérgeno (43). Aunque se ha identificado 
que este factor de la exposición a los alérgenos en el tiempo influye en los niveles de 
Eotaxina-1. En este estudio ambos grupos de pacientes con rinitis alérgica expuestos y no 
expuestos a humo de tabaco presentaron la misma severidad de la rinitis alérgica siendo 
todos moderados y en relación a los síntomas nasales también fueron similares en ambos 
grupos, por lo que este factor no tuvo influencia en nuestros resultados. 
En animales y en sujetos con asma, el humo de tabaco influye en las concentraciones de 
Eotaxina-1 y otros quimioatrayentes de eosinófilos (39). Yakamoto y cols. en 2003, en el cual 
su principal hallazgo fue que los niveles de Eotaxina-1 mediante ELlSA en el esputo y suero 
de pacientes asmáticos fumadores y no fumadores, aumentaron en los fumadores y en 
pacientes asmáticos, en comparación con los no fumadores. Así como se observó niveles 
de Eotaxina elevados en el esputo obtenido de los fumadores sin eosinofília (39). 
24 
Aunque en nuestro estudio únicamente se incluyeron pacientes con exposición a humo de 
tabaco en las ultimas 48 hrs, no se podría especificar si los niveles de Eotaxina-1 se 
mantienen, aumentan o disminuye a las 48 hrs. de la exposición. En un estudio realizado por 
Krisiukeniene y cols. en 2009 en el esputo de sujetos fumadores con asma tuvieron una 
mayor concentración de Eotaxina-1 que los no fumadores asmáticos (44). Aunque es el 
primer estudio realizado de Eotaxina-1 en mucosa nasal de pacientes con rinitis alérgica 
persistente comparando los pacientes expuestos y no expuestos a humo de tabaco, nuestros 
resultados coinciden que en la presencia de una patología alérgica al haber exposición a 
humo de tabaco aumenta los niveles de concentración de Eotaxina-1, como lo puntualizan el 
resto de los estudios. 
Se observo que la cantidad de eosinófilos guarda relación con los niveles elevados de 
Eotaxina-1 en los pacientes expuestos de manera pasiva a humo de tabaco, en comparación 
con los no expuestos, en el cual la Eotaxina-1 como se ha identificado influye en la migración 
de los eosinófilos, y se ha identificado en estudios como el realizado por Montaña y cols. en 
2013 donde demuestra que en la mucosa nasal de pacientes jóvenes con exposición activa-
pasiva al humo de cigarrillo de tabaco tenían más eosinófilos que los pacientes con sólo la 
exposición pasiva y los pacientes sin exposición al humo de cigarrillo de tabaco (30). Goo 
Min y cols. en 2007 identifica que la exposición a humo de tabaco puede prolongar la vida 
media de los eosinófilos, además de aumentar su producción sugiriendo que se debe a 
factores como la producción de factores de sobrevida como la Eotaxina entre otros (26). 
Ikeda y cols. en 2009 identifico que la presencia de Eotaxina-1 con inmunohistoquimica en 
pacientes con poliposis nasal y en secreciones detectadas por ELlSA correlacionó con la 
presencia de eosinófilos 
Los hallazgos apoyan la necesidad de diseñar estudios para investigar las asociaciones 
entre el humo de tabaco y otros quimioatrayentes de eosinófilos como las Eotaxina-2 y 
Eotaxina-3, entre otros. 
CONCLUSION. 
En pacientes jóvenes con rinitis alérgica persistente la exposlclon a humo de tabaco se 
relaciona a un incremento en los niveles de Eotaxina-1 en relación con pacientes no 
expuestos con la misma enfermedad, y la elevación en la concentración de Eotaxina-1 se 
relaciona con el aumento en la cantidad de eosinófilos. 
25 
REFERENCIAS 
1. Bush RK. Etiopathogenesis and management of perennial allergic rhinitis: a state of the arl 
review. Treat Respir Med 2004;3, pp.:45-57. 
2. Skoner DP. Allergic rhinitis: Definition, epidemiology, pathophysiology, detection, and 
diagnosis. J Allergy Clin Immunol2001 ;108, pp.:2-8. 
3. Bousquet J, Van Cauwenberge P, Khaltaev N, Aria Workshop Group, World Health 
Organization. Allergic rhinitis and its impact on asthma. J Allergy Clin Immunol 2001;108: 
pp.:147-334. 
4. Mygind N, Anggard A, Druce H. Definition, classification, and terminology. In: Mygind N, 
Weeke B, editors. Allergic and vasomotor rhinitis. Copenhagen: Muunksgaard 1985:15. 
5. Wright AL, Holberg CJ, Marlinez FD, Halonel M, Morgan W, Taussing LM. Epidemiology of 
physician-diagnosed allergic rhinitis in childhood. Pediatrics 1994;94: pp:895-901. 
6. Haberal 1, Corey JP. The role of leukotrienes in nasal allergy. Otolaryngol Head Neck Surg 
2003; pp:129:274-9. 
7. Byrne PM, Wood L. Interleukin-5 and allergic inflammation. Clin Exp Allergy 1999;29: 
pp.:573-5. 
8. Beeh KM, Beier J, Kornmann 0, Meier C, Taeumer T, Buhl R. A single nasal allergen 
challenge increases induced sputum inflammatory markers in non-asthmatic subjects with 
seasonal allergic rhinitis: correlation with plasma interleukin-5. Clin Exp Allergy 2003;33: 
pp:475-82. 
9. Lopez Velazquez B, Bastida Segura DL, Escárcega Barbosa D, et al. Determinación de 
interleucinas e IgG4 en pacientes con rinitis alérgica, con y sin inmunoterapia. Rev Alergia 
Mex 2004;5: pp:139-44. 
10. Naclerio RM. Allergic rhinitis. N Engl J Med 1991 :325: pp:860-9. 
11. Un R, Nahal A, Lee M, Menikoff H. Cytologic distinctions belween clinicalgroups using 
curette-probe compare to cytology brush. Ann Allergy, Asthma Immunol 2001; 86: pp:226-
31. 
12. Lund V. Allergic rhinitis-making the correct diagnosis. Clin Exp Allergy 1998; 28: pp:25-8. 
13. Escalante DA, Mercado OV, Sienra-Monge JJL. Rinosinusitis alérgica. Temas de pediatria: 
Alergia e Inmunologia. México:McGraw-Hill, 1997: pp:141-54. 
14. Meltzer EO. The prevalence and medical and economic impact of allergic rhinitis in the 
United States. J Allergy Clin ImmunoI1997;99: pp:805-28. 
15. Abbas AK, Uchtman AH. Inmunologia celular y molecular. 5ta Ed. Elsevier España: Madrid, 
2004: pp:563. 
16. Borish L. The role of leukotrienes in upper and lower airway inflammation and the 
implications for treatment. Ann Allergy Asthma ImmunoI2002;88: pp:16-22. 
17. Jirapongsananuruk 0, Vichyanond P. Nasal cytology in the diagnosis of allergic rhinitis in 
children. Ann Allergy Asthma ImmunoI1998;80: pp:165-70. 
18. Un RY, Clarin E, Lee M, Menikoff H, Nahal A. Patterns of nasal eosinophilia in allergy clinic 
patients as determined by swab and curette sampling. Allergy Asthma Proc 1997;18: 
pp:221-6. 
19. Bañuelos Arias AC, Montaño Velázquez BB, Campillo Navarrete MR, et al. Pruebas 
cutáneas, IgE sérica especifica e IgE total en el diagnóstico de pacientes con rinitis 
alérgica perenne. Rev Alergia Mex 2003;4: pp:147-53. 
20. Hadar T.,Yaniv E, Shvili Y., et al. Histopathological changes of the nasal mucosa induced 
by smoking. Inhalation Toxicology, 2009; 21 (13): pp:1119-1122 
21. Vinke JG, KleinJan A, Severijnen WFM, Fokkens WJ. Passive smoking causes an "allergic" 
cell infiltrate in the nasal mucosa of non-atopic children. Int J Pediatr Otorhinolaryngol 
1999;51 :pp:73-813. 
26 
22. Bascom R, Kesavanathan J, Permutt T, Fitzgerald TK, Sauder L, Swift DL. Tobacco smoke 
upper respiratory response relationships in healthy nonsmokers. Fund App Toxicology 
1996; 29: pp:86-93. 
23. Matsumoto K, Aizawa H, Inoue H, et al. Eosinophilic airway inflammation induced by 
repeated exposure to cigarette smoke. EurRespir J 1998;12:pp:387-94. 
24. Yamaguchi Y, Suda T, Ohta S et al. Analysis of the survival of mature human eosinophils: 
Interleukin-5 prevents apoptosis in mature human eosinophils. Blood 1991 ;78; pp:2542-7. 
25. Lee E, Robertson T, Smith J, Kilfeather S. Leukotriene receptor antagonists and synthesis 
inhibitors reverse survival in eosinophils of asthmatic individuals. Am J RespirCrit Care Med 
2000;161; pp:1881-6. 
26. Goo Min M.- Jin Song D, Miller M., et al. Coexposure to Environmental Tobacco Smoke 
Increases Levels of Allergen-Induced Airway Remodeling in Mice. J Immunology 2007; 
178: pp:5321-5328. 
27.0livieri M, Bodini A, Peroni DG, et al. Passive smoking in asthmatic children. Effect of a 
"smoke-free house" measured by urinary cotinine levels. Allergy Asthma Proc 2006;27: 
pp:350-353. 
28. Scherer G, Conze C, von Meyerinck L, Sorsa M, Adlkofer F. Importance of exposure to 
gaseous and particulate phase components of tobacco smoke in active and passive 
smokers. Int Arch Occup Environ Health 1990;62: pp:459-66. 
29. Moerloose K., Pauwels R., Joos G. Short-Term Cigarette Smoke Exposure Enhances 
Allergic Airway Inflammation in Mice. Am J Respir Crit Care Med 2005;172: pp:168-172. 
30. Montaño Velázquez BB, Garcia Vázquez FJ, Campillo Navarrete R, Mogica Martinez MD, 
Flores González L, Jáuregui-Renaud K. I nfluence of exposure to tobacco cigarette smoke 
on the eosinophil count in the nasal mucosa of young patients with perennial allergic 
rhinitis. Rhinology 2013; 51: pp:253-258. 
31. Polak J, Van Noorden S. Immunocytochemistry: Modern Methods and Applications. 
Radcliffe England Ed. WRIGHT, 2nd Ed. 1986. Van Noorden S Chapter 3. Tissue 
Preparation and Immunostaing Techniques for Light Microscopy. 
32. I HCWORLD Life Science Information Nelwork. 2007 
http://www.ihcworld.comUntro/intro.htm (Consultada 17/03/2010). 
33. Gomez G. A., Casas G. M., Angel. Interpretación clinica del laboratorio. Ed. Panamericana 
2006. pp:365-370. 
34. Gary H, Kaser M: Making and Using Antibodies. A practical handbook. Boca Raton FL 
EUA. Ed. CRC Press 2007. Ramos Vara J, Ackerman J: Immunohistochemical Methods. 
35. Burnette W. "Western Blotting": electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl 
sulfate - polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with 
antibody and radioiodinated protein A. Analytical Biochemistry 1981,112 (2): pp:195-203. 
36. Terán L, Ledesma Y, Krengel S, et al. Eotaxinas en asma bronquial y poliposis nasal. Gac 
Med Mex 2006;142:2: pp:139-144. 
37. Semik A, Barczyk A, Waderkiewicz R, et al. Eotaxin, but not IL-8, is increased in upper and 
lower airways of allergic rhinitis subjects after nasal allergen challenge. Allergy Asthma 
Proc 2011 ;32: pp:230 -238. 
38. Gonzalo JA, Lloyd CM, Wen D, et al. The coordinated action of CC chemokines in the lung 
orchestrates allergic inflammation and airway hyperresponsiveness. J Exp Med 1998;188: 
pp:157-167. 
39. Yamamoto K, Takanashi S, Hasegawa Y. Eotaxin Level in Induced Sputum Is Increased in 
Patients with Bronchial Asthma and in Smokers. Respiration 2003;70: pp:600-605. 
40. Paplinska M, Hermanowicz J, Nejman P. Expression of eotaxins in the material from nasal 
brushing in asthma, allergic rhinitis and COPD patients. Cytokine 2012;60: pp:393-399. 
27 
41.lkeda K, Toru Y, Kojima Y, Koyanagi A, Yokoi H, Saitoh T, Kawano K, Furukawa M, 
Kusunoki T. Eotaxin-1, -2, and -3 immunoreactivity and protein concentration in the nasal 
polyps of eosinophilic chronic rhinosinusitis patients. Acta Clin Croat 2009; 48: pp:85-115. 
42. Terada N, Hamano N, Kim W., et al. The Kinetics of Allergen-induced Eotaxin Level in 
Nasal Lavage Fluid. American J Respiratory Critical Care Medical2001 ;164: pp.575-579. 
43. Hogan SP, Mishra A, Brandt EB, et al. A pathological function for eotaxin and eosinophils in 
eosinophilic gastrointestinal inflammation. Nature Immunol 2001;1: pp:353-360. 
44. Krisiukeniene A, Babusyte A, Stravinskaite K, et al. Smoking affects eotaxin levels in 
asthma patients. J Asthma 2009;46: pp:470-6. 
45. Secretaria de Salud. Dirección General de Epidemiologia. Encuesta Nacional de 
Adicciones 2008 (ENA-2008). México 2008. 
46. Jirapongsananuruk 0, Vichyanond P. Nasal cytology in the diagnosis of allergic rhinitis in 
children. Ann Allergy Asthma ImmunoI1998;80: pp:165-70. 
47. Cozen W, Diaz-Sanchez D, James Gaudermann W, et al. Th1 and Th2 cytokines and IgE 
levels in identical twins with varying levels of cigarette consumption. J Clin Immunol 
2004;24: pp:617-22. 
48. Corren J, Harris AG, Aaronson D, Beaucher W, et al. Efficacy and safety of loratadine plus 
pseudoephedrine in patients with seasonal allergic rhinitis and mild asthma. J Allergy Clin 
ImmunoI1997;100: pp:781-788. 
49. Warren CW. Tobacco use among youth: a cross country. Tob Control 2002;11 : pp:252-70. 
50. Lazcano-Ponce E, Hernández-Avila M. La epidemia de tabaquismo. Epidemiologia, 
factores de riesgo y medidas de prevención. Salud Publica Mex 2002;44: pp:51-2. 
28 
29 
ANEXO 1. 
CARTA DE CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA PARTICIPACION EN PROYECTOS DE INVESTIGACION CLlNICA 
HOSPITAL CENTRO MEDICO "LA RAZA". 
Lugaryfecha: ____________ . 
Por medio del presente autorizo que mi (parentesco): _____________ _ 
(nombre):_____________________________________________ participe en el proyecto de investigación titulado 
"ASOCIACION DE LA FRECUENCIA DE EXPRESiÓN DE EOTAXINA Y LA CANTIDAD DE EOSINOFILOS EN MUCOSA NASAL 
DE SUJETOS ADULTOS CON RINITIS ALÉRGICA PERSISTENTE EXPUESTOS Y NO EXPUESTOS A TABAQUISMO", con 
número de registro y autorización por Comité Local de Investigación y Ética en Investigación en Salud R-2014-3502-86, que tiene 
como objetivo medir y comparar la expresión proteica de eotaxina-1,2,3 (inmunohistoquimica) con la cantidad de eosinófilos 
(inmunohistoquimica) en mucosa nasal de sujetos adultos expuestos y no expuestos a tabaquismo. El estudio consistirá en 
registrarlas caracteristicas demográficas y clinicas de los pacientes. Luego se les administrará el cuestionario de la Encuesta 
Nacional de Adicciones 2008 y se obtendrá una muestra de orina para la cuantificación de cotinina y se obtendrá una muestra de 
mucosa nasal del cornete inferior, mediante raspado con cureta. 
Se me ha explicado que la participación de mi (parentescoL ________________ consistirá en la aplicación de un cuestionario 
para evaluar la exposición de factores ambientales, la medición con un aparato por la nariz del grado de la nariz tapada y un 
pequeño raspado de la nariz para obtener células (que aunque no se ha documentado alguna complicación, podria existir una 
remota posibilidad de un escaso sangrado en la nariz, por lo cual se realizarán las medidas necesarias para su prevención y 
tratamiento), y una muestras de orina. 
Declaro que se me ha informado ampliamente sobre los posibles riesgos, inconvenientes, molestias y beneficios derivados de su 
participación en éste estudio, aunque no se han registrado efectos que dañen la nariz con los estudios que se realizarán, aún así, 
estaré pendiente y en contacto con el investigador Dra. B. Montaño V. (celular 55 5408 4752) Y Dra. B. Flores (celular 
5529198051) ante la presencia de cualquier molestia. 
El investigador principal se ha comprometido a darme la información oportuna sobre cualquier procedimiento, para responder 
cualquier pregunta y aclarar cualquier duda que le plantee acerca de los procedimientos que se llevarán a cabo, los riesgos, 
beneficios o cualquier otro asunto relacionado con la investigación. 
Entiendo que conservo el derecho de retirar mi presencia del estudio en cualquier momento en que lo considere conveniente, sin 
que ello afecte la atención médica que recibe del Instituto. 
El investigador principal me ha dado seguridad de que no se me identificará en las presentaciones o publicaciones de este 
estudio y que los datos relacionados con su privacidad serán manejados en forma confidencial. También se ha comprometido 
proporcionarme la información actualizada que se obtenga durante el estudio, aunque ésta pudiera hacerme cambiar de parecer 
respecto a mi permanencia en el mismo. 
Nombre y firma del Responsable 
O Tutor 
Testigo 
Dra. B. Beatriz Montaño Velázquez 
Investigador principal 
Testigo 
30 
ANEXO 2. 
INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL 
UMAE CENTRO MEDICO LA RAZA 
NIÑOS 
Nombre: __________________________________________________________ ___ 
Número de afiliación: ____________________________ _ 
T el éfono: ____________________________ _ 
Edad: _____ _ 
I MC. ________ _ 
Peso ________________ _ 
Talla ________________ _ 
Sexo ______________________ ___ 
Oc upación. __________________ _ 
Grado de obstrucción por síntomas nasal: 
LEVE MODERADO 
Marque aquellos síntomas que presenta: 
Obstrucción (nariz tapada) _________ _ 
Rinorrea ( secreción nasal) _________ _ 
Prurito (comezón) ________________ _ 
Estornu dos ____________________ _ 
Alcoholismo 
Tabaquismo 
Activo: 
S 1 __ _ 
SI 
Pasivo: ___ _ 
NO 
SEVERO 
NO 
Tiempo de evolución de rinitis alérgica persistente __________________________ _ 
Clasificación _____________ _ 
Pruebas de alergia: _________________ _ 
EOTAXINA 
REV.l __ _ REV.2 ___ _ REV.3 __ _ 
EOSINOFILOS 
REV.l __ _ REV.2 ___ _ REV.3 ___ _ 
31 
ANEXO 3. 
ENCUESTA NACIONAL DE ADICCIONES 
Encuesta sobre Tabaquismo en Jóvenes Mexicanos 
1. ¿Alguna vez has probado cigarros, aunque sólo hayas aspirado una o dos veces? 
A) Si 
B)No 
2. ¿Cuántos años tenías cuando probaste fumar por primera vez? 
A)Nunca he fumado cigarros 
8)10 años o menos 
C)11 años de edad 
0)12 años de edad 
E)13 años de edad 
F)14 años de edad 
G)15 años de edad 
H)16 años o más 
SI TU RESPUESTA ES "NUNCA HE FUMADO CIGARROS" FAVOR DE PASAR A LA PREGUNTA NUMERO 11. 
3. Cuando fumaste por primera vez ¿cuál fue la razón por que lo hiciste? 
A)Por curiosidad 
B)por que me presionaron mis amigos 
C)para sentirme parte de un grupo 
D)para parecer de más edad 
E)para tener más personalidad 
F)porque ya tengo edad suficiente para hacerlo 
G)Otra 
4. Durante los pasados 30 días (un mes), ¿cuántos días fumaste cigarros? 
A) O días 
B) 1 a 2 días 
C) 3 a 5 días 
D) 6 a 9 días 
F) 20 a 29 días 
G) cada día los 30 días 
5. Durante los pasados 30 días (un mes), los días en que fumaste, ¿cuántos cigarros fumaste? 
A)No fumé cigarros durante los pasados 30 días (un mes). 
B) Menos de un cigarro por día 
C)1 cigarro por día 
D)2 a 5 cigarros por día 
E)6 a 10 cigarros por día 
F)11 a 20 cigarros por día 
G)Más de 20 cigarros por día 
6. Durante los pasados 30 días (un mes), ¿qué marca de cigarros fumaste con mayor frecuencia? 
(SELECCIONAR UNA SOLA RESPUESTA) 
A)No fumé cigarros durante los pasados 30 días (un mes) 
B) Ninguna marca especial 
C)Malboro 
D)Broadway 
E)Boots 
F)Montana 
G)Camel 
H)Otra marca nacional, ¿cuál? _______ _ 
7. Durante los pasados 30 días (un mes), ¿alguna vez utilizaste tabaco en otra forma que no fueran cigarros? (por ejemplo: 
tabaco para masticar, aspirar, puros, pipa, cigarros pequeños, chicles de nicotina) 
A)Si 
B)No 
32 
8. ¿Cuál es el lugar donde principalmente fumas?(marca una sola respuesta) 
A)No fumo cigarros 
B)En casa 
C)En el colegiol escuela 
D)En el trabajo 
E)En casa de amigos 
F)En fiestas y reuniones sociales 
G)En lugares públicos (por ejemplo: parques, en la calle, en centros comerciales, étc) 
H)En otros lugares 
9. ¿Alguna vez fumas ó tienes ganas de fumar inmediatamente cuando te levantas en la mañana? 
A)Nunca fumé cigarro 
B)He dejado el cigarro 
C)No, no fumo ni me dan ganas de fumar inmediatamente al levantarme en la mañana 
D)Sí, algunas veces fumo o me dan ganas de fumar al levantarme en la mañana 
E)Sí, siempre fumo o tengo ganas de fumar al levantarme en la mañana 
10. En los pasados 2 días ¿ fumaste cigarros? 
A)No fumé cigarros durante los pasados 2 días (ayer o anteayer). 
B) Menos de un cigarro por día 
C)1 cigarro por día 
D)2 a 5 cigarros por día 
E)6 a 10 cigarros por día 
F)11 a 20 cigarros por día 
G)Más de 20 cigarros por día 
11. Durante los pasados 7 días ¿cuántos días fumó alguien en tu presencia estando en tu casa? 
A)Odías 
B)1 a 2 días 
C)3 a 4 días 
D)5 a 6 días 
E)7 días 
12. Durante los pasados 2 días ¿ fumó alguien en tu presencia estando en tu casa? 
A)SI 
B)NO 
13. Durante los pasados 7 días ¿cuántos días fumó alguien en tu presencia estando fuera de tu 
casa? 
A)O días 
B)1 a 2 días 
C)3 a 4 días 
D)5 a 6 días 
E)7 días 
14. Durante los pasados 2 días ¿fumó alguien en tu presencia estando fuera de tu casa? 
A)SI 
B)NO 
15.¿Alguno de tus mejores amigos o amigas fuma? 
A)Ninguno de ellos 
B)Alguno de ellos 
C)La mayoría de ellos 
D)Todos ellos 
16.¿tus padres (o padrastro, o madrastra, o tutores) fuman? 
A)Ninguno de ellos 
B)Los dos 
C)Solo mi papá (padrastro o tutor) 
D)Solo mi mamá (madrastra o tutora) 
E)No sé 
17. En los pasados 2 días ¿ a cuantos cigarros estuviste expuesto? 
A) No estuve expuesto a cigarros durante los pasados 2 días (ayer o anteayer) 
B) Menos de un cigarro por día 
C) 1 cigarro por día 
D) 2 a 5 cigarros por día 
E) 6 a 10 cigarros por día 
F) 11 a 20 cigarros por día 
G)Mas de 20 cigarros por día 
33 
	Portada
	Contenido
	Texto