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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO MAESTRÍA EN MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA Clasificación Taxonómica de Parásitos de Importancia en Salud Pública en cinco especies de Pescados Marinos, que se expenden en “La Nueva Viga”, México, D.F. TESIS QUE PARA OPTAR POR EL GRADO DE: MAESTRÍA EN MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA PRESENTA VEGA MARTÍNEZ DANIELA TUTOR JOSÉ FERNANDO NÚÑEZ ESPINOSA FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA COMITÉ TUTORAL DRA. EVANGELINA ROMERO CALLEJAS FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA DRA. ADRIANA LLORENTE BOUSQUETS FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN � MÉXICO, D.F. , AGOSTO 2013 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. � � �� CONTENIDO PÁGINA RESUMEN ............................................................................................................................ 4 � CAPÍTULO 1. MARCO TEÓRICO .................................................................................. 5 1.1 INTRODUCCIÓN .......................................................................................................... 6 ���������� ����� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 1.2 ANISAKIASIS O ANISAKIDOSIS ............................................................................ 13 ��������� ��� �� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ������ � ���������� ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� �������������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� �������������������� ����� �� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ������������������������������ � ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� �������������� �� ������ �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ������������������ ��� �� ��� ������ �� � ������������������������������������������������������������������������������������������������� � �������! �������� � ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� �����������������"� �"����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ���������� �� � ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 1.3 ANTECEDENTES ....................................................................................................... 22 JUSTIFICACIÓN .............................................................................................................. 26 HIPÓTESIS ........................................................................................................................ 27 OBJETIVOS ....................................................................................................................... 27 �� ����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ���� ��� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� CAPÍTULO 2. METODOLOGÍA .................................................................................... 28 2.1 MATERIAL Y MÉTODOS ........................................................................................ 29 ������ ��������� ����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� � ������� �"�������� ����#��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� � ���������� ����� ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������$� ������ �� ���������� ����� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ ���������� �� ����� ! � ����� � ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ ������ ! � ��������#� �� %� � ���"� �� ��� � �� ���������������������������������������������������������������������������������������� ���������&�� ����� ����� ����� ��� ���'� �� �������� �� �� ������������������������������������������������������������ CAPÍTULO 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................. 39 3.1 INSPECCIÓN ............................................................................................................... 40 ������������������� �������������� ������ ��� �� ������������������������������������������������������������������������������� �������#������������� �"����� ���(��������&�� �������������������������������������������������������������������������������������������� ��������� � �#������� ������� �"��������&�� ����������������������������������������������������������������������������������������������� ������ � �������#���������� � ����������������������&�� ��������������������������������������������������������������� � � �� ���������&�� ��� ������ ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ���������&�� ����������� ��������� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ 3.1.6.1 Caranx hippos (Jurel) ....................................................................................... 47 ��������������������������� ��� �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 3.1.6.1.2 TREMATODOS ASPIDOGASTREOS ........................................................................ 51 ������������������������� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ 3.1.6.1.4 NEMATODOS .............................................................................................. 54 3.1.6.2 Scomberomorus maculatus (Sierra) ................................................................. 56 ���������������������������� ��� �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������3.1.6.2.2 COPEPODOS ........................................................................................................ 58 3.1.6.2.3 NEMATODOS ............................................................................................. 60 3.1.6.3 Caranx crysos (Cojinuda) ................................................................................. 63 ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 3.1.6.4 Eugerres plumieri (Mojarra rayada) ................................................................ 64 ���������������������������� � � ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 3.1.6.5 Mugil cephalus (Lisa) ....................................................................................... 66 ����������������������������� ��� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� 3.1.6.5.2 COPEPODOS ....................................................................................................... 67 ��������������������������� ��� �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� � 3.1.6.5.4 ISOPODO Y ARGULIDO ....................................................................................... 70 ���������������������������� � � ���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ������ � ���&�� ���� � ����� ��� �� ��� ���'� �� � ��� ���� � �� �� ��� ��� ��� � ������� ��� ���&�� ���� � �������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� DISCUSIÓN ........................................................................................................................ 75 CONCLUSIONES .............................................................................................................. 91 RECOMENDACIONES .................................................................................................... 93 LITERATURA CITADA .................................................................................................. 95 � ANEXOS ........................................................................................................................... 107 � �)����*�� ��� ���� � ��� �)� ��� �������������� ���������� ������ ��� �� ��������������������$�� � �)����*������ �� ����� ! 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Para efectos del presente estudio se eligió por su importancia para la comercialización de alimentos provenientes de mar, al mercado de “La Nueva Viga”, ya que en él se expenden a diario 1,500 toneladas, de diversas especies de pescados y mariscos, y de al menos 26 especies de pescados provenientes del Océano Pacífico y del Golfo de México. La muestra se conformó por cinco especies de origen marino de mayor consumo para la población del Distrito Federal, de acuerdo con los datos de PROFECO, 2010, y tomando en cuenta lo observado en mercados y tiendas de autoservicio; éstas fueron: Lisa (Mugil cephalus), Mojarra rayada (Eugerres plumieri), Jurel (Caranx hipos), Cojinuda (Caranx crysos) y Sierra (Scomberomorus maculatus). El tamaño de la muestra se determinó de acuerdo con la metodología de curva área-especie y con base en el principio del Teorema del Límite Central (30 de cada especie). La elección de los ejemplares se realizó de manera aleatoria. De los 150 ejemplares muestreados se recolectaron 1,664 parásitos de 7 diferentes grupos, dentro de los cuales se identificaron 26 diferentes tipos de parásitos, de los cuales 8 pudieron ser clasificados por especie y 18 por género, como sigue: Monogeneos, Cemocotyle sp., Allopyragraphorus sp., Protomicrocotyle sp., Metamicrocotyla macracantha, Microcotyle sp., Cynoscionicola sp. y Thoracocotyle sp. Copepodos, Caligus minimus, Lernanthropus corniger, Lernanthropus mugilis, Ergasilus sp., Kroyeria sp., Taeniacanthus sp., Naobranchia lizae y Lepeophtheirus sp. Aspidogastreo, Lobatostoma sp. Isopodos, Nerocila acuminata, Aega sp., y Sphaeroma sp. Argulidos, Argulus sp. Acantocefalos, Floridosentis mugilis y Neoechinorhynchus golvani. y Nematodos, Hysterothylacium sp., Paraphilometroides sp., Physocephalus sp. y Contracaecum sp. Se encontraron dos parásitos de importancia en Salud Pública, los cuales corresponden al Nematodo Contracaecum sp., recolectado de la especie Mugil cephalus (Lisa) y el nematodo Hysterothylacium sp. obtenido de la especie Caranx hippos (Jurel). Es importante resaltar que las 30 Lisas se encontraron parasitadas con el nematodo Contracaecum sp., encontrándose en hígado, riñón y cavidad celómica, en estadio larval 3, y en un solo ejemplar se encontró en intestino en estadío larval 2, el total de estos nematodos, fue de 429 Contracaecum sp. En el caso de Hysterothylacium sp. se encontraron 350 ejemplares en el intestino de un solo ejemplar de Jurel, en estadio larval 2. Ninguno de los nematodos fue encontrado en músculo, sin embargo el punto clave radica, en que una vez muerto el pez los parásitos pueden migrar al músculo y general así el riesgo de importancia en Salud Pública. � � �� CAPÍTULO 1 Marco Teórico � � �� 1.1 INTRODUCCIÓN: 1.1.1 Aspectos generales México posee una extensión territorial de 1, 964, 375 km2, con una superficie continental de 1, 959, 248 km2 y una insular de 5,127 km2. También ostenta gran variedad de sistemas costeros y marinos dentro de sus aguas territoriales: 12,500 km2 de superficie de lagunas costeras y esteros y 6,500 km2 de aguas interiores como lagos, lagunas, represas y ríos. Además de la extensión de sus litorales: 629,925 hectáreas al litoral del Pacífico y 647,979 hectáreas al litoral del Golfo de México y el Mar Caribe, lo que le confiere un gran potencial pesquero (Juárez, 2007) 1. La Organización de las Naciones Unidaspara la Agricultura y la Alimentación (FAO), a través de su Departamento de Pesca y Acuicultura, establece que mundialmente existen 2 tipos de producción pesquera: una es por medio de la acuicultura y otra es por medio de la captura de animales de su medio natural (pesca), ambas con el fin de proveer de alimento al humano (FAO, 2010) 2. La acuicultura es el conjunto de actividades, técnicas y conocimientos de cultivo de especies acuáticas vegetales y animales, bajo condiciones controladas (Rafful, 1981) 3. La pesca se define como cualquier acto que se ejecuta con el propósito de “atrapar” animales acuáticos (pescados) en las aguas, playas, costas o riberas. También se incluyen a las especies de invertebrados que se extraen del mar (mariscos), (Rafful, 1981) 3. Para México, constituye una actividad estratégica que tiene un gran impacto económico, social y alimentario; ya que contribuye a la generación de la riqueza por medio de la procuración de empleos y a su gran potencial productivo; además ofrece una amplia base de productos � � �� alimenticios que contribuyen en el planteamiento de políticas enfocadas en ofrecer a los consumidores comida sana, nutritiva y accesible (Juárez, 2007) 1. Esta actividad se realiza en tres áreas geográficas principales: 1) Litoral del Pacífico; 2) Litoral del Golfo y El Caribe, y 3) aguas continentales. Según datos de la FAO, a nivel mundial en 2004, México se colocó en el lugar 16 como pescador marítimo y en el lugar 28 como productor acuícola, en tanto que en el plano regional México se sitúa en el segundo lugar como pescador marítimo sólo después de Perú (Juárez, 2007) 1. Año con año, la producción nacional ha ido en aumento, en 2007 se alcanzó un volumen de 1, 539, 100 toneladas, de las cuales 1, 450, 063 correspondieron a la captura y 89, 037 al área de acuicultura, (equivalente al 7.74% del volumen de producción pesquera en Latinoamérica y 1.1% respecto del volumen de pesca mundial). 1 Para 2008, el volumen de producción ascendió a 1, 739, 922 toneladas, de las que 1, 588, 857 fueron por captura y 151, 065 a acuicultura, éstos resultados generan que México se encuentre entre los 20 primeros países productores pesqueros por captura (FAO, 2012) 4, 5. En cuanto a las especies capturables, por su importancia comercial, en México, en aguas continentales y territoriales, se les ha divido en 4 grupos: 1. Especies pelágicas (atún, sardina, anchovetas, jurel, cojinuda, sierra); 2. Especies demersales (huachinango, huachinango rojo, lisa, mojarra rayada, pargo, tiburón, cazón, peto, macarela reina); 3. Crustáceos y moluscos (camarón, langosta, abulón, ostión, almeja, pulpo, caracol, pepino de mar, erizo); � � � 4. Especies de cría: mojarra, tilapia, carpa, trucha, bagre y langostino (Juárez, 2007) 1. Como se puede observar, las especies jurel, cojinuda y sierra pertenecen a las especies pelágicas, las cuales son aquellas que no viven en las proximidades del fondo, esto es nadan o son arrastrados pasivamente por la actividad de las aguas al estar flotando en ellas, con poco contacto con el fondo; al contrario de las especies demersales en donde se sitúan las especies lisa y mojarra rayada, que viven cerca del fondo y dependen de él (FAO, 2012) 6. El país cuenta con más de 300 especies de peces y mariscos comestibles, de los cuales aproximadamente 200 son consumidos regionalmente, y alrededor de 100 especies comestibles se consideran comerciales y se encuentran en los diversos mercados de acuerdo a su temporada de producción (Gobierno federal, 2010) 7. Con respecto del volumen de la producción, el 85% del total se destina al mercado interno, mientras que el 15% restante se considera para la exportación, principalmente a los Estados Unidos. Es importante señalar que la demanda de productos pesqueros para el consumo interno se ha estado incrementado (reportes obtenidos a partir de 2001), (Juárez, 2007) 1. En cuanto a las tendencias de consumo se ha observado que la ingesta de pescado y productos del mar se ha incrementado en urbes, como la Ciudad de México, debido a sus propiedades alimenticias, así como al bajo costo de venta de algunas especies, vinculado al desarrollo de técnicas modernas de captura, industrialización y comercialización. En los últimos 8 años el consumo nacional per cápita de productos del mar y acuícolas se ha incrementado, según datos de la FAO, al pasar de 7.16 kg registrados en el año 2001 a 10.4 � � � kg consignados en el 2008. Para el 2010 la Comisión Nacional de Pesca (CONAPESCA) determinó un consumo nacional per cápita de 12.8 kg, siendo 10.57 kg de consumo directo y 2.22 kg de consumo indirecto. La comercialización de los productos procedentes de la pesca marítima y la acuicultura se realiza en las centrales de abastos, cadenas de almacenes e hipermercados, y en algunos casos en puntos de venta establecidos por parte de las empresas productoras o plantas procesadoras. Los principales centros de distribución en el territorio nacional son: La Nueva Viga en el Distrito Federal; Irapuato y León, Guanajuato; Monterrey, Nuevo León; Oaxaca, Oaxaca; Puebla, Puebla; Tuxtla Gutiérrez, Chiapas; y Zapopan, Jalisco (Juárez, 2007) 1. Por lo que atañe a “La Nueva Viga”, se considera que este mercado es el principal punto de distribución y comercialización de pescados y mariscos para la Ciudad de México y su zona conurbada, ya que en él se expenden diariamente 1,500 toneladas de las diversas especies, para más de 3 millones de consumidores (Gobierno federal, 2012) 7. Las nuevas demandas en el consumo, así como las normas sanitarias para la comercialización de productos alimenticios, deben considerar, entro otros, el rubro de la calidad, ya que el potencial consumidor debe conocer cuándo un producto es adecuado para su consumo (FAO, 2010; Jaramillo, 1994) 2, 8. La calidad es un atributo que determina que tan “adecuado” es, o no un producto o servicio. En el caso de los pescados, la calidad se puede medir por medio de métodos sensoriales que incluyen: vista, tacto, olor y sabor o bien, por métodos químicos (Juárez, 2007; FAO, 2010; Jaramillo, 1994) 1, 2, 8. � � ��� Una determinación de la calidad, es el grado de frescura. Existen varias escalas de puntuación para evaluarla en estos productos, Rafful, 1981, utilizó 4 niveles para ésta determinación, los cuales son: muy fresco, fresco, regular o alterado. “La calidad va de la mano con la inocuidad”. (Núñez Espinosa, comunicación personal). Un producto inocuo, es aquel que al ser consumido no causa daños a la salud y debe estar ausente de alteración, adulteración o contaminación. Por lo tanto, un producto contaminado, no es un producto inocuo. La contaminación en alimentos puede ser por agentes biológicos (parásitos, hongos, bacterias o sus toxinas, virus), químicos (metales pesados, higienizantes, hidrocarburos, etc.), y/o físicos (espinas, vidrios, grapas, astillas de madera, etc.), (Jaramillo, 1994) 8. Desde el punto de vista químico, la carne de pescado tiene una actividad acuosa (Aw) elevada, en comparación con otras, como la de res o cerdo; esto favorece el desarrollo de agentes patógenos, que dan pie al desarrollo de una contaminación biológica que se evidencia, entre otros elementos, por la presencia de estos (Rafful, 1981) 3. El parasitismo es una de las modalidades de asociación de los seres vivos, es decir de simbiosis; es una asociación antagónica e inestable entre dos seres de distinta especie, de los cuales el más pequeño, el parásito, vive de modo temporal o permanente en otro ser más organizado, el hospedador, alimentándose a sus expensas y causándole un daño potencial o actual. El parásito depende metabólica y evolutivamente del hospedador, con lo cual de forma actual o potencial ocasiona acciones patógenas o modificaciones del equilibrio homeostático del hospedador (Sánchez,2000) 9. � � ��� El éxito del parasitismo radica en su capacidad para adaptarse y para integrarse al medio interno del huésped. Desde el punto de vista inmunológico, el parasitismo puede considerarse un éxito si el parásito se integra en el hospedador de manera que no se le considere exógeno (Sánchez, 2000) 9. Se ha observado que el parasitismo en peces es un fenómeno frecuente; sin embargo, las enfermedades parasitarias no se manifiestan más que cuando las condiciones del medio ambiente permiten la proliferación de los mismos (Sánchez, 2000; García, 2008; Vega, 2009) 9-11. Las infestaciones parasitarias en alimentos tienen gran importancia desde varios puntos de vista: económico, ya que desencadenan efectos negativos en la comercialización del producto, debido a que alteran el aspecto de un producto en forma desagradable, inhibiendo así su capacidad de comercialización, y por lo tanto, su rentabilidad. Biológico, debido a que los parásitos inciden en el rendimiento, alterando la capacidad reproductiva de las especies, además de provocar una disminución en la conversión alimenticia y generar una baja ganancia de peso. Finalmente sanitario, debido a que los organismos parásitos inducen morbilidad y mortalidad en hospederos y potencialmente impactan en la salud de los consumidores (García, 2008; Vega, 2009) 10, 11. Por otra parte hay una gran diversidad de parásitos, aunque los que con mayor frecuencia se encuentran en los pescados se dividen en: protozoos, platelmintos, nematodos y crustáceos (García) 12. La infestación larvaria en peces pueden generar helmintiasis humanas a veces graves como la difilobotriosis, dioctofimosis (nefropatías), distomatosis hepato-biliares, � � ��� heterofiosis (importante por afecciones cerebro-espinales y miocárdicas). Nematodos como Gnathostoma sp. (larvas migrans subcutáneas y viscerales), Angiostrongylus cantonensis (meningoencefalitis), Capillaria philippinensis (enteritis) y Anisakidae (inflamación gástrica y duodenal). Existen numerosos casos registrados en diferentes partes del mundo, aunque la mayoría se sitúan en lugares donde el pescado se consume crudo y alberga distintas fases evolutivas de parásitos, que al ser ingeridas por el hombre lo infectan, éste problema es de Salud Pública y se conoce como ICTIOZOONOSIS (García, 2008) 10. Las ictiozoonosis parasitarias consideradas más importantes por el consumo de pescado son Paragonimosis (P. westermani, P. szechuanensis), Gnatostomiosis (Gnathostoma sp.) y Anisakidosis (Anisakis simplex, Contracaecum sp. y Pseudoterranova sp.), (García) 12. Aunque estas enfermedades se presentan en México, no existe mucha información sobre el número de casos pero se tiene lo siguiente: - Para el caso de Paragonimiosis en México, se consideran zonas endémicas Colima, Puebla, Hidalgo, San Luis Potosí, Michoacán, Nayarit. Se ha reportado su presencia en Yucatán, Veracruz, Tabasco, Chiapas y Estado de México, aunque se carece de información reciente (UNAM, 2011) 13. - Para el caso de Gnatostomosis, la enfermedad se ha detectado en Baja California, Sinaloa, Nayarit, Jalisco, Guerrero y Oaxaca, por el lado del Pacífico; por el del Golfo de México, en Tamaulipas, Veracruz y Tabasco y en la región central, en Aguascalientes. Sin embargo, otros estados de la República como Colima, Chiapas, Michoacán, Morelos y � � ��� Yucatán están involucrados, ya que se han encontrado larvas o adultos en diferentes especies de animales silvestres o domésticos (Lamothe, 2003) 14. - Pocos son los reportes de Anisakidosis en el país, sin embargo se ha reportado en Veracruz, Oaxaca y Monterrey (Alejo, 2003; Aguilar, 2002; Iruegas, 2010) 15- 17. Dada la importancia de los anisakidos en este trabajo, se ahondará en la historia natural de ésta enfermedad. 1.2 ANISAKIASIS O ANISAKIDOSIS La Anisakiasis o Anisakidosis es una ictiozoonosis producida por parásitos helmintos clasificados dentro de los nematodos (García) 12. 1.2.1 Agente infeccioso Es un parásito helminto, de cuerpo no segmentado, que forma parte de la clase Nematoda. Es de color blanquecino, casi transparente, y de reducido tamaño, de hasta 3 cm de longitud y algo menos de 1 mm de diámetro. Dentro de los nematodos, pertenece al orden Ascaridia y a la familia Anisakidae, formada por 24 géneros, de los cuales los más estudiados son los que forman la subfamilia Anisakinae: Phocanema (también conocida como Pseudoterranova), Contracaecum, Anisakis e Hysterothylacium (Rubiales, 2007) 18. Figura 1 Contracaecum sp. obtenido de hígado de Lisa � � ��� 1.2.2 Ciclo biológico 1.2.2.1 Anisakis simplex Los anisaquidos adultos son parásitos de mamíferos marinos (ballenas, delfines, focas, leones marinos) los cuales son los hospederos definitivos (Juárez, 2007) 1. Los huevos de los parásitos adultos son eliminados con las heces de estos mamíferos marinos en el agua. Libres en el agua continúan su desarrollo hasta el segundo estadio (L2) donde ya es larva infectante y mide unos 0.3 mm de longitud. Puede permanecer en el interior del huevo, o bien eliminarse por eclosión de este, pudiendo permanecer libre y viable en el agua durante no más de 3 meses. Estas larvas son ingeridas por hospedadores intermediarios; el ciclo exige dos hospedadores intermediarios, los primeros hospedadores intermediarios suelen ser pequeños crustáceos, donde crecen hasta alcanzar unos 5mm; estos son ingeridos por los segundos hospedadores intermediarios un pez o un cefalópodo, en donde las larvas invaden la pared del intestino, emigran a los tejidos y desarrollan el tercer estadio larvario (L3), eventualmente este segundo hospedador intermediario puede ser consumido de nuevo por un pez o cefalópodo al cual transmiten las larvas L3, sin que estas completen su ciclo; o bien el segundo hospedador intermediario puede ser consumido por un mamífero marino donde completan el ciclo al llegar al estómago. Allí se adhieren a la pared gástrica y evolucionan al cuarto estadio larvario (L4), pasando después al estado adulto, completando así su ciclo biológico (Juárez, 2007; García; Rubiales, 2007; CDC, 2012) 1, 12, 18, 19. � � ��� 1.2.2.2 Contracaecum sp. Estos anisaquidos en fase adulta, son parásitos de aves, siendo los hospedadores principales las garzas, las cuales son los hospederos definitivos (Juárez, 2007) 1. Los huevos de los parásitos adultos son eliminados con las heces de estas aves en el agua. Libres en el agua continúan su desarrollo hasta el segundo estadio (L2) donde ya es larva infectante. Puede permanecer en el interior del huevo, o bien eliminarse por eclosión de este, pudiendo permanecer libre y viable en el agua durante no más de 3 meses. Estas larvas son ingeridas por hospedadores intermediarios; el ciclo exige dos hospedadores intermediarios, los primeros hospedadores intermediarios suelen ser pequeños crustáceos, Huevo libre, expulsado en heces Eclosión: Larva libre (L1) 1er huésped intermediario: Anfipodos, copepodos y euphasidos (L2-Infectante) 2o huésped intermediario: Pez o cefalópodo (L3) Mamíferos marinos: Huéspedes definitivos (L4-Adulta) Figura 2 Ciclo de Anisakis simplex � � ��� donde crecen hasta alcanzar unos 5mm; estos son ingeridos por los segundos hospedadores intermediarios los cuales son peces, en donde las larvas invaden la pared del intestino, emigran a los tejidos y se desarrollan el tercer estadio larvario (L3), eventualmente este segundo hospedador intermediario puede ser consumido de nuevo por otro pez, al cual transmiten las larvas L3, sin que estas completen su ciclo; o bien el segundo hospedador intermediario puede ser consumido por un ave, donde completan el ciclo al llegar al estómago. Allí se adhieren a la pared gástrica y evolucionan al cuarto estadio larvario (L4), pasando despuésal estado adulto, completando así su ciclo biológico (García; Rubiales, 2007; CDC, 2012; Juárez, 2007; Osanz, 2001) 12, 18-21. Huevo libre, expulsado en heces Eclosión (L1) 1er Huésped intermediario (L2- Infectante) 2o Huésped intermediario (L3) Huésped definitivo (L4), gusanos en proventrículo Figura 3 Ciclo de Contracaecum sp. � � ��� 1.2.2.3 Hysterothylacium sp. Los anisaquuidos adultos son parásitos de peces, los cuales son los hospederos definitivos (Juárez, 2007) 1. Los huevos de los parásitos adultos son eliminados con las heces de estos peces en el agua. Libres en el agua continúan su desarrollo hasta el segundo estadio (L2) donde ya es larva infectante. Puede permanecer en el interior del huevo, o bien eliminarse por eclosión de este, pudiendo permanecer libre y viable en el agua durante no más de 3 meses. Estas larvas son ingeridas por hospedadores intermediarios; el ciclo exige dos hospedadores intermediarios, los primeros hospedadores intermediarios suelen ser Copepodos; estos son ingeridos por los segundos hospedadores intermediarios los cuales son peces, en donde las larvas invaden la pared del intestino, emigran a los tejidos y se desarrollan el tercer estadio larvario (L3), eventualmente este segundo hospedador intermediario es consumido por otro pez (huésped definitivo) en el cual se adhieren a la pared gástrica y evolucionan al cuarto estadio larvario (L4), pasando después al estado adulto, completando así su ciclo biológico (García; Rubiales, 2007; CDC, 2012; Juárez, 2007; Osanz, 2001) 12, 18-21. Figura 4 Ciclo de Hysterothylacium sp. � � � � 1.2.3 Modo de transmisión El hombre se considera un hospedero accidental adquiere las larvas en tercer estadío, al ingerir pescado crudo o insuficientemente cocido, así como ahumados, semiconservado, seco o en vinagre, cocinado en microondas, ceviches y variedades de cocina japonesa como sushi o sashimi. Las larvas se encuentran enrolladas en espiral plana y encapsuladas en cualquier órgano de la cavidad celómica y muscular de los peces (García; Rubiales, 2007) 12, 18. Al igual que los cefalópodos y peces que consumen la larva L3, en el humano la larva no consigue alcanzar el estadio adulto, permaneciendo como se ingirió en el tercer estadio larvario (FAO, 2012) 2. En los peces parasitados por las larvas, el parásito (que alcanza en esta fase unos 2 a 3 cm de longitud) se encuentra habitualmente en el tubo digestivo cuando el pez está vivo. Una vez muerto, las larvas migran hacia la cavidad abdominal, vísceras (principalmente el hígado), musculatura y algunas incluso llegan a perforar la piel del pescado (Rubiales, 2007) 18. Si se entiende la evolución de las larvas dentro del pescado, una vez que este muere, la pesca intensiva a la que están siendo sometidos los mares, fortalece al ciclo de este parásito. Cuando los pescadores capturan en alta mar, suelen limpiar el pescado y arrojar sus vísceras al mar, salvando a lar larvas contenidas en ellas de una muerte segura en las cámaras de congelación. Esas vísceras, que suelen contener las mayores concentraciones de anisakidos, son ingeridas posteriormente por otros peces sanos que, a su vez, quedan � � � � infectados. El gusano va a así fortaleciendo su ciclo y se expande cada vez más en los océanos (Rubiales, 2007) 18. Una vez dentro del cuerpo del humano, la larva puede invadir el tracto gastrointestinal. Aunque eventualmente el parásito muere, produce una inflamación masiva en el esófago, estómago o intestino (Rubiales, 2007) 18. Algunas personas experimentan una sensación de cosquilleo después o en el momento en que están ingiriendo el pescado crudo o poco cocido, ya que las larvas permanecen vivas. Esto es en esencia, el movimiento del gusano en la boca o mientras es deglutido. Se puede en algunas ocasiones, extraer el gusano manualmente de la boca o garganta (por medio de la tos) y así prevenir la infección. También, algunas personas experimentan vómito como síntoma y así el gusano puede ser expulsado del cuerpo (CDC, 2012) 19. 1.2.4 Período de incubación y cuadro clínico A partir de la llegada de las larvas al tubo digestivo, pueden darse diversas posibilidades. 1.- La primera es que la larva discurra a lo largo del tubo digestivo sin que produzca ningún problema, puesto que dichas larvas no están adaptadas al organismo humano, eliminándose en la defecación. 2.- La larva se enganche en las paredes del tubo digestivo, perforando su capa superficial, dando lugar a la patología Anisakidosis (Rubiales, 2007) 18. La patología se presenta con un cuadro clínico de dos tipos. � � ��� El síndrome gástrico agudo, en el cual sobreviene un fuerte cólico epigástrico, con náuseas y vómitos que se presentan 4 a 6 horas después de la ingestión del pescado infectado. Algunas veces se requiere una intervención quirúrgica, en otros casos la evolución puede ser de hasta 2 años. Cuando se afecta el intestino delgado, ocurre la aparición brusca de náuseas, vómitos, cólicos y fiebre; todo esto en unos 7 días después de la ingestión de las larvas (Rubiales, 2007) 18. Adicionalmente, se pueden presentar cuadros alérgicos (anafilaxia), caracterizados por urticaria, angioedema, angioedema facial (hinchazón del rostro), sintomatología gastrointestinal, respiratoria (edema de glotis, bronco constricción); y, en casos más severos, choque anafiláctico. Estos síntomas de alergia suelen aparecer entre las 4 y 72 horas posteriores a la ingesta del pescado parasitado y pueden ir o no acompañadas con o sin la sintomatología intestinal (García; Rubiales, 2007; CDC, 2012) 12, 18, 19. 3.- La larva perfore el intestino y emigre a otros órganos más o menos distantes del tracto digestivo (hígado, pulmones, bazo e incluso páncreas). La larva es incapaz de reproducirse en el cuerpo humano, por lo tanto no puede alcanzar su estadío adulto, ni poner huevos. Sus daños están, pues, limitados al tiempo que es capaz de resistir con vida dentro del organismo infectado, tiempo el cual los expertos han calculado en un “par de semanas”, aunque no se ha podido determinar con exactitud este dato porque la supervivencia del gusano es variable y depende de diversas circunstancias (Rubiales, 2007) 18. � � ��� 1.2.5 Métodos de control Éste nematodo es muy susceptible a la temperatura, las temperaturas recomendadas para su destrucción son las siguientes: Congelar el pescado a -20ºC durante más de 24 horas, es importante saber que los congeladores domésticos no alcanzan esta temperatura. Se ha observado que si la temperatura es de -15ºC, este tiempo debe duplicarse para garantizar la muerte de la larva. Sin embargo la ingestión de parásitos muertos elimina el riesgo de la infección, pero no el de una reacción alérgica a personas altamente sensibles. El ahumado debe realizar a una temperatura igual o superior a 60ºC durante al menos 10 minutos para asegurar la muerte de las larvas (Rubiales, 2007) 18. 1.2.6 Medidas preventivas El hábito y la forma más efectiva de evitar la infección es no consumir pescados y/o mariscos crudos, mal cocinados, ahumados, salados, marinados, ceviches o variedades de la cocina japonesa (FAO, 2012; García) 2, 12. 1.2.7 Diagnóstico Anamnesis (historia del paciente), � Cuadro clínico. � � ��� � Examen endoscópico (donde se pueden visualizar las larvas enganchadas a nivel gástrico, pudiendo hacerse la extracción de las mismas a través del tubo de endoscopía, con lo que el cuadro clínico suele ceder (García; Rubiales, 2007) 12, 18. 1.3 Antecedentes En México, con respecto a Ictiozoonosis, existen pocos reportes, sin embargo, hemos concentrado algunos de los estudios que concuerden con las especies de pescados que hemos estudiado, con los grupos de parásitos encontrados y con el área de estudio (Golfode México), como sigue: Tabla 1. Antecedentes parasitológicos de las especies estudiadas Grupo de parásito Hábitat Órgano Autor Caranx hippos (Jurel) MONOGENEOS Cemocotyle novaborcensis Campeche Branquias Caballero y Bravo-Hollis, 1967 22 “ Cd. del Carmen, Campeche Branquias Bravo-Hollis y Salgado Maldonado, 1982 22 Cemocotyle carangis Alvarado, Veracruz Branquias Montoya Mendoza y Salgado Maldonado, 2009 23 Allopyragraphorus incomparabilis Florida y Texas Branquias William y William (1996) 24 Allopyragraphorus winteri Tuxpan, Veracruz; Zontecomapan, Veracruz; Cd. del Carmen, Campeche Branquias Bravo-Hollis y Salgado Maldonado, 1982 22 “ Norte de Tuxpan, Veracruz Branquias Caballero y Bravo-Hollis, 1965 22 Allopyragraphorus hippos Alvarado, Veracruz Branquias Montoya Mendoza y Salgado Maldonado, 2009 23 Protomicrocotyle mirabilis Norte de Tuxpan, Veracruz Branquias Caballero y Bravo-Hollis, 1965 22 “ Campeche Branquias Caballero y Bravo-Hollis, 1967 22 � � ��� “ Golfo de México Branquias Yamaguti, 1968 22 “ Nueva York, Golfo de México y Florida Branquias Johnston et Tiegs, 1922 22 Metamicrocotyla macracantha Tamiahua, Veracruz Branquias Méndez, 1993 25 ASPIDOGASTREOS Lobatostoma ringens Laguna Madre, San Fernando, Tamaulipas Intestino Iruegas Buentello, 1999 22 COPEPODOS Caligus chorinemi, C. coryphaenae, C. longipedis Oeste de Florida, Golfo de México y Caribe Branquias Cressey, 1991 Caligus chelifer Sur de Tamaulipas y Norte de Veracruz Branquias Suárez-Morales et. al.. 1997 36 Lernanthropus giganteus Zona central de Venezuela Branquias Lagarde, 1991 NEMATODOS Philometroides grandipapillatus Norte del Golfo de México Subcutáneo Moravec, 2010 47 Philometra salgadoi Campeche Cavidad ocular Vidal-Martínez, 1995 48 Scomberomorus maculatus (Sierra) MONOGENEOS Microcotyle scomberomori Port Arkansas, Texas Branquias Koratha, 1955 30 Thoracocotyle crocea Florida Branquias Hargis, William, 1954 “ Bahía de Tangola- Tangola, Oaxaca Branquias Meserve, 1938 31 “ Yucatán Branquias Bunkley y William, 1996 32 COPEPODOS Los reportes del género Kroyeria, solo fueron encontrados en tiburones, los reportes se agregan a continuación Kroyeria brasiliense Brasil Branquias de tiburón Galeorhinus vitaminicus Thatcher-Júnior, 2006 38 Kroyeria gracilis Costa Oeste de Florida y Golfo de México Branquias de tiburón Carcharinus obscurus y Carcharinus leucas Cressey, 1970 39 � � ��� Eugerres plumieri (Mojarra rayada) Para el Acantocefalo Neoechinorhynchus golvani, no se encontraron reportes para Mojarra rayada, más sin embargo se agregan a continuación los reportes encontrados en otras especies Neoechinorhynchus golvani Alvarado, Veracruz Intestino de Centropomus parallelus (Chucumite) Trujillo-Páez, 1994 “ Laguna de Catemaco, Veracruz Intestino de Cichlasoma aureum (Naca) Chavez et. al., 1995 Caranx crysos (Cojinuda) ISOPODOS Nerocila lanceolata Atlántico No indicado Segal, 1987 32 Aega deshaysiana, ecarinata, dentata y tenuipes Cuba, Golfo de México y Puerto Rico No indicado Kensley, 1989 53 Mugil cephalus (Lisa) MONOGENEOS Metamicrocotyla macracantha Golfo de México y Florida Branquias Koratha, 1955 26 “ Bahía de Santa María, Sinaloa Branquias Juárez Arroyo, 1985 27 “ Carolina del Sur No indicado Baker-Pante, 2005 28 “ Callao, Perú No indicado Aliaga-Chirinos, 2011 29 COPEPODOS Ergasilus lizae Europa No indicado Boxshall, 2001 36 Ergasilus cyanopictus Brasil Branquias Carvalho, 1962 Ergasilus versicolor Brasil Branquias Cavalcanti et.al., 2004 Naobranchia lizae Carolina del Sur No indicado Baker-Pante, 2005 44 “ Callao, Perú No indicado Aliaga-Chirinos, 2011 45 Lepeophtheirus hospitalis Canadá Branquias Zabata, 1973 36 Lepeophtheirus kareii China Branquias Shen, 1958 36 ISOPODOS Sphaeroma walkeri, lindae y terebrans Golfo de México No indicado Schootte, 2009 54 Sphaeroma quadridentatum Golfo de México No indicado Johnson, 2005 55 ARGULIDOS Argulus sp. Laguna de Tamiahua, Veracruz En Lisa blanca (Mugil curema) González-Cobos, 2002 56 “ Misisipi No indicado Overstreet, 1974 56 � � ��� ACANTOCEFALOS Floridosentis mugilis Bahía de Santa María, Sinaloa Intestino Juárez-Arroyo, 1985 27 NEMATODOS Contracaecum sp. Monterrey No indicado Iruegas Buentello, 2010 17 “ Perú No indicado Pérez-Chávez, 1999 59 � � ��� JUSTIFICACIÓN: Las enfermedades de transmisión alimentaria (ETA), según la FAO, son aquellas enfermedades de carácter infeccioso o tóxico, causadas por agentes que penetran al organismo usando como vehículo un alimento. Las ETA se producen en general por alimentos contaminados. Los alimentos se pueden contaminar con microorganismos patógenos (parásitos, hongos, bacterias) o por las toxinas producidas por estos, virus y por agentes químicos. Es por esto de vital importancia, poder determinar que los alimentos de consumo humano se encuentren libres de cualquier agente que pueda ocasionar un daño a la salud del consumidor. Por lo que respecta a los organismos acuáticos, éstos pueden asociarse a diversos agentes que posibilitan la aparición de enfermedades en los humanos. Este riesgo se maximiza cuando el consumo de alimentos asociados a la pesca se realiza de manera inapropiada. Dentro de estos agentes se encuentran los parásitos, muchos de ellos requieren de los organismos acuáticos para llevar a cabo su ciclo de vida; cuando el humano consume la fase infectante del parásito provoca diversos trastornos en la salud de éste. Es importante que el Médico Veterinario lleve a cabo las tareas concernientes en esta área con la finalidad de prevenir la presentación de la enfermedad en el ser humano. Un estudio realizado en el año 2008 demostró que en un muestreo al azar en mojarras y lisas expendidas en el mercado de la “Nueva Viga”, fue posible aislar al nematodo Anisakis sp, que produce en humanos la Anisakiasis, la larva de éste parásito puede causar inflamaciones serias de la pared del estómago o intestino, se presenta con dolor abdominal, náuseas, vómito, fiebre y diarrea. Sin embargo, el estudio anterior, se realizó en pescados procedentes de agua dulce, por lo que será necesario complementarlo, investigando en ésta ocasión pescados provenientes de agua salada. � � ��� HIPÓTESIS: Es posible que algunas especies de pescados marinos, procedentes del Golfo de México, que más se consumen en el D.F., y se expenden en el Centro de Distribución de Pescados y Mariscos “La Nueva Viga”, presenten parásitos que afectan la salud humana. OBJETIVO GENERAL: Evaluar la frecuencia de parásitos, de importancia en salud pública, en una muestra de pescados marinos, procedentes del Golfo de México, que se expenden en el Centro de Distribución de Pescados y Maricos “La Nueva Viga”, México, D.F. mediante su clasificación taxonómica. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: 1. Determinar las cinco especies de peces marinos, que se expenden en el mercado “La Nueva Viga”, por su mayor demanda y consumo en el D.F., México. 2. Realizar la inspección de los pescados mediante una necropsia y en paralelo evaluar su grado de frescura (muy fresco, fresco, regular, alterado). 3. Identificar y conservar los especímenes parásitos encontrados en los diferentes órganos y tejidos de todos los pescados empleados en este estudio. 4. Determinar los géneros y las especies de los parásitos encontrados en todos los ejemplares de peces que conformaron la muestra de este estudio. � � � � �CAPÍTULO 2 Metodología � � � � 2.1 MATERIAL Y MÉTODOS 2.1.1 Tipo de estudio De acuerdo a la clasificación de Ignacio Méndez y Col. (1990), en su libro “El protocolo de la Investigación”, el presente estudio se clasifica de la siguiente manera: Prospectivo, Transversal, Descriptivo y Observacional, (Méndez, 1993) 61. 2.1.2 Universo de trabajo ESPECIES SELECCIONADAS Los criterios de inclusión para la elección de las especies de estudio fueron: ser de origen marino y las más consumidas. Por consiguiente, la selección de especies se basó en datos de la Procuraduría Federal del Consumidor (PROFECO) y con base en lo observado en mercados, tiendas de autoservicio, comercios y demás centros de distribución de productos pesqueros en México; y como consecuencia la elección de 5 especies de pescados marinos, las cuales se presentan en la Tabla 3: Tabla 2. Especies de pescados seleccionadas para el estudio (nombre común y científico) Nombre Común Nombre Científico Lisa del Golfo Mugil cephalus Mojarra Rayada Eugerres plumieri Jurel Caranx hipos Cojinuda Caranx crysos Sierra Scomberomorus maculatus � � ��� Características taxonómicas básicas de las especies a estudiar Previo al desarrollo del estudio, se llevó a cabo el reconocimiento de las características taxonómicas básicas de las especies de peces sujetos a la investigación; las cuales fueron: familia, nombre común y científico, diagnosis biológica, distribución geográfica en México, áreas de captura en México y presentaciones comerciales una vez capturados. (La información recabada se encuentra en el Anexo 1 ). 2.1.3 Espacio y tiempo El estudio se realizó en el Centro de Distribución de Pescados y Mariscos la “Nueva Viga”, localizado en Prolongación eje 6 Sur, colonia San José Aculco, Delegación Iztapalapa, CP 09000, México, Distrito Federal; en el periodo comprendido del 8 de febrero de 2011 al 9 de diciembre de 2011 (Figura 5). Figura 5. Imagen satelital que muestra la disposición del mercado de la “Nueva Viga” (circulo rojo). � � ��� Dos son las procedencias de pescados que son expendidos en la “Nueva Viga”, el Pacífico y el Golfo de México. Las cinco especies de estudio, también comparten el origen: Golfo de México. Los estados considerados para ésta vertiente son: Tamaulipas (amarillo), Veracruz (verde), Tabasco (blanco), Campeche (Rosa) y Yucatán (verde), (Figura 6). DISTRIBUCIÓN DE LOCALES El mercado “La Nueva Viga”, cuenta con un total de 5 pasillos, identificados con las letras A, B, C, D y E. De estos, los pasillos A, B y C, poseen casi la totalidad de locales que expenden diariamente pescados y mariscos; en el pasillo D, muchos locales se Figura 6. Estados de la República Mexicana que comprenden el Golfo de México � � ��� encuentran cerrados y en el pasillo E, se ubican los restaurantes especializados en diversas presentaciones de pescados y mariscos. �� � �� �� �� �� �� Figura 7. Imagen satelital que muestra la distribución de los pasillos en el mercado de la “Nueva Viga” � � ��� Cuando en los locales se identificaron ejemplares con signos de autolisis, las especies eran seleccionadas de otro local; como se trata de un mercado cuya venta principal es al mayoreo, el producto fresco es el que se llevan primero, de tal forma en muchos locales se encontraban ejemplares con estados de conservación regulares y alterados. LOCALES A MUESTREAR El mercado de la “Nueva Viga” cuenta con 205 locales. Para los fines de éste estudio se obtuvo la información de la Tabla 3: Tabla 3. Número de locales en el mercado de “La Nueva Viga”, que expenden los pescados de las especies seleccionadas. La elección de los locales a muestrear se realizó de manera aleatoria, considerando que en ellos se expendieran los ejemplares que cumplieran con los criterios de inclusión. Se procuró que los locales seleccionados no se repitieran, sin embargo dada las condiciones de no frescura en que se llegaron a encontrar muchos ejemplares, en la mayoría de locales algunas especies se muestrearon en locales en donde ya se había tomado alguna muestra. Especie Número total de locales que la expenden Lisa del Golfo 15 locales Mojarra rayada 43 locales Jurel 13 locales Cojinuda 8 locales Sierra 56 locales � � ��� NÚMERO Y TAMAÑO DE LA MUESTRA El tamaño de muestra se determinó utilizando la metodología de la curva área- especie y con base en el principio del Teorema del Límite Central (García, 2008) 10. Se partió de una muestra piloto de 25 ejemplares (5 de cada especie), de acuerdo con el teorema del Límite Central (García, 2008) 10. El objetivo de la muestra piloto fue que se pudiera observar el tiempo que se invertiría para realizar la inspección de cada pescado, y así poder calendarizar los muestreos y número de pescados que se podrían investigar en un periodo determinado. Una vez muestreados los 25 ejemplares de las cinco especies, se desarrolló la metodología de la curva área-especie; la cual consiste en graficar las especies de parásitos encontradas en la muestra piloto; lo que permitió identificar las especies de parásitos con mayor abundancia, al observar la forma de una meseta, que indica el punto en donde las especies de parásitos dejan de acumularse sin que se aporten especies nuevas, determinando así la necesidad de muestreas más ejemplares o si el tamaño de la muestra es suficiente (García, 2008) 10. 2.1.4 Criterios de inclusión Para la elección de cada ejemplar de las 5 especies marinas, se describen en la Tabla 4, los criterios de inclusión que debían cumplirse y de no ser así, se descartaba el pescado. Tabla 4. Criterios de inclusión para la elección de cada uno de los ejemplares muestreados Criterio Descripción Talla Se refiere a la longitud total del pez Se eligieron ejemplares de longitudes similares, siendo esta mayor a 15 centímetros � � ��� Temporalidad Se refiere a la adquisición de la especie correspondiente a su época de mayor abundancia Lisa, de marzo a octubre Mojarrita rayada, de marzo a diciembre Jurel, marzo a mayo y septiembre a octubre Cojinuda, todos los meses del año Sierra, de marzo a mayo y de octubre a diciembre Calidad Se relaciona con la calidad de la carne para su venta en el mercado Se eligieron ejemplares de primera calidad: sin lesiones, manchas, suciedad, enteros, en decir con aletas, con ojos y piel. De apariencia agradable. Frescura En relación al tiempo de vida útil del pescado Se adquirieron pescados con aproximadamente 3 días de haber sido capturados y que cumplan con las características sensoriales de un pescado “fresco”: • Piel brillante, sin laceraciones, golpes o cambios de coloración en la misma • Mucus cutáneo no opaco • Ojos prominentes, no sumidos, ni opacos • Olor a “fresco”, no dulce (dulzón), amoniacal ni putrefacto • Con escamas perfectamente adheridas al cuerpo • Carne firme, que no se marque la presión del dedo (digital) Presentación Pescados no eviscerados En las inspecciones se revisaron sus vísceras, así como los músculos y se registró la presencia o ausencia de parásitos en ellas Determinación del grado de frescura Se hizo hincapié en el criterio grado de frescura, para determinarlo utilizamos la escala señalada por Rafful, 1981, la cual es la siguiente: 3 Tabla 5. Escala para la determinación del grado de frescura de pescados (Rafful, 1981) Muy fresco Fresco Regular Alterado Piel Brillante, lustrosa Ligera pérdida del aspecto radiante Deslustrada, bastante blanquecina Mate, arenosa, acusadamente blanquecina Sustancias viscosas externas Transparentes o acuosas Lechosas Gris- amarillentas Amarrillas-marrón � � ��� Una vez elegidos cada uno de los ejemplares, se depositaron en bolsas de plástico, y se etiquetaron con la siguiente información registrada: Especie Día, fecha y hora de la adquisición Número de local Se transportaron en cajas o bolsas isotérmicas con refrigerante y se trasladaron al Departamento de Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, de la Universidad Nacional Autónoma de México. Ahí se mantuvieron en condiciones de refrigeración (2°C + 2°), para los pescados cuyo manejo fuera el mismo día de adquisición o en condiciones de congelación (-18°C+/-3°), para el caso de los pescados cuyo manejo no fuera el mismo día de adquisición. Para los pescados que se mantuvieron en congelación, Ojos Convexos, pupilas negras, córnea translúcida Planos, pupilas ligeramente opacas, córnea ligeramente opalescente Ligeramente cóncavos, pupilas grises, córnea opaca Totalmente hundidos, pupilas grises, córnea opaca y decolorada Branquias Rojas, brillantes, translúcidas Rosas, con mucus ligeramente opaco Grises, blanquecinas, mucus opaco y grueso Marrones, blanquecinas, mucus gris- amarillento y coagulado Olores internos y de las branquias Frescos, fuertemente a algas marinas y marisco Sin olor, olor neutro, ligeramente rancio Olor definido a rancio Olor acético, parecido a frutas, ácido sulfhídrico, desechos fecales � � ��� se inició su inspección en el menor tiempo posible; manteniendo la temperatura indicada (- 18°C+/-3°) y, evitando cambios abruptos de la misma, para evitar su deterioro. Posteriormente, se llevó a cabo la inspección externa e interna, y se revisaron sus órganos y tejidos. 2.1.5 Mediciones y técnica de necropsia Se siguió el procedimiento establecido por Eiras, 2003. 63 (La técnica se encuentra desarrollada en el Anexo 2) � 2.1.6 Técnicas de fijación, conservación y tinción Una vez inspeccionados los pescados, se determinó la presencia o ausencia de parásitos. Para cada grupo de parásitos se determinaron las técnicas de fijación, conservación y tinción, que se muestran a continuación: a) Trematodos y cestodos se fijan entre 2 placas de vidrio y se conservan en formol al 4% por 24 horas b) Nematodos se conservan en alcohol al 70% tibio c) Ectoparásitos en alcohol al 70% • Se utilizó la Tinción Paracarmin de Meyer, para el montaje de los parásitos en resina sintética (Gobierno federal, 2009) 7. Estas técnicas se realizaron con el apoyo del personal del Laboratorio de Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad � � � � Nacional Autónoma de México, bajo la supervisión de la Dra. Evangelina Romero Callejas. 2.1.7 Identificación, parámetros ecológicos y caracterización de la infección. Se utilizaron las claves establecidas por Yamaguti 26 para la identificación de los especímenes. Para cada grupo de parásitos, pertenecientes a la misma familia, se analizaran los siguientes parámetros ecológicos: Frecuencia (Frec): la cual se define como el número de huéspedes infectados con una especie parásito, entre el número de huéspedes examinados. Abundancia (Ab): número de ejemplares de una especie parásita, entre el total de huéspedes examinados. Intensidad promedio (X): número de ejemplares de una especie parásita, entre el número de huéspedes parasitados. Rango de intensidad: (X – X): número mínimo de ejemplares de una especie parásita en un huésped y número máximo de ejemplares de una especie parásita en un huésped. Una vez obtenidos los parámetros ecológicos, de todos los parásitos clasificados, se caracterizarán las infecciones, esto es se dará una explicación de los resultados obtenidos. � � � � � � � CAPÍTULO 3 Resultados y Discusión � � ��� 3.1 Inspección La inspección de los primeros ejemplares, de la primera muestra, se inició el día 8 de febrero de 2011 con la especie Jurel y finalizó el día 24 de junio de 2011 con la especie Cojinuda. Todos los ejemplares se recolectaron entre las 4:00 a.m. y las 5:30 a.m. Se inició con la muestra piloto, a partir de la cual se determinó la inspección de 3 a 4 especímenes diariamente. TALLA MAYOR Y MENOR REGISTRADA Para los 150 ejemplares la talla menor registrada fue de 16 cm y correspondió a la especie Mojarra rayada y la talla mayor registrada fue de 52 cm y correspondió a la especie Sierra. Teniendo una longitud promedio en los 150 ejemplares de 27.5 cm. FECHA DE RECOLECCIÓN DE EJEMPLARES La recolección de los pescados se llevó a cabo considerando la época de su mayor abundancia, menor precio y por lo tanto mayor consumo; y se realizó de la siguiente manera: � � ��� Tabla 6. Se muestra por especie los meses en que los pescados fueron muestreados La especie más difícil de muestrear fue la Cojinuda, con todo y que la época de su mayor abundancia son todos los meses del año, los meses del muestreo fue escasa y hasta el mes de junio se encontró en mayor cantidad, razón por la cual sólo se muestreó en ese mes. Las especies jurel, lisa y sierra fueron recolectadas para su inspección en el mes de febrero, y según los datos no es su época de mayor abundancia, pero observamos que pueden adelantarse unos meses a estas fechas debido a factores ambientales. 3.1.1 Grado de frescura de los pescados inspeccionados Mencionamos los 4 niveles para determinar la frescura (Rafful, 1981): muy fresco, fresco, regular y alterado. Para los 150 pescados seleccionados e inspeccionados, se encontró que el 85% se encontraba en estado de conservación “fresco”, mientras el 15% restante se encontró en estado de conservación “regular”. MES DE MUESTREO Feb. Mzo. Ab. May. Jun. Total Especie Núm. % Núm. % Núm. % Núm. % Núm. % Núm. Caranx hippos (Jurel) 6 20 4 13.33 - - 16 53.33 4 13.33 30 Mugil cephalus (Lisa) 7 23.33 10 33.33 6 20 7 23.33 - - 30 Eugerres plumieri (Mojarra rayada) - - 6 20 - - 18 60 6 20 30 Caranx crysos (Cojinuda) - - - - - - - - 30 100 30 Scomberomorus maculatus (Sierra 5 16.66 8 26.66 - - 17 56.66 - - 30 150 � � ��� En general de cada uno de los ejemplares, de las especie Caranx hippos (Jurel), Caranx crysos (Cojinuda) y Mugil cephalus (Lisa) se encontraron en un 87% en estado de conservación “fresco”, esto es no más de 4 ejemplares por especie tuvieron un estado de conservación “regular”. Para los 30 ejemplares de la especie Eugerres plumieri (Mojarra rayada), más del 94% se encontró en estado fresco, esto es no más de 2 ejemplares tuvieron un estado de conservación “regular”. La excepción fue la especie Scomberomorus maculatus (Sierra), en la cual aproximadamente el 25% se consideró tuvo un estado de conservación “regular”. 3.1.2 Ejemplares positivos a cualquier parásitos Del total de 150 ejemplares, 80 (53.33%) resultaron positivos a parásitos. 3.1.3.1 Porcentaje de peces (por especie) positivos a parásitos * Tabla 7. Muestra el número y porcentaje de peces positivos por especie de pescado muestreados en el Laboratorio de Diagnóstico Parasitológico, FMVZ-UNAM. Especie Positivos Porcentaje TOTAL Caranx crysos (Cojinuda) 2 6.66% 30 Caranx hippos (Jurel) 25 83.33% 30 Scomberomorus maculatus (Sierra) 22 73.33% 30 Mugil cephalus (Lisa) 30 100% 30 Eugerres plumieri (Mojarra rayada) 1 3.33% 30 TOTAL 80 53.33% 150 * El total de ejemplares muestreados por especie de pescado fue 30 � � ��� Como se muestra en la Figura 8, la especie más parasitada al 100% fue la especie Lisa, en orden descendiente le sigue la especie Jurel con 83.33%, Sierra con 73.33%, Cojinuda con 6.66% y Mojarra rayada con 3.33%. Figura 8. Porcentaje de positivos a parásitos en orden ascendente, por especie de pescado De los 80 ejemplares queresultaron positivos a la presencia de parásitos (53.33%), solo de 31 ejemplares se obtuvieron parásitos de importancia en Salud Pública, esto representa un 38.75% del 53.33% positivo y un 20.66% de los 150 ejemplares muestreados. Los parásitos encontrados de importancia en Salud Pública son nematodos de los géneros Contracaecum e Hysterothylacium, los cuales se clasificaron como Contracaecum sp. e Hysterothylacium sp. respectivamente. Los nematodos determinados como Contracaecum sp. se encontraron en el 100% de las Lisas inspeccionadas (30 ejemplares). ������ ������� ������� ������� ������� ������� ������� ������� ������� ������� �������� ��������������� ���� ���� ������ ������ ����� � � ��� Se encontró un total de 429 nematodos de este género, 424 en el tercer estadio larval, con longitudes mayores a 1 centímetro, los órganos de los cuales fueron obtenidos fueron 254 de hígado, 158 de riñón y 12 de cavidad celómica. Los 5 ejemplares restantes se encontraron en el intestino de un ejemplar de Lisa aunque en su segundo estadio larval, teniendo longitudes menores de medio centímetro. Para el caso de Hysterothylacium sp. se colectaron 350 ejemplares en estadio larval dos, con longitudes menores a medio centímetro en el intestino de un ejemplar de la especie Caranx hippos (Jurel). Figura 9. Número y especies de pescados en los cuales se encontraron parásitos de importancia en Salud Pública � 3.1.4 Total de ejemplares encontrados por grupo de parásito * De los 150 pescados inspeccionados se obtuvieron un total de 1,664 parásitos, los cuales pertenecen a los siguientes grupos en las siguientes proporciones: Trematodos �� �� ��� ��� ��� ��� ��� �� � �� ��� � � ��� Monogeneos 537 ejemplares, Trematodos Aspidogastreos 2 ejemplares, Copepodos 282 ejemplares, Nematodos 811 ejemplares, Acantocefalos 27 ejemplares, Isopodos 4 ejemplares y Argulidos 1 ejemplar. Figura 10. Total de ejemplares encontrados por grupo de parásito, de los 150 pescados muestreados � * De cada una de éstas familias se incluye en el Anexo 3, una breve explicación de morfología y técnica de colecta y conservación (Eiras, 2003) 63. 3.1.5 Parásitos clasificados * En la Tabla 8, se indica cada parásito que fue clasificado, así como el órgano y pescado donde fueron encontrados. * La clasificación taxonómica y la morfología de cada parásito clasificado se encuentran desarrolladas en el Anexo 4 �� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ��� !��� ���� �����"���#� �� � � ��#� ������"���#� �#���� �#"���#� �������#� ����"���#� ��� "�������#� �#�����#� �� �����#� �� � �� � �� ��� � � �� �� � � ��� Tabla 8. Se indica el parásito encontrado, su número, pescado y órgano en que fue encontrado, así como la figura que lo esquematiza. Parásito Número de parásitos y número de pescados en los que fueron encontrados Órgano Figura Cemocotyle sp. 48 parásitos en 7 Jureles Branquias Figura 13 Allopyragraphorus sp. 19 parásitos 10 Jureles Branquias Figura 14 Protomicrocotyle sp. 392 parásitos 21 Jureles Branquias Figura 15 Metamicrocotyla macracantha 1 parásito 1 Jurel Branquias Figura 16 Lobatostoma sp. 2 parásitos 1 Jurel Branquias Figura 17 Caligus minimus 2 parásitos 1 Jurel Branquias Figura 19 Lernanthropus corniger 36 parásitos 11 Jureles Branquias Figura 20 Lernanthropus mugilis 1 parásito 1 Jurel Branquias Figura 21 Hysterothylacium sp. 350 parásitos 1 Jurel Intestino Figura 23 Paraphilometroides sp. 1 parásito 1 Jurel Branquias Figura 24 “ 2 parásitos 1 Jurel Ojo Figura 24 Microcotyle sp. 10 parásitos 6 Sierras Branquias Figura 27 Cynoscionicola sp. 40 parásitos 4 Sierras Branquias Figura 28 Thoracocotyle sp. 4 parásitos 4 Sierras Branquias Figura 29 Ergasilus sp. 1 parásito 1 Sierra Branquias Figura 31 Kroyeria sp. 8 parásitos 2 Sierras Branquias Figura 32 Physocephalus sp. 29 parásitos 1 Sierra Intestino Figura 34 Fam. Philometridae * 1 parásito 1 Sierra Intestino Figura 35 Paraphilometroides sp. Varios ejemplares, sin conteo específico por fragilidad de parásitos, en 2 Sierras Testículo Figura 36 Nerocila acuminata 1 parásito 1 Cojinuda Branquias Figura 38 Aega sp. 2 parásitos 1 Cojinuda Branquias Figura 39 Neoechinorhynchus golvani 2 parásitos 1 Mojarra rayada Intestino Figura 40 Metamicrocotyla macracantha 23 parásitos 6 Lisas Branquias Figura 16 Taeniacanthus sp. 7 parásitos 4 Lisas Branquias Figura 43 Naobranchia lizae 6 parásitos 1 Lisa Branquias Figura 44 Lepeophtheirus sp. 1 parásito 1 Lisa Branquias Figura 45 � � ��� Ergasilus sp. 220 parásitos 15 Lisas Branquias Figura 31 Contracaecum sp.*2 429 parásitos 30 Lisas Hígado Riñón Cavidad Celómica Intestino Figura 46 Sphaeroma sp. 1 parásito 1 Lisa Branquias Figura 47 Argulus sp. 1 parásito 1 Lisa Superficie ocular Figura 48 Floridosentis mugilis 25 parásitos 5 Lisas Branquias Figura 49 * El ejemplar se encontró roto, de tal forma solo puedo ser clasificado hasta Familia. *2 Se encontraron 254 parásitos en hígado, 158 en riñón y 12 en cavidad celómica, en 30 Lisas todos en estadío larval 3. Por otro lado 5 parásitos fueron encontrados en intestino de 1 Lisa en estadío larval 2. 3.1.6 Parásitos por especie de pescado 3.1.6.1 Jurel (Caranx hippos) Figura 11. Grupos de parásitos encontrados en los 30 Jureles muestreados �� ��� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ���������� ���� �� ������� ������ ��� �� �� ��� �� � �� ��� ���� �� � �� �� �� �� �� �� ��� �� ������������������������� ����� � � � � 3.1.6.1.1 Monogeneos de Jurel De los 460 Monogeneos encontrados: 48 se determinó pertenecen al género Cemocotyle sp., 19 al género Allopyragraphorus sp., 392 al género Protomicrocotyle sp. y 1 a la especie Metamicrocotyla macracantha. � CLASIFICADO: Cemocotyle sp. * En los círculos azules, se muestran las características físicas principales, que llevaron a la clasificación de cada uno de los parásitos. Los dibujos sin círculo azul, no muestran las características claras, de tal manera se refuerzan con mejores imágenes en los apéndices (al final de este trabajo). - Los dibujos en blanco fueron realizados por el Biólogo Enrique Muñoz, siguiendo las características indicadas en la literatura de los parásitos clasificados. Las imágenes en color, fueron obtenidas de los parásitos clasificados en éste trabajo. Figura 13. Monogeneo clasificado como Cemocotyle sp. Opistohaptor asimétrico (indicado en círculo azul) * Figura 13. Monogeneo cla B. Enrique Muñoz � � � � Figura 15. Monogeneo clasificado como Protomicrocotyle sp. Opistohaptor asimétrico con 4 grapas de un solo lado (indicado en círculo azul) � CLASIFICADO: Allopyragraphorus sp. � CLASIFICADO: Protomicrocotyle sp. LASIFICADO: Protomicrocotyle sp. Figura 14. Monogeneo clasificado como Allopyragraphorus sp. Opistohaptor parecido a un ala caudal de pez (indicado en círculo azul) B. Enrique Muñoz Figura 15. Monog B. Enrique Muñoz � � ��� � CLASIFICADO: Metamicrocotyla macracantha -Parámetros ecológicos de los Monogeneos de Jurel Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Cemocotylesp. 7 48 23.33 1.6 6.85 1-20 Allopyragraphorus sp. 10 19 33.33 0.63 1.9 1-5 Protomicrocotyle sp. 21 392 70 13.06 18.66 1-49 Metamicrocotyla macracantha 1 1 3.33 0.03 1 1 Figura 16. Monogeneo clasificado como Metamicrocotyla macracantha Haptor con hileras de anclas (indicado en círculo azul) Figura 16. Mon B. Enrique Muñoz � � ��� 3.1.6.1.2 Trematodos Aspidogastreos de Jurel Solo se encontraron 2 trematodos en los 30 Jureles inspeccionados. � CLASIFICADO: Lobatostoma sp. - Parámetros ecológicos de Trematodo Aspidogastreo de Jurel Al ser el único Trematodo Aspidogastreo, no hay punto de comparación para los parámetros ecológicos. Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Lobatostoma sp. 1 2 3.33 0.06 2 2 Figura 17. Aspidogastreo clasificado como Lobatostoma sp. Discos adheridos en porción lateral (indicado en círculo azul) B. Enrique Muñoz � � ��� 3.1.6.1.3 Copepodos de Jurel De los 39 Copepodos encontrados: 2 se determinaron pertenecen a la especie Caligus minimus, 36 a la especie Lernanthropus corniger y 1 a la especie Lernanthropus mugilis. � CLASIFICADO Caligus minimus Figura 19. Copepodo clasificado como Caligus minimus Placas frontales con lúnulas (indicadas en círculos azules) B. Enrique Muñoz � � ��� � CLASIFICADO Lernanthropus corniger (Yamaguti, 1954) � CLASIFICADO Lernanthropus mugilis ASIFICADO L h ili Figura 20. Copepodo clasificado como Lernanthropus corniger Placa dorsal (indicada con flechas azules) � Figura 21. Copepodo clasificado como Lernanthropus mugilis Cuello definido (indicado con flecha azul) Figura 2 B. Enrique Muñoz 21. Copepodo clasificado c B. Enrique Muñoz � � ��� - Parámetros ecológicos de los Copepodos de Jurel Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Caligus minimus 1 2 3.33 0.06 2 2 Lernanthropus corniger 11 36 36.66 1.2 3.27 1-7 Lernanthropus mugilis 1 1 3.33 0.03 1 1 3.1.6.1.4 Nematodos de Jurel De los 353 nematodos encontrados: 350 se determinaron pertenecen al género Hysterothylacium sp. y 3 al género Paraphilometroides sp. � CLASIFICADO Hysterothylacium sp. Figura 23. Nematodo clasificado como Hysterothylacium sp. B. Enrique Muñoz � � ��� � CLASIFICADO Paraphilometroides sp. - Parámetros ecológicos de los nematodos de Jurel Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Hysterothylacium sp. 1 350 3.33 11.66 350 350 Paraphilometroides sp. (Caranx hippos) 2 3 6.66 0.1 1.5 1-2 Figura 24. Nematodo clasificado como Paraphilometroides sp. Alas cefálicas (indicadas en círculo rojo) 4. Nematodo clasificado co B. Enrique Muñoz � � ��� 3.1.6.2 Sierra (Scomberomorus maculatus) � Figura 25. Grupos de parásitos encontrados en las 30 Sierras muestreadas 3.1.6.2.1 Monogeneos de Sierra De los 54 Monogeneos encontrados: 10 se determinó pertenecen al género Microcotyle sp., 40 al género Cynoscionicola sp. y 4 al género Thoracocotyle sp. �� ��� ��� ��� ��� ��� ��� ����������� �� � � ��� ��� �� ��� ��� �� ��� � �� �� � �� �� �� �� �� � ��������������� ����������� � � � ��� � CLASIFICADO Microcotyle sp. � CLASIFICADO Cynoscionicola sp. Figura 28. Monogeneo clasificado como Cynoscionicola sp. CADO Cynoscionicola sp. Figura 27. Monogeneo clasificado como Microcotyle sp. Opistohaptor triangular (indicado en círculo azul) B. Enrique Muñoz igura 28. Monogeneo clasi B. Enrique Muñoz � � � � � CLASIFICADO Thoracocotyle sp. -Parámetros ecológicos de los Monogeneos de Sierra Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Microcotyle sp. 6 10 20 0.33 1.66 1-4 Cynoscionicola sp. 4 40 13.33 1.33 10 1-30 Thoracocotyle sp. 4 4 13.33 0.13 1 1 3.1.6.2.2 Copepodos de Sierra De los 9 Copepodos encontrados: 1 se determinó pertenece al género Ergasilus sp. y 8 al género Kroyeria sp. Figura 29. Monogeneo clasificado como Thoracocotyle sp. Opistohaptor se extiende de extremo a extremo (indicado en círculo azul) B. Enrique Muñoz e Muñoz � � � � � CLASIFICADO Ergasilus sp.� � CLASIFICADO Kroyeria sp. � CLASIFICADO K i Figura 31. Copepodo clasificado como Ergasilus sp. Figura 32. Copepodo clasificado como Kroyeria sp Figura 31. C B. Enrique Muñoz Figu B. Enrique Muñoz � � ��� - Parámetros ecológicos y caracterización de la infección de los Copepodos de Sierra Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Ergasilus sp. 1 1 3.33 0.03 1 1 Kroyeria sp. 2 8 6.66 0.26 4 2-6 3.1.6.2.3 Nematodos de Sierra Se encontraron 29 nematodos en los 30 ejemplares de Sierra que pertenecen al género Physocephalus, 1 nematodo encontrado en intestino el cual solo se pudo clasificar hasta familia Philometridae, debido a que estaba roto y el resto se encontró en testículos, pertenecen al género Paraphilometroides, aunque no se tiene una cantidad ya que fue imposible realizar un conteo de éstos (este parásito ya había sido encontrado en la especie Caranx hippos –Jurel-, por lo que su imagen no se repetirá). Figura 33. Géneros de Nematodos encontrados en las 30 Sierras muestreadas �� � �� � ��� � � ��� �������� ������� � ��� ���������������� �� ���� �� ����������� �� �� �� �� � �� ��� �� �� �������������� � � � ��� � CLASIFICADO Physocephalus sp. Familia: Philometridae � Este ejemplar se encontraba roto, de tal forma y dado que no se observan estructuras que lo clasifiquen en un género específico, solo pudo ser clasificado hasta familia. (APENDICE B) Figura 34. Nematodo clasificado como Physocephalus sp. �� Figura 35. Nematodo clasificado hasta familia Philometridae, ya que como se observa en la imagen el ejemplar estaba roto B. Enrique Muñoz � � ��� � CLASIFICADO Paraphilometroides sp. � Se encontraron varios ejemplares en gónadas masculinas en 2 Sierras, no se pudo realizar un conteo específico del número de ejemplares, debido a la fragilidad de los parásitos y a la gran cantidad de ejemplares encontrados � Dada la fragilidad de los ejemplares encontrados, solo pudimos obtener fotos de los mismos estando en el órgano encontrado, el cual fueron los testículos, como se observa en la Figura 36 (APENDICE A) - Parámetros ecológicos de los nematodos de Sierra Especie parásita Hospederos parasitados Número de parásitos Frecuencia % Abundancia Intensidad promedio Intervalo de infección Physocephalus sp. 1 29 3.33 0.96 29 29 Familia: Philometridae 1 1 3.33 0.03 1 1 Paraphilometroides sp. No se realizó conteo. Figura 36. Imagen que muestra al nematodo clasificado como Paraphilometroides sp., notándose la dificultad en el manejo de éstos parásitos y la imposibilidad para poder realizar un conteo � � ��� 3.1.6.3 Cojinuda (Caranx crysos) De los 2 ejemplares positivos, los parásitos encontrados fueron 3 Isopodos. 3.1.6.3.1 Isopodos de Cojinuda De los 3 ectoparásitos encontrados: 1 se determinó pertenece a la especie Nerocila acuminata y 2 al género Aega sp. � CLASIFICADO Nerocila acuminata
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