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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN ESTUDIO COMPARATIVO UTILIZANDO 2 DIFERENTES TIPOS DE SILICÓN PARA LA CONSERVACIÓN DE CORAZONES DE CANINO MEDIANTE LA TÉCNICA DE PLASTINACIÓN. TESIS QUE PARA OBTENER EL TITULO DE: MÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA PRESENTA: SUSAN RODRÍGUEZ MIRANDA ASESOR: DR. CARLOS GERARDO GARCÍA TOV AR COASESOR: MVZ. JOSÉ LUIS NIETO BORDES CUAUTITLAN IZCALLI. EDO. DE MEX. 2010 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN UNIDAD DE LA ADMINISTRACION ESCOLAR DEPARTAMENTO DE EXAMEN ES PROFESIONALES ~~t · '. -u. N. A. M. AS U NT O :\-)l€)m0SEAP¡f~S.J3A TORIOS SUPERIORES C(~UTlTLA~ DRA. SUEMI RODRIGUEZ ROMO DIRECTOR DE LA FES CUAUTITLAN PRESENTE DEPARTAMENTO DE EXA.MENES PROFWONALE& ATN: L. A. ARACELI HERR'ERA HERNANDEZ Jefe del Departamento de Exámenes Profesionales de la FES Cuautitlán Con base en el arto 28 del Reglamento General de Exámenes, nos permitirnos comunicar a usted que revisamos la Tesis: Estudio comparativo utilizando 2 diferentes tipos de silicón para la conservaci6n de corazones de canino mediante la técnica de plastinación. que pr~senta la , pasante: Susan Rodríguez Miranda con numero de cuenta: 403020416 para obtener el título de : Médica Veterinaria Zootecnista Considerando que dicho trabajo reúne los requisitos necesarios para ser discutido en el EXAMEN PROFESIONAL correspondiente, otorgamos nuestro VOTO APROBATORIO. ATENTAMENTE "POR MI RAZA HABLARA EL ESPIRITU" Cuautitlán Izcalli, Méx. a 23 de _M=ay.L..::::..o ______ " de 2010 PRESIDENTE MVZ.Carlos Lorenzo García VOCAL Dr. CarIes Gerardo García SECRETARIO MC. Gerardo Garza Malacara PRIMER SUPLENTE MC. Enrique Flores Gasca SEGUNDO SUPLENTEMVZ. Gabriela Fuentes Cervantes;_----.;;4::~~;:z~--.....:... DEDICATORIA Tus brazos siempre se abrían cuando quería un abrazo. Tu corazón comprendía cuándo necesitaba una amiga. Tus ojos tiernos se endurecían cuando me hacía falta una lección. Tu fuerza y tu amor me guiaron y me dieron alas para volar. Gracias Mami, por esta oportunidad que me brindas; sin tu apoyo y sin tu ejemplo no estaría ahora cumpliendo mis sueños. Tú eres mi ejemplo mas grande. Tú eres el ejemplo que quiero seguir y es a ti a quien quiero premiar con mi esfuerzo, gracias por sacrificarte y darnos todo a mi y a mis hermanos, pero sobre todo el amor y cariño que siempre nos has regalado y nos seguirás regalando desde el cielo mamita. Atentamente: SUSAN AGRADECIMIENTOS Hoy aprendo a decir Gracias: Gracias a Dios por la oportunidad de existir y por escuchar siempre mis oraciones. Gracias a mi mami por darme el regalo más preciado que es la vida, por enseñarme a ser fuerte ante cualquier situación, por tu esfuerzo para que yo estudiara y por estar siempre conmigo. Gracias a mi papá ya mis hermanos Javier, Robert y Gabi porque sin ustedes, su apoyo y cariño, yo no podría haber llegado a este momento, gracias porque al ser mi familia me dan la fuerza para seguir adelante. Gracias a mis abuelitos Maura, Tomas (q.e.p.d.), Aurora y Benardo, por darme a mis padres y por darme su gran amor. Gracias a mis tíos que siempre se preocuparon y me dieron su apoyo. Gracias a mis asesores Dr. Carlos Gerardo García Tovar y MVZ. José Luis Nieto Bordes por permitir que aprendiera muchas cosas y por dejar que formara parte de este proyecto. Gracias al Sr. Abel y al MVZ. Miguel Angel Carmona por su valiosa ayuda. Gracias a mis amigos: Adriana DJ. Claudia C. Ernesto B. David M. Delman F. Dulce R. Gabriela F. Margarita A. Nelly C. Norma Z. Victor M. Yesica T. Alejandra L. Carlos O.(q.e.p.d) Tania. Janet M. Silvia T. y Viridiana H. por darme un abrazo cuando mas lo necesitaba y por hacer de mi vida estudiantil algo especial e inolvidable porque los conocí. Gracias a esos seres que Dios puso en mi camino y que por ellos decidí esta profesión, a mi perrito Nerón ya todas las mascotas que fueron un miembro mas de mi familia. Gracias a los profesores de MVZ de la FESC. de quienes me llevo lo bueno y lo malo que me será útil en mi vida profesional. Gracias a la FES Cuautitlan y sobre todo a la UNAM porque puedo decir: "ORGULLOSAMENTE UNAM". Este trabajo se realizó con el apoyo del proyecto PAPIME "Aplicación de técnicas de conservación en la producción de piezas anatómicas como apoyo a la enseñanza de la Anatomía Veterinaria" (Clave PE 201610) Y de la Cátedra de Investigación "Morfología Veterinaria y Biología Celular". INDICE 1. RESUMEN ................................................................... 1 2. INTRODUCCiÓN ... ........................................................ 2 3. JUSTIFICACiÓN ... ......................................................... 8 4. OBJETiVOS ...... ............................................................ 9 5. MATERIALES Y MÉTODOS ........................................... 10 6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ......................................... 14 7. CONCLUSIONES ... ...................................................... 22 8. BIBLIOGRAFíA ............................................. ............... 23 RESUMEN La plastinación es un moderno método para la conservación duradera de materia orgánica, creada por el anatomista alemán Gunther Van Hagens. Consiste en la sustitución de agua y lípidos de los tejidos biológicos por un polímero curable (silicona, epoxy, poliéster) el cual es, posteriormente, endurecido. La clase de polímero a utilizar, determinará las propiedades ópticas (transparente u opaco) y mecánicas (flexible afirme) del espécimen impregnado. Las piezas fijadas de esta manera mantienen la textura y coloración del tejido vivo, además son más resistentes que las piezas fijadas por medio de las técnicas clásicas. La técnica incluye cuatro etapas: fijación, deshidratación, impregnación forzada (en congelación y vacío) y curado. El presente trabajo se realizó en el laboratorio de apoyo técnico de anatomía de la FES Cuautitlán UNAM con el fin de evaluar el uso de 2 diferentes silicones, Silastic T-2® (Dow Corning, Kaucho Químico S.A. de C.v.) y S-10® (Biodur) en 20 corazones de caninos para su conservación mediante la técnica de plastinación y ser utilizados en su estudio anatómico. Los órganos fueron divididos en 2 grupos de 10 corazones cada uno. Los resultados obtenidos muestran que los corazones plastinados con T-2® y S-10® mostraron una diferencia en cuanto a sus características morfológicas, con una disminución de volumen de los primeros en comparación con los segundos, esto sin afectar la calidad de los corazones plastinados con T -2® para su utilización en la docencia, además de contar con la ventaja de su fácil adquisición en el país y sin necesidad de implementar equipos costosos para la realización de la técnica, ya que, a diferencia de la técnica utilizada para el silicón S- 10®, con el silicón T-2® la impregnación se hace a temperatura ambiente. 1 INTRODUCCiÓN El sistema circulatorio está compuesto por dos componentes separados pero relacionados: el sistema cardiovascular sanguíneo y el sistema vascular linfático. El sistema cardiovascular sanguíneo consta de una bomba dividida en cuatro compartimientos; el corazón y una redde vasos por los cuales circula la sangre y su función es transportar sangre en ambas direcciones entre el corazón y los tejidos por lo cual produce circulación en dos sentidos. La función del sistema vascular linfático es recolectar la linfa, que es el exceso de líquido tisular extracelular y devolverlo al sistema cardiovascular. Por tanto brinda transporte en un solo sentido. (Dyce, 2002). El corazón es un órgano muscular, hueco y de forma Canica, la base está en dirección cráneodorsal y está sujeto a otras formaciones torácicas por los troncos arteriales y venosos, y por un saco que lo envuelve llamado pericardio. (Fig.1) Fig. 1. Forma del corazón de canino Se localiza en el interior de la cavidad torácica ocupando desde el espacio intercostal 111 hasta el V o VI. Su forma recuerda a la de un cono en cuyo caso la base del mismo se ubica al nivel del espacio intercostal 111 y el vértice está localizado sobre el piso torácico muy cerca del esternebra VII. El corazón se encuentra cubierto por los pulmones lateralmente, dorsalmente es sostenido por los grandes vasos que llegan o salen de él mientras que ventralmente el ligamento frenicopericardico lo sujeta al diafragma. (Evans, 1993) Bombea la sangre hacia dos circuitos separados: el circuito pulmonar (circulación menor), que transporta sangre hacia los pulmones, y el circuito general (circulación mayor), que distribuye sangre a todos los órganos y tejidos del cuerpo y desde ellos. Estos circuitos están formados por arterias, capilares y venas. Las arterias son una serie de vasos que transportan sangre desde el corazón y que se va ramificando en vasos de diámetro cada vez más pequeños para irrigar todas las regiones del cuerpo con sangre; los capilares forman lechos que llevan el mismo nombre, son redecillas de vasos de paredes muy delgadas en los que se intercambian o pasan gases, nutrientes, desechos metabólicos, hormonas y sustancias de señalamiento entre la sangre y los tejidos del cuerpo para apoyar a las actividades 2 metabólicas normales; por último, las venas, que son vasos que drenan lechos capilares y forman vasos cada vez de mayor calibre para devolver la sangre al corazón.(Frandson, 1985) Anatomía del corazón El estudio de la anatomía del corazón iniCia describiendo su superficie y estructura, para posteriormente detallar la anatomía interna. Superficie del corazón Debido a que el corazón durante su desarrollo gira sobre su eje, la parte correspondiente al lado derecho queda craneal y su lado izquierdo está caudalmente, por lo que al observar el corazón in situ se pueden identificar dos superficies, que abarcan parte del lado derecho e izquierdo del corazón. La derecha tiene en su base la parte correspondiente a los atrios, de ahí que se denomine superficie atrial. La izquierda se caracteriza por tener en su base a las aurículas de los atrios, por lo que se denomina superficie auricular. (Adams, 2004) Al observar la superficie del corazón se nota la presencia del surco coronario, cerca de la base y el cual marca la separación entre los atrios y ventrículos. Contiene mucha grasa que envuelve a las arterias coronarias y rodea al corazón, excepto en el origen de la arteria pulmonar en donde se interrumpe. (Frandson, 1985)(Fig. 2) Existen 2 atrios (derecho e izquierdo), que internamente están separados por el tabique interatrial, 2 ventrículos (derecho e izquierdo), a su vez separados internamente por el tabique interventricular. La ubicación del tabique interventricular se puede determinar externamente por la presencia del surco interventricular formado por dos partes, el surco subsinusal (en la superficie derecha o atrial) y el surco paraconal (superficie izquierda o auricular). (Adams, 2004; Dyce, 2002)(Fig. 2) A B Fig. 2. A) Vista izquierda y B) derecha. 1. Ventrículo derecho; 2. Ventrículo izquierdo; 3. Aurícula izquierda; 4. Surco paraconal; 5. Tronco pulmonar; 6. Aurícula derecha; 7. Aorta; 8. Surco subsinusal; 9. Surco coronario. 3 Estructura del corazón La pared del corazón consta de 3 capas, una externa serosa que se llama epicardio, una endotelial interna llamada endocardio y una gruesa capa muscular intermedia que es el miocardio. El endocardio es una capa de células endoteliales escamosas que tapiza las cámaras cardíacas, cubre sus válvulas y se continúa con la capa interna de los vasos; de esta capa se derivan las cúspides y las cuerdas tendinosas de las válvulas atrioventriculares. El miocardio es el músculo cardíaco formado por músculo estriado involuntario. Se divide en atrial y ventricular, siendo mucho más delgado el atrial. Por otro lado el miocardio del ventrículo izquierdo es más grueso que el derecho. A nivel del tabique atrioventricular, el miocardio atrial y ventricular están separados por cuatro anillos fibrosos que rodean a los orificios que comunican a los atrios con los ventrículos (anillos atrioventriculares derecho e izquierdo) y a los orificios de origen de las arterias aorta y pulmonar (anillos aórtico y pulmonar). El epicardio es en realidad la lámina visceral del pericardio seroso, que se describe más adelante. (Dyce, 2002) El pericardio es un saco fibroseroso que envuelve al corazón, raíces de las arterias aorta y pulmonar, y terminaciones de las venas cavas, ácigos y pulmonares. Estructuralmente está formado por una lámina fibrosa y otra serosa: a) Lámina fibrosa.- bolsa fibrosa que se origina de la base del corazón y lo envuelve, así el corazón se mantiene aislado del resto de órganos torácicos. b) Lámina serosa.- membrana serosa que se subdivide en dos láminas, parietal y visceral. La lámina parietal reviste al pericardio fibroso, la lámina visceral se une firmemente al músculo cardíaco formando al epicardio. Estas láminas se encuentran separadas por un espacio apreciable, la cavidad pericárdica, dentro de la cual se encuentra al líquido pericárdico. (Dyce, 2002) Anatomía interna del corazón El corazón está dividido en cuatro cámaras dos atrios, derecho e izquierdo y dos ventrículos derecho e izquierdo. El atrio derecho está dividido en dos partes: el seno venoso (de las venas cavas) y un apéndice llamado aurícula. El seno venoso es la cavidad del atrio en donde vacía la sangre procedente de las venas cavas y se mezcla con aquella proveniente de las venas coronarias y que termina en el seno coronario. En la superficie interna del atrio, entre los orificios de las venas cavas craneal y caudal existe una elevación, el tubérculo intervenoso, que evita la confrontación entre las corrientes de las cavas mediante la desviación ventral de ambas hacia el orificio atrioventricular derecho. En el interior de la aurícula se encuentran unos delgados relieves musculares de forma irregular denominados músculos pectinados. Todos estos músculos parten de una elevación del miocardio (la cresta terminal), que marca el límite entre la aurícula y el seno venoso. Externamente la cresta terminal se aprecia como un surco, el surco terminal. (Adams, 2004) 4 Los atrios derecho e izquierdo están separados por el tabique interatrial. En la vida fetal en el tabique interatrial hay un orificio que comunica ambos atrios, el foramen oval y que después del nacimiento este cierra su luz, quedando solo una depresión apreciable en el lado del tabique hacia el atrio derecho, la fosa oval. (Adams, 2004) El ventrículo derecho recibe el flujo sanguíneo proveniente del atrio derecho a través del orificio atrioventricular derecho en donde se encuentra la válvula atrioventricular derecha, la cual está formada por tres cúspides, por lo que esta válvula se conoce como válvula tricúspide. Sobre el borde libre de las cúspides se anclan las cuerdas tendinosas, que provienen de unas elevaciones del miocardio llamadas músculos papilares. (Adams, 2004) Del ventrículo derecho, a través del orificio pulmonar, surge la arteria pulmonar. En este orificio existen tres valvulillas semilunares que forman la válvula pulmonar.El área del ventrículo en donde se origina la arteria pulmonar se denomina cono arterioso y está limitado por el tabique interventricular y una elevación que lo separa del orificio atrioventricular derecho la cresta supraventricular. (Adams, 2004) La pared interna del ventrículo presenta crestas musculares llamadas trabéculas carnosas que son menos aparentes en el cono arterioso. Además en la cavidad del ventrículo derecho existen una o más trabéculas septomarginales que cruzan la luz del ventrículo desde el tabique interventricular hasta la pared marginal del mismo. (Adams, 2004) El atrio izquierdo recibe a las venas pulmonares a través de los orificios de las venas pulmonares. Al igual que el atrio derecho presenta dos partes, el seno venoso (de las venas pulmonares) y el apéndice terminal ciego o aurícula izquierda, que también presenta músculos pectinados, aunque es de notarse la ausencia de una cresta terminal. En la superficie del tabique interatrial orientada hacia el atrio izquierdo, a nivel de la fosa oval, se aprecia el pliegue oval que es el vestigio de lo que en vida fetal fue la válvula del foramen oval. (Adams, 2004) El ventrículo izquierdo recibe el flujo sanguíneo del atrio izquierdo a través del orificio atriventricular izquierdo en donde se encuentra la válvula atrioventricular izquierda la cual cuenta con dos cúspides por lo que se le denomina válvula bicúspide o mitral, también presenta cuerdas tendinosas, músculos papilares, trabéculas carnosas y septomarginales semejantes a las del ventrículo derecho. En el ventrículo izquierdo se localiza el vestíbulo aórtico en donde se sitúa el orificio aórtico que marca la salida de la aorta ascendente. En el orificio se encuentra la válvula aórtica que cuenta con tres valvulillas semilunares. En las proximidades del orifico aórtico se encuentran las dos primeras ramas de la aorta, las arterias coronarias, que irrigan al corazón y se aprecian como dos orificios sobre la superficie interna de la aorta. (Adams, 2004) El corazón de canino El corazón del canino difiere extraordinariamente en forma y posición del de los animales de mayor talla. El peso absoluto del corazón de un perro de tamaño medio es de 400 a 600 gramos y representa del 0.9 al 2.2% de peso total del cuerpo. El peso relativo está sujeto a amplias variaciones. Es grande en los perros de caza y en los adiestrados para carreras y trabajo. En los perros gordos o de vida sedentaria puede ser solo de 0.5%.(Sisson, 1981) 5 PLASTINACIÓN La preservación de cadáveres y especímenes es un proceso descrito desde la antigüedad, los egipcios aportaron al conocimiento médico y de la industria funeraria el uso de sustancias químicas y técnicas para embalsamar; son clásicas las descripciones anatómicas de las obras de Hipócrates, Galeno, Avicena, Vesalio, Leonardo da Vinci, entre otros, y las ilustraciones anatómicas de importantes artistas como el mismo da Vinci, Rembrandt y en la modernidad, Testug Latarget. (Jiménez, 1995) La demostración de especímenes completos o cortes anatómicos es un ejercicio importante en la enseñanza e investigación anatómica, ya que permite reconocer, describir y analizar las estructuras que constituyen al organismo en su posición tridimensional y sus relaciones espaciales. Las operaciones tradicionales que permiten obtener piezas fijadas para el estudio anatómico se denomina embalsamiento y se ha mejorado permitiendo en la actualidad que las piezas preparadas puedan resistir varios grados de manipulación. (Gersenowies, 1998) Por lo cual durante varios siglos los científicos han intentado crear un método efectivo y seguro de conservación y de larga preservación de especímenes, ya que preparaciones anatómicas creadas en el pasado tienen muchas desventajas. (Sivrev, 2005) Tal es el ejemplo de las piezas fijadas con una solución de formol al 8 o 10%, que obtienen una preservación de 4 a 5 años. Sin embargo, diversos estudios han demostrado que el formol tiene un efecto toxico y carcinógeno. Esto motivo la búsqueda de otros métodos de preservación de organismos, entre los cuales destaca la substitución del agua por diversos compuestos que permiten una mejor preservación y manejo de los especímenes. Se han utilizado los polímeros sintéticos para la preservación de los organismos, incluyéndolos en bloques gruesos de resina los cuales no son de fácil manejo siendo utilizados como material de exhibición y museo, teniendo una preservación inadecuada de la coloración natural.(Gersenowies, 1998) Las técnicas anatómicas que actualmente se usan, en forma rutinaria, para fines docentes y de investigación (fijación en formol, alcohol, etc.), si bien son económicas, adolecen de múltiples defectos, destacándose la corta vida media de los preparados anatómicos y en algunos casos la poca fidelidad con respecto al material vivo. (Olivares, 1999) El formol ha estado en uso durante más de un siglo como desinfectante y conservador. En la enseñanza de la anatomía, el uso de preparaciones cadavéricas sigue siendo el método mas eficiente para lograr que el estudiante comprenda y retenga por más tiempo el conocimiento que le será útil en su ejercicio profesional futuro. Los estudiantes de medicina veterinaria por lo general tienen una experiencia de primera mano con esta sustancia en sus primeros días de estudio de anatomía práctica. Debido a la exposición a este reactivo se presentan síntomas como irritación de ojos y vías respiratorias así como cambios en las células epiteliales en la boca y linfocitos en sangre. (Adbelhay, 2007) La plastinación es un moderno método para la conservación duradera de materia orgánica, creada por el anatomista alemán Gunther Von Hagens (Von Hagens, 1979) quien comenzó a trabajar en su desarrollo desde la década de los años 70 del siglo XX y entre 1980 y 1982 patentó en Europa y Norteamérica los productos diseñados en su laboratorio como la silicona, los polímeros y las resinas de tipo epóxico, así como los catalizadores y los equipos necesarios para la técnica, e igualmente la plastinación como tal; al finales del siglo XX 6 entregó sus conocimientos al servicIo de la humanidad y se dedicó a la exposición en diferentes partes del mundo. (Olivares, 1999; Sivrev, 2005) La plastinación consiste en la sustitución de agua y lípidos de los tejidos biológicos por un polímero curable (silicona, epoxy, poliéster) el cual es, posteriormente, endurecido (Olivares,1999; Sivrev, 2005) La clase de polímero a utilizar, determinará las propiedades ópticas (transparente u opaco) y mecánicas (flexible o firme) del espécimen impregnado. Las piezas fijadas de esta manera mantienen la textura y coloración del tejido vivo, además son más resistentes que las piezas fijadas por medio de las técnicas clásicas. (Von Hagens, 1979; Miklosova, 2004) Existen tres variaciones de la técnica: 1.- La impregnación en silicona, usada para especímenes enteros y órganos, obteniendo una apariencia natural y preparados flexibles, siendo usados para fines docentes. (Jiménez, 2005) 2.- La impregnación con epoxy, para la obtención de cortes de órganos o cuerpos enteros transparentes, es utilizada para fines de investigación. (Olivares, 1999) 3.- La impregnación con biopolímeros, obteniendo preparados opacos, rígidos y quebradizos, esta técnica es utilizada para cortes de encéfalo. (Olivares, 1999) La técnica incluye cuatro etapas: fijación, deshidratación, impregnación forzada (en congelación y vacío) y curado. (Gersenowies, 1998) La fijación se realiza, mediante inyección o inmersión del cadáver o espécimen en soluciones de formalina acuosa al 10% por un periodo de 1 a 4 semanas de acuerdo con el tamaño del órgano; durante esta etapa se recomienda disecar según las estructuras que se quieran demostrar. (Ruiz, 2003) Para la deshidratación se recomienda la inmersión del preparado o cuerpo en baños de acetona que deben iniciarse en concentraciones no mayores del 70%; semanalmentese cambia el baño aumentando la concentración del solvente hasta lograr una deshidratación por lo menos del 99% la cual se determina mediante el acetonómetro. Esta etapa debe realizarse a bajas temperaturas pues de lo contrario a temperatura ambiente, los especímenes o los órganos sufren un grado de contracción, denominada retracción.(Henry, 1997; Ruiz, 2003) Para la impregnación forzada se debe elegir entre siliconas, polímeros y epóxidos; el proceso se lleva acabo mediante una cámara y una bomba de vacío; la presión de vacío generada en la cámara facilita la evaporación del solvente y el ingreso al tejido de las moléculas del material seleccionado. Se realiza a bajas temperaturas, por debajo de 15°C. (Miklosova, 2004) El proceso del curado varia según del material utilizado: para los especímenes impregnados con silicona se utiliza una cámara de gas y luego se mantiene al espécimen hasta por seis meses en un recipiente o una bolsa sellados (el periodo se determina por el tamaño del órgano o preparado anatómico); para los cortes impregnados por polímeros o resinas de tipo epóxido se recomienda el uso de calor o luz ultravioleta por 24 horas; durante la etapa del curado se deben eliminar los restos del material utilizado.(Henry, 1997; Miklosova, 2004) 7 JUSTIFICACiÓN El silicón 8-10® es utilizado en la técnica de rutina de plastinación por todo el mundo dando buenos resultados en diferentes estudios realizados, sin embargo su costo y adquisición son complicados, además la técnica requiere de congelación por lo que requiere de congeladores que elevan su costo. Nosotros proponemos el uso del silicón silastic T -2® debido a que nos permite realizar la técnica de plastinación a temperatura ambiente, a diferencia del método con silicón 8-10® en la que la impregnación forzada se tiene que realizar a -20°C. Lo anterior hace que el método utilizado con silastic T -2® sea más sencillo y no se requiera la instalación y adaptación de equipos costosos para mantener los estados de congelación y vacío requeridos por este método. 8 OBJETIVOS Objetivo general: Evaluar la utilización de 2 diferentes silicones, silasctic T-2® (Kaucho Químico) y 8-10® (Biodur), para la conservación mediante la técnica de plastinación de corazones de canino en cuanto a sus características morfológicas. Objetivos particulares: 1. Obtener corazones de canino conservados para ser utilizados en su estudio anatómico. 2. Aplicar la técnica de plastinación como método de conservación en corazones de canino con silicón silastic T-2® y 8-10®. 3. Determinar las diferencias en cuanto a la calidad obtenida en la aplicación de los dos tipos de silicón (silastic T-2 ®y 8-1 O®). 9 MATERIALES Y METODOS Biológico: 20 corazones de la especie canina Químico: Formalina acuosa al 10% 8ilicón 8-10® (Biodur) Hardener 8-3 Agente curador 8-6 8ilicón silastic T -2® Agente curador T-2® Aceite fluido DC 200/350 Instrumental: Cuchillos Estuche de disección Algodón Recipientes Refrigerador Congelador Acetonómetro 2 Cámaras de vacío 2 Bombas de vacío Cámara de curado Bomba de aire Hilo cáñamo Tela Bolsas de cierre hermético Brocha Báscula 10 METODOLOGíA El trabajo se realizó en el Laboratorio de Apoyo Técnico de Anatomía de la FES Cuautitlán UNAM, para lo cual se obtuvieron 20 corazones de cadáveres de canino (donados por Centro de Control Canino de Cuautitlán). Los cuales fueron divididos en 2 grupos con 10 corazones cada uno. En el grupo 1 se utilizo el silicón S-10® y en el grupo 2 el silicón T -2®. En general la metodología es similar salvo en la fase de impregnación forzada y de polimerización (curado), los pasos a seguir fueron: Obtención y preparación del corazón. Se retiró el corazón de la cavidad torácica junto con los pulmones, para facilitar la extracción del corazón y la mayor parte de los vasos sanguíneos. Se llevó a cabo una disección sistemática y cuidadosa para lograr la visibilidad de las estructuras anatómicas que conforman al corazón. Al término de la disección se rellenaron las cavidades cardíacas y los vasos sanguíneos con algodón, con el fin de mantener su forma. (Fig. 3) Fig. 3. Obtención y preparación del corazón del perro para el procedimiento de plastinación. Posteriormente cada corazón se fijó por inmersión en solución fijadora de formalina acuosa al 10% durante una semana. Después se procedió a realizar un lavado por inmersión con agua corriente durante 24 horas para retirar el exceso de la misma, y pasar a refrigeración a 4°C por un periodo de 12 horas, al término de este tiempo se retiró el algodón de su cavidad. El siguiente paso fue la deshidratación, cuyo objetivo fue remover la grasa y liquido tisular, para ser reemplazados por un solvente orgánico en este caso la acetona. Esta fase se realizó a temperaturas por debajo de los -20°C. 11 La deshidratación se realizó utilizando exclusivamente acetona en cuatro cambios cada uno de 1 semana, la deshidratación por inmersión en acetona se inicio a una concentración de 97% en los dos primeros cambios, en el tercer y cuarto cambio se aumentó la concentración de la acetona al 100%. En esta etapa se utilizó el acetonómetro con el fin de garantizar la concentración final de la acetona después de cada paso; al término de la última incubación, la acetona quedó a una concentración del 99%, lo cual nos garantizó la deshidratación del órgano. La impregnación forzada se realizó utilizando una cámara y bomba de vacío. La presión del vacío generada en la cámara facilito la extracción de la acetona de los tejidos y su sustitución por el silicón. En este paso el grupo 1 se colocó en el silicón 8-10® + 8-3 (Biodur) dentro de la cámara de vacío la cual fue colocada dentro de un congelador a -20°C al cual se le adaptó una serie de tubos que permitieron conectar con la bomba de vacío que se mantuvo fuera del congelador. Posteriormente los corazones depositados en el silicón fueron sometidos a vacío a una presión de por lo menos 25mmHg. Durante 3 semanas, iniciando a 16-20 incHg (24 hrs.) y controlando la presión con las siguientes presiones: 50, 15, 5 Y menor a 5 mmHg por 2 o 3 semanas, después se rompió la presión de vacío lentamente, se mantuvieron las piezas sumergidas en el 810/8-3 por 24 hrs., en congelación. Posteriormente se sacaron las piezas impregnadas de la cámara y se dejaron escurrir a -20°C y para iniciar la fase de curado. Mientras que los 10 corazones del grupo 2 se depositaron en silicón transparente 8ilastic T- 2®. Posteriormente los corazones depositados en el silicón fueron sometidos a vacío a una presión de por lo menos 25 mmHg, a temperatura ambiente este proceso tuvo una duración de 3 semanas, similar al proceso aplicado para biodur, solo que se hizo a temperatura ambiente. Al término de la impregnación los corazones se pusieron a escurrir para eliminar los restos de silicón y posteriormente pasaron a la etapa de polimerización (curado). La polimerización se llevo a cabo en el grupo 1 mediante la gasificación del agente curador 8-6 por lo cual se colocaron en una cámara de curado que mantuvo los órganos en contacto con los vapores durante 3 semanas. (Fig. 4) 12 Fig. 4. Proceso de polimerización del grupo 1 (8-1 o®) en una cámara de curado. La polimerización para el grupo 2 se realizó aplicando directamente el agente curador T -2® a los órganos y en las primeras 24 a 48 hrs. se sometieron a una presión de vacío de 15 mmHg, pasado este tiempo se retiraron de la cámara y se dejaron a temperatura ambiente para realizar el curado. Al término de la polimerización ambos grupos se colocaron en bolsas de plástico con cierre. Para el término del curado se retiró el exceso de silicón que trasudaba de los órganos mediante la limpieza con un lienzo seco y limpio. (Fig. 5) Fig. 5. Corazones colocados en bolsa con sello hermético en la última etapa de plastinación 13 RESULTADOS Y DISCUSiÓN En el presente trabajo se hizoun estudio comparativo de plastinación de corazón de canino utilizando dos diferentes silicones. Para obtener los resultados comparativos se hicieron una serie de mediciones y evaluación cualitativa con el fin de determinar cual es el mejor silicón para ser empleado de forma rutinaria en el laboratorio. Todas las mediciones se realizaron al inicio (1), después de la fijación (F) y al término de la plastinación (P). (Fig. 6). Las medidas se realizaron de acuerdo a como se ilustra en la figura 7. Los datos obtenidos fueron divididos en dos grupos: datos cuantitativos (peso, tamaño del surco coronario, tamaño de aurícula al ápice y tamaño de la vena al ápice) y datos cualitativos (forma, color, olor y textura). Inicio de la plastinación (1) Después de la fijación (F) Término de la plastinación (P) Fig. 6. Se muestran 3 imágenes de los corazones (vista izquierda) durante el proceso de la plastinación. 14 Datos cuantitativos Se realizaron comparaciones intragrupos (datos cuantitativos dependientes) e intergrupos (datos cuantitativos independientes) mediante la prueba estadística de t student con un valor significativo de 0.05%. Estadística de datos dependientes a través de la prueba de t student, que consiste en la comparación del antes y después de los datos obtenidos en un mismo grupo. Para llevar a cabo la prueba estadística con mayor significancia se tomaron en cuenta los datos obtenidos al inicio de la plastinación (1) y al término de la plastinación (P) de cada uno de los grupos. (Fig. 8 Y 9) A B e Fig. 7. Imágenes de 3 corazones mostrando la localización en donde se realizaron las diferentes mediciones A) Tamaño del surco coronario, B) Tamaño de aurícula izquierda al ápice, C) Tamaño de vena pulmonar al ápice. GRUPO 1 (S-10®) Al inicio Al término Fig. 8. Imágenes de 2 corazones (vista izquierda) al inicio y al término de la técnica de plastinación, con silicón S-10® (BIODUR). 15 GRUPO 2 (T-2®) Al inicio Al término Fig. 9. Imágenes de 2 corazones (vista izquierda) al inicio y al término de la técnica de plastinación, con silicón silastic T-2® (Kaucho). Los resultados obtenidos mediante la prueba estadística de t student que se muestran en las tablas 1 y 2, se realizaron con un valor significativo de 0.05% (valor de t student 2.1009). Indicando que los corazones sometidos a la técnica de plastinación en los diferentes grupos disminuyeron su volumen de forma significativa considerablemente al término de la misma en comparación con las medidas obtenidas al inicio de dicho procedimiento. Para realizar la prueba estadística de datos independientes de t student, que consiste en la comparación de los datos obtenidos en dos diferentes grupos se procedió a obtener la media de cada una de las medidas al inicio, postfijación y al término de la plastinación de ambos grupos. (Tabla 3) MEDICIONES MEDIA T STUDENT Peso 69.2 8.14* Tamaño coronario 1.61 2.87* Tamaño aurícula/ápice 1.04 4.33* Tamaño pulmonar/ápice 0.6 5* Tabla. 1. En la tabla se muestra los resultados obtenidos: las medias (de las diferencias entre los momentos antes y después de la plastinación) y de t student del grupo 1 (BIODUR) de los datos dependientes. (*diferencia significativa) 16 MEDICIONES MEDIA T STUDENT Peso 53.7 8.53* Tamaño coronario 1.07 4.03* Tamaño aurícula/ápice 0.59 2.56* Tamaño pulmonar/ápice 1.04 2.73* Tabla. 2. En la tabla se muestra los resultados obtenidos: las medias (de las diferencias entre los momentos antes y después de la plastinación) y de t student del grupo 2, silicón T-2 ® de los datos dependientes. (*diferencia significativa). VARIABLE Grupo 1 MEDIA DS Grupo 2 MEDIA DS T STUDENT (N) (N) Peso (1) 10 211.5 58.48 10 155 .6 37.61 2.54 * Peso (F) 10 214.2 58 .11 10 159.5 38.93 2.51 * Peso (P) 10 142.3 36.49 10 101.9 26.04 2.89 * Tamaño coronario (1) 10 21.51 2.47 10 18.85 1.54 2.93 * Tamaño coronario (F) 10 22.14 2.5 10 21.04 1.7 1.68 Tamaño coronario (P) 10 20.36 1.9 10 20.74 1.09 1.33 Tamaño aurícula/ápice(l) 10 8 0.99 10 7.41 1.39 1.1 Tamaño aurícula/ápice(F) 10 8.46 0.88 10 7.98 1.19 1.02 Tamaño aurícula/ápice(P) 10 8.86 0.88 10 7.1 0.68 5.02 * Tamaño pulmonar/ápice(l) 10 9.87 1.17 10 7.89 1.65 3.1 4 * Tamaño pulmonar/ápice(F) 10 10.24 1.02 10 8. 13 1.63 3.52 * Tamaño pulmonar/ápice (P) 10 9.95 1.15 10 7.65 0.73 5.47 * Tabla. 3. Se muestran los resultados obtenidos de los datos independientes mediante la prueba de t student de dos diferentes muestras. (* diferencia significativa) La tabla 3 muestra los datos obtenidos de los grupos 1 y 2 los cuales fueron comparados para obtener el valor de la prueba t student, obteniendo como resultado que en las mediciones señaladas se presentó una diferencia significativa (*) entre ambos grupos. El grupo 2 presentó una disminución en peso (1, F, P), tamaño coronario (1), tamaño aurícula/ápice (P) y tamaño pulmonar/ápice (1, F, P) en comparación con el grupo 1 al término de la plastinación, esto pudo deberse a que los corazones de este grupo (silicón T- 2®) se pasaron de la deshidratación a temperatura de congelación y la impregnación forzada que se hizo a temperatura ambiente, esto pudo originar cierto grado de contracción del tejido tal y como lo hemos observado también en el caso de plastinación de encéfalos con este silicón (Martínez, 2006) y que ha sido reportado por Henry (1997) y Ruiz (2003) (Fig. 10). 17 Al BI A2 B2 A3 B3 A4 B4 A5 B5 Fig. 10. Imágenes comparativas en diferentes vistas de 2 corazones plastinados con diferentes silicones S-10® (A) Y T-2® (B), vista izquierda (1), derecha (2), craneal (3), costado derecho (4), costado izquierdo (5). Datos cualitativos Todas las mediciones para las características de forma, color, olor y textura, se realizaron al término de la plastinación. Cada característica se evaluó de la siguiente manera, forma: que el corazón mantuviera su anatomía natural, sin contar con demasiadas malformaciones; color: que mantuviera el color lo mas natural y que permitiera la mayor visualización de las estructuras superficiales; olor: que no contar con olor desagradable ni irritante; textura: se califico la flexibilidad y la sensación al tacto. 18 Debido a que se trata de aspectos cualitativos, con el fin de poder realizar el análisis estadístico para determinar diferencias, se tomó como referencia para cada característica la siguiente escala: Muy bien (4) Bien (3) Regular (2) Malo (1) Muy malo (O) Cada uno de los corazones fueron calificados individualmente por 5 personas dedicadas a la enseñanza de la anatomía, obteniendo los siguientes resultados. Las tablas 4, 5, 6 Y 7 muestran la frecuencia de la escala de cada uno de los grupos. FORMA ESCALA GRUPO 1 GRUPO 2 o o o 1 o 1 2 4 5 3 5 4 4 1 o No. Total 10 10 Tabla. 4. Muestra la escala para calificar la forma y la cantidad de corazones del grupo 1 y 2 COLOR ESCALA GRUPO 1 GRUPO 2 O O O 1 1 O 2 3 2 3 6 8 4 O O No. Total 10 10 Tabla. 5. Muestra la escala para calificar el color y la cantidad de corazones del grupo 1 y 2. OLOR ESCALA GRUPO 1 GRUPO 2 O O O 1 O O 2 O O 3 10 10 4 O O No. Total 10 10 Tabla. 6. Muestra la escala para calificar el olor y la cantidad de corazones del grupo 1 y 2 19 TEXTURA ESCALA GRUPO 1 GRUPO 2 O O O 1 O O 2 6 7 3 4 3 4 O O No. Total 10 10 Tabla. 7. Muestra la escala para calificar textura y la cantidad de corazones del grupo 1 y 2 Promedios de Grupo 1 y grupo 2 SILICON S-10® SILICON T-2® Grupo 1 Grupo 2 Forma 3 2.6 Textura 2.8 2.5 Color 2.9 3.1 Olor 3.7 3.7 Tabla . 8. Promedios obtenidos de cada grupo con forme a sus características 4 3.5 3 2.5 2 • GRUPO 1 • GRUPO 2 1.5 0.5 o FORMA COLOR OLOR TEXTURA Tabla. 9. Muestran las diferencias que existieron con las medias de los datos obtenidos de ambos grupos. 20 Como puede observarse en las tablas 8 y 9, los corazones del grupo 1, mantuvieron la forma anatómicamás cercana a la del corazón fresco, a diferencia de los del grupo 2, que sufrieron deformación al final del proceso. Sin embargo los corazones del grupo 2 mostraron una mejor coloración a diferencia del grupo 1. Ambos grupos no mostraron un olor desagradable ni irritante, pero entre los grupos mostraron un olor diferente, debido al silicón utilizado. Por último, en lo que a la textura se refiere, el grupo 2 mostró mayor resequedad en comparación con el grupo 1. (Fig. 15) A B Fig. 15. Se muestran los corazones de mayor calidad obtenidos de ambos grupos (A) y los de menor calidad de ambos grupos (B). Al no existir diferencia importante en los parámetros cualitativos, podemos pensar que la sustitución del silicón dentro de los tejidos fue adecuada, ya que de lo contrario, se hubieran empezado a notar cambios por descomposición. Es importante señalar, que a la fecha en que se escribió este trabajo (6 meses después de la impregnación con el silicón), los corazones aun conservan las características de calidad señaladas en este trabajo para ambos silicones. 21 CONCLUSIONES 1. Se obtuvieron 20 corazones de canino a los que se les aplicó la técnica de conservación mediante la plastinación. 2. Se aplicó la técnica de plastinación utilizando los silicones T-2® y S-10®. 3. Se hizo el análisis comparativo entre ambos silicones y se observó lo siguiente: a) Los corazones plastinados con los diferentes tipos de silicón (S-10® y T-2®) disminuyeron su peso, tamaño coronario, tamaño aurícula/ápice y tamaño pulmonar/ápice, comparando el inicio y el término del dicho procedimiento, independientemente al silicón utilizado. b) Hubo diferencia significativa en varios de los parámetros analizados, como son: peso (1, F, P), tamaño coronario (1), tamaño aurícula/ápice (P) y tamaño pulmonar/ápice (1, F, P). Las diferencias consistieron en una disminución en estos parámetros en los corazones plastinados con el silicón T2 en comparación con el silicón S-10®. c) En las características morfológicas los corazones plastinados de ambos grupos obtuvieron una calificación de calidad a pesar de que los corazones plastinados con T-2® sufrieron una deformación. 4. La aplicación del silicón T -2® para la plastinación de corazones dio resultados adecuados obteniéndose piezas de calidad para ser utilizadas en docencia, con la ventaja de que este silicón es más fácil de adquirir en México y no necesita de la instalación de equipos costosos, especialmente de congeladores para la impregnación. 22 BIBLIOGRAFíA 1. Adams D. Canine Anatomy. Towa State Press Ed.,4th. ed. Philadelphia, USA. 2004; 265-279. 2. Adbelhay M, Ali and Thnaian A. Preservation of ruminant and equine anatomical specimens by silicone plastination. S. Jour of King Fai Un 2007; 8(1 ):111-118. 3. Dyce KM, Sack WO, Wensing CJG. Textbook of veterinary anatomy. Saunders Ed., 3rd. ed. Philadelphia, USA. 2002; 217- 228. 4. Evans HE. Miller's anatomy of the dogo Saunders Ed., 3rd. ed. Philadelphia, USA. 1993; 586- 597. 5. Frandson R. Anatomía y fisiología de los animales domésticos. Ed. Interamericana, 3ra ed. México, D. F. 1985; 243- 246. 6. Gersenowies J, González M. 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