Evaluacion-de-la-proteina-glutation-peroxidasa-como-posible-marcador-de-falla-renal-en-pacientes-con-diabetes-tipo-2

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Biológicas / Saúde

Medicina Fácil

5/8/2022

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Medicina

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FACULTAD DE MEDICINA

DIVISIÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO
E INVESTIGACION

INSTITUTO DE SEGURIDAD Y SERVICIOS SOCIALES
DE LOS TRABAJADORES DEL ESTADO

EVALUACIÓN DE LA PROTEINA GLUTATION PEROXIDASA COMO
POSIBLE MARCADOR DE FALLA RENAL EN PACIENTES CON
DIABETES TIPO 2
PRESENTA
JULIO ALBERTO CRUZ SANTANA

PARA OBTENER EL DIPLOMADE LA ESPECIALIDAD
MEDICINA INTERNA

TUTORES
Dr. Carlos Lenin Pliego Reyes

NO. DE REGISTRO DE PROTOCOLO
232.2014
AÑO
2014
UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTÓNOMA DE MÉXICO
Ricardo
Texto escrito a máquina
México D.F.
Ricardo
Texto escrito a máquina

UNAM – Dirección General de Bibliotecas
Tesis Digitales
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PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL

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fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo
mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro,
reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el
respectivo titular de los Derechos de Autor.

DR.FÉLIX OCTAVIO MARTÍNEZ ALCALÁ
COORD. DE ENSEÑANZA E INVESTIGACIÓN

DR.GUILEBALDO PATIÑO CARRANZA DRA. MARTHA EUNICE ARELLANO
JEFE DE ENSEÑANZA JEFE DE INVESTIGACIÓN

DR. CARLOS LENIN PLIEGO REYES
PROFESOR TITULAR

DRA. MARTHA EUNICE ARELLANO
ASESOR DE TESIS

RESUMEN
La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) se ha convertido en uno de los problemas de salud
pública más importante debido a los altos costos de su tratamiento y de la
prevención de las complicaciones. Una de las complicaciones más frecuentes de la
DM2 es la insuficiencia renal crónica (IRC), la cual se define como una disminución
de la función renal expresada por un aclaramiento de creatinina < 60 ml/min/1.73
m2 o como la presencia del daño renal persistente durante al menos tres meses. En
la práctica clínica diaria, la valoración de la función renal se suele hacer según las
cifras de creatinina sérica. Aunque hay muchos factores, especialmente la edad y
la masa muscular del sujeto, que pueden influir en su concentración. Dadas las
diversas desventajas que presenta la creatinina sérica se han buscado nuevos
marcadores que diagnostiquen la insuficiencia renal (IR) en etapas tempranas y de
manera más sensible y especifica. Por lo tanto, se estudió la actividad de la enzima
glutation peroxidasa (GPx) como posible marcador para determinar IR en pacientes
con DM2. Se realizó un estudio prospectivo de tipo clínico, experimental y analítico
en 30 pacientes diagnosticados con diálisis peritoneal, 30 pacientes diabéticos no
nefrópatas con >10 años de evolución de la enfermedad y 30 individuos no
diabéticos y no nefrópatas. Se les determinó en suero la glucosa, colesterol total,
colesterol HDL, colesterol LDL, triglicéridos, creatinina, urea y ácido úrico. Además
se determinó la hemoglobina glucosilada y la actividad de la enzima GPx al medir
la desaparición de NADH a 340 nm. Se encontró que la actividad de esta enzima
disminuyó significativamente en los pacientes nefrópatas respecto a los controles
(NEF: 0.22 ± 0.06; CTRL-DM: 0.34 ± 0.08; CTRL: 0.35 ± 0.1). Esta disminución se
encontró asociada exclusivamente en los controles al ajustar los valores de la
actividad de la enzima GPx por el sexo, género, presión arterial sistólica y diastólica,
glucosa y creatinina sérica y la presencia de diabetes. Los resultados sugieren que
la determinación de la actividad de la enzima Glutatión Peroxidasa puede ser
utilizada como un marcador en el desarrollo de ERC en pacientes con diabetes, ya
que la disminución de la actividad se asoció únicamente con la presencia de
nefropatía. Además, los resultados de las curvas ROC demostraron que la enzima
4

Gpx es un buen marcador para el diagnóstico de la ERC con un porcentaje de
precisión de 84.7%.

ABSTRACT
Diabetes mellitus type 2 (DM2) has become one of the most important problems of
public health due to the high costs of treatment and prevention of complications. One
of the most common complications of type 2 diabetes is chronic renal failure (CRF),
which is defined as a decrease in renal function expressed by creatinine clearance
<60 ml / min / 1.73 m2 or the presence of renal damage persisting for at least three
months. In clinical practice, the assessment of renal function is usually determined
from the serum creatinine. Although many factors, especially age and muscle mass
of the subject, which may influence its concentration. Given the various
disadvantages of serum creatinine have sought new markers to diagnose renal
failure (RF) in early and more sensitive and specific way stage. Therefore, the activity
of the enzyme glutathione peroxidase (GPx) were studied as a potential marker for
determining IR in T2DM patients. A prospective study of clinical, experimental and
analytical type was performed in 30 patients diagnosed with peritoneal dialysis, 30
diabetic nephropathy patients with> 10 years of evolution of the disease and 30 non-
diabetic nephropathy and not individuals. Were determined in serum glucose, total
cholesterol, HDL cholesterol, LDL cholesterol, triglycerides, creatinine, urea and uric
acid. Furthermore glycated hemoglobin and GPx enzyme activity by measuring the
disappearance of NADH at 340 nm was determined. It was found that the activity of
this enzyme decreased significantly in nephropathy patients compared to controls
(NEF: 0.22 ± 0.06; CTRL-DM: 0.34 ± 0.08; CTRL: 0.1 ± 0.35). This decrease was
found exclusively associated controls to adjust the values of GPx enzyme activity by
sex, gender, systolic and diastolic blood pressure, glucose and serum creatinine and
the presence of diabetes. The results suggest that the determination of the activity
of the enzyme glutathione peroxidase may be used as a marker in the development
of CKD in patients with diabetes, as the decrease in activity was associated only with
the presence of nephropathy. Furthermore, the results of ROC curves showed that
GPx enzyme is a good marker for diagnosis of CKD with a percentage of 84.7%
accuracy.

AGRADECIMIENTOS

Asesor Metodológico
M. en C. Angélica Saraí Jiménez Osorio

INDICE

I.INTRODUCCIÓN………………………………………………………………………9
II. ANTECEDENTES………………………………………………………………..…10
2.1 Diabetes Mellitus tipo 2………………………………………………….10
2.1.1 Definición………………………………………………………………..10
2.1.2 Prevalencia………………………………………………………10
2.1.3. Clasificación de diabetes mellitus………………………….11
2.1.3.1. Diabetes mellitus tipo 2…………………………….13
2.1.3.2. Complicaciones de la diabetes mellitus tipo 2…14
2.2 Insuficiencia renal crónica en pacientes diabéticos……………….16
2.3 Glutatión Peroxidasa……………………………………………………..17
2.3.1 Generalidades……………………………………………………17
2.3.2. Estructura………………………………………………………..18
2.3.3. GPx1 y GPx3………………………………………………….…18

III. Justificación…………………………………………………………………………19

IV. Hipótesis…………………………………………………………….……………….19
V. Objetivos……………………………………………………………….……………..20
5.1 Objetivos generales………………………………………..………………20
5.2 Objetivos específicos……………………………………….….…………20

VI. Metodología…………………………………………………………………………21
6.1 Diseño del estudio……………………………………………………..…21
6.1.1. Criterios de Inclusión…………………………………….……………21
6.1.2. Criterios de exclusión…………………………………………226.1.3. Criterios de eliminación………………………….……………23
6.2. Obtención dela muestra…………………………………………………23
6. 3 Análisis clínicos………………………………………………………...…23
6.3.1 Química Sanguínea………………………………………………23
6.3.2 Hemoglobina glicosilada……………………………………….24
6.4 Determinación de la enzima GPx…………………………………….….24
6.5 Análisis estadísticos………………………………………………………25

VII. RESULTADOS …………………………………………………………………..…26
7.1 Características de la población de estudio………………………...…26
7.2 Parámetros bioquímicos…………………………………………….……28
7.3 Niveles de GPx en la muestra poblacional…………………………….28
7.4 Sensibilidad y especificidad de Gpx como marcador……………….30

VIII. DISCUSIONES……………………………………………………………………..31
IX. CONCLUSIÓN…………………………………………………………………….…34
X. LIMITACIONES DEL ESTUDIO Y PERSPECTIVAS…………………………….34
XI. REFERENCIAS………………………………………………………………………35

INTRODUCCIÓN
La cantidad de personas con diabetes en el mundo incrementa en una proporción
tal que supera las estimaciones realizadas por instancias internacionales. En el año
2000 se estimaba que para el año 2030 las personas con diabetes en el mundo
alcanzaran la cifra de 366 millones de personas. Sin embargo, en la última
estimación de la Federación Internacional de Diabetes, esta cifra ha sido superada
para el año 2013. Aunado al hecho de que aproximadamente la mitad de esta cifra
corresponde a personas no diagnosticada, estamos hablando de que para el año
2015 habrán millones de personas en el mundo que sufran de alguna complicación
secundaria a la diabetes si está no es adecuadamente manejada. De estos
pacientes, se considera que un cuarto (100 millones de personas,
aproximadamente) padecerán nefropatía diabética (ND). La ND es la complicación
micro vascular más común en los pacientes con diabetes mellitus. Es la principal
causa que conlleva a la morbilidad y mortalidad en pacientes con diabetes. La ND
se caracteriza por niveles de albuminuria ≥300 mg/día, velocidad de filtración
glomerular (FG) reducida y predisposición a hiperglicemia crónica durante la fase
prediabética. En la práctica clínica, uno de los principales marcadores de falla renal
es la creatinina sérica. Su determinación en suero, la accesibilidad a la toma de
muestra y debido a que es muy rápida su medición en quipos automatizados hacen
de ella un buen estándar para el diagnóstico de progresión a nefropatía durante la
diabetes. Sin embargo, la creatinina sérica (Crs) se encuentra aumentada hasta la
cuarta etapa de la ND y puede verse modificada por diferentes factores que
enmascaran sus niveles y dificultan el diagnóstico. Uno de los principales
indicadores para evaluar la función renal es la velocidad de FG. Sin embargo, los
métodos y estándares para determinar el FG suelen ser más costosos, requieren
más tiempo y tienen aplicación limitada para el monitoreo del FG. Existen muchos
otros indicadores candidatos que pueden estar asociados con la progresión de la
ND en modelos experimentales, sin embargo hay poca evidencia en humanos que
sugieran que son más sensibles a cambios en la velocidad de excreción de
albúmina más específicamente que en la velocidad de FG.
10

II. ANTECEDENTES
2.1 Diabetes Mellitus tipo 2
2.1.1 Definición
La diabetes Mellitus (DM) es un grupo de enfermedades metabólicas
caracterizadas por hiperglicemia, es decir, por un incremento persistente en los
niveles basales de glucosa en la sangre (≥126 mg/dl o 7.0 mmol/l), como
consecuencia de defectos en la secreción o producción de insulina, en la acción de
la insulina, o en ambos (ADA, 2014).
En la base de su etiopatogenia subyace un bien establecido mecanismo dual:
por un lado, un estado sostenido de resistencia insulínica, y por otro, una disfunción
secrectora de las células beta pancreáticas de tendencia progresiva, crónica e
irreversible. Ambos estados condicionantes de la DM tienen una base genética y
ambiental no del todo bien conocida (Taniguchi y col., 2006).
2.1.2 Prevalencia
Las enfermedades crónicas se han convertido en uno de los problemas de salud
pública más importante debido a los altos costos de su tratamiento y de la
prevención de las complicaciones. Los cambios en el comportamiento humano y los
estilos de vida en el último siglo han provocado un gran incremento de incidencia
mundial de diabetes, sobre todo de tipo 2 (Zimmet y col, 2001). En el año 2000, la
Organización Mundial de la Salud (OMS) calculaba que el número de personas con
diabetes en el mundo era de 171 millones y pronosticó que aumentaría a 366
millones para el año 2030 (Wild y col, 2004). Sin embargo, la IDF publica en el año
2013 nuevas cifras en donde se estima que a nivel mundial hay 382 millones de
personas afectadas con esta enfermedad, lo cual corresponde a lo estimado en el
año 2000 por la OMS para el año 2030. Más alarmante es el hecho de que
aproximadamente 175 millones de personas actualmente padecen la enfermedad y
no ha sido diagnosticada. Esto corresponde a casi la mitad de los casos
diagnosticados y puede dar una idea de que en 10 años, aproximadamente 500
11

millones de personas en el mundo padecerán alguna complicación por la
enfermedad si ésta no se controla adecuadamente (IDF, 2013).
Desde 1940, la diabetes se encontraba dentro de las primeras 20 causas de
mortalidad en México, con una tasa de 4.2 por 100,000 habitantes. Pese a ello, se
la consideraba una enfermedad poco frecuente (1% de la población adulta) las
consecuencias de la enfermedad crecieron a partir de 1970, cuando la diabetes
ocupó el 15º lugar como causa de muerte. Diez años después ocupó el noveno lugar
y para 1990 alcanzo el cuarto lugar por causa de mortalidad general. A partir del
año 2000 la diabetes se clasificó como la primera causa de muerte en mujeres y la
segunda en hombres, después de la cardiopatía isquémica, complicación común
en los pacientes diabéticos no tratados (SSA, 2002). En 2003, la diabetes
representó el 12.6% de todas las muertes ocurridas en el país y la edad promedio
al morir fue de 66 años. Para el año 2013, la IDF estima que la prevalencia de la
diabetes, basada en la extrapolación de países similares, es de 11.77%, mientras
que el 70.3% de las muertes estaban relacionadas con la enfermedad (IDF, 2013).
La diabetes genera un considerable efecto en los sistemas de salud, dado que fue
la 11ª causa de ingreso a hospitales de la Secretaría de Salud durante el año 2000
(SSA, 2002), sólo superada por factores de ingreso relacionado con el embarazo,
accidentes, problemas perinatales y algunas de las infecciones o procedimientos
quirúrgicos más comunes. Asimismo, el mayor periodo de hospitalización (6.1
contra 3.5 días en personas con y sin diabetes) y la elevada letalidad de la
enfermedad agrandan el costo de su atención. Además, la diabetes es la causa más
frecuente de ceguera, amputaciones no traumáticas, incapacidad prematura e
insuficiencia renal terminal, en México y en la mayoría de los países (SSA, 2001).
2.1.3. Clasificación de diabetes mellitus
La diabetes se clasifica de acuerdo al cuadro clínico que presenta el paciente,
el cual hace posible identificar y diferenciar el tipo de diabetes, el estado y su
tratamiento. Para el año 2014, la Asociación Americana de Diabetes (ADA, por sus
12

siglas en inglés) mantiene la clasificación de la DM, de acuerdo a su etiología, en 4
categorías establecidas desde el año 2003 (Tabla 1).
Tabla 1: Clasificación etiológica de la diabetes mellitus
I. Diabetes tipo 1
A. Immune mediated
B. Idiopathic
II. Diabetes tipo 2
Varía desde resistencia a insulina con relativa deficiencia de insulina hasta deficiencia en la
secreción de la insulina con resistencia insulínica.
III. Otros tipos específicos
A. Defectos genéticos en la función de las células beta-pancreáticas
1. MODY 3 (Cromosoma 12, HNF-1a)
2. MODY 1 (Cromosoma 20, HNF-4a)
3. MODY 2 (Cromosoma 7, glucokinase)4. Otras formas raras de MODY
5. Diabetes neonatal transitoria y permanente
6. ADN Mitocondrial y otros
B. Defectos genéticos en la acción de la insulina
1. Resistencia a insulina tipo A
2. Leprechaunismo
3. Síndrome Rabson-Mendenhall
4. Diabetes lipoatrófica y otros
C. Enfermedades del páncreas exocrino
1. Pancreatitis
13

2. Trauma por pancreatectomía
3. Neoplasias
4. Fibrosis quística
5. Hemocromatosis
6. Pancreatopatía fibrocalculosa y otros
D. Endocrinopatías
1. Acromegalia
2. Síndrome de Cushing
3. Glucagonoma
4. Feocromocitoma
5. Hipertiroidismo
6. Somatostatinoma
7. Aldosteronoma y otros
E. Inducida por fármacos o químicos
1. Vacor
2. Pentamidina
3. Ácido nicotínico
4. Glucocorticoides
5. Hormonas tiroideas
6. Diazóxido
7. Agonistas beta adrenérgicos
8. Tiazidas
9. Dilantina
10.Interferon gamma y otros
F. Infecciones
14

1. Rubeola congénita
2. Citomegalovirus y otros
G. Formas poco communes de diabetes inmune
1. Síndrome Stiff-man
2. Anticuerpos anti-receptor de la insulina y otros
H. Otros síndromes genéticos asociados con la diabetes
1. Síndrome de Down
2. Síndrome Klinefelter
3. Síndrome de Turner
4. Síndrome Wolfram
5. Ataxia de Friedreich
6. Huntington
7. Síndrome Laurence-Moon-Biedl
8. Distrofia miotónica
9. Porfirias
10. Síndrome Prader-Willi y otros
IV. Diabetes gestacional
ADA, 2014.
2.1.3.1. Diabetes mellitus tipo 2
Esta forma de diabetes, antes llamada diabetes no insulino-dependiente
(DMNID), diabetes tipo II, o diabetes del adulto. Es un término antiguo usado para
los individuos quienes presentan resistencia a la insulina y, por lo general,
deficiencia de insulina. La etiología de la diabetes tipo 2 es compleja y
multifuncional, donde la destrucción autoinmune de las células  no ocurre. Es más
común que el tipo 1, representa aproximadamente al 90% de todos los casos de
diabetes y generalmente se presenta en la edad adulta. Por lo general se trata de
15

personas que no requieren insulina, que no desarrollan cetoacidosis, aun cuando
en ocasiones el tratamiento insulínico puede necesitarse para la corrección de
hiperglucemia que no ha respondido a otros tratamientos. A veces se desarrolla
cetoacidosis, sobre todo cuando se asocian infecciones. Los niveles séricos de
insulina pueden ser normales, elevados o bajos (Cheatham y Khan, 1995; Taniguchi
y col., 2006).
Aun cuando la característica principal sea la hiperglicemia, se han descrito
factores, tanto ambientales como genéticos, para su desarrollo. Entre los factores
ambientales de riesgo tenemos la edad, el tipo de alimentación y el estilo de vida
(Nayaran y col., 2003). Se presenta normalmente en la edad adulta, en tanto que el
80% de los adultos que presentan la enfermedad son clasificados como obesos o
con sobrepeso y la obesidad por sí misma causa cierto grado de resistencia a la
insulina. Los pacientes que no son obesos pueden tener un porcentaje
incrementado de grasa corporal distribuida predominantemente en la región
abdominal. La influencia de estos factores en el desarrollo de la enfermedad se ha
demostrado claramente, ya que cambios en el estilo de vida retrasa, e incluso
previenen, la aparición de la mayoría de las complicaciones asociadas a la diabetes
(ADA, 2014).
2.1.3.2. Complicaciones de la diabetes mellitus tipo 2
Aunque las típicas manifestaciones clínicas de la DM (polifagia, polidipsia y
poliuria, junto con un estado de astenia permanente) son conocidas desde antiguo,
las consecuencias microangiopáticas y macroangiopáticas (Tabla 2), vinculadas
con la diabetes mellitus no han quedado bien establecidas hasta fechas recientes
(Giugliano y col., 2008). Por estas razones, y esencialmente sobre la base de
detallados estudios clínicos y epidemiológicos, la diabetes mellitus ha sido definida
por la American Diabetes Association (ADA) como una enfermedad cardiovascular
de origen metabólico.

Tabla 2. Tipo de complicaciones en la diabetes
Complicación Órgano diana
Microvascular Presente en la retina, en los glomérulos y en los nervios periféricos
(retinopatía, neuropatía periférica, respectivamente).
Macrovasculares Asociados con daños ateroscleróticos, al afectar la irrigación en distintos
tejidos y órganos provocando infarto al miocardio, apoplejía o amputación
de alguna extremidad del paciente (Atkinson y MacLaren, 2001).

Las complicaciones macrovasculares manifestadas clínicamente como
cardiopatía isquémica, insuficiencia cardíaca, la enfermedad vascular cerebral y la
insuficiencia arterial periférica son la principal causa de muerte en el paciente con
diabetes. A pesar de ser las principales causas de mortalidad, su prevalencia está
subestimada debido a que en los certificados de defunción se cataloga a la diabetes
como una causa no relacionada a la muerte o simplemente, la diabetes no había
sido diagnosticada. Junto con la nefropatía son las complicaciones que mayor costo
implica su atención En consecuencia, la diabetes mellitus provoca cardiopatía
isquémica, insuficiencia cardíaca congestiva, arteriosclerosis generalizada con
preferente afectación de las arterias distales de miembros inferiores, trastornos
neurológicos centrales y periféricos, nefropatía tendente al fracaso renal absoluto y
ceguera irreversible (Giugliano y col., 2008).En efecto, las estadísticas indican que
más del 80% de la morbimortalidad provocada por la DM es de tipo cardiovascular,
mientras que menos del 1% de los diabéticos muere en el mundo occidental por
trastornos derivados del descontrol metabólico (Palma, 2007). Aguilar-Salinas y col.,
reportaron en el 2003, tras un estudio con más de 3000 sujetos, las características
de los pacientes con diabetes tipo 2, destacando que las principales causas de
mortalidad en estos pacientes se asocian a riesgos de desarrollar complicaciones
crónicas. La prevalencia más alta está dada por los factores de riesgo
cardiovascular, siguiendo la nefropatía diabética y microalbuminuria.

2.2 Insuficiencia renal crónica en pacientes diabéticos
La enfermedad renal (nefropatia) es más común en personas con diabetes que en
las personas sin diabetes; y la diabetes es una de las principales causas de
enfermedad renal crónica, seguida de la nefropatía hipertensiva o vascular y de las
glomerulonefritis (Amenabar y col., 2002). Ésta se presenta en un tercio de los
pacientes que sufren diabetes tipo 1 y en un 25% de los pacientes que sufre
diabetes tipo 2 (Sánchez y col., 2009; Lei y col., 2014).
La enfermedad renal crónica se define como una disminución de la función renal
expresada por un filtrado glomerular o por un aclaramiento de creatinina estimado
< 60 ml/min/1.73 m2 o como la presencia del daño renal persistente durante al
menos tres meses (Levey y col., 2003). Esta definición, además de establecer un
criterio único que facilita las comparaciones, permite estratificar diferentes estadios
de insuficiencia renal (IR) según el grado de descenso del filtrado glomerular (FG).
Para el diagnóstico de IR, el método referencia es la medida del aclaramiento de
creatinina en orina de 24 horas, pero esta determinación con frecuencia ofrece
resultados muy dispersos asociados fundamentalmente a errores en la recolección
de la orina. Así, en la práctica clínica diaria, la valoración de la función renal se suele
hacer según las cifras de creatinina sérica, aunque hay muchos factores,
especialmente la edad y la masa muscular del sujeto, que pueden influir en su
concentración (Molitch y col., 1980; Rocci y col., 1984).
Algunos estudios demostraron que en IR inicial cuando el filtrado glomerular casi es
normal, una disminución en el filtrado glomerular lleva sólo a un ligero aumento de
la Crs ya que se eleva la secreción proximal tubular de la creatinina. La
consecuencia es que con filtradosglomerulares ya reducidos la creatinina
plasmática se encuentra dentro del marco de lo normal, por lo que una Crs normal
o casi normal no necesariamente implica que el filtrado glomerular se ha mantenido.
Cuando la Crs se eleva por encima de 2 mg/dl, entonces el proceso de secreción
18

se satura y se refleja más el filtrado glomerular (Coresh y col., 2001; Chobanian y
col., 2003).
La medición de Cr en suero se hace comúnmente en equipos automatizados en los
laboratorios de hospitales y clínicas. Sin embargo, las técnicas usuales
sobreestiman su valor real debido a la presencia de cromógenos diferentes de Cr.
Además, la calibración de los estándares para medir Crs no está estandarizada, los
valores pueden variar en cada prueba. Por lo tanto, la evaluación de la Crs como
método aislado para diagnosticar la Crs no es lo suficientemente sensible para
identificar pacientes con ERC.
Dadas las diversas desventajas que presenta la Crs al variar con la edad, con la
masa del sujeto y para ser un indicativo de falla renal temprana, se han buscado
nuevos marcadores que diagnostiquen la IR en etapas tempranas. Una enzima que
se ha utilizado como marcador de daño renal en animales es la enzima antioxidante
glutatión peroxidasa, la cual se encuentra disminuida su actividad en animales con
nefropatía experimental.
2.3 Glutatión Peroxidasas
2.3.1 Generalidades
La enzimas glutatión peroxidasas (GPx) pertenecen a un grupo de familia
filogenéticamente relacionadas, que contienen un centro catalítico conformado por
selenio y cisteína (Margis y col., 2008; Toppo y col., 2008). Existen 8 isoformas de
esta enzima (GPx 1-8).
Este grupo de enzimas catalizan la reducción de peróxido de hidrógeno H2O2 o bien,
hidroperóxidos orgánicos, a agua o sus alcoholes correspondientes utilizando
NADPH como donador de electrones y glutatión (GSH) (Ursini y col., 1995) (Fig.1).

Fig. 1. Mecanismo de acción de la enzima GPx

Existen 8 isoformas de la enzima. GPx1 es ubicua en citosol y en la mitocondria,
GPx2 se expresa en epitelio intestinal, GPx3 en plasma sanguíneo, GPx4 protege
las membranas celulares manteniendo el balance redox, GPx5 es secretada e la
epidermis, GPx6 se localiza en el epitelio olfatorio. GPx7 y GPx8 sólo contienen
cisteína en su centro catalítico y muestran una menor actividad (Kryukov y col.,
2003; Maiorino y col., 2007).

2.3.2. Estructura
El centro catalítico de la enzima está compuesto por una triada formada por
selenocisteína (Sec) o cisteína (Cys), glutamina (Gln) y triptófano (Trp) y más tarde
se descubrió de que se trataba de una tétrada con una asparagina (Asn) adicional
(Epp y col., 1983; Tossato y col., 2008). Esta tétrada es altamente conservada en
todas las isoformas de la enzima a excepción de la GPx8 que contiene serina (Ser)
en lugar de Gln. GPx1, 2, 3, 5 y 6 son homotetrámeros lo cual determina su
especificidad por hidroperóxidos. GPx 4, 7 y 8 son monómeros que permiten
probablemente reaccionar con más complejos de lípidos hidroperóxidos (Toppo y
col., 2009, Flohé y col., 2011).

2.3.3. GPx1 y GPx3
GPx 1 fue la primer selenoproteína identificada. Reacciona con H2O2 y con
hidroperóxidos de bajo peso molecular. Contiene 5 aminoácidos involucrados en la
reactividad con GSH. Se le considera como la enzima que contrarresta los daños
causados por estrés oxidante y su actividad no puede ser reemplazada por otra
selenoproteína y por tanto tiene una función primaria antioxidante in vivo (Haan y
col., 1998; Lubos y col., 2011). GPx3 es similar a GPx1 y se trata de una enzima
extracelular que es liberada al plasma y puede ser fácilmente glicosilada. Fue la
primera descrita que es sintetizada en el túbulo proximal del riñón y
basolateralmente secretada en el plasma (Whitin y col., 2002; Olson y col., 2010).
Esta enzima secretada puede ser transportada por la unión a membranas de otros
20

tejidos. En plasma se encuentra en concentraciones micromolares. Se trata de una
enzima que actúa como un buffer para estabilizar el estado inflamatorio. En modelos
animales y en estudios clínicos, se ha observado que la actividad de esta enzima
disminuye en pacientes diabéticos y nefrópatas (Brigelius-Flohé y Maiorino, 2013).

III. Justificación

Debido que la prevalencia de la DM va en aumento y ésta es la primera causa de
ERC, encontrar marcadores que sean efectivos, de bajo costo, rápidos y sensibles
para contribuir a mejorar el diagnóstico de la ERC resulta primordial para contribuir
a mejorar la detección y tratamiento oportuno de la enfermedad.

IV. Hipótesis
Al disminuir la actividad de la proteína gpx servirá como marcador de insuficiencia
renal en pacientes con diabetes tipo 2.

V. Objetivos

5.1 Objetivos generales
Evaluar la actividad de la proteína gpx para obtener un marcador de falla renal en
pacientes con diabetes tipo 2.

5.2 Objetivos específicos
a. Determinar los marcadores que clasifiquen a la población de estudio en
diabéticos y no diabéticos

b. Evaluar el marcador que determine falla renal en la población de estudio.

c. Analizar la actividad de la gpx en la población de estudio.

d. Evaluar el papel de la gpx como marcador de falla renal.

VI. Metodología
6.1 Diseño del estudio
La presente investigación se realizó en el Hospital Regional Lic. Adolfo López
Mateos (HRLALM) y fue aprobada por el comité de Investigación, Ética y
Bioseguridad con número de registro 232.2014 y fue financiada por CONACYT
(SALUD-2013-201519).
Se estudiaron 30 pacientes diabéticos con insuficiencia renal crónica, 30 pacientes
que solo presenten diabetes tipo 2, con el mismo tiempo de evolución de la
enfermedad y 30 sujetos sin diabetes y sin ERC. A todos los pacientes que se
incluyeron en el estudio se les solicitó que firmaran el consentimiento informado
(Anexo 1) y posteriormente se les realizó una historia clínica y se les aplicó un
cuestionario para recabar la información objeto del estudio (Anexo 2).
Los pacientes neurópatas fueron reclutados en el 3º y 5º piso del HRLALM. Los
sujetos diabéticos y controles sanos se reclutaron en la Clínica de Detección y
Diagnóstico automatizado (CLIDDA), unidad adjunta al HRLALM.

6.1.1. Criterios de Inclusión
a) Grupo control sano (CTRL):
- Hombres o mujeres mayores de 40 años de edad
- Con glicemia en ayunas <90 mg/dl y Hemoglobina glicosilada (HbA1c)
entre 3.5 a 5.7%
- Sin antecedentes de hiperglicemia ni enfermedades renales
- Con creatinina sérica <1.2 mg/dl
b) Grupo control diabéticos (CTRL-DM)
- Hombres o mujeres mayores de 40 años de edad
- Con DM tipo 2 diagnosticada
23

- Con más de 10 años de evolución de la enfermedad
- Con glicemia en ayunas >126 mg/dl y HbA1c >7%
- Sin antecedentes heredofamiliares de ERC
- Con creatinina sérica <1.2 mg/dl
c) neurópatas (DMNEF)
- Hombres o mujeres mayores de 40 años de edad
- Con DM tipo 2 diagnosticada
- Con más de 10 años de evolución de la enfermedad
- Con glicemia en ayunas >126 mg/dl y HbA1c >7%
- Con ERC diagnosticada y diálisis peritoneal
- Con creatinina sérica > 1.6 mg/dl
6.1.2. Criterios de exclusión
a) Grupo control sano:
- Individuos cuyo resultado de creatinina sérica sea > 1.5 mg/dl
- Pacientes con eventos de hiperglicemia transitoria
- Sujetos hipertensos
- Pacientes con historia familiar de ERC
b) Grupo control diabéticos
- Individuos cuyo resultado de creatinina sérica sea > 1.5 mg/dl
- Pacientes con hipertensión no controlada
- Pacientes con historia familiar de ERC
24

c) Nefrópatas
- Pacientes incapaces de firmar consentimiento por estar en estado crítico
6.1.3. Criterios de eliminación
- Pacientes que no presenten el consentimiento firmado
- Pacientes con historial clínico y/o resultados incompletos
- Pacientes que resultedifícil la extracción de sangre

6. 2 Obtención de la muestra
A todos los pacientes se les tomaron dos muestras de sangre por punción venosa
de sangre periférica con tubos vacutainer (Becton Dickinson and Company, Franklin
Lakes, New Jersey, USA). Un tubo sin aditamento para los análisis de química
sanguínea y el otro tubo con EDTA como anticoagulante para la determinación de
biometría hemática, HbA1c y la extracción de plasma para la determinación de la
actividad de GPx.

6. 3 Análisis clínicos
6.3.1 Química Sanguínea
La química sanguínea comprendió 6 determinaciones:
- Glucosa
- Triglicéridos
- Colesterol
- Creatinina
- Urea
- Ácido úrico

Estas mediciones se realizaron en equipo automatizado de cada laboratorio: el
laboratorio central del HRLALM y el laboratorio de CLIDDA.

6.3.2 Hemoglobina glicosilada.
La determinación de HbA1c se realizó en el equipo automatizado Miura 200 (I.S.E.
Guidonia, Roma, Italia) en el laboratorio de Medicina Genómica del HRLALM,
utilizando un kit comercial marca DiaSys (Holzheim Germany). Los resultados se
reportaron en porcentaje.

6.4 Determinación de la enzima GPx
La actividad de la GPx se mide de manera indirecta por una reacción acoplada con
la glutatión reductasa (Lawrence y Burk, 1976). Se basa en la disminución de la
absorbencia a 340 nm debido a la desaparición de NADPH. La GPx al reducir los
hidroperóxidos consume glutatión reducido, el cual es regenerado por la glutatión
reductasa a partir de glutatión oxidado, proceso que consume NADPH (Fig. 2).

Fig. 2. Reacción de reducción de H2O2 a partir de GSH por la enzima GPX. El método
utiliza GSH reductasa y detecta el consumo de NADPH a 340 nm.

La actividad de esta enzima se determinó en el plasma sanguíneo y las muestras
se procesaron en el laboratorio 209, edificio F de la Facultad de Química, UNAM.
Primeramente, se centrifugó la sangre con EDTA a 3000 x g durante 10 min a 4° C,
para obtener el plasma sanguíneo. Por cada paciente se utilizaron 20 µl de plasma
diluido 1:2. La actividad de la enzima se midió al hacer reaccionar 35 µl de plasma
diluido 1:2, con un coctel que contenía 280 µl de GSH 1mM, EDTA 1mM, NADPH
GSH reductasa GPx
H2O2
2 H2O
GSSG
2 GSH NADP+ + H+
NADPH  340 nm
26

0.2 mM y 9 unidades de GSH-reductasa en buffer de fosfatos 50 mM pH 7.5. La
medición de la actividad se inició al hacer reaccionar la mezcla anterior con 35 µl de
H2O2 626 µM. Se realizó una cinética de 3 minutos midiendo el consumo de NADPH
por minuto a 340 nm en un lector de placas multimodal (Synergy HT (Biotek,
Winooski, VA, USA). Una unidad de GPx se definió como la cantidad de enzima que
es capaz de oxidar 1 µmol de NADPH/min.

6.5 Análisis estadísticos
El análisis de los datos fue desarrollado utilizando el programa estadístico STATA
12. Se determinó la distribución de las variables utilizando una prueba de Shapiro-
Wilk y confirmada con la prueba Rank-Sum. Para las variables con distribución
gaussiana se realizó un análisis de varianza para comparar los 3 grupos de estudio,
corregido por una prueba de Bonferroni. Para las variables con distribución no
gaussiana, se utilizó la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis. Los valores de las
variables continuas de variables con distribución gaussiana se presentan como la
media ± desviación estándar y las de distribución no gaussiana se presentan como
la media (rango intercuartílico: 1er y 3er cuartil). Para el análisis de asociación se
realizó una regresión lineal múltiple para estimar el grado de asociación de la
actividad de GPx con la ERC, ajustada por edad, sexo, IMC, presión sistólica,
presión diastólica, estatus de fumador (si o no), diabetes (si, no), glucosa, HbA1c,
triglicéridos y colesterol. Y finalmente, para el análisis de Gpx como marcador
diagnóstico de la ERC se realizó un análisis de Curvas de Operación Características
(curva ROC, por sus siglas en inglés) confrontando GPx y Crs vs ERC. Los gráficos
y correlaciones de Spearman Gpx vs variable estadísticamente significativa de la
regresión lineal, se realizó usando el software GraphPad Prism v. 6.0. (GraphPad
Software, Inc., La Jolla, CA, USA). Una P <0,05 fue considerado significativo.

VII. RESULTADOS
7.1 Características de la población de estudio
Se incluyeron 90 sujetos en el presente estudio, de los cuales 30 fueron sujetos no
diabéticos, no nefrópatas, sin antecedentes heredo-familiares de nefropatía de
alguna etiología y no hipertensos. Estos sujetos se incluyeron en el grupo de
controles (CTRL). Para el grupo de control de la nefropatía diabética, se incluyeron
30 pacientes con más de 10 años de diagnóstico de la enfermedad los cuáles no
presentaba nefropatía diabética y no tenían antecedentes heredo-familiares de
nefropatía. Este grupo se utilizó como control de la nefropatía diabética (DM). Para
el grupo de nefrópatas se reclutaron 30 pacientes con diagnóstico de nefropatía de
etiología diabética y en diálisis peritoneal. En la Tabla 3 se muestran las
características de la población de estudio, que incluyen la edad, el género, el Índice
de Masa Corporal (IMC), la presión arterial sistólica (PAS), la presión arterial
diastólica (PAD) y los años de evolución de diabetes mellitus.

Tabla 3. Características de la población de estudio
NEF-DM CTRL-DM CTRL
Edad 57.96 ± 8.5a 61.46 ± 8.3a 45.47 ± 6.1
Masculino 0.68a,b 0.40 0.41
Femenino 0.32a,b 0.60a 0.49
IMC 29.6 (25.9-32.6) 26.9 (25-30.8) 27.59 (25.3-30.6)
PAS 130 (120-140)a 121 (110-130)a 113.5 (110-120)
PAD 80.2 ± 15.1 78 ± 11.8 73.9 ±8.1
Evolución DM 16.6 (12.5-20) 15 (11-16) -
Los datos se presentan como la Media ± DE para variables con distribución gaussiana y como la
media (rango intercuartílico) para variables no gaussianas. El género se expresa en frecuencia. NEF:
grupo de nefrópatas diabéticos, CTRL-DM: pacientes controles con diabetes mellitus, CTRL: grupo
28

control, IMC: Índice de masa corporal, PAS: presión arterial sistólica y PAD: presión arterial
diastólica. P<0.05: a vs CTRL y b vs CTRL-DM
La edad de los sujetos control fue menor que los sujetos CTRL-DM y NEF,
probablemente debido a que la media de la edad de los sujetos que asisten a
CLIDDA para sus análisis de rutina es menor que la de sujetos con DM y ERC.
Además, resultó complicado reclutar individuos que cumplieran los criterios de
inclusión para los sujetos CTRL fuera de la clínica. Por tanto, la edad se tomó como
variable en los análisis de regresión lineal. De la misma manera, el género se incluyó
en como variable regresora, ya que durante el reclutamiento se captaron más
hombres que mujeres en el grupo NEF. De estos, el 68% fueron hombres y 32%
mujeres. De manera contraria en el grupo de CTRL-DM se encontró mayor
frecuencia de mujeres que hombres (60% vs 40%, respectivamente). Finalmente, y
como es característico de los pacientes nefrópatas, la media de la PAS fue más alta
en los sujetos NEF que los controles con un incremento del 7% vs CTRL-DM y
14.5% vs CTRL. No se observaron cambios significativos en el IMC, la PAD y los
años de evolución de la DM en los sujetos de estudio.
7.2 Parámetros bioquímicos
A todos los pacientes se les determinó la química sanguínea de 6 puntos que
comprendió glucosa, colesterol, triglicéridos, urea, creatinina y ácido úrico. Además,
para clasificar a los controles, se determinó la HbA1c en la población de estudio.
Los resultados se observan en la Tabla 4.
Tabla 4. Parámetros bioquímicos de la población de estudio
NEF-DM CTRL-DM CTRL
Glucosa 158 (126.5-180)a 136.16 (108-153)a 91.8 (86-98)
HbA1c 6.8 (5.8-7.4)a 6.8 (5.9-7.4)a 4.75 (4.4-5.2)
Colesterol 171.3 (141-213)a 174.15 (151-191) 198 (168-219)
Triglicéridos 187.8 (126-236) 171.6 (128-190) 184.6 (132-218)
Urea 70.9 (34-89)a,b 31.5 (25.8-38.8)a 17.36 (17-19)
29

Creatinina5.8 (1.9-6.7) a,b 0.77 (0.6-0.9) a 0.69 (0.6-0.8)
Ácido úrico 6.06 ± 1.4 5.75 ± 0.8 5.2 ± 1.1
Los datos se presentan como la Media ± DE para variables con distribución gaussiana y como la
media (rango intercuartílico) para variables no gaussianas. NEF: grupo de nefrópatas diabéticos,
CTRL-DM: pacientes controles con diabetes mellitus, CTRL: grupo control y HbA1c: hemoglobina
glicosilada. P<0.05: a vs CTRL y b vs CTRL-DM
Las concentraciones de glucosa y los niveles de HbA1c fueron significativamente
mayores en los sujetos con DM, sin mostrar diferencia significativa entre los
nefrópatas y controles diabéticos. La media de la glucosa en ayuno del grupo NEF
es ligeramente superior que el grupo CTRL-DM, sin embargo no lo es a nivel
significativo. Por tanto, los niveles de HbA1c en ambos grupos son mayores en un
43% respecto al grupo CTRL y de la misma manera a la glucosa, no se encontró
diferencia significativa entre los grupos NEF y CTRL-DM. Es interesante resaltar
que la media de las concentraciones de colesterol total en el grupo de NEF fueron
significativamente menores que en los sujetos CTRL debido a que el rango
intercuartílico inferior del grupo NEF fue 20 unidades por abajo del grupo CTRL.
Como es característico de la ERC, los niveles de urea y creatinina en los pacientes
NEF fueron significativamente superiores a los del grupo CTRL y CTRL-DM. En
cuanto a la urea, los valores en el grupo CTRL fueron 4 veces inferiores a NEF y 8
veces menor en cuanto a la creatinina sérica, lo que indica buena selección tanto
de controles como de pacientes. No se observaron cambios significativos en los
niveles de triglicéridos y ácido úrico en los sujetos de estudio.
7.3 Niveles de GPx en la muestra poblacional
La actividad de la enzima GPx extracelular se determinó en el plasma de los
pacientes nefrópatas y controles (Fig. 2). Se puede observar que la actividad de
esta enzima disminuye significativamente en los pacientes nefrópatas respecto a
los controles (NEF: 0.22 ± 0.06; CTRL-DM: 0.34 ± 0.08; CTRL: 0.35 ± 0.1). Incluso,
la mediana de la actividad plasmática de GPx en los pacientes diabéticos es
superior que la del grupo CTRL (0.35 vs 0.32, respectivamente).
30

El análisis de regresión múltiple de la variable “actividad de Gpx” mostró una
asociación significativa con la presencia de nefropatía diabética,
independientemente de la edad, género, IMC, PAS, PAD, los niveles de glucosa y
creatinina (Tabla 5). Esta asociación por sí sola explica un 27% de la variabilidad de
la actividad de GPx. Sin embargo, cuando se incluyen las variables anteriores, en
conjunto explican un 44% de la actividad de GPx. Para resolver problemas de
heteroscedasticidad y lograr un mejor ajuste, la variable Gpx fue transformada a su
escala logarítimica.

Fig 3. Actividad de la enzima GPx en el plasma de la población de estudio. Se presenta la
distribución de los datos con la mediana (línea horizontal) y el rango intercuartílico (barras
de error). P<0.05 a vs CTRL y b vs CTRL-DM.

Tabla 5. Regresión lineal para explicar la variabilidad de la actividad de Gpx
P (modelo) <0.0001
R2 0.44
Variable β Error estándar P Intervalo de confianza (95%)
Edad (años) -0.0047 0.0044 0.298 -.0136279 .004227
Género (M=0, F=1) 0.013 0.07 0.851 -.1267675 .1532771
IMC (kg/m2) 0.0019 0.0074 0.794 -.1267675 .1532771
a,b
31

PAS 0.0005 0.0026 0.827 -.0046589 .0058146
PAD -0.001 0.0036 0.773 -.0083362 .0062223
Glucosa mg/dL 0.0014 0.0007 0.059 -.0000531 .0028612
Creatinina mg/dL 0.006 0.0009 0.517 -.0124547 .0245492
Diabetes (0=no/1=si) -0.03 0.1 0.786 -.2496723 .189649
Nefropatía (0=no/1=si) 0.6281 0.1 <0.0001 -.8698186 -.3863977
La variable de la actividad de Gpx fue transformada a escala logarítmica para lograr un ajuste
adecuado. Las variables Diabetes y Nefropatía se trataron como variables dummy utilizando al grupo
CTRL como referencia.

7.4 Sensibilidad y especificidad de Gpx como marcador
La sensibilidad y especificidad de la actividad de la enzima GPx en suero se
determinó vía curvas de operación características del receptor (Receiver Operating
Characteristic, ROC) (Fig. 4.). El área bajo la curva fue de 0.847, con un error
estándar de ± 0.054 y un intervalo de confianza de 0.74 a 0.95 (P<0.0001). Estos
valores indican que la actividad de GPx tiene un 84.7% de precisión como
diagnóstico de la enfermedad y debido a la significancia, el determinar la actividad
de GPx en los pacientes diabéticos con más de 10 años de la evolución de la
enfermedad posee suficiente habilidad para discriminar entre diabético nefrópata y
no nefrópata.

e
Fig. 4. Curva ROC para proceder diagnóstico en base a la actividad de GPx
expresada como U de GPx/ml plasma.

VIII. DISCUSIONES
La enfermedad renal crónica sigue siendo una de las principales causas de muerte
en nuestro país. El estándar de oro para el diagnóstico y clasificación de la
nefropatía es el análisis cuantitativo de microalbuminuria de 24 horas y la creatinina
sérica. Sin embargo, diversos factores tal como la edad, el ejercicio, la hipertensión,
el control de la glucosa, la alimentación y la carga genética, entre otros, puede
influenciar en el aclaramiento de creatinina y la excreción urinaria de albúmina. Por
otra parte, la variación de volumen de orina recolectado durante las 24 horas puede
afectar el diagnóstico de nefropatía diabética. Por tanto, el uso de marcadores
endógenos para evaluar la función renal resulta importante para el diagnóstico de
nefropatía diabética. Entre estos se han sugerido como biomarcadores a proteínas
33

de bajo peso molecular tal como la Cistatina C, β-microglobulina y el colágeno Tipo
IV en vez de la creatinina sérica.
En el presente estudio se determinó la actividad de GPx en pacientes diabéticos
con diálisis peritoneal y se comparó la actividad contra un grupo control diabético
con el mismo tiempo de evolución de la diabetes sin enfermedad renal. Durante el
reclutamiento se encontró mayor frecuencia de hombres nefrópatas con diálisis
peritoneal que de mujeres, contrario al grupo de controles con DM, en donde se
encontró mayor frecuencia de mujeres que de hombres. Debido a que el
reclutamiento de individuos diabéticos no nefrópatas se realizó en clínicas de
detección y atención al trabajador, se encontraron tales frecuencias debido a que
hay mayor asistencia de mujeres para la prevención y control de la enfermedad en
las clínicas, mientras que hay menor frecuencia de hombres que se controlan y por
tanto, se encontraron más en la sala de nefrología. Así mismo, en las clínicas en
donde se reclutaron los controles, se encontró mayor frecuencia de individuos con
edad promedio de 45 años que corresponde a la edad promedio de productividad
laboral. Sin embargo, ni la edad ni el género en conjunto mostraron una asociación
con la actividad de GPx.
En el año 2012, la ENSANUT reportó que el 70% de los individuos mexicanos se
encuentra en cifras de sobrepeso y obesidad. En el presente estudio se encontró
que los tres grupos se encuentran en rangos de sobrepeso y no se encontraron
diferencias significativas en los grupos de estudio. Sin embargo, el rango
intercuartílico superior del IMC en el grupo de nefrópatas es mayor, lo que puede
reflejarse en la hipertensión y por tanto en la presencia de nefropatía, debido a que
las personas que presentan obesidad tienen un mayor riesgo de ser hipertensos en
una magnitud de 2.6 veces.
Por otro lado, la prevalencia nacional de proteinuria en nuestro país e de 9.2%, de
estos, el 40% tiene hipertensión arterial sistémica, por lo que la hipertensión en un
factor de riesgo importante en el desarrollo de nefropatías. En la muestra
poblacional observamos que los individuos diabéticos y con nefropatía diabética
muestran presión arterial sistólica superiora la de los individuos controles, no
34

habiendo así cambios en la presión arterial diastólica. La presión arterial sistólica y
diastólica no se mostraron asociadas a la actividad de GPx.
En la presente investigación se encontró que la GPx está disminuida en los
pacientes con nefropatía de etiología diabética. Esta disminución no se observó en
los pacientes con diabetes con el mismo tiempo de evolución de la enfermedad, lo
cual sugiere que este efecto puede ser causado principalmente por un mecanismo
involucrado durante en desarrollo de la nefropatía y no por la hiperglicemia. El
análisis de regresión lineal para la actividad de GPx como variable dependiente
mostró una asociación significativa sólo con la presencia de nefropatía. Además al
realizar la curva ROC se observó un alto porcentaje de precisión de la enzima como
marcador diagnóstico de la nefropatía diabética (84.7%). Por tanto, los resultados
nos sugieren que la actividad de la enzima Gpx en plasma puede ser un buen
proceder diagnóstico de la enfermedad. Esto se debe a que en la nefropatía
disminuye la secreción de la enzima Gpx, la cual es sintetizada en el túbulo proximal
del riñón y basolateralmente secretada en el plasma (Whitin y col., 2002; Olson y
col., 2010).
Yoshimura y col., (1996), reportaron que la actividad de Gpx en plasma depende en
gran parte de la función renal. Por medio de análisis de inmunoblot, demostraron
que la enzima GPx no es detectable en pacientes con baja actividad de Gpx.
Mientras que la actividad se encuentra disminuida en un 45% entre hombres y
mujeres japoneses. Sin embargo, la actividad de GPx en eritrocitos no mostró
cambios significativos en tales pacientes. Más tarde, estas conclusiones fueron
confirmadas en pacientes egipcios. Por tanto, la actividad de GPx en plasma puede
ser un marcador de daño renal.

IX. CONCLUSIÓN
Los resultados sugieren que la determinación de la actividad de la enzima Glutatión
Peroxidasa puede ser utilizada como un marcador en el desarrollo de ERC en
pacientes con diabetes, ya que la disminución de la actividad se asoció únicamente
con la presencia de nefropatía.
Además, los resultados de las curvas ROC demostraron que la enzima Gpx es un
buen marcador para el diagnóstico de la ERC con un porcentaje de precisión de
84.7%.

X. LIMITACIONES DEL ESTUDIO Y PERSPECTIVAS
Una de las limitaciones del estudio es que no se contó con los valores de proteína,
creatinina en orina y velocidad de filtrado glomerular para algunos pacientes CTRL
y CTRL-DM. Se sugiere que el escalar este proyecto en una muestra poblacional
más grande y con las determinaciones de los estándares de oro para el diagnóstico
de ERC permitirán comparar y validar la prueba de una manera más precisa.

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