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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO. FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA ESPECIALIZACIÓN EN ORTODONCIA. Tratamiento de la superficie del esmalte dental humano con pastas dentales para dientes sensibles, barnices de flúor y su papel en la remineralización, TESIS PARA OBTENER EL GRADO DE: ESPECIALISTA EN ORTODONCIA. PRESENTA: GRISEL ARISBE CALETE AZCÁRATE Director de tesis: Dr. José Reyes Gasga 2015 Margarita Texto escrito a máquina Los Reyes, Iztacala, Tlalnepantla Margarita Texto escrito a máquina , Edo. de México Margarita Texto escrito a máquina UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. DEDICATORIAS A mis padres por creer en mí, por su amor tan grande y apoyo incondicional en todos los aspectos, para hacer mis sueños y metas posibles. A mi hermana por brindarme su amor y confianza al acompañarme en este viaje. AGRADECIMIENTOS. Quiero hacer el más sincero agradecimiento a mis profesores de la especialidad, por el gusto y la pasión, la dedicación y el empeño con el que transmiten su conocimiento y enseñanzas y, por haber sembrado en mí la semilla del conocimiento. A todos ustedes, mil gracias. ESPO Rossana Senties ESPO Patricia Dettmer ESPO Mario Onuma Mtro. Víctor Vásquez Mtro. René Rivera ESP O. Wilfrido Sánchez Navarro ESPO Arcadio Alvarado ESPO Alejandro Marcuschamer ESPO Mario Katagiri Dr. Eduardo Llamosas ESPO Vidal Saldaña ESPO Federico Cañas. Agradezco al Dr. José Reyes Gasga por el entusiasmo, paciencia y dedicación al enseñarme la otra cara de la odontología que también es bella y apasionada, la investigación. A Pedro Mexia por brindarme sus conocimientos y apoyo tan importante en la preparación de la muestra, con tanto gusto y calidez con que realiza su trabajo. AGRADECIMIENTOS • José Reyes Gasga • Patricia Dettmer Mendoza • Pedro Mexia Hernández • Samuel Tehuacanero • Iván Puente Lee • Rebeca Trejo • Jacqueline Cañetas • Mario Monroy • Carlos Magaña • Manuel Aguilar Franco Proyecto DGAPA-UNAM-IN106713. Índice Resumen 1 Definición del problema 2 Objetivo 2 Hipótesis 3 Justificación 3 CAPITULO I Esmalte 1.1. Estructura del Esmalte 4 1.2 Composición química del Esmalte 6 1.3. Disolución del esmalte 7 CAPITULO II Mecanismos de acción de las pastas dentales para sensibilidad y los barnices de flúor 2.1. Definición de sensibilidad dental 9 2.2. Pastas dentales para sensibilidad 12 2.3. Pruebas Científicas 13 2.4. Barnices 16 CAPITULO III Descripción de técnicas 3.1. Microscopio Electrónico de Barrido 20 3.2. Espectroscopia de rayos X de energía dispersiva (EDS O EDX) 22 3.3. Micro-Durómetro Vickers 22 CAPITULO IV Metodología 25 CAPITULO V Resultados 5.1 El pH y los elementos detectados en las pastas y barnices 33 5.2 Grupo control 38 Microscopia de Luz Microscopia Electrónica de Barrido Análisis EDS 5.3 Desmineralización 39 Microscopia de Luz Microscopia Electrónica de Barrido Análisis EDS 5.4 Muestras tratadas con pastas de dientes 43 Microscopia de Luz Microscopia Electrónica de Barrido Análisis EDS Dureza Vickers 5.5 Muestras tratadas con bernices de flúor 52 Microscopia Electrónica de Barrido Microscopia de Luz dos semanas después de aplicar el barniz Microscopia Electrónica de Barrido, dos semanas después de aplicar el barniz Análisis EDS Dureza Vickers CAPITULO VI Discusión 6.1 Sobre el pH y los elementos detectados en las pastas y barnices 65 6.2 Grupo control 65 6.3. Desmineralización 66 6.4. Muestras tratadas con pastas de dientes 66 6.5. Muestras tratadas con bernices de flúor 68 CONCLUSIONES 71 BIBLIOGRAFÍA 72 1 RESUMEN En el presente trabajo se realiza la comparación morfológica, química y de dureza del esmalte dental humano sano, el desmineralizado, el tratado con pasta dental para dientes sensibles y el tratado con barniz de flúor. La metodología abarca la exposición de órganos dentales a las pastas dentales para dientes sensibles y a los barnices de flúor. El esmalte desmineralizado fue tratado con pasta dental para dientes sensibles con NITRATO DE POTASIO de la marca Pro-esmalte, pasta dental con CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne original, y pasta dental con ARGININA de la marca Colgate Sensitive Pro-Alivio. También se le aplicó una capa de barniz de FLORURO DE SODIO al 5 % de la marca Ultra Thin Waterpik, con barniz de FLÚOR al 1% de la marca Flúor Protector de Ivoclar Vivadent, y con barniz de FLORURO DE SODIO al 5% de la marca Duraphat-Colgate. El análisis estructural y químico se realizó usando las técnicas de Microscopía de luz, Microscopía electrónica de barrido, el análisis químico por la técnica de rayos X característicos MEB-EDX y la medida de dureza Vickers. Dentro del procedimiento experimental realizado (i.e. sin estar en contacto con la saliva), los resultados indicaron que no todas las pastas dentales para sensibilidad y los barnices de flúor, ayudan a la remineralización del esmalte, pero ninguno, traspasa al esmalte para llegar a dentina. En el caso de los barnices de flúor, éstos cambian la morfología y el color del esmalte, así como su dureza. El cambio de composición química se realiza a nivel superficial. 2 DEFINICIÓN DEL PROBLEMA. La desmineralización del esmalte es uno de los problemas a los que se enfrenta el ortodoncista, pues la colocación de aparatología fija ortodóntica dificulta la limpieza de la cavidad bucal. Además, sí el paciente no colabora con sus hábitos de higiene, como sucede generalmente, y éste, es susceptible a la desmineralización, el daño puede ser grave e irreversible. Esto es lo que hace prioritaria la búsqueda de medidas para su prevención y control. En ciertos casos, la desmineralización del esmalte llega a causar sensibilidad dental. En el mercado existen diversas marcas comerciales de pastas dentales que ayudan a combatir el problema de la sensibilidad pero solo cuando la dentina se encuentra expuesta. Sin embargo, al cepillar los dientes, es inevitable que la pasta tenga contacto con el esmalte. Sabemos que las pastas ayudan a la dentina a combatir el problema de la sensibilidad, pero ¿qué pasa con el esmalte al tener contacto con estas pastas?, ¿las pastas para sensibilidad nos ayudan a combatir el problema de la desmineralización? Por otro lado, es común que el especialista recurra a la aplicación de flúor para prevenir o detener la desmineralización y eliminar la sensibilidad dental, pero realmente, ¿Los barnices de flúor nos ayudan a combatir la desmineralización del esmalte? Estas son las preguntas que se intentan responder en este trabajo de tesis. OBJETIVO. Comparar la morfología, la química y la dureza del esmalte dental humano sano,el desmineralizado y el tratado con pasta dental para dientes sensibles y el tratado con barniz de flúor. Establecer el papel de estas sustancias en la remineralización del esmalte 3 HIPOTESIS. La hipótesis a comprobar en el presente trabajo de tesis es la siguiente: H: Las pastas dentales para dientes sensibles y los barnices de flúor, ayudan a la remineralización del esmalte. JUSTIFICACIÓN. En comparación con pacientes de otras ramas odontológicas, los pacientes de ortodoncia son mucho más vulnerables a la desmineralización del esmalte, por la falta de higiene y el uso de aparatos fijos que permiten la acumulación prolongada de la placa bacteriana en la superficie del esmalte. En algunos casos la desmineralización causa sensibilidad dental y es común que el especialista recomiende el uso de pastas para sensibilidad, las cuales funcionan cuando la dentina está expuesta. Sin embargo al cepillarse, la pasta entra en contacto con el esmalte y otros tejidos de la cavidad bucal, y no se sabe que efecto causan las pastas para sensibilidad sobre la superficie del esmalte. Por otro lado, el barniz de flúor está indicado para proteger la superficie del esmalte de la desmineralización y combatir la sensibilidad dental, pero realmente no se sabe que efecto causan en la superficie del esmalte este tipo de barnices. Por lo tanto, para el ortodoncista es una importante tarea minimizar la ocurrencia de desmineralización del esmalte. En este estudio se pondrán a prueba el uso de pastas dentales para sensibilidad con diferentes componentes cada una de ellas y, el uso de flúor de diferentes marcas comerciales, para saber si estos elementos pueden ser auxiliares en el tratamiento de ortodoncia y en la remineralización del esmalte. 4 CAPITULO I ESMALTE 1.1. Estructura del Esmalte. El esmalte cubre y da forma al exterior de la corona dentaria. Tiene un aspecto vítreo, su superficie es brillante y traslúcida, su color depende de la dentina que lo soporta, su grosor es variable sobre la superficie completa de la corona del diente (Figura I.1 A). Es el tejido más duro del organismo y eso se debe a que es la estructura más mineralizada de todas cuantas formen el organismo1. La unidad estructural básica del esmalte es el prisma. El prisma del esmalte atraviesa homogéneamente todo el espesor del esmalte, desde la línea amelo- dentinaria, hasta la superficie de la corona (Figura I.1 B). Los prismas del esmalte se agrupan en haces llamados fascículos, los cuales no siempre son paralelos y no siguen la misma orientación. El entrecruzamiento de estos haces dan apariencia de bandas claras y obscuras, según la orientación que tienen y reciben el nombre de Bandas de Hunter1 (figura I.1. C). El prisma se compone de los cristales compactos de apatita y su orientación es perpendicular a la superficie externa. En la mayoría de las áreas del esmalte humano, muestra un patrón en ojo de cerradura, lo que hace que los prismas al ser observados en un corte transversal, se dividan en cabeza y cola2 (Figura 1.2) El espacio entre los prismas y los cristales que los conforman está lleno de material orgánico, principalmente proteico, y se le conoce como sustancia interprismática o vaina. La calcificación de la matriz orgánica se realiza de afuera hacia adentro, en capas que van superponiéndose, alternando periodos de mineralización y periodos de descanso. Estos periodos forman líneas o estrías sobre la superficie del esmalte, y se les conoce como estrías de Retziws1 (Figura 1.3) 5 Figura I.1. A) Corte sagital de la corona dental. Se observa el esmalte, la dentina y la línea amelocementaria. Se puede apreciar el grosor variable del esmalte, la orientación de los prismas y las bandas de Hunter. B) Orientación de los prismas. C) Las zonas claras y obscuras de las Bandas de Hunter. Figura I.2. A) Imagen de MEB de la superficie del esmalte dental humano, se observa la forma de herradura de los prismas en donde se aprecian las cabezas y las colas. B) Se muestra la forma y orientación del prisma. 6 Figura I.3. Imagen de cara vestibular de Primer premolar superior. Se observan las estrías de Retziws en la superficie del esmalte. 1.2 Composición química del Esmalte. El esmalte dental humano está compuesto de 96% de materia inorgánica y 4% de material orgánico y agua. La hidroxiapatita (Ca10 (PO4)6. 2(OH)) es un fosfato de calcio cristalino, y es el principal componente inorgánico del esmalte. La hidroxiapatita no es totalmente pura, contiene varios elementos o impurezas que en ocasiones son benéficas como el flúor. Como el esmalte maduro está expuesto a un ambiente de saliva sobresaturada con calcio y fosfato, contiene iones diferentes a un esmalte recién erupcionado, por tanto no es raro encontrar diferente composición en la superficie y en el interior del esmalte2, 3. El esmalte de la superficie está más mineralizado que el esmalte interno y tiene menor contenido de agua, esto se debe a la exposición al ambiente de saliva sobresaturada en calcio y fosfato. 7 Las apatitas biológicas se caracterizan por su relación calcio/fosforo. Para la hidroxiapatita pura la relación es de 1.67, igual que para la fluorapatita3. Constituyentes Análisis. Porcentaje en peso. Ca 33.6 – 39.4 P 16.1 – 18.0 CO2 1.95 - 3.66 Na 0.25 – 0-90 Mg 0.25 – 0.56 Cl 0.19 – 0.30 K 0.05 – 0.30 Figura I.4 Tabla de la composición química de la superficie del esmalte dental humano. 1.3. Disolución del esmalte. Al estar el esmalte dental en el medio ambiente bucal y en contacto permanente con la saliva, se produce un intercambio continuo entre los iones que los componen. Cuando este equilibrio se rompe se presenta generalmente un proceso de desmineralización del esmalte. La capa más externa del esmalte está protegida por un alto contenido de fluoruro y por una película de superficie orgánica procedente de la saliva, sin embargo, una vez que es traspasada esta capa, los iones y las moléculas de ácido están en libertad de reaccionar con la estructura del esmalte y disolverla. Puesto que el esmalte humano carece de poder biológico de regeneración, estudios IN VITRO indican que la saliva tiene la capacidad de remineralizar la superficie del esmalte descalcificado. La secuencia de desmineralización del esmalte comienza por el contacto de un ácido en su superficie, ocasionando la pérdida de materia orgánica soluble. 8 Posteriormente, el ácido penetra en los cristales de hidroxiapatita atacando el centro de los prismas y, produciendo perforaciones en la parte central. Estos espacios pueden ser tan grandes, que permiten la invasión por bacterias y por lo tanto la aparición de caries. Los cambios morfológicos van acompañados de alteraciones en la composición química de los tejidos afectados. Los cambios más señalados asociados con la desmineralización son una disminución de los iones de carbonato y magnesio y un aumento en el contenido de floruro. La caries del esmalte es una consecuencia de la disolución de éste. El proceso carioso debe incluir la difusión del reactor (ácido) hacia el sitio de reacción (esmalte), seguida por la reacción (disolución) y por la difusión de los productos de la reacción lejos del sitio en que se formaron. Un factor que determina la disolución del esmalte es la solubilidad de la hidroxiapatita, otro factor es la velocidad de disolución la cual será controlada por la reacción más lenta. La teoría de Bronsted – Lowry establece que un ácido es una sustancia que tiende a perder un protón (H-) en una reacción química, es decir es un donador de protones. Una base es un receptor de protones. La disolución del esmalte dental en un ataque ácido depende de la reacción entre el ión hidrógeno (H+) y los materiales inorgánicos del esmalte2.9 CAPITULO II MECANISMOS DE ACCIÓN DE LAS PASTAS DENTALES PARA SENSIBILIDAD Y LOS BARNICES DE FLÚOR. En algunos casos, la desmineralización del esmalte dental produce sensibilidad, y es común que el clínico recomiende pastas exclusivas para combatir este problema o aplique barnices de flúor. 2.1. Definición de sensibilidad dental. Se define como una respuesta exagerada a estímulos que usualmente no causan respuesta en la salud dental4. Las respuestas se presentan sobre todo ante bebidas y alimentos fríos y/o calientes, ácidos y/o dulces5. Las posibles causas de la sensibilidad dental son: Caries dental Fractura dental Obturaciones desgastadas Enfermedad gingival Fractura de esmalte. Es muy frecuente que la sensibilidad dental se presenta por exposición de la dentina, denominada Hipersensibilidad dentinal. La hipersensibilidad dentinal es una condición de dolor agudo que ocurre cuando la raíz del diente comienza a exponerse por recesión gingival (Figura II.1 A). La recesión gingival puede ocurrir naturalmente, pero a menudo es causada por sobre agresión del cepillado dental, traumatismo oclusal o, por enfermedad periodontal6. 10 Otra causa es el Bruxismo, el apretamiento de dientes durante todo el día, o el rechinido nocturno, desgasta al esmalte exponiendo a la dentina (Figura II.1B, C). Figura II.1. A) Dentina expuesta por recesión gingival. B) Desgaste coronal por bruxismo. C) Perdida de la anatomía coronal de los dientes anteriores superiores por el excesivo desgaste que expone a la dentina. La teoría más aceptada sobre cómo se origina la sensibilidad dentinal, es la teoría hidrodinámica y fue desarrollada en los años 60’s por Brannstrom y colaboradores (Citados por Bühker y Walters) 4,7. Ésta indica que cuando los fluidos que se encuentran dentro de los túbulos dentinarios son sujetos a cambios de temperatura o cambios físicos osmóticos, los fluidos cambian o se mueven estimulando a los nervios receptores sensitivos de presión, que guían la transmisión del estímulo hacia el tejido pulpar (Figura II.2). La base de esta teoría es que los fluidos que llenan los túbulos dentinarios se encuentran abiertos a la cavidad oral en la superficie de la dentina, así como dentro de la pulpa.4,7 11 Las pastas dentales para sensibilidad que se encuentran comúnmente en el mercado, ayudan a combatir la sensibilidad por exposición de la dentina. Figura II.2. A) Exposición de la dentina a los estímulos que causan el movimiento de los fluidos en el interior de los túbulos dentinarios, excitando a los nervios receptores. B) Nervios sensitivos del tejido pulpar en el interior de los dientes ocasionando dolor punzante. Los ingredientes activos más comunes en las pastas dentales para sensibilidad son: Cloruro de Estroncio Nitrato potásico Arginina Hay dos teorías principales sobre cómo tratar la sensibilidad dental: 1. La interferencia de la transmisión nerviosa a través de las sales de potasio. 2. La oclusión de los túbulos dentinarios6. 12 2.2. Pastas dentales para sensibilidad Colgate Sensitive Pro-Alivio. Ingrediente activo: Arginina C6H14N4O2. Es un aminoácido que contiene la saliva y tiene propiedades protectoras. Las últimas investigaciones sugieren que la Arginina, cargada positivamente en un pH fisiológico, se une a la superficie dentinal cargada negativamente y ayuda a atraer una capa rica en calcio a la superficie de la dentina hacia los túbulos dentinarios para obturarlos y sellarlos (Figura II.3). La Arginina desencadena la oclusión de los túbulos dentinarios, la cual se mantiene intacta inclusive después de la exposición a ácidos, previniendo la transmisión de los estímulos productores de dolor8. Figura II.3. Imagen obtenida de la página Web de Colgate en donde muestra la acción se Sensitive-Proalivio. A) Acercamiento de los túbulos dentinarios abiertos. B) Túbulos dentinarios ocluidos después de usar la pasta, lo que impide la transmisión de estímulos. C) Interior de los túbulos dentinarios y su conexión con el tejido pulpar. Sensodyne Original Cloruro de Estroncio Cl2 Sr6H2O. Bloquea los túbulos dentinarios parcialmente al saturarlos de estroncio y estaño impidiendo que reciban estímulos del exterior. Al ser metales insolubles, permiten que su efecto sea prolongado. Si el uso diario es interrumpido, la sensibilidad puede reaparecer9, 10 13 Pro-Esmalte, Crest Sensitive, Dientes Sensibles. Nitrato de Potasio KNO3. Interrumpe la transmisión de impulsos eléctricos a los nervios dentales evitando el dolor. Las pastas y dentífricos contienen KNO3 al 5%. Se recomienda usar 2 veces por día durante 4 MEBanas para observar resultados10, 11. Figura II.4. A) Encía retraída que expone a la dentina de la superficie radicular. B) Simulación de los estímulos dolorosos al llegar al tejido pulpar. 2.3. Pruebas Científicas. Se ha demostrado que la arginina y el carbonato de calcio se encuentran naturalmente en la saliva y juntos trabajan en el mecanismo natural de oclusión por depósito de minerales en la dentina, reteniendo calcio y fosfato dentro de los túbulos dentinarios y fuera de ellos, forma una capa protectora en la superficie de la dentina. Es por eso que la arginina al 8% y el carbonato de calcio son agregados a las pastas dentales y dentífricos para combatir la sensibilidad. Estudios basados en la microscopía electrónica como Microscopía de Barrido de Laser Confocal (CLSM), Microscopía Electrónica de Barrido (MEB), Microscopía de Fuerza Atómica (AFM), Energía Dispersa por Rayos X (EDX) y Espectroscopía de Electrones para Análisis Químico (ESCA), han demostrado que la arginina junto con el carbonato de calcio, son altamente eficientes en la oclusión de túbulos dentinarios. También se demostró que trabajan efectivamente estos componentes 14 en las pastas para profilaxis, cuando se les añade fluoruro y sílice. Estas pruebas fueron in vitro, realizadas en molares de dientes humanos con dentina expuesta, en donde se abrieron los túbulos dentinarios con la grabación de ácido cítrico al 1% durante 20 segundos. Posteriormente, a cada muestra se le asignó una sustancia con las que fueron tratadas y analizadas, demostrando así, que la arginina es un tratamiento eficaz contra la sensibilidad dentinal6 (Figura II.5). Figura II.5. Imagen del MEB de la superficie de la dentina antes y después de ser tratada con pasta profiláctica desensibilizante con arginina al 8% y carbonato de calcio (Imagen tomada de la bibliografía 6). A) 2000X magnificaciones). B) 10,000X magnificaciones. El Cloruro de Estroncio ha demostrado la disminución de la sensibilidad dentinal al usar la pasta durante el cepillado dental dos veces por día durante cuatro semanas. Las sales de estroncio y estaño trabajan por precipitación insoluble de los metales en la superficie de la dentina, ocluyendo parcialmente los túbulos dentinarios. Las sales de Estroncio tienen la desventaja de la incompatibilidad con el fluoruro y generalmente no se recomienda las pastas de dientes a base de estroncio para uso diario. 15 El estroncio generalmente se le relaciona con un mal sabor de boca y con la pigmentación de los dientes.6 El Nitrato de Potasio trabaja basándose en la teoría hidrodinámica. Los iones de Potasio bloquean la sinapsis entre las células nerviosas, reduciendo la excitación nerviosa que se asocia al dolor. Algunas investigaciones refieren que el uso de pastas dentales a base de nitrato de potasio usadas dos veces por día durante cuatro MEBanas, no presenta ningún cambio en la superficie del diente. Sin embargo Knight y colaboradores (citado por Walters)7, reportaron que varios mecanismos y procedimientos químicos tienen la capacidad de obliterar los túbulos dentinarios. Este Autor comprobó mediante la observación basadaen la microscopia electrónica de barrido que el KNO3 al 5% reduce el diámetro de los túbulos dentinarios mediante la obliteración y el flujo de los fluidos dentro de los túbulos disminuye, reduciendo la hipersensibilidad dentinal7. La mayoría de las investigaciones que evalúan la eficiencia del nitrato de potasio como tratamiento para la sensibilidad dental, se basan en el análisis clínico, es decir, los resultados se obtienen por medición táctil, estimulación térmica y estimulación al chorro de aire, así como la valoración subjetiva del dolor durante cada día de vida de los pacientes. La medición subjetiva se basa en un cuestionario en donde el paciente reporta el grado de dolor que percibe al ingerir alimentos fríos o caliente, bebidas, al aire frio, al cepillarse los dientes en su vida rutinaria. La escala va del 0 al 10, en donde 0 representa nada de dolor y el 10 es el nivel máximo de dolor. Algunos estudios utilizan la prueba de Yeaple para la medición objetiva a los estímulos. Es un aparato electrónico que mide el nivel del impulso eléctrico ante cada estimulo7. 16 Karim y Gillam en enero del 2013 (citado por Türkkahraman),12 publicaron un estudio comparativo en donde se dieron a la tarea de investigar la eficacia de los ingredientes activos para tratar la sensibilidad, específicamente cloruro de estroncio y nitrato de potasio, basándose en una revisión hemerográfica de 390 artículos. Ellos concluyeron que las pastas dentales a base de estroncio y potasio han demostrado y probado clínicamente una reducción en los síntomas de la sensibilidad dentinal, pero no pudieron comprobar cuál es el mejor tratamiento para la sensibilidad12. 2.4. Barnices Barniz de Flúor. Los barnices están indicados para combatir la sensibilidad dental, prevención y tratamiento de lesiones cariosas, defectos en el esmalte como desmineralización y fisuras, entre otras. A continuación se menciona el mecanismo de acción de algunas marcas comerciales que fueron seleccionadas para este trabajo. Barniz de flúor Duraphat Colgate. Floruro de Sodio al 5%. NaF Está indicado en: Tratamiento de raíces expuestas y sensibilidad dentinaria. Prevención y tratamiento de lesiones cariosas en niños adolescentes y adultos. Restauración de abrasiones o depresiones por cepillado, tratamiento de fisuras y desmineralización. Protección después de la remoción de puentes, brackets y otros dispositivos. Protección contra caries secundaria alrededor de brackets, coronas y puentes. 17 Mecanismo de acción El barniz al aplicarse, forma una capa de partículas globulares ricas en floruro de calcio, la cual se acumula en la superficie de los dientes formando una capa densa que obtura los túbulos dentinarios (Figura II.6 A, B, -1). Los glóbulos una vez que se adhieren a la superficie dentaria, se rompen y liberan iones de floruro cálcico favoreciendo a la remineralización (Figura II.6 -2). Cuando la lesión es cubierta con fluorapatita, el floruro de calcio restante hace un depósito que se libera gradualmente y controla el pH del ataque ácido subsecuente, proporcionando meses de protección activa 14, 26, 27, 28 (Figura II.6 -3) Figura II.6. Imágenes tomadas de la página de internet de Colgate. A) Imagen del barniz Duraphat después de aplicarse en una superficie. B) Amplificación de A. 1) Representación de las partículas globulares que se adhieren a la superficie. 2) Representación de la liberación de flúor proveniente de las partículas globulares, en donde el flúor penetra en el defecto. 3) Representación de la obturación del defecto con flúor, manteniendo un reservorio del mismo. 18 Fluor Protector. Flúor al 1% Es una laca protectora con fluoruro. Dadas sus propiedades, la laca se distribuye con facilidad y fluye rápidamente a las estructuras superficiales complejas. Se seca con rapidez y muestra una adhesión excelente a los dientes. El protector de flúor es apto para el tratamiento de niños, adolescentes y adultos. La acción protectora del protector de flúor se basa en los siguientes factores: inhibición de la desmineralización, estimulación de la remineralización, incorporación de fluoruro a las capas inferiores del esmalte, reparación de lesiones de caries incipientes. Indicaciones Hipersensibilidad: Defensa contra los estímulos externos en los cuellos expuestos Protección superior contra caries y la erosión Ventajas Concentración de fluoruro al 0,1 % Tratamiento mejorado de áreas problemáticas difíciles de alcanzar Laca clara, sin color y de secado rápido Resultados elevadamente estéticos15. Waterpik UltraThin Barniz de fluoruro de sodio al 5%. NaF Esta indicado en sensibilidad dentinal y cavidades. Sus características como alta viscosidad, incoloro, sabor agradable, secado rápido y endurecimiento al contacto con la saliva, fácil aplicación e instructivo simple. Lo 19 colocan por encima de 3M ESPE Omni Vanish 5 % NaF Varnish en un estudio realizado por Waterpik UltraThin16. La marca comercial de waterpik ultrathin no da a conocer el mecanismo de acción del producto ni los beneficios que obtiene el paciente al aplicar el producto. 20 CAPITULO III DESCRIPCIÓN DE TÉCNICAS. 3.1. Microscopio Electrónico de Barrido. En el Microscopio electrónico de barrido (MEB) o Scanning Electron Microscope (SEM), un haz de electrones forma una imagen de la muestra en observación. Su funcionamiento se rige por una gran cantidad de electrones que viajan a una gran velocidad dentro de un alto vacio en el interior de una columna cilíndrica hueca que se encuentra al alto vacío. El vacío es requerido para evitar la colisión entre los electrones y las moléculas de aire2. Los componentes básicos del MEB son: el sistema de lentes, el cañón de electrones, el detector de electrones, el tubo de rayos catódicos y de registro, y la electrónica asociada con ellos (Figura III.2). Dentro de la columna cilíndrica, en la parte superior, se encuentra el cañón electrónico, constituido por un filamento de tungsteno. Este filamento, se encarga de emitir electrones por termoemisión. Los electrones son acelerados por el alto voltaje aplicado entre el ánodo y el filamento. La base física de la formación de una imagen en el microscopio electrónico reside en la dispersión de los electrones al interaccionar con la muestra. Cuando la muestra se coloca en el trayecto del haz de electrones, estos producen diferentes tipos de señales (Figura III.1). Estas señales son: electrones retro-dispersados, electrones secundarios, electrones absorbidos, electrones Auger, y rayos X característicos. Estas señales llevan información sobre la estructura y composición química de la muestra en observación.2, 3 Los electrones que se usan como la base para la Microscopía de barrido y el microanálisis químico son los secundarios y retro dispersados. Estos electrones son recolectados por un dispositivo electrónico que se encuentra conectado a un monitor de televisión. Cuanto mayor sea el número de electrones contados por el dispositivo, mayor será el brillo del píxel en la pantalla. A medida que el haz de electrones barre la muestra, se presenta la imagen en el monitor (Figura III.2) 21 Figura III.1. Diagrama de la interacción entre el haz y la muestra, y las diferentes señales que se producen. Figura III.2 Diagrama del microscopio electrónico de barrido MEB 22 3.2. Espectroscopia de rayos X de energía dispersiva (EDX O EDX). El análisis químico de un material es obtenido en microscopios electrónicos de barrido a través del sistema MEB-EDX (Figura III.3) si éste cuenta con el detector que permite colectar y analizar los rayos X característicos que se producen al interaccionar el haz electrónico con la muestra.Los rayos X característicos se producen de la siguiente manera. En reposo, un átomo dentro de la muestra se encuentra en un estado fundamental (o no excitado) y los electrones se encuentran en niveles discretos de energía o capas de electrones ligados al núcleo. Cuando el haz electrónico interacciona con la muestra bajo estudio, se expulsan los electrones de los átomos de la muestra. Así el átomo queda en un estado excitado. Para regresar a su estado base, el espacio que ocupaba ese electrón queda libre, un electrón de una capa exterior, de mayor energía llena ese espacio, y la diferencia de energía genera un rayo-X. Ya que cada elemento tiene una estructura atómica única y los rayos X que son característicos de la estructura atómica de un elemento, la muestra se identifican de forma única. El número y la energía de los rayos X emitidos son medidos por un espectrómetro de energía dispersiva. La energía de los rayos X son característicos permite medir la composición elemental de la muestra. 3.3. Micro-Durómetro Vickers La prueba de dureza es ampliamente usada para evaluar las propiedades de los materiales como la plasticidad y la elasticidad. Existen diversos métodos para probar la dureza de un material, pero los de más amplio uso son los de indentación estática; en donde un indentador de geometría determinada es forzado sobre la superficie del material en reposo, y el peso por unidad de área de impresión se considera la dureza del material. Dependiendo del sistema de prueba, la dureza se expresa por un número que es inversamente proporcional a la profundidad de la indentación para una carga y marcador específicos. 23 Figura III.3 Imagen del Microscopio Electrónico de Barrido y del EDX. Figura III.4. A) Imagen de microdurómetro Vickers. B) Imagen del indentador piramidal de diamante penetrando en la muestra. C) Indentación o impresión piramidal. 24 Existen dos tipos de marcadores empleados para las pruebas de microdureza, el marcador de Knoop y el de Vickers. El durómetro de Vickers es indentador de diamante piramidal con un ángulo incluido de 136° entre las caras opuestas (Figura III.4). Como resultado de la forma del marcador, la impresión sobre la superficie de la muestra será un cuadrado. La longitud de las diagonales del cuadrado es medida por medio de un microscopio equipado con un micrómetro ocular que contiene filos movibles. La distancia de los filos se indica en un contador calibrado en micras, esta medida es utilizada para obtener el número de dureza de tablas ya elaboradas que presentan los valores calculados de acuerdo a la siguiente fórmula: Hv= 0.102 𝐹 𝑆 = 0.102 0.102 = 2F sin 𝜃 2 𝑑2 =0.1891 𝐹 𝑑2 Donde Hv es la dureza Vickers, F es la Prueba de carga, S es la Superficie del área de indentación en milímetros, d es la Longitud de la diagonal promedio de una indentación en mm., y Θ es el Frente del ángulo plano del indentador piramidal en grados. El indentador de Vickers es el más sensible de los probadores de dureza. Tiene una sola escala continua para todos los materiales y el número de dureza es virtualmente independiente de la carga. Debido a la posibilidad de usar cargas ligeras pueden probarse secciones más delgadas que de cualquier otra prueba y la impresión cuadrada es la más fácil de medir con exactitud17. 25 CAPITULO IV METODOLOGÍA. De acuerdo a lo comentado en los capítulos anteriores, la metodología abarca la exposición de órganos dentales a las pastas dentales para dientes sensibles y a los barnices de flúor, así como su observación y análisis por microscopía de luz, Microscopía electrónica de barrido, el análisis químico por la técnica de rayos X característicos MEB-EDX y la medida de dureza Vickers. Fueron seleccionados dos órganos dentarios humanos (premolares), recién extraídos por razones ortodóncicas, de pacientes jóvenes de 12 y 14 años libres de defectos morfológicos y procesos cariosos (Figura IV.1 A). Luego de ser extraídos, los dientes fueron limpiados y sumergidos en suero fisiológico para evitar su deshidratación. La corona de cada diente fue fraccionada en 5 partes, todos los cortes se realizaron en sentido vertical del diente, como rebanada de pastel (Figura IV.1 D). Cada muestra contiene una porción de esmalte que abarca los tercios oclusal, medio y cervical del esmalte. Los dientes fueron seccionados mediante una cortadora de disco de diamante Mod. ISIMET 1000, marca comercial Buehler (Figura IV.1 B); que contiene un disco abrasivo de diamante, de seis pulgadas de diámetro y un grosor de 0.5mm (Figura IV.1 C). Las muestras obtenidas, fueron embebidas en acrílico auto curable rápido, transparente (monómero y polímero), de la marca Nic-tone, dejando expuesto el esmalte externo. Esto se logró haciendo unos pequeños moldes de cera rosa toda estación y vaciando el acrílico en ellos, para después sumergir cada una de las muestras (Figura IV.1 E, F). Posteriormente todas las muestras fueron sumergidas en agua desionizada, con la finalidad de que no interviniera algún ión, el cual no sea de procedencia de alguna de las sustancias a estudiar y, que pudiese favorecer a la remineralización del esmalte. 26 En las muestras obtenidas del diente número uno, se pusieron a prueba las pastas dentales para dientes sensibles, y en las muestras obtenidas del diente número dos, los barnices de flúor. Figura IV.1 A) Imagen de los órganos dentarios. B) Cortadora de disco de diamante Mod. ISIMET 1000, marca comercial Buehler. C) Diente seccionado por disco de diamante. D) Muestras obtenidas a partir de la fracción de cada diente. E) Cera Rosa, toda estación y lámpara de alcohol. F) Acrílico auto polimerisable (monómero y polímero). Se seleccionaron 3 tipos de pastas dentales para sensibilidad, cada pasta con los ingredientes activos y marcas diferentes, y en donde cada marca comercial ofrece grandes beneficios con respecto a las otras marcas no seleccionadas. Las pastas son: Proesmalte a base de Nitrato de Potasio, Colgate sensitive-proalivio a base de Arginina y Sensodyne original a base de Cloruro de Estroncio (Figura IV.2) Del mismo modo fueron seleccionadas 3 marcas comerciales de flúor, de aplicación en el consultorio y en diferentes concentraciones, los cueles son: Flúor Protector de Ivoclar con flúor al 1%, Ultra Thin Waterpik con floruro de sodio al 5% y Colgate Duraphat con floruro de sodio al 5% (Figura IV.4) Como fueron obtenidas 5 muestras de cada diente, éstas fueron enumeradas del 1 al 5. Las muestras 1 y 2 de cada diente, fueron seleccionadas como grupo control. 27 Las muestras núm. 1 se mantuvieron intactas, solo sumergidas en agua des- ionizada. Las muestras de la número 2 a la número 5, se les aplico ácido fosfórico (Figura IV.5) durante 30s y después de enjuagaron con abundante agua. Figura IV.2 Imagen de las pastas dentales seleccionadas y sus ingredientes activos. Figura IV.4 Barnices de flúor seleccionados para este trabajo. A) Flúor Protector de la marca Ivoclar, flúor al 1%. B) Ultra Thin de la marca Waterpik, Floruro de sodio al 5%. C) Duraphat de la marca Colgate, floruro de sodio al 5%. 28 Órgano dentario 1. Muestra 1.1 Control Muestra 1.2 Esmalte desmineralizado Control Muestra 1.3 Esmalte desmineralizado tratado con pasta dental para dientes sensibles con NITRATO DE POTASIO de la marca Pro- esmalte Muestra 1.4 Esmalte desmineralizado tratado con pasta dental para dientes sensibles con CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne original. Muestra 1.5 Esmalte desmineralizado tratado con pasta dental para dientes sensibles con ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. Figura IV. 5 Ácido Fosfórico H3PO4 de la Marca Comercial J.T. Baker. 29 Órgano dentario 2. Muestra 2.1 Control Muestra 2.2 Esmalte desmineralizadoControl Muestra 2.3 Esmalte desmineralizado tratado con barniz de floruro de Sodio al 5 % de la marca ULTRA THIN WATERPIK Muestra 2.4 Esmalte desmineralizado tratado con barníz de flúor al 1%. Flúor Protector de la marca ivoclar vivadent Muestra 2.5 Esmalte desmineralizado tratado con Barniz de floruro de sodio al 5% de la marca Duraphat Colgate. Cada una de la muestras fueron observadas en el microscopio de luz y el microscopio electrónico de barrido antes de ser sometidas al tratamiento. Para las muestras del órgano dentario 1, nuevamente fueron observadas 7 días después y para el órgano dentario 2, tres MEBanas después. Se utilizó un Estereoscopio modelo Stemi 2000-C de la marca Zeiss. El modelo de la lámpara es KL 200 de la marca Zeiss. Además tiene la opción de integrarse una cámara de alta definición, a color, que permite digitalizar la imagen. Al igual que el estereoscopio, el microscopio fotónico tiene la opción de colocar una cámara de alta definición, que permite digitalizar la imagen (Figura IV.6). El Microscopio Electrónico de Barrido utilizado en este estudio fue el MEB Modelo Jeol 5600, y las observaciones fueron hechas a través de electrones retro dispersados. 30 Todas las muestras se mantuvieron en agua des ionizada durante todo el tiempo que duro el tratamiento. Figura IV.6 A) estereoscopio Stemi 2000-C de la marca Zeiss. B) Microscopio Fotónico modelo Axiovert 25 marca comercial Zeiss. Una vez designadas las sustancias a estudiar en las pastas dentales, a las muestras 1.3, 1.4 y 1.5, se le aplico con un hisopo la pasta dental correspondiente durante un minuto y posteriormente se enjuagó la muestra con agua potable. Este procedimiento se realizó tres veces por día, entre 9 y 10 am, 3 y 4 pm, 10 y 11pm, durante siete días, que es el tiempo señalado por las diferentes marcas comerciales, en hacer efecto. Nuevamente las muestras de la 1.3 a la 1.5 fueron observadas en el microscopio de luz y el microscopio electrónico de barrido. Las muestras 2.3, 2.4 y 2.5, fueron secadas con una gasa estéril y se aplicó el barniz correspondiente en cada muestra sobre la superficie del esmalte con el pincel que cada marca comercial provee. Se dejó actuar la sustancia aproximadamente 15 min. y se guardaron en un recipiente individual el cual contenía agua desionizada. 31 Las marcas comerciales de los barnices de flúor, mencionan que después de que aplico el barniz, su efecto es inmediato, pero este se potencializa gradualmente hasta cumplir las 24 horas, es por eso que 24 horas después se procedió a observar las muestras en el MEB. Tres MEBanas después, las muestras 2.3, 2.4 y 2.5, se colocaron en un recipiente individual de vidrio que contenía acetona y se introdujeron en el ultrasonido (Figura IV.7) durante 10 minutos, hasta asegurar que estuviera desprendida en su totalidad la capa de barniz en cada una de las muestras. Figura IV.7. Ultrasonido de la marca comercial Branson, modelo 1510. Una vez eliminado el barniz, las muestras fueron observadas en el microscopio de luz y el MEB, además de ser analizadas en el EDX. Posteriormente, todas la muestras se sometieron a pruebas de dureza en el micro durómetro Vickers, pero antes, a las muestras, se les agregó más acrílico para formar una base más grande y resistente y así proceder a medir la micro-dureza. 32 Para esta prueba, se utilizó un Micro-durómetro VICKERS (MICRO HARDNESS TESTER), modelo MHT-2, marca comercial Matsuzawa Seiki Co. Se utilizó un peso de 200 gramos, en un tiempo de 20 segundos para cada marca del diamante. La dureza se midió en el tercio medio de la corona en cada una de las muestras, realizando así 15 registros en cada muestra (Figura IV.8). Figura IV.8. A) Imagen de micro durómetro Vickers. B) Muestras preparadas para la prueba de dureza. Nótese la marca en el centro de la muestra, es la zona donde se tomaron las mediciones. 33 CAPITULO V. RESULTADOS 5.1 El pH y los elementos detectados en las pastas y barnices. Se realizó el estudio del valor de pH de las pastas y barnices con papel pH para medir su acidez o alcalinidad. Esto nos permitió tener una idea del tipo de reacción que observaremos al aplicar estos productos al esmalte. La figura V.1 presenta los valores de pH registrados en las pastas y los barnices utilizados. La pasta Pro-Esmalte tiene un pH ácido de 5. La pasta Sensodyne Original tiene un pH ácido de 6 y la pasta Colgate Sensitive- Proalivio tiene un pH alcalino entre 11 y 12. En el caso de los barnices, el barniz Flúor Protector de Ivoclar tiene un pH ácido entre 3 y 4. El barniz Duraphat de Colgate y el barniz Ultra Thin Waterpik tienen un pH neutro de 7. Figura V.1. Obtención de los Valores de pH de las pastas y los barnices utilizados. La pasta Pro- Esmalte tiene un pH ácido de 5. Sensodyne Original su pH ácido de 6 y Colgate Sensitive- Proalivio tiene un pH alcalino entre 11 y 12. 34 También se analizó la composición química de las pastas y barnices por medio de la técnica de espectroscopia de los rayos x característicos medios en función de la energía de éstos (EDX). Estos resultados dieron una idea de los elementos que interaccionaron con la superficie del esmalte al momento de su aplicación. La figura V.2 presenta el espectro de EDX de la pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. En esta figura también se presentan la imagen de MEB de la pasta y la tabla de los porcentajes en peso (wt%) y en porcentaje atómico (at%) de los elementos detectados. Como puede observarse, en la pasta dental de NITRATO DE POTASIO se detectó Silicio, Azufre, Cloro, Aluminio y Potasio además de Carbono y Oxígeno. En este caso, el nitrógeno no fue detectado, posiblemente por cuestiones del rango de detección de la técnica. La figura V.3 presenta el espectro de EDX de la pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original. También se presenta la imagen de MEB de la pasta y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. Se detectaron Cloro, Calcio, Estroncio, Azufre, Titanio aparte del Carbono y el Oxígeno. Figura V.2. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra de pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. 35 Figura V.3.Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra de pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original.%wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico Al igual que en el caso de las pastas, los barnices también fueron analizados por la técnica de EDX para conocer los elementos presentes en éstos. La figura V.5 presenta el espectro de EDX del barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. Al igual que en casos anteriores, también se presenta la imagen de MEB de la muestra y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. En este barniz se detectó Silicio y Flúor, aparte del Carbono y el Oxígeno. La figura V.4 presenta el espectro de EDX de la pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. En este caso se detectó Molibdeno, Calcio, Fosforo, Aluminio, Silicio, Sodio y Titanio, aparte del Carbono y el Oxígeno. La figura V.6 presenta el espectro de EDX del barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK. Aquí se detectó Silicio, Sodio, Calcio y Cloro, a parte del Carbono y el Oxígeno. Nótese que, al menos por esta técnica, el flúor no fue detectado como componente de este barniz. 36 La figura V.7 presenta el espectro de EDX delbarniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. Se detectó Flúor, Sodio y Azufre, aparte del Carbono y el Oxígeno. Figura V.4. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra de pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Figura V.5. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra del barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. El espectro se obtuvo de un área de 100 µm2. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. 37 Figura V.6. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra del barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Figura V.7. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra del barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. 38 5.2 Grupo control Microscopía de Luz Una vez que las muestras fueron seleccionadas, el grupo control fue analizado por Microscopía de luz, en donde se observó la superficie del esmalte de la cara vestibular del diente. Esta superficie no fue alterada de por sustancia alguna. En las imágenes de la figura V.8, se puede observar el brillo natural el esmalte, junto con las estrías de Retzius. La línea de fractura que se observa en la figura V.8A se originó por deshidratación de la muestra durante su preparación. En la figura V.8D se presenta un acercamiento de la superficie del esmalte donde se puede observar la desmineralización natural que presenta el tejido. Figura V.8. Imágenes de Microscopía de luz de la muestra testigo de esmalte (grupo control). A) Imagen de la cara vestibular. B-D) Distintas amplificaciones de la muestra en (A). Nótese las líneas de Retzius y la fractura que presenta. Las imágenes presentan una desmineralización natural. 39 Microscopía Electrónica de Barrido Al analizar la muestra de grupo control a través del microscopio electrónico de barrido, nuevamente se observa la desmineralización natural del esmalte, junto con las estrías de Retzius propias de su anatomía y la línea de fractura. Las imágenes de la figura V.9 presentan esta descripción. Análisis EDX La muestra del grupo control en un corte sagital fue analizada por la técnica de EDX. El espectro de EDX se obtuvo de un área de 10 µm2 de la orilla de la muestra, aproximadamente. En la figura V.10 se observa la imagen de la muestra junto con su espectro y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. Los elementos detectados (adicionales a los elementos de la hidroxiapatita Ca, P, O, C) fueron: Flúor, Sodio, Aluminio, Silicio, Cloro y Potasio. 5.3. Desmineralización Microscopía de Luz Al igual que la muestra del grupo control, la muestra que fue desmineralizada con el ácido fosfórico, fue observada con el microscopio de luz, antes y después de la desmineralización. En la figura V.11A-B se puede observar el brillo natural del esmalte antes del ataque ácido. En la figura V11C-D se presenta el grabado en el esmalte y se observa la pérdida del brillo natural de éste, sin embargo siguen observándose las estrías de Retzius. Microscopía Electrónica de Barrido En la figura V.12 se presentan las imágenes de Microscopía electrónica de barrido de la muestra del esmalte desmineralizada con ácido fosfórico, en donde se observan las irregularidades de la superficie producidas por el ataque. La opacidad observada en la figura V.11C-D causada por el ataque ácido durante 30 segundos produce las irregularidades observadas en (B) y (C). 40 Figura V.9. Imágenes de MEB de la muestra testigo de esmalte (grupo control). A) Imagen de la cara vestibular. B-C) Distintas amplificaciones de la muestra en (A). Nótese las líneas de Retzius y las fracturas que presenta. Las imágenes presentan una desmineralización natural. Figura V.10. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra testigo de esmalte (grupo control). %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa F, Na, Al, Si, Cl y K. 41 Figura V.11. A-B) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte antes de ser desmineralizada. Nótese las líneas de Retzius. C-D) Imágenes de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico. Nótese la opacidad causada por el ataque ácido de 30 segundos. Figura V.12. A) Imágenes de Microscopía electrónica de barrido de la muestra del esmalte desmineralizada con ácido fosfórico. Nótese las irregularidades de la superficie producidas por el ataque. B-C) Distintas amplificaciones de la muestra en (A). 42 Análisis EDX Al analizar la desmineralización de la muestra en un corte sagital por medio del EDX, en un área de 10µm2 de la orilla de la muestra aproximadamente, se detectaron elementos adicionales a la hidroxiapatita, los cuales fueron Magnesio, Sodio y Cloro. En la figura V.13 se observa la imagen del EDX, el espectro de la muestra y la tabla de los elementos obtenidos. Figura V.13. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra desmineralizada. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Mg, Na, y Cl. 43 5.4 Muestras tratadas con pastas de dientes a) Nitrato de potasio Microscopía de Luz Para la muestra que fue tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte, después de haber sido desmineralizada con el ácido fosfórico y tratada con esta pasta, se observó con el microscopio de luz. En la figura V.14, en lugar de observarse una remineralización, nótese la irregularidad de la superficie causado por una desmineralización más agresiva. En estas imágenes ya no son visibles las estrías de Retzius. Figura V.14. A-D) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. Nótese la irregularidad de la superficie causado por una desmineralización más agresiva. 44 Microscopía Electrónica de Barrido Al observar la muestra tratada con pasta de dientes a base de nitrato de potasio a través del MEB, se observa una superficie muy irregular causada por una desmineralización más agresiva que revela la estructura misma de los prismas del esmalte. En la figura V.15 se observan las imágenes del MEB que presentan esta desmineralización. Además, la agresión presentada atacó preferencialmente al material inorgánico del esmalte, el cual produce la disolución de los prismas y deja casi intacto el material orgánico. Análisis EDX En el análisis de EDX realizado en un área aproximada de 10 µm2 de la orilla de la muestra desmineralizada, y después de ser tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte, se detectó Magnesio, Sodio y Cloro adicionales a los elementos de la hidroxiapatita. En la Figura V.16 se observa el espectro junto con la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. En la tabla se puede apreciar que los elementos presumiblemente de la pasta no están presentes. Esto puede deberse a que los elementos no fueron absorbidos en la superficie del esmalte, o a que su concentración está por debajodel límite de detección de este método de análisis. Figura V.15. A) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. B-C) Mayores amplificaciones de (A). Obsérvese en (A) y (B) la irregularidad de la superficie causada por una desmineralización más agresiva, lo que produce que se revele la estructura de los prismas en (C). 45 Figura V.16. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra desmineralizada y después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Mg, Na y Cl. b) Cloruro de Estroncio Microscopía de Luz La muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original, también fue analizada mediante Microscopía de luz. En Figura V.17, en lugar de observarse una remineralización, nótese la gran irregularidad de la superficie causado por un ataque más agresivo. En estas imágenes no nos es posible apreciar las estrías de Retzius que se observan en la anatomía normal de esmalte. 46 Figura V.17. A) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original. B-D) Mayores amplificaciones de (A). Nótese la irregularidad de la superficie causado por un ataque más agresivo. Figura V.18. A) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original. B-C) Mayores amplificaciones de (A). Nótese la irregularidad de la superficie causado por un ataque más agresivo. 47 Microscopía Electrónica de Barrido En la muestra desmineralizada y después tratada con la pasta a base de CLORURO DE ESTRONCIO, al observarla en el MEB se aprecia una superficie muy agredida. En la figura V.18 se observa que en lugar de una remineralización, la irregularidad de la superficie es mayor y es causada por un ataque más agresivo, el cual causa la destrucción completa de la superficie. Análisis EDX Posteriormente la muestra tratada con la pasta a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original, se analizó con EDX. La figura V.19, presenta la imagen de MEB de la muestra en un corte sagital y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. El espectro se obtuvo de un área aproximada de 10 µm2 de la orilla de la muestra. Adicional a los elementos de la hidroxiapatita (Ca, P, O, C), se observaron Sodio, Magnesio y Cloro. Sin embargo no se observa el Estroncio que contiene la pasta. Esto puede deberse a que el estroncio no penetro a través de la superficie del esmalte, o su concentración se encuentra por debajo del límite de detección de esta la técnica. c) Arginina Microscopía de Luz La muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate, también fue observada en el microscopio de luz. En la figura V.20, se observan las imágenes de la irregularidad de la superficie causado por un ataque aparentemente menos agresivo que los observados en las muestras tratadas con pastas a base de cloruro de estroncio y nitrato de potasio. 48 Figura V.19. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Na, Mg y Cl. Figura V.20. A) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. B-D) Mayores amplificaciones de (A). Nótese la irregularidad de la superficie causado por un ataque menos agresivo. 49 Microscopía Electrónica de Barrido Las imágenes de Microscopía electrónica de barrido de la muestra tratada con pasta dental a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate (figura V.21) presentan la irregularidad de la superficie y la exposición de los prismas causado por un ataque preferencial del material inorgánico. La figura V.21C presenta claramente la disolución de la estructura de los prismas y deja su envolvente orgánica. Análisis EDX La figura V.22 muestra el espectro de EDX de la muestra tratada con pasta dental a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate, el cual se obtuvo de un área de aproximadamente 10 µm2 de la orilla de la muestra después de un corte sagital. También se presenta la imagen de MEB de la muestra y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados. Adicional a los elementos de la hidroxiapatita (Ca, P, O, C), se observó Sodio y Cloro. Sin embargo no es posible diferenciar la concentración del Calcio proveniente de la pasta. Tampoco se observa presencia de Molibdeno ni de Aluminio detectados originalmente en la pasta (figura V.4). Figura V.21. A) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. B-C) Mayores amplificaciones de (A). Nótese la irregularidad de la superficie la exposición de los prismas causado por un ataque preferencial del material inorgánico. 50 Figura V.22. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes de los elementos detectados de la muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Na y Cl. d) Dureza Vickers de las muestras tratadas con pastas de dientes La figura V.23 presenta la tabla de los resultados de la Micro-dureza VICKERS. Estos son 15 lecturas en 5 muestras tratadas con las pastas dentales para dientes sensibles y sumergidas en agua desionizada. El renglón “Muestra 1” presenta los resultados del grupo control. El renglón “Muestra 2” presenta los resultados de la muestra desmineralizada. El renglón “Muestra 3” presenta los resultados de la muestra desmineralizada y después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte. El renglón “Muestra 4” presenta los resultados de la muestra desmineralizada después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original. El renglón “Muestra 5” presenta los resultados de la muestra desmineralizada después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. 51 Estos resultados indican que la muestra 5 (la muestra tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate) fue la que presentó mayor dureza de todas, y la muestra 3 (muestra desmineralizada y después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte) fue la que presenta mayor variabilidad en los valores de dureza. Figura V.23. Tabla de los resultados de Micro-dureza VICKERS de 15 lecturasen 5 muestras tratadas con pastas dentales para dientes sensibles y sumergidas en agua desionizada. Muestra 1= Grupo control, Muestra 2= Muestra desmineralizada, Muestra 3= Muestra desmineralizada y después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte, Muestra 4= Muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original, Muestra 5= Muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. Hv = promedio, D.S. desviación estándar. La figura V.24 presenta la representación gráfica de los resultados de Micro- dureza VICKERS de las muestras tratadas con pastas de dientes y mostrados en la tabla de la figura V.23. Como se puede observar, la muestra 5 presentó mayor dureza y la muestra 3 es la que presenta mayor variabilidad. De acuerdo con lo presentado en esta gráfica, los valores de dureza son prácticamente similares. 52 Figura V.24. Representación Gráfica de la tabla de los resultados de Micro-dureza VICKERS de 15 lecturas en 5 muestras tratadas con pastas dentales para dientes sensibles y sumergidas en agua desionizada. Esta grafica solo presenta los valores promedios de los datos mostrados en la tabla. M1= Grupo control, M2= Muestra desmineralizada, M3= Muestra desmineralizada y después tratada con pasta dental para dientes sensibles a base de NITRATO DE POTASIO de la marca Proesmalte, M4= Muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de CLORURO DE ESTRONCIO de la marca Sensodyne Original, M5= Muestra desmineralizada después tratado con pasta dental para dientes sensibles a base de ARGININA de la marca Sensitive pro-alivio Colgate. La línea amarilla representa el promedio de la muestra M1, Las líneas rojo y azul representan la desviación estándar (D.S.) de la muestra M1 5.5 Muestras tratadas con bernices de flúor a) Barniz flúor protector Microscopía Electrónica de Barrido Al igual que las muestras desmineralizadas y tratadas con pastas para dientes sensibles con diferentes componentes, las muestras desmineralizadas y tratadas con barniz de flúor, también fueron observadas y analizadas por microscopía de luz y Microscopía electrónica. Para la muestra desmineralizada con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicar el barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT, se observó su superficie en el microscopio electrónico de barrido. Cabe mencionar que, después de su aplicación, el barniz se evapora. En la figura 53 V.25, las imágenes presentan irregularidades producidas en la superficie del esmalte y posiblemente debido a la forma de aplicación del barniz (se aplicó el aplicador que provee la marca). Esta figura indica que al interaccionar el haz electrónico con la superficie de la muestra, lo que produjo el conocido contraste de “efecto de carga” en las zonas de mayor espesor en la capa de barniz. Este efecto es producto del bien conocido comportamiento no conductor de la muestra de esmalte. Microscopía de Luz tres MEBanas después de aplicar el barniz Tres MEBanas después de que se aplicó el barniz de FLÚOR PROTECTOR de la marca IVOCLAR VIVADENT en la muestra y se removió el barniz por ultrasonido, se analizó en el microscopio de luz. En la figura V.26 se presentan las imágenes de Microscopía de luz. Estas imágenes muestran las irregularidades producidas en la superficie del esmalte. Aún después de remover el barniz, se observó una capa de tono nacarado (en este caso se observan tonalidades blanquizcas). Además se aprecia una línea de fractura producida por deshidratación. Figura V.25. A-C) Imágenes de MEB do de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicarse el barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. B-C) Amplificaciones de (A). 54 Figura V.26. A-D) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT y ser removido. En (A) se presenta una línea de fractura producida por deshidratación. B-D) Amplificaciones de (A). Se observó una capa de tono nacarado (en este caso se observan tonalidades blanquizco). Microscopía Electrónica de Barrido, tres MEBanas después de aplicar el barniz Después de haber observado microscopio electrónico de barrido la muestra desmineralizada y después de haberse aplicado el barniz de flúor de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT, se volvió a observarse ésta en el microscopio electrónico de barrido. En la figura V.27 se observa las irregularidades producidas en la superficie del esmalte ocasionadas por un ataque muy agresivo del producto. Las líneas de fractura que se observan son consecuencia de la deshidratación de la muestra. 55 Figura V.27. A-C) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT y ser removido. B-C) Amplificaciones de (A). Análisis EDX En la figura V.28 se observa la imagen de MEB de la muestra en un corte sagital, la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados y el espectro de EDX de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. Aquí se puede observar que hay algunos elementos detectados adicionales a los de la hidroxiapatita (Ca, P, O, C), como son: Magnesio, Sodio, Aluminio, Silicio y Cloro. La señal del Silicio proviene directamente del barniz (figura V.5). Figura V.28. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Mg, Na, Al, Si, Cl y K. 56 b) Barniz ultra thin waterpik Microscopía Electrónica de Barrido La muestra desmineralizada con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicar el barniz de fluoruro de Sodio al 5 % de la marca ULTRA THIN WATERPIK, se observó en el microscopio electrónico de barrido. En la figura V.29, al igual que en el análisis de la muestra tratada con flúor protector, las imágenes muestran irregularidades producidas en la superficie del esmalte. Las imágenes indican que, al interaccionar el haz electrónico con la muestra, se produjo el conocido efecto de carga en las zonas de mayor espesor en la capa de barniz. La diferencia en espesor en diferentes zonas de la capa de barniz se debió posiblemente a la forma de aplicación del barniz (se aplicó con el aplicador que provee la marca comercial). Figura V.29. A-C) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicarse el barniz de fluoruro de Sodio al 5 % de la marca ULTRA THIN WATERPIK. B-C) Amplificaciones de (A). Microscopía de luz una MEBana después de aplicar el barniz La muestra desmineralizada y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK y ser removido, se observó en el microscopio de luz. Las imágenes, las cuales se muestran en la figura V.30, presentan irregularidades producidas en la superficie del esmalte. Nótese los cambios de color en la superficie del diente (en este caso se observan tonalidades verdosas). 57 Microscopía Electrónica de Barrido, tres MEBanas después de aplicar el barniz La muestra de esmalte desmineralizado y tratado con el barniz de la marcaULTRA THIN WATERPIK y después de ser removido, se analizó nuevamente en el MEB. La figura V.31 presenta las irregularidades producidas en la superficie del esmalte después de un ataque severo. Análisis EDX Al analizar por EDX la misma muestra desmineralizada y después tratada con barniz de la marca ULTRA THIN WATERPIK, se observó que había elementos adicionales a los de la hidroxiapatita (Ca, P, O, C). En Figura V.32 se muestra el espectro de EDX, la imagen de MEB de la muestra en un corte sagital y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados. Aquí se detectó Magnesio, Sodio, Aluminio, Silicio y Potasio. El Silicio, el Sodio y el Cloro provienen del barniz (figura V.6). También para este análisis, el espectro se obtuvo de un área de aproximada 10 µm2 de la orilla de la muestra. c) Barniz Duraphat Microscopía Electrónica de Barrido. Una vez que se desmineralizó la muestra con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicarse el barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE, se observó en el microscopio electrónico de barrido. En la figura V.33 se observan las irregularidades producidas en la superficie del esmalte. Nótese que en las áreas donde se desprendió el barniz se observa una superficie demasiado agredida y casi destruida. Microscopía de Luz tres MEBanas después de aplicar el barniz La misma muestra desmineralizada y tratada con el barniz de fluoruro de sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE, se llevó al ultrasonido para ser removido y posteriormente se observó en el microscopio de luz. En la figura V.34, se 58 observan las irregularidades producidas en la superficie del esmalte a causa del barniz. Es evidente el cambio de color de la superficie del esmalte (en este caso se observan tonalidades anaranjadas). Figura V.30. A-D) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK y ser removido. B-D) Amplificaciones de (A). Nótese los cambios de color en la superficie del diente (en este caso se observan tonalidades verdosas). Figura V.31. A-C) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de fluoruro de Sodio al 5 % de la marca ULTRA THIN WATERPIK y ser removido. B-C) Amplificaciones de (A). 59 Figura V.32. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Mg, Na, Al, Si, Cl y K. Figura V.33. A-C) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y 24 horas después de aplicarse el barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. B-C) Amplificaciones de (A). Obsérvese la existencia de áreas donde se desprendió el barniz. 60 Figura V.34. A-D) Imágenes de Microscopía de luz de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de fluoruro de sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE y ser removido. B-D) Amplificaciones de (A). Nótese el cambio de color de la superficie del esmalte (en este caso se observan tonalidades anaranjadas). Microscopía Electrónica de Barrido, tres MEBanas después de aplicar el barniz Posteriormente la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y después de haberse aplicado el barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE y ser removido, también se observó en el microscopio electrónico de barrido. La figura V.35 muestra las irregularidades producidas en la superficie del esmalte. Las líneas de fractura que se observan, son producidas por deshidratación de la muestra. Nótese la marca de identificación “x” producida con una fresa de bola con la intención original de contar con un sistema de referencia para la orientación de la muestra en el MEB. Esta marca presentaba un espesor y profundidad dado, pero después de aplicar el barniz su profundidad disminuyó 61 pero a su vez el grosor de las líneas de la “x” se extendió. Esto indica que la superficie del esmalte experimentó una “suavización” después de la aplicación del barniz. Análisis EDX Los elementos químicos de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro de la marca DURAPHAT COLGATE y ser removido, se analizaron con EDX. La figura V.36 presenta la imagen de MEB de la muestra en un corte sagital, el espectro obtenido de un área aproximada de 10 µm2 de la orilla de la muestra y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados. Como se puede observar, los elementos adicionales a los de la hidroxiapatita (Ca, P, O, C), fueron el Sodio y el Cloro. Se puede suponer que el sodio proviene del barniz. d) Dureza Vickers de las muestras tratadas con barniz La Figura V.37 presenta la tabla de los resultados de Micro-dureza VICKERS de 15 lecturas en 5 muestras tratadas con barniz de flúor y sumergidas en agua desionizada. El renglón “Muestra 1” presenta los resultados del Grupo control. El renglón “Muestra 2” presenta los resultados de la muestra desmineralizada. El renglón “Muestra 3” presenta los resultados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT. El renglón “Muestra 4” presenta los resultados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK. El renglón “Muestra 5” presenta los resultados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. Como se observa en la tabla de la figura V.37, la muestra 5 (la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE) presentó la mayor dureza, y las muestra 3 y 5 (la 62 muestra desmineralizada y después tratada con barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT y la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE, respectivamente) presentaron la mayor variabilidad en los valores de dureza. Figura V.35. A-C) Imágenes de MEB de la muestra del esmalte desmineralizado con ácido fosfórico y tres MEBanas después de haberse aplicado el barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE y ser removido. B-C) Amplificaciones de (A). Figura V.36. Espectro de EDX, la imagen de MEB y la tabla de los porcentajes obtenidos de los elementos detectados de la muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. %wt = porcentaje en peso. %at = porcentaje atómico. Adicional a los elementos de la HAP (Ca, P, O, C), se observa Na y Cl. 63 Figura V.37. Tabla de los resultados de Micro-dureza VICKERS de 15 lecturas en 5 muestras tratadas con barniz de flúor y sumergidas en agua desionizada. Muestra 1= Grupo control, Muestra 2= Muestra desmineralizada, Muestra 3= Muestra desmineralizada y después tratada con barniz de flúor al 1% de la marca FLÚOR PROTECTOR IVOCLAR VIVADENT, Muestra 4= Muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro de Sodio al 5% de la marca ULTRA THIN WATERPIK, Muestra 5= Muestra desmineralizada y después tratada con barniz de fluoruro sodio al 5% de la marca DURAPHAT COLGATE. Hv = promedio, D.S. desviación estándar. Figura V.38. Representación Gráfica de la tabla de los resultados de Micro-dureza VICKERS de 15 lecturas en 5 muestras tratadas con barniz de flúor y sumergidas
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