Alteraciones-cromosomicas-de-celula-unica-en-parejas-con-antecedente-de-aborto-espontaneo

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6/10/2022

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Biología

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DIRECTOR DE TESIS: DRA. SONIA CANÚN SERRANO
MÉXICO, D. F. 2006
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE CIENCIAS
ALTERACIONES CROMOSÓMICAS DE CÉLULA
ÚNICA EN PAREJAS CON ANTECEDENTE
DE ABORTO ESPONTÁNEO
T E S I S
QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE:
B I Ó L O G O
PRESENTA
MARÍA DEL CARMEN SIERRA ROMERO

UNAM – Dirección General de Bibliotecas
Tesis Digitales
Restricciones de uso

DERECHOS RESERVADOS ©
PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL

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del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México).
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mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro,
reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el
respectivo titular de los Derechos de Autor.

Hoja de Datos del Jurado
1. Datos del alumno.
Apellido paterno: Sierra
Apellido materno: Romero
Nombre: Maria del Carmen
Teléfono: 21570900
Universidad Nacional Autonoma de Mexico
Facultad de Ciencias
Carrera: Biología

2. Datos del Tutor.
Grado: Médico Especialista en Genética Humana
Nombre: Sonia
Apellido paterno: Canún
Apellido materno: Serrano

3. Datos del sinodal 1
Grado: Doctor en Ciencias (Biología)
Nombre: Patricia
Apellido paterno: Ramos
Apellido materno: Morales

4. Datos del sinodal 2
Grado: Maestra en Ciencias (Biología Celular)
Nombre: Adriana
Apellido paterno: Muñoz
Apellido materno: Hernández

5. Datos del sinodal 3
Grado: Maestro en Ciencias (Biología Celular)
Nombre: Armando
Apellido paterno: Muñoz
Apellido materno: Moya

6. Datos del sinodal 4
Grado: Licenciado en Biología
Nombre: José Jesús Heraclio
Apellido paterno: Herrera
Apellido materno. Bazán

7.- Datos del trabajo escrito
Título: "Alteraciones cromosómicas de célula única en parejas con antecedente de
aborto espontáneo"
Número de páginas 51
Año 2006

DEDICATORIAS
A DIOS
Por sus bendiciones y por haberme colocado en este tiempo, espacio y lugar.
A MI PADRE
A quien le debo todo cuanto soy. Para este ser especial con admiración y respeto, porque a pesar de las
adversidades siempre contribuyó con entusiasmo a mis anhelos y formó mi criterio como hija y como ser
humano.
A MI MADRE
Con todo mi amor, admiración y respeto, por ser ejemplo de bondad, que con cariño y esfuerzo apoyó la
culminación de una etapa importante de mi vida.
A MIS HERMANOS
Vero, Georgina, Elvis y Marco Antonio con amor por compartir todo conmigo.
Especialmente a mi hermana Elvis por su valentía para continuar superándose y a mi hermana Vero por
ayudarme a valorar la vida misma, por ser ejemplo de fortaleza y bondad.
A cada uno de ellos gracias por todos esos momentos felices que hemos vivido.
A MI ABUELITA ANSELMA (Q. E. P. D)
Que ya no vio culminado su deseo, pero que siempre confió en mí; para ella a pesar de que no esté
conmigo, donde quiera que se encuentre.
AL DOCTOR RAFAEL ESLAVA GARCIA (Q. E. P. D)
A quien con su ejemplo fue un motivo constante de superación, honestidad y perseverancia para alcanzar
las metas deseadas. Por sus sabios consejos y por todo el apoyo que siempre me brindó. Gracias

AGRADECIMIENTOS

A las autoridades del Hospital General " Dr.Manuel Gea González" por las facilidades otorgadas para la
realización de esta investigación.

Mi más sincero agradecimiento a la Dra. Sonia Canún Serrano, por la confianza depositada en mí para
introducirme al fascinante mundo de la Genética y por permitirme aprender de ella tanto en el plano
académico como en el humano. Gracias por sus enseñanzas, apoyo y amistad.

A la Dra. Patricia Ramos Morales, muchas gracias por sus acertadas sugerencias y por dedicarme su
valioso tiempo y apoyo incondicional.

A los Sinodales:
M en C. Adriana Muñoz Hernández
M en C. Armando Muñoz Moya
Biól. José Jesús Heraclio Herrera Bazán
Por sus valiosos comentarios y su atención.

INDICE
1.0 RESUMEN…………………………………………………………………………. 1
2.0 INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………. 2
3.0 MARCO DE REFERENCIA……………………………………………………… 7
4.0 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA…………………………………………... 13
5.0 JUSTIFICACIÓN…………………………………………………………………... 13
6.0 OBJETIVO…………………………………………………………………………. 13
7.0 DISEÑO……………………………………………………………………………. 13
8.0 MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………………... 14
9.0 DESCRIPCIÓN DE PROCEDIMIENTOS………………………………………… 16
10.0 RESULTADOS…………………………………………………………………… 22
11.0 DISCUSIÓN………………………………………………………………………. 31
12.0 SUGERENCIAS………………………………………………………………….. 35
13.0 CONCLUSIÓN…………………………………………………………………… 36
14.0 ANEXO…………………………………………………………………………… 37
15.0 BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………………. 46

RESUMEN

Las alteraciones cromosómicas de célula única pueden ocurrir en cultivos de linfocitos normales
como un evento in vitro; sin embargo, algunos autores han reportado una frecuencia mayor en
parejas con infertilidad, Higgins y Palmer (Hum Genet 75;24, 1987) demostraron la presencia de
rearreglos estructurales de célula única principalmente translocaciones en parejas con
antecedentes de aborto habitual. En este estudio se presentan los resultados citogenéticos de 120
parejas con pérdidas gestacionales: uno a cinco abortos espontáneos. Las edades promedio
fueron de 25 años en el sexo femenino y de 28 años en el sexo masculino. De cada paciente se
analizaron al microscopio 25 metafases provenientes de cultivos de linfocitos y teñidas con
bandas GTG, se diagnosticaron las siguientes aberraciones estructurales de célula única: 7
translocaciones en el grupo de mujeres y una en el grupo de varones.
Estos resultados, además de confirmar la observación de Higgins y Palmer, sugieren que la
frecuencia de translocaciones en pacientes con infertilidad es mayor que lo esperado por azar,
suceden también in vivo y pueden causar pérdidas gestacionales.

INTRODUCCION

La fertilidad es la capacidad de reproducción que tienen los organismos vivos; los factores
genéticos, cromosómicos y génicos desempeñan un papel importante en la reproducción
humana. La incapacidad de reproducción se conoce como infertilidad. La infertilidad primaria es
la imposibilidad de fecundar en el hombre y de concebir en la mujer. La infertilidad secundaria
es la falta de descendencia e incluye el aborto de repetición y la muerte del recién nacido.
El aborto se define como la interrupción del embarazo antes de la vigésima semana cuando el
embrión alcanza un peso aproximado de 500g. Los abortos se clasifican en espontáneos e
inducidos, el espontáneo es el que ocurre debido a causas naturales sin la intervención de
factores lesivos externos, el inducido, por el contrario, se debe a factores externos al
organismo, tales como agentes físicos o químicos que interrumpen en forma intencionada la
gestación. El aborto espontáneo ocurre en el 15% de los embarazos clínicamente identificables,
y es mayor si se toma en cuenta que muchos cigotos se eliminan en etapas tempranas del
desarrollo por lo que el aborto pasa inadvertido hasta en un 80% según la Organización Mundial
de la Salud (OMS). La causa puede deberse a malformaciones del aparato reproductivo,
alteraciones endócrinas, factores inmunológicos, enfermedades infecciosas o factores genéticos
específicos. (1)
3
La etiología principal es la genética, ya que aproximadamente el 50 % de los abortos
espontáneos se asocia con una alteración cromosómica. (2)
La infertilidad por lo tanto, ha sido el centrode interés de varias especialidades médicas y los
avances recientes en genética, ginecología, endocrinología e inmunología, han permitido un
mejor entendimiento de los factores etiológicos de la infertilidad y un conocimiento más
adecuado de los eventos de la reproducción en el ser humano.
El desarrollo de la metodología citogenética ha hecho evidente cuadros clínicos ocasionados por
aberraciones cromosómicas en los recién nacidos a término o prematuros.
Al inicio de la década de los 60, varios grupos de investigación se dedicaron a conocer la
participación de las anormalidades cromosómicas en la etiología del aborto espontáneo, los
estudios se han realizado directamente en los productos de aborto o en las parejas con aborto
habitual. (3)
Los estudios realizados en parejas con infertilidad tienen una frecuencia de anormalidades
cromosómicas de 0 a 31%, esta amplia variación se debe al número de parejas estudiadas y a los
criterios de selección de las mismas para realizar estudios citogenéticos. Algunos estudios
incluyen parejas con dos, tres o más abortos consecutivos, otros autores estudian a parejas que
además de los abortos han tenido hijos con malformaciones congénitas y finalmente existen
trabajos en que se descartan otras causas de aborto antes de llevar a cabo la valoración genética
y citogenética. (4)
Warburton y Fraser (1964) calcularon el riesgo de aborto independientemente de su etiología de
acuerdo al número de abortos que presente la pareja; el riesgo para un aborto fue calculado en
24%, después de 2 abortos en 26% y después de 3 abortos en 32%. (5)
4

Sant-Cassia y cols (1981) estimaron que en el 7% de las parejas con aborto habitual, alguno de
los miembros es portador de una translocación cromosómica balanceada. (6)
Armendares y cols (1982) en un estudio de 47 parejas infértiles, encontraron que la frecuencia
de anormalidades cromosómicas era de 6.4% siendo estas translocaciones autosómicas
balanceadas. (7)
Michels y cols (1982) observaron que el porcentaje de translocaciones balanceadas en parejas
con historia de abortos era variable de acuerdo al número de abortos, en parejas con 2 abortos el
8.4% presentaba una translocación balanceada, con 3 abortos el 2.7%, con 4 abortos el 10% y
con 5 abortos el 5.9%.(8)
En 150 parejas con historia de abortos de repetición, muertes fetales y/o hijos malformados, la
evaluación cromosómica mostró el 4.7% de parejas con alteración: 5 translocaciones, 1
inversión y 1 mosaico gonadal; con historia de 2 abortos espontáneos la frecuencia de
alteraciones cromosómicas fue de 2.9%, con 3 abortos espontáneos de 3.4%, de 4 o más abortos
espontáneos de 5.4%, cuando existía una historia de abortos y muerte fetal o malformaciones
congénitas de 25%. (9)
Byrd estudió 55 parejas con historia de 2 o más abortos recurrentes y encontraron el 6.8% de
padres portadores de translocación, sin embargo en 11 parejas con una historia de abortos de
repetición y malformaciones congénitas el 27.4% presentaron una alteración cromosómica. (10)
5
Lippman-Hand A y Vekemans S M (1983) reportaron que la mujer se encuentra con mayor
frecuencia como portadora balanceada, lo cual se debe a que las anormalidades cromosómicas
son compatibles con fertilidad en la mujer, pero en el varón ocasionan esterilidad. (11)

Sachs E.S. y cols (1985) realizaron estudio cromosómico a 500 parejas con historia de 2 o más
abortos espontáneos y se observó un cariotipo anormal en 50 parejas (10%), sin aparente
relación con el número de abortos. Las anormalidades fueron translocaciones (44%), mosaicos
(48%), y deleciones o inversiones (8%). En 20 casos las translocaciones fueron recíprocas
principalmente de origen materno, la mayor parte de los mosaicos involucraron el cromosoma X
materno. (12)
Bourrouillou G y cols (1986) estudiaron a 2136 parejas con uno o más abortos espontáneos, en
4.3 % de las parejas estudiadas uno era portador de una anormalidad cromosómica. Las
anormalidades autosómicas se observaron con mayor frecuencia en la mujer y ocurrió en una
pareja de cada 23. (13)
Castle y Bernstein estimaron que el 6.8% de parejas con 2 o más abortos espontáneos de menos
de 20 semanas de edad gestacional presentaban una alteración cromosómica, sin embargo se
excluyeron algunas anormalidades cuya influencia en la etiología del aborto no era clara por lo
que la frecuencia descendió a 2.3%.(14)
Campana estudió 269 translocaciones balanceadas en 5445 parejas que fueron estudiadas por
presentar 2 o más abortos espontáneos, aproximadamente el 5% de estas parejas uno de sus
miembros presentaban una alteración cromosómica 2/3 una translocación recíproca y 1/3 una
translocación robertsoniana. (15)
6
Portnoi y cols (1988) en 1142 parejas con pérdidas reproductivas recurrentes, encontraron
alteraciones cromosómicas en el 4.8%, no encontraron asociación entre el número de abortos y
el número de alteraciones cromosómicas.
La incidencia de anormalidades citogenéticas (6.6%) se encontró en 256 parejas con aborto y un
hijo normal. Al igual que otros autores se encontraron más mujeres portadoras que varones. (16)
Canún y cols (1988) estudiaron 98 parejas consecutivas con antecedente de uno o más abortos
espontáneos del primer trimestre y encontraron un cariotipo anormal en el 5.1% de ellas. (17)

MARCO DE REFERENCIA

En cultivo de linfocitos normales se han reportado alteraciones cromosómicas de célula
única y se han identificado los cromosomas involucrados así como sus puntos de ruptura.
En la década de los setentas se reportaron los primeros estudios sobre alteraciones de célula
única, en varios grupos de poblaciones, como se refiere a continuación:
Welch y Lee (1975) en un estudio de linfocitos de 250 individuos reportaron 9 células con
translocaciones balanceadas de novo, tres de ellas involucraron los cromosomas 7 y 14,
se observaron en 3 individuos con diversos diagnósticos tales como Síndrome de
Rubinstein-Taybi, múltiples anomalías congénitas, e inclusive un individuo sano que
tenía un hijo con trisomía 22. En los tres casos se observó que el cromosoma 14
involucraba el mismo punto de ruptura 14q11-12; los puntos de ruptura para el cromosoma
7 fueron: 7p13, 7q33-q36, 7q34-q36. También hallaron otras translocaciones como:
t(2;14)(p11;32) y 46,XX,t(7;10)(q11-22;q24-q26).(18)
Aula y Koskull (1976) reportaron rupturas en ciertas regiones cromosómicas entre ellas la
región 14q24 en pacientes y familiares con malformaciones congénitas. (19)
En 852 individuos estudiados por retraso mental Beatty -De Sana, Hoggard y Cooledge
(1975), encontraron 5 pacientes con alteración de una sola célula, la translocación
recíproca involucraba los cromosomas 7 y 14 con puntos de ruptura en 7p13, 7q34-q36 y
14q11-q12.(20)
Aymé y cols (1976) en linfocitos de 542 individuos normales observaron 9 “hot spots” para
rupturas que incluyen las regiones 7p1, 7q3, 14q1 y 14q3. De 31 translocaciones 10
ocurrieron entre los cromosomas 7 y 14 con puntos de ruptura en 7q35, 14q13 y 14q32, lo
8

cual sugirió que las rupturas se distribuyen en forma selectiva en el genoma. (21)
Zech y Haglund (1978) en un estudio de linfocitos de sangre periférica en 45 individuos
normales y en 5500 metafases analizadas observaron 12 translocaciones que
involucraban los cromosomas 7 y 14 con los siguientes rearreglos : t(7;14)(qter;q12-3),
t(7,14)(p13;q11-2), t(7;14)(pter,q22) y t(7;14)(q32,qter), la frecuencia de estas
translocaciones se calculó en 0.002 (2X10
-3
) .Estos rearreglos no seobservaron en el
análisis de biopsias de linfomas , cáncer de vejiga, líneas linfoblastoides o médula ósea de
pacientes con leucemia ; aún cuando el punto de ruptura 14q32 habitualmente se
encuentra en la mayoría de las células con linfoma de Burkitt y mielomas. (22)
Aurias y cols (1980) observaron la translocación 7;14 en forma esporádica en 3
familiares en primer grado de pacientes con Ataxia-Telangiectasia (A-T), por lo que se
propuso que este rearreglo pudiera ser un indicador de heterocigocidad para el gen de A-
T.(23)
Weemaes y cols (1981) reportaron translocaciones de célula única 7;14 en 4 miembros de
una familia siendo idénticas a las reportadas en otros trabajos, lo cual sugirió la expresión
de un estado heterocigoto de una nueva entidad de inestabilidad cromosómica y dio lugar
a que se postulara que individuos fenotípicamente normales con estos hallazgos podrían
ser heterocigotos de una alteración de inestabilidad cromosómica semejante a A-
T.Algunos autores han sugerido que los pacientes con translocación 7;14 esporádicas
pueden ser portadores heterocigotos de un Síndrome de Inestabilidad Cromosómica
semejante a A-T o bien al Síndrome de ruptura de Nijmengen.(24)
Hustinx y cols. (1979) consideraron esta posibilidad cuando el padre de una paciente con
A-T se le encontró que tenía una metafase con translocación 7; 14. (25)
9

Subsecuentemente Cohen y cols (1975) reportaron resultados similares en fibroblastos y
linfocitos entre heterocigotos de 5 familias con A-T. (26)
Wallace y cols. (1984) describen 12 translocaciones 7;14 en un estudio de 1402
individuos con diferentes diagnósticos, las translocaciones observadas fueron, t(7;14)
(p13;q11.2) y t(7; 14)(q32-4;q11.2). En 5 casos se asumió la existencia de un factor
estacional debido a que las translocaciones se observaron constantemente en el mes de
septiembre de diferentes años , también propusieron la posible presencia de un clastogeno
específico o de un agente citotóxico presente en los medios de cultivo de esa temporada,
capaz de tener un efecto específico sobre ciertos sitios de ruptura en los cromosomas 7 y
14 en individuos susceptibles; o bien que las variaciones estacionarias pudieron ser
causadas por infecciones virales u otros agentes. (27)
Mattei y cols (1979) observaron variaciones estacionales similares que afectaron los
cromosomas 7; 14 lo que apoyaría la posible etiología viral. (28)
Isobe y cols (1985) describieron la ocurrencia no al azar de translocaciones 7;14 en
cultivos de linfocitos normales ; dichos rearreglos involucraron principalmente las regiones
7p11-13, 7q31-36, 14q11-13 y 14q32.(29)
Iskra (1985) reportó 11 rearreglos cromosómicos in vitro en 9 de 388 personas (22%) :
inv(7)(p15q36), inv(14)(q11q32), t(7;14)(q36q11), t(1;5)(q23q13), t(7;14)(q36q11),
t(7;14)(p13q11), t(7;14)(q36q11), t(3;5)(p24,?), t(3;14)(q21q22), t(3;12)(p11q23),
t(2;6;12)(q22p12q24). Estos rearreglos fueron tres veces más frecuentes en parejas con
abortos espontáneos y parejas con hijos con cariotipo anormal, que en parejas con hijos con
cariotipo normal, por lo que probablemente los rearreglos cromosómicos in vitro reflejan la
inestabilidad cromosómica de las células somáticas que puede indicar una inestabilidad
10

cromosómica en células germinales y por lo tanto un mayor riesgo de aberraciones
cromosómicas en los descendientes. (30)
Reddy y Thomas (1985) reportaron el estudio citogenético de 1561 pacientes; en 8 de ellos
encontraron la translocación 7; 14 en una sola metafase en estudios de rutina, los cultivos
fueron realizados en tiempos cortos y estimulados con fitohemaglutinina (PHA), no se
observó un incremento de rupturas cromosómicas, el punto de ruptura en el cromosoma
14 fue consistentemente en q12, y en el cromosoma 7 en p13 y q35, con una distribución
de aproximadamente 50/50.(31)
Dewald y cols (1986) en un estudio de 11,952 pacientes, encontraron 83 metafases con
alteración de célula única, que involucraron los cromosomas 7 y 14. En 81 casos los puntos
de ruptura fueron en 14q11 y en 7q34 (TIPO I) y 7p13 (TIPO II); las translocaciones tipo I
ocurrieron en 42 pacientes y la tipo II en 39 pacientes, las otras dos translocaciones fueron:
7; 14(q11q32) y 7; 14(p13q32).
De los 83 casos el 20% presentó múltiples defectos al nacimiento, 17% retraso en el
desarrollo, 11% múltiples abortos y sólo en 3 casos se diagnosticó A-T.
Los heterocigotos para A-T se ha estimado que constituyen aproximadamente el 1% de la
población general.
La frecuencia de las translocaciones 7;14 esporádicas en cultivos de linfocitos varía de un
estudio a otro, el promedio de número de metafases con translocación 7;14 reporta rangos
entre 2.35x10
-4
a 13.46x10
-4
, debido a que cada reporte involucra un número diferente de
pacientes y por el tamaño de las muestras que generalmente son pequeñas .
El número total de metafases de todos los reportes de investigación es de 95 854, la
frecuencia por metafase es de aproximadamente 5.01 X 10
-4
en cultivos estimulados con
11

fitohemaglutinina (PHA), la frecuencia de estas translocaciones en otros estudios de
linfocitos estimulados con PHA , fue de 5.12 X10
-4
por metafase y el total de la
frecuencia de translocaciones 7;14 fue de 4.94 X10
-4
por metafase; en consecuencia la
verdadera frecuencia de metafases esporádicas con una translocación 7;14 es
probablemente 5.0 X10
-4
en cultivos de linfocitos.
Las translocaciones 7;14 con puntos de ruptura semejantes, en estudios de linfocitos T
pueden estar aumentadas debido a que las bandas involucradas se encuentran muy
próximas durante la interfase y pueden contener genes comunes involucrados en las
fisiología normal de los linfocitos T. Esto sugiere que las translocaciones pueden estar
asociadas con linfocitos T y que la mayoría ocurre durante la reparación y replicación del
DNA. En este estudio no se encontró correlación entre rearreglos y variaciones estacionales
o meses del año, edad o sexo del individuo.
Estos rearreglos no se encontraron en fibroblastos, células de líquido amniótico, o en
metafases de linfocitos no estimulados con fitohemaglutinina, asimismo tampoco se
encontraron en pacientes con un proceso maligno que se desarrollase subsecuente al análisis
cromosómico. (32)
Higgins y Palmer (1987) estudiaron 555 individuos citogenéticamente, 140 fueron referidos
por aborto habitual (Grupo 1) y 415 fueron referidos por otras razones (Grupo 2). En este
estudio se encontraron 14 translocaciones de célula única en el grupo 1 y 6 translocaciones
de célula única en el Grupo 2; 9 rearreglos estructurales de célula única en el grupo 1 y 11
en el Grupo 2. En el Grupo 1 las translocaciones incluyeron a los cromosomas
1,2,5,7,8,9,10,11,13,14,17 y19; sin embargo la de mayor frecuencia fue la translocación
7;14 con los siguientes puntos de ruptura p13,p14, y q35 para el cromosoma 7 y q11 para
12

el cromosoma 14, los rearreglos cromosómicos incluyeron inversiones, duplicaciones y
deleciones.
En el Grupo 2 las translocaciones incluyeron los cromosomas 1,5,6,7,9,14,15 y 17, en las
deleciones e inversiones, los cromosomas 9 y 14 fueron los más involucrados. Al
comparar los resultados entre estos dos grupos de pacientes se encontró un aumento
significativo de translocaciones de célula única en los individuos con aborto habitual. (33)

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Cual es la frecuencia de alteraciones de célula única en pacientes con antecedente de aborto
espontáneo?

JUSTIFICACIÓN
Las aberraciones cromosómicas observadas en diferentes grupos de pacientes con anormalidades
del proceso reproductivo son habitualmente constitucionales; sin embargolas alteraciones de
célula única que se observan en células somáticas nos presentan la disyuntiva, de un origen in
vitro o reflejan una respuesta biológica in vivo.
Esta investigación pretende ampliar el conocimiento acerca del impacto de este hallazgo y sus
posibles consecuencias en el futuro reproductivo, además de establecer medidas de seguimiento
y prevención.

OBJETIVO
Estimar la frecuencia de alteraciones cromosómicas de célula única en parejas con aborto
espontáneo.

DISEÑO
Estudio descriptivo, abierto, observacional, retrospectivo, transversal.

MATERIAL Y METODOS

UNIVERSO DE ESTUDIO
Se estudiaron los cariotipos de parejas con antecedente de por lo menos un aborto espontáneo,
que se captaron de 1989 a 2003 a través de la Consulta Externa de Genética del Hospital General
“Dr. Manuel Gea González” S.S.A.

TAMAÑO DE LA MUESTRA
120 parejas (240 pacientes) que hacen el total de las parejas con antecedente de aborto
espontáneo, que acudieron al Servicio de Genética.

Criterios de selección
Parejas con edad cronológica similar.

Criterios de inclusión
1.- Cariotipos de parejas que hayan presentado por lo menos un aborto espontáneo del primer
trimestre de gestación.
2.-Participación de ambos miembros de la pareja.

Criterios de exclusión
1.- Que sólo se cuente con el cariotipo de un miembro de la pareja.
2.- Parejas que no presentaran las características antes mencionadas.
Criterios de eliminación
1.- Cariotipos de parejas que presentaron alteraciones cromosómicas estructurales constitutivas o
numéricas, de los autosomas o de los cromosomas sexuales.

Variables dependientes: Alteraciones de célula única.

Variable independiente: Número de abortos.

DESCRIPCIÓN DE PROCEDIMIENTOS

PARA LA REALIZACIÓN DEL ESTUDIO CITOGENÉTICO (CARIOTIPO)

1.- Cultivo celular de linfocitos en sangre periférica

2.- Obtención del paquete celular

3.- Elaboración de laminillas

4.- Técnica de bandas G

5.- Análisis microscópico

6.- Microfotografía

7.- Montaje de cariotipo
17

CULTIVO DE LINFOCITOS EN SANGRE PERIFERICA

El estudio se realizó con la técnica de Moorhead modificada (34)

1.- En condiciones de esterilidad se tomó en una jeringa desechable de 5ml, 0.1 ml de heparina
en solución acuosa a una concentración de 1,000 unidades por mililitro.

2.- Con la misma jeringa mediante una venopunción se extrajeron 2 ml de sangre total.

3.- Se mezcló suavemente la sangre con la heparina para evitar la coagulación.

4.- Se preparó previamente medio de cultivo Mc Coy 5a Mod. (Gibco) de 100 ml, agregando 1
ml de glutamina (Gibco) y 1 ml de penicilina-estreptomicina (Gibco).

5.- Se cultivaron las muestras en 10 ml de medio Mc Coy 5a Mod previamente preparado, más
1ml de sangre total y 0.25ml de fitohemaglutinina.

6.- Todos los cultivos fueron realizados por duplicado bajo campana de flujo laminar.

7.- Se incubaron durante 68-72 horas a 37 ° C.
18
OBTENCIÓN DEL PAQUETE CELULAR

Transcurrido el tiempo de incubación se procedió a lo siguiente:
1.- Se agregó a cada cultivo 0.25 ml de colchicina a una concentración de 10 µ/ml.
2.- Se incubaron durante 30 minutos a 37 ° C.
3.- Posteriormente los cultivos se vertieron a tubos de ensaye para centrifugarlos a 1500 rpm
durante 10 minutos.
4.- Se eliminó cuidadosamente el sobrenadante.
5.- Se resuspendió el botón con solución hipotónica de KCL 0.075 M.
6.- Se incubaron a 37° C durante 30 minutos.
7.- Se centrifugó a 1500 rpm durante 10 minutos.
8.- Se desechó cuidadosamente el sobrenadante.
9.-Se agregó solución fijadora (metanol: ácido acético, 3:1) hasta completar 10 ml.
10.-Se dejó actuar el fijador a temperatura ambiente durante 10 minutos.
11.- Se centrifugó a 1500 rpm durante 10 minutos.
12.- Se eliminó el sobrenadante.
13.- Se dejó en solución fijadora y en refrigeración por 24 horas.
14.- Se centrifugó a 1500 rpm durante 10 minutos.
15.- Se eliminó el sobrenadante
16.- Se agregó solución fijadora y nuevamente se centrifugó a 1500 rpm durante 10 minutos.
17.- Finalmente se agregó fijador de acuerdo al botón obtenido para la elaboración de las
laminillas.
19
ELABORACION DE LAMINILLAS

1.- Las preparaciones se realizaron por medio de goteo del paquete celular sobre portaobjetos
previamente sumergidos en etanol al 70%, dejando caer dos gotas de la suspensión celular desde
una altura suficiente para lograr una dispersión adecuada de los cromosomas.

2.- Dejar secar al aire y observar bajo microscopio en contraste de fases.

3.- Posteriormente después de una semana de maduración, las preparaciones se procesaron con
técnica de bandas GTG.

20
TECNICA DE BANDEO

1.- Se utilizaron laminillas de una semana de maduración.

2.- Las preparaciones se trataron en una solución de tripsina por segundos*, controlando según
actividad de tripsina en cada laminilla de cada caso.

3.- Se pasaron a un lavado rápido con agua de la llave.

4.- Se colocaron en etanol al 30% durante 20 segundos aproximadamente.

5.-Se lavaron en agua de la llave.

6.- Se tiñeron con colorante Wright al 50% durante 20 segundos.

7.- Se tiñeron con colorante Giemsa al 5% durante 40 segundos.

8.- Se lavaron con agua de la llave.

9.-Se dejaron secar al aire y 24 horas después montar las preparaciones.
* Los tiempos de tripsina dependen del tiempo de maduración de la laminilla y deben ajustarse
en cada caso.
21
ANALISIS AL MICROSCOPIO
El análisis se realizó bajo microscopio OLYMPUS CH-2 MODELO CHS a un aumento 100X.
Se analizaron 25 células para cada paciente.

MICROFOTOGRAFIA

Se seleccionaron las metafases que presentaron alteración de célula única y se tomó
microfotografía con película Kodalithe y TMX, en un fotomicroscopio de luz trasmitida Carls
Zeizz FOMI III modelo D-7082, con un objetivo de inmersión planapocromático 100 X.
La impresión de los negativos se realizó en papel brillante F3 Kodabrome; y las amplificaciones
se realizaron en una ampliadora PATERSON PCS 1000 en blanco y negro con accesorios
estándar PCS 1000 y un objetivo de 500 mmf 3.5 y una luz de seguridad incorporada.

MONTAJE DE CARIOTIPO

De cada foto se recortó cada uno de los cromosomas y se integró el cariotipo de acuerdo a los
parámetros establecidos en el SISTEMA INTERNACIONAL DE NOMENCLATURA EN
CITOGENETICA HUMANA ISCN de 1995. (35)

RESULTADOS

Se analizaron los cariotipos de 120 parejas (240 pacientes) con antecedente de abortos
espontáneos, la distribución de edad tanto de hombres como mujeres se presenta a continuación:

MUJERES
X = 25 años
MEDIANA = 26 años
MODA = 26 años
Con una desviación estándar = 5.38 años

HOMBRES
X = 28 años
MEDIANA = 29 años
MODA = 23 años
Con una desviación estándar = 5.66 años

De 120 parejas referidas (240 pacientes) con antecedente de aborto espontáneo, en 8 pacientes
se encontró alteración de célula única (7 mujeres y 1 varón) con un número total de 22 abortos.
Las parejas presentaron de uno a cinco abortos espontáneos del primer trimestre de gestación.
(Tabla I)

Se aplicó la prueba no paramétrica de Kruskall-Wallis, para conocer la significancia que existe
entre el número de abortos y la frecuencia de alteración de célula única.
No. de abortos / Frecuencia de alteraciones de célula única
H = 8.421 con un grado de libertad.
p = 0.004 (p<0.05). Altamente significativa
Por lo que podemos deducir que la presencia de alteración de célula única es significativa en
relación al número de abortos espontáneos que se presentaron en nuestro estudio.
De las 120 parejas, 48 presentaron 2 abortos espontáneos, siendo este grupo el de mayorfrecuencia (Tabla II) (Gráfica 1)
En todos los grupos, ya sea con uno o cinco abortos, se identificaron alteraciones de célula
única. Es importante resaltar que a pesar de que el grupo de parejas con 5 abortos espontáneos es
el más pequeño, se halló una alteración de célula única.
Llama la atención que la alteración de célula única encontrada en el grupo de parejas con uno y
cuatro abortos espontáneos presentaron una translocación 7; 14 con puntos de ruptura muy
similares.
24

Cabe resaltar que el cromosoma 14 es el que principalmente se observó involucrado en todos los
rearreglos.
Al analizar las translocaciones y los puntos de ruptura encontramos que los cromosomas 7 y 14
fueron los más frecuentemente involucrados en estos rearreglos cromosómicos, así como la
región 14q32. (Tabla III)
La frecuencia más alta de las translocaciones de célula única se observó en la 7; 14 (0.375)
(Tabla IV)
De los rearreglos que involucrarón translocaciones 7; 14 los puntos de ruptura fueron diferentes
entre sí, pero semejantes a los reportados en la literatura.

Tabla I

FRECUENCIA DE ALTERACIONES DE CÉLULA ÚNICA EN PAREJAS DE UNO A
CINCO ABORTOS ESPONTÁNEOS DEL PRIMER TRIMESTRE DE GESTACIÓN

PACIENTE EDAD SEXO No. DE
ABORTOS/
EN LA
PAREJA
ALTERACIÓN DE
CÉLULA ÚNICA
FRECUENCIA
1 25años Femenino 2 46,XX,t(13;14)(q33;q24) 1
2 21 años Femenino 1 46,XX,t(7;14)(p14;q32) 1
3 30 años Femenino 4 46;XX,t(7;14)(p13,q32) 1
4 32 años Femenino 4 46,XX,dirdup(14)(q32qter) 1
5 26 años Femenino 2 46,XX,t(1;16)(p34;q34) 1
6 33 años Masculino 5 46,XY,t(4;6)(q24;q24) 1
7 39 años Femenino 3 46,XX,t(7;14)(q11.1p11.1) 1
8 20 años Femenino 1 46,XX,t(2;13)(q22;q33) 1
26

TABLA II

FRECUENCIA DE ALTERACIÓN DE CÉLULA ÚNICA Y NÚMERO DE ABORTOS

No. DE PAREJAS No. DE ABORTOS No. DE CASOS FRECUENCIA
36 1 2 0.06
48 2 2 0.04
21 3 1 0.05
9 4 2 0.22
6 5 1 0.17
27

Gráfica 1
Frecuencia de alteraciones de célula única en 120 parejas con
antecedente de aborto espontáneo.

0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
1 2 3 4 5
NÚMERO DE ABORTOS
F
R
E
C
U
E
N
C
I
A
28

Tabla III

FRECUENCIA DE LOS PUNTOS DE RUPTURA DE CÉLULA ÚNICA

PUNTOS DE RUPTURA DE CÉLULA ÚNICA TOTAL
1p34 1
2q22 1
4q24 1
6q24 1
7p13 1
7p14 1
7q11.1 1
13q32 1
13q33 1
14p11.1 1
14q24 1
14q32 3
16q24 1

TABLA IV
FRECUENCIA DE LAS TRANSLOCACIONES DE CÉLULA ÚNICA

La siguiente tabla muestra los datos obtenidos por diferentes grupos de trabajo para la incidencia
de t(7;14); en nuestro estudio se obtuvo una frecuencia de rearreglos cromosómicos de 1.3X10-3
y de 5X10-4 para la translocación 7;14.
TRANSLOCACION
DE CELULA UNICA
No. DE REARREGLOS FRECUENCIA
1;16 1 0.125
2;13 1 0.125
4;6 1 0.125
7;14 3 0.375
13;14 1 0.125
30

TABLA V
INCIDENCIA DE t(7;14) EN CULTIVO DE LINFOCITOS
No. DE METAFASES INCIDENCIA
CENTRO DE
ESTUDIO
No. de
individuos
No. de
células
t(7;14)
(q33-36;q11-12)
t(7;14)
(p13-15;q11-12)
t(7;14)
otros
Total t(7;14)
por
persona
t(7;14)
por
célula
FRECUENCIA REFERENCIAS DIAGNOSTICO
Denver
Colorado
300 600 3 1 4 1/75 1/1500 6x10-4 Hecht et al (1975) Asesoramiento
genético
Denver
Colorado
2500 40000 17 17 1/147 1/2353 4x10-4 Hecht et al (1979)
Tempe
Arizona
240 2800 2 2 1/120 1/1400 7x10-4 Kaiser-McCaw et
al (1979)

Atlanta
Georgia
852 21300 1 4 5 1/170 1/4260 2x10-4 Beatty- De Sana
et al (1975)
Retraso mental y
familiares
Halifax
Canadá
250 5000 2 1 3 1/83 1/1667 5x10-4 Welch an Lee
(1975)
Diagnosticos diversos
Stockholm
Sweden
45 5500 6 6 12 1/4 1/458 2x10-3 Zech and
Haglund(1978)
Hombres y mujeres
de varios proyectos
de investigación
Paris
France
12500 50000 16 28 44 1/284 1/1136 8x10-4 Aurias et al
(1980)

Johannesburg 1402 32300 6 6 12 1/117 1/2692 3x10-4 Wallace et al
(1984)
Diagnosticos diversos
Johannesburg 3462 45000 6 6 12 1/228 1/3750 2.6x10-4 Wallace et al
(1984)
Diagnosticos diversos
Lund
Sweden
1595 17545 5 6 11 1/145 1/1595 6.2x10-4 Petersson and
Mitelman(1985)

Bangalore
India
1561 31220 3 5 8 1/195 1/3902 2.5x10-4 Reddy and
Thomas (1985)
Anomalías
cromosómicas
Rochester 11915 16599
1
42 39 1 82 1/145 1/2024 4.9x10-4 Dewald et al
(1986)
Diagnósticos diversos
Indianapolis 140 3500 1 4 5 1/28 1/700 1.4x10-3 Higgins and
Palmer (1987)
Parejas con múltiples
abortos
Hosp.Gral.
Manuel Gea
González
240 6000 3 3 1/80 1/2000 5x10-4 (1997) Parejas con
antecedente de aborto
espontáneo
31

DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos muestran que la alteración de célula única se observo en el 3.3%
de los pacientes estudiados (240), siendo entonces un 6.6% como parejas estudiadas (120).
La frecuencia de célula única en nuestro estudio fue de 1X 10
-3
, en el estudio realizado por
Higgins y Palmer (1987) se reportó una frecuencia de 2x 10
-3
diferencia que pudo deberse a
la selección de la muestra ya que en nuestro estudio se incluyeron pacientes con antecedente
de uno a cinco abortos espontáneos y en el de Higgins y Palmer (1987) la muestra se
seleccionó con base a 2 o más abortos, es importante señalar que no existe en la literatura
otro reporte que relacione pérdidas reproductivas con este tipo de rearreglos.
La alteración que se observó con mayor frecuencia fue la t (7; 14) siendo entonces una
frecuencia de 5 X 10
–4
que comparada con la población estudiada de Higgins y Palmer
(1987) mostró diferencia ya que su frecuencia de 1.4x10
-3
siendo esta mayor que nuestro
estudio.
En otros estudios realizados con diferentes poblaciones las frecuencias varían de 1.4x10
-3

Higgins y Palmer (1987) a 8x10
-4
Aurias et al (1980), lo que refleja que esta variación
pueda deberse a diferencias en la selección de pacientes.
Aún cuando se han postulado varias teorías con relación a este hallazgo se considera que los
cromosomas 7 y 14 pueden tener una gran inestabilidad por la frecuencia en que se
presentan.
Zech y Hagland (1978) reportaron que el receptor de células-T esta formado por las
cadenas, alfa (α) y beta (β), y que el gen para la cadena beta del receptor de células -T
humanas esta localizado en el brazo largo del cromosoma 7 en la banda q35, como esta
32

región se encuentra propensa a desarrollar rupturas in vivo, probablemente refleja
inestabilidad generada por rearreglos somáticos de los genes del receptor de células -T
durante la diferenciación normal en esta línea celular.
Croce y cols (1985) mediante hibridación in situ reportaron que el gen que codifica la
cadena alfa (α) del receptor de células -T , se localiza en la banda 14q11-q12, región que
consistentemente esta involucrada en translocaciones e inversiones detectables en
leucemias de células-T y linfomas; así entonces el locus para la cadena α puede participar
en la activación del oncogen en tumores de células-T.(36)
Jones y cols (1985) observaron en células híbridas somáticas de humano - roedor que
existen genes que codifican la cadena α del receptor de células - T humanas y que mapean
en el cromosoma 14 humano. Estos genes codifican dos diferentes clases de antígeno
receptor que están presentes en el mismo cromosoma, los rompimientos involucrados
en los cromosomas 7 y 14 son frecuentes en tumores de células - T. (37)
Las translocaciones de célula única en cultivos de linfocitos pueden ocurrir in vitro o in
vivo, los puntos de ruptura 7p13-15, 7q35 y 14q11 en las translocaciones 7;14 involucran
genes para las cadenas α ,β, γ en los receptores antigénicos de células-T humanas, las
translocaciones cromosómicas pueden estar relacionadas con los rearreglos que ocurrendurante el desarrollo somático de la unidad receptora de células-T, o pueden ser debido a
la alta actividad en la transcripción de sitios específicos en la célula-T. Los puntos de
ruptura entre los cromosomas 7 y 14 tienen su explicación posiblemente en que la
mayoría de los rearreglos ocurrieron durante la estimulación con PHA, esto también
revela una consistente asociación con sitios frágiles.
33

El hallazgo de translocaciones de célula única en parejas con aborto habitual puede reflejar
una inestabilidad de estos cromosomas. Estos rearreglos también pueden ocurrir en la línea
germinal y causar descendencia anormal o pérdidas gestacionales debido a un cariotipo
anormal.
Estos rearrreglos también pueden ocurrir in vivo; su origen puede estar relacionado con la
edad, mosaicismo o embarazos previos. Las anormalidades de célula única pueden indicar
mosaicismo parental. Covone y cols (1984) propusieron que células del trofoblasto fetal
pasan a la circulación materna por lo que las anormalidades de célula única pueden ser el
residuo de un primer embarazo en el cual las células fetales han permanecido en circulación
materna. (38)
Sciorra y cols en (1992) reportaron un mosaico bajo de una translocación 7/14 en el padre
de un paciente con 7q+ y múltiples anomalías congénitas. El estudio cromosómico del
padre se realizó en linfocitos y fibroblastos y sólo se encontró una célula alterada en
linfocitos. El sitio de ruptura del cromosoma 7 coincidía en padre e hijo, lo cual es un
hallazgo poco usual pero significativo. (39)
Estos rearreglos cuando ocurren en las células germinales pueden incrementar las pérdidas
gestacionales o ser el reflejo de translocaciones crípticas que escapan al estudio citogenético
o pueden estar relacionados a un mosaicismo como ocurrió en el caso de Sciorra y cols.
Por lo que debe hacerse seguimiento en parejas o individuos con este tipo de alteración ya
que el seguimiento podría aclarar la significancia clínica de un evento aparentemente
aislado.
34

Al considerar la frecuencia de célula única en relación al número de abortos observamos
que aumenta a partir del cuarto aborto, lo cual puede ser una indicación de riesgo de
pérdidas reproductivas la presencia de este hallazgo.
En resumen la frecuencia de alteración de célula única en parejas con antecedente de aborto
aumenta en relación al número de abortos, lo cual puede ser una indicación de causa de
abortos como se observa en la Gráfica 1, aún cuando hasta el momento no existe una clara
significancia biológica de este hallazgo.
Es importante destacar que en este estudio también se encontró con mayor frecuencia la t
(7; 14) como se reporta en la literatura, lo cual indica que efectivamente son sitios
susceptibles de rearreglo cromosómico.
Es de llamar la atención que en este estudio el hallazgo de célula única se observó en
diferentes años y en diferentes estaciones del año, lo que hace pensar que existe algún
mecanismo intrínseco entre estos dos cromosomas específicamente y con ciertos puntos de
ruptura que provocan estos intercambios cromosómicos pero que pueden ser la causa de
pérdidas gestacionales en parejas con antecedente de aborto espontáneo.

SUGERENCIAS

Seria importante considerar el realizar la comparación de este estudio con otros grupos, como
incluir parejas que tengan hijos con múltiples malformaciones congénitas, parejas con niños con
Síndrome de Down, parejas con niños con retraso mental y parejas con niños con alteraciones
cromosómicas, y así contar con una comparación con otras patologías para obtener una
significancia biológica más amplia con respecto a nuestro estudio.
Específicamente en este estudio es importante seguir estudiando a este tipo de parejas pero
además con un grupo de comparación que contase con las siguientes características:
1.- Parejas sin antecedente de aborto espontáneo.
2.- Parejas sin antecedente de alteración cromosómica.

CONCLUSIÓN

1.- En todos los grupos, aún con diferente número de abortos se identificaron alteraciones de
célula única.
2.- Estos rearreglos se presentaron de manera preferente en el sexo femenino, siendo sólo un
caso el que se reporta en el sexo masculino.
3.- No se encontró relación alguna entre hallazgo de célula única, edad, y/o número de abortos.
4.- Los cromosomas que preferencialmente estuvieron involucrados fueron el 7 y 14.
5.- El cromosoma que con mayor frecuencia se vio involucrado en todos los rearreglos fue el
cromosoma 14.
6.- La frecuencia de rearreglos cromosómicos en nuestro estudio fue de 1.3 X 10
-3.
7.- La frecuencia para la traslocación 7; 14 fué de 5X10
-4.

8.- La frecuencia de alteración de célula única en parejas con antecedente de aborto aumenta con
relación al número de abortos.

37
ANEXO
REACTIVOS
Heparina
Medio Mc Coy 5 A modificado (Gibco) Frasco de 100 ml
Por cada 100ml de medio agregar 1ml de antibiótico y 1 ml de glutamina.
Antibiótico: Penicilina-Estreptomicina (Gibco) Frasco de 20 ml liofilizada.
L- Glutamina-200ml 100X líquida Frasco de 20 ml
Heparina
Fitohemaglutinina (PHA) Gibco Frasco de 10 ml liofilizada.
Colchicina (Sigma) 10µg/ml
Solución hipotónica KCL 0.075M
Fijador: Metanol 3: 1 Ac. Acético
Tripsina 0.06%
Etanol al 30%
Eosina Azul de metileno en solución, según Wright para microscopía.
Eosina Azul de metileno solución Giemsa.
Buffer Sörensen pH 6.8
Solución isotónica NaCL 0.9%
Bicarbonato de sodio 7.5%
Película Kodalith Ortho 6556 tipo 3 de 35mm 30.Sm (100 pies)
Revelador Dektol Kodak
Fijador rápido universal Koda

38
RESULTADO: 46,XX,dirdup(14)(q32qter)

RESULTADO: 46,XX,t(2;13)(q22;q33)

40
RESULTADO: 46,XX,t(1;16)(p34;q34)

41
RESULTADO: 46,XX,t(13;14)(q33;q24)

42
RESULTADO: 46,XX,t(7;14)(p14;q32)

43
RESULTADO: 46,XX.t(7;14)(p13;q32)

RESULTADO: 46,XX,t(7;14)(q11.1;p11.1)

RESULTADO: 46,XY,t(4;6)(q24;q24)

BIBLIOGRAFÍA

1.- González-Merlo J, Del Sol JR, Fortuny A (1994): Obstetricia. Ediciones Científicas y
Técnicas, S.A. Salvat. Cuarta edición Barcelona España 295-316.

2. - Jacobs P (1977): Epidemiology of Chromosomal abnormalities in man. Am J
Epidemiol 105: (3): 180 – 191.
3. - Boué J, Boué A (1973) Chromosomal analysis of two consecutive abortuses in each of
43 women. Hum Genet 19: 275 – 296.

4. - Salamanca Gómez Fabio (1990): Citogenética Humana. Citogenética e Infertilidad.
Panamericana, México 189 – 200.

5. - Warburton D, Clarke F, Fraser F (1964): Spontaneous abortion risk in man. Data from
reproductive history collected in a Medical Genetics Unit. Am J Hum Genet 16: 1-25.

6. - Sant-Cassia LI, Cooke P (1981): Chromosomal analysis of couples with repeated
spontaneous abortions. Br J Obstet Gynecol 88:52–58.

7.- Armendares, S, Giner, J, Merino, G, Salamanca F (1976): Estudios cromosómicos en
pacientes azoospérmicos. Rev Invest Clín Méx 28: 375 – 394.

8. - Michels VV, Medrano C, Venne VL, Riccardi VM (1982): Chromosome traslocations
in couples with multiple spontaneous abortion. Am J Hum Genet 34: 507 – 513.

9. - Husslein P, Huber J, Wagenbichler P, Schnedl W (1982): Chromosome abnormalities
in 150 couples with spontaneous abortions. Fertil Steril 37: 379-383.

10. - Byrd JF, Askew DE, Mc Donough PG (1977): Cytogenetic findings in fifty -five
couples with recurrent fetal wastage. Fertil Steril 28: 246 – 250.

11. - Lippman-Hand A, Vekemans M (1983): Balanced translocations among couples with
two or more spontaneous abortions. Are males and females equally likely to be carriers.
Hum Genet 63: 252 – 257.

12. - Sachs ES, JahodaMGJ, Van Hemel JO, Hoogeboom AJM, Sandkuyl LA (1985):
Chromosome studies of 500 couples with two or more abortions. Obstetrics & Gynecology
65: 375-378.

13. - Bourrouillou G, Colombies P, Dastugue N (1986): Chromosome studies in 2136
couples with spontaneous abortions. Hum Genet. 74: 399-401.

14. - Castle D, Bernstein R (1988): Cytogenetic analysis of 688 couples experiencing
multiple spontaneous abortions. Am J Med Genet. 29: 549 – 556.

15. - Campana M, Serra A, Neri G (1986): Role of chromosome aberrations in recurrent
abortion: A study of 269 balanced translocations. Am J Med Genet 24: 341-356.

16. - Portnoi MF, Joye N, M.D., Van Den Akker J, Morlier G, Toillemite JL (1988):
Karyotipes of 1142 couples with recurrent abortion 72: 31 – 34.

17.- Canún S, Zafra G, Martúnez M, Di Castro P, García M (1988): Estudio clínico y
citogenético en 98 parejas con antecedente de aborto espontáneo. Ginec Obstet Mex
56: 273 – 276.

18. - Welch JP, Lee CLY, (1975): Non-random ocurrence of 7-14 translocations in human
lymphocyte cultures. Nature 255: 241-242.

19. - Aula P, Koskull H Von (1976): Distribution of spontaneous chromosome break in
human chromosomes. Hum Genet. 32. 143- 148.

20. - Beatty-DeSana JW, Hoggard M J, Cooledge JW. (1975): Non- random ocurrence of
7-14 translocations in human lymphocyte cultures. Nature 255: 242-243.

21.-Aymé S, Mattei JF, Mattei MG., Aurran Y, Giraud F. (1976): Non random distribution
of chromosome breaks in cultured lymphocytes of normal subjects. Hum Genet. 31: 161-
175.

22. - Zech L, Haglund U (1978): A recurrent structural aberration, t(7;14), in
phytohemagglutinin - stimulated lymphocytes. Hereditas. 89: 69-73.

23. - Aurias A, Dutrillaux B, Buriot D, Lejeune J (1980): High frequencies of inversions
and translocations of chromosome 7 and 14 in ataxia telangiectasia. Mutat Res 69: 369-374.
24. - Weemaes CMR , Hustinx TWJ, Scheres JMJC, van Munster PJJ, Bakkeren JAJM,
Taalman RDFM (1981): A new chromosomal instability disorder : The Nijmegen breakage
syndrome. Acta Paedriatr Scand 70: 557- 565.

25. - Hustinx TWJ, Scheres JMJC, Weemaes CMR., Haar BGA, Janssen AH (1979)
Karyotype instability with multiple 7/14 and 7/7 rearrangements. Hum Genet. 49: 199-208

26. - Cohen MM., Shaman M., Dagan J, Shmueli E, Kohn G (1975): Cytogenetic
investigations in families with ataxia-telangiectasia. Cytogenet Cell Genet 15:338-356.

27. - Wallace C, Bernstein R, Pinto MR (1984): Non - random in vitro 7; 14 translocations
detected in a routine cytogenetic series. 12 Examples and their possible significance. Hum
Genet 66: 157 – 161.

28. - Mattei MG, Ayme S, Mattei JF, Aurran Y, Giraud F (1979): Distribution of
spontaneous chromosome breaks in man . Cytogenet Cell Genet 23: 95-102.

29. - Isobe M, Erikson J., Emanuel B, Nowell P, Croce C (1985): Location of gene for β
subunit of human T- cell receptor at band 7q35, a region prone to rearrangements in T-
cells. Science 228: 580 - 582.

30. - Iskra P (1985): Somatic chromosome rearrangements detected in human lymphocytes.
Clin Genet 28: 438 A.
31. - Reddy K, Thomas I (1985): Significance of acquired non random 7/14 Translocations.
Am J Med Genet 22: 305-310.

32. - Dewald GW, Noonan KJ, Spurbeck JL, Johnson DD (1986): T- Lymphocytes with
7;14 translocations: Frequency of ocurrence, breakpoints, and clinical and biological
significance. Am J Hum Genet: 38: 520 – 532.

33. - Higgins M, Palmer C (1987): Single cell translocations in couples with multiple
spontaneous abortions. Hum Genet 75: 24-27.

34. - Moorhead P, Nowel P, Metlman W, Battips D, Hungerford D: (1960) Chromosome
preparations of leucocytes cultured from human peripheral blood. Exp. Cell Res. 20: 613-
616.

35. - ISCN (1995): An International System for Human Cytogenetic Nomenclature,
Mitelman F(ed); S Karger, Basel.

36. - Croce C, Isobe M, Palumbo A, Puck J, Ming J, Tweardy D, Erikson J, Mark D,
Rovera G (1985): Gene for α - chain of human T- cell receptor: Location on chromosome
14 region involved in T- Cell Neoplasms. Science 227: 1044 – 1047.

37. - Jones C, Morse H, Kao F, Carbone A, Palmer E (1985): Human T- cell receptor α -
chain genes: Location on hromosome 14. Science 228: 83–85.

38. - Covone A, Mutton D, Johnson P, Adinolfi M (1984): Trophoblast cells in peripheral
blood from pregnant women. Lancet II: 841-843.

39. - Sciorra L, Schlenker E, Toke D, Brady–Yasbin S, Day Salvatore D, Lee M (1992):
Low level mosaicism for a balanced 7;14 translocation in the father of an abnormal 7q+
child. Am J Med Genet 42: 296 – 297.

Portada
Índice
Resumen
Introducción
Marco de Referencia
Planteamiento del Problema Justificación Objetivo Diseño
Material y Métodos
Descripción de Procedimientos
Resultados
Discusión
Sugerencias
Conclusión
Anexo
Bibliografía