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II~Z() UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO FACULTAD DE MEDICINA DIVISION DE ESTUDIOS DE POSGRADO SERVICIO DE DERMATOLOGIA HOSPITAL GENERAL DE MEXICO OD. HIPERSENSIBILIDAD A LA SEMILLA DEL LINO SECDUNDARIA A LA SENSIBILlZACION PREVIA CON OTRO ALERGENO T ES I S D E P OS G R A D O HOSPiTAL GE~~ERAl DE MEXICO QUE PARA OBTENER EL TITULO EN LA ESPECIALIDAD DE ALERGIO E INMUNOLOGIA CLlNICA P R E S E N T A DRA. MARIA LUISA ALMEIDA REYNA ASESOR DE TESIS: DR. JOSE MEXICO D.F. MONTES MONTES AGOSTO 2005 2004. ~ IJO~- UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. Dr. Eduardo de Anda Becerril . ! 'ACIÓN Jefe de~ Departamento d~ ~nseñanz~IVISIÓN OE F. POL GRADO HospItal General de Mexlco O. D. FACULTA DlC\NA Dr. José Montes Montes Profesor Titular del Curso de Especialización de Alergia e Inmunología Clínica ¿¡:a~:fff\'? ............ --- U .N. A. L Autorizo I DlraccIón General de BIbIIotecII de " UNAM 8 difundir QI\ fOflll8to lle<f.fÓnlco e Impreso el contenido de mi trabajo rer.epclorfai NOMBRE: r-1ad?! J ( l!5ª e~:xx:~ I2cj rro FECHA: .22 .;xptlctnbr'C ólOO5 F'_' qtc 2 Universidad Nacional Autónoma de México HIPERSENSIBILIDAD A LA SEMILLA DEL UNO SECUNDARIA A LA SENSIBILIZACiÓN PREVIA CON OTRO ALERGENO Por Dra. María Luisa Almeida Director del curso: Dr. José Montes Montes Hnc;:nlít,,¡ General de México Jefe del Curso de Alergia e Inmunología Clínica Asesor de Tesis: Dr. José Montes Montes Colaboradores: Alejandro Rosas MC. Coordinador del Laboratorio del Servicio de Alergia e Inmunología Clínica Hospital General de México MÉXICOD. F. Dr. Jorge López López Jefe del Servicio de Alergia e Inmunología Clínica Hospital General de México Dr. Julio Casasola Médico Adscrito del Servicio de Reumatología <1"";:>1..1""" General de México AGOSTO 2005 3 AGRADECIMIENTOS A mi madre por su amor único e indestrucUble, porque como dijera el bohemio .. es ella, la que con su sangre me dio vida, y ternura y cariño. Porque aunque esperas los mejor de mí, me tal como soy. A mi esposo porque contigo soy yo misma, porque le has dado a mi vida más más alegria, más confianza; porque contigo he empezado una nueva que segura durará por "",.,"""'v'" A mi hermana porque he desde niñas lo bueno, lo mala, los sueños, los deseos, las alegrías y tristezas que al final hemos superado juntas, porque siempre estás cerca de mí. A mis abuelos por su amor, sus valorar los pequeños detalles para en mi vida. sus enseñanzas, por enseñarme a felicidad y por haber sido la mejor guía A mis tíos y primos por haber creído en mi y porque se que cuento con su apoyo incondicional. A mis maestros quienes me enseñaron que lo más importante de esta profesión no se encuentra en los libros, sino en los pacientes. Al Dr. Montes por haber confiado en mí y haberme dado la oportunidad de alcanzar esta meta. A Alex Rosas por su apoyo, paciencia y f'nrnn,r""""",it'm A todas las personas que me han enseñado que la vida es como un buen libro, cuanto más avanza uno, tanto más "' .... 'uu.'" .... ",i"",nifj('~,rln Gracias. 4 CONTENIDO .. Portada .. Agradecimientos .. Contenido .. Glosario .. Introducción y Marco Teórico .. Objetivos .. Material y Método .. Resultados .. Discusión .. Conclusiones .. Anexos .. Bibliografía 5 ELlSA FAST FCERI IgE IL kDa LT MHC PAF PG RAST Th2 GLOSARIO Prueba inmuno-absorbente ligada a enzimas Prueba fluoro-alergo-absorbente Receptor de Alta Afinidad para la fracción Fc de la Inmunoglobulina E Inmunoglobulina E Interleucinas Kilo Daltons Leucotrienos Complejo Principal de Histocompatibilidad Factor Activador de Plaquetas Prostaglandina Examen de Radio Alergo Absorción Linfocitos T cooperadores tipo 2 6 INTRODUCCIÓN Y MARCO TEÓRICO La sensibilización alérgica es más frecuente por mucosas que por vía cutánea. Los pacientes ató picos presentan una mayor incidencia de anafilaxia debido a alimentos, medio de contraste radiológico o exposición al látex. (1.2) Aproximadamente 1 de cada 1500-3000 pacientes hospitalizados en los Estados Unidos sufren de una reacción anafiláctica. El riesgo de muerte de quienes la padecen es del 1 %, ocasionando 1000 muertes por año. (3-5) Los síntomas de las reacciones alérgicas pueden variar desde las menos severas que .incluyen debilidad, mareo, eritema, urticaria, angioedema, náusea, vómito y que pueden progresar a síntomas más severos como obstrucción del tracto respiratorio, hipotensión y colapso vascular. (5) Los principales agentes causales de la anafilaxia son los alimentos (33%), picaduras de insectos (14%) y los medicamentos (13%). Los eventos que se inician durante el ejercicio corresponden a un 7% y en el 19% de los casos no se ha encontrado la causa. (3,5) En los niños, la alergia a alimentos ocurre en el 8% en mayores de 3 años y aproximadamente en el 2% de la población adulta. La mayoría de estas reacciones son ocasionadas por cacahuates, nueces, mariscos, leche, huevo y aditivos bisulfitos que se encuentran en muchos alimentos. El inicio de los síntomas se presenta generalmente a los 30 minutos después de su ingesta, aunque puede variar desde 20 minutos hasta 6 horas. (5) La alergia a alimentos se define como una reacción contraria, adversa a los alimentos que es mediada inmunológicamente y que incluye mecanismos IgE específicos y no específicos. Los síntomas pueden variar e incluyen manifestaciones gastrointestinales, cutáneas y respiratorias, hasta anafilaxis sistémica (4-6) Los alimentos están compuestos de proteínas, carbohidratos y lípidos, los principales alergenos de los alimentos son glícoproteínas hidrosolubles. En general, los alergenos son estables al tratamiento con calor, ácidos y proteasas. 7 Otras or(mff~d¡;;ldes que conocidas. (5) ser la causa de su ",1",rr""n¡(',(1I",ti no son del todo El conocer a nivel molecular los nnnf'ln,;,I",,, alergenos alimentarios nos facilita el entendimiento de los síndromes clínicos, esto incluye el síndrome de alergia oral. El síndrome de oral es debido a la de similitudes entre las secuencias de amino ácidos de los alergenos alimentarios y las que se encuentran en los y se necesita cerca del 70% de similitud en las secuencias para que esto se lleve a cabo. (4,6) Dentro de los síndromes conocidos por reactividad cruzada entre los alergenos respiratorios contenidos en el polen y los alergenos alimentarios se conocen el provocado por la polen de abedul, latexJfrutas, de manzana, zanahoria y avellana con el aves/huevo. Esto indica que debe existir un alergeno responsable de la sensibilización que se encuentre tanto en los pólenes como en los alimentos. (4.6) Las proteínas alergénicas de la reactividad cruzada son llamadas "panalergenos", debido a su estructura conservada (por ejemplo la profilina) contienen epitopos en las células lo que la reactividad cruzada entre los ;::¡I."rn~'nf"'" contenidos en los nnlpr,p", y los alimentos (6) En cuanto a la hipersensibilidad a la semilla del lino hasta el momento se conocen 11 casos reportados en la bibliografía, los cuales se han presentado clínicamente como anafilaxia. (7-101 Se ha sugerido la posibilidad de queen en los que no se conoce la causa de anafilaxis antígenos de alimentos poco comunes en alimentos preparados complejos como ensaladas, salsas y algunos alimentos distintivos de IJU'C;UIU;:' están siendo insuficientes la historia clínica y los diarios de alimentos para identificar el alimentario, por lo que sugieren la utilización de cutáneas como adyuvantes.(!!) Los autores eligieron antígenos que han sido que producen incluyendo semillas, entre ellas la semilla del lino, utilizando el método de prick con extractos glicerinados al 50%; la reacción se reportó como si la roncha era mayor o igual a 5mm con un control positivo de histamina y uno ne(laIIVO. En 94 de 102 pacientes la prueba cutánea resultó positiva para uno o varios de los "I",rn~'nr." 8 empleados y de estos en un paciente fue positiva para linaza; en 7 pacientes hubo correlación clínica positiva de sensibilidad. Todas las reacciones ante los antígenos alimentarios ocurrieron 4 horas después de su ingesta y en ningún paciente en los que hubo correlación clínica con el resultado de las pruebas cutáneas se presentaron nuevamente los síntomas una vez que el alimento fue excluido de su dieta. (11) El lino (Fig. 1) es una planta que pertenece a la familia Unaceae. (Linux usitatissimum), pelada con tallo único, de unos 0.8m de altura, de hojas simples lanceoladas y flores grandes de color azul; es una planta de está presente durante todo el año en forma de arbusto. Proviene de Asia Central y ha sido cultivada durante 5000 años. Los egipcios, hebreos, griegos y romanos utilizaron la linaza como alimento y fibra para confeccionar ropa, velas de barco y otros articulos. (12) Figura 1. Planta de Lino Hoy en día la frecuencia en su ingesta ha aumentado debido a su utilidad como fibra natural en grano, panes, galletas, o su aceite extraído del grano en casos de estreñimiento y como energético, además de su uso en la fabricación de barnices, pinturas, linóleo y jabón; las semillas se emplean también en comidas de animales (perros, gatos, pájaros, vacas) (12) 9 Se ha demostrado que la reacción alérgica es mediada por IgE por correlación clínica y por pruebas cutáneas por el método de prick con el extracto de linaza, examen de liberación de histamina, determinación de IgE total e IgE específica para el lino mediante inmunoCAP o RAST (examen de radio-alergo-absorción). (7- 12) En todos los casos excepto en un paciente había antecedentes de atopia personal manifestada como rinitis alérgica, asma o alergia alimentaria al huevo, pollo y mostaza y solo en un caso de anafilaxia no había podido ser demostrada su causa. En todos los pacientes se presentaron los síntomas después de la primera vez que ingirieron el alimento que contenía linaza a los 2 hasta los 30 minutos después, lo cual sugiere que debe existir una sensibilización previa al alergeno, sospechando que probablemente se trate de un cruce antigénico ya sea con un aeroalergeno, con otro alergeno alimentario, o por medio del contacto previo insospechado por la vía oral, ya que no se han reportado casos por inhalación del polvo en el procesamiento de la linaza ni se ha descrito como asma ocupacional mediada por IgE en trabajadores del lino, sin embargo, todavía no se ha podido demostrar. (7-12) Se ha sugerido una proteína multimérica de peso molecular de 150-175 kDa que disminuye a 35-100 kDa al reducir el grupo sulfidrilo como el alergeno responsable. León y colaboradores, en el año de 2002 reportaron que el alergeno implicado es un dímero, consistente en monómeros de 28 kDa unidos a grupos sulfidrilo (SH2). Un candidato podría ser la enzima malato deshidrogenada (MDH-1) encontrada en las semillas de linaza, un dímero de subunidades idénticas de 35 kDa. (9,10) 10 OBJETIVOS General Evaluar si existe sensibilización previa a algún alérgeno (incluyendo inhala bies y alimentos) que explique la reactividad cutánea en pacientes con alergia a la semilla deJ lino sin el. antecedente de haberla consumido. Particulares Determinar la frecuencia del consumo de linaza en un grupo de pacientes atópicos Determinar la frecuencia de reactividad cutánea a las proteínas de la semilla del lino en un grupo de pacientes atópicos. Evaluar la importancia de haber consumido linaza para que un grupo de pacientes atépicos presente reactividad cutánea él la semilla del lino. Valorar el patrón de reactividad cutánea a un panel de alergenos (inhalables y alimentos) en pacientes con prueba cutánea positiva y prueba cutánea negativa con el extracto de la semilla del lino. Analizar si existe asociación entre la reactividad cutánea al extracto de la semilla del lino y a otros alérgenos. Determinar la presencia de anticuerpos IgE específicos in vitro contra las proteínas de la semilla del lino en pacientes con reactividad cutánea a dicho alérgeno Determinar si existe reactividad cruzada entre las proteínas de la semilla del lino y otras proteínas presentes en los otros alergenos. II MATERIAL Y MÉTODOS Población: Pacientes que acudieron al Servicio de e Inmunología Clínica del Hospital General de México entre los meses de junio a del 2005. Diseño del estudio: Estudio prospectivo. transversal, observacional de 100 pacientes con historia de atopia. Encuesta descriptiva clínica mediante un cuestionario que incluya síntomas locales o sistémicos a los alimentos que más frecuentemente producen alergia, pruebas cutáneas por el método de a pólenes. hongos. otros inhala bies y alimentos Criteños de inclusión; Pacientes adultos con historia clínica con y antecedentes de síntomas de alergia oral a alimentos incluyendo a la semilla del lino demostrando hipersensibilidad tipo I in vivo a hongos u otros inhalables o alimentos por el método de prick. Criterios de exclusión: Pacientes que utilizaron medicación antihistamínica 72 horas antes del estudio, pacientes en los que no se demostró hipersensibilidad tipo I in vivo por método de prick a pólenes. hongos, otros inhalables o alimentos con tratamiento con Beta-bloqueadores, pacientes con otros trastomos pacientes que no deseen ingresar al estudio. del Extracto de la Semilla de Lino. La semilla de lino se maceró y el polvo se rl"",,,,nl"'lr<:> lavando 5 veces con una mezcla de etanol-acetona (1:1) y tres veces con éter etílico anhidro. El polvo se dejó secar y con este se preparó una en Solución Amortiguada de Fosfatos (PBS) pH 7.4 a una proporción 1 :10 (p/v). La mezcla se agitó durante 4 horas en frío. Posteriormente se y el sohrenadante se filtró con una membrana de 0.45 ~ de poro. Se cuantificaron totales por el método de Bradford (xx) y se a una concentración de 500 en Solución Salina Fenolada (Evan's) con a 12 Pruebas cutáneas. A todos los pacientes se les realizaron cutáneas por el método de con un panel de pólenes, hongos y otros inhalables (cucaracha y ácaros del y con el extracto de linaza Anexo 1). Cuando el paciente refirió síntomas compatibles con alergia a algún alimento en se le realizó la cutánea con ese alimento por el método de si se contaba con el extracto si no, en casos se utilizó el método de ·prick \lS el cual consiste en pinchar el alimento fruta o con una lanceta para posteriormente realizar una incisión en la piel del con la misma lanceta impregnada con el alimento. Para la positivo hislamina probados se muestran en la tabla 1. En los pacientes que así se requirió se nrn,n~lrnn por el realización de las (1 :1000 p/v) y como cutáneas se utilizó como negativo el diluyente. Los método de "prick vs prick" la manzana, pera, piña, durazno, fresa, uva, mandarina, zanahoria y toronja, Electroforesis en de Poliacrilamida en condiciones reductoras. Las proteínas del extracto de la semilla de lino se diluyeron en regulador de muestra 2X (Tris 0.5 M, al 10%, glicerol al 20%, azul de bromofenol al 0.01%. SDS al a una concentraciónde 3 La muestra se colocó en baño María a ebullición durante 15 minutos y se realizó la electrofóresis de acuerdo al sistema de Laemmli (13) en con una concentración de monómeros del 10%. Inmunoelectrotransferencia La IET se realizó de acuerdo al método de Towbin (14). del corrimiento de las proteinas en los de nnl,,,,,..,,I,,,,.,., las proteínas se transfirieron a membrana de nitocelulosa aplicando 250 mA por dos horas. Al término de la transferencia se cortó una sección del papel para ser teñido con tinta china 0.1 % en PBS para ver el patrón de proteínas totales. La membrana de nitrocelulosa con las proteínas transferidas se cortó en tiras de 4mm de ancho y se colocó en un que contenía de (gelatina al EDTA disódico 5mM, Tween 20 al 0.1% en TBS y se puso en durante toda la noche para bloquearla. Las membranas de nitrocelulosa ya se recubrieron con 1 mL del suero de los (1:10) en leche al 5% en PBS con 0.1% de Tween 20 y se incubó por dos horas a 13 temperatura ambiente con Posteriormente se hicieron 10 lavados de 1 minuto cada uno con solución de lavado al 0.1%). Se agregó 1.0 mL de un anticuerpo de cabra humana USA) conjugado a peroxidasa diluido 1 :20,000 en leche al 5% en PBS con 0.1 % de Tween 20 y se incubó a temperatura ambiente con los tiempos mencionados anteriormente. Una vez concluida la incubación se realizaron 10 lavados de un minuto cada uno con solución de lavado y la inmunodetección se realizo mediante con un comercial las instrucciones del fabricante. Rr,,,,,< • ..,.,,,,,,I·., el "",nr'''''' de esta técnica es que al actuar la enzima (peroxidasa) sobre su sustrato ("~'rt ... ",írln de el luminol se oxida. El luminol oxidado se encuentra en un estado de excitación, y en presencia de un realzador se da la emisión de luz cuando elluminol pasa a un estado de menor excitación. La luz emitida se en de Kodak, con un tiempo de exposición de 25 minutos. Las autorradiografía (Kodak). se revelaron con reactivos estándar para Purificación de los anticuerpos contra las de la semilla de lino. Una mezcla de sueros de los que mostraron el reconocimiento más intenso de las proteínas de la semilla del lino en la ínmunoelectrotransferencia se incubaron con las proteínas de la semilla de lino inmovilizadas en partículas de nitrocelulosa en agitación toda la noche en frio .. La se centrífugo y el sobrenadante que contenia los que no reconocieron las de la semilla de lino, se separó y se hasta su uso. Los contra las proteínas de la semilla de lino se mediante un cambio de pH con Glicina 0.2 M pH 2,5. El pH se neutralizó con solución salina con TRIS (TBS) 10 X, suficiente para alcanzar un de 7.2. La se centrífugo y el sobrenadante con los alcanzar una concentración isotónica y se ensayos de inmunoelectrotransferencia. Análisis estadístico. Se utilizaron las se diluyó hasta hasta su en los de Chi-cuadrada de Person para saber si los grupos de pacientes con cutánea al extracto de semilla de lino y el de pacientes con prueba cutánea son diferentes entre sí y la prueba exacta de Físher para comparar la frecuencia de reconocimiento de los 14 diferentes alergenos entre los dos grupos. Se consideró que la diferencia es e>íl'1,nlhf'<>!í\l<> con un valor de p 5: 0.05. Se calculó el riesgo relativo de .. w~",,,,nt'>r sensibilización a la semilla del lino con cada uno de los alergenos utilizando la Razón de Momios (RM) como medida de asociación ya que se trata de una patoloqi de baja prevalencia. (15-18). 15 RESULTADOS De tos 100 pacientes incluidos en el estudio, 31 son hombres (31%) y 69 mujeres con un edad promedio de 33.99 años de 15 a 68 años) ; 62 negaron haber consumido linaza hombres y 45 mujeres) y 38 referían haberla consumido por lo menos en una ocasión como parte de su dieta diaria (14 hombres y 24 92 Pacientes no refirieron síntomas de alergia con alimento y solamente 8 en por lo menos una ocasión síntomas compatibles con alergia demostrada por prueba cutánea n"'<1m,,,,, por prick con el extracto alergénico del alimento o por medio de la de VS prick con el alimento; 4 de estos 8 pacientes tenían el antecedente de haber consumido linaza. De los 1 00 ~~,-;~~.,'- estudiados, 95 fueron "o., ... ..,'mtr",. al ..,'ome,,,,, de la semilla del lino y 5 demostraron positividad cutánea con una los criterios utilizados en el Servicio de México. "';:'~JU"';:'lCl mayor o igual a 3+ del General de De los 5 n::l1r¡",nt~,,,, con resultado positivo al "'I",rn~'nf'l de la semilla del lino solo 2 referían haber consumido linaza. No hubo diferencia ",innítí"..,tnJ<> entre ambos grupos de acuerdo a la edad, género el antecedente de haber consumido o no linaza ni en cuanto a la alergia alimentaria. En el grupo con cutánea positiva al extracto de la semilla del lino los alergenos que con mayor frecuencia presentaron positividad (mayor o igual al 30%) fueron Amaranthus. Alnus. sinuata, Ambrosía. Artemisia. Artemisía. Artemisia. vulgaris, Atriplex. bracteosa, Cosmos. Cynodon. dactylon, Chenopodium. album, Franseria. Fraxinus spp., Helianthus. annus, Holcus Ligustrum vulgare, Lolium perenne, spp., Quercus spp., Rumex Salsola kaN, farinae, y de gato. En el grupo con cutánea negativa al extracto de la semilla del lino solamente 5 una 16 frecuencia mayor o igual al 30% que fueron Fraxinus spp., Ugustrum Quercus spp., 'arinae y Dermatophagoides como se muestra en las Gráficas 1 y 2. Al comparar la frecuencia de reactividad cutánea positiva con los diferentes ",¡",rn,'nr,,, n,-nh""U,,, entre los dos grupos estudiados se observó que A. sínuata, A. efalior, A. A. A. tridentata y C. bípínatus fueron los únicos ",¡",rn"nl','" que dieron una diferencia estadísticamente significativa. Es decir, que estos ",¡""rm>"r,,, fueron reconocidos con mayor frecuencia de la esperada en el grupo con prueba cutánea positiva con el extracto de la semilla de lino. Así mismo, se calculó la Razón de Momios para estos Tabla 1. Alergenos en los que la diferencia en la frecuencia de reactividad cutánea positiva fue estadísticamente significativa. Alergeno Línaza+ Linaza Valor de p Riesgo relativo A. sinuata 80% 15-8% 0.004 21.333 A. efatior 60% 8,4% 0.009 2.289 A. trífida 60% 8% 0_009 2.289 A. vufgaris 80% 3.2% 0.0001 4.84 A. tridentata 60% 3.2% 0.019 1.614 C. bipinatus I 60% 6.3% 0.005 2.342 .. Lll'laza + == PaCientes con prueba cutanea pOSitiva al extracto de la semilla de lino Linaza - == Pacientes con prueba cutánea al extracto de la semilla de lino • Para los estudios nollóQit:;Os se 2 sueros más de ""<:I,rí&>nlc,,, que resultaron con reactividad cutánea positiva al extracto de la semilla de lino y a las proteínas de A. vulgaris, siendo un total de 7 sueros, reconociendo en su conjunto 10 proteínas del extracto de la semilla de lino y 10 en el de A. vulgaris cuyo Peso Molecular oscilaba en un rango de 55-86kDa , encontrando reconocimiento en 3 de 7 sueros de una proteína de 55 kDa del extracto de la semilla del lino con intensidad moderada. Tres de A. fueron reconocidas en 4 de 7 sueros, las proteínas de 86kDa y 70 kDa mostrando reconocimiento moderado y una proteína de 60 kDa fue reconocida con elevada intensidad (Fig. 17 Por medio del estudio de inmunoelectrotransferencia con los anticuerpos específicos contra las proteínas de la semilla del lino se demostró que existe reconocimiento cruzado de proteínas presentes en A. vulgaris y proteínas de la semilla del lino (Fig. 3). No hubo correlación clínica-inmunológica entre el haber consumido o no previamente la semilla del lino con la intensidad del reconocimiento de las proteínas de ésta ya que los pacientes que tuvieron reconocimiento más fuerte en los ensayos de inmunoelectrotransferencia refirieron no haberla consumido 18 » r m ;;O G') m Z o A,$inuah Al.l.dtwieLtna ATridentAtI ..... o N O PORCENTAJE P0.236 w O ". o P D.009 P O.on9 01 en .....¡ o o o 0.004 0.009 t~::l:::::~::~;-1---r--1-"" O.(JOOl A.VuiogarU .............. C,'aiplhllll'Ct.tS ca, eJ FfaJltifIIUS HA ..... KH.llótptlNlhl LVW'QlilflD LPentnne PPratamr.e Pf05op1'1 """'c_ RCtisput SallloOhl (lO o rn ...:Ii. 15 10 ráfica 2. DIFERENCIAS EN LA REACTIVIDAD A ALIMENTOS -." r n r n n n °1 i I ~ ti j' ¡ill ji! ALIMENTOS Figura 2. Resultados inmunoelectrotransferencia sueros de los pacientes. de la de los 6 200 kDa- 125 85 39 31 19 \. .J\. ----' PROTEINAS DE PROTEINAS DE UNO A. vulgaris MPM = Marcadores de peso molecular; PT = Proteínas totales; 1 al 7 Sueros de los pacientes; 8 Mezcla de sueros de los pacientes ESTA TESIS NO SM.~ OE LA BIBI.IOTECA 19 Figura 3. Resultados de la inmunoelectrotransferencia de los sueros de los pacientes con los anticuerpos específicos contra la semilla de Lino MP P 1 2 3 1 2 3 200 kDa- 125 85 39 31 19 \ J , I PROTEINAS PROTEINAS DE A. DE LINO vulgaris MPM= Marcadores De Peso Molecular, PT= Protefnas Totales; 1 Mezcla de sueros positivos; 2 Anticuerpos específicos contra las proteínas de la semilla de lino; 3 sobrenadante 20 DISCUSiÓN Alrededor de un tercio de la población que acude al Servicio de Alergia e ,n{"\,{"\f'1'''' Clínica del Hospital General de México refiere haber consumido en por lo menos una ocasión la semilla de lino. lo que que su es alta y cada vez mayor ya que actualmente existen más alimenticios en el mercado que la contienen, sin embargo no existió correlación en cuanto a su consumo y la reactividad cutánea que los ante dicho ::ll",rfl",nn lo que otra vía de sensibilización diferente a la vía oral. El grupo de que presentaron reactividad cutánea al extracto de la semilla del lino también reactividad cutánea a varios otros inhalables, no así a alimentarios, en comparación con el grupo n""'1::lt,vn No hubo correlación estadísUca entre los pacientes con alimentaria y a la semilla del lino, lo cual apoya la posibilidad de que la sensibilización sea a través de la vía respiratoria. Las de lino de los ",Io,,,, •• n,,,,, relacionados con nrr,!oi,n'" U'''''''''''''''11'''' a A. A sinuafa. A. e/afior, A. en la semilla A. tridentata y C. mC;llmuu,s_ Esta correlación hace pensar que para que se lleve acabo una reacción de I ante las proteínas de la semilla del lino aún durante un contacto con ésta debe existir reconocimiento cruzado de un ",,,,r,,,,rifírn que reconozca tanto a las proteínas en estos presentes en la semilla del lino. por lo que el calculado de desarrollar hipersensibilidad a la semilla del lino en los n::llri",nt".", alérgicos a estos "ni.,,,.,,, es de 2 hasta 21 veces mayor en comparación con los pacientes que no reactividad cutánea a estos alergenos, 1) Los Pesos Moleculares de las proteínas reconocidas por los sueros de los con reactividad cutánea a la linaza están en el mismo rango que los descritos en el estudio de León y colaboradores (13) 21 Probablemente, alguna de las proteínas reconocida por la de pacientes con reactivídad cutánea con el extracto de la semilla de lino, cruce anligénicamente con alguna de las del polen de A. vulgaris, y sea responsable de la sensibilización a las previo de este. de la semilla del lino aun en ausencia de consumo 22 CONCLUSIONES La importancia de la alergia a la semilla del lino se debe a que su consumo o su utilización en otros productos va en aumento y que los síntomas que se presentan llegar a ser de anafilaxia aún al primer contacto. Si la frecuencia del consumo de la semilla del lino del grupo estudiado a la población diríamos que un terdo de la la ha consumido en algún momento de su vida, sin embargo, hacen falta más estudios para conocer la frecuencia de consumo real. La a A. vulgaris no es el único factor de riesgo implicado para el desarrollo de a la semilla del lino, también se observó diferencia estadística para los J'lIPr(1~>nf"1i'" de los de A. A. e/atior, A. trífida, A. tridentata y c. t1/IJIIni'J[/JS No se obselvó relación entre el consumo previo de la semilla del lino y el desarrollo de reactividad cutánea, además los n:::l,,.I<>nl,,,,<: que presentaron reconocimiento más fuerte por anticuerpos específicos de las de la semilla del lino negaron haberla consumido anteriormente. El grupo de nJ'lr:lpnIP con reaclividad cutánea al extracto de la semilla del lino se reactividad cutánea a varios otros alergenos no asi a alimentarios, al igual que el grupo sin reactividad al extracto de la semilla del lino, lo que apoya la teoría de que probablemente la vía de sensibilización sea por inhalación y no por vía oral, al igual que sucede en el síndrome de oral. Con este estudio se pudo demostrar el cruce antígénico entre proteinas de la semilla del lino y A. vu/garis ya que al anticuerpos que reconocen de la semilla del lino se observó que estos también reconocen es necesario continuar el estudio del cruce antigénico con el resto de los nl'\l<>(1,,:,,:: que resultaron con una en el de A. vulgaris. Sin diferencia estadísticamente significativa para identificar la o las proteinas que 23 puedan ser las del desarrollo de hipersensibilidad posterior a las proteínas de la semilla del lino. No descartamos la posibilidad de que se trate de un panalergeno nuevo o alguno de los ya reportados. 24 ANEXO I Al ergenos utilizados en las prue b as cu aneas e Pólenes Hongos AH ... ", ... v,," Amaranthus palmer; Rhizopus spp. r, Alnus sinuata i Gandida albicans Soya i Ambrosia elafior Otros Inhalables Trigo ! 41.:b, v,,,,, trifida Dermatophagoides farinae I Camarón ludoviciana ~ '~t'-g I Nuez pteronyssínus Artemísia tridentata Cucaracha Pescado Artemísia vulgarís Plumas de pollo Pollo Atriplex bracteosa Lana Puerco Gosmos bipinatus Pelo de gato Res Gynodon -J Pelo de perro Huevo Ghenopodium a/bum Leche Franseria tenuifolía Semilla de lino I=raxinus spp, Helianlhus annus Holcus ,,,¡,, Ligustrom vulgare Lo/ium perenne Phe/um pratense Prosopis spp. Quercus spp. I Rumex crispus I I i • Sa/sola kali I 25 BIBLIOGRAFíA 1. Holgate S, Church M, Lichtenstein L. Alergia. 2d ed. Madrid: Harcourl; 2002. p. 387. 2. Abbas A, Lichtman A, Pober J. Inmunología celular y molecular. 2d ed. 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