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Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 152 El lago de Zapotlán el Grande. Jalisco, un ecosistema frágil y susceptible a la contaminación microbiana nociva, que llega en sus efluentes. Lake Zapotlan in Jalisco Mexico, a fragile ecosystem susceptible to harmful microbial contamination from its effluents. 1Adán Sepúlveda Montes, 1María Belén Rodríguez Fajardo, 1Gonzalo Rocha Chávez, 1Elia Margarita Rodríguez Chávez, 2María Dolores Méndez Robles. 1Centro Universitario del Sur. Av. Enrique Arreola Silva, No. 883. C.P. 49000 Ciudad Guzmán, Mpio. de Zapotlán el Gde. Jalisco. México. Tel. 01 (341) 5 75 22 22, 2Centro Universitario de los Altos. Carretera a Yahualica Km 7.5, Tepatitlán de Morelos, 47600, Jalisco, México, Tel. 01 (378) 7828033 Ext. 56834. adans@cusur.udg.mx/gonzalor@cusur.udg.mx/eliar@cusur.udg.mx/nelbe907@gmail.com / mdmendez@cualtos.udg.mx RESUMEN. A la laguna de Zapotlán arriban durante todo el año en mayor o menor medida arroyos y canales con agua pluvial y doméstica, con aguas crudas o pre tratadas y posiblemente contaminada con microorganismos, lo que genera siempre la incertidumbre de saber si el agua puede utilizarse con seguridad para la población. El objetivo del trabajo consistió en conocer la concentración de organismos coliformes totales (OCT) y organismos coliformes fecales (OCF) como principales indicadores de la calidad microbiológica del agua. Se trabajó en 9 estaciones de muestreo, que son los espacios donde regularmente se práctica la pesca, natación, el canotaje y remo, en la laguna de Zapotlán. El estudio se realizó durante los meses de septiembre a diciembre de 2011, recolectando cada 8 días una muestra de 500 ml por estación de muestreo, en total 10 muestras por estación. La toma, traslado y procesamiento de la muestra al laboratorio se efectuó como lo señala la Norma Oficial Mexicana NMX-AA-102-1987. Los resultados señalan que para org. coliformes fecales el 51% de muestras está dentro del límite permitido por la norma, para servicio al público con contacto directo y un 34.4% con niveles permitidos solo para servicio al público con contacto indirecto u ocasional y solo el 15% o sea 13 muestras son las que rebasan el límite máximo. Se concluye que la presencia de OCF es evidencia de la entrada de materia fecal en la laguna. Se comprueba que independientemente de la estación de muestreo, los riesgos de entrar en contacto con aguas contaminadas persisten en toda la laguna. Es necesario realizar monitoreos constantes para Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 153 poder observar el comportamiento de la calidad microbiológica del agua de la laguna y tomar si lo requiere, medidas correctivas inmediatas. ABSTRACT. Streams of waste water, either treated or not, along with rain runoffs arrives to lake Zapotlan throughout the year and potential bacterial contamination arise concerns among population of that municipality in the state of Jalisco México. The lake is used for recreational purposes and microbiological contents are important for safe usage of such water vessel. The objective of this study was to determine the concentration of total coliform (TC) and fecal coliform (FC) as main bacterial indicators of water quality. Nine sampling sites where fishing, swimming, canoeing and rowing are regularly practiced in the lake were stablished as monitoring stations. A total of ten samples 500 ml each were collected from every site starting September to December 2011 at a weekly interval. Sampling and processing were carried out according to the Official Mexican Standard NMX-AA-102-1987. The results showed that 51% of samples are within the limit for direct contact and 34.4% for indirect or occasional contact whereas only 15% of samples exceed the maximum limit. Because of the presence of FC, it was concluded that fecal content is entering the lagoon in a regular basis. Regardless of the sampling site, risks of contacting contaminated water is constant throughout the entire lagoon. Continuous monitoring is needed in order to determine bacterial contamination in water as a tool for carrying corrective measures in a timely manner. Palabras claves: Laguna de Zapotlán, Organismos Coliformes Fecales, Organismos Coliformes Totales. Key words: Fecal Coliforms, Total Coliforms, Lake Zapotlán INTRODUCCIÓN La laguna de Zapotlán, se localiza en la parte occidental de México en el Sur de Jalisco, a 135 km de la ciudad de Guadalajara, limitada al Este por las pendientes de la Sierra del Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 154 Tigre; lo que propicia condiciones excepcionales de biodiversidad de flora y fauna, así como un gran atractivo turístico (De la Rosa y col., 2005; García 2009; Pacheco y col., 2004. La laguna de Zapotlán, se encuentra en una sub - cuenca endorreica (cerrada) con una extensión de 499 Km2, en la cual los aportes pluviales y fluviales son las principales fuentes de abastecimiento de agua, formándose una gruesa capa de agua de un promedio de 2.5 m, la cual es aprovechada para uso agrícola debido a su alta cantidad de nutrientes. (Gómez, G.C y col., 2009) El agua es un recurso imprescindible para la supervivencia del ser humano y el desarrollo de todas las formas de vida. Sin embargo el hombre mediante actividades domésticas, de consumo, de recreo, agrícolas e industriales; ha provocado un proceso de deterioro y contaminación de las mismas al alterar su calidad, es decir, sus características físicas, químicas y biológicas. (Chiroles y col., 2007; Pacheco y col., 2004) La calidad biológica del agua, está determinada por los contenidos orgánicos presentes y dentro de este grupo se encuentran los microorganismos, en general representados por parásitos, hongos y bacterias; que en mayor o menor medida son patógenos para los humanos y animales. (De Orellana 2009). Para obtener una estimación de la calidad del agua, desde hace años se han propuesto diversos indicadores biológicos; basándose en la evaluación de organismos presentes en los sistemas acuáticos. Por tanto, la microbiología juega un papel muy importante para definir que especies microbiológicas se pueden utilizar como indicadores. (Rigola 1989) El uso de microorganismos bioindicadores de calidad del agua disminuye los costos y facilita la implementación de medidas eficientes de tratamiento, control del agua y de enfermedades asociadas a su transmisión. (Ríos, S. y col., 2017) No podemos decir que determinado tipo de agua puede o no puede ser utilizada hasta no conocer la concentración de estos grupos indicadores y el uso que se le va a dar dependerá de este estudio, pues según las Normas Mexicanas según el número de microrganismos encontrados puede tener diversos usos; agrícola, industrial, recreativo (deportivo) de trabajo (pesca o uso de otros recursos naturales de estos espacios) e incluso para agua potable, siempre y cuando cumpla con los parámetros establecidos. (Marco y col., 2004) Tradicionalmente, los grupos de bacterias considerados como indicadores son los coliformes totales y coliformes fecales. (Chiroles y col., 2007; Félix y col., 2008) Calidad microbiológica del agua de la laguna de Zapotlán el Grande. Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congresoy al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 155 Aunque en muchos países, incluido el nuestro, se han puesto en práctica acciones costosas encaminadas a disminuir la contaminación microbiológica del agua de ríos, arroyos y lagos, la morbilidad de las enfermedades transmitidas por agua de origen microbiano, sigue siendo motivo de preocupación. (De la Rosa y col., 2005; Fernández 2004) Son muchos los factores que favorecen la presentación de este problema, lo que dificulta tomar medidas preventivas; por ejemplo los de tipo cultural, social, tecnológicos, políticos, económicos y sobre todo de tipo sanitario. (Diersing 2009; Fernández 2004) Mala potabilización del agua, nulo o poco mantenimiento de los pozos, agua de drenaje sin un tratamiento correcto que son vertidas en ríos, arroyos o lagos, utilización de esta agua contaminada para riego de frutas u hortalizas, falta de vigilancia sanitaria constante, eficiente y eficaz, entre otros factores, son los que dificultan tener un control seguro de estos ambientes acuáticos, para quienes la usan o la consumen. (Fernández 2004) Partiendo de estos antecedentes y teniendo conocimiento que a la laguna de Zapotlán arriban durante todo el año en mayor o menor medida arroyos y canales con agua pluvial y doméstica, con aguas crudas o pre tratadas y posiblemente contaminada con microorganismos, todo esto genera siempre la incertidumbre de saber si el agua puede utilizarse con seguridad para la población. Considerando estas problemáticas y pensando en dar respuestas a algunas de ellas, se trabajó este proyecto, el cual vertió información sobre el comportamiento de la calidad del agua de este ecosistema, observando por otro lado la correlación que pudiera existir entre el lugar de descarga de este tipo de agua y el grado de contaminación de este espacio. Se trabajó básicamente en conocer la concentración de organismos coliformes totales (OCT) y organismos coliformes fecales (OCF) como principales indicadores de la calidad microbiológica del agua de la Laguna de Zapotlán. METODOLOGÍA Durante 5 años, investigadores de la Universidad de Guadalajara y de otras Universidades de Canadá, realizaron estudios en la Laguna como parte de un proyecto de recuperación de los humedales en esta región de Jalisco, desde entonces se decidió establecer 13 estaciones de muestreo dentro del perímetro de la laguna, que hasta hoy han servido de referencia para estudios como éste. (Hernández y col., 2009) Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 156 En esta investigación, se decidió utilizar solo 9 estaciones de muestreo, (Figura 1) que son los espacios donde regularmente se práctica la pesca, natación, el canotaje y remo, en la laguna de Zapotlán. El estudio se realizó durante los meses de septiembre a diciembre de 2011, recolectando cada 8 días una muestra de 500 ml por estación de muestreo, en total 10 muestras por estación. Para llegar a cada una de las 9 estaciones de muestreo seleccionadas, se utilizó una lancha acuática propiedad del Centro Universitario del Sur, la cual debía ser tirada con vehículo especial y depositada en el lago cada vez que se tomaban las muestras. La técnica empleada para la toma, traslado y procesamiento de la muestra al laboratorio se realizó tal y como lo señalan la Norma Oficial Mexicana NMX-AA-102-1987 y Norma Oficial Mexicana NOM-112-SSA1-1994. (DOF. 1992; DOF. 1994). Figura 1 Ubicación de las estaciones de muestreo en la Laguna de Zapotlán el Grande. Jalisco (imagen tomada de Google Earth 2012) Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 157 Para proceder al análisis de resultados los datos fueron recabados en una hoja Excel para el acomodo inicial de los datos, y fueron analizados con el software Statistix® para determinar las medidas de tendencia central. De igual forma, el coeficiente de variación fue aplicado para determinar el grado de variación entre los diferentes parámetros del estudio. (ISD. 2005). De acuerdo a la norma NOM-003-ECOL-1997 (tabla 1), para este tipo de agua, señala un límite máximo permitido para organismos coliformes fecales de 240 NPM/ 100 ml., para servicio al público con contacto directo, como es natación, paseos en lancha, remo, canotaje y esquí. Mientras que considera un límite máximo permitido de 1000 NPM/ 100 ml., para servicios al público con contacto indirecto u ocasional, como es riego de jardines, camellones en avenidas, barreras hidráulicas de seguridad y panteones entre otros. (SEMARNAP. 1997) Tabla 1 Límites máximos permisibles de contaminantes según NOM-003-ECOL-1997 Tipo de reúso Promedio mensual Coliformes fecales NMP/100 ml Huevos de Helminto (h/l) Grasas y Aceites mg/l DBO5 mg/l SST mg/l Servicios al público con contacto directo 240 1 15 20 20 Servicios al público con contacto indirecto u ocasional 1,000 5 15 30 30 RESULTADOS Y DISCUSIÓN Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 158 Los resultados se analizaron considerando lo que la norma exige para aquellos lugares donde desembocan aguas tratadas, y de acuerdo con lo anterior se muestra lo siguiente. Las bacterias coliformes, no deben estar presentes en sistemas de abastecimiento, almacenamiento y distribución de agua, y si así ocurriese, ello es indicio de que el tratamiento fue inadecuado o que se produjo contaminación posterior. (American Public Health Association 1993) Es importante considerar que el grupo de OCT, incluye microorganismos que no necesariamente son de origen fecal, sino que estos están en el medio ambiente y de ahí llegan por el escurrimiento del agua de la lluvia a la laguna. El hecho de que a la laguna lleguen ríos o arroyos, la hace susceptible a su vez, de contaminación por aguas residuales, los cuales como lo menciona un trabajo realizado en el rio San Pedro principal corriente en el Estado de Aguascalientes, México, las cargas de coliformes totales y fecales fueron muy altas y ambos parámetros presentaron valores prácticamente iguales en las 43 estaciones que revisaron, una coincidencia con la laguna Zapotlán donde se realizó la investigación, es que en el rio San Pedro, también son depositadas cerca del 96 % de las aguas residuales tratadas y crudas generadas por los diversos sectores. Lo resultados de este estudio fueron muy claros y es que el 93 % de estos sitios superaron entre tres y seis órdenes de magnitud (100 000 a 100 000 000 NMP/100 ml) el criterio para coliformes totales (1000 NMP/100 ml) y fecales (100 NMP/100 ml). (Guzmán, C.G. y col. 2011) Figura 2. Resultados de OCT por estación de muestreo Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 159 La figura 2, muestra los resultados encontrados por estación de acuerdo a tres niveles de contaminación, y aunque este grupo no es considerando como referente para determinar si existe riesgo de contaminación de acuerdo a la Norma, si es importante considerarlo como referente con el grupo de organismos coliformes fecales, resaltando que no existen una estación en particular que se diferencie estadísticamente por tener un mayor presenciade este grupo. Respecto a este mismo grupo pero considerando los resultados por semana de estudio (figura 3) , se observa que las semanas 4, 5 y 6 tuvieron el mayor número de muestras con el nivel más bajo de contaminación, siendo precisamente en estas semanas cuando se realizaron los juegos panamericanos; actividad deportiva realizada en este lugar como una subsede. Lo que hace suponer que existió una mejor atención al tratamiento en estos días a como se realiza de manera regular. Figura 3. Resultados de OCT por semana de muestreo Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 160 Por otro lado, la figura 4, muestra resultados muy interesantes, pues para este grupo si es importante observar los límites permisibles por la Norma, de acuerdo con esto observamos que por estación 46 muestras, es decir el 51% está dentro del límite permitido por la norma, para servicio al público con contacto directo y un 34.4% (31 muestras) con niveles permitidos solo para servicio al público con contacto indirecto u ocasional y solo el 15% o sea 13 muestras son las que rebasan el límite máximo (tabla 1). Pacheco y col. 2004, reportaron que la calidad microbiológica de las muestras de agua subterránea en los sistemas municipales de abastecimiento en el Estado de Yucatán, México., en un 45% de las muestra tenían de 0 – 10, el 23% de 10 a 100 un 18% mostraron de 100 a 1000 mientras que el 14%, tenía más de 1000 OCT por 100ml de agua analizada, este último dato muy similar a nuestro resultado, donde el 15% de las muestras estudiadas rebasaron el límite máximo permitido por la norma. Figura 4. Resultados de OCF por estación de muestreo En los datos de la figura 5, podemos observar tres momentos, en las primeras 6 semanas se observa como un número considerable de muestreos, está por debajo de la Norma, excepto en las semanas 2 y 3 que aparecen varios de estos muestreos con números que van de 240 ufc/ml a 1000 ufc/ml. Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 161 Figura 5. Resultados de OCF por semana de muestreo Después de hacer un análisis cuidadoso, es probable pensar que esto pudo ser atribuido a la presencia de los efectos del huracán Jova, que ocurrió en estos días, y que trajo una precipitación pluvial de hasta 50 mm/cm2 de agua, lo cual trae como consecuencia natural la entrada de gran cantidad de agua de otros afluentes naturales a la laguna (escurrimientos que se unen a arroyos y canales), además de los que vierten aguas tratadas, y esto a su vez trae por consecuencia algo que inclusive se puede dar en todos los países del mundo, cuando ocurren este tipo de fenómenos, como el caso de que las plantas de tratamiento no se den abasto para poder tratar tal cantidad de agua y por ello se deja pasar con un tratamiento incompleto o muy probable sin este proceso. Las semanas 4,5 y 6 por su lado muestran que la mayoría está dentro del límite permitido, excepto una muestra, más sin embargo en las últimas 4 semanas se obtuvieron 28 muestras (78%) con recuentos fuera de Norma. En esta investigación también se realizó un análisis de los datos obtenidos, con la finalidad de dar a conocer el coeficiente de correlación de Pearson utilizando el software Statistix® y así saber cuánto influye la zona de la laguna donde se descargan las aguas de Cd. Guzman (afluente A) y Gómez Farías (afluente B), ambos del Estado de Jalisco, y el grado de contaminación encontrado en cada estación de muestreo. Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 162 En las 10 semanas de muestreo, se analizó la correlación que existe entre las estaciones y el tipo de afluente (A, B), para conocer el grado de contaminación de OCT y OCF y la influencia que la distancia de los afluentes tenía en el aumento o disminución del número de cada uno de los grupos analizados. Para realizar este estudio se procedió a medir las distancias entre las estaciones y cada uno de los afluentes, (utilizando la herramienta para medición de Google Earth) congregando las estaciones al afluente A o B que estuviera más cerca según fuera el caso, excepto la estación 8, que se consideró para ambos afluentes por estar aproximadamente a la misma distancia. Se observó una fuerte correlación negativa entre las estaciones cercanas al afluente B, (1, 3, 4, 8, 9 y 11) y el número de coliformes fecales, encontrados, sobre todo en las semanas 1, 2, 4, 5 , 9 y 10, lo que quiere decir que durante esas semanas, entre más distancia existe entre el afluente y la estación, menor es el número de coliformes fecales encontrados (r = - 0.88) sin embargo en las otras semanas del estudio que son la 3, 6, 7 y 8 no hubo correlación entre estos dos factores estudiados. (r = - 0.11). Contrariamente a lo esperado, en el afluente A, hubo una correlación positiva entre la distancia y el número de coliformes fecales, indicando que entre mayor era la distancia al afluente contaminante, mayor es el número de coliformes encontrados. (r = 0.89). Otros factores que pudieron haber intervenido en estos resultados además de los mencionados es el temporal de lluvias, que distribuye más homogéneamente la contaminación que llega por toda la laguna, las corrientes naturales de la misma laguna. CONCLUSIONES La presencia de organismos coliformes fecales, es evidencia de la entrada de materia fecal en la laguna. Es necesario realizar monitoreos constantes para poder observar el comportamiento de la calidad microbiológica del agua de la laguna, y si así lo requiere tomar las medidas correctivas de forma inmediata. Mantener el agua de la laguna con una calidad microbiología aceptable, depende en gran medida de una buena disposición por parte de las instancias responsables. Revista Latinoamericana el Ambiente y las Ciencias 10(23): 152-164 2019 Memoria en extenso. XII Congreso y al XVIII Curso Taller Internacional sobre Cuencas, Humedales y su Rehabilitación. 163 No existe relación entre la distancia encontrada de la entrada de agua tratada a la laguna (afluente A y B) y el grado de contaminación por OCT y OCF que se encontró en cada estación estudiada. Se determina que independientemente de la estación de muestreo, los riesgos de entrar en contacto con aguas contaminadas persisten en toda la laguna. BIBLIOGRAFÍA American Public Health Association, American Water Works Association, Water Environment Federation. (1993). Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. American Public Health Association. Ed.18. Washington, D.C. Chiroles, S.; González, M.I.; Torres, T.; Valdés, M. (2007). Bacterias indicadoras de contaminación fecal en aguas del río Almendares. Hig. Sanid. Ambient. 7: 222-227 De la Rosa, M.E.; Vargas, J. G. (2005). El caso de las Micro y Pequeñas Empresas en la Laguna de Zapotlán. 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