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“DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE UN EQUIPO DE FOTOBIOESTIMULACIÓN BASADO EN DIODOS LÁSER DE =850 NM PARA APLICACIONES DE BIOESTIMULACIÓN EN OBJETOS BIOLÓGICOS” T E S I S QUE PARA OBTENER EL GRADO DE: MAESTRO EN CIENCIAS EN INGENIERÍA ELECTRÓNICA PRESENTA: ING. MAURICIO HERNÁNDEZ VIZUET ASESOR DR. ALEXANDRE MICHTCHENKO MÉXICO, D. F. A 28 DE MARZO DEL 2007. INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERÍA MECÁNICA Y ELÉCTRICA SECCIÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO E INVESTIGACION i Índice. Glosario………….……………………………………………………………........ 1 Resumen…………………………………………………………………………... 2 Abstract…………………………………………………………………………… 2 Objetivo…………………………………………………………………………… 3 Justificación…………………………………………………………………….…. 4 Capítulo 1 – Antecedentes y estado del arte 1.1 Introducción……………………………………………………….…... 6 1.2 Factores importantes en el proceso de fotobioestimulación……...…… 9 1.3 Aplicaciones de la fotobioestimulación en biología……………...….. 12 Capítulo 2 – Características generales de los láseres. 2.1 Introducción………………………………………………….….…… 15 2.2 Operación básica del láser……………………………………..…….. 18 2.3 Características por tipos de láseres……………………………….….. 20 2.4 Clasificación de seguridad en los láseres.…………….…………..….. 23 2.5 Seguridad en láseres….………………………………………….….... 25 Capítulo 3 – Diodos láser. 3.1 Introducción……………………………………………………….…. 29 3.2 Diferencias entre los LED’s y los diodos láser…………………......... 33 3.3 Comparación de diferentes tipos de láseres………………………..… 34 3.4 Seguridad en el uso de diodos láser……………………………….…. 34 3.5 Diodos láser………………………………………………………….. 35 3.6 Construcción de un diodo láser……………………………………..... 36 ii 3.7 Diodos de alta potencia en el espectro visible……………………..… 38 3.8 Diodos láser de alta potencia…………………………….……….….. 38 3.9 Diodos láser pulsados de alta potencia………………………….…… 39 3.10 Diodos láser de emisión por la cavidad superficial vertical (Vertical Cavity Surface Emitting Laser Diodes -VCSEL).………....….….… 39 3.11 Características del haz de un diodo láser……………………..…….. 41 3.12 Coherencia espacial de los diodos láser……………………...…...… 43 3.13 Coherencia temporal en los diodos láser…………………….……... 43 Capítulo 4 – Desarrollo del sistema con diodos láser. 4.1 Introducción……………………………………………………..…… 45 4.2 Características de los diodos láser y circuitos controladores………… 46 4.3 Controladores para diodos láser de alta potencia…………………….. 48 4.4 Diodo láser utilizado en el diseño del sistema láser…………...…….. 48 4.5 Diseño de la fuente de poder…………………………………………. 50 4.6 Diseño de la parte de control……………………………………..….. 53 4.7 Programación de la PC a través de Visual Basic 6.0…………...……. 57 4.8 Propuesta de desarrollo de una matriz de láseres IR con λ = 850 nm…….………………………………………………..……. 60 Capítulo 5 – Experimentos sobre semillas de trigo (Triticum aestivum L) 5.1 Materiales y método…………………………………………..……… 65 5.2 Resultados…………………………………………………..………... 70 Discusión de resultados………….…………………………………..………….. 78 Conclusiones generales………….…………………………………..…………... 81 Trabajo a futuro………….………………………………………..……………. 82 iii Referencias……………………………………………………….………….…... 83 Apéndice A: Estadística. A.1 Algunos conceptos básicos…………………………………….….… 86 A.2 Arreglo ordenado……………………………………………….….... 89 A.3 Datos agrupados y distribución de frecuencias……………….…...… 90 A.4 Estadística descriptiva: medidas de tendencia central……….…..….. 93 A.4.1 La media aritmética……………………………….…..…… 94 A.4.2 La mediana……………………………………….…..……. 94 A.4.3 La moda……………………………………………...….…. 95 A.5 Estadística descriptiva: medidas de dispersión………………….…... 95 A.5.1 El rango o intervalo de variación………………...... 96 A.5.2 La variancia……………………………………...… 96 A.5.3 La desviación estándar………………………...…….97 A.6 La distribución normal………………………………………...…….. 97 A.7 Coeficiente de correlación…………………………………...……… 99 A.8 Error estándar de la media…………………………………..……... 101 iv Índice de figuras. Capítulo 1 – Antecedentes y estado del arte Figura 1.1. Efectos de bioestimulación en función de la longitud de onda para un cultivo de E.coli cuando la intensidad y el tiempo son constantes y la longitud de onda varía………………………………………………………….. 9 Figura 1.2. Efectos de bioestimulación en función de la longitud de onda para la síntesis de DNA en un cultivo de células HeLa cuando la longitud de onda varía………………………………………………………………….. 10 Figura 1.3. Importancia de la intensidad y del tiempo de irradiación adecuados para la estimulación del crecimiento de un cultivo de células de E.coli…… 10 Figura 1.4. Respuesta de estimulación para los sistemas biológicos…………………….. 12 Capítulo 2 – Características generales de los láseres Figura 2.1. Operación básica de un láser………………………………………………… 18 Capítulo 3 – Diodos láser. Figura 3.1. Diodo láser de homo estructura……………………………………………… 30 Figura 3.2. Diodo láser de hetero estructura…………………………………………… 30 Figura 3.3. Diagrama de las bandas de energía para una unión PN de doble hetero estructura……………………………………………………………………. 31 Figura 3.4. Construcción de un diodo láser de hetero estructura………………………. 31 Figura 3.5. Dispositivo de diodo láser………………………………………………….. 36 Figura 3.6. Composición de un diodo láser……………………………………………. 37 Capítulo 4 – Desarrollo del sistema con diodos láser. Figura 4.1. Gráfica de potencia de salida contra corriente de operación en un diodo láser…………………………………………………………………………. 46 Figura 4.2. Imagen del diodo láser utilizado para el diseño del sistema láser…………… 49 Figura 4.3. Circuito de polarización de la fuente de voltaje……………………………... 50 Figura 4.4. Circuito de encendido lento para la fuente de voltaje………………………... 51 Figura 4.5. Configuración del circuito LM317 como fuente de corriente……………….. 52 Figura 4.6. Circuito de alimentación del diodo láser con encendido lento……………… 52 Figura 4.7. Fuente de alimentación construida para la alimentación del diodo láser……. 53 Figura 4.8. Terminales del microcontrolador AT89C52. ……………………………….. 54 Figura 4.9. Diagrama de conexiones del microcontrolador para el control de los tiempos de v irradiación…………………………………………………………………… 55 Figura 4.10. Interfaz de usuario desarrollada para la lectura de los datos del microcontrolador…………………………………………………………… 58 Figura 4.11. Interfaz de usuario observada cuando se ha seleccionado un tiempo de irradiación de 15s……………………………………………………… …...59 Figura 4.12. Imagen de la tarjeta construida para la etapa de control……………………. 60 Figura 4.13. Área de la distribución gaussiana considerada para el proceso de radiación...61 Figura 4.14. Traslape de las distribuciones gaussianas para la producción de un haz casi homogéneo………………………………………………………………..… 61 Figura 4.15. Implementación de la matriz láser…………………………………………... 62 Figura 4.16. Conexión de los diversos diodos láser al circuito de alimentación………… 63 Capítulo 5 – Experimentos sobre semillas de trigo (Triticum aestivum L) Figura 5.1. Distribución gaussiana obtenida para el eje X……………………………….. 65 Figura 5.2. Distribución gaussiana obtenida para el eje Y……………………………….. 65 Figura 5.3. Ubicación del láser para la visualización del haz láser con λ=850nm para la posterior radiación de las semillas de trigo………………………………….. 66 Figura 5.4. Haz láser visto a través de una cámara infrarroja……………………………. 66 Figura 5.5. Haz láser visto a través de una cámara de CCD……………………………... 67 Figura 5.6. Área de radiación definida a partir de las distribuciones gaussianas obtenidas tanto para X como para Y………………………………………….67 Figura 5.7. Proceso de radiación de las semillas…………………………………………. 68 Figura 5.8. Radiación de semillas de trigo dentro del área definida……………………... 69 Apéndice A: Estadística. Figura A.1. Histograma para una serie de datos…………………………………………. 92 Figura A.2. Polígono de frecuencia para una serie de datos……………………………... 93 Figura A.3. Gráfica de la distribución normal…………………………………………… 98 Figura A.4 Gráfica de una correlación positiva perfecta con r = +1……………………... 99 Figura A.5 Gráfica de una correlación positiva alta con r = +0.8………………………... 99 Figura A.6 Gráfica de una correlación positiva baja con r = +0.1……………………… 100 Figura A.7 Gráfica de una correlación cero con r = 0………………………………….. 100 Figura A.8 Gráfica de una correlación negativa perfecta con r = -1…………….……… 100 vi Índice de tablas. Capítulo 2 – Características generales de los láseres Tabla 2.1. Clasificación de los láseres en base a su potencia de salida…………………... 25 Capítulo 4 – Desarrollo del sistema con diodos láser. Tabla 4.1. Valores máximos de operación del diodo láser para una temperatura de 25º C……………………………………………………………………….. 49 Tabla 4.2. Características ópticas y eléctricas del diodo láser para una temperatura de 25ºC………………………………………………………………………... 49 Capítulo 5 – Experimentos sobre semillas de trigo (Triticum aestivum L) Tabla 5.1. Planeación de los experimentos para el proceso de radiación………………… 68 Tabla 5.2. Porcentaje de germinación para las semillas de trigo (Triticum aestivum L)…..70 Tabla 5.3. Estadística descriptiva para la plúmula………………………………………...70 Tabla 5.4. Porcentajes de germinación en semillas de trigo para una intensidad de 12.5 mW/cm2…………………………………………………………………………70 Tabla 5.5. Estadística descriptiva para la longitud de la plúmula del control y de los diferentes tiempos de irradiación para una intensidad de 12.5 mW/cm2………..71 Tabla 5.6. Porcentajes de germinación para el control y los diferentes tiempos de irradiación para una intensidad de 25 mW/cm2……………………………….. 72 Tabla 5.7. Estadística descriptiva para la longitud de la plúmula del control y de los diferentes tiempos irradiación para una intensidad de 25 mW/cm2…………… 72 Tabla 5.8. Porcentajes de germinación para el control y los diferentes tiempos de irradiación para una intensidad de 50 mW/cm2………………………………... 73 Tabla 5.9. Estadística descriptiva para la longitud de la plúmula del control y de los diferentes tiempos irradiación para una intensidad de 50 mW/cm2…………… 74 Tabla 5.10. Porcentajes de germinación para el control y los diferentes tiempos de irradiación para una intensidad de 100 mW/cm2……………………………. 75 Tabla 5.11. Estadística descriptiva para la longitud de la plúmula del control y de los diferentes tiempos irradiación para una intensidad de 100 mW/cm2………... 75 Apéndice A: Estadística. Tabla A.1. Tabla para los datos de la plúmula del control general sin arreglar…………... 89 Tabla A.2. Tabla para los datos de la plúmula del control general con arreglo ordenado……………………………………………………………………… 89 vii Índice de gráficas. Capítulo 5 – Experimentos sobre semillas de trigo (Triticum aestivum L) Gráfica 5.1. Crecimiento de la plúmula en semillas de trigo para una I = 12.5 mW/cm2……………………………………………………………. 71 Gráfica 5.2. Crecimiento de la plúmula en semillas de trigo con I=25mW/cm2………….. 73 Gráfica 5.3. Crecimiento de la plúmula en semillas de trigo con I=50mW/cm2………….. 74 Gráfica5.4. Crecimiento de la plúmula en semillas de trigo con I=100mW/cm2…….…… 76 Gráfica 5.5. Crecimiento de la plúmula para las distintas intensidades y los distintos tiempos (Vista frontal)………………………...……………………………. 77 Gráfica 5.6. Crecimiento de la plúmula para las distintas intensidades y los distintos tiempos (Vista lateral)………………………………………………………. 77 Gráfica5.7. Porcentaje de crecimiento para una intensidad de 15 mW/cm2 y tiempos de 15, 30, 60 y 120 s………………………………………………………… 79 Gráfica5.8. Porcentaje de crecimiento para una intensidad de 30 mW/cm2 y tiempos de 15, 30, 60 y 120 s………………………………………………………… 79 1 Glosario. nm nanómetros. λ Longitud de onda de la luz. Sus unidades son los namómetros (nm). He-Ne láser de Helio-Neón. I Intensidad de radiación. Sus unidades se expresan en [W/cm2]. t Tiempo de aplicación de la radiación láser. Sus unidades son los segundos [s]. UV Radiación Ultravioleta. DNA Ácido desoxirribonucleico D Dosis de energía por centímetro cuadrado [J/cm2]. TLBP Terapia Láser de Baja Potencia. Láser Acrónimo de la palabra Amplificación de luz por emisión estimulada de radiación (Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation). IR Radiación infrarroja. CW Onda continua. CA Corriente alterna. CD Corriente directa. RF Ondas de Radio Frecuencia. FEL Láser de electrones libres (Free Electro Laser). Q Factor de calidad de que se encuentra en un resonador del tipo Fabry-Perot o en un resonador externo conectado al láser. TRC Tubo de rayos catódicos. Nd Abreviación del Neodimio. CDRH Centro de Dispositivos y Salud Radiológica (Center for Devices and Radiological Health). GaAs Material semiconductor de Arsenurio de Galio. AlGaAs Material semiconductor de Arsenurio de Galio Aluminio. VCSEL Diodos láser de emisión por la cavidad superficial vertical (Vertical Cavity Surface Emitting Laser Diodes). FP Cavidad de resonancia del tipo Fabry-Perot. Plúmula Pequeño brote de una planta, que durante la germinación proporcionará el tallo y las hojas. Radícula Parte del embrión de las plantas que da lugar a la raíz. 2 Resumen Este trabajo tiene como propósito general el desarrollar un sistema de radiación láser utilizando diodos infrarrojos con λ = 850 nm para poder buscar parámetros adecuados de la luz láser que nos permitan estimular sistemas biológicos. Este trabajo está dedicado al estudio de los fenómenos de bioestimulación en el trigo (Triticum aestivum L) y sobre este sistema se buscarán los parámetros óptimos de la luz para producir su estimulación. Para poder buscar los parámetros óptimos de la luz que puedan producir estos efectos de bioestimulación primero se construirá un prototipo de un sistema con diodos láser para después poder experimentar en el sistema biológico propuesto y buscar estos parámetros. Abstract This work has as principal objective to develop a laser system using infra red lasers diodes with λ = 850 nm to study some parameters that can stimulate biological systems. This work is dedicated to study bio-stimulation effects in wheat (Triticum aestivum L) and for this system some optimum parameters will be searched to produce stimulation. First the system will be designed and constructed, and then biological experiments will be done using this laser system. 3 Objetivo. Este trabajo está dedicado a la investigación de los efectos de fotobioestimulación en semillas de trigo provocados por luz láser infrarroja de alta intensidad y al diseño de un prototipo basado en diodos láser que proporcione una radiación adecuada para obtener estos efectos. El propósito de éste trabajo no es el de investigar los procesos bioquímicos que sucede dentro de los sistemas biológicos, sino encontrar los parámetros óptimos de la luz láser que permitan activar sus mecanismos biológicos. Mediante los resultados de la experimentación con estas semillas se pretende diseñar un prototipo electrónico que permita irradiarlas con los parámetros óptimos de radiación con luz láser infrarroja de λ = 850 nm para así provocar los efectos de fotobioestimulación antes mencionados. 4 Justificación. El éxito de la producción de granos y forrajes se basa en gran medida en el uso de semillasde alta calidad. Para lograr esto es necesario llevar a cabo investigaciones que permitan generar semillas mejoradas para producir mayor cantidad de alimento por unidad de superficie. La producción de semillas mejoradas requiere del uso de diversas técnicas y metodologías especializadas, entre las que se encuentran el análisis de las características de las semillas, que permitan evaluar su calidad y potencial agrícola. Normalmente esta mejora en la calidad de las semillas se logra a través de métodos físicos, químicos, biológicos y genéticos. En muchos casos los métodos utilizados son invasivos llegando de esta forma al consumo humano. Desde hace algunos años se ha observado que el estimular estos sistemas con luz ha permitido mejorar algunas de sus características por lo que en este trabajo se pretende trabajar con este método debido a las ventajas que presenta al no ser un método invasivo. 5 Capítulo 1 Antecedentes y estado del arte. Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 6 1.1 Introducción En algunas teorías de índole científico se ha propuesto que la energía electromagnética ha sido un factor determinante para el desarrollo de la vida en la Tierra. De todo el espectro radio eléctrico se ha designado a la luz como la energía electromagnética que mayor participación ha tenido en el desarrollo de la vida. Debido a esto, desde hace algunas décadas se ha estudiado el efecto de la luz sobre diversos sistemas biológicos. [1] Algunas investigaciones realizadas de forma reciente muestran que la luz, en especial la de color rojo, puede activar y desactivar genes en las células. A su vez en otras investigaciones se incorpora el uso de luz láser de He-Ne y se muestra que es posible acelerar el crecimiento de las plantas, aumentar la taza de germinación y mejorar la resistencia a enfermedades y plagas. [2,3] De igual forma algunas investigaciones realizadas en el Instituto Politécnico Nacional sobre foto-bioestimulación en semillas de maíz (Zea mays L.), trabajos previos sobre estimulación en semillas de trigo, lechuga y pepino, muestran que es posible acelerar algunos procesos en las semillas como lo es el crecimiento utilizando luz láser producida por diodos láser. [29-32] Los láseres nos permiten aplicar dosis de luz altamente monocromática con una eficiencia e intensidad mayor a la que se obtendría mediante otras fuentes de luz, como la luz solar o lámparas acopladas a filtros especiales. Actualmente los procesos de manufactura de los diodos láser y su gran demanda han provocado la disminución de sus precios, lo que hace del diodo láser un dispositivo adecuado para este tipo de investigaciones y aplicaciones, además de que presenta las características necesarias para producir ciertos fenómenos de estimulación. [4,5] Para poder provocar los fenómenos de bioestimulación, existen algunos parámetros que son determinantes para que se produzcan estos fenómenos; estos son el nivel de Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 7 monocromaticidad de la luz, su longitud de onda λ (nm), la intensidad I (mW/cm2) y el tiempo de aplicación t (s). [4,5] Aunque el estudio de estos efectos se ha estado realizando desde hace décadas, se carece de estudios completos que especifiquen las características que debe presentar la luz para producir efectos de fotobioestimulación útiles. Por esto, es necesario un estudio que nos permita determinar los parámetros óptimos de irradiación. La palabra bioestimulación significa estimular sistemas biológicos a través de diversos métodos, estos pueden ser físicos, químicos, biológicos o genéticos. La finalidad de llevar a cabo esto, es la producción de sistemas biológicos con mejores características, esto es, inmunidad a ciertas enfermedades, mejoramiento de los sistemas cuando estos ya se han deteriorado debido al paso del tiempo, mejoramiento de alguna de sus características físicas, mejoramiento de algunas de sus características fisiológicas, aumentar la taza de crecimiento de los sistemas biológicos, etc. [6,13] Desde hace décadas se han hecho estudios con luz para la producción de los fenómenos antes mencionados. Se ha experimentado con fuentes de luz no coherente y con luz coherente (luz láser) siendo esta última de interés en el presente trabajo. Las primeras publicaciones relacionadas con la terapia láser de baja intensidad aparecieron hace más de 30 años. Desde entonces se han publicado aproximadamente 2000 estudios sobre este tema controversial. En la década de los 60 y 70 diversos doctores en la unión europea, principalmente en la Unión Soviética y en Hungría, desarrollaron activamente la bioestimulación láser. Sin embargo, diversos científicos alrededor del mundo han abordado este tema y han abierto un escepticismo acerca de la credibilidad de la interacción de la luz láser visible con los diversos sistemas biológicos estudiados y su modificación a nivel molecular. [7] Actualmente esta rama de bioestimulación de sistemas biológicos con luz láser aún esta muy lejos de pertenecer a una rama establecida de la medicina o de la biología, pero hay Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 8 publicaciones en revistas de prestigio donde se ha observado que la luz láser interactúa con los sistemas biológicos a niveles moleculares alterando su funcionamiento. [2-9] De forma general existe una absorción de la luz de baja intensidad por moléculas no especializadas denominadas moléculas foto-receptoras; estas moléculas pueden absorber la luz en ciertas longitudes de ondas y no pertenecen a órganos especializados para la recepción de la luz. La molécula que absorbe la luz puede transferir la energía absorbida a otra molécula la cual se activa y genera cambios químicos en el tejido circundante. De forma alternativa la molécula primigenia activada por la luz puede tomar parte de forma directa en las reacciones químicas del tejido. En este caso particular la molécula foto- receptora no es propia del sistema, sino que se ha introducido en él para la producción de los fenómenos de estimulación. Hay otra forma de producir efectos de bioestimulación en sistemas biológicos y esto se logra radiando estos sistemas con luz de una longitud de onda específica que pueda activar algunos de sus componentes nativos, alterando de esta forma su metabolismo. Este tipo de estimulación es la base para la terapia con láser de baja potencia. Los métodos de terapia con luz no utilizan específicamente un láser, estos pueden utilizar fuentes convencionales de luz que generen la longitud de onda específica para el proceso (terapia con luz UV). En el caso de la bioestimulación láser, los láseres nos permiten aplicar dosis de luz altamente monocromática con intensidades mayores a las que se obtendrían con otras fuentes de luz; además la eficiencia de un diodo láser está por encima de otras fuentes de luz. De igual forma con un láser se puede obtener luz en una longitud de onda específica con un ancho espectral relativamente angosto. El láser permite investigar el comportamiento de los organismos vivos en longitudes de onda a las que normalmente no se exponen. En general los láseres son herramientas muy útiles que proporcionan varias ventajas como lo son: el uso de fibras ópticas para irradiar partes internas del cuerpo, alta mono-cromaticidad y fácil sintonización de la longitud de onda, uso sencillo, son seguros eléctricamente en el caso de láseres con semiconductores. Actualmente la fotoestimulación con láser de baja potencia utiliza láseres de He-Ne con una λ=632.8 nm [3-5,7] así como láseres de semiconductores y LED’s. [4] Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 9 1.2 Factores importantes en el proceso de fotobioestimulaciónExisten tres factores que son determinantes para la obtención de una respuesta foto- química y foto-biológica temprana: la longitud de onda (nm), la intensidad (W/m2) y la dosis (J/m2). La longitud de onda (nm) y el nivel de monocromaticidad son determinantes para la aparición de los efectos de bioestimulación mientras que la intensidad (W/m2) y el tiempo de aplicación (seg.) con una longitud de onda determinan la magnitud de los efectos. [4] Figura 1.1. Efectos de bioestimulación en función de la longitud de onda para un cultivo de E.coli cuando la intensidad y el tiempo son constantes y la longitud de onda varía. [4] En la figura 1.1 es posible observar en el eje “x” el valor de la longitud de onda y en el eje “y” el crecimiento de células en un cultivo de E.coli. El valor de 1.0 corresponde al nivel de control. Se puede observar que con un valor de longitud de onda de aproximadamente 450 nm se tiene una estimulación en el crecimiento del sistema biológico del 50%. Posteriormente a esta longitud de onda es posible observar otras amplitudes máximas en aproximadamente 550 y en 630 nm. Posterior a esta última longitud de onda se puede observar que para la región infrarroja la amplitud de la respuesta comienza a incrementarse paulatinamente suponiendo una estimulación máxima en alguna región del Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 10 infrarrojo por arriba de una longitud de onda de λ = 750nm. Es de aquí la importancia de buscar fenómenos de estimulación en longitudes de onda del infrarrojo. Figura 1.2. Efectos de bioestimulación en función de la longitud de onda para la síntesis de DNA en un cultivo de células HeLa cuando la longitud de onda varía. [4] En la figura 1.2 se puede observar que para la síntesis de DNA en células HeLa existe una máxima estimulación en una longitud de onda de aproximadamente 775 nm. Un efecto similar pero de menor amplitud se puede observar para una longitud de onda de 630 nm. [4] Figura 1.3. Importancia de la intensidad y del tiempo de irradiación adecuados para la estimulación del crecimiento de un cultivo de células de E.coli. [4] Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 11 De las figuras 1.2 y 1.3 se puede observar que para que exista un proceso de bioestimulación es necesario considerar los siguientes parámetros: la longitud de onda (nm), el ancho de onda o el nivel de monocromaticidad, la intensidad (W/cm2) y el tiempo de exposición (s). La dosis es un factor compuesto definido de la siguiente manera. [4] 2 JD I t cm ⎡ ⎤= ⋅ ⎢ ⎥⎣ ⎦ (1.1) Donde: D = dosis de energía por centímetro cuadrado [J/cm2]. I = intensidad de radiación por centímetro cuadrado [W/cm2]. t = tiempo de irradiación [s]. Los efectos que la luz puede producir se pueden clasificar como directos o indirectos. Los efectos directos suceden cuando la luz genera un efecto dentro del tejido radiado; los efectos indirectos suceden cuando se genera una señal nerviosa o neuroendocrina en el área irradiada y esta genera un efecto sistémico en otra parte del cuerpo. Los parámetros utilizados en la exposición láser varían grandemente (dosis, longitud de onda, intensidad, luz láser de onda continua u onda pulsada, duración del pulso y razón de repetición). Las intensidades típicas utilizadas en la Terapia Láser de Baja Potencia (TLBP) están dentro del intervalo de 1 a 10 mW/cm2. Con el paso de los años se ha observado que la radiación de bajo nivel de energía ejerce un efecto estimulador en las células y en los tejidos. Esta radiación empleada en la terapia con luz produce efectos foto-químicos y foto- biológicos los cuales desde hace tiempo se han estado estudiado. La respuesta de estimulación presenta tres características importantes las cuales se pueden observar en la figura 1.4 y estas características son: Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 12 1. La respuesta a un estímulo se manifiesta siempre con un comportamiento de disparo, esto es, la amplitud de la respuesta se eleva de forma espontánea hasta un valor determinado conforme la dosis, la intensidad o el tiempo de exposición se incrementen de forma lineal. 2. Las curvas de la respuesta tienen forma de campana en donde existe un máximo y un mínimo el cual corresponde al nivel de control. 3. Incrementando el valor del factor físico considerado (dosis, intensidad, etc.) uno puede inhibir la respuesta del sistema biológico en consideración. Figura 1.4. Respuesta de estimulación para los sistemas biológicos. [4] 1.3 Aplicaciones de la fotobioestimulación en la biología. Dentro del área de la biología se han desarrollado diversos estudios los cuales indican la forma en que la luz láser interactúa con los sistemas biológicos. Dentro de esta área se ha reportado la producción de un sistema promotor de genes en plantas, el cual puede ser activado de forma rápida y desactivado a su vez con el uso de luz pulsada. Los experimentos realizados en este sistema promotor de genes muestran que con luz roja es posible activar el proceso de producción genética en este sistema, y con luz infrarroja es posible revertir el proceso de producción genética. Este método de activación por luz tiene la ventaja de que es un método no invasivo, y permite activar un determinado gen a través de la simple exposición a una señal de luz [2]. Capítulo 1. Antecedentes y estado del arte. 13 Para las plantas el poder sensar la luz de su ambiente es tan importante como para los animales lo es la visión. La capacidad para detectar las variaciones en la luz es determinante para la competencia y por consiguiente para la supervivencia de las plantas. La forma en la que las plantas sensan la luz es a través de los fitocromos, una familia pequeña de la proteína fitocrómica foto-receptora cuyos orígenes han sido trazados a partir de los procariontes fotosintéticos. Los avances recientes permiten la comprensión de los mecanismos moleculares de los fitocromos así como de la importancia de su evolución biológica, lo que hace posible un avance rápido en la rama de la biología. Estas estructuras foto-receptoras, los fitocromos, son los responsables de que los procesos de foto- bioestimulación se lleven a cabo en las plantas llegando al punto de definir una nueva área de investigación denominada Ingeniería Biológica basada en la luz [2-15]. 14 Capítulo 2 Características generales de los láseres. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 15 2.1 Introducción La palabra láser es un acrónimo de “amplificación de luz por emisión estimulada de radiación”. [19] La salida de un láser puede ser un haz pulsado o continuo con diferente λ (longitud de onda); con potencias menores de 1 mili-vatios hasta potencias que alcanzan los millones de vatios. Pese a todas estas diferencias todos los láseres presentan características en común: [19,20] 1) Un medio excitable. Éste puede ser un sólido, líquido, gas, o algún material semiconductor que pueda ser bombeado a un estado de energía más alto. a. Debe ser posible llevar a la mayor parte del medio excitable a un nivel de energía superior (electrón, ion o vibracional) llamado población de inversión. b. Debe de existir una transición descendente activada por una emisión estimulada. c. La mayoría de los láseres están basados en sistemas de 3 o 4 niveles de energía. Estos se determina a partir del medio excitable. i. Sistema de 3 niveles: Aquí existe un bombeo del nivel 1 (estado basal) al nivel 3 el cual decaerá rápidamente al nivel 2. Existe una emisión estimulada cuando hay un decaimiento del nivel 2 al nivel 1. Este tipo de sistemas de 3 niveles se utilizan para láseres pulsados debido a que absorben su longitudde onda cuando están en su estado basal. Este comportamiento de absorción de su longitud de onda los hace virtualmente imposibles para mantener una población de inversión que permita una operación en onda continua (CW). El láser de rubí es un sistema de 3 niveles. ii. Sistema de 4 niveles: Este tipo de sistemas láser hacen un bombeo del nivel 1 (nivel basal) al nivel 4, del cual se producirá un decaimiento rápido al nivel 3. Existe una emisión estimulada cuando hay un decaimiento del nivel 3 al nivel 2 que a su vez decaerá al Capítulo 2. Características generales de los láseres. 16 nivel 1. Este tipo de sistemas de 4 niveles pueden ser utilizados para trabajar en modo continuo (CW) siempre y cuando el tiempo de vida de permanencia en el nivel 2 sea lo suficientemente corto para evitar una interrupción en la emisión. El láser de He-Ne es un sistema de 4 niveles. 2) Un medio que permita bombear energía en el medio excitable. Este medio puede ser óptico, químico, eléctrico, etc. a. Los láseres a gas utilizan una descarga eléctrica de CA o CD a través del gas, pueden utilizar también excitación externa de radio frecuencia (RF), un bombardeo de un haz de electrones así como una reacción química. Es posible realizar un bombeo con otros medios. b. Los láseres de estado sólido pueden utilizar un bombeo óptico de una lámpara destellante de xenón de alta energía, de un láser bombeado o de un arreglo de diodos láser. c. Los láseres semiconductores normalmente se bombean a través de fuentes de corriente de CD aunque también pueden ser bombeados de forma óptica o a través de un haz de electrones. d. Los láseres líquidos se suelen bombear de forma óptica aunque existen otros medios. e. Los láseres de rayos X se bombean utilizando pequeños dispositivos nucleares. Aunque se han elaborado ensayos de estos dispositivos hay duda de si estos han sido exitosos o no. Actualmente existen láseres de rayos X que se producen a partir de diferentes medios de bombeo y los cuales no se destruyen con cada disparo. [19] f. Los láseres de electrones libres (FEL – Free Electro Laser) son bombeados por aceleradores de partículas. Este tipo de láseres tienen un costo de millones de dólares y no se construyen sobre la misma línea. 3) Un resonador: En la mayoría de los casos la cavidad de resonancia es del tipo Fabry –Perot, un par de espejos, uno a cada lado del láser, los cuales permiten que la luz Capítulo 2. Características generales de los láseres. 17 estimulada rebote de un lado al otro a través del medio excitable. Generalmente uno de los espejos es reflexivo mientras que el otro es parcialmente transparente lo que permite que el haz del láser escape. Los espejos pueden ser perfectamente planos, o uno de los dos o los dos pueden presentar una ligera curvatura. [21] a. Algunos láseres tienen un solo espejo en uno de sus lados (láser de nitrógeno) o no tienen espejos (los láseres de rayos X no presentan espejos debido a que es casi imposible reflejar la radiación electromagnética a las longitudes de onda de los rayos X). b. Es posible encontrar elementos ópticos adicionales como prismas, cavidades con un factor de calidad alto (alta Q), Células de Kerr, y otras presentes dentro del resonador. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 18 2.2 Operación básica del láser En la figura 2.1 se muestra la operación básica de un láser. A continuación de la imagen se explicarán los pasos para producir el fenómeno láser. [19, 20] Figura 2.1. Operación básica de un láser. [20] 1.- En su estado básico los átomos, las moléculas o los iones del medio excitable se encuentran en su nivel más bajo de energía conocido como su estado basal. 2.- A continuación se lleva a cabo un bombeo de energía en el material excitable de forma tal que sus átomos, moléculas o iones se ubican en un nivel mayor de energía creando así una inversión de población, de esta forma participarán en la emisión Capítulo 2. Características generales de los láseres. 19 estimulada, teniendo más importancia los átomos, moléculas o iones que se ubican en el nivel dos (para este caso). 3.- De forma aleatoria, estos átomos / iones / moléculas excitados caen a un nivel inferior de energía por si mismos. En este proceso cada uno emitirá un solo fotón de luz de forma aleatoria. Esto es llamado "emisión espontánea" y por si mismo no es de mucha utilidad para algún proceso. El mismo proceso es básicamente el que explica el brillo de un letrero de gas de neón, o lo capa de fósforo de una lámpara fluorescente o pantalla de un TRC. Sin embargo Einstein mostró que si uno de estos fotones encontraba en su camino a un átomo, a una molécula o a un ión excitado, este fotón lograría que el átomo, molécula o ión respectivamente decayera en su nivel de energía produciendo de esta forma un fotón, el cual presentaría las mismas características que el primigenio. Las características son: [19- 21] a) El nuevo fotón tendrá exactamente la misma longitud de onda. b) El nuevo fotón tendrá exactamente la misma fase. c) El nuevo fotón será emitido exactamente en la misma dirección que el fotón primigenio. d) En la mayoría de los casos el nuevo fotón tendrá la misma polarización que el fotón primigenio. Sin embargo es posible que el resonador proporcione una orientación diferente al haz láser lo que hará que este se polarice. Los fotones producidos se moverán en direcciones aleatorias, unos se escaparán por algunos de los lados del tubo de resonancia mientras que otros rebotarán en los espejos y se escaparán al chocar con los contornos del tubo. 3 y 4.- De forma ocasional existen algunos fotones que se mueven de forma paralela en dirección longitudinal del tubo de resonancia. En este caso estos fotones cruzarán el tubo de resonancia hasta chocar con algún espejo, lo que hará que estos viajen en dirección contraria, este proceso se repetirá varias veces. Los fotones al ir viajando de un lado al otro Capítulo 2. Características generales de los láseres. 20 del tubo de resonancia irán encontrando diversos átomos/ moléculas/ iones excitados que producirán de esta forma fotones nuevos con las mismas características que los que están cruzando el tubo. Así los fotones producidos reforzarán la producción de más fotones teniendo así una avalancha de éstos a través del proceso de emisión estimulada. 5.- El haz producido será altamente monocromático (muy próximo a la misma longitud de onda) y coherente (todas las ondas estarán en fase). De igual forma el haz estará colimado (los fotones viajarán de forma paralela) o por lo menos se observará que surge a partir de un punto (diodos láser). En cualquiera de los casos el haz de luz obtenido puede ser manipulado de diferentes formas mismas que no se pueden realizar con la luz proveniente de una fuente convencional de luz. Si la fuente de bombeo es adecuada y puede estar excitando de forma constante a los átomos/ moléculas/ iones del medio excitable para que estos se ubiquen en niveles de energía superiores, la emisión estimulada sucederá de forma continua e indefinida (existen problemas de calentamiento y problemas de bajas y altas corrientes que interfieren con esta operación indefinida) produciendo así un láser de onda continua. Si el bombeo no puede ser mantenido de forma constante o los niveles de energía no pueden ser mantenidos con constancia el resultado será un láser pulsado. 2.3 Características por tipos de láseres Diodos láser [21]: Es un chip de material semiconductor controlado por una fuente de alimentación de bajo voltaje. Este tipo de láser tiene una retroalimentación óptica a través de un fotodiodo. El objetivo de tener este ultimo elemento es el de regular la corriente del diodo láser.Las longitudes de onda de estos dispositivos son: en el rojo (635 nm), el rojo profundo (670 nm), el IR (780 nm, 800 nm, 900 nm, 1500 nm, hasta varios µm). Actualmente se cuenta con láseres de diodo en la región del UV cercano, violeta y azul, desde los 380 nm hasta los 450 nm, teniendo estos últimos un precio muy elevado. Actualmente se han Capítulo 2. Características generales de los láseres. 21 desarrollado láseres verdes en distintos laboratorios pero estos presentan la desventaja de que funcionan a temperaturas del nitrógeno líquido y a su vez su tiempo de vida es muy reducido. La calidad del haz láser para los diodos láser depende del diseño. El haz en forma pura presenta una forma elíptica o una forma de cuña, siendo a su vez muy astigmático. Su corrección requiere óptica adicional (interna o externa). La longitud de su coherencia va desde unos cuantos milímetros hasta algunos metros. Las potencias de salida más comunes en el mercado van desde 0.1 mW hasta los 5 mW. Existen diodos láser con potencias arriba de 100 W. Para los diodos láser de muy altas potencias los sistemas no están hechos por un solo diodo sino por arreglos de diodos los cuales nos permiten alcanzar potencias de más de 100,000W. Es posible encontrar diodos láser desde 1 dólar hasta más de 10,000 dólares. En general los láseres de diodos son de bajo costo, de baja potencia a la entrada, pero en la mayoría de los casos su controlador requiere de altas exigencias en su funcionamiento lo que eleva su costo. Láseres de He-Ne [19]: los más comunes se venden en tubos de plasma con espejos internos, su fuente de alimentación es de alto voltaje. Es posible utilizar espejos externos los cuales son caros. La longitud de onda de estos dispositivos es en el rojo (632.8 nm), naranja (611.9 nm), amarillo (594.1 nm), verde (543.5 nm) e IR (1523.1 nm), presentan baja eficiencia y su costo es mayor. La calidad del haz es muy alta. La salida que se obtiene esta muy bien colimada sin el uso de óptica externa, presenta una excelente longitud en su coherencia (de 10 cm. hasta varios metros) y es muy monocromático. La potencia de salida típica es de 0.5 a 35 mW aunque es posible encontrar de potencias mayores a los 250 mW. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 22 Su costo va desde los 25 dólares hasta más de 5,000 dólares. En general no son caros, son fáciles de encontrar, robustos y de larga duración. Láseres de Dióxido de Carbono CO2 [19, 20]: Este tipo de láseres presenta un diseño que permite el flujo de gas. Su fuente de excitación puede ser una fuente de alto voltaje en CD, una fuente de RF, un haz de electrones u otra fuente que proporcione una alta energía. Las longitudes de onda más comunes que se manejan son de 10,600 nm, de 9,600 nm. La calidad del haz es alta. La potencia de salida va desde unos cuantos vatios hasta el orden de 100 kW o más. El uso que se le da a estos láseres es para el corte de metales, para soldar, para el tratamiento de superficies y el templado de materiales, el marcado de plásticos, madera, para el procesamiento de materiales, en medicina para cirugías. El costo de este tipo de sistemas va desde los miles de dólares hasta los cientos de miles de dólares dependiendo del tipo específico y de la potencia de salida. Láseres de estado sólido [19-21]: Su material puede presentar forma de barra, de tabla o de disco de cristal. Este tipo de láseres se bombean comúnmente con lámparas de destellos o de arco, diodos láseres de alta potencia o con arreglos de diodos láser. El bombeo a través de fibras ópticas dopadas utilizando diodos láser de alta potencia es común y su finalidad es proporcionar un medio de ganancia. Las salidas obtenidas pueden ser pulsadas, continuas (CW), o cuasi-continuas (Cuasi-CW) dependiendo éstas del diseño del sistema y de la aplicación que se le va a dar. La longitud de onda va desde el IR cercano (el material más común es el Nd dopado el cual proporciona una salida cercana a los 1,064 nm) hasta el visible (rubí a 694.1 nm). Es posible utilizar a la salida un multiplicador de frecuencias para obtener longitudes de onda en el espectro visible (532 nm) o en el UV (355 o 266 nm). Su potencia de salida varía ampliamente, Peta vatios pico para propósitos de investigación con potencias promedio de 1,000 W o más. Estas potencias son muy altas pero de duración muy pequeña. Los usos que se le dan a este tipo de láseres son en la industria militar, en telémetros láser, investigación atómica, señalamiento de blancos, en aplicaciones médicas y quirúrgicas, espectroscopia, en el estudio de la materia y otras áreas. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 23 2.4 Clasificación de seguridad en los láseres [22] Existen diferentes organizaciones encargadas de establecer los lineamientos de seguridad para el uso de sistemas láser. Uno de los más importantes es el Centro de Dispositivos y Salud Radiológica (CDRH-Center for Devices and Radiological Health). Este centro es parte de la Administración de Comida y Fármacos de los Estados Unidos, siendo la organización más importante en los Estados Unidos para el comercio y la actividad científica de los láseres. Los láseres son catalogados por el fabricante y etiquetados de forma apropiada dependiendo del los riesgos que implica el láser. Los siguientes criterios son utilizados para clasificar a los láseres: a) Longitud de onda: si el láser está diseñado para emitir diferentes longitudes de onda la clasificación se basará en la longitud de onda más peligrosa. b) Se considera el tiempo de exposición inherente al diseño tanto para los láseres de onda continua (CW) como para los láseres pulsados con (PW). c) En el caso de los láseres pulsados se considera la energía total por pulso, la duración del pulso, la razón de repetición y la radiación emergente del haz. Los láseres se clasifican y controlan de acuerdo al siguiente criterio: Láseres Clase I: este tipo de láseres no presentan ningún riego al estarlos viendo de forma continua. Están diseñados de tal forma que no es posible tener acceso a la radiación láser. A este tipo de láseres pertenecen los láseres de baja potencia o los láseres de alta potencia incrustados en sistemas específicos como las impresoras láser. Láseres Clase II (láseres visibles de 400 a 700 nm): Este tipo de láseres emiten luz visible para la cual existe una respuesta de aversión del ojo humano. Estos dispositivos no presentan ningún peligro a menos que sean vistos directamente por Capítulo 2. Características generales de los láseres. 24 largos periodos de tiempo. Esto sucede con la mayoría de las fuentes de luz de gran intensidad. Láseres Clase IIa (láseres visibles de 400 a 700 nm): Este tipo de láseres emiten luz visible la cual no está hecha para su observación directa. Bajo condiciones normales de funcionamiento no se producirá un daño en el ojo a menos de que sea visto de forma continua por un lo menos durante 1,000 segundos. Ejemplo de este tipo de láseres son los láseres lectores de códigos. Láseres Clase IIIa: Este tipo de láseres normalmente no causan daño al ojo si su haz es visto de forma momentánea pero pueden producir daños si se utilizan medios ópticos para manipular el haz (colimadores, fibras ópticas, etc) Láseres Clase IIIb: Estos láseres generan daño si su haz es visto de forma directa o se ponen en contacto directo con la piel. Esto incluye el ver directamente el haz así como las reflexiones del haz que se puedan dar. Los láseres Clase IIIb no producen reflexiones difusas peligrosas a menos que sean vistas de forma muy próxima. Láseres Clase IV: Este tipo de láseres representan un peligro para la visión si su haz es visto de forma directa o a través de reflexiones en espejos o al obtener reflexiones difusas.Además este tipo de láseres presentan el riesgo de producir fuego así como quemaduras en la piel. En la tabla 2.1 se establecen los intervalos de potencia del haz para cada clasificación: Capítulo 2. Características generales de los láseres. 25 Tabla 2.1 Clasificación de los láseres en base a su potencia de salida. [22] Clase Potencia Máxima (mW) Símbolo impreso Texto en la etiqueta precautoria I ≤ 0.39 No necesario No necesaria IIa (0.39, 1) Exposiciones menores a 1,000 seg. No necesario No necesaria II ≤ 1 Precaución Radiación láser. No fije la mirada en el haz. IIIa ≤ 5 Precaución (Irradiación < 2.5 mW/cm2) Radiación láser- No fije la mirada en el haz o no vea directamente el haz a través de instrumentos ópticos. IIIb ≤ 500 Peligro Radiación láser. Evite la exposición directa al haz. IV > 500 Peligro Radiación láser. Evite la exposición del haz en el ojo o en la piel. 2.5 Seguridad en láseres [22] Los láseres en general presentan medidas únicas de seguridad especialmente para la visión. Mientras los peligros de las armas de fuego y de los explosivos son obvios para la mayoría de la gente, en los láseres es necesario enfatizar que cabe la posibilidad de que un haz de fotones sin masa impacten el ojo, al no ser manejados con cuidado, provocando así daños severos y aún irreversibles en la visión, generando de esta forma ceguera temporal o total. Para los láseres de alta potencia existen riesgos adicionales como lo es la producción de fuego a causa del alto contenido de energía del haz, así como riesgo de descarga por el uso de voltajes que son potencialmente letales. En general los láseres son dispositivos que llaman la atención de las personas, sin embargo a excepción de los dispositivos láseres de muy baja potencia, aquellos que presentan menos que una fracción de mW de potencia de salida en el haz, éstos poseen riegos únicos con respecto a los daños en la visión ya sean temporales o permanentes. Los receptores visuales que cubren la retina del ojo son parte del sistema nervioso central y no se regeneran por lo que hay que extremar las precauciones. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 26 La salida de muchos láseres corresponde a un haz altamente colimado, lo cual significa que la energía está concentrada en un área muy pequeña. Cuando la lente del ojo enfoca este haz lo proyecta en un punto microscópico, haciendo que el área del haz láser disminuya aumentando de esta su potencia, vaporizando instantáneamente el tejido del ojo. Un parpadeo no es suficiente para proteger al ojo ya que el tiempo para destruir el tejido es muy pequeño. Actualmente los apuntadores láser están muy de moda, pero es necesario considerar que si estos son enfocados cuidadosamente se puede obtener una potencia de salida de 5 o 6 mW lo cual es suficiente para quemar un pedazo de cinta eléctrica negra con vestigios de humo. Los láseres de los reproductores de CD, los diodos láser visibles, los láseres pequeños de He-Ne están catalogados como dispositivos de Clase II o Clase IIIa. Los láseres de Clase II presentan un riesgo bajo aún si se toman medidas mínimas de precaución. Los láseres de Clase IIIa se deben de tomarse con más responsabilidad y cuidado ya que estos presentan un haz bien colimado el cual puede producir fuertes daños en la visión. A esta clase pertenecen los apuntadores láser y los láseres de He-Ne. Los láseres graduados con una categoría de Clase IIIb o mayor presentan peligros adicionales como daño instantáneo a la visión; y con la Clase IV existe la posibilidad de producir quemaduras en la piel y sobre otros objetos. Los láseres más pequeños de CO2 están dentro de esta clasificación. Actualmente los diodos láser de alta potencia se han vuelto más accesibles y es posible encontrarlos a precios razonables. Es muy común el suponer que debido a su tamaño tan pequeño este no presenta riesgos. Esto es algo equivocado. Un diodo láser de 100 mW alimentado con baterías tiene la potencia suficiente de perforar la retina de forma tan fácil como un láser de argón de 100 mW el cual es alimentado con fuentes de voltaje grandes. Capítulo 2. Características generales de los láseres. 27 La mayor parte de los diodos láser trabajan dentro de la región IR e invisible, y debido a esto son más peligrosos ya que la respuesta de aversión del ojo no funciona con estos dispositivos, por lo que uno no se percata que la visión está siendo destruida hasta que se hace presente el daño. Los láseres de gas presentan riesgos adicionales al de los daños en la visión. Este tipo de láseres requieren generalmente altos voltajes o fuentes de alimentación conectadas a la línea eléctrica por lo que existe un riesgo de choque eléctrico al tocar por accidente los cables no aislados. 28 Capítulo 3 Diodos láser. Capítulo 3. Diodos láser. 29 3.1 Introducción Los diodos láser son un tipo especial de láseres. Difieren de las fuentes láser convencionales en dos cosas. [21] 1) Para los láseres clásicos los átomos activos que participan en el proceso láser (átomos, moléculas o iones) son independientes de otros iguales y solo los que tienen el mismo nivel de energía se pueden utilizar para el proceso láser. 2) En el caso de los láseres de semiconductores sucede algo completamente diferente. Aquí un nivel de energía definido sólo puede ser ocupado por dos partículas activas (electrones, Principio de Pauli). En el caso de los semiconductores las funciones de onda de los átomos individuales se traslapan para formar una banda común de energía, y el grado de ocupación del nivel producido sigue los principios de la estadística de Fermi Dirac. Cuando se considera el proceso láser es necesario tomar en consideración las transiciones entre las dos distribuciones de poblaciones de las dos bandas de energía en vez de dos niveles de energía. Los diodos láser no presentan alguna longitud de onda en la emisión inherente a su naturaleza. Esto se debe a que no existen dos niveles discretos de energía que son los responsables del proceso láser, como sucede en los láseres convencionales, sino que el proceso láser se debe a la distribución de electrones en las bandas de energía. Una diferencia que presentan los diodos láser con respecto a los láseres convencionales es la propagación de la luz láser dentro de la región PN. La distribución espacial de la intensidad del haz láser está definida en mayor proporción por el medio láser y no por el resonador, como sucede en los láseres convencionales. Los diodos láser están formados por diversos materiales semiconductores, el más utilizado es el material de Arsenurio de Galio y es posible encontrar otras combinaciones de este material para producir luz coherente en un empaquetado pequeño. Capítulo 3. Diodos láser. 30 Como ya se mencionó anteriormente la diferencia de energía entre la banda de valencia y la banda de conducción es lo que produce el mecanismo de acción para la luz láser. El elemento activo es un dispositivo de estado sólido no muy diferente a un LED. Dentro de los diodos láser existen diversas configuraciones del material N y P. Existen diodos láser de homo estructura los cuales constan de una sola unión PN. En la figura 3.1 se muestra la imagen de un diodo de homo estructura. Figura 3.1. Diodo láser de homo estructura. [21] Actualmente los diodos láser fabricados no presentan una sola unión PN sino varias uniones de material PN (figura 3.2). Esto permite que entre los materiales PN se genere una barrera de potencial mayor comparada con los diodos de homo estructura, incrementando de esta forma la acumulación de cargasen esta barrera para la producción de una región de inversión que disminuirá la corriente de umbral para la operación del diodo láser (figura 3.3). Figura 3.2. Diodo láser de hetero estructura. [21] Capítulo 3. Diodos láser. 31 Figura 3.3. Diagrama de las bandas de energía para una unión PN de doble hetero estructura. [21] Figura 3.4. Construcción de un diodo láser de hetero estructura. [21] Los diodos láser difieren de los demás tipos de láseres en las dimensiones del resonador y en las características de la propagación del haz. Para un diodo láser el material activo representa al mismo tiempo el resonador. De forma muy general los diodos láser presentan sus espejos en las caras laterales del material semiconductor los cuales delimitan de esta forma la cavidad de resonancia (figura 3.4). Comparando las características de un diodo láser y de un láser de He-Ne se tiene que para un diodo láser la razón de la longitud del resonador con respecto a la longitud de onda es igual a: 300 366 820 L m nm µ λ = = (3.1) Capítulo 3. Diodos láser. 32 Donde: L = longitud del resonador [m]. λ = longitud de onda del láser [m]. Para un láser de He-Ne tenemos que: 320 316 10 632 L cm x nmλ = = (3.2) Donde: L = longitud del resonador [m]. λ = longitud de onda del láser [m]. De los valores antes mostrados es posible observar que las características del haz de luz láser variarán significativamente entre un láser de He-Ne y un diodo láser. Dentro de la gama de diodos láser se cuenta con los diodos láser entonables, los cuales presentan una cavidad de resonancia externa que permite modificar un poco la longitud de onda del haz. De igual forma existen diodos láseres pulsados los cuales requieren una alta corriente para alcanzar su nivel de disparo y proveer a su salida una potencia en vatios (W), pero esto solo será por un corto tiempo (microsegundos o menos). La potencia promedio alcanzará apenas unos cuantos milivatios (mW). Este tipo de diodos no son muy comunes actualmente. La alimentación del diodo láser deberá será proporcionada por una fuente de DC controlada por corriente o por un controlador, el cual proporcionará una modulación a muy altas frecuencias para el uso en fibras ópticas o para la comunicación en el espacio libre. En comparación con los LED, los diodos láser requieren de muchos cuidados en el uso de la electrónica asociada (controladores) ya que su deficiente manejo hará que el diodo láser se destruya. [19] Capítulo 3. Diodos láser. 33 Un parámetro al que es sensible el diodo laser y el cual podría producir su destrucción es la corriente, esta no debe de ser excedida ni por un tiempo de 1 µs. Esta sensibilidad a la corriente dependerá a su vez de las características particulares del dispositivo así como de la temperatura de la unión. En general esta sensibilidad a la corriente se debe a la gran cantidad de retroalimentación positiva que está presente cuando el diodo láser esta operando. Cualquier variación en la corriente hace que exista una mayor concentración de energía electromagnética en el haz luminoso, pudiendo dañar las caras laterales del dispositivo semiconductor de forma instantánea. Debido a esto, es necesario introducir lazos cerrados de retroalimentación óptica, los cuales sirven para estabilizar la potencia del haz láser cuando existan variaciones debidas a la temperatura o a otras causas. [20] Algunas ventajas que presentan los diodos láser es que son compactos (su elemento activo es del tamaño de un grano de arena), consumen baja potencia y voltaje, presentan una eficiencia mayor que otros láseres, son robustos y presentan un tiempo de vida alto si son usados adecuadamente. Con respecto a sus desventajas tenemos los requisitos críticos en su controlador así como su desempeño óptico, el cual no se puede igualar con otro tipo de láseres. Los diodos láser presentan una coherencia y un nivel de monocromaticidad inferior a otros láseres. Esto se debe al tamaño de su cavidad de resonancia (una fracción de mm formada por la unión de semiconductores del grupo III y IV). Debido a esto los diodos láser no se recomiendan para aplicaciones en holografía e interferometría. 3.2 Diferencias entre los LED's y los diodos láser [21] Es posible pensar en un LED como un láser sin una cavidad de retroalimentación. Los LED's emiten fotones a partir de la recombinación de electrones, presentando un espectro ancho. Cuando se agrega una cavidad de resonancia con una Q alta, la retroalimentación puede ser lo suficientemente alta como para activar la acción láser. La mayoría de los diodos láser tienen la cavidad de resonancia construida dentro del dispositivo, pero existen diodos láser con la cavidad de resonancia externa. Capítulo 3. Diodos láser. 34 La adición de una cavidad de resonancia con alta Q modifica drásticamente el número de modos de operación. En un LED no es posible hablar de modos de operación. 3.3 Comparación de diferentes tipos de láseres [19] Es necesario aclarar que un diodo láser es un láser verdadero y no un LED mejorado. En la industria es más difícil hacer un diodo láser con una línea de emisión angosta que un láser de gas o algún otro tipo de láser de cristal. En general el agregar una cavidad de resonancia de mayor longitud a un láser, contribuirá a estrechar la línea de emisión. Es posible utilizar una cavidad externa de resonancia con muy alta Q para que de esta forma sea posible incrementar la coherencia de un diodo láser. En un láser de gas la línea de fluorescencia es angosta lo que genera una ganancia espectral limitada. Los diodos láser tienen mayor ancho en su fluorescencia espectral. 3.4 Seguridad en el uso de diodos láser [22] En general todos los láseres presentan un riesgo para la visión, especialmente cuando la salida del dispositivo está colimada y/o es invisible. De igual forma existe un riesgo cuando en su salida existe una potencia mayor a los 3 o 5 mW. [Clase II y IIIa] Los diodos láser de los reproductores de CD presentan una longitud de onda de 780 nm (IR cercano) y una potencia de salida menor o igual a 1 mW. Esta potencia de salida se debe al uso de la óptica asociada que hace que el haz diverja. Si se logra quitar esta óptica la salida será de 5 mW colimada. Esta potencia de salida tiene la capacidad de perforar la retina generando daños en esta sin que uno se percate. [Clase IIIa] Capítulo 3. Diodos láser. 35 Los diodos láser que funcionan en la región visible y los apuntadores láser presentan a su salida una potencia de 1 a 5 mW en diversas frecuencias (635 a los 670 nm). Cuando estos rayos se encuentran colimados tienen la capacidad de perforar la retina. [Clase II y IIIa] Actualmente hay que extremar precauciones con los apuntadores láser de color verde ya que estos tienen como base diodos láser IR de potencia y aunque no sea posible percibir una salida del haz, es posible que se esté produciendo una salida IR la cual no es visible por el ojo humano. [Clase IIIb] En el caso de los dispositivos quemadores de CD's estos utilizan diodos láser que producen potencias en múltiplos de 10 mW. Una unidad de escritura de CD's, en el momento de estar leyendo, presentará una potencia de entre 3 y 5 mW. En el momento de escribir, esta unidad tendrá una potencia a la salida de 25 a 30 mW. Este tipo de láseres aún si no están colimados presentan un riesgo para la visión. [Clase IIIb] Actualmente los diodos láser IR, para aplicaciones de potencia, se han vuelto de uso común sobre todo con el uso actual de diodos de estado sólido bombeados. Estos presentan un gran riesgo para la visión además de que su haz concentrado puede producir fuego o quemaduras debido a la potencia a la salida que estos manejan. Elojo por sus características detectará más intenso un láser con longitud de onda de 635 nm (5 veces más intenso) que un diodo con longitud de onda de 670 nm. 3.5 Diodos láser [17-21] Los diodos láser más comunes son los usados en los reproductores de CD’s y en las unidades de CD de las computadores. Este tipo de diodos láser, como ya se mencionó, producen un haz invisible en la parte del espectro del infrarrojo cercano con una longitud de onda de 780 nm. La potencia óptica a la salida de un diodo láser puro, esto es sin algún Capítulo 3. Diodos láser. 36 tipo de óptica asociada, será de por lo menos 5 mW. Un vez que este haz pasa por la óptica asociada, el haz golpeará al CD con una potencia dentro de un intervalo de 0.3 a 1 mW. Los diodos láser visibles han ido remplazando a los láseres de He-Ne en diversas áreas como en los supermercados, en los apuntadores láser, en los dispositivos posicionadores usados en medicina (CT y MIR escáner) y en otras aplicaciones. El primer láser producido dentro de la región visible fue para una longitud de onda de 670 nm. Actualmente ya se cuenta con diodos láser con longitud de onda de 650 nm y 635 nm. Los diodos láser con longitud de onda de 635 y 650 nm se utilizan en la tecnología del DVD. La longitud de onda más corta (de 635 y 650 nm) en comparación con los diodos IR de 780 nm hacen que en un DVD quepa mayor cantidad de información, aproximadamente 8 veces o más, que en un disco normal. [Clase II] Al igual que los diodos infrarrojos estos presentan una potencia de salida máxima de 3 a 5 mW. Existen otros tipos de diodos láser de altas potencias pero su costo es de cientos de dólares por potencias de salida del orden de 20 mW. Para muy altas potencias se utilizan arreglos de diodos láser o barras de diodos láser, estas producen potencias del orden de vatios, pero su desventaja es que sus precios alcanzan los miles de dólares. 3.6 Construcción de un diodo láser [21] La figura 3.5 muestra un módulo láser. Figura 3.5. Dispositivo de diodo láser. [19] Capítulo 3. Diodos láser. 37 Figura 3.6. Composición de un diodo láser. [20] El tamaño típico del empaque de un diodo láser es de 5 a 10 mm de tamaño (figura 3.5), mientras que el tamaño del chip semiconductor es menor que 1 mm (figura 3.6). Conforme el haz principal emerge del diodo láser este presentará una forma de V (cuña) siendo a su vez altamente divergente y con una apertura típica de 10º x 30º. Es necesaria una óptica externa para producir haces paralelos (colimados). Una lente convexa (esférica) sirve bien para este fin. En los módulos láser y en los apuntadores láser se usa una lente la cual, por lo menos una de sus caras, presenta una superficie sin curvaturas esféricas mientras que por el otro lado existe una superficie esférica. La longitud focal efectiva de una lente de este tipo es de 5mm. [17] Debido a la naturaleza de la unión ésta produce un haz con forma de cuña y una divergencia no proporcional (10º x 30º), de igual forma se da la presencia de astigmatismo. La longitud focal efectiva para colimar el haz en X y en Y difiere ligeramente. Es necesario el uso de una lente cilíndrica o de una lente con una curvatura astigmática para compensar estas características. Sin embargo la cantidad de astigmatismo es pequeña por lo que en general es ignorada. En general la forma del haz es elíptica o rectangular, esto puede corregirse utilizando un par de prismas. [20] La luz producida por la unión del diodo láser normalmente esta polarizada linealmente. Capítulo 3. Diodos láser. 38 El haz de la parte posterior del diodo láser golpea a un fotodiodo el cual es utilizado como un dispositivo opto-electrónico de lazo cerrado. Éste dispositivo tendrá la función de regular la corriente y a su vez la potencia del haz. El fotodiodo se monta con un ángulo tal que evita la aparición de reflexiones que interfieran con la operación del diodo láser. 3.7 Diodos de alta potencia en el espectro visible Actualmente es posible encontrar diodos láser con potencias ópticas de salida en el orden de vatios. Este tipo de dispositivos tienen un precio alto, pero comparando el costo de este sistema completo con un sistema láser de He-Ne de 25 mW, su costo será mucho menor. Como ya se mencionó con anterioridad este tipo de diodos láseres es muy sensible en su manejo, por lo que un control incorrecto de sus parámetros podrá destruirlo. De igual forma la calidad del haz no logra alcanzar a las características del sistema de He-Ne más barato. Los diodos láser de alta potencia en el espectro visible presentan un funcionamiento multimodo, un haz no circular y astigmatismo. El hecho de que sean multimodo significa que no pueden ser utilizados en aplicaciones de holografía e interferometría. [21] 3.8 Diodos láser de alta potencia Este tipo de dispositivos van desde algunos vatios hasta los cientos de vatios. Estos láseres trabajan generalmente en el área IR cercana, comúnmente 808 nm. Con el advenimiento de los diodos láseres bombeados, las potencias de salida han logrado alcanzar salidas por arriba de los 1,000 vatios. [19-21] Una forma de obtener estas altas potencias es con la implementación de diodos láser en barras. Este tipo de barras están hechas con un chip de tamaño de 10 mm, con unos 16 a 24 emisores láseres de 150 micras de ancho y con potencias de emisión arriba de los 2 vatios por emisor. Capítulo 3. Diodos láser. 39 Es muy importante tener en mente que el poseer el diodo láser es sólo una pequeña parte del problema. Uno de los puntos más importantes a resolver es el control del diodo láser dentro de sus especificaciones máximas de potencia, esto es, evitar que se sobrepase la corriente máxima permitida, así como la implementación de un adecuado enfriamiento. 3.9 Diodos láser pulsados de alta potencia [19-21] La mayor parte de los diodos pulsados trabajan dentro del espectro IR. En las hojas de datos es posible encontrar especificaciones de potencia de salida de 9 o 14 W. Estas potencias son pico. Las potencias promedio son de unos cuantos mW teniendo un ciclo útil de 0.1% o menos con respecto al ciclo completo. Estos dispositivos utilizan longitudes de onda típicas de entre los 850 y los 910 nm, aunque existen otras longitudes de onda disponibles. Este tipo de diodos láser vienen en empaques de plástico, pareciéndose mucho a los LED's. Debido a esto, no es posible enfriarlos de forma adecuada por lo que la disipación de potencia se convierte en un factor limitante en su operación. 3.10 Diodos láser de emisión por la cavidad superficial vertical (Vertical Cavity Surface Emitting Laser Diodes -VCSEL) [21] En algunos diodos láser el haz producido se emite a partir de una de las caras del semiconductor. Este tipo de semiconductores es conocido como diodo láser Fabry-Perot debido a que su cavidad funciona de forma similar que la de un láser convencional de gas o de estado sólido. Los diodos láser tienen construida su cavidad de resonancia dentro del material semiconductor. Los espejos pueden ser ambos lados del chip, uno, o en su caso ambos lados son antirreflejantes y de forma externa se anexan espejos. Los diodos VCSEL (Vertical Cavity Surface Emitting Laser Diodes) emiten su haz a través de la superficie de la cara superior del material semiconductor. La cavidad está formada por un ciento o más de capas de espejos y por un láser semiconductor. Capítulo 3. Diodos láser. 40 Algunas de las características que presentan estos dispositivos son: a) Características del haz: La mayor parte de las características de un láser VCSEL pueden ser controladas, o en su defecto afectadas seleccionando el número y espesor de las capas de espejos y de otros parámetros del proceso de manufactura. Los diodos láser operanen modo simple y longitudinal, pero es posible encontrar algunos que funcionen en múltiples modos transversales. b) Perfil y forma del haz: De forma general los diodos de baja potencia del tipo de FP presentan un área de emisión de 1x3 µm mientras que en los diodos VCSEL la región de emisión puede ser diseñada para producir diferentes formas (aún en forma de dona o de anillo), esto permite producir un acoplamiento óptico adecuado para una fibra óptica multimodo. Los diodos láser VCSEL tienen un haz en forma circular de 5 a 25 µm de diámetro. La divergencia del haz es mucho menor que la que presentan los diodos con cavidad del tipo FP. Debido a esta forma circular del haz no es necesario hacer correcciones de asimetría ni de astigmatismo. Solo es necesaria una lente simple para poder producir una excelente colimación del haz. c) Baja corriente de disparo y baja corriente de operación: Los diodos láser del tipo de FP poseen una corriente de disparo promedio de 30 mA mientras que los diodos láser VCSEL poseen corrientes de disparo de 1 o 2 mA. Esto trae consecuencias positivas como bajos requisitos de potencia eléctrica, es posible alcanzar velocidades más altas de transferencia de datos, más velocidad de modulación, más simplicidad en la circuitería del controlador, menores emisiones radiadas. Para los diodos VCSEL es suficiente un control por corriente prescindiendo de la retroalimentación óptica que utiliza un fotodiodo, la cual en los diodos láser del tipo FP tiene la función de prevenir la destrucción del diodo láser por excesos de corriente. d) Pequeño tamaño: Mientras que los diodos láser del tipo FP presentan una longitud de 250 a 500 µm, los diodos VCSEL solo se limitan en tamaño por los contactos eléctricos. Estos dispositivos presentan un tamaño promedio de 100 µm pero este puede ser reducido hasta 50 µm o menos. Capítulo 3. Diodos láser. 41 e) Menores costos de manufactura: Durante la construcción de este tipo de dispositivos en posible hacer pruebas de umbral, de funcionamiento, forma del haz, calidad y estabilidad sin tener que separar los dispositivos de la oblea de semiconductor en donde se encuentran cientos de estos. En los diodos del tipo FP es necesario separa los diversos dispositivos de una oblea para que sean probados, lo que impide hacer modificaciones al dispositivo. f) Montaje y empaquetado simplificado: Los diodos VCSEL pueden utilizar empaquetados de plástico que no sean costosos, o combinarse con diversos componentes ópticos que en general tiendan a reducir costos. Las longitudes de onda disponibles para este tipo de diodos son de 780, 850 y 980 nm. Existen en el mercado diodos láser con longitudes de onda por arriba de los 1300 nm. 3.11 Características del haz de un diodo láser [20, 21] A diferencia de los láseres de He-Ne y de otro tipo de láseres de gas comunes, el haz puro obtenido a la salida, a partir de uno de los bordes del diodo láser, es altamente divergente y sufre de dos asimetrías: astigmatismo y el perfil del haz presenta forma elíptica. Al mismo tiempo el haz está polarizado linealmente de forma inherente. Todo esto se deriva de la forma de la apertura emisora en uno de los lados del diodo láser, la cual está alargada en vez de presentar una forma circular. Los diodos de baja potencia con una ventana emisora en su parte lateral, normalmente operan en un modo espacial sencillo para ambos ejes, mientras que el mismo tipo de diodo pero para altas potencias, mayores o iguales que 100 mW, presentan un modo espacial múltiple en el eje horizontal y un modo sencillo en el eje vertical. Para un diodo que trabaja en modo sencillo en ambos ejes es posible, con un poco de trabajo, enfocarlo con un límite de difracción. Esto es imposible de hacer para un diodo que presenta un modo espacial múltiple. Capítulo 3. Diodos láser. 42 La apertura emisiva lateral de un diodo láser, de forma típica, presenta dimensiones de 1 µm x 3 µm. Sin embargo para diodos de alta potencia las dimensiones podrán ser del orden de 10 µm o aún de 100 µm o más. El ángulo de divergencia,θ, está dado por la siguiente expresión: 2 720 d λθ π = (3.3) Donde: θ = ángulo de divergencia. λ = Longitud de onda del láser. d = diámetro del haz láser. π = constante. Para un diodo láser con una apertura emisiva de 1 µm x 3 µm el ángulo de divergencia será de 48 x 16 grados. Para un diodo láser con una apertura emisiva de 1 µm x 10 µm, el ángulo de divergencia será de 48 x 4.89 grados, mientras que para un diodo láser con apertura emisiva de 1 µm y 100 µm el ángulo de divergencia será de 48 x 0.48 grados. Un láser de He-Ne tiene un ángulo de divergencia de 0.05 grados para un haz con diámetro de 1 mm. La asimetría en dimensiones que existe, tanto en el eje X como el eje Y, hacen que el haz del diodo láser presente un perfil elíptico. Este perfil a veces se describe con la forma de una cuña. Es posible observar que con este tipo de láseres de diodos se obtiene no un punto sino una línea recta o un rectángulo. El astigmatismo leve del diodo láser resulta de la divergencia desigual. Es posible observar que un diodo láser con potencia de 5 mW, presentará un astigmatismo de 40 µm, el cual será un valor típico. Capítulo 3. Diodos láser. 43 3.12 Coherencia espacial de los diodos láser [16, 17] Los diodos láser normalmente presentan una cavidad interna del tipo Fabry-Perot. Estos a su vez presentan una coherencia espacial del orden de milímetros. Los láseres grandes presentan una coherencia espacial comparable a la longitud física de la cavidad de resonancia. Los diodos láser tienen un tamaño de fracción de milímetro en uno de sus lados. Debido a esto se espera obtener una coherencia espacial baja. Debido a su estabilidad en el tiempo, la cual no es muy grande, es posible obtener una coherencia espacial de 20 cm o más, valores que son usuales. Este tipo de coherencia es similar a la coherencia obtenida para un láser de He-Ne. 3.13 Coherencia temporal en los diodos láser [16,17] La coherencia temporal en los diodos láser depende de la fuente de alimentación utilizada y de la retroalimentación óptica del diodo láser. Con un diodo de un modo longitudinal simple, sin retroalimentación óptica, y una corriente de ruido menor a 1 µA RMS en un ancho de banda de ruido de 1 MHz, es posible obtener anchos de línea de 10 MHz para una coherencia temporal del orden de nanosegundos. Con la existencia de una retroalimentación óptica, el ancho de línea se puede disminuir drásticamente a pocos Hercios o dispararlo a varios THz (Tera hercios), dependiendo de la intensidad y del tiempo de retraso entre la luz emanada del diodo y de la que regresa al mismo. 44 Capítulo 4 Desarrollo del sistema con diodos láser. Capítulo 4. Desarrollo del sistema con diodos láser. 45 4.1 Introducción Como ya se mencionó en el capítulo 3, un diodo láser es un dispositivo semiconductor muy sensible a las variaciones de corriente. Exceder el nivel máximo permitido aunque sea por un microsegundo dañará permanentemente el dispositivo. Debido a esto se debe de tener mucho cuidado en el diseño del controlador del diodo láser, por lo que hay que tener en consideración algunas características como son: [23] a) Restricción absoluta de la corriente: Esto incluye inmunidad a los transitorios en la línea de alimentación así como aquellos que ocurran al encender y apagar la alimentación de un diodo láser cuando éste funciona en ciclos. Los parámetros de diversos componentes electrónicos, como es el caso de los circuitos integrados, rara vez especifican los cambios en la alimentación en ciertos periodos de tiempo. No se recomienda el uso de amplificadores
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