AüLVAREZ-SAüNCHEZ-ITANDEUI-MARAìA-REBECA

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INFORME TÉCNICO DE LA OPCIÓN CURRICULAR EN LA MODALIDAD DE: 
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN. 
 
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL 
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA 
TÍTULO DEL TRABAJO: 
ESTABLECIMIENTO DE UN MÓDELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA 
LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD 
FARMACOLÓGICA. 
QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE 
INGENIERO FARMACÉUTICO. 
PRESENTA: 
ÁLVAREZ SÁNCHEZ ITANDEUI MARÍA REBECA. 
 
MÉXICO, D. F. MAYO DE 2009 
DIRECTOR INTERNO: DRA. MARIA GUADALUPE RAMIREZ SOTELO. 
EVALUADORAS: M en C. YOLANDA DE LAS MERCEDES GOMEZ Y GOMEZ 
 Q.F.B.MARIA DE LOURDES MORENO RIVERA 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
 
 
DEDICATORIA: 
Dedico este trabajo a mis padres Martin y Rosalba quienes hicieron mucho esuerzo y sacrificios para 
que yo terminara esta carrera,a dios por darme unos padres maravillosos, y una amilia hermosa. 
También dedico este trabajo a mis hermanos Selene, Juana y Antonio que me ayudaron alientandome a 
seguir adelante y me echaban porras para que no me venciera y triunfara 
También dedico este trabajo amis sobrinos Isaac,Aurora y Valeria por darme muchas alegrías 
A mi hija ABIL JHOANA a quien le debo la maravillosa experiencia de ser mamá a esa personita que 
es la luz de mi vida, el motor para seguir adelante, y el luchar para ser mejor persona para que se 
sienta orgullosa de mi., hija TE AMO. 
A Augusto por darme consejos, apoyarme, estar conmigo en los momentos difíciles y por ayudarme a 
terminar esta carrera a pesar de todas las diicultades 
A todos ustedes les dedico este trabajo que me ha costado mucho esfuerzo y dedicacion además de que 
lo elabore con mucho cariño quiero darles las gracias a mis padres por darme la vida y darme todo para 
salir adelante, y aquí les digo que los amo a ustedes y a mis hermanos y que nunca voy a dejar de 
agradecerles lo que han hecho por mi. 
A todos ustedes les dedico este pensamiento 
El amor es como una mariposa. 
Mientras más lo persigues más te evade. Pero si lo dejas volar, regresará a ti cuando menos lo esperes. 
El amor puede hacerte feliz, pero muchas veces duele, pero el amor sólo es especial cuando se lo 
entregas a alguien que realmente se lo merece. 
Así que tómate tu tiempo y elige lo mejor.
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
 
 
AGRADECIMIENTOS 
Existen unas personas bien cerca de nosotros que en la mayoría de las ocasiones 
nos brindan su amistad y su cooperación justo en el momento cuando lo 
necesitamos. Y en esta ocasión deseo expresar mi gratitud a todas estas 
personas: GRACIAS;DIOS por dejarme conocer a todos estas personas en mi 
vida para darme alguna enseñansa Papi y mami, por el esfuerzo, cariño, apoyo, 
consejos y esas alentaciones para seguir adelante gracias por darme la vida y una 
carrerapor que sin ustedes no estaría realizando este trabajo; ELSA,VERONICA,Y 
SOBRE TODO ESPECIALMENTE A MIRELLA SANCHEZ por las horas que me 
dedicas a ofrecerme ayuda técnica; GUADALUPE SOTELO YOLANDA GOMEZ, 
LOURDES MORENO por darme sus conocimientos y su asesoramiento, ayuda 
técnica cuando lo necesite siempre me extendieron la mano; AUGUSTO, por 
ofrecerme su amistad y su cooperación desde el salón de clases hasta mi casa; A 
MIS HERMANOS por los consejos ayuda y compañía y por todo su cariño; ABIL 
JHOANA, gracias por los momentos mágicos que me has hecho pasar, por 
hacerme muy feliz y por darme una luz y una espernza en la vida, Gracias. Y a 
todas aquellas otras personas que me han ofrecido su amistad en tan corto 
tiempo. A todos, GRACIAS, Muchísimas gracias, de todo corazón, todo eso vale 
mucho para mí. 
Les dedico a todos ustedes este pensamiento : 
 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
I 
 
ÍNDICE. Pág. 
RESUMEN .......................................................................................................................................................... 1 
1.- INTRODUCCIÓN ........................................................................................................................................... 2 
1.1.- TRANSTORNOS METABÓLICOS ............................................................................................................. 2 
1.2 ENFERMEDADES DEL PÁNCREAS ........................................................................................................... 2 
1.3 DIABETES .................................................................................................................................................... 2 
1.3.1 TIPOS DE DIABETES ............................................................................................................................... 3 
1.4 INSULINA ..................................................................................................................................................... 5 
1.5 MECANISMO DE ACCION DE LA INSULINA ............................................................................................. 7 
1.6 METABOLISMO DE LA GLUCOSA ............................................................................................................ 9 
1.7 PÁNCREAS ................................................................................................................................................ 11 
1.8 PRODUCTOS NATURALES ...................................................................................................................... 13 
1.8 UBICACIÓN DE LOS ISLOTES DE LANGERHANS ................................................................................. 12 
1.8.1.1.-Galega, Ruda cabruna ....................................................................................................................... 13 
1.8.1.2.-Alcachofera ........................................................................................................................................ 14 
1.8.1.3.-EUCALIPTO ........................................................................................................................................ 15 
1.8.1.4.-Fenogreco .......................................................................................................................................... 16 
1.9 MODELOS PARA ESTUDIAR LA DIABETES ........................................................................................... 17 
2. EFECTOS TÓXICOS .................................................................................................................................... 20 
2.1 ESTREPTOZOTOCINA .............................................................................................................................. 21 
2.1.1.-Selectividad de las células beta por estreptozotocina ...................................................................... 21 
2.1.2.-La inhibición de la secreción de insulina por estreptozotocina ....................................................... 22 
2.1.3 Mecanismo de acción de la estreptozotocina ..................................................................................... 22 
3.- JUSTIFICACIÓN ......................................................................................................................................... 23 
4.- OBJETIVOS ................................................................................................................................................ 24 
4.1 Objetivo General ...................................................................................................................................... 24 
4.2 Objetivos específicos ...............................................................................................................................24 
5.- METODOLOGÍA .......................................................................................................................................... 25 
5.1 MÉTODO TEMPORAL ............................................................................................................................... 26 
5.2 MÉTODO PERMANENTE .......................................................................................................................... 26 
5.3 Diseño del modelo experimental para la inducción de diabetes tipo 1 ............................................... 26 
5.4 Determinación de los niveles de glucosa en rata .................................................................................. 27 
5.5 Estudio histopatológico del páncreas .................................................................................................... 27 
5.6 TECNICA DE LA PARAFINA ..................................................................................................................... 27 
5.8 PRUEBA CUALITATIVA DE GLUCOSA OXIDASA .................................................................................. 28 
6.-MEMORIA DE CÁLCULO PARA LA METODOLOGIA TEMPORAL .......................................................... 29 
6.1 Método de glucosa ................................................................................................................................... 31 
6.2.-MEMORIA DE CÁLCULO PARA LA METODOLOGIA TEMPORAL ....................................................... 32 
7.-RESULTADOS DE GLUCOSA EN AYUNO .......................................................................................... 33 
7.1 RESULTADOS DE LA DIABETES TEMPORAL ...................................................................................... 34 
7.2 MEMORIA DE CÁLCULO PARA LA METODOLOGIA PERMANENTE ................................................... 39 
7.2.1 Preparacion de solución de estreptozotocina ..................................................................................... 40 
7.2.2 Cálculos para la administración de estreptozotocina en las ratas ................................................... 40 
7.3 RESULTADOS DE LA DIABETES PERMANENTE .................................................................................. 41 
7.4 RESULTADOS DE LA HISTOLOGIA DEL PANCREAS ........................................................................... 45 
8.- ANÁLISIS DE RESULTADOS .................................................................................................................... 47 
9.- BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................................................................... 50 
10.- CONCLUSIONES: ..................................................................................................................................... 49 
11. -GLOSARIO ................................................................................................................................................ 52 
12.- ABREVIACIONES ..................................................................................................................................... 53 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
II 
 
INDÍCE DE TABLAS 
 
 
Tabla 1. Animales empleados para investigar diversos aspectos de la Diabetes. ................................... 18 
Tabla 2. Modelos experimentales que no utilizan animales íntegros. ........................................................ 19 
Tabla 3 Volumenes de administración .......................................................................................................... 30 
Tabla 4 Determinación de glucosa ................................................................................................................ 32 
Tabla 5 Determinación de glucosa ................................................................................................................ 32 
Tabla 5 Volumenes de administracion para las ratas tratadas ................................................................... 40 
Tabla 6 Determinación de glucosa ................................................................................................................ 32 
Tabla 7 Determinación de glucosa después de la inyección de la rata A .................................................. 33 
Tabla 8 Determinación de glucosa después de la inyección de la rata D .................................................. 34 
Tabla 9 Concentraciones de glucosa de la primera experimentación ....................................................... 35 
Tabla 10 Concentraciones de glucosa de la segunda experimentación .................................................... 36 
Tabla 12 Concentraciones de glucosa de la segunda experimentación .................................................... 37 
Tabla 13 Volumenes de administración intraperitonial de solución de estreptozotocina ....................... 39 
Tabla 14 Diferencia de concentración de glucosa antes y después de la administración de SZT ......... 39 
Tabla 16 Tabla de concentraciones de glucosa en diabetes permanente del primer experimento ......... 40 
Tabla 17 Tabla de concentraciones de glucosa en diabetes permanente del segundo experimento .... 41 
Tabla 18 Tabla de concentraciones de glucosa en diabetes permanente del tercer experimento .......... 42 
 
 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE PRODUCTOS 
NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
I 
 
 
 
INDÍCE DE FIGURAS 
 
Figura 1.- Comparación entre a) situación normal y b) diabetes tipo I ........................................................ 4 
Figura 2 Comparación entre a) situación normal y b) diabetes tipo II ......................................................... 5 
Figura. 3 Molecula de la insulina ..................................................................................................................... 6 
Figura 4 Mecanismo de acción de la insulina ................................................................................................ 8 
Figura. 5 Proceso de la glucosa ...................................................................................................................... 9 
Figura. 6 Representación del mecanismo de glucosa ................................................................................. 10 
Figura 7 Pancreas ........................................................................................................................................... 11 
Figura. 8 Islotes de Langerhans .................................................................................................................... 12 
Figura. 9 Comparación de las propiedades químicas del alloxan y la estreptozotocina ......................... 20 
Figura. 10 Molécula de la estrepzototocina .................................................................................................. 22 
Figura.11 Reacciones de la glucosa oxidasa ............................................................................................... 28 
Figura 12 Inyección intraperitonial de glucosa ............................................................................................ 29 
Figura.13 Prueba de la glucosa por medio del kit (kit de Optium Xcced) .................................................. 31 
Figura. 14 Observacion de los islotes de Langerhans en un arata normal y en una rata diabetica ........ 44 
Figura. 15 Islotes de Langerhans en rata normal Fig. 16 Islotes de Langerhans en rta normal ............ 44 
Figura. 17 Islotes de Langerhans en diabetes Fig. 18 Islotes de Langerhans en diabetes .............. 45 
 
Grafica 1 Determinación de glucosa en ayuno ............................................................................................ 33 
Grafica 2 Comportamiento de la glucosa basal en ratassin tratamiento .................................................. 34 
Grafica 4 Concentracion de glucosa primer experimento .......................................................................... 35 
Grafica 5 Concentracion de glucosa segundo experimento ....................................................................... 36 
Grafica 6 Concentracion de glucosa tercer experimento ............................................................................ 37 
Gráfica 7 Diferencia de glucosa antes y despues de la administración .................................................... 40 
Gráfica 8 Comparación de la glucosa de la rata control y de las ratas tratadas primer experimento .... 41 
Gráfica 9 Comparación de la glucosa de la rata control y de las ratas tratadas primer experimento .... 42 
Gráfica 10 Comparación de la glucosa de la rata control y de las ratas tratadas tercer experimento .... 43 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCEMIA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
 
ÁLVAREZ SÁNCHEZ ITANDEUI MARÍA REBECA, * RAMÍREZ SOTELO MARÍA GUADALUPE, 
UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA, Avenida Acueducto s/n Barrio la Laguna Ticomán, 
Correo electrónico mgramirez@ipn.com.mx 
Palabras clave: diabetes, estreptozotocina, glucosa 
 
INTRODUCCIÓN: La diabetes es una alteración del metabolismo 
de los carbohidratos, lípidos y proteínas, caracterizada por niveles 
elevados de glucosa debido a fallas o defectos en la acción de la 
insulina, secretada por las células b del páncreas. Esta hormona es 
necesaria para que las células del organismo puedan utilizar la 
glucosa como combustible y transformarla en energía. La 
enfermedad se clasifica en tipos 1 y 2. Un modelo empleado para 
inducir la diabetes experimental tipo 1 es la destrucción química de 
los islotes Langerhans con estreptozotocina (SZT), misma que 
produce insulinismo pancreático debida a la destrucción progresiva 
de las células  en la rata. 
METODOLOGÍA: Este trabajo está dividido en dos fases 
experimentales. En la primera se indujo la diabetes temporal, en 
donde se seleccionaron 4 ratas (wistar) con peso de 250-300g y se 
les inyecto intraperitonialmente 3g de glucosa/kg de peso. En la 
segunda se seleccionaron 5 ratas (wistar) para la inducción de la 
diabetes tipo 1con peso de 250-300g divididas en 2 lotes, el 
primero de 2 ratas que son ratas control y se les inyecto buffer de 
citratos al 0.1M por inyección intraperitonial, y el segundo grupo 
conformado por 3 ratas se les administró una dosis única de 
estreptozotocina de 63mg/kg de peso por inyección 
intraperitonialmente. 
Glucosa en rata.-Se determinó la concentración de glucosa 
sanguínea mediante el método de la glucosa oxidasa utilizando el 
equipo Optium Xcced. 
 Estudio histopatológico del páncreas.-Se hizo la extracción dl 
páncreas de la rata control y con tratamiento. Éste fue perfundido 
con solución salina, fijado 12 horas con solución de formol al 4 % y 
deshidratado con alcohol etílico a concentraciones crecientes (70 a 
96 %) de 6 a 24 horas. Posteriormente, el tejido se aclaró con xilol, 
alcohol y parafina durante un periodo de 1 a 6 horas. Se efectuó la 
impregnación con parafina de 30 minutos a 6 horas, se realizaron 
cortes con un micrótomo y se tiñeron mediante la técnica de 
hematoxilina-eosina. El análisis se realizó en el Departamento de 
Patología del CINVESTAV- IPN 
RESULTADOS Y DISCUSIÓN: Se obtuvieron las mediciones de 
glucosa de las ratas en un ayuno de 3-4 horas (fig.1), en donde se 
observa un rango promedio de 75-80 mg/dl, de la concentración 
basal de glucosa sanguínea. 
 
Fig.1 Niveles basales de la concentración de glucosa en las ratas 
Wistar. Se muestra la desviación estándar de cada uno de los 
sujetos de experimentación 
Se obtuvieron las concentraciones de glucosa sanguínea en las 
ratas tratas con SZT (gráfica 1). 
 
Grafica 1 Se observa el incremento de concentración de glucosa 
conforme pasa el tiempo y se ve que las ratas B y D están arriba 
de las ratas control C y F. 
Los resultados de estos estudios muestran que las ratas sanas (en 
ayuno), conservan un rango similar de la concentración de glucosa 
basal. En estudios realizados de la resistencia a la glucosa 
mediante una cinética temporal, en donde las ratas fueron 
administradas intraperitonealmente con una concentración 
conocida de glucosa, se observó un incremento máximo de la 
concentración de la misma en sangre en un tiempo de 20-30 min, 
recuperándose al cabo de una hora a su estado basal (datos no 
mostrados). En cambio, en las ratas administradas con SZT, 
(grafica 1) se observó comoel nivel de glucosa de las ratas tratadas 
(B,D) es mayor que la ratas control (C,F), asi como el incremento 
en el tiempo de el descenso de la concentración de glucosa en las 
ratas tratadas. Este efecto claramente muestra el efecto que el 
SZT ha tenido en las células B del páncreas, mismo, que se 
confirmará por los estudios histopatológicos en proceso. 
CONCLUSIONES: 
• Se determinó que el promedio aproximado de 
concentracion de glucosa basal en ratas Wistar macho 
es de 78 mg/dL y que metabolizan la glucosa en un 
promedio de 20-30 minutos. 
• La concentraciónde glucosa sanguínea máxima en una 
administración de 3g Glucosa/kg peso en las ratas sin 
tratamiento es menor a 100 mg/dl. 
• La concentración de glucosa sanguínea en ratas tratadas 
con SZT y administradas con glucosa es mayor a100 
mg/dl, así como el tiempo de metabolización de la misma 
(mayores a 1 hora) 
BIBLIOGRAFÍA 
• González-Campo de Cos Manual de Bioquímica Editorial: 
Nacional: México 1989:42 
• Guyton-Hall. Fisiología médica. Editorial: Mc. Graw-Hill 
Interamericana 1997: 736 
• Cotran - Kumar Patología estructural y funcional. – 
Collins Editorial.: Mc. Graw-Hill Interamericana. Sexta 
edición. 
RA RB RC RD RE RRA
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ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
1 
 
RESUMEN 
 
La Diabetes Mellitus es debida a una alteración del equilibrio de las hormonas y demás factores 
que regulan el metabolismo de los hidratos de carbono, y, generalmente tienen por causa una 
lesión de los islotes de langerhans del páncreas que conduce a una merma de la secreción de 
insulina. Como consecuencia, hay pronto hiperglucemia y glucosuria, la tolerancia para el azúcar 
disminuye y la pérdida de glucosa por los riñones que lleva consigo una mayor eliminación de agua 
para mantenerla en disolución, explica la poliurea(aumento de la cantidad de orina), la sed, la 
pérdida de peso y el hambre que son características de la enfermedad. A medida que disminuye la 
capacidad de utilización de la glucosa se forma más cantidad de ésta a expensas de las proteínas, 
con lo cual aumenta el desgaste. 
La diabetes mellitus es consecuencia de una disminución de la secreción de insulina por las 
células beta de los islotes de langerhans. La herencia desempeña un papel importante en 
determinar en quiénes se desarrollará diabetes y en quiénes no. A veces lo haces aumentando la 
susceptibilidad de las células beta a sufrir la destrucción por sustancias químicas o favoreciendo el 
desarrollo de anticuerpos autoinmunitarios contra células beta, parece haber una simple tendencia 
hereditaria a la degeneración de las células beta. 
Un modelo empleado para inducir la diabetes experimental tipo 1 es la destrucción química de los 
islotes con estreptozotocina. La estreptozotocina (SZT) produce insulinismo pancreático por la 
destrucción progresiva de las células b en la rata. 
Los diferentes mecanismos de acción que tiene la estreptozotocina son los siguientes: 
1. Metilación del DNA, dado que la SZT opera como donadorde óxido nítrico en los islotes 
pancreáticos, induciendo la muerte de las células b. 
2. Destrucción autoinmune de células b. 
3. Inhibición de la enzima N-acetil-beta-D-glucosaminidasa que cataliza la ruptura de N-
acetilglucosamina unida a una proteína de 135 kD enlazada por un oxígeno (O-glicosilación). 
METODOLOGÍA: Este trabajo está dividido en dos fases experimentales. En la primera se induce 
a la diabetes temporal donde se seleccionaron 4 ratas (wistar) con peso de 250-300g y se les 
inyecto intraperitonialmente 3g de glucosa/kg de peso. En la segunda se seleccionaron 5 ratas 
(wistar) para la inducción de la diabetes tipo 1con peso de 250-300g divididas en 2 lotes, el primero 
de 2 ratas que son ratas control y se les inyecto buffer de citratos al 0.1M por inyección 
intraperitonial, y el segundo grupo conformado por 3 ratas se les administro una dosis única de 
estreptozotocina de 63mg/kg de peso por inyección intraperitonialmente. 
Glucosa en rata.- Se utilizó el método de la glucosa oxidasa (kit de Optium Xcced). Donde se 
picaron las ratas en la punta de la cola y por medio de una gota de sangre se determino la glucosa 
en sangre por medio del kit. 
Estudio histopatológico del páncreas.-Se seleccionó una rata al azar de cada uno para extraer 
el páncreas. Éste fue perfundido con solución salina, fijado 12 horas con solución de formol al 4 % 
y deshidratado con alcohol etílico a concentraciones crecientes (70 a 96 %) de 6 a 24 horas. 
Posteriormente, el tejido se aclaró con xilol, alcohol y parafina durante un periodo de 1 a 6 horas. 
Se efectuó la impregnación con parafina de 30 minutos a 6 horas, se realizaron cortes con un 
micrótomo y se tiñeron mediante la técnica de hematoxilina-eosina. El análisis se realizó en el 
Departamento de Patología del CINVESTAV- IPN 
RESULTADOS 
Los resultados de estos estudios muestran que las ratas sanas (en ayuno), conservan un rango 
similar de la concentración de glucosa basal. En estudios realizados de la resistencia a la glucosa 
mediante una cinética temporal, en donde las ratas fueron administradas intraperitonealmente con 
una concentración conocida de glucosa, se observó un incremento máximo de la concentración de 
la misma en sangre en un tiempo de 20-30 min, recuperándose al cabo de una hora a su estado 
basal (datos no mostrados). En cambio, en las ratas administradas con SZT, (grafica 1) se observó 
comoel nivel de glucosa de las ratas tratadas (B,D) es mayor que la ratas control (C,F), asi como 
el incremento en el tiempo de el descenso de la concentración de glucosa en las ratas tratadas. 
Este efecto claramente muestra el efecto que el SZT ha tenido en las células B del páncreas, 
mismo, que se confirmará por los estudios histopatológicos en proceso. 
http://www.monografias.com/trabajos/tomadecisiones/tomadecisiones.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos14/neuronas/neuronas.shtml#SISTYHORM�
http://www.monografias.com/trabajos14/metabolismo/metabolismo.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos14/ciclos-quimicos/ciclos-quimicos.shtml#car�
http://www.monografias.com/trabajos11/tole/tole.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos15/cana-azucar/cana-azucar.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos14/problemadelagua/problemadelagua.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos10/carso/carso.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos10/compo/compo.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos12/diabet/diabet.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos/celula/celula.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos13/heren/heren.shtml�
http://www.monografias.com/trabajos5/recicla/recicla.shtml#papel�
http://www.monografias.com/trabajos12/desorgan/desorgan.shtml�
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
2 
 
 
1.- INTRODUCCIÓN 
1.1.- TRASTORNOS METABÓLICOS 
Los trastornos metabólicos se refieren a una serie de alteraciones de los procesos 
bioquímicos relacionados con la síntesis de determinadas proteínas, el funcionamiento de 
procesos energéticos, el aprovechamiento de nutrientes tales como vitaminas o minerales 
y la eliminación de sustancias tóxicas para el organismo. (16) 
El metabolismo es el proceso que usa el organismo para obtener o producir energía por 
medio de los alimentos que ingiere. La comida está formada por proteínas, carbohidratos 
y grasas. Las sustancias químicas del sistema digestivo descomponen las partes de los 
alimentos en azúcares y ácidos, el combustible de su cuerpo. (9) El organismo puede 
utilizar este combustible inmediatamente o almacenar la energía en tejidos corporales, 
tales como el hígado, los músculos y la grasa corporal. 
Ocurre un trastorno metabólico cuando hay reacciones químicas anormales en el cuerpo 
que interrumpen este proceso. (5,9) Cuando eso ocurre, es posible que tenga demasiada 
cantidad de algunas sustancias o demasiado poco de otras que necesita para mantenerse 
saludable. Usted puede desarrollar un trastorno metabólico si algunos órganos, tales 
como el hígado o el páncreas, se enferman o no funcionan normalmente. 
1.2 ENFERMEDADES DEL PÁNCREAS 
Entre los transtornos del páncreas, se incluye la endocrinopatía mas frecuente, la 
diabetes mellitus enfermedad crónica que, por ejemplo,afecta a 6.5 y 10 millones de 
personas y ocupa el noveno lugar entre las causas de muerte por enfermedad en 
México.(2) 
La diabetes melitus consiste en un grupo de enfermedades en que hay incapacidad para 
producir o usar la insulina. De ello, resulta el aumento de glucosa en sangre 
(hiperglucemia) y la excreción de esta misma sustancia en la orina (glucosuria). El 
transtorno se singulariza por las tres “pes”: poliuria, que es la producción excesiva de la 
orina por la incapacidad de los riñones para reabsorber agua; polidipsia, o sed excesiva y 
la consecuente ingestión abundante de líquidos, y polifagia, que es la ingestion excesiva 
de los alimentos.(17) 
1.3 DIABETES 
La diabetes es un desorden del metabolismo, en el que los niveles de glucosa (azúcar) de 
la sangre están muy altos. La glucosa proviene de los alimentos que consume. La insulina 
es una hormona que ayuda a que la glucosa entre a las células para suministrarles 
energía, esta es un factor muy importante en este proceso (17). Durante la digestión se 
descomponen los alimentos para crear glucosa, la mayor fuente de combustible para el 
cuerpo. Esta glucosa pasa a la sangre, donde la insulina le permite entrar en las células. 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
3 
 
 
(La insulina es una hormona segregada por el páncreas, una glándula grande que se 
encuentra detrás del estómago). 
1.3.1 TIPOS DE DIABETES 
TIPO 1 
Es una enfermedad crónica (vitalicia) que ocurre cuando el páncreas no produce 
suficiente insulina para controlar apropiadamente los niveles de glucemia 
La diabetes es una enfermedad vitalicia para la cual aún no existe una cura. Existen 
varias formas de diabetes. La diabetes tipo 1 a menudo se conoce como diabetes juvenil 
o diabetes insulino-dependiente. En este tipo de diabetes, las células del páncreas 
producen poca o ninguna insulina, la hormona que permite que la glucosa entre en las 
células del cuerpo. (6) 
Sin suficiente insulina, la glucosa se acumula en el torrente sanguíneo, en lugar de 
penetrar en las células. El cuerpo, a pesar de los altos niveles de glucosa en el torrente 
sanguíneo, es incapaz de utilizarla como energía, lo que lleva a que aumente el hambre. 
Además, los altos niveles de glucemia hacen que el paciente orine más, lo que a su vez 
causa sed excesiva. En un lapso de 5 a 10 años después del diagnóstico, las células beta 
del páncreas productoras de insulina están completamente destruidas y el cuerpo ya no 
puede producir más insulina. La diabetes tipo 1 representa entre el 5% y el 10% de todos 
los casos diagnosticados de diabetes. (4) 
Síntomas 
• Aumento de la sed 
• Gasto urinario excesivo 
• Pérdidade peso a pesar del aumento del apetito 
• Náuseas 
• Vómitos 
• Dolor abdominal 
• Fatiga 
 
 
 
 
 
 
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003146.htm�
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003088.htm�
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PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
4 
 
 
 
Figura 1.- Comparación entre a) situación normal y b) diabetes tipo I 
Fig.1 Se muestra en el esquema a) la producción y unión de la insulina a la célula para permitir la entrada de 
glucosa, al contrario en el esquema b) se puede observar la diabetes 1 que está caracterizada porque no hay 
producción de insulina por lo tanto no hay una unión con la célula por el cual no puede haber una introducción 
de la glucosa. Por esta razón, las personas que padecen diabetes del tipo 1 se deben someter a un 
tratamiento insulino-dependiente. 
TIPO 2 
La diabetes tipo 2 es una enfermedad que dura toda la vida, caracterizada por altos 
niveles de azúcar en la sangre. Se presenta cuando el cuerpo no responde correctamente 
a la insulina, una hormona secretada por el páncreas. La diabetes tipo 2 es la forma más 
común de esta enfermedad. 
La diabetes es causada por un problema en la forma en que el cuerpo produce o utiliza la 
insulina. La insulina es necesaria para mover la glucosa (azúcar en la sangre) hasta las 
células, donde ésta se usa como fuente de energía. (6) 
Si la glucosa no entra en las células, el cuerpo no puede utilizarla para producir energía. 
Entonces queda demasiada glucosa en la sangre, lo que causa los síntomas de la 
diabetes. Resistencia a la insulina significa que la insulina producida por el páncreas no 
puede entrar en las células grasas y musculares para producir energía. Dado que las 
células no están recibiendo la insulina que necesitan, el páncreas produce cada vez más. 
Con el tiempo, se acumulan niveles anormalmente altos de azúcar en la sangre, una 
situación llamada hiperglucemia. Muchas personas con resistencia a la insulina tienen 
hiperglucemia y niveles altos de insulina en la sangre al mismo tiempo. Las personas con 
sobrepeso tienen mayor riesgo de padecer resistencia a la insulina porque la grasa 
interfiere con la capacidad del cuerpo de usarla. (2) 
Por lo general, la diabetes tipo 2 se desarrolla gradualmente. La mayoría de las personas 
con esta enfermedad tienen sobrepeso en el momento del diagnóstico. Sin embargo, la 
diabetes tipo 2 puede presentarse también en personas delgadas, especialmente en los 
ancianos. 
 
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5 
 
 
Síntomas 
Con frecuencia, las personas con diabetes tipo 2 no presentan síntoma alguno. En caso 
de presentarse síntomas, éstos pueden ser: 
• Aumento de la sed 
• Aumento de la micción 
• Aumento del apetito 
• Fatiga 
• Visión borrosa 
• Disfunción eréctil 
• Ausencia de la menstruación 
 
 
 Figura 2 Comparación entre a) situación normal y b) diabetes tipo II 
Fig.2 Se muestra en el esquema a) la producción y unión de la insulina a la célula para permitir la entrada de 
glucosa, al contrario en el esquema b) se puede observar la diabetes 2 En el caso de la diabetes del tipo 2, 
generalmente comienza con resistencia a la insulina, un trastorno en el cual las células no utilizan la insulina 
de manera adecuada. A medida que aumenta la necesidad de insulina, el páncreas pierde gradualmente su 
capacidad de producir insulina los receptores de las células se hacen más resistentes a la insulina y por lo 
tanto no permiten que la glucosa penetre en la célula. 
1.4 INSULINA 
La insulina es un polipéptido formado por 51 residuos de aminoácidos 
Es una hormona no esteroidea polipeptídica que se produce en las células beta de los 
islotes de langerhans y es liberada al torrente sanguíneo para que interactué con sus 
respectivos receptores que generalmente se encuentran en todos aquellos tejidos que son 
capaces de metabolizar glucosa. 
 
 
 
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003146.htm�
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003029.htm�
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003164.htm�
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003149.htm�
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6 
 
 
 
Fig. 3 Molécula de la insulina 
Figura 3. La insulina es una enzima producida por el páncreas que interviene en el metabolismo de los 
azucares. Su ausencia causa la diabetes. Consiste de dos cadenas polipeptidicas con 21 y 30 residuos de 
aminoácidos. Ambas cadenas están enlazadas a través de puentes disolfuro provenientes del azufre de la 
cisteína. Cada terna de letras en la figura representa una abreviatura del nombre (en ingles) del aminoácido 
original (Gly=glicina, Val=valina, etc.). () 
Esta sustancia se segrega en el páncreas, más concretamente en las células b en los 
llamados islotes de Langerhans, en forma de precursor inactivo, la proinsulina, que una 
vez sintetizada se transfiere, en un proceso dependiente de energía, al aparato de Golgi. 
La estructura activa está compuesta de dos cadenas unidas por dos puentes de disulfuro. 
Una vez en el aparato de Golgi, se almacena en forma de gránulos y es liberada por 
medio de un proceso de emiocitosis. De la insulina que llega al hígado, prácticamente la 
mitad es eliminada y la que alcanza la circulación periférica tiene una vida media de unos 
20 minutos y es, posteriormente destruida por la insulinasa del hígado y del riñón. 
La secreción de insulina en respuesta a la glucosa se realiza en dos pasos, en el primero 
se libera la hormona previamente sintetizada y, en el segundo, se debe a la conversión de 
precursores. La liberación de la insulina se halla bajo la acción de los estimulantes de los 
receptores b, como el isoprotenerol, y es inhibida por agentes bloqueantes b, como el 
propanolol. Su liberación se inhibe por los estímulos vagales, por la adrenalina, 
noradrenalina, serotonina y por la 2-desoxiglucosa. (14) 
La insulina es la principal hormona encargada de disminuir los niveles de glucosa en 
sangre. Esta hormona aumenta el transporte de glucosa al interior de las células y su 
conversión a glucógeno; además aumenta la oxidación del azúcar. Favorece el proceso 
de síntesis de lípidos y disminuye tanto la movilización de grasa de los depósitos, como 
su oxidación en el hígado; además, aumenta el transporte de algunos aminoácidos en las 
células blanco. Estas acciones ocurren rápidamente, no obstante, se sabe que la insulina 
ejerce acciones más tardías, por ejemplo el ser un factor de crecimiento celular. (4,5) 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
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7 
 
 
1.5 MECANISMO DE ACCIÓN DE LA INSULINA 
La insulina actúa en varias reacciones celulares. Primero, se une a receptores específicos 
que se encuentran en las células efectoras, la interacción que se produce entre esta 
sustancia y sus receptores va seguida de la disminución de los niveles intracelulares de 
AMPc. La insulina una vez unida a sus receptores impide el aumento de AMPc provocado 
por el glucagón y las catecolaminas y modera los niveles hepáticos de AMPc. Por lo tanto, 
una de las acciones de la insulina es modular la actividad de las hormonas dependientes 
del AMPc. 
Cuando se une a los receptores también facilita la penetración de la glucosa y de 
aminoácidos a las células del tejido adiposo y muscular por medio de diferentes 
mecanismos. En este caso, la insulina interviene de manera indirecta en el transporte de 
los ácidos grasos por la célula adiposa, puesto que estimula la producción de 
lipoproteínlipasa, una enzima que también estimula la hidrólisis de los triglicéridos 
plasmáticos. (10) 
Este polipéptido también influyede manera significativa en las vías metabólicas que 
siguen tanto la glucosa, los aminoácidos y los ácidos grasos después de la penetración en 
la célula. Básicamente, la insulina: 
• Estimula las vías que dan lugar a la producción de energía a partir de la 
glucosa, a una acumulación de energía en forma de glucógeno y de grasas 
• Estimula la síntesis de diversos tipos de proteínas, al mismo tiempo que 
interfiere en sus vías de degradación. 
• Interfiere en la gluconeogénesis. 
• Actúa como antagonista con las acciones mediadas por el AMPc. 
• Aumenta la captación celular de sodio, potasio y de fosfato inorgánico, 
independientemente de la utilización de la glucosa. 
• Estimula la síntesis de mucopolisacáridos. 
En la Fig.4 se plantea un esquema hipotético de la transducción de la señal en la acción 
de la insulina, como sigue: 
Tras la unión de la hormona, el receptor de la insulina es autofosforilado en las tirosinas y 
se activa la quinasa. El receptor fosforila sustratos intracelulares, incluidas las proteínas 
IRS-1 y Shc, las cuales, después de ser fosforiladas, se asocian con proteínas que 
contienen dominios SH2, como p85, SYP o Grb2. La formación del complejo IRS1-p85 
activa la PI 3-quinasa; el complejo IRS-l-SYP activa la SYP lo cual conduce a la activación 
del MEK. El complejo Shc-Grb2 hace de mediador en la estimulación de la unión de GTP 
a la P2l Ras, lo cual desencadena una cascada de fosforilaciones. Estas fosforilaciones 
probablemente se dan de forma secuencial, y en ellas interviene el protooncogén raf, la 
 
MEK, la quinasa de MAP y la quinasa II de S6. Es probable que el receptor se acople por 
separado a la activación de una fosfolipasa C específica que cataliza la hidrólisis de las 
moléculas de glucosil-PI en la membrana plasmática. El inositol fosfato glucano (IPG), 
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8 
 
 
producto de la reacción anterior puede actuar como segundo mensajero, especialmente 
en lo que se refiere a la activación de fosfatasas de serina/treonina y la posterior regu-
lación del metabolismo de la glucosa y los lípidos. (9) 
 
 
Figura 4 Mecanismo de acción de la insulina 
La insulina es la hormona “anabólica” por excelencia, permite disponer a las 
células del aporte necesario de glucosa para los procesos de síntesis con gasto de 
energía, que luego por glucólisis y respiración celular se obtendrá la energía 
necesaria en forma de ATP (mononucleótido de adenosina trifosforilado) que usa 
el metabolismo como unidad de energía transportable para dichos procesos. 
Mantiene la concentración de glucosa en nuestra sangre. Lo consigue porque 
cuando el nivel de glucosa es elevada el páncreas lo libera a la sangre. Su función 
es favorecer la absorción celular de la glucosa. 
Es una de las 2 hormonas que produce el páncreas junto con el glucagón (al 
contrario de la insulina, cuando el nivel de glucosa disminuye es liberado a la 
sangre). La insulina se produce en el Páncreas en los “Islotes de Langerhans”, 
mediante unas células llamadas Beta. (7) 
 
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9 
 
 
 
Fig. 5 Proceso de la glucosa 
Fig. 5 Se muestra la degradación del alimento en el intestino para transportar las proteínas al páncreas al ser 
degradados rápidamente por las incretinas, para ser trasportados al páncreas donde se encuentran las células 
beta en las cuales si hay un incremento de glucosa liberan la insulina para obtener una mayor captación de la 
glucosa, también en el páncreas se encuentran las células alfa las cuales se activan si hay menor cantidad de 
glucosa para liberar el glucagón y de esta manera se obtenga un menor gasto de energía. 
1.6 METABOLISMO DE LA GLUCOSA 
La insulina facilita el almacenamiento de la energía en el hígado. Las enzimas del 
metabolismo de carbohidratos son reguladas coordinadamente en el hígado en 
respuesta a la señal de la insulina 
1. Glucógeno sintasa 
2. Glucógeno fosforilasa 
3. Fosfofructoquinasa-1 (PFK-1) 
4. Fosfofructoquinasa-2 (PFK-2) 
5. Piruvato quinasa 
La insulina regula coordinadamente el metabolismo de la glucosa 
 
 
 
 
 
http://lovenurse.files.wordpress.com/2007/07/incretins_healthy.gif�
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10 
 
 
Fig. 6 Representación del mecanismo de glucosa 
Fig.6 Las seis enzimas marcadas en rojo son afectadas por la acción de la insulina, por tres mecanismos 
diferentes. Todas menos la glucógeno fosforilasa son estimuladas. Sin embargo, hay que observar que la 
PFK-2 es una actividad de una enzima bifuncional, la otra mitad de esta súper-enzima será tratada más tarde. 
El páncreas posee tanto una función endocrina como exocrina. Exocrinamente libera 
enzimas al tracto digestivo, mientras que endocrinamente se secretan diferentes 
hormonas al torrente sanguíneo para coordinar y regular el uso de la glucosa (14) 
El glucagón y la insulina permiten mantener el metabolismo de la glucosa en sangre por 
ello cuando hay aumento de la concentración de glucosa en sangre, la insulina se activa 
para disminuirla; por el contrario cuando están bajas el glucagón se activa para producir 
azucares. La acción de estas dos hormonas produce un estado homeostático con el fin de 
que no se produzcan efectos patológicos por una irregularidad en el control de la glicemia 
Después de que la glucosa entra en las células, permite la entrada de aminoácidos para 
la síntesis de ciertas proteínas necesarias, para que participen en procesos metabólicos. 
Además la insulina permite convertir la glucosa en glucógeno como fuente de reserva, 
también disminuye la glucógenolisis y enlentece la gluconeogenesis para disminuir el 
desarrollo de nueva glucosa, con el fin de preservar los niveles de glicemia en valores 
normales. 
Los niveles de glucosa son los que permiten la liberación o inhibición de la insulina o 
glucagón, ya que cuando existe una hiperglicemia las células beta se estimulan para 
producir insulina, y cuando hay un estado de hipoglucemia las células alfa permiten la 
liberación de glucagón que desencadena ciertos mecanismos para utilizar las reservas de 
glucosa. 
 
 
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11 
 
 
1.7 PÁNCREAS 
El páncreas es una glándula de acción mixta que interviene en la parte endocrina y 
además en la gástrica; la parte endocrina se aloja en la cola del páncreas donde se 
encuentran los islotes de langerhans, que contienen células beta productoras de insulina, 
células alfa productoras de glucagon y células delta que producen somatostatina que 
inhibe la liberación de hormona de crecimiento y controla la liberación de ciertas 
hormonas por parte de los islotes 
El páncreas se sitúa en un plano posterior y levemente inferior al estómago, consta de 
islotes de Langerhas (células endocrinas) y grupos de células productoras de encimas 
(acinos).Los cuatro tipos celulares de la porción endocrina son células alfa beta delta y F, 
las células alfa secretan glucagon, las beta insulina, las delta somatostatina, y las F 
polipeptido pancreático. 
El glucagon aumenta la glucemia y su secreción se estimula con el nivel bajo de la misma, 
y la insulina disminuye la glucemia, siendo estimulada su secreción por las 
concentraciones altas de glucosa en la sangre (17) 
 
Figura 7 Pancreas 
Fig.7 Se muestra la ubicación del páncreas, donde se hace una ampliación para poder observar los islotes de 
Langerhans donde se producen las células beta las cuales se encuentran dentro de estos islotes 
El glucagón y la insulina permiten mantener el metabolismo de la glucosa en sangre por 
ello cuando hay aumento de la concentración de glucosa en sangre, la insulina se activa 
para disminuirla;por el contrario cuando están bajas el glucagón se activa para producir 
azucares. La acción de estas dos hormonas produce un estado homeostático con el fin de 
que no se produzcan efectos patológicos por una irregularidad en el control de la glicemia. 
(6) 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
12 
 
 
1.8 UBICACIÓN DE LOS ISLOTES DE LANGERHANS 
En el páncreas se encuentran los Islotes de Langerhans y las Células Beta de los mismos 
se encargan de producir la hormona Insulina. 
El páncreas está ubicado en el abdomen por detrás y hacia la izquierda del estómago. 
Está adherido al intestino delgado y al bazo. Dentro del páncreas hay pequeños grupos 
de células llamados Islotes de Langerhans, allí se ubican las células Beta. 
Dentro de los islotes están las células Beta que producen la Insulina. En la gente que no 
padece de diabetes, la glucosa de la sangre (glucemia) estimula la producción de Insulina 
en las células Beta. Ellas "miden" los niveles de azúcar constantemente y entregan la 
cantidad exacta de Insulina para que la glucosa pueda ingresar a las células y ser 
aprovechada, manteniendo el azúcar en sangre en el rango normal de 60 a 120 mg. (12) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fig. 8 Islotes de Langerhans 
En la fig. 8 Se observa el páncreas, donde se observa una ampliación de los islotes de Langerhans en donde 
se ven las células , las cuales están produciendo insulina, para permitir la entrada de glucosa. 
 
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13 
 
 
1.9 PRODUCTOS NATURALES 
Los productos naturales de origen vegetal son recursos renovables de múltiple uso para el 
hombre. 
Son aquellos que en su composición contiene principios activos o partes obtenidas 
directamente o mediante procedimientos específicos de vegetales, minerales o animales 
cuyo uso se halla justificado por la práctica de la medicina tradicional o bien por estudios 
científicos. (21) 
1.9.1 PLANTAS MEDICINALES PARA EL TRATAMIENTO DE DIABETES 
1.9.1.1.-Galega, Ruda cabruna 
Nombre común o vulgar: Galega, Ruda cabruna 
Nombre científico o latino: Galega officinalis 
 
Características: 
Planta vivaz capaz de alzarse a un metro del suelo y que puede ser perenne, viviendo 
durante el transcurso de los años, aunque en los inviernos desaparece todo vestigio de 
vida para más tarde, al llegar abril, retomar su proceso vital con el nacimiento de nuevos 
vástagos de los que saldrán otra vez las hojas y los órganos reproductores. Las hojas son 
pinnadas, esto es, están formadas por foliolos, que no son otra cosa que una especie de 
falsas hojitas que en realidad corresponden a una misma hoja madre. 
Los alcaloides le confieren también propiedades diuréticas. 
Indicaciones, contraindicaciones: 
Los derivados de la guanidina y los flavonoides le confieren propiedades como 
hipoglucemiante y diurético. 
Indicado para estados en los que se requiera un aumento de la diuresis: afecciones 
genitourinarias (cistitis, ureteritis, uretritis, oliguria, urolitiasis), hiperazotemia, 
hiperuricemia, gota, hipertensión arterial, edemas, sobrepeso acompañado de retención 
de líquidos. 
Coadyuvante en el tratamiento de la diabetes. 
 
 
 
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14 
 
1.9.1.2.-Alcachofera 
Nombre vulgar: Alcachofera 
Nombre científico: Cynara scolymus L. 
Hábitat: Planta cultivada en muchos lugares 
del mundo y muy abundante en el mediterraneo, 
pocas veces asilvestrada. 
Características: 
Hábitat: Planta cultivada en muchos lugares del mundo y muy abundante en el 
mediterraneo, pocas veces asilvestrada. 
Características: Planta perenne de hasta 2 m. de altura de familia de las compuestas. 
Hojas pinnado lobuladas de más de 60 cm. de longitud, con lóbulos sin espinas y envés 
tomentoso. Capítulos vistosos muy grandes de hasta 15 cm. con las flores azuladas y las 
brácteas ovales. Receptáculo floral comestible. Planta cultivada en muchos lados del 
mundo y muy abundante en el mediterráneo, pocas veces asilvestrada. 
 
Componentes: 
 Ácidos: cafeolinico y decafeolquinico, cafeico, linoleico, oleico, pantoténico. 
(Flor) ferulico (planta.) 
 Vitaminas: B (Niacina,Ri bofamina,thiamina, B6) 
 Pigmentos Flavonoide Mucilago Inulina 
 Minerales, magnesio, fósforo, potasio hierro 
 
Propiedades medicinales 
 Antidiabética: Rebaja el nivel de azúcar en la sangre y previene o ayuda a 
combatir la diabetes (jugo de las hojas mezcladas con vino) 
 Diurético: Favorece la eliminación de liquido en el cuerpo, por lo que resulta 
interesante 
 
 
 
 
 
 
 
 
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15 
 
1.9.1.3.-EUCALIPTO 
Nombre vulgar: Eucalipto 
Nombre científico: Eucalyptus 
CARACTERÍSTICAS DEL EUCALIPTO: 
Árbol de gran porte, con tronco liso y Hojas persistentes, falciformes y coriáceas. Flores 
poco vistosas, con un receptáculo a modo de urna en la que quedan encerrados los 
estambres. Fruto en cápsula leñosa. 
PRINCIPIOS ACTIVOS DEL EUCALIPTO: 
• Aceite esencial (0,5-3.5 %): 
• Monoterpenos. 
• Sesquiterpenos. 
• Alcoholes enfáticos y monoterpénicos. 
• Sesquiterpenoles. 
• Óxidos terpénicos: eucaliptol (70-80%). 
• Aldehídos. 
• Ácidos polifenóncos: caféico, gálico, ferúlico y gentísico. 
• Flavonoides. 
• Taninos y elagitaninos. 
• Resina. 
• Triterpenos: ácido ursólico y derivados. 
APLICACIONES DEL EUCALIPTO: 
Afecciones respiratorias: asma, bronquitis, rinitis, faringitis, amigdalitis, traqueitis, gripe, 
resfriados. Afecciones urogenitales: vaginitis, cistitis. Diabetes tipo II. Dermatitis 
candidiásica y bacteriano. 
EFECTO TÓXICO DEL EUCALIPTO: 
Poco tóxico pero, a dosis altas, el aceite esencial puede originar gastroenteritis, náuseas, 
vómitos, hematuria, depresión respiratoria y coma. En aplicación tópica se dan casos de 
intolerancia, que cursan con eczema y prurito 
 
 
 
http://images.google.com.mx/imgres?imgurl=http://viviendosanos.com/wp-content/uploads/2007/12/eucalipto.jpg&imgrefurl=http://viviendosanos.com/2007/12/eucalipto-para-los-costipados.html&usg=__H_885EG7kbvgAb1eXyLUzjJlenE=&h=347&w=242&sz=10&hl=es&start=2&um=1&tbnid=oE82mebwjbT8kM:&tbnh=120&tbnw=84&prev=/images?q=eucalipto&hl=es&rlz=1R2GGLL_es&sa=N&um=1�
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16 
 
 
1.9.1.4.-Fenogreco 
Nombre vulgar: Fenogreco 
Nombre científico: Alholva trigonella 
 
Descripción: pertenece a la familia de las Leguminosas, y no suele alcanzar más del 
medio metro de altura. Produce unas vainas estrechas y largas en forma de hoz, dentro 
de las cuales se encuentran de 10 a 20 semillas amarillas. Toda la planta desprende un 
olor característico no muy agradable. 
Principios activos: 
 Semilla: Mucílago (hasta 50%) y Fitoestrógenos, como la diosgenina 
 Hoja: colina y betacarotenos 
 hemiterpenoide y-lactona, sotolon (3-hidroxi-4,5-dimetil-2(5H)-furanona 
 sesquiterpenos, alcanoles, glucósido de furostanol, trigonelina (N'-metil-6-
piridona-3-carboxilamida, 0.4 %) 
Ventajas medicinales: 
 Aumenta el contenido de lipoproteínas de alta densidad (Colesterol bueno) 
y disminuye el contenido de Colesterol total en la sangre. Esto hace que 
haya menos Colesterol disponible para que se fije en las paredes de las 
arteria y, de esta manera, previene el desarrollo de la arterosclerosis y las 
cardiopatías peligrosas sobretodo en los diabéticos. 
 Ayuda aprevenir la enfermedad de Alzheimer. Cuando esta enfermedad ya 
se ha desarrollado, esta planta contribuye a retardar el proceso. 
 El fenogreco es eficaz para curar el estreñimiento. 
 El polvo de las semillassuprime hemorragias y desinflama los tejidos. 
 Es una hierba para la diabetes que puedes utilizar. Lo más común es 
consumir las semillas de esta planta en forma de polvo. De esa manera, 
ayudarás a mejorar la tolerancia hacia la glucosa. 
Precauciones: 
 La alholva podría producir un empeoramiento de la obstrucción esofágica si 
la ingesta de agua no es la adecuada. 
 podría producir un empeoramiento de la oclusión intestinal si la ingesta de 
agua no es la adecuada. 
 Íleo paralítico. La alholva podría inducir la aparición de una obstrucción 
intestinal si la ingesta de agua no es la adecuada. 
 La alholva podría producir un empeoramiento de la obstrucción intestinal si 
la ingesta de agua no es la adecuada. 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
17 
 
1.10 MODELOS PARA ESTUDIAR LA DIABETES 
En las Tablas 1 y 2 se resumen los modelos más utilizados. Los más frecuentemente 
usados son aquellos en los que se induce la diabetes por medio del Alloxan y 
Estreptozotocina, le siguen los modelos con animales seleccionados genéticamente. De 
los modelos que no emplean al animal íntegro, los mas empleados son: los Kits que 
actualmente se comercializan, los cuales tienen instrucciones sencillas y determinan por 
ejemplo la actividad enzimática (catalasa, ácido ascórbico etc.,); el cultivo celular es muy 
usado también, se compran líneas celulares y se hacen alícuotas y después se congelan, 
sólo se van descongelando y cultivando en medios específicos.(3) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
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18 
 
Tabla 1. Animales empleados para investigar diversos aspectos de la Diabetes. 
Nivel de organización Son diabéticos 
debido 
a: Características del modelo 
 
Animales 
íntegros 
Son los que 
más se 
emplean 
porque se les 
evalúa como 
una entidad y 
se 
pueden 
apreciar 
aspectos 
variados 
desde 
su conducta, 
apariencia, 
tomar datos 
como la 
presión 
arterial ( 
invasiva o no 
invasiva) es 
factible la 
toma 
de muestras 
biológicas 
como 
orina, sangre 
y 
conservar los 
animales por 
largo tiempo o 
tomar 
muestras 
de diferentes 
tejidos para 
análisis 
posteriores 
Animales no 
manipulados o 
seleccionados 
genéticamente 
 
 
1. 
Estreptozotocina 
 
 
Se trata de animales de diversas cepas, 
pueden ser 
Ratones, ratas, conejos y perros. Se les 
puede inducir a 
un cuadro “diabético” por medio de 
fármacos (1,2); por 
Medio de una dieta rica en azúcares (3); y 
por manipulación quirúrgica (4). 
2. Aloxan 
 
3. Nutricional 
 
4. Quirúrgico 
|Animales 
manipulados o 
seleccionados 
genéticamente 
Ratón ob/ob 
 
Resistentes a leptina, desarrolla obesidad, 
e hiperfagia 
Rata db/db 
 
Deficientes en leptina. desarrolla obesidad, 
e hiperfagia 
 
Rata BB 
Estos ejemplares, presentan diabetes 
espontánea, con una incidencia del 77% 
en los machos y 87% en las hembras 
antes de los 120 días de vida. Son obesos, 
presentan insulinitis en el 100% de los 
animales. 
Rata Lewis Estas ratas son muy utilizadas porque 
“altamente” susceptibles a ser inducidas 
con estreptozotocina. 
Rata Goto-
Kakizaki 
 
Estas ratas no son obesas, exhiben un 
metabolismo hormonal y vascular similar al 
del paciente diabético. 
Corresponde a un modelo de diabetes tipo 
II 
Ratas Zucker 
i) delgadas 
ii) fa/fa 
 
i) Desarrollan hiperlipidemia, hiperglicemia 
cuando se les alimenta con purina 5008, 
ii) son obesas y presentan resistencia a la 
glucosa y nefropatía. 
 
Rata TZDN 
 
 
Desarrolla nefropatía diabética, mimetiza el 
patrón de la 
enfermedad con la progresion que se 
presenta en los 
pacientes 
Rata SHHF 
 
Estas ratas presentan nefropatía 
hipertensión, y 
congestión cardiovascular. Modelo de 
diabetes tipo II 
Rata 2SF1 Cruza que se obtiene de las cepas 
ZDF y SHHR 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
19 
 
Tabla 2. Modelos experimentales que no utilizan animales íntegros. 
Nivel de 
Organización 
¿Cómo se induce la 
diabetes? 
Características del 
modelo 
Limitaciones y 
ventajas 
Órganos y 
tejidos 
Se obtienen de 
animales 
diabéticos 
previamente por 
manejo 
farmacológico, 
quirúrgico nutricional 
o de 
alguna cepa 
específica. 
También se pueden 
manipular 
las condiciones 
ambientales “in 
vitro” para originar 
una 
condición fisiológica 
específica. 
Son órganos como el 
corazón, 
o el lecho 
mesentérico y la 
aorta. Se mantienen 
en 
soluciones 
fisiológicas por 
varias horas y se 
determinan 
diversos aspectos, 
por ejemplo 
la producción de 
óxido nítrico. 
La ventaja, es que 
son experimentos 
que se realizan en 
una sesión de 
horas, brindan de 
manera confiable 
información detallada 
de una 
reacción o una 
respuesta fisiológica. 
Limitación: no 
siempre se observa 
una respuesta 
congruente con otros 
modelos 
Células Se compran o se 
obtienen de 
animales íntegros. 
Se cultivan y se 
pueden hacer 
muchas repeticiones 
en un 
solo experimento 
La ventaja es que se 
obtiene 
información precisa 
de diversos 
eventos celulares. 
La limitación es que 
las células se 
hallan libres en un 
medio y en la 
realidad se hallan 
integradas 
formando un todo. 
Sub-celular Se adquieren en 
forma de “Kit “ 
Son productos 
sintéticos y 
semisintéticos que 
están 
diseñados para 
reaccionar con 
algún tipo específico 
de 
molécula o durante 
una 
reacción química. 
La ventaja es que 
cuantifica 
rápidamente una 
actividad 
específica. La 
limitación: estas 
reacciones las 
observamos en un 
medio artificial y nos 
da idea de lo 
que sucede, pero 
biológicamente 
puede tener diversas 
rutas 
metabólicas y 
originar diversos 
productos. 
 
 
ESTABLECIMIENTO DE UN MODELO DE RATA HIPOGLUCÉMICA PARA LA EVALUACIÓN DE 
PRODUCTOS NATURALES CON ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA. 
20 
 
2.-EFECTOS TÓXICOS 
El alloxan y la estreptozotocina son los más prominentes productos diabetogenicos 
químicos en la investigación de la diabetes. Ambos son análogos de la glucosa 
citotóxicos. Aunque su citotoxicidad se logra a través de diferentes vías, sus mecanismos 
de acción selectivos de células beta son idénticos. 
En la fig.9 se muestra en el primer cuadro los análogos de glucosa tóxicos a las células  
que son el alloxan y la estreptozotocina, enseguida la acción selectiva sobre las células  
es la captura por el transportador de glucosa GLUT-2 lo que va a provocar la muerte de 
las células  en el caso del alloxan provoca toxicidad por radicales libres y en el caso de 
estreptozotocina la toxicidad es por alquilación, donde se va a obtener como resultado la 
muerte de las células  por necrosis, el resultado de este tratamiento es la diabetes 
mellitus insulino-dependiente, lo que significa que obtuvimos una diabetes química debido 
a las sustancias utilizadas, las cuales denominamos como diabetes alloxan y diabetes 
estreptozotocina respectivamente. (11) 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fig. 9 Comparación de las propiedades químicas del alloxan y la estreptozotocina 
 
Análogos de la glucosa 
toxicos a las células β 
Acción selectiva sobre 
las células β 
 
DIABETES QUÍMICA 
 
Muerte de las células β 
 
Modo de la muerte 
celular 
 
 
RESULTADO 
Alloxan Estreptozotocina 
Captura por el transportador de 
glucosa GLUT-2 
Toxicidad por 
radicales libres 
Toxicidad por 
alquilacion 
Diabetes mellitus insulino dependiente 
Muerte celular de las células β por 
necrosis 
Diabetes 
estreptozotocina 
Diabetes 
alloxan 
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21 
 
2.1 ESTREPTOZOTOCINA 
La estreptozotocina, inhibe la secreción de insulina y provoca un estado de insulino-
dependiente diabetes mellitus. Ambos efectos puedenser atribuidos a sus propiedades 
químicas, al saber de su potencia alquilante (véase el cuadro de texto: Comparación de 
las propiedades químicas de alloxan y estreptozotocina). Al igual que con alloxan, su 
especificidad de la célula beta es principalmente el resultado de la absorción selectiva de 
celulares y la acumulación. 
 
2.1.1.-Selectividad de las células beta por estreptozotocina 
 
La estreptozotocina es un análogo de la nitrosourea en el que la N-metil-N-nitrosourea 
(MNU) está vinculado al carbono-2 de una hexosa. La acción tóxica de la 
estreptozotocina se debe a los alquilantes y compuestos químicamente relacionados, 
exige su asimilación en las células. 
La estreptozotocina es selectiva debido a que es acumulada en las células beta 
pancreática a través de la baja afinidad del transportador de glucosa GLUT2 en la 
membrana plasmática [14, 16]. Así, las células productoras de insulina que no expresan este 
transportador de glucosa son resistentes a la estreptozotocina]. 
La importancia de este transportador de glucosa GLUT2 se muestra en la observación 
de que la estreptozotocina provoca daños en los demás órganos que expresan este 
transportador, en particular el riñón y el hígado [17, 19]. 
 
2.1.2.-La inhibición de la secreción de insulina por estreptozotocina 
 
Los efectos de la estreptozotocina en la homeostasis de la glucosa y la insulina refleja la 
toxina inducida por alteraciones en la función de las células beta. Inicialmente, la 
biosíntesis, secreción de insulina y metabolismo de la glucosa (como la oxidación de 
glucosa y el consumo de oxígeno) son afectados [93-95]. En la otra parte, no tiene la 
estreptozotocina inmediata y directa inhibición sobre el transporte de glucosa [77] o en el 
momento de la fosforilación de la glucosa por la glucosinasa [39]. Sin embargo, el efecto 
lo presenta más tarde en las etapas de deterioro funcional de la célula beta, las 
deficiencias en términos de la expresión génica y la producción de la proteína conducen 
al deterioro del transporte y metabolismo de la glucosa.[96] 
Incluso antes de los efectos negativos en el ADN mitocondrial y alquilación y glicosilación 
de proteínas se hacen evidentes, la inducción de estreptozotocina por el agotamiento de 
NAD + que puede resultar en la inhibición de la biosíntesis y la secreción de insulina [82, 
85, 94]. 
Más tarde, la inhibición de la glucosa inducida por aminoácidos y la secreción de insulina 
da como resultado de la mitocondria disfunción de la enzima y el daño a la mitocondria 
del genoma puesto de manifiesto [99]. Este deterioro es más marcado de los nutrientes-
que para los no nutrientes inducida por secreción de la insulina. 
 
 
 
 
 
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22 
 
2.1.3 Mecanismo de acción de la estreptozotocina 
La estreptozotocina (SZT) produce insulinismo pancreático por la destrucción progresiva 
de las células b en la rata. En la actualidad, se han propuesto diferentes mecanismos de 
acción, tales como: 
 
1.- Metilación del DNA, dado que la estreptozotocina opera como donador de oxido nítrico 
en los islotes pancreáticos, induciendo a la muerte de células  
2.- Destrucción autoinmune de las células  
3.- Inhibición de la enzima N-acetil-beta-D-glucosaminidasa que cataliza la ruptura de N-
acetilglucosamina unida a una proteína de 135 kD enlazada por un oxigeno (O-
glicosilacion). Comparadas con otras células, las b producen más cantidad de esta 
enzima por lo que puede ser particularmente sensible al efecto del compuesto 
 
Fig. 10 Molécula de la estrepzototocina 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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23 
 
3.- JUSTIFICACIÓN 
Se desarrolla el siguiente proyecto para ayudar a la comunidad para mejorar su calidad de 
vida y para que obtengan un mejor tratamiento de la diabetes ya que por su naturaleza 
epidemiológica, la diabetes se ha convertido en un problema grave de salud pública a 
nivel mundial. De hecho, se estima que hoy en día existen más de 143 millones de 
individuos con este padecimiento, y muchos de ellos aún no lo saben. 
Según la Federación Mexicana de Diabetes, esta enfermedad afecta actualmente a más 
de 246 millones de personas en el mundo y se cree que en 2025 alcanzará los 333 
millones; la mayoría de los casos se presentan en países en vías de desarrollo 
En México, el número de diabéticos fluctúa entre los 6.5 y los 10 millones (la prevalencia 
nacional es de 10.7 por ciento en personas entre 20 y 69 años); de ese total, dos millones 
no han sido diagnosticados. 
Esas cifran llevan a la nación a ocupar el noveno lugar a nivel global. Aquí, 13 de cada 
100 muertes son provocadas por esa pandemia y el grupo de edad con mayores decesos 
se ubica entre los 40 y los 55 años. Asimismo, una de cada tres defunciones reporta a la 
diabetes como causa secundaria. 
También se ha reportado, que la diabetes afecta en mayor medida a las mujeres; sin 
embargo, en promedio, los varones con diabetes mueren a una edad más temprana que 
las féminas (67 contra 70 años respectivamente). 
Actualmente hay que llevar un tratamiento muy estricto y caro a base de medicamentos e 
insulina la cual en ocasiones es rechazada por el organismo y el tratamiento no es muy 
efectivo, por esta razón se decide trabajar con plantas medicinales para no dañar tanto al 
organismo con la toxicidad de algunos medicamentos, además de que no se ha 
presentado ningún tipo de reacción adversa en el tratamiento con plantas medicinales y el 
costo es mucho menor. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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24 
 
4.- OBJETIVOS 
4.1 Objetivo General 
 Establecer el modelo de rata hipoglucemica para la evaluación de productos 
naturales con actividad farmacéutica 
4.2 Objetivos específicos 
 Determinar las condiciones experimentales para establecer el modelo de rata 
hipoglucemica 
 Determinar la concentración de los niveles basales de glucosa por química 
sanguínea del modelo (rata wistar) 
 Realizar las pruebas preliminares de inducción de diabetes temporal en ratas 
wistar 
 Realizar pruebas preliminares de inducción de diabetes permanente al modelo de 
rata wistar. 
 Observar el daño producido en el las células a nivel de páncreas por 
estreptozotocina en la rata wistar mediante inmunohistoquímica. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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25 
 
5.- METODOLOGÍA 
 
Este trabajo está dividido en dos fases experimentales. En la primera se induce a la 
diabetes temporal donde se seleccionaron 4 ratas (wistar) con peso de 250-300g y se les 
inyecto intraperitonialmente 3g de glucosa/kg de peso. En la segunda se seleccionaron 5 
ratas (wistar) para la inducción de la diabetes tipo 1con peso de 250-300g divididas en 2 
lotes, el primero de 2 ratas que son ratas control y se les inyecto buffer de citratos al 0.1M 
por inyección intraperitonial, y el segundo grupo conformado por 3 ratas se les administro 
una dosis única de estreptozotocina de 63mg/kg de peso por inyección 
intraperitonialmente. 
 
Glucosa en rata.- Se utilizó el método de la glucosa oxidasa (kit de Optium Xcced). 
Donde se picaron las ratas en la punta de la cola y por medio de una gota de sangre se 
determino la glucosa en sangre por medio del kit. (Kit de Optium Xcced 
 
5.1 MÉTODO TEMPORAL 
Método de tolerancia a la glucosa 
• Para el estudio utilizamos ratas Wistar machos (obtenidas del bioterio del 
CINVESTAV-IPN) con peso entre 250g – 300 g 
• Para la solución de glucosa se utilizo dextrosa (Reasol) 
• Prueba de Tolerancia a la Glucosa (PTG) 
Para realizar la prueba administramos glucosa arazón de 3 g por kg de peso, 
por inyección intraperitoneal. La sangre para determinar insulina y glucemia se 
obtendrá de la punta de la cola después de 10 min de administrar glucosa y asi 
sucesivamente. Determinaremos la glucemia por medio de un kit 
5.2 MÉTODO PERMANENTE 
Material y métodos 
Este trabajo experimental se basa en la administración de estreptozotocina (SZT) para 
inducir a la diabetes tipo 1. Se selecciono las dosis de SZT adecuadas para inducir a 
diabetes tipo 1 en los animales de prueba, caracterizada por hiperglucemia moderada, ya 
que se administro una dosis de 65 mg/kg de peso.(revista mexicana) 
5.3 Diseño del modelo experimental para la inducción de diabetes tipo 1 
Se emplearon ratas (wistar obtenidas del bioterio del CINVESTAV-IPN) macho con peso 
de 280 a 360 g. 
 
 
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26 
 
Posteriormente, se realizo el Control negativo que contuvo Buffer de citratos 0.01 M pH 
4.5 estéril IP (2 ratas). Tratamiento con estreptozotocina: 65 mg/kg peso (3 ratas),y se 
realizo la cinética de glucosa 
Se dejo pasar un tiempo de dos a cuatro semanas de tratamiento post-administración de 
estreptozotocina, se determinaron los niveles de glucosa sanguínea por medio de un kit 
(kit de Optium Xcced) y se realizó el estudio histopatológico del páncreas (realizado en el 
CINVESTAV-IPN en el departamento de Patología). 
5.4 Determinación de los niveles de glucosa en rata 
Se utilizo el método de la glucosa oxidasa por medio de un kit (kit de Optium Xcced), que 
se fundamenta en la oxidación enzimática de la glucosa catalizada por la glucosa oxidasa. 
Durante esta reacción, mediada por peroxidasa, se produce peróxido de hidrógeno que 
reacciona con el fenol y la 4—aminofenazona, originando una quinoneimina. 
5.5 Estudio histopatológico del páncreas 
Se seleccionó una rata al azar de cada uno de los lotes para extraer el páncreas. Este 
fue perfiindido con solución salina, fijado 12 horas con solución de formol al 10 % y 
deshidratado con alcohol etílico a concentraciones crecientes (70 a 96 %) de 6 a 24 
horas. Posteriormente, el tejido se aclarara con xilol, alcohol y parafina durante un periodo 
de 1 a 6 horas. Se efectuó la impregnación con parafina de 30 minutos a 6 horas, se 
realizaron cortes con un micrótomo y se tiño mediante la técnica de hematoxilina eosina. 
La histología del páncreas se realizara por medio de la técnica de la parafina 
5.6 TÉCNICA DE LA PARAFINA 
 
Se utiliza para preparar cortes de tejido y poderlos observar a microscopio, por lo tanto 
estas son las características: 
 
 OBTENCIÓN O MUESTRA DE TEJIDO: 
 
 Se obtienen por una biopsia (extracción de un fragmento de tejido) 
 Se diseca con cuidado, el tejido por medio de un instrumento cortante 
(bisturí, tijeras, pinzas sacabocado, cuchilla para legrar). 
 Tamaño aproximado de 1cm en todas sus dimensiones. 
 En caso de cadáver se toma una muestra de tejido de preferencia recién 
muerto para evitar la degradación. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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27 
 
 FIJACIÓN: 
 
 Evita la degradación post-mortem. 
 Endurece los tejidos blandos. 
 Se usa formaldehido al 4% en solución acuosa amortiguada hasta obtener 
un pH neutro (formol). 
 Evita la lisis. 
 Sirve de Antiséptico 
 Se puede utilizar el tetra oxidó de osmio 
 fijador para microscopio electrónico. 
 
 DESHIDRATACIÓN: 
 
 Es una deshidratación gradual (se logra pasar el bloque de tejido por 
alcohol de diferentes potencies hasta llegar hasta el absoluto). 
 El alcohol no es un solvente de la parafina, así que hay que sustituirlo por 
xilol u otro solvente que se mezcle con el alcohol. 
 
 ACLARAMIENTO: 
 
 Se pasa el bloque deshidratado con alcohol a través de xilol en cambios 
sucesivos, hasta sustituir el alcohol por xilol en preparación para inclusión. 
 
 INCLUSIÓN: 
 
 El bloque penetrado por el xilol, se pasa por parafina caliente varias veces. 
 La parafina derretida llena los espacios antes ocupados por el agua y al 
endurecerse, cuando se enfría hace que el bloque esté listo para el corte. 
 
 CORTE: 
 
 Se elimina la parafina 
 Se hace el corte con el micrótomo. 
 El espesor del corte es de 3 a 6 µm. 1µm = (0.0001mm) (1X10−6m). 
 
 TINCIÓN Y MONTAJE: 
 
 La tinción se hace con soluciones acuosas para que la parafina que ha 
penetrado en el corte sea sustituido por agua y pasar la atreves del xilol, 
para eliminar el xilol y por varios baños de alcohol de diversas potencies y 
al final con agua. 
 Montaje: se pasa por una serie de recipientes con alcohol de diversas 
potencies hasta llegar al absoluto y después por el xilol se pone una gota 
de bálsamo de Canadá. 
 
 
 
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28 
 
5.8 PRUEBA CUALITATIVA DE GLUCOSA OXIDASA 
 
Este método es utilizado hoy en día para la determinación y cuantificación de glucosa en 
sangre y orina y vino a reemplazar a otros como la prueba de Benedict, debido a su 
mayor especificidad y sensibilidad. La prueba se basa el uso de una enzima llamada 
glucosa oxidasa que reconoce específicamente a una de las formas anoméricas de la D-
glucosa, la forma beta glucopiranosa. Esta enzima, en presencia de glucosa, oxígeno y un 
amortiguador de pH, genera gluconolactona y peróxido de hidrógeno. 
 
 
Fig.11 Reacciones de la glucosa oxidasa 
 
El peróxido de hidrógeno es a su vez sustrato de otra enzima, la peroxidasa, la cual en 
presencia de fenol y una amina aromática (en nuestro caso, la amino-4- antipirina) genera 
un compuesto de color rosado y agua. Por lo tanto, cuando el reactivo vira de incoloro a 
rosado, se demuestra la presencia de glucosa en la muestra. 
 
6.-MEMORIA DE CÁLCULO PARA LA METODOLOGÍA TEMPORAL 
Se pesaron todas las ratas y se tomaron solo dos ratas la de menor peso y la de mayor 
peso 
• Se les realizo la prueba de la glucosa descrita anteriormente (esta fue sin ayuno) 
• Se preparo una solución madre con dextrosa de la siguiente manera: 
 
 
• Después se tomo en cuenta el peso de la rata para poder ver cuántos gramos de 
azúcar se iban a admistrar ya que se tiene un antecedente de 3 g por kg de peso 
y se realizo de la siguiente forma: 
 
 
 
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29 
 
RATA A (menor peso) 
 
RATA D (mayor peso) 
 
• Después de obtener los resultados de cuanto se necesita de glucosa se hace la 
división entre la concentración de la solución madre para así saber cuánto se iba a 
administrar en la inyección intraperitonial 
RATA D 
 
RATA A 
 
• Enseguida se inyecto intraperitonialmente y se determina la glucosa por media del 
kit (kit de Optium Xcced) cada 15 min hasta 60 min 
Figura 12 Inyección intraperitonial de glucosa 
Fig.12 Esta figura muestra como se debe tomar la rata y en qué posición se introduce la jeringa para poder 
administrar la glucosa por vía intraperitonial 
 
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30 
 
Se realizó el mismo procedimiento para las ratas siguientes obteniendo los siguientes 
datos para administrar 
En la tabla 3 Se muestran los volúmenes a administrar intraperitonialmente en cada rata 
realizados por triplicado en diferentes días 
Tabla 3 Volumenes de administración 
RATAS Primer volumen 
administrado de glucosa 
 al 4.4M (mL) 
Segundo volumen 
administrado de glucosa 
 al 4.4M (mL) 
tercera volumen 
administrado de glucosa 
al 4.4M (mL) 
A 0.6 0.7 0.7 
E 0.57 0.6 0.6 
C 1 0.9 0.9 
W 0.63 0.63 
Estas administraciones se hicieron cada 10 min hasta alcanzar su glucusa basal 
6.1 Método de glucosa 
 
Material: