Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
TRABAJO ESCRITO CORRESPONDIENTE A LA OPCIÓN DE TITULACIÓN: CURRICULAR EN LA MODALIDAD DE: PROYECTO DE INVESTIGACIÓN INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA TÍTULO DEL TRABAJO: MICROENCAPSULACION DE UN EXTRACTO ACUOSO DE CAPULIN (Prunus serotina) EMPLEANDO SECADO POR ASPERSION Y MEZCLAS DE ALMIDON DE MALTODEXTRINA Y CHINCHAYOTE QUE PARA OBTENER EL TÍTULO DE INGENIERO EN ALIMENTOS PRESENTA: SERGIO DANIEL ALVARADO DE LEÓN Ciudad de México a, 14 Diciembre de 2016 DIRIGIDA POR: DR. JORGE YAÑEZ FERNANDEZ DR. MIGUEL AGUILAR MÉNDEZ NMBRE DIRECTOR(ES) Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página I Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página II Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página III ÍNDICE RESUMEN .................................................................................................................... 1 1. INTRODUCCIÓN ...................................................................................................... 2 2. ANTECEDENTES. .................................................................................................... 2 2.1. CAPULÍN. .............................................................................................................. 2 2.1.1. DISTRIBUCIÓN DEL CAPULÍN EN MÉXICO..................................................... 3 2.1.2. DENOMINACIONES DEL FRUTO. ..................................................................... 3 2.1.3. FORMAS DE PROPAGACIÓN. .......................................................................... 4 2.1.4. USOS. ................................................................................................................ 4 2.2. COMPUESTOS BIOACTIVOS. ............................................................................. 4 2.2.1. COMPONENTES BIOACTIVOS DEL CAPULÍN. ............................................... 5 2.2.1.1. POLIFENOLES ................................................................................................ 5 2.2.1.2. ANTIOXIDANTES. ........................................................................................... 7 2.2.1.3. FLAVONOIDES. .............................................................................................. 7 2.2.1.4. ANTOCIANINAS. ............................................................................................ 7 2.3 ENCAPSULACIÓN. ................................................................................................ 8 2.4 MÉTODOS DE ENCAPSULACIÓN. ....................................................................... 9 2.4.1 MICROENCAPSULACIÓN. ............................................................................... 11 2.4.2 INCLUSIÓN MOLECULAR. ............................................................................... 11 2.4.3 COACERVACIÓN. ............................................................................................ 11 2.4.4 EXTRUSIÓN. ..................................................................................................... 12 2.4.5 SECADO POR ENFRIAMIENTO/CONGELAMIENTO. ...................................... 12 2.4.6 COBERTURA POR LECHO FLUIDIZADO. ....................................................... 12 2.4.7 ATRAPAMIENTO POR LIPOSOMAS. .............................................................. 12 2.4.8 SECADO POR ASPERSIÓN. ............................................................................ 13 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página IV 2.4.8.1 MATERIALES EMPLEADOS PARA LA MICROENCAPSULACIÓN. ............ 13 2.4.8.2. ALMIDÓN. ..................................................................................................... 14 2.4.8.3. MODELOS DE FORMACIÓN DEL GRANULO DE ALMIDÓN. ..................... 15 2.4.8.4. FORMACIÓN DEL GRANULO DE ALMIDÓN. .............................................. 15 3. JUSTIFICACIÓN. ................................................................................................... 17 4. OBJETIVOS. .......................................................................................................... 18 4.1 OBJETIVO GENERAL. ........................................................................................ 18 4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS................................................................................. 18 5. METODOLOGÍA Y MATERIALES. ........................................................................ 19 5.1. METODOLOGÍA .................................................................................................. 19 5.2. EXTRACCIÓN DE ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ............................................ 21 5.3. CARACTERIZACIÓN DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ............................... 21 5.3.1 DETERMINACIÓN DE HUMEDAD DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ......... 21 5.3.2 PROPIEDADES DE FLUJO DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ................... 21 5.3.2.1. DENSIDAD APARENTE DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ..................... 21 5.3.2.2. DENSIDAD EMPACADA DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. .................... 22 5.3.2.3 ÍNDICE DE CARR DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ............................... 22 5.3.2.4 COCIENTE DE HAUSNER DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. .................. 22 5.3.2.5 ANGULO DE REPOSO DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ....................... 22 5.3.3. MORFOLOGÍA GRANULAR DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ................. 23 5.3.4. DETERMINACIÓN DE CAPACIDAD DE HINCHAMIENTO Y SOLUBILIDAD DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ................................................................................. 23 5.3.5. DETERMINACIÓN DE CAPACIDAD DE RETENCIÓN DE AGUA DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE.................................................................................................... 24 5.3.6. DETERMINACIÓN DE CENIZAS DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. .......... 24 5.3.7. FIBRA CRUDA DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ...................................... 25 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página V 5.3.8. DETERMINACIÓN DE GRASA DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ............. 25 5.4. OBTENCIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO DE CAPULÍN. ................................... 25 5.5. CARACTERIZACIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO. ............................................ 25 5.5.1. DETERMINACIÓN DE SOLIDOS SOLUBLES TOTALES (°BRIX) .................. 25 5.5.2. DETERMINACIÓN DE PH. ............................................................................... 26 5.5.3. DETERMINACIÓN DE ACIDEZ TITULABLE. .................................................. 26 5.5.4. DETERMINACIÓN DE AZUCARES TOTALES. ............................................... 26 5.5.5. DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE POR EL MÉTODO DE DPPH. ................................................................................................................................... 27 5.5.6. DETERMINACIÓN DE POLIFENOLES TOTALES POR EL MÉTODO DE FOLIN- CIOCALTEU. .............................................................................................................. 28 5.6. SECADO DE MEZCLA DE DISPERSIONES CON EL EXTRACTO ACUOSO ... 29 5.7. CARACTERIZACIÓN DEL MICROENCAPSULADO .......................................... 29 5.7.1. DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD ACUOSA. ................................................ 30 5.7.2. DETERMINACIÓN DE HUMEDAD. .................................................................. 30 5.7.3. DETERMINACIÓN DE SOLUBILIDAD. ............................................................ 30 5.7.4. DETERMINACIÓN DE LA MORFOLOGÍA DE LOS MICROENCAPSULADOS.30 6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN. .............................................................................. 31 6.1. CARACTERIZACIÓN DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ............................... 31 6.1.1. DETERMINACIÓN DE HUMEDAD, GRASA, CENIZA, FIBRA CRUDA. .......... 31 6.1.2. PROPIEDADES DE FLUJO. ............................................................................32 6.1.3. MORFOLOGÍA Y BIRREFRINGENCIA DEL GRANULO. ................................ 34 6.1.4. CAPACIDAD DE HINCHAMIENTO, SOLUBILIDAD Y CAPACIDAD DE RETENCIÓN DEL AGUA. .......................................................................................... 36 6.2. CARACTERIZACIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO DE CAPULÍN. ...................... 38 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página VI 6.2.1. SOLIDOS SOLUBLES TOTALES, ACIDEZ TITULABLE, AZUCARES TOTALES. ................................................................................................................................... 38 6.2.4. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE. Y POLIFENOLES TOTALES. .......................... 39 6.3. RENDIMIENTO DEL PROCESO DE ENCAPSULACIÓN POR EL MÉTODO DE SECADO POR ASPERSIÓN. ..................................................................................... 40 6.4. DETERMINACIÓN DE HUMEDAD, ACTIVIDAD ACUOSA Y SOLUBILIDAD DEL ENCAPSULADO. ....................................................................................................... 40 6.5. ANÁLISIS DE LOS COMPUESTOS BIOACTIVOS DEL CAPULÍN. ................... 41 6.6. MORFOLOGÍA DE LOS MICROENCAPSULADOS. ........................................... 43 7. CONCLUSIONES. .................................................................................................. 45 8. PERSPECTIVAS. ................................................................................................... 45 9. REFERENCIAS. ..................................................................................................... 46 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página VII Índice de figuras. FIGURA 1. FRUTOS DEL ÁRBOL DE CAPULÍN. ......................................................................... 3 FIGURA 2. CLASIFICACIÓN DE POLIFENOLES ......................................................................... 6 FIGURA 3. ESTRUCTURA DE LOS PRINCIPALES FLAVONOIDES. ................................................ 7 FIGURA 4. ESTRUCTURA DE LAS PRINCIPALES ANTOCIANINAS. .............................................. 8 FIGURA 5. ESQUEMA DE FORMACIÓN DEL GRANULO DE ALMIDÓN. ........................................ 16 FIGURA 6. ETAPAS DE LA METODOLOGÍA PARA MICROENCAPSULAR UN EXTRACTO ACUSO DE CAPULÍN. ................................................................................................................... 19 FIGURA 7. DETERMINACIONES PARA LA CARACTERIZACIÓN DE ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE, EXTRACTO ACUOSO Y MICROENCAPSULADOS. .............................................................. 20 FIGURA 8. MICROSCOPIA DE LUZ BLANCA DE LOS GRÁNULOS DE ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. 35 FIGURA 9. MICROSCOPIA DE LUZ POLARIZADA DEL GRANULO DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ................................................................................................................................. 35 FIGURA 10. GRÁFICO DE LA SOLUBILIDAD DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE RESPECTO A LA TEMPERATURA. .......................................................................................................... 37 FIGURA 11. GRÁFICO DE HINCHAMIENTO DEL GRANULO DE ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE RESPECTO A LA TEMPERATURA. .................................................................................. 37 FIGURA 12. MICROGRAFÍA DEL MICROENCAPSULADO CON MEZCLAS DE ALMIDÓN (7%) Y MALTODEXTRINA (3%). ............................................................................................... 44 FIGURA 13. MICROGRAFÍA DEL MICROENCAPSULADO CON MEZCLAS DE ALMIDÓN (5%) Y MALTODEXTRINA (5%). ............................................................................................... 44 FIGURA 14. MICROGRAFÍA DEL MICROENCAPSULADO CON MEZCLAS DE ALMIDÓN (3%) Y MALTODEXTRINA (7%). ............................................................................................... 44 FIGURA 15. MICROGRAFÍA DEL MICROENCAPSULADO CON MALTODEXTRINA (10%) ............... 44 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página VIII Índice de tablas. TABLA 1. TÉCNICAS DE ENCAPSULACIÓN CON SUS AGENTES ENCAPSULANTES Y COMPONENTES BIOACTIVOS QUE PROTEGEN. ............................................................... 10 TABLA 2. CLASIFICACIÓN DE AGENTES ENCAPSULANTES UTILIZADOS PARA MICROENCAPSULAR. ................................................................................................... 14 TABLA 3. TEMPERATURAS DE CALENTAMIENTO DE LAS SOLUCIONES PARA DETERMINAR CAPACIDAD DE HINCHAMIENTO Y SOLUBILIDAD. ............................................................ 23 TABLA 4. CONCENTRACIÓN Y VOLÚMENES PARA LA PREPARACIÓN DE LAS DILUCIONES DE LA CURVA ESTÁNDAR DE ÁCIDO ASCÓRBICO. .................................................................... 27 TABLA 5. PORCENTAJE DE LAS CONCENTRACIONES DE LOS AGENTES ENCAPSULANTES PARA LA PREPARACIÓN DE LAS DISPERSIONES CON EL EXTRACTO ACUOSO. ........................... 29 TABLA 6. RESULTADOS DE QUÍMICO PROXIMAL DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. .................. 31 TABLA 7. PROPIEDADES DE FLUJO DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE ..................................... 32 TABLA 8. ESCALA DE FLUIDEZ RESPECTO AL RANGO DEL ÍNDICE DE CARR. .......................... 33 TABLA 9. ESCALA DE FLUIDEZ RESPECTO AL RANGO DEL COCIENTE DE HAUSNER. ............... 33 TABLA 10. CLASIFICACIÓN DE LOS POLVOS RESPECTO AL RANGO DE ÁNGULO DE REPOSO ... 34 TABLA 11. CAPACIDAD DE HINCHAMIENTO Y PORCENTAJE DE SOLUBILIDAD DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE. ........................................................................................................... 36 TABLA 12. CAPACIDAD DE RETENCIÓN DE AGUA DEL ALMIDÓN DE CHINCHAYOTE.................. 38 TABLA 13. CARACTERIZACIÓN DEL EXTRACTO ACUOSO Y FRUTO DEL ÁRBOL DE CAPULÍN. .... 39 TABLA 14. RENDIMIENTOS DE LOS MICROENCAPSULADOS EMPLEANDO SECADO POR ASPERSIÓN. ............................................................................................................... 40 TABLA 15. CARACTERÍSTICAS FISICOQUÍMICAS DE LOS MICROENCAPSULADOS. .................... 41 TABLA 16. POLIFENOLES TOTALES DE LOS MICROENCAPSULADOS. ..................................... 42 TABLA 17. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE LOS MICROENCAPSULADOS. .................................. 43 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 1 Resumen El fruto de capulín contiene compuestos bioactivos los cuales promueven estados saludables y prevención de enfermedades. Algunos de los compuestos con actividad bioactiva son los polifenoles que desempeñan un papel importante tanto en las plantas como en los alimentos y que son usados principalmente como colorantes o antioxidantes. Algunos de estos componentes del capulín que aportan una importante actividad antioxidante son los flavonoides como kamferol, quercetina y antocianinas. Sin embargo, una limitante de estos componentes bioactivos es su baja estabilidad a cambios de temperatura, tensión de oxígeno y la luz entre otros. Al respecto los procesos de encapsulación se presentan como una alternativa para mantener la actividad la actividad de las moléculas antes mencionadas Es por eso que en el presente proyecto se evaluó el efecto del proceso de microencapsulación por secado por aspersión en las propiedades físicas y fisicoquímicas de un extracto acuoso de capulín (EAC). Para esto se realizaron diferentes formulaciones de almidón de chinchayote- maltodextrina (ACH-MAL). Bajo un diseño de mezclas Simplex Lattice, con 8 corridas experimentales donde las mezclas de ACH-MAL fueron de 7.5 a 2.5 respectivamente. El proceso de secado se realizó en un equipo BÜCHI Mini Spray Dryer B-290, empleando una temperatura de entrada de 120°C., flujo de 15% y aspiración de 100%. Los resultados mostraron el mejor rendimiento de 89.13% siendo un encapsulado con 10% de maltodextrina, también la muestra mostro la mejoractividad acuosa (0.268), humedad (2.21%) y solubilidad (75.43%). Por otra parte el microencapsulado que se desarrolló con 10% maltodextrina presento menor perdida de polifenoles totales con respecto a los demás microencapsulados mostrando una concentración de 73.97mg AG/ml. La muestra que mostro mejor actividad antioxidante fue una mezcla de almidón de chinchayote (7%) y maltodextrina (3%) teniendo un porcentaje de inhibición de 46.61%. Concluyendo: La corrida 3 no cambio su capacidad antioxidante respecto al extracto acuso siendo del 45.06%. Por ende las corridas con mezclas de almidón de chinchayote con maltodextrina favorecen a la estabilidad de la capacidad antioxidante, mientras que las corridas con mezclas con mayor contenido de maltodextrina favorecen a los polifenoles totales. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 2 1. Introducción En México hay una gran variedad de frutos que tienen una importante actividad antioxidante y contenido de fenoles denominados como compuestos bioactivos los cuales son constituyente de los alimentos que aportan efectos benéficos a la salud. Un fruto con gran potencial antioxidante es el fruto del árbol de capulín el cual sus compuestos bioactivos han sido el objeto de numerosos estudios debido y su efecto benéfico en la prevención de enfermedades cronicodegenerativas, como las cardiovasculares y cáncer. Además una función importante en la industria de los alimentos es que su presencia puede limitar el deterioro por reacciones de oxidación extendiendo la vida útil de estos productos (García et.al., 2009), también podría ser utilizado para la obtención de colorantes debido a su alto contenido de antocianinas. Por otro lado en estudios recientes se ha detectado en el capulín flavonoides como kamferol, quercetina y antocianinas, los cuales le aportan una importante actividad antioxidante al fruto de capulín. Estos compuestos bioactivos no son muy estables a los efectos medioambientales como la luz, temperatura, pH y el oxígeno. En la actualidad existen diferentes tecnologías que permiten la estabilidad de estos compuestos bioactivos, una de estas tecnologías es la microencapsulación. Donde el agente encapsulante confiere las propiedades de protección del compuestos activo. 2. Antecedentes. 2.1. Capulín. El capulín es un árbol que puede alcanzar 12 metros de altura, su corteza es rojiza y las hojas alargadas, tiene flores pequeñas que se agrupa en forma de racimos. Origina frutos en forma de pequeños globos color purpura, con hueso de forma ovalada. El fruto maduro es muy dulce y algo astringente (CONAFOR, 2016). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 3 Figura 1. Frutos del árbol de capulín. 2.1.1. Distribución del capulín en México. Habitan en climas cálidos, semicálidos, semisecos y templados. En México se le encuentra en zonas montañosas (Comisión nacional forestal, 2016), con altitud de 2500 metros o más. En México se produce en los estados de Guanajuato, Jalisco, Chiapas, Chihuahua, Coahuila, Durango, Hidalgo, Morelos, Oaxaca, Querétaro, San Luis Potosí, Tamaulipas, Veracruz y la Ciudad de México (CONAFOR, 2016). 2.1.2. Denominaciones del fruto. Nombres comunes en México: Capulín, Capulín Blanco (Rep. Mex.); Capulín (Mesa Central); Cerezo (Ario de Rosales, Mich.); Shencua, Shengua, Xengua (l. tarasca, Mich.); Cusabi (l. tarahumara, Chih.); Uasiqui, Jeco (l. guarigia, Chih.); Pakshumk (l. mixe, Oax.); T-nundaya (l. mixteca, Oax.); Tzu'uri (l. cora, Nay.); Paté, Shimal-ma-lu (l. chontal, Oax.); Capuli taunday (l. zapoteco, Oax.); Xeugua (Mich.); Detze, Ghohto (l. Otomí) (CONABIO, 2016). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 4 2.1.3. Formas de propagación. Se propaga por diferentes medios como la siembra directa con semillas, el estacado, los cortes de tallo y los injertos de yema. Cuando los frutos son maduros se cosechan de forma manual, normalmente se recogen uno por uno para no dañarlos, después se colocan en contenedores de plástico o carrizo y se cubren con las ramas del mismo árbol o de otras hierbas para ser trasladadas a los centros de venta o fabricas para ser procesados (CONAFOR, 2016). 2.1.4. Usos. Se puede consumir en fresco o transformado en varios productos como bebidas dulces, helados, jalea, mermelada, jarabe y miel (CONAFOR, 2016). La corteza del árbol de capulín y sus hojas se usan como expectorante, antiespasmódico, sedante, febrífugo y para combatir diarreas. 2.2. Compuestos bioactivos. Son constituyentes nutricionales extra que se encuentran en los alimentos en pequeñas cantidades que generan beneficios a la salud humana. También son referidos como nutracueticos. Están constituidos por un amplio rango de compuesto químicos con diferentes estructuras, actividad fisiológica, y masa moléculas entre 200 y 1000 Da (Pennington, 2002). Los compuestos bioactivos típicos son: carotenoides (α-carotenoides, β-carotenoides, licopeno, luteína), flavonoides (flavonoides, flavonas, isoflavonas, flavanoles, antocianinas), ácidos fenólico (ácido cinámico, ácido cafeico, ácido clorogénico, ácido cumárico, ácido ferúlico, ácido cítrico, ácido elágico, hidroxitirosol, tirosol, la oleuropeína), esteroles vegetales (β-sitosterol, campesterol, fitosteroles, saponina, escualeno, sigmasterol, estanol), resveratrol, probióticos, omega-3 ácidos grasos (ácido a-linoleico), proteínas, Compuestos orgánicos de azufre (alilo, sulfuros dialicos), índoles y monoterpenos (limoneno, alcohol perílico) (Drioli et. al., 2016). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 5 2.2.1. Componentes bioactivos del capulín. El capulín es altamente valorado por ayudar a contrarrestar los efectos de las enfermedades como hipertensión, dolores estomacales, infecciones bucales, diarrea, paludismo, bronquitis, y tos al igual que ayuda a prevenir cáncer. Esto es debido al contenido de componentes bioactivos de los cuales estudios recientes han revelado que en las hojas contiene kamferol, quercetina, isorramentina glucósidos, ácido ursólico y derivados y prunasina que en su mayoría son antioxidantes (Biessesls et. al., 1974). También han sido aislados glucósidos cianogénicos como la amigdalina y prunasina en las semillas. En la cascara del fruto contiene antocianinas. 2.2.1.1. Polifenoles Son sustancias importantes presentes en las plantas y alimentos que les confiere una importante capacidad antioxidante a estos y algunos su pigmentación. Dentro de los polifenoles descritos en las plantas se pueden clasificar en diferentes clases atendiendo el número de carbonos e hidroxilos que los constituyen y su estructura. Asimismo existen formas solubles simples, o completamente insolubles, como las ligninas. Los compuestos fenólicos de la dieta se pueden clasificar de siguiente manera: Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 6 Figura 2. Clasificación de polifenoles Ácidos Fenólicos Ácidos hidroxibenzoico Ácido gálico, P-ácido, hidroxibenzoico Ácidos hidroxicinámicos Ácido coumárico, ácido caféico, ácido ferúlico, ácido clorogénico Flavonoides Flavonoles Flavonas Flavanoles Flavanonas Antocianinas Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 7 2.2.1.2. Antioxidantes. Los antioxidantes es toda sustancia que retrasa o previene el deterior, daño o destrucción provocados por una oxidación. 2.2.1.3. Flavonoides. Son compuestos fenólicos y metabolitos secundarios biológicamente activos, pigmentos naturales presentes en frutas y vegetales (Wach et .al., 2005), normalmente como conjugados en formas glicosiladas o bien esterificadas, pero también pueden aparecer en su forma libre (agliconas), especialmente por el procesado de los frutos. Los flavonoides presentes en los frutos protegen al organismo del daño producido por agentes oxidantes (Martínez, 2002).Figura 3. Estructura de los principales flavonoides. 2.2.1.4. Antocianinas. Es un subgrupo de los flavonoides y es uno de los grupos de pigmentos más ampliamente distribuidos en el mundo vegetal. Son responsables de una amplia gama de colores en los vegetales y plantas, que incluyen el azul, purpura, violeta, magenta, rojo y naranja. Se Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 8 consideran flavonoides por que tiene el esqueleto carbonado C6C3C6 característico. (Badui, 2006). Comúnmente tienen dos enlaces dobles en el anillo heterocíclico y un hidroxilo en posición 3, y polimerizan fácilmente, dando lugar a compuestos conocidos como taninos que a su vez se clasifican en taninos condensados (proantocianidinas) y taninos hidrolizables (elagitaninos y galotaninos) (Seeram et .al., 2007). Un incremento del pH por encima de 4 produce una disminución del color de antocianinas y antocianidinas. Otros cambios de color se producen como consecuencia de la oxidación de las antocianinas produciéndose un oscurecimiento en los frutos (Murkovic, 2003). Figura 4. Estructura de las principales antocianinas. 2.3 Encapsulación. La encapsulaciones un proceso en donde delgadas películas, generalmente de materiales poliméricos son aplicadas a pequeñas partículas sólidas, liquidas, o gotas de gases que permiten atrapar estos componentes un matrices homogéneas o heterogéneas para su protección. Este método es muy utilizado para atrapar componentes activos y liberarlos bajo condiciones controladas. En la industria alimenticia el uso de esta tecnología es una práctica común, encontrando en forma encapsulada: antioxidantes, aminoácidos, Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 9 vitaminas, minerales, colorantes, enzimas y edulcorantes con el fin de mejorar su estabilidad dentro de los alimentos. (Deladino et. al., 2007). La encapsulación ofrece numerosos beneficios ya que añade un valor agregado al alimento, una mayor estabilidad entre los diferentes componentes así como la protección de un componente activo contra la luz, humedad, la temperatura, los daños mecánicos, la permeabilidad y la reactividad (al pH y/o a la presencia de sales) que pueden deteriorarlo (Wang et. al., 2004; kashappa et. al., 2005). Fang y Bhandari (2010), mencionan que la encapsulación de compuestos bioactivos involucra 3 pasos primordiales: 1. La formación de una pared alrededor del material encapsulado. 2. Aseguramiento de filtraciones no deseadas. 3. Aseguramiento que los materiales no deseados tengan contacto con el producto encapsulado. El tamaño de partículas formadas a través de la encapsulación pueden ser clasificadas como: macro (>5000 µm), micro (1-5000 µm) y nano (<1 µm) (Jafari et. al., 2008). 2.4 Métodos de encapsulación. Se clasifican en procesos físicos (secado por aspersión, extrusión, y recubrimiento por aspersión), fisicoquímicos (coacervación simple o compleja y atrapamiento en liposomas), químicos (polimerización interracial e inclusión molecular) (Ré, 1998). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 10 Tabla 1. Técnicas de encapsulación con sus agentes encapsulantes y componentes bioactivos que protegen. Técnicas de encapsulación Biopolímeros Componentes activos Secado por aspersión Maltodextrina, goma arábiga, diferentes aislados de proteínas, caseinato de sodio, polisacárido de soya soluble, β-ciclodextrina, goma de mezquite Aceite de naranja, acetato de linalol, cardamomo, d- limoneno Inclusión molecular β-ciclodextrina Linalol, aceite de cascara de naranja, d-limoneno, aceite de limón, sabor café natural y sintético Coacervación Gelatina, polifosfato de sodio, goma arábiga Aceite de romero, aceite de menta, teobromina Extrusión Maltodextrina, azúcar simple o almidón modificado Sabores, vitamina C, colorantes Secado por enfriamiento/congelamiento Aceites vegetales hidrogenados o aceites de bajo punto de fusión Aditivos alimentarios sólidos, sabores solidos Cobertura por lecho fluidizado Hidrocoloides, polímeros solubles en disolvente, carbohidratos simples Sólidos, por lo general producto farmacéuticos Adaptada de kashappa et al. (2005) Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 11 2.4.1 Microencapsulación. La microencapsulación es una técnica mediante la cual pequeñas gotas liquidas, películas gaseosas o sólidas, se recubren con una pared polimérica porosa conteniendo una sustancia activa. El termino microencapsulación en la industria de alimentos se refiere a la encapsulación de sustancias de bajo peso molecular o de pequeñas cantidades de determinados compuestos (Parra, 2011). La selección de la técnica de microencapsulación adecuada se rige por las propiedades físicas y químicas del núcleo y el recubrimiento así como la aplicación que se le dará a las microcápsulas obtenidas. Los materiales de recubrimiento normalmente son materiales capaces de formar películas y se pueden seleccionar de una amplia variedad de polímeros naturales o sintéticos dependiendo el compuesto a encapsular (Desai et al, 2005). 2.4.2 Inclusión molecular. También conocida como encapsulación molecular, utiliza ciclodextrinas las cuales tienen un centro hidrofóbico mientras que la superficie exterior es hidrofílica, estos forman complejos por inclusión o por huésped anfitrión. Donde el principal mecanismo es la formación de complejos por inclusión de analito: provocan un equilibrio dinámico en el cual el agua u otro compuesto, son reemplazados en la cavidad de la molécula de ciclodextrina. La inclusión se puede acabo por 2 métodos el primero consiste en la cristalización de la molécula huésped y la ciclodextrina, después un disolvente menos hidrofóbico que la molécula huésped se mezcla con los componentes dando una acomplejación de la molécula huésped hacia el centro de la ciclodextrina y la molécula huésped junto con la ciclodextrina son mezcladas con agua hasta conseguir el equilibrio. El segundo método involucra la forma gaseosa de la molécula huésped en una solución de ciclodextrina (Romberger et. al., 1998; Pszcola, 1998). 2.4.3 Coacervación. La coacervación consiste en la formación de una solución coloide con el material a encapsular y el material encapsulante, en donde se provoca una fase de separación inducida por un cambio de temperatura, pH, o fuerza iónica. Esto es debido a que las cargas se orientan y disminuye la solubilidad del coloide convirtiéndose en un sistema Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 12 bifásico, logrando una cobertura y atrapamiento del material activo disperso, finalmente la cobertura es solidificada por medios térmicos o entrecruzamiento (Yañez et. al., 2002). 2.4.4 Extrusión. La microencapsulación por extrusión se lleva a cabo por la formación de una emulsión del material encapsulante y el acarreador por medio de un dado a alta presión. Es uno de los procesos más usados, después del secado por aspersión (Risch et. al., 1998). 2.4.5 Secado por Enfriamiento/congelamiento. Es una técnica variante del secado por aspersión consiste en el enfriamiento o congelamiento del material a encapsular mezclado con el acarreador por medio de aire frio, las microcápsulas se producen por nebulización de la suspensión. Los acarreadores utilizados en el proceso son aceites vegetales en algunos casos aceites vegetales hidrogenados, la reducción de temperatura produce una solidificación del acarreador formando una pared la cual forma una capsula que contiene la sustancia activa (Jackson, 1991). 2.4.6 Cobertura por lecho fluidizado. Esta técnica consiste en suspender partículas sólidas en aire a alta velocidad dentro de una cámara con temperatura y humedad controlada, donde el material encapsulante es atomizado (Brazel, 1999). 2.4.7 Atrapamiento por liposomas. Untipo de capsula con más propiedades versátiles y menos fragilidad que aquellas hechas de grasa es el de los liposomas. Son empleados para la liberación de vacunas enzimas y vitaminas en el cuerpo. Consisten en una o más capas de lípidos no tóxicos y aceptables en los alimentos (Gorski, 1994; Hoch. 1997). Los liposomas son vesículas que se forman cuando películas de fosfolípidos son dispersadas en un medio acuoso, al igual que las membranas naturales, los liposomas son selectivamente permeables a iones. La encapsulación es formada cuando a solución acuosa de la sustancia activa es mezclada con la película de lípido. Estructuralmente Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 13 existen tres tipos de liposomas: multilamelar, vesículas de un compartimiento y macrovesículas (Yáñez et. al., 2002). 2.4.8 Secado por Aspersión. Es un método ampliamente aplicado para secar soluciones acuosas y orgánicas, al igual que es usado para la industria química y alimentaria. Leche en polvo, resina acrílica oxido de aluminio, antibióticos, bentonita, plasma sanguíneo, catalizadores (Ni, Zn), café instantáneo, detergentes, enzimas, flavorizante, fungicidas, herbicidas, proteína vegetal hidrolizada, sílica Gel, vitaminas A, B2, E, sorbitol y tintes son algunos productos que se someten a un proceso de secados por aspersión. La importancia en la industria alimentaria es que se puede utilizar para conservar los alimentos, como un método de secado rápido. También reduce el peso y volumen de la solución a secar. El secado por aspersión consiste en la evaporación de la humedad de un alimento atomizado mezclando el spray y el medio de secado. El medio de secado generalmente es aire. El secado se debe mantener hasta que el contenido de humedad deseada s alcanza en las partículas de rociado y el producto se separa del aire. La mezcla rociada suele ser un solvente, emulsión, suspensión o dispersión. Para la encapsulación primero se forma una dispersión del acarreador con el material activo, después la dispersión es atomizada por una boquilla o disco, las capsulas son colectadas posteriormente (Yáñez, 2002). 2.4.8.1 Materiales empleados para la microencapsulación. También son llamados acarreadores, tiene como función formar una pared protectora que contendrá al compuesto bioactivo o en casos generales contendrá al agente activo o a encapsular. Son clasificados por el siguiente orden: Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 14 Tabla 2. Clasificación de agentes encapsulantes utilizados para microencapsular. Categoría Material encapsulante Carbohidratos Almidón, maltodextrina, quitosano, solidos de jarabe de maíz, almidón modificado y ciclodextrinas Celulosa Carboximetil celulosa, metilcelulosa y etilcelulosa. Gomas Goma acacia, agar, alginato de sodio y carragenina Lípidos Cera, parafina, cera de abejas, aceites y grasas Proteína Gluten, caseína, gelatina, albumina y péptidos (Adaptada de Desai y Park (2005) 2.4.8.2. Almidón. El almidón se denomina como un carbohidrato de reserva de energía de las plantas, se puede encontrar en las células de altas plantas como plastidios (amiloplastos y cloroplastos), en semillas y tubérculos en mayor proporción como maíz, papa, trigo, y tapioca, pequeñas cantidades en arroz, sorgo, camote, arrurruz, sagu, frijol mungo (varia del tipo de cereal el contenido de almidón 60-75%). El almidón está conformado por dos polímeros: amilosa (lineal enlaces α 1-4) y amilopectina (ramificado enlaces α 1-6), la amilosa es una cadena lineal de unidades. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 15 2.4.8.3. Modelos de formación del granulo de almidón. El almidón está compuesto de finas laminillas, cada una está compuesta por cerca de 100 hélices de doble cadena, cada uno con alrededor de 20 unidades de glucosa. Las dobles hélices son muy densas con un alto grado de regularidad como en un cristal. Las estructuras laminares y Superhelice de amilopectina son, sin embargo, sólo una pequeña parte de todo el cuadro. En una escala más grande (microscópica), se sabe que los gránulos de almidón están formados por la alternancia de depósitos amorfos y semicristalinos, entre 100 y 800 nm de espesor. Estas estructuras se denominan anillos de crecimiento (The European journal for science, 2016). Los gránulos de almidón crecen por superposición, la capa nueva depositada por fuera varia de espesor según la cantidad de carbohidrato disponible, estas capas son llamadas anillos de crecimiento los cuales se originan durante diferentes fases de la biosíntesis de los gránulos de almidón en que alterna la deposición de capas cristalinas de almidón con una capa amorfa de almidón. Estas capas probablemente son producidas por las fluctuaciones en el tipo o modo de las deposición de almidón durante la biosíntesis, por decir, los granulo de almidón de papa muestran mejores anillos de crecimiento cuando están completamente hidratados y cuando el almidón es secado estos desparecen (Hanssen et.al., 1953). 2.4.8.4. Formación del granulo de almidón. Inicia con una unidad de glucosa la cual unidad a 20 unidades más forma una doble hélice después sigue un conjunto de cerca de 100 doble hélices formando laminillas o Superhelices las cuales conforman los blockets y anillos de crecimiento, los cuales finalmente definen el granulo de almidón. En la siguiente imagen describe este crecimiento hasta el granulo. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 16 Figura 5. Esquema de formación del granulo de almidón. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 17 3. Justificación. La técnica de microencapsulación por secado por aspersión ha sido empleada industrialmente con la finalidad de dar un valor agregado a los productos a través de la protección y transporte. Por otro lado las ventajas con que cuenta esta técnica, se ven afectadas o controladas por el material encapsulante o pared que es el que confiere la protección a los componentes bioactivos; siendo esta la principal razón por la que continuamente se evalúan nuevos agentes encapsulantes que permitan mantener las propiedades bioactivas de las moléculas atrapadas. Por otro lado México cuenta con una gran variedad de frutos con potencial actividad biológica que no han sido aprovechados y por ende no tienen un importante valor comercial; tal es el caso del fruto del árbol de capulín, del cual que se reporta que posee una un importante actividad antioxidante debido a componentes bioactivos como son polifenoles y particularmente antocianinas, donde estas últimas pueden tener una potencial aplicación como ingredientes en e área de los alimentos y un importante impacto en la salud por sus propiedades bioactivas. Debido a lo anterior en el presente proyecto se plantea la evaluación de las propiedades de pared que puede presentar el almidón de chinchayote, como una alternativa de encapsulación de los componentes bioactivos del fruto del árbol de capulín, los cuales pudieran tener una potencial aplicación en el área de alimentos y farmacia. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 18 4. Objetivos. 4.1 Objetivo general. Microencapsular un extracto acuoso de capulín por secado por aspersión empleando almidón de chinchayote y maltodextrina como agentes encapsulantes. 4.2 Objetivos específicos. Obtener y caracterizar almidón chinchayote Obtener y caracterizar un extracto acuoso de capulín Microencapsular un extracto acuoso de capulín empleando secado por aspersión y utilizando mezclas de almidón de chinchayote y maltodextrina Evaluar la capacidad antioxidante del extracto acuoso de capulín antes y después de microencapsular. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 19 5. Metodología y materiales.5.1. Metodología Figura 6. Etapas de la metodología para microencapsular un extracto acuso de capulín. Etapa 1 Extracción y caracterización de almidón de chinchayote Etapa 2 obtención y caracterización del extracto acuoso Etapa 3 Micro- encapsulación y caracterización del extracto acuoso Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 20 Figura 7. Determinaciones para la caracterización de almidón de chinchayote, extracto acuoso y microencapsulados. Caracterización del almidón de chinchayote *Determinación de humedad. *Propiedades de flujo. *Morfología granular. *Capacidad de hinchamiento y solubilidad. *Capacidad de enlace con el agua. *Determinacion de Grasas *Determinacion de cenizas *Determinacion de fibra cruda Caracterización del extracto acuoso de capulín *Grados Brix. *Determinación de pH. *Acidez titulable. *Azucares Totales. *Actividad antioxidante. *Polifenoles Totales *Determinación de humedad. Caracterización del micro encapsulado *Actividad acuosa. *Determinación de humedad. *Determinación de solubilidad. *Polifenoles totales *Actividad antioxidante. *Microscopia electronica de barrido Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 21 5.2. Extracción de almidón de Chinchayote. Para la extracción de almidón primero se procede a lavar el tubérculo, después se desinfecta con hipoclorito 10 ppm durante 10 minutos. Se pela el tubérculo y se corta en cuadros de 2 cm aproximadamente. Se procede a triturar con agua en una relación 1:1 con respecto al volumen, después el extracto acuoso se filtra con unas mallas de número 30, 50 y 60. El residuo es triturado nuevamente y filtrado repitiendo se una vez más para el residuo restante después de este segundo triturado se desecha el residuo. Una vez obtenido el filtrado se realizan 3 o hasta 4 lavados con agua en una relación 1:4 con respecto al volumen. Después el material decantado se seca a 60°C durante 1 o 2 días. Se obtiene una masa seca la cual se tritura hasta pasar por una malla de número 200. 5.3. Caracterización del almidón de Chinchayote. Se realizó una caracterización de las propiedades fisicoquímicas del almidón de Chinchayote en las que se evalúa la calidad del polvo con las propiedades de flujo, propiedades químicas con un análisis químico proximal, sus características físicas como su morfología granular, solubilidad y capacidad de enlace con el agua. 5.3.1 Determinación de humedad del almidón de Chinchayote. Se utilizó el método 10.064 de la A.O.A.C. con modificación, donde se pesaron muestras de 1g en charolas o platillos de aluminio previamente pesadas a peso constante, posteriormente las muestras fueron llevadas a una estufa a una temperatura de 60°C durante 24h 5.3.2 Propiedades de flujo del almidón de Chinchayote. Para determinar la fluidez de un polvo se realizan una serie de métodos que describiremos a continuación (Juliano et. al., 2006). 5.3.2.1. Densidad aparente del almidón de Chinchayote. Se define como la masa de un polvo dividida entre el volumen aparente y se expresa como g/cm3. Para realizar la determinación se coloca el polvo de masa conocida sin compactar en una probeta graduada de 10ml de peso conocido hasta la marca de 10ml (Juma, 2000; Niro Analytical Methods, 2009). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 22 5.3.2.2. Densidad empacada del almidón de Chinchayote. Se denomina como la cantidad de masa total de polvo con respecto al volumen de polvo compactado y se expresa en g/cm3. Se determinó midiendo el volumen del polvo de masa conocida después de llenar una probeta de masa conocida de 10 ml con el polvo y golpeándola 100 veces sobre una superficie dejando caer la probeta una altura de 5 cm. (Jumah, 2000) 5.3.2.3 Índice de Carr del almidón de Chinchayote. También llamado índice de compresibilidad el evalúa la capacidad de flujo del polvo comparando la densidad aparente con la densidad empacada del polvo (Shah et. al., 2008) y se calcula con la siguiente ecuación: 𝐼𝐶 = ( 𝐷𝑎 − 𝐷𝑒 𝐷𝑎 ) ∗ (100) Ecuación 1 Dónde: Da=densidad aparente De=Densidad empacada 5.3.2.4 Cociente de Hausner del almidón de Chinchayote. El cociente de Hausner es la relación de la densidad empacada y la densidad aparente descrita en la siguiente ecuación (Shah et. al., 2008): 𝐶𝐻 = 𝐷𝑒 𝐷𝑎 Ecuación 2 Dónde: Da=densidad aparente De= densidad empacada 5.3.2.5 Ángulo de reposo del almidón de Chinchayote. El ángulo de reposo es una medida empírica del flujo de sólidos, para determinar este parámetro se mide el ángulo formado por el polvo con respecto a la horizontal. Para la determinación se toman 5g de polvo y se deja caer suavemente por un embudo el cual es colocado a 10cm de altura sobre una superficie horizontal, después el polvo forma un Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 23 montículo al cual se le medirá el radio formado y su altura para proceder hacer el cálculo del ángulo que se describe en la siguiente ecuación (Moreira et. al., 2009): 𝐴𝑛𝑔𝑢𝑙𝑜 𝜃 = 𝑎𝑟𝑐 tan 𝐴 𝑟 Ecuación 3 Dónde: A= altura del montículo r=radio del montículo 5.3.3. Morfología granular del almidón de Chinchayote. Se determinó haciendo una dispersión de almidón de Chinchayote en agua destilada al 0.1% relación w/v. después se observó la dispersión. Las imágenes fueron tomadas con una cámara Leica DFC310FX y objetivos 40X y 60X acoplados al microscopio Leica DM500B, además, las imágenes fueron analizadas con el software Leica Application Suite (LAS AF). 5.3.4. Determinación de capacidad de hinchamiento y solubilidad del almidón de Chinchayote. Se colocó 0.4g de almidón de chinchayote en un tubo de centrifugación con 40ml de agua destilada. Se preparan 6 soluciones acuosas y se calientan por 30 minutos a diferentes temperaturas que muestra la siguiente tabla: Tabla 3. Temperaturas de calentamiento de las suspensiones para determinar capacidad de hinchamiento y solubilidad. Suspensión acuosa Temperatura (°C) 1 0 2 50 3 60 4 70 5 80 6 90 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 24 Se deja enfriar a temperatura ambiente y se centrifuga por 15 minutos a 3000 revoluciones por minuto. El sobrenadante se recupera cuidadosamente y el sedimento es pesado. Una vez obtenido el sobrenadante se seca en una estufa a 110°C durante la noche y se pesa el sobrenadante seco, para obtener la capacidad de hinchamiento y el porcentaje de solubilidad se utilizaron las siguientes formulas (Nadiha et. al., 2010): 𝐶𝑎𝑝𝑎𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 ℎ𝑖𝑛𝑐ℎ𝑎𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜 ( 𝑔 𝑔 ) = 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑒𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 ℎ𝑢𝑚𝑒𝑑𝑜 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑎𝑙𝑚𝑖𝑑ó𝑛 Ecuación 4 𝑆𝑜𝑙𝑢𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑(%) = ( 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑏𝑟𝑒𝑛𝑎𝑑𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑆𝑒𝑐𝑜 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑎𝑙𝑚𝑖𝑑ó𝑛 ) ∗ 100 Ecuación 5 5.3.5. Determinación de capacidad de retención de agua del almidón de Chinchayote. La capacidad de enlace con el agua fue determina con 1g de almidón de chinchayote suspendida en 20ml de agua destilada, la suspensión fue agitada por 1 hora. Después se centrifugo a 2200rpm por 10 minutos. El almidón depositado o decantado fue drenado por 10 minutos y después pesado, también se pesó la solución drenada (Medcalf et. al., 1965). La capacidad de enlace con el agua fue calculada a partir de la siguiente ecuación: 𝐶𝐸𝐴% = (𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑟𝑒𝑛𝑎𝑑𝑎 − 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑒𝑛𝑒𝑑𝑜𝑟) ∗ 100 Ecuación 6 5.3.6. Determinación de cenizas del almidón de Chinchayote. Se utilizó el método 13.006 de la A.O.A.C. de 1960 el cual describe que se toma una muestra seca de 3g a 5g y se coloca en una capsula de porcelana previamente pesada a peso constante después se llevó a ignición la muestras, posteriormentese coloca en una mufla a 550°C durante 6h. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 25 5.3.7. Fibra cruda del almidón de Chinchayote. Se utilizó el método 22.040 de la A.O.A.C. de 1960 el cual consiste en usar 2g de muestra seca y desengrasada, la cual se somete a una digestión acida con ácido sulfúrico 0.255N a ebullición durante 30 minutos, después se filtra con un papel filtro Whattman No. 40 sin cenizas y se ajusta el pH a 7, posteriormente se realiza una digestión alcalina con hidróxido de sodio 0.313N a ebullición durante 30 minutos, después se procede a filtrar, posteriormente se toma el filtro y se seca a 110°C y se deja enfriar. Después se lleva a ignición en una capsula de porcelana previamente pesada a peso constante para llevarlo a una mufla a 600°C durante 20 minutos. 5.3.8. Determinación de grasa del almidón de Chinchayote. Se efectúo el método 22.033 de la A.O.A.C. de 1960 el cual describe que se toman 2g de muestra seca y se coloca en un cartucho de celulosa previamente pesado, y se coloca en un sistema soxhlet, se condensa durante 4 horas, posteriormente se toma el matraz con el residuo de grasas y se coloca en una estufa a 60°C durante 24 horas. 5.4. Obtención del extracto acuoso de capulín. Para obtener el extracto acuoso se utilizó 100g de pulpa de capulín previamente macerada sin semilla y se mezcla con 500ml de agua destilada. Después se centrifugó en una centrifuga IEC HN-SII a 3000 rpm durante 5 minutos y se realiza un filtrado con vacío y papel filtro Whatman número 1. El filtrado es congelado a -60 ºC en oscuridad hasta su uso. 5.5. Caracterización del extracto acuoso. Para la caracterización del extracto acuoso de capulín se utilizaron las siguientes determinaciones. 5.5.1. Determinación de solidos solubles totales (°Brix) Se tomó una gota del extracto acuso de capulín y se deposita en un refractómetro de Abbe previamente calibrado. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 26 5.5.2. Determinación de pH. Se tomaron 50 ml del extracto acuoso y se depositó en un vaso de precipitados de 100ml y se tomó lectura con un potenciómetro HANNA 5.5.3. Determinación de acidez titulable. Se homogenizan 20 g de muestra con 100 ml de agua destilada, se toma una alícuota de 5ml de la solución y se diluye en 50ml, se agrega 1 ml de indicador de fenolftaleína y se titula con una solución de hidróxido de sodio 0.01N. La acidez titulable se calcula con la siguiente ecuación (Alencaster, 1997): %𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑔𝑎𝑙𝑖𝑐𝑜 = 𝑇 ∗ 𝑁 ∗ 𝑉 ∗ 170.14 𝑀 ∗ 𝑃 ∗ 10 Ecuación 7 Dónde: T=ml de NaOH usados en la titulación N=Normalidad de la solución de NaOH V=Volumen del filtrado M=alícuota del filtrado tomada para la titulación P=Peso de la muestra en gramos 174.14=Peso equivalente del ácido gálico 10=factor de conversión 5.5.4. Determinación de azúcares totales. Se utilizó el método de ácido fenol sulfúrico. Se realizó una dilución de la muestra 1:7000. Se tomó 500µl y se adiciono en un tubo de ensaye después se agrega 500µl de fenol al 5% (v/v) e inmediatamente se agrega 2.9 ml de ácido sulfúrico y se agita vigorosamente se deja reposar 15 minuto y se tomó lectura de la absorbancia a 490nm. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 27 5.5.5. Determinación de actividad antioxidante por el método de DPPH. Una alícuota de 500ml de extracto fue mezclado con 125µl de Tris-HCl (PM 7.4, 0.1M). A esta solución se le agregaron 500µl d DPPH (0.16 mg/ml). Después de 30 minutos de reposo en la oscuridad la absorbancia fue leída a 517nm. El porcentaje de inhibición fue calculado con la siguiente ecuación (Molyneux, 2004): 𝑃𝑜𝑟𝑐𝑒𝑛𝑡𝑎𝑗𝑒 𝑑𝑒 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛 = (1 − 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 ) ∗ 100 Ecuación 8 Previamente a la ejecución del ensayo se preparó estándares y muestras como se indica a continuación: Solución madre de ácido ascórbico 1mg/ml preparamos 10ml con metanol. Para la preparación de DPPH, utilizamos 8 mg de DPPH y lo aforamos con metanol hasta 50ml. Preparamos diluciones del estándar y la muestra para realizar la curva tipo usando como solvente metanol como indica la siguiente tabla: Tabla 4. Concentración y volúmenes para la preparación de las diluciones de la curva estándar de ácido ascórbico. Concentración Solución madre (µl) Solvente (µl) 0 - 2000 10 20 1980 25 50 1950 50 100 1900 75 150 1850 100 200 1800 125 250 1750 150 300 1700 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 28 5.5.6. Determinación de polifenoles totales por el método de Folin-Ciocalteu. El contenido fenólico fue calculado a partir de la capacidad de reducción del reactivo de Folin-Ciocalteu con algunas modificaciones (Waterhouse, 2002) y utilizando ácido gálico como estándar. Un volumen de muestra de 20µl fue adicionado a 1.4ml de agua destilada, seguido de 100µl de reactivo de Folin-Ciocalteu (2M). la solución se dejó reposar a temperatura ambiente. Posteriormente se adicionaron 300µl de una solución de carbonato de sodio al 20% (m/v) y 180µl de agua destilada. Después de 100 minutos de reposo en la oscuridad, la absorbancia fue determinada a una longitud de onda de 760nm. Los resultados se expresaron como el peso equivalente de ácido gálico en mg/ml de extracto (Cicco et. al., 2009). Preparación de solución de ácido gálico: se disolvieron 0.5g de ácido gálico en 10ml de etanol después se aforo la solución a 100 ml con agua desionizada Preparación de estándares para la curva tipo: Se tomaron alícuotas de 250µl, 500µl, 1250µl, 2500µl para aforarse a 25ml. Preparación de solución de carbonato de sodio: se disuelve 50g de carbonato de sodio anhidro en 200ml de agua destilada y lleva a ebullición. Después de enfriar adicionar unos cuantos cristales de carbonato de sodio y dejar reposar 24 horas a temperatura ambiente. Filtrar con un papel filtro Whatman número 1 y adicionar agua hasta completar 250ml. 5.6. Microencapsulación. El proceso de microencapsulación se llevó acabo por medio de un secador por aspersión a una temperatura de entrada de 120°C, una temperatura de salida de 79°C ± 1°C, aspiración de 100% y un flujo de la bomba de 15%. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 29 5.6. Secado de mezcla de dispersiones con el extracto acuoso Se realizó un diseño de experimentos simplex lattice quadratic donde se realizaron 8 mezclas de diferentes concentraciones, las cuales se dispersaron en 100 ml de extracto acuoso de capulín que se muestra en la siguiente tabla: Tabla 5. Porcentaje de las concentraciones de los agentes encapsulantes para la preparación de las dispersiones con el extracto acuoso. Experimento Almidón de chinchayote % Maltodextrina % 1 10 0 2 5 5 3 0 10 4 7 3 5 10 0 6 0 10 7 3 7 8 5 5 La preparación de las suspensiones se realizó en 2 etapas. En la primera etapa se dispersó el almidón de chinchayote y maltodextrina en un volumen de 100ml con una concentración al doble de la tabla a 55°C con agitación durante 30 minutos. En la segunda etapa se prepara la primera dispersión con 100ml de extracto acuoso de capulín en un dispersor (ULTRA TURRA T25 digital) a 7000 rpm durante 5 minutos. Posteriormente la dispersión es llevada al secador por aspersión bajo las condiciones antes mencionada. 5.7. Caracterización del microencapsulado Para la caracterización del polvo microencapsulado se tuvo que liberar los componentes bioactivos a través de la siguiente metodología: Se coloca 50mg del microencapsulado en tubo ependor con 1 ml de agua destilada y se agita durante 3 minutos, posteriormente se toman 0.5ml y se mezcla con 1ml de etanol en un tubo ependor y se agita durante 3 minutos, después se centrifuga a 13200rpm durante 2 minutos y se toma 0.5ml deAlvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 30 sobrenadante se coloca en un tubo eppendorf con 1ml de etanol y se agita durante 3 minutos, se centrifuga a 13200rpm y se recupera el sobrenadante. 5.7.1. Determinación de actividad acuosa. Para la determinación de actividad acuosa se utilizó un higrómetro Aqua Lab Series 3 TE. Donde se utilizamos 2 gramos de muestra los cuales se depositaban en una celda y se introduce al equipo y se obtiene de forma directa el valor de actividad de agua. 5.7.2. Determinación de humedad. Se utilizó el método 10.064 de la A.O.A.C. con modificación, donde se pesaron muestras de 0.1g en charolas o platillos de aluminio previamente pesadas a peso constante, posteriormente las muestras fueron llevadas a una estufa a una temperatura de 60°C durante 24h 5.7.3. Determinación de solubilidad. Se disolvió 0.1g de muestra en 10ml de agua destilada a 30°C, después se centrifuga a 3000rpm por 5 minutos, después se toma una alícuota de 25ml del sobrenadante y se coloca en una caja Petri, posteriormente se seca en una estufa durante 5 horas a 105°C (shittu et.al., 2007). La solubilidad se calcula con la siguiente formula: 𝑆𝑜𝑙𝑢𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑(%) = ( 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑏𝑟𝑒𝑛𝑎𝑑𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑆𝑒𝑐𝑜 𝑃𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑎𝑙𝑚𝑖𝑑ó𝑛 ) ∗ 100 Ecuación 9 5.7.4. Determinación de la morfología de los microencapsulados. Se realizó una microscopia electrónica de barrido para caracterizar morfológicamente los microencapsulados. La determinación se realizó en un microscopio electrónico de barrido JEOL JSM.6390LV. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 31 6. Resultados y discusión. 6.1. Caracterización del almidón de chinchayote. 6.1.1. Determinación de humedad, grasa, ceniza, fibra cruda. Se evaluó la humedad, contenido de cenizas, grasas y fibra cruda del almidón de chinchayote. Los resultados obtenidos fueron comparados con lo reportado por Hernández et.al. (2010) quíen aíslan y caracterizan el almidón de chinchayote, como se muestra en tabla 7. Tabla 6. Resultados de químico proximal del almidón de chinchayote. Determinación Valor Referencia* Humedad 5.56% ± 0.27 4.7% ± 0.08 Grasas 0.40% ± 0.05 0.34% ± 0.03 Cenizas 0.36% ± 0.01 0.39% ± 0.01 Fibra cruda 0.36% ± 0.02 (Hernández et.al., 2010). Como observamos la humedad, contenido de grasas, cenizas del almidón de Chinchayote tienen un valores muy cercanos a los reportados por Hernández et.al (2010), quienes extraen y caracterización almidón, que denominan de “chayote mexicano” (chinchayote). No obstante, la pequeña diferencia en los resultados obtenidos en este trabajo y los reportados pueden ser debidos al variaciones en métodos de aislamiento del almidón, a la diferencia entre tiempo y temperatura de secado; también puede ser atribuido a la variabilidad del tubérculo y región donde se cultivó. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 32 6.1.2. Propiedades de flujo. Las propiedades de flujo sirven para evaluar la calidad del polvo con que se trabaja al igual que determina la fluidez del polvo dependiendo de los resultados que se presentan en dicho polvo. Con respecto a lo anterior se realizaron 5 pruebas diferentes para la evaluación del polvo o del almidón de chinchayote dando los siguientes resultados que se muestran en la tabla 8. Tabla 7. Propiedades de flujo del almidón de chinchayote Determinación Valor Densidad aparente (kg/m 3) 665.78 ± 9.72 Densidad empacada ( kg/m 3) 811.86 ± 5.16 Índice de Carr (Adimensional) 22.55 ± 1.53 Coeficiente de Hausner 1.22 ± 0.01 Ángulo de reposo (º) 40.31 ± 0.83 El conocimiento de la densidad de los polvos tiene una gran relevancia en el área de alimentos debido que en estudios relacionados con las propiedades de los materiales y procesos industriales se realizan a partir de estas ajustes de las condiciones de almacenamiento, procesamiento, envasado y distribución. Por tanto las propiedades de flujo son importantes para la determinación del comportamiento de los polvos en su aplicación (Thalberg et.al, 2004). La densidad empacada es una medida de las características de empacado de las partículas sólidas, el almidón de chinchayote presenta una densidad empacada de 0.811 g/cm3 es decir las partículas tiende a la esfericidad. Este resultado se ve influenciado por el tamaño y forma de la partícula, también dependen de la preparación, el tratamiento y almacenamiento de la muestra es decir de la forma en que se manipuló (Farmacopea, 2016). La compresibilidad del polvo o índice de Carr y el cociente de Hausner se evalúan con la densidad aparente y la densidad empacada. En la tabla 9 se indica los valores del índice de Carr y sus valores de fluidez. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 33 Tabla 8. Escala de fluidez respecto al intervalo del índice de Carr. Rangos del índice de Carr Fluidez <10 Excelente 11-15 Buena 16-22 Regular >38 Poca (Shah et. al., 2008). El índice de el índice de compresibilidad y el índice de Hausner son medidadas que expresan la propensión del un polvo a la compresión; como tales son medidad de la capacidad de asentamiento de un polvo (Farmacopea, 2016). Según lo reportado por Shah et. al., ( 2008), se puede observar (tabla 8) que el almidón de Chinchayote tiene un valor de fluidez tipo regular. El índice de Carr también evalúa la compresibilidad del polvo. El cociente de Hausner evalúa la cohesión reflejada por la fricción de las partículas (Thalberg et. al., 2004). En la tabla 10 se muestra los valores de fluidez que representa cada rango de cociente de Hausner. Tabla 9. Escala de fluidez respecto al intervalo del cociente de Hausner. Rangos de índice de Hausner Fluidez <1.25 Buena 1.26-1.39 Regular >1.4 Poca (Barbosa et.al., 2005) Los polvos con un cociente de Hausner mayor a 1.4 son altamente cohesivos. Como observamos en la tabla 8 el cociente de Hausner para el almidón es menor a 1.25 lo que refleja propiedades de buena fluidez. El ángulo de reposo está relacionado con la fricción entre las partículas y con la resistencia al movimiento entre estas (Ileleji et. al.,2008) en la siguiente tabla se muestra una clasificación de los polvos con respecto al valor del ángulo de reposo. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 34 Tabla 10. Clasificación de los polvos respecto al intervalo de ángulo de reposo Angulo de reposo Fluidez 10°-30° Excelente flujo 31°-45° Libre de flujo 46°-60° Poco cohesivos (Santomaso et. al., 2003) El valor del Angulo de reposo del almidón de chinchayote es de 40.31 como muestra la tabla 8 evaluando este valor en la tabla 11 el polvo obtenido tiene un libre flujo 6.1.3. Morfología y birrefringencia del gránulo. En la figura 9 se puede apreciar la morfología del granulo de almidón de chinchayote, los cuales se caracterizan por tener una forma irregular (poligonales, cónicas y angulares) y en algunos casos se llegan apreciar gránulos con forma esférica. La birrefringencia en los gránulos de almidón se muestra por la incidencia de luz polarizada sobre estos, donde se puede formar una cruz de malta. Lo cual indicara si tiene un alto orden molecular dentro del granulo. Las cadenas de la amilopectina son las responsables de las regiones cristalinas dentro del gránulo, mientras que la región amorfa está formada por puntos ramificados de la amilopectina y por la amilosa (Zobel, 1988). Cuando las regiones cristalinas se reducen, también se reduce el ordenamiento molecular y por ende hay una pérdida de birrefringencia. En la figura “9” observamos los gránulos de almidón de chinchayote con un aumento de 60x en un campo polarizado, donde, en el campo polarizado observamos la presencia de cruz de malta en los gránulos de almidón Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 35 Figura 8.Microscopia de luz transmitida de los gránulos de almidón nativo de Chinchayote. Figura 9. Microscopia de luz polarizada del gránulo de almidón nativo de Chinchayote. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 36 El ordenamiento molecular de los almidones en relación al contenido amilosa- amilopectina puede predecir el comportamiento reológicos de los almidones en suspensión y como geles. Por otro lado los gránulos de almidón son relativamente densos e insolubles en agua fría, dando lugar a la formación de dispersiones con concentración del 35% de baja viscosidad facilitando el secado por aspersión (Dendy et.al., 2004). 6.1.4. Capacidad de hinchamiento, solubilidad y capacidad de retención del agua. Como se observa en la tabla 12 la solubilidad es reportada como una ración de volumen del granulo de almidón hinchado con respecto al volumen del almidón seco a diferentes temperaturas la capacidad de hinchamiento varía entre 3.29 y 10.63 g/g, donde en la temperatura de 80°C se obtuvo una gran capacidad de hinchamiento. La solubilidad se expresó en porcentaje presentando un mayor valor a una temperatura de 80°C. La capacidad de retención de agua se evaluaron 6 muestras de almidón de Chinchayote de mismo peso como indica la metodología dando como resultado 65.14% ±0.74 de retención de agua. Tabla 11. Capacidad de hinchamiento y porcentaje de solubilidad del almidón de chinchayote. Temperatura (°C) Solubilidad (%) Capacidad de hinchamiento (g/g) 0 80.05 ± 0.62 3.02 ± 0.67 50 81.93 ± 0.92 5.0 ± 0.0 60 83.05 ± 3.93 4.75 ± 0.46 70 92.71 ± 1.24 10.44 ± 1.31 80 95.49 ± 0.21 10.63 ± 0.77 90 94.96 ± 1.79 8.66 ± 0.57 Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 37 Figura 10. Gráfico de la solubilidad del almidón de Chinchayote respecto a la temperatura. Figura 11. Gráfico de hinchamiento del gránulo de almidón de chinchayote respecto a la temperatura. 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 20 50 60 70 80 90 So lu b ili d ad ( % ) Temperatura (°C) 0 2 4 6 8 10 12 14 20 50 60 70 80 90 H in ch am ie n to ( g/ g) Temperatura (°C) Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 38 El poder de hinchamiento se relaciona con la capacidad de adsorción de agua de cada almidón. Como se ha descrito los almidones nativos son insolubles en agua por debajo de su temperatura de gelatinización, pero cuando los gránulos se someten a calentamiento progresivamente en agua, se alcanza un punto donde comienzan a hincharse irreversiblemente. Al hincharse los gránulos de almidón aumentan la viscosidad de las dispersiones (Tscheuschner, 2001). Por esta razón se determinan estas propiedades físicas para establecer los parámetros para dispersar las mezclas de almidón de chinchayote y maltodextrina las cuales fueron con agitación a 50°C para evitar la temperatura de gelatinización. Tabla 12. Capacidad de retención de agua del almidón de Chinchayote. Muestra Capacidad de retención de agua (%) 1 64.42 2 66.71 3 64.64 4 64.87 5 65.25 6 64.95 6.2. Caracterización del extracto acuoso de capulín. Se realizó una caracterización fisicoquímica del capulín evaluando grados Brix, acidez titulable, azucares totales, actividad antioxidante, determinación de polifenoles totales, para poder comparar si presenta una gran pérdida de la actividad antioxidante durante el proceso de microencapsulación empleando secado por aspersión. Al igual que se caracterizó morfológicamente los microencapsulados por medio de una microscopia electrónica de barrido 6.2.1. Solidos solubles totales, acidez titulable, azucares totales. Se realizó una caracterización fisicoquímica al fruto y ala extracto acuoso, donde observamos que hay una disminución en estas propiedades a excepción del pH. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 39 Tabla 13. Caracterización del extracto acuoso y fruto del árbol de capulín. Determinación Fruto Extracto *Reportado Solidos solubles totales (°Brix) 16.66 ± 0.28 1.83 ± 0.28 --------------- pH 4.56 ± 0.03 4.56 ± 0.00 3.96 ± 0.25 Azúcares totales (mg/ml ) 177.52 ± 2.65 44.20 ± 6.20 ------------- Acidez titulable (% Ácido gálico) 1.92 ± 0.11 1.28 ± 0.02 1.1 *Jiménez et. al., 2011 Existen 3 factores importantes que afectan el contenido nutricional de los alimentos, tales como el factor genético, ambiental y prácticas cotidianas (Barret et.al., 2005). Genético: las diferencias radican en la composición de las plantas así como su calidad y su potencial de supervivencia una vez cosechados. Ambientales: los factores como luz, temperatura y el viento, son variables que interactúan directamente con la calidad nutricional de los frutos. Por ejemplo la temperatura se asocia al grado de transpiración de la planta afectando en esta la absorción de minerales y en su metabolismo. Prácticas cotidianas: este se relaciona con el tipo de suelo, nutrientes del suelo y su disponibilidad agua, poda y control de pesticidas. 6.2.4. Actividad antioxidante. y polifenoles totales. La actividad antioxidante reportada para el extracto acuso fue de 45.06% ± 9.09 de inhibición del DPPH y 140.01 mg de ácido ascórbico/ml ± 28.75. Mientras que en la literatura reportan 51.38% de inhibición del DPPD. La cantidad de polifenoles totales en el extracto acuoso fue de 199.87mg AG/ml. Mientras que en la literatura es de 746.00 mg AG/ml es posible que la disminución tan drástica del contenido de polifenoles se deba al grado de madurez del fruto ya que en los frutos inmaduros se encuentra una mayor proporción de flavonoides (Barret et.al., 2005). Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 40 6.3. Rendimiento del proceso de encapsulación por el método de secado por aspersión. En la tabla 14 se muestran los resultados obtenidos para el rendimiento de recuperación de microencapsulado en todos los experimentos ensayados. Se observa que el experimento número 8 correspondiente a 10% maltodextrina, presento el valor más alto. Mientras que el menor rendimiento se observó en el experimento 1 el cual corresponde a una composición de 10% almidón de Chinchayote. Los resultados indicaron que el rendimiento se ve afectado de forma positiva a medida que la concentración de maltodextrina se incrementa en la mezcla de agente acarreador. Tabla 14. Rendimientos de los microencapsulados empleando secado por aspersión. Corrida Rendimiento (%) 1 28.99 2 29.47 3 31.01 4 46.85 5 30.29 6 58.85 7 87.83 8 89.13 6.4. Determinación de humedad, actividad acuosa y solubilidad del encapsulado. Los microencapsulados presentaron humedades muy bajas entre un intervalo de 1.78 a 4.05, lo cual es un resultado favorable, ya que los reportados en la literatura son entre 2% a 8% (Baudelaire, 2013). Por otra parte también se obtuvieron bajas actividades de agua lo cual representa que las interacciones biológicas y químicas son menos probables. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 41 Un factor importante en los encapsulados es la solubilidad, ya que se necesita que la capsula sea fácilmente destruida o que pueda liberar fácilmente el material activo por disolución en un solvente debido a su alta solubilidad. También se observa que a concentraciones más altas de almidón de Chinchayote disminuyen el porcentaje de solubilidad y mientras el porcentaje de maltodextrina aumente incrementa la solubilidad de los encapsulados. Tabla 15. Características fisicoquímicas de los microencapsulados. Muestra Aw Humedad (%) Solubilidad (%) 1 0.285 ± 0.001 4.05 ± 0.14 7.62 ± 0.37 2 0.312 ± 0.003 3.98 ± 0.12 14.57 ± 1.02 3 0.285 ± 0.003 1.78 ± 0.06 55.92 ± 0.86 4 0.314 ± 0.005 4.49 ± 0.15 64.15 ± 1.52 5 0.336 ± 0.002 2.45 ± 0.40 52.57 ± 1.34 6 0.275 ± 0.003 3.54 ± 0.07 15.30 ± 0.29 7 0.345 ± 0.002 2.66 ± 0.20 62.85 ± 1.95 8 0.268 ± 0.004 2.21 ± 0.0775.43 ± 0.15 6.5. Análisis de los compuestos bioactivos del capulín. Como se observa en la tabla 16 el contenido de polifenoles se redujo respecto al del extracto acuoso que fue de 199.87 mg A. Gálico/ml este comportamiento se debe al proceso de secado ya que a la temperatura utilizada para el secado por aspersión es de 120°C. Sin embargo en se ha reportado que en la microencapsulación de extractos acuoso de nanche empelando secado por aspersión se mantiene el contenido de polifenoles totales a temperaturas de 110°C a 120°C y hay un decremento a temperaturas de 125°C a 175°C (Lozada, 2016), también se ha argumentado que a medida que aumenta la temperatura Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 42 puede ocurrir una la polimerización o la síntesis de compuestos fenólicos explicando que se puede presentar un aumento de polifenoles a temperaturas altas como de 175°C (Mishra et.al., 2014). Los resultados obtenidos por Ferrari et.al. (2010), reportan que las temperatura afecta negativamente al contenido de fenoles debido a que se genera una degradación y oxidación ocasionada por las temperaturas altas. Tabla 16. Polifenoles totales de los microencapsulados. Corrida Polifenoles totales (mg A. Gálico/ml) 1 114.87 ± 4.34 2 118.52 ± 8.55 3 113.62 ± 3.37 4 137 ± 1.51 5 128.62 ± 5.20 6 105.75 ± 2.34 7 120.62 ± 1.88 8 109.75 ± 4.44 Como se puede observar en la tabla 17 la actividad antioxidante o porcentaje de inhibición de DPPH presenta un bajo decremento respecto al extracto acuoso de capulín siendo este de 45.06%. También se puede apreciar en la mezcla del experimento (7% almidón de Chinchayote y 3%maltodextrina ) no presenta cambios respecto al extracto acuoso. Los microencapsulados con una composición mayor de almidón de chinchayote presentan una menor perdida de actividad antioxidante comparándose con los microencapsulado con una composición mayor de maltodextrina. Por otro lado los resultados obtenidos por Lozano (2016), reporta que a menores concentraciones de maltodextrina se obtiene una mayor capacidad antioxidante en los microencapsulados. Ahmed et.al., analizaron microencapsulados utilizando papa dulce. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 43 Tabla 17. Actividad antioxidante de los microencapsulados. Corrida % de inhibición de DPPH Concentración (mg A. Ascórbico/ml) 1 42.40 ± 2.72 60.79 ± 4.58 2 43.56 ± 2.49 63.26 ± 4.19 3 46.61 ± 2.17 68.39 ± 3.66 4 40.77 ± 6.06 58.58 ± 10.19 5 42.29 ± 3.82 61.13 ± 6.43 6 38.45 ± 5.29 54.67 ± 8.90 7 41.94 ± 3.82 60.54 ± 10.34 8 36.80 ± 2.96 51.89 ± 4.98 Mishra et.al. (2014), menciona que el contenido de fenoles afecta la capacidad antioxidante obteniendo comportamientos similares al contenido de polifenoles totales ya que al aumentar la temperatura en un rango de 125°C a 175°C se observa una pérdida de actividad antioxidante. El autor también menciona que la exposición a altas temperaturas afecta o puede afectar la estructura de compuestos fenólicos causando degradación y por ende una pérdida de la actividad antioxidante. 6.6. Morfología de los microencapsulados. En las figuras 12-15 se muestra la morfología de los microencapsulados bajo diferentes composiciones de almidón de Chinchayote y maltodextrina. En estas figuras se puee observar que capsulas con 10% de almidón forman aglomerados entre las microcápsulas con gran tamaño, mientras que las microcápsulas con 10% maltodextrina son de menor tamaño. Por otra parte los microencapsulados con mezclas de almidón y maltodextrina muestran diferentes tamaños y menos aglomerados. En las micrografías se presentaron formas irregulares, esto se debe al proceso de secado ya que se utilizó la función de pulso de limpieza a causa de que el material a secar era muy viscoso, lo cual genera un cambio de presión en la alimentación y en las aspersión. Alamilla-Beltran et.al. (2005), reporta que a temperaturas bajas hay un mejor grado de contracción en las partículas producidas ocasionando que el tamaño de partícula sea menor. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 44 Figura 12. Micrografía del microencapsulado con mezclas de almidón (7%) y maltodextrina (3%). Figura 13. Micrografía del microencapsulado con mezclas de almidón (5%) y maltodextrina (5%). Figura 14. Micrografía del microencapsulado con mezclas de almidón (3%) y maltodextrina (7%). Figura 15. Micrografía del microencapsulado con maltodextrina (10%) Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 45 7. Conclusiones. Las dispersiones de almidón deben prepararse con temperaturas menores a 60°C. Los mejores rendimientos respecto a los polvos obtenidos por secado por aspersión fueron aquellos que tenían únicamente maltodextrina, mientras los rendimientos más bajo se presentaron al emplear solo almidón de Chinchayote. Los microencapsulados obtenidos presentaron un intervalo de humeada de 1.78-4.49%, los cuales se encuentran dentro de lo que la literatura marca como polvos estables. La el contenido de fenoles y la actividad antioxidante no cambio significativamente por efecto del proceso de secado. La mayor concentración de maltodextrina mejora significativamente la actividad antioxidante y el contenido de polifenoles en los microencapsulados obtenidos. La morfología de las microcápsulas depende de la composición de la muestra, concluyendo que a mayor cantidad de almidón de chinchayote en las mezclas los microencapsulados son de mayor tamaño y forman aglomerados, mientras que las mezclas que contiene mayor contenido de maltodextrina se presentan microencapsulados de menor tamaño. La forma de las microcápsulas depende de las condiciones del proceso de encapsulación. Las microcápsulas de todas las muestras son de forma irregular debido a la función pulso de limpieza durante el secado, la temperatura, ya que cuando se utiliza la función pulso de limpieza el material o las gotas dispersadas salen a diferente presión generando deformidades y la temperatura genera colapsamientos cuando es alta. 8. Perspectivas. En el presente proyecto se evaluó al almidón de Chinchayote nativo, el cual confirió buenas propiedades de protección como material pared. Sin embargo, estas propiedades encapsulante pueden ser mejoradas por medio de algunas modificaciones químicas o enzimáticas que permitan competir con la maltodextrina, para obtener mejores propiedades respecto a la capacidad antioxidante y contenido de polifenoles. Alvarado De León Sergio Daniel; (2016) Página 46 9. Referencias. Niro Analytical Methods. (2009). [www.niro.com/methods]… Ahmed, M., Aketer, M.S., Lee, J,C. y Eun J.B. (2010). Encapsulation by spary drying of bioative components, physicochemical and morphological porperties from purple swet popato. LWT-Food Science and Technology, 43(1),1307-1312. Alamilla-Beltran, L., Chanona-perez, J.J., Jimenez-Aparicio, A.R., & Gutierrez-Lopez, G.F. (2005). Description of morphological changes of particles along spray drying. Journal of Food Engineering, 67,179-184. Badui (2006). Química de los alimentos, 2ª edición, pp 388-399. Biessels, H.W.A., Van Der Kerk-Van Hoof, A.C., Kettens-Van Den Bosch, J.J., Salemink, C.C.A. (1974) Triterpenes of Prunus serotina and Prunus lusitanica. Phytochemistry 13: 203-2 07. Alencaster (1977). Cambios Fisiológicos y Bioquímicos Durante la Maduracion del Mamey (Calocarpum mammosum), pp 13-14. AOAC. (1960) Officual Methods of Analysis, 9th edition. Association of Official Ananlytical Chemists. Washimgton, D.C. Barbosa-Cánovas, G.C., Ortegas Rivas, E., Juliano, P., & Yan, H. (2005). Food Powdders. Physical Properties, Procesing and Functionality. Kluwer Academic/Plenum Publishers. Barret, D., Somogyi, L. y Ramaswamy, H. (2005). Proccesing Fruits- Science and technology.
Compartir