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1 INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE MEDICINA Y HOMEOPATÍA SECCIÓN DE ESTUDIOS DE POSGRADO E INVESTIGACIÓN. ESPECIALIDAD EN TERAPÉUTICA HOMEOPÁTICA. “ANÁLISIS POR ESPECTROFOTOMETRÍA DE DIFERENTES TINTURAS DE Nux vomica “ TESIS QUE PARA OBTENER EL DIPLOMA DE ESPECIALIDAD EN TERAPÉUTICA HOMEOPÁTICA. PRESENTA: CÉSAR ALBERTO TOVAR RODRÍGUEZ DIRECTORAS: DRA. CLAUDIA GUADALUPE BENÍTEZ CARDOZA. MCYH. MARÍA DE LOURDES CRUZ JUÁREZ MÉXICO, D.F. ENERO 2009 2 3 4 5 CONTENIDO TEMÁTICO. LISTA DE FIGURAS ………………………….. I ABREVIATURAS ………………………….. II RESUMEN ….………………….. III 1.- INTRODUCCIÓN … …………………………1 1.1 ANTECEDENTES ……………………………2 1.2 ESPECTROSCOPIA (DEFINICIÓN) ……………………………4 1.3 PROPIEDADES DE LA RADIACIÓN………………………………4 1.4 REGIONES ESPECTRALES …………………………6 1.5 EL SISTEMA ATÓMICO MOLECULAR.…………………………7 1.6 INTERACCIÓN DE LA RADIACIÓN….………………………….8 1.7 LEY DE ABSORCIÓN …………………………9 2.-PREPARACIÓN DEL MEDICAMENTO HOMEOPÁTICO ……….11 2.1. DESCRIPCIÓN TAXONOMICA de Nux vómica ……………...15 2.2. HISTORIA de Nux vomica …………………………….16 2.3. ACCIÓN FISIOPATOLÓGICA ………….………………………..18 2.4. UTILIDAD CLÍNICA EN HOMEOPATÍA .....…………………….19 6 2.5. POSOLOGÍA, INDICACIÓN TERAPÉUTICA ..………………..20 2.6. CONSIDERACIONES GENERALES ……………………………21 3.-PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA …………………………….22 4.-JUSTIFICACIÓN …………………………….23 5.- OBJETIVOS …………………………….24 5.1.-OBJETIVO GENERAL ………………………….24 5.2.-OBJETIVOS PARTICULARES …………………….24 6.- HIPÓTESIS …………………………….25 7.- MATERIAL Y MÉTODOS …………………………….26 7.1. ESTRATEGIA EXPERIMENTAL …………………………………….26 7.2. RECURSOS MATERIALES. …………………………………….27 7.3. METODOLOGÍA, PREPARACIÓN TINTURA ……………………..28 7.4. OBTENCIÓN DE ESPECTROS …………………………….…29 8.-RESULTADOS. ………………………….…30 8.1. ESPECTROS DE ABSORCIÓN DE LUZ UV/Vis .……………...31 9.-DISCUSIÓN ………………………………………………….…40 10.-CONCLUSIÓN ………………………….…42 7 11.-BIBLIOGRAFÍA ………………………….…44 ÍNDICE DE FIGURAS. Fig. 1.1 Haz de Radiación Electromagnética. Fig. 1.2 Espectro Electromagnético Fig. 1.3 Estructura Atómica Fig. 1.4 Fenómeno de Absorción. Fig. 2.1 Semilla de Nux vomica Fig. 7.1 Semilla de Nux vomica Fig. 8.1 Diferentes Tinturas de Nux vomica Dilución Fig.8.2. Espectro de Absorción Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía. 1 Fig.8.3. Espectro de Absorción Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía. 2 Fig.8.4. Comparación de Ambos Espectros de la ENMYH. Fig.8.5. Espectro de Absorción del Laboratorio Medicor. Tintura “nueva”. Fig.8.6. Espectro de Absorción del Laboratorio Medicor. Tintura “vieja”. Fig.8.7. Comparación de Ambos Espectros del Laboratorio Medicor. Fig.8.8. Espectro de Absorción del Laboratorio Hoffmann. Fig.8.9. Espectro de Absorción del Laboratorio Similia. 8 Fig.8.10Espectro de Absorción del Laboratorio Boiron. (Laboratorio Francés) Fig.8.11Espectro de Absorción de Todos los Laboratorios. ABREVIATURAS CH. Centesimal Hahnemaniana. CD. Cirujano Dentista ENMyH. Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía. GL. Gay lussac IPN. Instituto Politécnico Nacional. MCYH. Médico Cirujano y Homeópata. NM. Nanómetros. UV/Vis. Luz ultravioleta visible. 9 RESUMEN. La espectroscopia de absorción de luz UV/Vis es un procedimiento relativamente simple que sirve para evaluar las tinturas homeopáticas, y que tiene grandes ventajas a diferencias de otras técnicas como: la rapidez del desarrollo de los ensayos y que es una prueba no destructiva. En este trabajo se analizaron tinturas de Nux vómica, de diferentes laboratorios comerciales tanto nacionales como extranjeros, con el fin de que forme parte de un manual donde se regularice la preparación de las diferentes tinturas ó como control de calidad, ya que muestra las pequeñas diferencias entre una tintura y otra respecto a la intensidad que está determinada por sus cromóforos. PALABRAS CLAVE. Espectroscopia. Tinturas. Homeopatía. Nux vomica. Espectro. Tintura de Nux vomica. Estandarización. Método. SUMMARY. The spectroscopy of light absorption UV/Vis is a relatively simple procedure that it serves to evaluate the homeopathic dyes, and that have great advantages to differences of other techniques like: the rapidity of the development of the tests and that is a non-destructive testing. In this work dyes of vómica Nux, of different national commercial laboratories were analyzed as as much foreign, in order that it comprises of a manual where the preparation of different dyes is regularized or like quality control, since it shows to the small differences between a dye and another one with respect to the intensity that is determined by its chromophores. 10 KEY WORDS. Spectroscopy. Dyes. Homeopathy. Nux vomica. Phantom. Dye of Nux vomica. Standardization. Method. 1.- INTRODUCCIÓN. La elaboración de las tinturas homeopáticas debe llevarse a cabo con estricto control de calidad tanto de las materias primas, como del proceso de obtención, y posteriormente su almacenamiento. En el caso de las tinturas homeopáticas obtenidas a partir de plantas se deben controlar varios parámetros: como la variedad botánica de la planta, época del año fecha y lugar de recolección, partes de la planta a utilizar, si el material se usará fresco o seco, título alcohólico, entre otros. La vigilancia estricta de estos parámetros garantiza la estandarización y por tanto la reproducibilidad de todas las preparaciones de una planta a lo largo del tiempo. (Morales 2007) Posterior a la obtención todas las tinturas deben ser sometidas a un riguroso análisis de laboratorio para verificar su control de calidad. En algunos laboratorios homeopáticos, cada tintura madre se controla específicamente a través de cromatografía en capa fina y al mismo tiempo una lectura densitométrica que proporciona una garantía suplementaria a este análisis. Está técnica permite controlar, de una manera eficaz y fiable, la estabilidad en el tiempo de las tinturas madres. Igualmente nos permite descubrir la presencia de posibles fraudes o impurezas de las mismas. Podemos decir que cada una de las tinturas madres tiene su huella digital y la forma de poder certificar su autenticidad es a través de la cromatografía, no obstante el costo puede ser elevado lo que representa que algunos laboratorios no puedan desarrollar dicha técnica. (Morales 2007). 11 Una posible técnica de análisis es la espectroscopia de absorción de luz UV/Vis que tiene algunas ventajas; una de ellas es la rapidez del desarrollo de los ensayos y que es una prueba no destructiva. (Skoog 2001). En este trabajo se presenta un análisis de los espectros de absorción de luz UV/Vis de tinturas de Nux vomica obtenidas de distintos laboratorios. Esta información puede ser útil para la mejor descripción y caracterización de los medicamentos homeopáticos y la estandarización del control de calidad de estas preparaciones. 1.1- Antecedentes. En la literatura existen pocos antecedentes de caracterización espectroscópica en medicamentos homeopáticos. En 1989 el Dr. Salas realizó una investigación cuyo objetivo fue validar las micro dosis del medicamento homeopático, utilizando resonancia magnética nuclear en el cual demostró la presencia indirecta del medicamento homeopático por la inducción del soluto en el solvente, explicándose esto por la teoría de los sistemas dispersos, de tal forma que la acción medicamentosa permanece en el medicamento, aunque sudilución vaya más allá del número de Avogadro, porque entre soluto y solvente, se produce un estado de cristal líquido plenamente identificable, estable y con características propias. (Salas A. 1989) En el año 1990 Rosas Landa y Rodríguez publicaron el trabajo: “Espectrofluorometría de los Medicamentos Homeopáticos” donde concluyen que el estudio fluorométrico de los medicamentos homeopáticos mejorará las técnicas de identificación de los medicamentos y posiblemente proporcione información de su concentración. (Rosas 1990). 12 En 1994 Rosas Landa y Rodríguez realizaron un trabajo de Espectrofluorometría en el control de calidad de los medicamentos homeopáticos con el objetivo de elaborar un código de identificación además de verificar el control de calidad y motivar a realizar un catálogo de identificación farmacológica y de control de aceptación universal. En el estudio se incluyeron medicamentos homeopáticos de uso común en dinamizaciones de 3, 6, 12 y 30 CH concluyendo que la fluorescencia en los medicamentos homeopáticos es una propiedad física presente, que entre otras puede ser útil efectivamente para verificar el control de calidad. (Rosas 1994). En el 2007 Rochín L y Benítez C. Realizaron un trabajo sobre la ” Evaluación y análisis de la Nux vomica a diferentes potencias (6, 12 y 30 CH) mediante espectrofluorometría”, en 2 etapas: Etapa de Sucusión. Etapa de Filtración y desgasificación. Los autores encontraron que la potencia no tiene una relación directa en la intensidad de los picos de los espectros de emisión de fluorescencia; en cuanto a la sucusión al momento de la lectura presenta espectros de emisión de fluorescencia con intensidad mayor que cuando se dejan reposar por 15 días. Hubo poco efecto en la intensidad de los picos de los espectros en todas las preparaciones descartando la posibilidad de que partículas suspendidas en las distintas diluciones interfieran en la señal de fluorescencia. En contraste el tratamiento con desgasificación la mayor parte de los casos disminuyó drásticamente la intensidad de los picos de los espectros de emisión lo que podría indicar la presencia de nano-burbujas o bien que durante la desgasificación ocurre evaporización del vehículo alterando la señal de fluorescencia. (Rochin 2007) 13 1.2- Espectroscopia. La espectroscopia es una rama de la Física y Química que se ocupa del estudio de la interacción de la radiación electromagnética con la materia y la aplicación al análisis químico. El espectro se define como una representación gráfica o fotográfica de la distribución de intensidades de la radiación electromagnética emitida o absorbida por la materia, en función de la longitud de onda de la radiación. Los espectros se deben a transiciones electrónicas entre estados de energía característicos de la materia. (Skoog 2001) 1.3- Propiedades de la Radiación Electromagnética. La radiación electromagnética es una forma de propagación de energía a través del espacio y emitida por una sustancia en estado excitado. Tiene naturaleza ondulatoria en su movimiento, definida por parámetros como velocidad, amplitud, frecuencia o longitud de onda. A su vez se describe como un conjunto de partículas llamadas fotones. La energía de un fotón es proporcional a la frecuencia de radiación. Al atravesar la materia, la radiación puede interaccionar con partículas que tengan una carga eléctrica o momento magnético, produciéndose una transferencia de energía entre la radiación y la materia. Los parámetros ondulatorios más característicos son la longitud de onda (λ) y la frecuencia (ν); la primera se define como mínim frecue de on (Fig.1 Figura diagram www.fa Todas cm/s cump la longitu mos sucesi encia es la nda y la ve .1) 1.1 Repres ma se señal ao.org s las radiac (en el aire le, νλ = c. d de un c ivos. La fr única cara elocidad de sentación esq lan los pará ciones se m se produce ciclo, o bie recuencia cterística c ependen d quemática d metros que mueven en e una variac en como la es el núm constante e de la natur de una onda describen un el vacío co ción del 0,0 a distancia mero de c n una radia aleza del m a de radiació na onda com on la misma 03 %), lueg entre dos ciclos por ación, ya qu medio de ón electroma mo su longit a velocidad o para una s máximos segundo; ue la longitu propagació agnética. En tud y amplitu d c =3,0x10 a radiación 14 o la ud ón. el ud. 0 10 se 15 Por otra parte, la energía asociada a la radiación electromagnética fue descrita por Planck en 1900. (Planck review 2003). Así, la energía de un fotón de radiación electromagnética es directamente proporcional a la frecuencia e inversamente proporcional a la longitud de onda. 1.4- Regiones Espectrales. La radiación electromagnética se distribuye en diversas "regiones espectrales" dependiendo de la longitud de onda o frecuencia de la misma. Ordenadas de mayor a menor longitud de onda se encuentran las regiones correspondientes a ondas de radio, microondas, infrarrojo, visible, ultravioleta y rayos X. (Chang 2007) El espectro electromagnético abarca un intervalo enorme de longitud de onda y frecuencia. La región visible del espectro percibido por el ojo humano es muy pequeña si se compara con otras regiones espectrales; ésta se encuentra aproximadamente entre los 380 y 780 nm. (Fig.1.2) 16 Fig.1.2 Espectro de radiación electromagnética, donde se muestran distintos tipos de radiación con sus longitudes de onda. Se resalta la región visible al ojo humano en colores. www.laeff.inta.es/.../imágenes/emspecsmall.jpg 1.5- El Sistema Atómico-Molecular En un sistema atómico-molecular están comprendidas diferentes tipos de energías de orden y magnitud diferente. La materia está compuesta por unas partículas mínimas elementales, el electrón, el protón y el neutrón que es a las que se deben todas sus propiedades. Estas partículas mínimas se agrupan para formar estructuras más complejas, los átomos. Estas estructuras que a su vez se agrupan entre sí formando moléculas. El núcleo está constituido por protones y neutrones y la corteza por electrones. Los electrones se encuentran alrededor del núcleo, en orbitales electrónicos; los orbitales tienen distintos niveles energéticos. (Fig.1.3) ESTR Fig.1.3 protone niveles El es funda excita Postu 1. RUCTURA A 3. Representa es en el núcl s energéticos. stado de e amental. Lo ados. (Skoo ulados de la Los átom discretos, especie c exactame ATÓMICA: ación esquem leo del átomo . www.geoci energía má os estado og 2001) a teoría cuá mos, iones caracteriz cambia su ente igual a mática de un á o. En la perif ities.com/mad ás bajo d s de ene ántica incluy y molécul ados por c estado, a la diferenc átomo. En el d feria se prese disonavenue/ e un átom ergía supe yen: las solo p cantidades d absorbe o cia de energ diagrama se m entan los elec /4364/IMG000 mo o mo eriores se ueden exis definidas d emite una gía entre lo muestran los ctrones ocup 019.GIF olécula es denomin stir en cie de energía. a cantidad s estados. neutrones y l ando diferent su estad nan estad rtos estado Cuando un de energ 17 los tes do os os na gía 18 2. Cuando los átomos, iones o moléculas absorben o emiten radiación al realizar la transición de un estado de energía a otro, la frecuencia y la longitud de onda de la radiación se relaciona con la diferencia de energía entre los estados. El orden y magnitud de estas energías son muy diferentes, por lo que las radiaciones electromagnéticas absorbidas o emitidas debidas a cambios energéticos, son muy distintas en longitud de onda y frecuencia,pudiéndose obtener espectros característicos según la región del espectro electromagnético. 1.6- Interacción de la radiación electromagnética con la materia. Cuando la radiación electromagnética incide sobre la materia, interacciona con ella dando lugar a fenómenos de transmisión, dispersión y absorción de la radiación. Cuando la luz continua (con todas las longitudes de onda posibles dentro de cierto intervalo) se hace pasar a través de celdas que contienen muestras de átomos o moléculas, la luz emergente ya no es continua, debido a que parte de las radiaciones de determinadas λ han sido absorbidas por la muestra. Las espectroscopias visible y ultravioleta miden longitudes de onda absorbidas o emitidas por electrones atómicos. En el espectrofotómetro, esta luz pasa a través de una ranura y un prisma y se separa en sus longitudes de onda que la componen, las cuales se observan como líneas de color, es decir, luz de diferentes energías, característica de la diferencia entre los distintos niveles de energía de los átomos. (Skoog 2001) La espectroscopia es una herramienta muy importante en la investigación científica, ya que el espectro de cualquier elemento es tan característico del mismo como la huella digital de una persona. 1.7- L Al in absor neces La le absor que la debe Con m propo recorr (Vallad Haz d incid Ley de Abs teraccionar rción, siem saria para q ey fundame rbida al pas a absorción atravesar l más detalle orcional a rido óptico dares 2006) de radiación e ente (intensid sorción de r la radia mpre que l que el siste ental que sar a través n de radiac a radiación e, explica q la concent o que deb ) electromagné dad= Po) Lambert-B ación elect la energía ma pase a rige el co s de la mat ción de una n y de la con que la luz tración de be atraves Muest ética Beer tromagnétic de la ra un nivel en omportamie teria es la a muestra ncentración absorbida la misma sar la radi ra Haz resul ca con la diación co nergético su ento de la ley de Lam depende d n de la mue por una m a e inversa iación elec de radia tante (intens a materia oincida con uperior perm fracción mbert y Bee del recorrid estra. muestra es amente pro ctromagnét ación elect idad = P) se produ n la energ mitido. de radiació er, que indi o óptico qu directamen oporcional tica. (Fig.1 tromagnética 19 ce gía ón ca ue nte al .4) a 20 Fig.1.4 Esquema representativo del fenómeno de absorción. La figura permite ver un haz de radiación paralelo antes y después de interaccionar con una muestra. Como se puede apreciar la intensidad de la radiación es mayor en el haz que aun no ha interaccionado con la muestra (P 0 ) y la intensidad es menor después de haber atravesado la muestra (P): es decir P 0 >P.www.fao.org/docrep/field/003/AB482S/AB482S03.htm El espectrofotómetro de absorción es un instrumento que nos permite cuantificar la absorción de la radiación electromagnética cuando interactúa con una muestra. Este equipo consta de una fuente de radiación electromagnética, un filtro y un detector fotoeléctrico además de un procesador de señales y un sistema de lectura. Existen fotómetros de filtros para medidas de absorción de región ultravioleta, visible e infrarrojo. (Montimer 1993) En este trabajo se utilizó un espectrofotómetro de absorción de luz UV/Vis. 2.- PREPARACIÓN DE LOS MEDICAMENTOS HOMEOPÁTICOS. En la elaboración de los medicamentos homeopáticos se exigen determinados requisitos para obtener la materia prima de las drogas, ya sean del reino vegetal, animal, mineral etc. Individualización de la especies. (taxonomía). Conocimiento exacto de la parte o partes a utilizar. Época del año, estado de la planta y las condiciones atmosféricas en que se debe recoger. 21 El material vegetal fresco o seco. Lugar y zona de recolección. Material silvestre o en su mismo ambiente. Las hojas. Se deben recoger cuando estén totalmente desarrolladas, antes de las floración. Las flores. Se recolectan cuando están en plena floración. Los frutos y semillas. Deben ser utilizados durante la maduración, época en que el principio activo está más concentrado en éstas partes de la planta. (Morales 2007) VEHÍCULOS. En homeopatía todos los medicamentos necesitan de un vehículo para ser administrados al organismo. No se puede utilizar cualquier sustancia como vehículo, ya que la experimentación pura se realiza con alcohol de caña o con trituración de azúcar de leche. Los vehículos deben ser inertes, sin alterar las propiedades de las sustancias medicinales, ser de la mejor calidad y pureza para obtener los mejores resultados en la elaboración de los medicamentos homeopáticos. Los vehículos empleados son: -Agua destilada. El agua que actualmente se usa en los laboratorios procede de fábricas especiales y es obtenida por destilación. El agua cuando no contiene 22 materias orgánicas o minerales se conserva inalterable a la luz del sol durante mucho tiempo. -Alcohol puro de caña. Es el vehículo más utilizado en farmacia homeopática, se obtiene por destilación de los licores fermentados, siendo un producto artificial. La fermentación se efectúa por acción de la levadura de cerveza. En México se utiliza para uso homeopático el alcohol extraído de la caña de azúcar. El alcohol concentrado tiene una fuerza de 96º GL. El alcohol para uso homeopático puede tener diferentes graduaciones según las aplicaciones y las reglas que se requieran para elaborar las tinturas y los medicamentos homeopáticos, las graduaciones más frecuentes son de 96º, 87º, 70º, 60º GL. El Llamado alcohol homeopático es el que tiene 87º GL y sirve para impregnar glóbulos, tabletas, gotas y cucharadas. -Glicerol. Debe ser totalmente puro, su aplicación y utilización principal es para la preparación de los extractos líquidos. Debe ser glicerina bidestilada. Otra aplicación es para la conservación de sustancias minerales que no se deben guardar en frascos de vidrio porque los descomponen, como es el caso de Fluoricum acidum. (Morales 2007) TINTURAS. Se elaboran a partir de una gran variedad de materias primas que son total o parcialmente solubles en alcohol. Para su obtención se requiere la extracción de los principios solubles de las materias primas. 23 Esta extracción se lleva a cabo por maceración o lixiviación de la materia prima fresca o seca, triturada y tratada con alcohol de 96º GL o con algunas mezclas de vehículos debidamente escogidos y en proporciones adecuadas. LIXIVIACIÓN. La materia prima se pulveriza finamente y se mezcla con la suficiente cantidad de vehículo para convertirla en una masa humedecida uniformemente, después de un lapso de quince minutos de reposo, se transfiere esta masa al percolador, comprimiéndola para que se compacte sin dejar huecos, después se vierte hasta que el vegetal triturado quede cubierto y empiece a gotear en el tubo de salida. En este momento se cierra la llave de paso y se deja macerar un día más procurando taparlo, lo cual evita la evaporación parcial del vehículo. Posteriormente se abre la llave de paso y se gotea de 10 a 30 gotas por minuto, se continúa la adición de solvente para que el nivel se mantenga encima del sólido, evitando la entrada de aire, hasta obtener el total del percolador. La tintura obtenida se somete a una segunda filtración y se ajusta el volumen final. (Morales 2007) MACERACIÓN. Consiste en introducir la materia prima triturada en un recipiente de vidrio ámbar, agregando el vehículo adecuado, el recipiente bien cerrado se coloca en un cuarto oscuro, a temperatura ambiente durante dos a cuatro semanas, (dependiendo de la naturaleza del material,)agitándolo o volteándolo dos veces al día. Al concluir el proceso, se decanta el líquido, se exprime el residuo, se filtra el producto y se verifica el volumen obtenido. Es el proceso de elección cuando el vegetal contiene gran cantidad de sustancias gomosas o mucilaginosas que podrían obstruir un percolador. Para la selección de las fuentes vegetales que incluyen plantas completas, hojas, tallos, cortezas, maderas, raíces, frutos y semillas, se deben considerar las siguientes especificaciones: (Morales 2007) 24 PLANTAS COMPLETAS. Se cuidara de escoger la planta sana y limpia, en los sitios más favorables para su desarrollo. Es importante señalar que las plantas que se van a utilizar para elaborar medicamentos homeopáticos deben de estar libres de herbicidas, insecticidas, fertilizantes, etc.; Así como ser plantas adultos jóvenes y recolectarse en época de la primera floración. (Morales 2007, Amic 1998) 2.1- Descripción Taxonómica Nux vomica 25 • Strychnos viene del griego y significa "amargo" o "áspero". • Nux vomica en latín significa "nuez venenosa". Fuente. Laboratorio de Farmacia Homeopática Nombres que recibe Fig. 2.1 Semilla de Nux vomica • - Latín: Strychnos nux vomica • - Castellano: nuez vómica, mataperros, canirán, matacán • - Catalán: matacá • - Italiano: noce vomica, noce canina, fungo di levante, vomiciaio • - Francés: vomiquier • - Inglés: nux vomica, poison nut, quaker buttons, vomiting nut • - Vietnamita: mâ thiên • - Alemán: Krähenaugen, Brechnuss Descripción: Árbol ramoso, tronco resquebrajado y corto, madera dura, sabor muy amargo. Flores pequeñas de color blanco verdoso formando grupos de 3-5 flores, de olor semejante al jazmín pero algo desagradable. Fruto piriforme del tamaño de una manzana y color anaranjado al madurar. Altura: hasta 15 metros Origen: india, Ceilán, indochina, malasia, norte de Australia, sur de china. Parte utilizada medicinalmente: Las semillas (habas secas). COMPONENTES PRINCIPALES • Alcaloides:(2-3%) o Estricnina (50%) o Brucina (50%) o Igasurina o Alfa y beta colubrina o Vomicina o Novacina o Alcaloides secundarios 26 o Ácidos igasúrico (clorogénico) y cafeotánico • Glucósidos o Loganina (5%) o Loganetina o Sustancias grasas (4%) Oleina Glicéridos sólidos Amirinas Pigmento amarillento Gomas Azúcares, Ácidos cafeotánico y clorogénico estigmasterina (Enciclopedia de las plantas que curan Tomo I 1984) 2.2- Historia. "Avicena y Serapion hicieron a Nux vomica y a Nux methel una sola, Avicena afirmaba que la Nuez vomitiva es de cualidad venenosa, fría en el tercer grado, teniendo una naturaleza estupefaciente, y provocando un mortal sueño. De las virtudes físicas de las nueces vomitivas creo que no es necesario escribir, debido a que el peligro es grande, y no se deben dar tomadas, sino mezcladas con otras composiciones realizadas seriamente por las manos del Apotecario". • Contiene estricnina, un veneno potente que actúa sobre el sistema cerebroespinal, produciendo convulsiones y colapso. • En dosis moderadas y controladas por un facultativo, provoca un estado de excitación neurovegetativa que hace que aumente la sensibilidad del olfato, tacto, vista y oído. 27 • En Amazonas existen varias subespecies de Strychnos que se utilizan en la elaboración del curare, destacando entre ellas Strychnos brachiata (sijipe), Strychnos erichsonii (cuit, limanajú), Strychnos guinensis (yajiaeo), Strychnos cogens, Strychnos panamensis... Contraindicaciones y observaciones • El uso de esta planta debe ser controlado por el especialista ya que presenta contraindicaciones y efectos secundarios. Como hemos apuntado, la nux vomica contiene estricnina, cuya eliminación es muy lenta en el organismo, produciendo efectos secundarios acumulativos incluso a dosis bajas. • En caso de intoxicación debe de tomarse un vomitivo potente y realizar el lavado del estómago rápidamente Además de intoxicaciones subagudas, se produce una acidosis metabólica con liberación de enzimas musculares y rabdomiolísis, responsables de la fatiga muscular. A dosis muy fuertes la estricnina tiene un efecto idéntico al curare. Existen grandes variaciones de la sensibilidad individual a la estricnina: los niños y las personas de edad son en general especialmente sensibles, mientras que las personas en estado de embriaguez alcohólica o barbitúrica pueden soportar dosis muy elevadas. Existe un antagonismo entre los barbitúricos y la estricnina, los primeros aumentan la intensidad mínima del estímulo necesario para obtener una respuesta, mientras que la estricnina la disminuye. (Waizel 2006, Enciclopedia de las plantas que curan Tomo I 1984). 28 2.3 Acción Fisiopatológica. La Nux vómica es por excelencia, un veneno que aumenta grandemente la excitabilidad refleja de la médula espinal, siendo el más violento de los venenos convulsionantes. Excita e irrita de igual modo, la sensibilidad en general, el sensorio, la esfera mental, la motricidad y las vísceras. Esta acción general violenta pero corta, rápida y profunda. A nivel del estomago se absorbe lentamente, aproximadamente en 30 minutos, en el intestino delgado su absorción toma unos 10 minutos y a nivel de colon más o menos 7 minutos. Las dosis débiles de 1 a 5 miligramos son las excitantes. Las dosis fuertes de 1 a 3 centigramos son las convulsivantes. La médula y el bulbo son los órganos principalmente afectados, sobre ellos produce la Estricnina, una exaltación de la excitabilidad refleja, de modo que las más pequeñas excitaciones periféricas trasmitidas a estos centros provocan reacciones motrices violentas y generalizadas, se admite actualmente que la Estricnina actúa sobre la excitabilidad de las neuronas intercalares sensitivas en la médula. Normalmente estas neuronas colocadas entre las vías sensitivas y las vías motrices, oponen una cierta resistencia al paso del influjo nervioso y estorban su difusión bajo la acción de la Estricnina, la neuronas intercalares se vuelven más conductoras “más permeables” y permiten el paso acelerado del influjo nervioso favoreciendo su propagación a los niveles medulares vecinos, con la consiguiente violenta, múltiple y desproporcionada respuesta motriz. Al actuar sobre el bulbo las dosis excitantes, la respiración vuelve más amplia y más rápida (taquipnea). Al actuar allí las dosis tóxicas o convulsivante, producen la inhibición, pero por la acción medular convulsionante sobre el diafragma y los demás músculos respiratorios, produce la asfixia. 29 Al actuar en el cerebro las dosis excitantes, se aumenta la receptividad de los órganos de los sentidos, oído, vista, olfato, se vuelven extraordinariamente sensibles. El sistema nervioso periférico es también afectado y así las dosis cerebrales excitadores aumentas su excitabilidad y las dosis producen su inhibición, haciendo desaparecer la motricidad. Se sabe que las dosis débiles de estricnina bajan la cronaxia del nervio y de su músculo respectivo, con lo cual no se produce verdadera contracción ya que se conserva el isocronismo, nada mas disminuido. Las dosis fuertes abaten la cronaxia del nervio y no alteran la del músculo con lo cual se produce un efecto llamado seudo-curarización y no curarización verdadera, puesto que la cronaxia del músculo ya no fue disminuida más. La estricnina por su acción sobre el centro vasomotor, puede provocar constricción central que se equilibra con vasodilatación periférica, razón por la cual los vasos y el corazón no resisten la intoxicación. Se puede observar con la dosis convulsivante un aumento en la contractilidad cardiaca que no llega a latetanización, lo que si ocurre con el resto de los músculos, por lo cual es desfallecimiento de este músculo es solo por fatiga. La dosis convulsivante elevan la presión sanguínea por el doble mecanismo de contractilidad cardiaca aumenta y la descarga adrenalina que se produce por la asfixia. (Mendiola 1977) 2.4- Utilidad Clínica en Homeopatía La Terapéutica Homeopática está basada en la hipótesis de Hipócrates que lo semejante cura lo semejante (similia similibus curentur), es decir el remedio a utilizar se elige cuando los síntomas que presenta un enfermo son lo más parecido a los que previamente un remedio homeopático ha demostrado por su experimentación pura. (Wright 2006). La experimentación Homeopática fue realizada por Hahnemann y colaboradores cuya patogenesia está incluida en la Materia Médica Pura. (Mendiola 1977). 30 2.5 - Posología, Indicación Terapéutica y Toxicidad. Indicaciones: Tónico amargo, laxante, depurativo, estimulante del apetito. Sistema digestivo, inapetencia, dispepsia atónica, sistema nervioso, parálisis y hemiplejía. (Waizel 2006) Extracto. Diarrea crónica, constipación habitual, dispepsia, debilidad nerviosa, alcoholismo, gastroenteritis, nefritis, anemia. Polvo. Constipación habitual, dispepsia, gastroenteritis, neurastenia. Tintura. Anemia, bronconeumonía, calambres, catarro intestinal con atonía cefalalgia, cólera congestión alcohólica, enterocolitis membranosa, fiebre amarilla, neuralgia compresiva, vómitos incoercibles. (Waizel 2006). Dosis de 1 a 5 miligramos, excitación de todas las funciones orgánicas, sistema nervioso, vías respiratorias, corazón, circulación aparato digestivo, vejiga y genitales. Dosis 1 a 3 centigramos, hormigueos, exaltación y perversión de la sensibilidad sensorial, vista, oído. Agitación, rigidez, taquicardia. Dosis de 5 centigramos, cuadro tetánico, ansiedad trismos, al menor contacto se desata crisis convulsiva hasta asfixia. Dosis más fuertes que 5 centigramos, puede producir parálisis flácida por inhibición, o atonía muscular. (Mendiola 1977) A dosis tóxicas tiene una acción convulsivante, puede provocar además de intoxicaciones agudas una crisis tetaniformes con opistótonos, trismus, fascie sardónica, dificultad respiratoria. 31 La intoxicación se manifiesta con hipertensión y bradicardia. Puede producir muerte por asfixia, debida a la contracción de los músculos del tórax y diafragma. La dosis mortal es aproximadamente de 1 mg/kg de peso. (Waizel 2006). 2.6- CONSIDERACIONES GENERALES. Dada la potencial toxicidad de la droga, ya no se usa terapéuticamente, se prefiere la aplicación en dosis homeopáticas. Industrialmente se usa para la obtención de estricnina, sustancia base en la elaboración de venenos para ratones. (Enciclopedia de las plantas que curan Tomo I 1984) También se utiliza para el tratamiento de los intoxicados por barbitúricos, empleado en los puestos de socorro de la Cruz Verde, en México, a razón de 0.01 a 0.02 gr por día. (Mendiola 1977). 32 3.-PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. Dado que los medicamentos homeopáticos tienen como base la tintura madre, debemos tener la certeza de que se mantengan sus propiedades en cuanto a calidad, independientemente del laboratorio farmacéutico donde se adquiera. ¿Existe un mismo espectro de absorción UV/Vis en diferentes marcas comerciales de la tintura Nux vómica? 33 4.- JUSTIFICACIÓN. Es muy común que los médicos homeópatas confíen en la industria farmacéutica homeopática, pero no existe un control de calidad estandarizado en la elaboración y almacenamiento de los medicamentos homeopáticos, por ello es necesario evaluar la composición y calidad de las tinturas homeopáticas a través de la espectroscopia y con ello garantizar su efectividad terapéutica. Las técnicas espectroscópicas representan una alternativa de análisis de los medicamentos homeopáticos. 34 5.- OBJETIVOS 5.1- Objetivo General. Analizar espectroscópicamente las diferentes preparaciones comerciales de la tintura madre “ Nux vómica” 5.2- Objetivos Específicos. Preparar la tintura de Nux vómica de acuerdo a la farmacopea homeopática mexicana. Obtener los espectros de absorción de tinturas de Nux vómica, preparadas en el Instituto Politécnico Nacional, y de diversos laboratorios farmacéuticos. Comparar los diferentes espectros obtenidos. 35 6.- HIPÓTESIS. Ya que existe una regulación y metodología establecida para la elaboración de tinturas homeopáticas según la farmacopea homeopática, entonces las diferentes tinturas comerciales sometidas a un análisis espectroscópico darán un mismo espectro de absorción de luz UV/Vis. 7.- M TIN DIF LAB MATERIAL NTURAS FERENT BORATO L Y MÉTO 7.1- E S DE TES ORIOS O E A U ODOS. STRATEG Fig. 7.1 Se TIN OBTENCI ESPECTR ABSORC UV/VIS 22 GIA EXPE milla de Nux NTURA ION DE ROS DE IÓN DE L 20 -450 N ERIMENT vomica A LUZ NM. TAL 36 37 ANALISIS DE RESULTADOS 7.2.-Recursos Materiales. Espectrofotómetro marca Beckman DU 650. Celdas de plástico de 10.0 mm de recorrido óptico (transparentes en región de 220 a 800 nm). Planta o semilla a utilizar Martillo Alcohol 90 O GL. Papel filtro Vaso de precipitado Soporte universal Balanza Placa de metal para apoyar la trituración Semilla de Nux vomica. Etanol de 95° marca Merck Agua destilada. Tintura Madre de Nux vomica, elaborada en la ENM y H el 09-09-08 y otra realizada el 21-08-07. Tinturas provenientes de laboratorios comerciales nacionales y extranjeros. I. Hoffmann II. Boiron III. Medicor IV. Similia V. ENMyH 1 Fecha de realización 21-08-07. 38 VI. ENMyH 2 Fecha de realización 09-09-08. 7.3- METODOLOGÍA. (Método de preparación de la tintura Nux vomica.) MACERACIÓN: Se utiliza para vegetales frescos. 1) Se identificó la semilla a utilizar de Nux vomica. 2) Se limpió y eliminó todas las partes rotas, descoloridas, negras, secas, marchitas, plagas, parásitos, tierra, polvo, etc. 3) Se pesó. Del peso de la semilla se agregó alcohol de 90º GL, en una relación de 5:1 peso/peso. 4) Se cortó en trozos (usando martillo). 5) Se suspendió la semilla en el alcohol. 6) Se etiquetó el frasco. 7) Se agitó dos veces al día (sucucionando de 100 a 200 veces por 15 a 30 días). 8) Se separó por decantación la tintura del residuo. 9) Se envasó, y etiquetó el frasco. 10) Se almacenó en un lugar fresco sin exposición de luz solar. (Enciclopedia - Brasil 1984, Delgado 2007) Cabe señalar que las tinturas realizadas en el Instituto Politécnico Nacional fueron realizadas bajo la supervisión del C.D. José M. Delgado, en la clase Práctica de 39 Farmacia Homeopática con los mismos reactivos, (alcohol, agua, y semilla de Nux vomica). 7.4.-OBTENCIÓN DE ESPECTROS DE ABSORCIÓN LUZ UV/VISIBLE: Todas las mediciones de espectros de absorción de Luz UV/Vis, se realizaron en el Espectrofotómetro marca Beckman, modelo DU-650, equipado con un porta celdas de acero inoxidable. Se utilizaron celdas de 1 cm de recorrido óptico (transparentes en región de 220 a 800 nm). Se realizaron los siguientes pasos: 1) Limpieza de la celdilla con etanol de 90° 2) Se colocó el blanco para el espectrofotómetro de luz UV/Vis con etanol de 90° (del mismo que se usó para la obtención de la tintura de Nux vómica. 3) Se hicieron diluciones1:100 con etanol de 90° de cada una de las tinturasde Nux vomica utilizando pipetas automáticas. 4) Se tomó el espectro de absorción de 220 a 450 nm. 5) Se graficaron los datos de absorbancia contra longitud de onda. 6) Se compararon los diferentes espectros de todas las tinturas utilizadas. 8.- R En pr ellas mues seguid la EN Fig. 8 RESULTA imera insta pareciendo tra del labo da por labo MyH del IP 8.1. Tinturas I. II. III. DOS. ancia se evi o estar mas oratorio Ho oratorio Boi PN, son las I s de Nux vo Hoffmann Boiron Medicor idencia la d s concentra offmann que ron y Medi que mostra II II omica, se h diferencia re adas unas e fue la de cor; mientr aron menor I IV hace enfasis especto al que otras. e coloración ras que las r intensidad V VI s en la com color entre . Entre ella n más inten muestras r d de color. ( mparación d cada una d as destaca nsa de tod realizadas e (Fig.8.1) del color. 40 de la as en 41 IV. Similia VII. ENMyH 1 Fecha de realización 21-08-07. VIII. ENMyH 2 Fecha de realización 09-09-08. 8.1. ESPECTROS DE ABSORCIÓN DE LUZ UV/VIS. A continuación se presenta el espectro de absorción de luz UV/Vis realizada en la ENMyH 1 el 21-08-07. Donde se aprecian tres bandas de absorción centradas en 261, 308 y 335 nm así como un valle a 277 nm. (Fig. 8.2) 200 250 300 350 400 450 0,0 0,2 0,4 0,6 Ab so rb an ci a Longitud de onda (nm) ENMyH 1 261 nm 308 nm 277 nm 335 nm Fig. 8.2. Espectro de absorción de luz UV/Vis de Tintura de Nux vomica realizada en la ENM y H 1 el 210807. 42 La segunda tintura a la que se determinó el espectro correspondió también a la realizada en la Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía, el 09-09-08, (2) (Fig.8.3) que también mostró tres bandas de absorción centradas en 261, 308, y 335nm respectivamente aunque menos pronunciada que la ENMyH 1 y un valle a 277 nm. Fig.8.3- Espectro de absorción de luz UV/Vis de Tintura de Nux vomica realizada en la ENM y H 2 elaborada el 090908 . En la comparación de ambos espectros de las tinturas realizadas en la ENMyH, notamos la curva de mayor intensidad de absorción en la tintura realizada el 210807 (ENMyH 1) que en la tintura realizada 090908 (ENMyH 2), (la primera tintura realizada hace 13 meses). Es posible que la diferencia de intensidades se deba a una menor concentración de los compuestos coloridos presentes en la muestra homeopática realizadas recientemente. Cabe señalar que en la 200 250 300 350 400 450 0,0 0,2 0,4 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) ENMyH 2 261 nm 308 nm 277 nm 335 nm 43 preparación de ambas tinturas homeopáticas se utilizó la Nux vomica adquirida en el pasaje catedral por lo que se desconocen varios parámetros del cultivo y recolección de la semilla, lo que dificulta la interpretación de los datos. (Fig.8.4). Fig.8.4.Comparación de espectro de absorción de luz UV/Vis ENMyH 1 Y 2 elaboradas en dos fechas distintas con 13 meses de diferencia. Se evaluaron dos muestra del laboratorio Medicor; preparadas aproximadamente con un año de diferencia entre ellas [(nueva y vieja) Fig 8.5 y Fig 8.6 respectivamente] además de una comparación entre ellas Fig.8.7; Que indica un espectro muy similar con respecto a la posición de las bandas de absorción, no así en la intensidad de los picos. La diferencia en las intensidades se puede explicar por la distinta concentración de los compuestos cromóforos presentes en la muestra, o bien a la degradación posiblemente por la oxidación de los mismos durante los meses de almacenamiento. 200 250 300 350 400 450 0,0 0,2 0,4 0,6 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) ENMyH 1 ENMyH 2 277 nm 308 nm 335 nm 261nm 44 Fig. 8.5 – Espectro de absorción luz UV/Vis de tintura de Nux vomica del laboratorio Medicor N, (tintura “nueva”) Fig. 8.6 – Espectro de absorción de luz UV/Vis tintura de Nux vomica del laboratorio Medicor, tintura “vieja” 200 250 300 350 400 450 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 Ab so rb an ci a Longitud de onda (nm) MedicorN 335 nm 246 nm 277 nm 301 nm 200 250 300 350 400 450 0,0 0,5 1,0 1,5 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) MedicorV 246 nm 301 nm 335 nm 277 nm 45 Fig. 8.7. – Comparación de espectros de absorción de luz UV/Vis de tinturas “vieja y nueva”de Nux vomica del laboratorio Medicor El laboratorio Hoffmann mostró un patron de coloración muy intensa, como se describió en la Figura. 8.1; que se demuestra con una banda centrada a 246, 301 y 335 nm y un valle a 277 nm. (Fig8.8). Como se puede apreciar las bandas de 301, 355 y 277 nm son coincidentes con los espectros de tinturas anteriormente mostradas. (ENMyH y Medicor Fig 8.4, 8.7). 200 250 300 350 400 450 0,0 0,8 1,6 2,4 Ab so rb an ci a Longitud de onda (nm) MedicorN MedicorV 246 nm 277 nm 301 nm 335 nm 46 Fig.8.8. – Espectro de absorción de luz UV/Vis de tintura de Nux vomica del laboratorio Hoffmann. La tintura de Nux vomica producida por el laboratorio Similia, muestra varias bandas de absorción que coinciden en su longitud de onda con las de los laboratorios Hoffmann, Medicor y las elaboradas en la ENMyH. La excepción corresponde a la aparición de un banda a 252 nm que no se observa en los espectros de las tinturas de los otros laboratorios, además la tintura del laboratorio Similia no presenta el pico de 261 que se observa en los espectros de los otros laboratorios comerciales. Fig 8.9 200 250 300 350 400 450 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) Hoffmann 246 nm 277 nm 301 nm 335 nm 47 Fig. 8.9.-Espectros de absorción de luz UV/Vis tintura de Nux vomica del laboratorio Similia. Al graficar el espectro obtenido de la tintura francesa, laboratorio Boiron se observó una banda centrada en 246, 301 y 335 nm y un valle a 277 nm patrones muy similares a las otras tinturas, por lo tanto se mantiene constante el mismo patron de curva, en particular en las regiones de longitudes de onda arriba de 277 nm. (Fig 8.10) 200 250 300 350 400 450 0,0 0,5 1,0 1,5 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) Similia 277 nm 301 nm 335 nm 252 nm 48 Fig. 8.10– Espectro de absorción de luz UV/Vis de tinturas de Nux vomica del laboratorio Boiron “laboratorio frances” Por último se compararon todas las curvas de absorción de las diferentes marcas comerciales obtenidas mediante análisis espectroscópico, con el fin de evidenciar las diferencias limitadas respecto al pico de absorción pero en la longitud de onda respeta el mismo patrón, es decir bandas centradas en 301 y 335 nm, un valle a 277 nm en todas las tinturas. Además se observa una banda en todos los espectros que puede aparecer desde 246 a 261 nm. (Fig 8.11). 200 250 300 350 400 450 0,0 0,7 1,4 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) Boiron 301 nm 335 nm 246 nm 277 nm 49 Fig. 8.11. – Comparación de espectros de absorción de luz UV/Vis de tinturas de Nux vomica de todos los laboratorios (ENMyH, Hoffmann, Medicor, Similia y Boiron.) 200 250 300 350 400 450 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 A bs or ba nc ia Longitud de onda (nm) ENMyH 1 ENMyH 2 Hoffmann MedicorN MedicorV Similia Boiron 277 nm 301 nm 335 nm [246-261] nm 50 9.-DISCUSIÓN. Las dos tinturas realizadas en el IPN ENMyH se realizaron por la regla 4 según la Farmacopea Homeopática Mexicana; (Amic 1998) bajo la asesoría del mismo personal C.D. José M. Delgado (Profesor titular de la clasePráctica de Farmacia Homeopática) con aproximadamente 13 meses de diferencia entre una y otra, con los mismos reactivos, y en ambos casos se utilizó el mismo protocolo respecto a la preparación. Cabe mencionar que el fruto (nuez) se compró en el “pasaje Catedral” desconociendo las características del cultivo y recolección. Lo anterior es importante porque explica la diferencia entre los espectros de absorción de luz UV/Vis de dichas tinturas ya que la Nux vómica de cada preparación muestra diferente intensidad de absorción en su espectro; cuando se observan diferencias en la intensidad de los espectros, generalmente esto indica que hay diferencia de concentración de los cromóforos. Debido a que desconocemos la historia del cultivo y recolección de la nuez que se utilizó en la preparación, no podemos determinar si los frutos tenían distinta composición o bien, los cromóforos pudieron haberse degradado por el almacenamiento de 13 meses de uno muestra contra otra. El espectro obtenido de la tintura del laboratorio Hoffmann muestra 1 banda centradas en 246 nm (Fig. 8.8); al igual que los laboratorios Medicor tanto la tintura vieja como la nueva, y como el laboratorio Boiron. También muestra otras 2 bandas centradas al igual que el resto de los laboratorios incluyendo los de la ENMyH en 301 y 335nm y un valle en 277 nm que todas las tinturas lo presentaron. Respecto a las tinturas utilizadas del laboratorio Medicor se comportaron muy similares en el espectro. (Fig. 8.5 y 8.6). 51 El espectro de la comparación entre las 2 tinturas del laboratorio Medicor fue muy similar aunque con una ligera variación en la intensidad de los picos. (Fig. 8.7), A pesar de que la tintura tiene un año de almacenamiento, lo que indica que la preparación está bien estandarizada así como de la estabilidad de la tintura a través del tiempo, lo que no ocurrió con las tinturas realizadas en ENMyH del IPN, pues también tenían un año de haber sido preparadas pero estas mostraron mayores diferencias en cuanto al espectro de absorción. (Fig. 8.4). En lo referente al laboratorio Similia se observó una banda centrada en 251nm, mientras que en los otros laboratorios habían salido en 246 diferencia de 5 nm. Fig. 8.9). Es posible que los cromóforos responsables de estas bandas sean diferentes en cada una de las tinturas. Respecto al laboratorio Boiron, que corresponde a la tintura francesa, se observó los mismos parámetros que las demás tinturas. (Fig. 8.10) Por último en la Figura 8.11 se observa un panorama general de los espectros de absorción de luz UV/Vis obtenidos de todas las tinturas de Nux vomica comparados; encontrando casi nula diferencia en cuanto a la longitud de onda, es decir, que todas las tinturas analizadas tienen el mismo espectro, aunque algunas como las realizadas en la ENMyH y la del laboratorio Similia mostraron un pico de intensidad en sitio diferente. Algunos ensayos espectroscópicos de la Nux vómica indican que sus compuestos activos (Estricnina y Brucina) presentan una banda de absorción a una longitud de onda de 261 nm, y 301 nm respectivamente. (Wagner 2004); por lo que podemos inferir que las bandas observadas en los espectros de absorción de luz UV/Vis de las tinturas de Nux vómica a la longitud de onda de 246-261 nm corresponde a la Estricnina y la banda de 301 nm corresponde a la Brucina (que como ya se mencionó anteriormente son los compuesto activos que se encuentran en mayor proporción en la semilla Estricnina 55% y Brucina 45%). Dichos compuestos son solubles en soluciones de etanol y agua; por lo tanto pueden estar presentes en las tinturas. 52 10.-CONCLUSIÓN. Este trabajo puede formar parte de un manual donde se regularice la preparación de las diferentes tinturas ó como control de calidad, ya que muestra las pequeñas diferencias entre una tintura y otra respecto a la intensidad que está determinada por sus cromóforos. En el presente trabajo se concluye que todos los laboratorios concuerdan con bandas centradas entre 246-261 nm y presentan bandas de 301 y 335 y un valle a 277 nm, lo que nos habla de que en realidad hay un grado importante de concordancia entre las tinturas analizadas de diferentes laboratorios y como ya se mencionó anteriormente las bandas de 246-261 y 301 nm corresponden a los compuestos activos de la Nux vómica. Las principales diferencias entre los espectros de absorción de luz UV/Vis de distintos laboratorios radican en las diferencias de intensidad de las señales, lo que sugiere diferencia de concentración en los cromóforos de cada una de las preparaciones, o bien la degradación de los mismos posiblemente por oxidación. Esto nos permite sugerir que futuras investigaciones estén dedicadas a evaluar la estabilidad de las tinturas homeopáticas a través del tiempo y en diversos ambientes. Con respecto a la elaboración de las tinturas de Nux vómica se recomienda que los laboratorios muestren mayor vigilancia tanto en la materia prima, como en el proceso de elaboración de los medicamentos para garantizar el éxito terapéutico. La espectrofotometría de luz UV/Vis puede ser útil para verificar el control de calidad de los remedios homeopáticos, ya que ofrece una identificación de compuestos activos (coloreados) precisos del medicamento sometido a esta técnica. 53 Por otro lado se puede concluir que las tinturas utilizadas hace un año y las utilizadas recientemente (vieja y nueva) tienen una preparación bien estandarizada así como de la calidad de la tintura a través del tiempo ya que se comparó la tintura abierta y utilizada hace un año con una de reciente adquisición y prácticamente no mostró diferencia alguna; por otra parte la tintura francesa que demostró un espectro de absorción muy similar a las tinturas nacionales y picos de intensidad en sitios idénticos, lo que nos habla de la concordancia entre laboratorios nacionales como europeos. Lo que resalta la importancia de dicho trabajo pues puede servir a futuras investigaciones como parámetro para el estudio de algunos factores que determinen la calidad de la tintura a través del tiempo o por otro lado factores que disminuyan el espectro de absorción como se ha especulado de sustancias fuertes, calor, radiación, evaporación, etc. 54 11.-BIBLIOGRAFÍA 1- Amic y Coeditores Farmacopea Homeopática de los Estados Unidos Mexicanos. 1998. 2- Chang, R. Química. 9ª Ed Mc Graw Hill 2007. 3- Delgado R. José M. Laboratorio Homeopático. 2007. 4- Demarque D. Farmacología y Materia Médica Homeopática. BOIRON 1997 5- Enciclopedia de las Plantas que Curan. Tomo I, 1984 Brasil. 6- Mendiola R. Farmacodinamia Homeopática. ED. IPN México 1977 7- Morales R. Síntesis de Farmacia Homeopática Farmacopraxia. 2ª ed.2007. 8- Mortimer E. Química. ED Iberoamérica. 1993. México. 9- Planck review. Academia de Ciencias Zaragoza. España 2003 10- Rochin L. 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