tesis-n0883-Hajdu

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Di r ecci ó n:Di r ecci ó n: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. 
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Tesis de Posgrado
Extracción del ficocoloide de laExtracción del ficocoloide de la
Iridea LaminaroidesIridea Laminaroides
Hajdu, Juan
1956
Tesis presentada para obtener el grado de Doctor en Ciencias
Químicas de la Universidad de Buenos Aires
Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la Biblioteca
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Hajdu, Juan. (1956). Extracción del ficocoloide de la Iridea Laminaroides. Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.
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Hajdu, Juan. "Extracción del ficocoloide de la Iridea Laminaroides". Tesis de Doctor. Facultad de
Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. 1956.
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por
JUAJ HM'DU
__/e.r-a" 761/17:
-1956­
Í?
9
Se estudió 1a extracción del ficocoloide de la Iridea lami­
naroides originaria de la Patagonia (Puerto Deseado).
La muestra de algas fué lavada, aecada a 40-45Q C y molida.
5e analizó someramenteel alga, obteniéndose!
Humedad:(por secado al vacío) 7,55 í
Cenizas: (calcinando a 5504) 21,5 fi
bulfato en cenizas! (negfin bcott) 53,4 X
o'uli‘ato total‘ (hidrolizando con ClH
a1 5%) 23,5 í
óacarificables comoglucosa: (según .
Sheffer-ñomogy) 45,0 fi
Fibra cruda‘ (técnica nOAC) 4,3 Z
Nitrógeno: (por Ajeldahl) 2,1 %
¿e investigó la influencia de la temperature sobre el rendi­
miento de las extracciones, hallando que tanto 1a viscosidad de los
extractos comola concentración del ficocoloide (iridoficina) crecía
con 1a temperatura. Por determinación con bencidina, se extraen de
10° g. de alga a
100 80 70 60° C de temperatura
76,8 72,5 72,0 70,6 g. de iridoficina, siendo 1a
viacoa. 19,2. 18,7 17,5 15,8 centipoises, a 25° en ClJa a1
0,2 í.
Las determinaciones indican que en el caso de 1a iridofici­
na la desnaturalización del ficocoloide con la temperatura es poco
pronunciada, muchomenos que en el caso de la Iridea cordata. Se
consideró que a 100° ae podia extraer el ficocoloide en buenas condi­
ciones.
Se procedió a extraer el ficocoloide tratando el alga con
ClNaal 0,2 3 a 1009 C durante una hora, filtrando y concentrando lue­
go los filtrados. be precipitó la iridoficina con el doble volumen
de alcohol isopropílico. ¿e tuvo un rendimiento del 55%.
Se efectuaron algunas determinaciones sobre el iridoricina,
con los siguientes resultados referidos al producto seco.
Uenizaa‘ 21,3 í
sodio en " = 25,3 A
Calcio " " a 6,5 fi
sulfato " " = 54,5 fi
Sulfato total' 26,4 Z
Sacarificables‘ 51,6 5
Nitrógeno: 0,3 fl
Humedad: 7,2 X
Se hicieron algunas reacciones de identificación para gomas
y filicocoides, para caracterizar la iridoficina.
Se estudió la determinación de la iridoficina, aplicando la
técnica de precipitación con clorhidrato de bencidina, valorando el
precipitado con dao“ N710. Se determinó que un m1. de NaQHN/1o equi­
valia a 0,0336 g de iridoficina precipitado: con clorhidrato de benci­
dina al 0,4 fi a pH4,4.
Se construyó un gráfico de las viscosidados en función de
la concentración, para soluciones de Clfla al 0.2 í, a 259 C en baso
de los resultadon de 2,62 5'42 29,9 101,9 centipola para
concentradionoode 0,1 0,2 0,5 0,15 g í.
Bate gráfico fué empleadopara valorar iridoficinn en solu­
ciones.
Los resultados confirman la diferencia entre los extractos de
las Iridoas encanta y laminnroidos, relvindicfindose la denominacióndo
iridoricina para el ficocoloide de 1a Iridoa laminaroides.
9LH<FLCHFE ¿Ehcírw CF C.tacz FFF:
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ELïCCHCL wtf WHCECtCHUtHF.b: bratz... PrFífithc
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Unam owwmw up Úhwuwo mc
toawOH mw ¿GH Ham
vow
(artvL. C.
Ahh)“. .. mxu
Agradezco al Dr. Pedro Cattaneo el haber
patrocinado mi trabajo.
Mi gratitud al Dr. Andrés U. Fortunato por
1a valiosa orientación que supo darme y mi reco­
nocimiento a todo el personal del Laboratorio
del Instituto Tecnológicodel Ministerio de
Comercioe lndustria.
INTRODUCCION
En los últimos años se han efectuado varios estudios sobre
el ficocoloide extraido de la ¡ridea cordata de 1a Patagonia. De ee­
ta manera, se tiene una visión completa sobre la extracción, composi­
ción, estructura, determinación y aprovechamientode este producto.
Junto con la Iridea cordata habita en el litoral patagónico
la Iridea laninaroides. Beta alga ha sido estudiada desde el punto de
vista algológico y quimico en forma parcial, pero todos los autores
trabajaron sobre muestras originqrias del hemisferio norte. En nues­
tro pais no existe trabajo alguno sobre esta especie.
bl objetivo fundamental del presente estudio es dar un proce­
dimiento para la extracción del ficocoloide de 1a ¡ridea laminaroidee,
y extraer el producto a partir del alga patagónica.
Por la ausencia de antecedentes locales sobre el alga, se ha
efectuado su analisis quimico. Tambiénse ha considerado conveniente
hacer algunas determinaciones quimica: y fisicas para caracterizar el
ficocoloide y compararlo con otros trabajos y substancias. Se han
adaptado para este producto técnicas de valoración de ficocoloides,
con el objeto de facilitar las investigaciones posteriores.
Se han reunido aquellos trabajos que fueron consultados pa­
ra encarar los diferentes aspectos de la investigación. Por lo tan­
to, se incluyen en la bibliografia ademásde los estudios efectuados
sobre la Iridea laninaroides, trabajos sobre otros especies de algas.Wes
se considernr‘n algunas cuestiones generales de las algas
con e! fin de ubicar la Iridea laminaroides entre las distintas espe­
cies y establecer sus relaciones con ellas.
Las algas son vegetales del grupo de los Zgllgphztg, dentro
de la cual forman la sección algas, que comprendevarias clases, órde­
nes y familias (1,2).
Existen algas macroscópicasy nicroscópicas. las microscópi­
cas se hallan distribuidas en la parte superior del mar y constituyen
el ficoplancton.
Las algas macroscópicashabitan en la zona litoral del nar.
son plantas de cuerpo vegetativo no diferenciado, que se denominata­
lo. E1 talo está formadopor células clorofilicas que contienen tam­
bién pigmentos de otros colores. 1e_reproduoo16nes sexual y esezual.
Le clasificación de las algas se realiza en general según
el pigmentodominante, las características del talo, la organización
de los 6rg anos de reproducción y el ciclo sexual. La mayoria de las
algas útiles para la economíahumanapertenecen a las clases
Chloroggxceae o algas verdes
Phacopglceae o algas pardas y
- 3 ­
52W 0alzasrojas.
Las algas que se tienen en cuenta en el presente trabajo per­
tenecen a la clase Rhodophyceno,y dentro de las algas rojas, a la fa­
milia Giggrtinnceae. 5on las especies C o ru c u , ¡piden carga­
s; e Iridgg laminaroideg. según diferentes autores (1, 2, 3) ésta úl­
tima se deberia denominar Iridgnglcus flaccidggo En este trabajo se
adoptó el nombreI. lamineroides, porque en le bibliografia local
(4, 5) se la designa asi.Numerosasespecies de algas presentan 1a característica de
contener sustancias coloidales complejas extraibles, llamadas gigggg­
¿gigggg algunos ficocoloides son importantes materias primas indus­
triales (agar, carregenine, elgina, etc.). Las tres especies arriba
mencionadascontienen ficocoloidea de constitución y propiedades seno­
Juntos.
Le Iridea laminaroideg habita en la zona sublitoral superior
de las costas occidentales del continente americano. Tambiénse en­
cuentra en el litoral patagónico. Su talo es corto, ancho, de bordes
ondulados. b‘ncolor varia de marrón oscuro a roJo pnrpúreo. Comoel
nombrelo indiea, es iridiacente.
La gggpggigiág del alga es, según Ellegwood (6)
Humedad! 89,74 7‘
ceniza total! 16,08 f (sobre materia]. secado a 1009)
insóluble! 3,27 ¡6
soluble: 12,81 ii
calcio‘ 0,391 í
sodio: 0,53 fi
potasio‘ 2,34 3
Cenizs sulfatot 3,52 5
cloruro! 1,54 í
fosfato! 0,73 fl
Fibra cruda! 0,706 í
¡odo! 4,32 pnl.
Extracción fraccionada con
fiter de petróleo: 0,1968 S
Cloroformoï 0,1937 5
¡ter etílico! 0,2050S
Alcohol etílico‘ 0,4530 fi
Agua i 86,34 5 extraido
Mori y Tntiys (7) hallaron la siguiente composición para la
Iridea laminaroides‘
Humedad. 10,60 f Cenizas totales‘ 15,50 5
Grlsls‘ 0,66 5 sílice en ceniza' 3,78 5
Mescla de pro­
teinas s 16,28 5 803 46,98 fi
Proteínas puras! 9,99 fi P205 ¡6,41 5
Fibra cruda‘ 0,36 Í M30 6,01 í
So ubles sin ni­
tr gene! 69,205 Cao 9,07 1
¡es camposiciones de las muestras de una misma especie pue­
den presentar fluctuaciones notables, dependiendode la procedencia o
de la época de la cosecha. Los variaciones no han sido estudiadas
en el caso de la Iridea laminsroides. ¡l Chondruscrispus fué inves­
tigado desde este punto de vista por Butler (8).
-5­
“¡todos de extracción del ficocoloidg
ae puedenmencionar dos trabajos que se refieren especifica­
mente a la extracción del ficocoloide de la ¿giggg_jggiggggiggg‘ el
de Haseid (9) y el de Hari y Tutiya (7).
Métodode Hassid: Se eliminó la clorófila del alga con alcohol etíli­
co caliente y ee seco en estufa de vacio a 50°. ¡es algas fueron ez­
traidae con agua varias veces, calentando a baño maría varias horas.
¡1 liquido filtrado fué vertido en etanol al 90%obteniéndose una sue­
peneión lechoea, que fué concentrada a1 vacio. Se tomó con alcohol de
95%, se dejó decantar, se filtró y se lav6 con alcohol de 965 y absolu­
to. 8e secó a 50“ con vacio, obteniendo una sustancia fibroea y blan­
ca que denominóiridoficina.
¡llegwood (6) extrajo el alga en forma parecida y ensayó
otros solventes ademásdel agua. ¡n ¿ter etílico, éter de petróleo,
cloroformo y etanol prácticamente no hubo extracción. Jlill.agua extra­
jo el 86,34 í.
M¿todode Tutizg z Moria consideraron inadecuado el método de Hassid,
debido a que no elimina el nitfógen0.del alga, que pasa luego al ficc­
coloide. Las algas Japonesas presentan un alto contenido de nitróge­
no. El métodoindicado por los autores permite obtener el ficocoloi­
de libre de materia nitrogenada.
Para este extraen con agua en presencia de cloruro de bario
en la preporción de 51 de agua para 100 g de alga. Luegode filtrar
y neutralizar con agua de barita y concentrar, ee agregó acetato de
plomohasta que dejara de aparecer un precipitado marrón. Se filtró
y se precipitó el mucilago con acetato básico de plomoy pulpa de pa­
-6­
pel. Se filtró y ee suspendió el precipitado en agua. Se precipitó
el plomocon ácido eulrhidrico, eliminando luego éste y el sulfuro de
plomo. Se reunieron los filtrados y ee precipitó con igual volumen
de etanol, obteniéndose la sal de bario del ficocoloide. Se redieol­
vió y se reprecipitó tres veces, decolorando con carbón activado. El
producto no contenía nitrógeno. Fué lavado con alcOhol y éter y seca­
do al vacío.
nste método fué aplicado por los autores al ChondrueAcela­
tua y a la Iridea Inminaroidee.
sobre la extracción del ficocoloide de la Iridea Cordata
han trabajado quzati (4), Barón(5) y ¿temita (10).
M¿todo de Luzzati= Trabajó sobre 50 g de alga seca molida. E1 alga
fué lavada con alcohol isopropílico al 8° 5 y luego con agua destila­
da. Se extrajo con 4 l. de solución de cloruro de podio al 0,2 f ca­
liente, agitando y calentando en baño a ebullición durante una hora.
Se agregó pulpa de papel y se filtró a travóe de algodón con vacio,
en caliente. se filtró nuevamentepor papel de filtro, lavando los
residuos. Se concentró a baño maria, con agitación, hasta 400 ml y
ae precipitó con 2,5 volúmenesde alcohol isoprOpilico. Se filtró,
ee lavó en licuadora con etanol, se filtró y se redisolvió en 1,5 1.
de agua. 5a concentró y se precipitó con isoprOpilico. Se lavó con
alcohol y éter, sacando finalmente en estufa de vacio a 60°. se obtu­
vo un producto blanco y fibroso, con un rendimiento del 32 fl.
Luzzati denominóeste extracto "iridoficina extracto standard",
teniendo en cuenta las denominacionesde extracto frio y extracto ca­
liente empleadospor Haas y Hill (ll) para la carragenina.
- 7 ­
Barón empleó la mismatécnica para sus extracciones.
¡studio! de Steinitg s Estudió sistemáticamente las condiciones de ez­
tracción, obteniéndose los siguientes resultadosa
Las viscosidades disminuyen por la presencia de Nacl, como
en el ceso de la carragenina.
La solución acuosa con 0,699 3/1 presenta le viscosidad de
452,7 cpoises, mientras que la salina a1 0,2 í con 0,697 3/1 tiene so­
lamente 93,21 cpoises.
La influencia de le teggeratura sobre 1a extracción fué en­
sayada a 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 y 11°“ C, con la siguiente técni­
cet
1° g de muestra se colocaron en 800 Il. de solución de N891
al 0,2 í calentsda a la temperature de extracción. ñe extrajeron agi­
tando y manteniendo la temperatura en un baño durante una hora. se
separó el liquido por filtración, llsmóndolo1'” extracto. El residuo
de alga-se volvió a extraer con 800 y 400 Il. de solución, obteniéndo­
se asi un 2n y 3° extracto. Cada uno de estos extractos fué pesado y
luego se ies determinó 1a concentración de ricocoloide por viscosidad,
con bencidins y precipitación, previa concentración, según técnicas
que se describirán más adelante. Los rendimientos de las extracciones,
de acuerdo a las distintas determinaciones se dan a continuación (re­
ferido a 10° g de alga seca).
Temperatura Precipitación viscoaidades Bencidina
50 59,64 58, ,
6° 54,58 65,55 62,63
7o 61,88 77.29 73.81
30 61,27 73,68 72,81
90 , 75,38 73,89
100 54,33 82,33
-8­
La consideración de los resultados permitió indicar la ten­
peratura de 70° C comola más adecuada para la extracción. Á layor
temperatura hubo una evidente desnaturalización del ficocoloide. Esta
observación fué confirmada con otras experiencias. Los extractos pre­
parados a temperaturas superiores a los 70° presentaron una fuerte fluo­
rescencia a la luz ultravioleta y la viscosidad disminuyecon la tempe­
ratura. Los factores de conversión en la valoración con bencidina re­
sultaron mayores para el ficocoloide obtenido a 709 que para el obte­
nido e 100°, indicando también una desnsturalización.
¡1 tiempo de gggraccióg óptimo era de una hora, según los
estudios efectuados controlando las viscosidades luego de extracciones
más o menos prolongadas.
En base de estas conclusiones se indicó el siguiente prece­
dimiento para extraer el'ficocoloide de le ¡rifles-Cordeta8 el alga la­
vada, secada y molida se extrae a 709 con solución de Nacl 0,2 5, en
la prOporción de 800 m1. Para cada 1° g de alga. Se filtra el extrae»
to, pudiéndose obtener luego el ficocolide por evaporación o precipi­
tación.
sobre la emtracción de la cerragenina existe une extensa li­
teratura. Algunosprocedimientos se mencionarán a continuación.
Métodode Haas z Hill. El alga fué lavada, sacada y molida hasta pol­
vo fino. Parte_del alga fué extraido con agua destilada fria, duran­
te 12 horas. se separó por filtración y se volvió a extraer el resi­
duo. ISeconcentró a sequedad, obteniéndose el ficoeoloide.
Se extrajo en caliente, en un baño con agua hirviente el­
pleóndoseagua destilada suficiente para dar una solución al 1 Í.
-9­
Luegode nadia hora, se separó por filtración, el residuo se extrajo
de nuevoy los filtredos reunidos se concentraron a sequedad. Se ob­
tuvo 70-75f de extracto hidrosoluble. Bn ambasextracciones obtiene
un producto en forma de hoJuelas, transparentes, semejantes e la gela­
tina.
m¿todode Butler. 20 g de alga lavada fueron extraídas con l lt. de
agua destilada durante 5-6 horas, en baño hirviente. Se filtro y se
concentró el liquido hasta 300nl. Se virtió en un litro de etanol­
95%obteniendo un precipitado fibroao. Se escurrió, se volvió a sue­
pender en etanol 95%, luego en alcohol absoluto y finalmente en ¿ter
etílico. de secó con vacío y se nolió el material (8).
Metodode Prister (24). Se extrajo le carragenina con agua caliente
y se filtró con coadyuvante. Se concentró hasta tener la solución al
103 y se vertió sobre alcohol isopropílico al 91 5. i¡n el volumenfi­
nal conviene que haya un 505 en peso de alcohol. Se separó el preci­
pitado, se desnenuzóy ae sacó con corriente de aire a 50-659 durante
2-6 horas.
Numerosastécnicas se basan en el método de Prister.
“¿todo de Rice (25). Las nuestras lavadas durante 12 horas son extrai­
das con agua destilada durante 6 horas en baño hirviente. b'e separa
por filtración, se concentra, se precipita con alcohol (4 volúmenes).
Se redisuelve en agua, se purifica por diálisis contre agua destilada,
se concentra y se reprecipita con alcohol. Se lava con alcohol y
¿ter y se seca con vacio. Se obtiene un producto blanco, fibroso.
Unavariante de este métodoaparece en el trabajo de Ïoung y
- 10 .
Rice (12), donde luego de la diálisis se lleva a sequedad con vacio
y finalmente con desecador de anhidrido rosfórico.
Éiinfllfli_fl2.5913 (13). ¡ste autor estudió las condiciones de extrae­
eión y sus efectos sobre el rendimiento. Llegó a los siguientes re­
sultados.
F116 en una hora el tiempo de 1a extracción. lo cantidad
extraída aumentaba con la temperatura. A 10og las extracciones eran
satisfactorias, no existiendo necesidad de extremar más las condicio­
nes.
Estudió 1a posibilidad de mejorar las extracciones sustitu­
yendo los cationes en el alga por diálisis. hncontró que 1a presencia
de No31en los extractos disninuia 1a viscosidad de estos (de 50 a 18
centistokes en uac1 a1 0,2 í).
Para las extracciones empleó 100 ¡1 de agua para cada grano
de alga y empleó el método de la precipitación con bencidina para sus
análisis.
La consideración de las diversas técnicas permitió e Barón
(5) agruparlos en métodospor extracción directa y métodos de extrac­
ción con precipitación, según se obtenga el ficocoloide por evapora­
ción a sequedad o precipitación con alcohol.
Propiedades físicas X Quimicas
Hassid fué el primer investigador quien aisló y estudió a1
ricocoloide de 1a ¡rides laminaroides, a1 cual denominóiridoficina.
Los trabajos de Hassid constituyan las únicas fuentes sobre las propie­
dades y constitución de la iridoficina (9, 14).
nu­
ha1ggáligig inorgánico da, según (9):
Uenizas‘ 25,4 fi
Sulfato en cenizass 69,6 í
sodio: 13,6 fi
Calcio: 2,0 f
Magnesiog 2,0 Z
üulfato total! 38,7 í
Hassid comprobóla ausencia de ácidos urónicos y de pentosa­
nos en la iridoficina. Determinóque la iridoficina carecía de propio­
dades reductores, pero tanto los productos de la hidrólisis ácida (sul­
fúrico 0,5 N) comolos de 1a alcalina (hidróxido de bario) son reduc­
tores. Por hidrólisis acido obtuvo 54 fi de ¿alactosao
¡l pHds las soluciones sra 6,5 y al podar rotatorio ¿{1):
+69,2. Las curvas de titulación y ¿o conductividad correspondían a
una sal de ácido débil y base fuerte. Por crioscOpia obtuvo un peso
molecular de 156°.
Con respecto a la cgnstitución Hassid concluyó que se trata­
ba de un sulfato atéreo de la galactosa, pues la relación sulfato to­
tal a sulfato en cenizas es 2‘1. La falta de poder reductor indicó
1a ausencia de grupo galactoss terminal libre. ¡1 peso molecular por­
mitió concluir quo 1a molécula contiene sais unidades galactosa. Por
adición de dos acstilos por unidad ¡alactosa dadudola presencia de
dos hidroxilos libros.
Los ficocoloides de la ¡ridaa Cordata y del ChondrusCris.
pus presentan semejanzascon la iridoficina. Luszati (4) al aislar
el ficocoloide de la Iridso cordata lo denominótambién iridoficina.
-12­
Barón (5) consideró que las dos "iridoficinas" son distintas sustancias."
E1 análisis del ficocoloide de la Iridee cordata dió!
Cenizas: 21,83 5
aulfato en cen123362,0 5
Sodio " " 26,0 í
Potasio " " 7,6 5
Galactoaai 49,3 í
Sulfato totai: 29,55 fl
Nitrógeno: 0,26 5
Este ficocoloide también es un sulfato etéreo de 1a galacto­
ea, pero su semejanza con 1a iridoficine de Bassid serio solamente cua­
litativa. Se puede extender esta observnción'a la carragenina, fico­
coloide del Chondruscrispus. SegúnButler (8) el análisis es, para
una muestra de alga!
Cenizas: 19,14
sulfato en cenizas| 58,74
Calcio " " 3,68
Potasio " " 11,99
Sulfato total' 28,38 fl
Nitrógenoi o,“
53 de destacar que Butler comprobónotables variaciones en
el análisis de los extractos de algas de diferente origen.
Buchanan,Percival y Percival (15) indicaron que el extracto
caliente (HE) del Chondrus contenía un 36.9 5 dc galactosa, además de
otro polisacárido formadoposiblemente por glucosa.
- 13 ­W
Aníligigdgla IrideaMae;
Se trabajó sobre una muestre de alga seca, cosechada en la
playa de Puerto Deseado, el 18 de febrero de 1954.
P 1 d ‘ lyrouimadamente 750 g del alga fueron lava­
do. rápidamente con abundante agua corriente para eliminar sales y
arena adheridas a la auperficia. las algas lavada: ae dejaron secar
a1 aire durante 4B horas. Be completó el aecado en estufa a 40-459,
hasta que laa hojas hubieran adquirido un estado quebradizo.
Se molió 1a muestra en un molino de diacoe. una porción de
25 a. ae nolió en molino de holaa hasta reducirla completamentea un
polvo impelpable. sobre esta última muestra ae llevaron a cabo loa
análisis. Para loa trabajos de extracción se empleóel alga desinte­
grada en el molino de discos.
Egggggg¿ Se determinó manteniendo 1a nuestra a 60° C en una estufa de
vacío durante 24 horas, y luego hasta constancia de peso. Se obtuvo
unvalor de 1,53%.
Con este valor de la humedadee corrigieron todas las deter­
minacionea, refiriendo loa resultados a la muaatra seca. ¡1 alga ea
higroacópica, por lo cual no ae puede mantenerla completamente sin hu­
madad.
Eggiggg. 5 g. de la muestra ae calcinaron en un criaol de platino en
mufla a 550°, durante 30 minutos y luego hasta constancia de peso. 21.55
-14­
Sulfato en cenizas, Disolviendo 0,75 g de cenizas en ¡El al 20 S, se- ­
gún el procedimiento indicado por Scott (16)
so obtuvo 53,4 fi quoreferido al alga, correspondeal Mi .
Sulfato on el ale. Se hidrolinrm 2 g. de mostra conEl el 55
durante 5 horas. ¡n el filtrado ae doterninó el sulfato segúnlas tio­
nicaacommon.M.
Sacarificablol. Se hidrolizó l g de muestra con El al 2,5 5 hirvien­
do 3 horas. En el filtrado oe determinaronlos ncnrificablu según
el métodode Shine-Samoa (17), upreúndoloo cano galactoon. 16.2!
M. Se empleóla técnica indicadapor el 40M:(18) efectuan­
doiunadoblehidrólisis ácida y alcalina sobre l g. de la mostra. m
lutrógeno. Se determinóusando lo técnica do Ham, sobre 2 g. do
mestre. .1­
Diocusión. Los resultados de ¡11W (6) y Tntiyn y MIoripara lu
cenim son notablemente menoresque en el presente análisis) 16,08 5
y 16,28 í respectivamente. Se debo tenor en cuento que el análisis
de la. algas (y de los fieocoloideo) puede variar notablemente según
el lugar y la época de su cosecha. Barón (5) para la Iridea carente
cosechada en la mimo región obtuvo 22,0%de cenizas.
¡l análisis de las cenizas de la Iridoa leninnroides del nio­
moorigen pero distinta concha, según una canunicación privada, oo‘
-15­
Cenizas! 19,6 fi
Caos 6,98 fl
“80‘ 10933
¡hp s 9,63
mazo a 15.24
803: 23,6
P205 1,67
Cl' vestigio
Extracción del ficocoloide
Se consideró necesario efectuarun estudio sobre cuales eran
las condiciones óptimas para la extracción, antes de decidirse por la
adopción de alguna de las técnicas conocidas. varios autores (11,13)
han señalado que las caracteristicas y 1a composiciónde los extractos
del Chondruscrispus varían con le temperature a la cual se efectúa
la operación. Steinits (1°) llegó a la conclusión que a temperaturas
superiores a los 80“ el ficocoloide de la ¡ridea corúata sufría proce­
sos de desnaturalización, indicando los 70° comotemperatura óptima pa­
ra la entracción. Para le ¡ridea laminaroides no se encontró litera­
tura sobre este problema.
¡studio de las condiciones, Para este estudio se tuvieron en cuenta
los trabajos de Rose (13) y Steinitz (10). Se extraJeron porciones
iguales de alga a temperaturas crecientes y se determinóla iridofici­
na extraída en cada caso.
5 g. de alga molida y seca fueron lavados con alcohol iso­
-16­
propilico caliente para eliminar sales y pigmentos. se decantó el al­
cohol y se lavó rápidamente con agua fria. se colocó el alga en un
baño de agua a la temperatura del emperimento (59,60,7°,80 y 90' C)
con 490 Il. de solución de NaClal 0,2 1 caliente. Se extrajo durante
una hora, con agitación mecánica y temperatura constante. se filtró
con vacio por algodón prensado. ll residuo ae volvió a extraer del
mismomodoque anteriormente, filtrando por el mismofiltro de algo­
dón. ¡1 residuo fue lavado sobre el filtro con 20° nl. de salmuera
caliente. Se reunieron los extractos y se los filtro por papel de
filtro de poro grueso. Se obtuvoun filtrado verdoso transparente,
que se llevó a 1 litro en un matras.
le cantidad de ricocoloide extraído se determinó por medidas
de viscosidad y por precipitación con bencidina. Nose efectuaron de­
terminaciones por precipitación con alcohol, por dar este métodore­
sultados imprecisos.
Se determinó lavvisoosidad del filtrado a 259 C. k1 dato
obtenido fué llevado sobre la curva de calibración correspondiente,
que se reproduce másadelante. Para tener mayorprecisión los resul­
tados de 80 y 100° se refirieron a una curva de viscosidades construí­
da con extractos a 1009 y los de 70, 6° y 50° a una de 70?.
Sobre porciones de 50 al se determinaron las concentraciones
del ficocoloide con clorhidrato de bcncidina, según la técnica indica­
da másabajo. Se valoraron los precipitados con NaOBN/lo, utilisín­
dose para el cálculo factores de equivalencia determinados con extrac­
tos a 1009 y 70° respectivamente.
-17­
Iridoficina extraída de loqggrgpos de alga.
Temperaturade Ficocoloide deter- Ficocoloide deter­
extracción minadopor viscosidad minado con banci­
dina ‘
100° C aa S 76,8 71
a. 81 72,5
70 76 72,0
60 71 70,6
50 71 _
AFaco( ch“?­
fis,t.0_é.;.€¡id a
o . U 'sa
y / bands“;
n. 1 4.——L c
1'60 7:0 ¿,0 (¡o 400 t C
D1scusión. Los resultados de las extracciones indican que las canti­
dades de ficocoloide extraídas aumentancon 1a temperatura.
¡G.consideración de los resultados indica que existe cierta
desnaturalización de 1a iridoficina a 100°. La curva de las determi­
naciones por bencidina crece más rápidamente que la curva de viscosida­
des, svidenciando un incremento desproporcionado de los grupos sulfa­
to libres. otros resultados, que se detallan másadelante, tambiénin- ‘
-18­
dican una descomposición. ¡1 ficocoloide obtenido a 70° produce solu­
ciones más viscosas que el producto obtenido a 10°”. Así, una solu­
ción de 0,5 g en solución de Clic al 0,2 5 e 25' da en el primer ceso
una viscosidad de 35,5 centipoises y en el segundo, 29,9. Los facto­
res de equivalencia de la bencidina confirman le observación! l nl.
de flaafl 0,1 N equivale a 0,0336 g de eltracto de 100° y a 0,03u2 i
de extracto de 709. Por lo tanto en el extracto de 100' hay más gru­
pos sulfato libres que en el de 70°.
Estos mismosresultados indican que el proceso de descomposi­
ción de ningún nodo puede ser avanzado, ya que las propiedades de la
iridcticine se modifican poco. Esto se hace mas evidente si se compe­
ra con .1 ficocoloide de la Iridea cordato. SegúnSteinits (10) los
resultados de las extracciones son!
Temperatura 60 7° 8° 90 10°n C
por viscosidad 65,55 77,29 73,68 75,33 54,33 g/100 g o;
Si
cm 73.8172,8173,8 n a
Se observan a los 100€ las consecuencias de un brusco proce­
so de descomposición. Los factores de equivalencia para la bencidina
son e 70 y 909 respectivamente, 0,03728 y 0,03528.
Resumiendo= se considere que la descomposición de la irido­
ricino a 1009 es poco intensa, muchomenor que para la I. cordata.
¡e posible extraer la iridoficinn a 100gsin que sufra un
deslejoramiento en sus propiedades másútiles.
2226n64áq"Qe;_222922;2¿21.se extrajo la iridoficinn a dos temperatu­
rasa 1°og y 70° C. Le mayor porte del extracto se obtuvo a 1009, si­
- 19 ­
guiando la técnica utilizada por Luzaati (4). 3a determinaron las ca­
racterísticas de este producto, a afectos de compararloscon los datos
de la literatura. una pequeñacantidad de iridoficina fué extraída a
70?, da una manera semejante, para obtanar algunos datos sobre esta
extracto (viscosidados y aquivalancia para la bencidina).
nggadimiensg. 5o g. de alga sa trataron con alcohol isopropílico sl
80%a ebullición para eliminar pigmentosy salas. 30 escurrió .1 alco­
hol, ae lavo rápidamente con agua. Se extrajo con 4 lts. de solución
de Clfla al 0,2 fl a baño maría hirviendo durante una hora. Se oscurrió
sobre un tamiz de 100 mallas con succión, reservando al residuo para
una segunda extracción.
El líquido obtenido ara verdoso y turbio. Fui purificado
por filtración an calienta por tala, con succión y con la ayuda da
amianto molido. 50 mantuvo calienta al embudocon ayuda da una lámpa­
ra de rayos infrarrojos. Posteriormente sa pasó al filtrado por cua­
druplc papal de filtro. Se lavaron Los residuos con agua calienta.
Se obtuvoun líquido claro, algo verdoso, transparente.
Se concentró a baño maría, con agitación continua, hasta rc­
ducir al volumena un litro. Sa filtro al ficocoloide agregando3 li­
tros de alcohol iaopropilico an frio, con fuerte agitación mecánica.
Se separó el precipitado sobre un tamighde 250 mallas. El residuo
fué desmanuzadoan una licuadora con 1 litro da alcohol iaopropilico.
Se filtró por tela, con ayuda de vacío, y aa lavó con alcohol. 30 ra­
diaolvió en agua (400 nl) y se reprecipitó con alcohol isopropílico.
Se filtró nuevamentepor tala, lavando con alcohol y luego con atar.
Se sacó la iridoticina an estufa de vacío a 45°.
- 20 ­
¡1 residuo de 1a extracción fue tratado con 1 litro de solu­
ción salina al 0,2 f a 1009y 1o trituró en licuadora. Se filtro por
tela y posteriormente por cuadruple papel de filtro. Se obtuvo un
liquido verdoso transparente que se concentró y luego se precipitó con
alcmol isopropílico.
Se obtuvieron en 1a primera extracción 3542 g (51,4 5), y un
1a segunda extracción Lg; g (3,9 fi). l¡1 rendimiento total fué del
¿549.75­
Una extracción previa efectuada sobre 10 g de alga- con le
mima técnica rindió 5,5 g de iridoi‘icina (ggj)
- 21 ­
C a r d f o
Anfilieie Quimico. La iridoficina obtenida e 100n según el procedimien­
to descripto, fué molido en un molino de discos. sobre esta muestra
se hicieron las determinacionesanalíticas.
Humggg. Se mantuvo la muestra en estufa de vacio a 45" durante 24 ho­
ras, luego de lo cual se obtuvo constancia de posO‘2.;2 5. con este
daato de 1a humedadse corrigieron las demásdeterminaciones refirién­
dolas a1 ficccoloide seco.
Cenizag. sobre 5 g de muestra se obtuvieron las cenizas a 550° C. Co­
moel producto se hinchaba al calentarse, se lo cerbonizó con cuidado
a la llama! 21,3¿5 .
Análisis de las cenizas. Se disolvió 1 g de cenisas en CiN 1'5, 11.­
vando luego a 500 nl. para tener una solución de 0,2 ng/hl de concen­
tración, comolo indica scott (16). Score esta solución se determinó.
Calcio. Sobre 100 m1. de 1a solución, por precipitación con oznlsto
de amonioy titulación con permanganeto de potaeio 0,1 N, según Trend­
well Han (19). 6.; fiSodio: sobre 20 ml. de solución, por el métododel triple acetato, se­
gúnScott (16) mi ,
Se encontraron ademásvestigios de potasio, magnesio y his­
rra.
figigatog. Sobre 100 m1por precipitación comosulfato de bario, según
Scott. 5425 fl (12,5 fl referido a1 ficocoloide)
Se comprobóle presencia de fosfatos y vestigios de cloruroc.
sulfato total. Por hidrólisis ácida, comoel ceso del alga, según Lu»
zznti (4) 39,4 i.
Sacarificables. Se siguió 1a mismatécnica que en el caso del alga,
ezpreséndolos comogalactosa g;¡6 5 .
Nitrógeno. Según el método de ndeidahl, sobre 2 g de muestra‘ 0,33 3
Reacciones del ficocoloide. Con el propósito de caracterizar y compe­
rar la iridoficina, se ensayaron las reacciones indicadas por Jacobo
y ¡arto (20) para la identificación de ganas, las que fueron unadae
por Luzzati (4) para el ficocoloide de la Iridea cordata. ¿e proce­
dió agregando 2-3 gotas de cada reactivo a 5 mi. de una solución de
iridoficinn a1 0,8 í.
Reactivo de Stokes Leve elpesamiento
Benctivo de Hillon Opalescencia con precipitado
fino
Acetato de plano neutro a1'20Ï Espesamiento; con un exceso
opalescencin
Acetato básico de plomo Precipitado flocolento volumi­
nooo
cloruro ferrico a1 55 Precipita en frío; hirviendo dí
precipitado rojo, fibroso
Hidrózido de potasio a1 10% Ge11r1ca
-23­
2 volúmenes de acético ¡speaamiento
Precipitación alcdhólica 63 m1. de etanol producen un
(para 20 m1. con agitación) precipitado fino que gelifica
al centrifugar.
Tambiénse ensayó a la microreacción de tinción indicada por
Jacobs (21), que se lleVa a cabo sobre el precipitado alcohólico. B1
reactivo se preparó agregando 10° nl. de solución de cloruro de zinc
al 62% 10 g de ioduro de potasio y 0,15 g de iodo. Se tiñó un trozo
del precipitado sobre un portaobjetos. A simple vista se observó una
coloración débil, mientras que con un pequeño aumentose distinguian
netas manchaspardas diseminadae en el precipitado.
P i itaci d termi c 6 d r c o d c ci .
Noee encontró antecedente bibliográfico alguno referente al
dosaJe de 1a iridoficina en sus soluciones, La necesidad de disponer
de algún procedimiento para estudiar las condiciones de extracción hi­
zo que se enaayara la precipitación con bencidina, utilizada para la
carragenina y para el extracto de la Iridea cordata.
La precipitación de los grupos sulfato de la carragenina con
bencidina es 1a hace del método de Russell Welle para determinar ca­
rragenina. La precipitación con clorhidrato de bencidina es específi­
ca aún en presencia de pectinae y gomaerébiga. Haas y Russell Helle
(22) disolvian el precipitado en caliente y valoraban 1a bencidinn
con caen 0,1 N. Determinaron que el factor de conversión es pare l
nl. de flaOH"/10, 0,0324 g de cerragenine.
üteinitz (10) halló en el caso del extracto de la Iridea
cordata resultados que indicaban que las condiciones de precipitación
-24‘
no eran satisfactorias. ¡1 precipitado filtraba y decantabanal y el
filtrado no quedabalibre de ficocoloido. Determinóque la precipita­
ción óptima ocurría a pH4,4. Indicó para su extracto un factor de
equivalencia de 0,03728.
Para 1a iridoficina se procedió a ensayar primero la precipi­
tación directa sin condicionar el pu. Se obtuvo una suspensión de r1­
brillas que no decantaba, que no se dejaba filtrar y que obstruia loa
poros. Al regular el pHde acuerdo con la técnica de Steinitz se ob­
tutieron precipitados que filtraban bien y los filtrados no contenían
ficocoloide. se efectuaron las determinaciones de acuerdo a 1a tecni­
ca indicada por Steinitz, que es la que sigue (lo):
" Se mide o se pero un volumen de solución que contenga apro­
ximadamente 0,2 g de ficocoloido que se diluye con 100 m1. de agua dos­
tilada en un vaso de 500 ml. So deja reposar 20 minutos. Se agregan
4 a. de acetato de sodio y un nl. de ácido acético glacial. Se agita
y se agregan 1° nl y luego 140 nl de solución de clorhidrato de benci­
dina a1 4 o/oo. Se filtra entoncespor crisol filtrante (sin vacio)
y se termina con succión, si es imprescindible.. Conayuda de las a­
guas madres se hace pasar todo el precipitado al crisol. se lava con
4 porciones de 2 nl de agua destilada. Se pasa el crisol a nn vaso de
precipitados de 50° y se agregan 250 nl de agua destilada. Se calien­
ta en bañomaria con agitación intensa. Si no se dispersara el preci­
pitado, se agrega una cantidad medida (de la bureta) de NaÜH0,1 N.
boguir calentando y agitando. Agregar Naaflagitando hasta disolución
y viraje de la fenolrtaleina. ¡1 agregadodebe ser lento ".
“Preparación del reactivo! oe pesan 4 g de clorhidrato de
bancidina, se empastancon 1-2 nl de agua hasta hacerla una pasta.
Agregaragua, llevarla a l litro. Dejar una noche, filtrar por papel
Nettnan N9l. Guardar en frasco oscuro".
“Si se dispone de bencidina base, pesar 2,88 g, moler, agre­
ger 1/2 1. de agua y 2,79 Il. de C13cone. en un vasito. Seguir cano
mín arriba ".
20° mgde iridoficine extraída a 10°? precipitado. en le for­
me indicada consumieron 5,88 y 5,95 nl de No03N710. E1 factor de e­
quivalencia es para este extracto 0,0336 ¡lil "¡03 Nllo.
Para el ficocoloide obtenido a 70° ee sectaron 5,80 y 5,86
nl. ¡1 factor de equivalencia es 0,0342 g/nl.
Magen- M- "nasolucióndeficocoloidoa1
4 5 gelifica a temperatura ambiente. La solución el 3 5 no lo hace.
¡1 gel e 4 í es blando, no tiene la rigidez de un gel de
agar. La gran viscosidad de las soluciones hace muydificil la dis­
tinción entre la solución y el gel. Para indicar que la solución de
4 í gelificó, se utilizaron las siguientes observeeiones‘los trozos
mantienen su forma, no mojan las paredes y las superficies son fibro­
“se
Xiggggigg_. Uña solución acuosa al o,1 5 tienea25n C la viscosidad
de 9,92 ggntipoiggg, Las viscosidades crecen notablemente con la con­
centración, haciendo muyimpreciees las determinaciones.
E1 agregado de Ulda a las soluciones disminuye fuertemehte
la viscosidad. Uñasolución de 0,1 g de iridoficina en 10° nl de eo­
lución salina a1 0,2 í tiene 2,62 centipoieee.
-m­
Deterzninaciónde la iridoficina por viscosimetria. 8e puede usar la
viscosidad para controlar en forma rápida y cómodala concentración
de los extractos (lo). Para esto se debe construir previamente la cur­
va de las viscosidades en función de la concentración, y referir luego
sobre esta curva laS'determinaciones de viscosidad.
ComO'laspropiedades de los extractos pueden variar según las
condiciones de extracción, se han construido dos curvas de referencias!
una con el extracto de 1009 y otra con el de 70°.
Cantidades conocidas de iridoficina fueron disueltas en so­
luciones de c1maal 0,2 í con calentamiento y agitación. 3o las ter­
mostatizó a 25°, dejandolas reposar para eliminar las burbuJes durante
una hora. Se determinó la viscosidad a 25g C con un viscosimetro de
0stuald. Le.segunda determinación era en general menor que la prime­
ra, por lo cual en general se tomó comobuena la primera determinación.
La constante del viscosimetro se determinó con una solución de glice­
rina de densidad conocida. Las densidades de las soluciones fueron
determinadas con picnómetro. Para determinar las concentraciones de
la iridoficina en los extractos, se procedió de formaparecida.
Ficocoloide de 100° C
Concentración o,1 0,2 o,5 0,75 g Í
viscosidad 2,62 5,42 29,9 101,9 centipoises
Ficecoloide ge 29°
Concentración 0,2 0,3 0,5 0,75 g í
viscosidad 7,55 9,39 36,46 132,9 centipoises
Í . /
LZJCOJ/Q/«ldeí 214 [Hná/bn ¡[c/Du
(0/766/7 5/102Cía/765.
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-27­
Determinaciones sobre los extractos
Temperatura de extracción 1oo 80 70 60 50° C
viscosidad 19,24 18,66 17,51 15,80 15,80 centi­
peine.
Iridoficina extraída 88 81 76 71 71 3/100 ­
g/alga
Las viscosidades de los extractos fueron referidas a le cur­
va correspondiente: la de 1009 para las extracciones a 80 y 100° y la
de 70° para las restantes.
Entre las observaciones fisicas se puedemencionar que los
filtrados de las extracciones a 70 y 100° presentan una ggggrggg¿glng­
¡ggggggig a la luz ultravioleta. Según Torcat (23) la Iridea corde­
te daba extractos muyfluorescentes a 100°.(MW
gggzggggigg Ficgggl, 1, cargas; Ir;dggic;gg
det. ¡uzmti Luzzati Barón Haasid HaJdu
Sacarificables 46,4 42,2 49,3 53,2 51,6 5
Nitrógeno - - 0,26 - 0,33 X
sulfato total 29,05 30,9 29,55 - 25,8 í
Cenizas 21,05 21,3 21,8 25,4 21,3 5
Su1r.cen1zas .- 51,5 62,0 69,6 43,5 í
Ja en " - - - 26,0 13,5 25,8 ió
Á " " .. .- 7,6 .- .­
Ca " " - .- - 2,0 6,5 í
Mg u n .- __ .. 2,0 .­
Discusión.
Segúnel análisis la iridoficina es un sulfato etéreo, sa­
lificado parcialmente con sodio y calcio. nista observación está de
acuerdo con los resultados de Hassid (9) solamente en el aspecto cun­
litativo. Del mismomodoque para el alga, las proporciones de los
distintos constituyentes varian notablementeen el presente caso.
Se puede atribuir este hecho a varios factores. Hay eviden­
cias que los ficocoloides tienen propiedades de intercambio iónico;
por esta razón, la presencia de Clüa en la extracción pudo influir so­
bre la composición. 5e debe tener además en cuenta las variaciones
de las algas y sus extractos según origen y época de cosecha.
. Desde este punto de vista son sugestiVas algunas semejanzas
entre la iridoficine y el extracto de 1a Iridea cordata, provenientes
ambas de algas cosechada. en Puerto Deseado. Comose mencionó en la
parte bibliográfica, Barón (5) determinó 21,8 fi de cenizas con 26,0%
de sodio para su ficocoloide; aqui se hallaron 21,3 í de cenizas con
25,8 76de sodio.
E1 análisis confirma 1a conclusión de Barón que los ficoco­
loides de las Iridees cordata y laminaroides son substancias distin­
tas. El ficocoloide de 1a Iridea cordate está salificado con sodio y
potasio, no centeniendocalcio. ¡e iridoficina, por el contrario,
contiene calcio y carece de potasio. Las reacciones ensayades para
caracterizar la iridoficina apoyantambién esta afirmación. Luzzati
(4) halló para su extracto, que él denominó"iridoficina" las siguien­
tes reacciones.
Reactivo de Stokes leve espesamiento
Reactivo de Millon opelescencia con espesamiento
Acetato de plomo neutro al 20% espesamiento pero no precipitado
-29­
Aoetato básico de plomo precipitado floculento voluminoso
cloruro férrico al 5“ precipita en frio y en caliente
da precipitado rojo vol.
Hidróxido de potasio a1 10% gelifica, no muchaconsistencia
2 volúmenes de acético espeaamiento
Precipitado alcohólico precipita con 88 m1de etanol.
Le tinción con e1 reactivo oloroyodozincico apenas eoloreó
el ficoooloide de la ¡ridea cordata mientras que la carragenina y la
iridoficina tomancolor marrón.
SegúnTorcat, el ficoooloide de 1a Iridea cordata no gelifi­
ceba ni aún a altas concentraciones; para formar geles sustituyó el
sodio del ficocoloide por Mg, Ba, Ce o ñ. La iridoficine posiblemen­
te debe sue mejores propiedades para la gelificación a la presencia
de Ce en su molécula.
Ademásde este: diferencias, el distinto comportamiento
de los dos extractos frente a la temperatura permite afirmar que se
trata evidentementede dos sustancias distintas, y serie incorrecto
denominar"iridoficina" al fioocoloide de la Iridea cordata. Se rei­
vindica la denominaciónde iridoficine para el extracto de 1a Iridee
lamineroidee, por razones de prioridad y por ser esta denominación,
corriente en 1a literatura. ¡1 ChemicalAbstract. empleael tirmino
“iridophycin” para designar este ficocoloide.
-30­
CONCLUSIONES
ba estudió la composición de la muestra de Iridea laminaroi­
des proveniente de 1a Patagonia, encontrándola diferente a los datos
consignadospor la literatura.
be investigó la influencia de la temperatura sobre las ope­
raciones de extracción del ficocoloide, estudiando su rendimiento y
propiedades. ¡l mejor rendimiento se tuvo a 100° C, mostrando los ex­
tractos minimos signos de descomposición.
Se extrajo el ficocoloide del alga a 100° C, en presencia de
0,2 Z de Ciiia, obteniendo un rendimiento de 55 g de iridoficina por
100 g de alga.
Se estudió analiticamente el ficocoloide, hallando su compo­
sición diferente cuantitativamente a los datos indicados por Haasid
(9), quien empleóun procedimiento distinto de extracción.
Se efectuaron sobre la iridoficina algunas reacciones de
caracterización y determinacionesfisicas.
be aplicó a la iridoficina la técnica de dosaje de ficoco­
loides por precipitación con clorhidrato de bencidina, valorando el
precipitado con JaÜH. b'e determinó que 1 nl. de NaOHN/l0 equivale a
0,0336 g de iridoficina extraída a 100° C.
Se puso a punto para este ficocoloide al método de valora­
ción de soluciones por viscoeimetria, construyéndose los gráficos de
referencia correspondientes.
Se compararonestos resultados con los valores obtenidos pa­
ra el ficocoloide de la Iridea cordata, confirmandola observación de
que se trataba de dos sustancias distintas. b‘econsidera que con el
término “iridoficina” se debe designar exclusivamente al ficocoloido
de la Iridea cordata.
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
(7)
(8)
(9)
(10)
(11)
(12)
(13)
(14)
(15)
(16)
(17)
(18)
(19)
(20)
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(24) dice - Lan. J. Research, 24 ü, 2U, 1946
k25) alggander J. o bolloid Dhemistry o ¡omo V1. üd. 1946
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Consideraciones generales sobre las algas
Métodosde extracción del ficocoloide
Propiedades físicas y químicas
PMTL‘, ¿”Mi L'EHI'ÁLL
Análisis de la Iridea laminaroides
Extracción del ficocoloide
lEstudio de las condiciones de extracción
Caracteres físicos y quimicosdel ficocoloide
CONCLUüIOJuB
BIBLIIA
Pág.
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31
	Resumen
	Portada
	Introducción
	Antecedentes bibliográficos
	Parte experimental
	Conclusiones
	Bibliografía
	Índice