012 Teorico ENZ-multiples sitios - Marianela Bella

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CINÉTICA ENZIMÁTICA
ENZIMAS CON MÚLTIPLES SITIOS CATALÍTICOS
INDEPENDIENTES COOPERATIVOS
S S
S S
+ -
E
S
S
+
Ks kP
+ P
ES E
+
S
S
Ks
kP
P
+
E
SE
+
kPS aKs
+ P
S
ES
+
S S
S
kP
aKs
S
P
+
SES
SE
Ec. 1: Constantes de disociación: 
Ec. 3: Balance de conservación de masa:
Ec. 2: Ecuación de velocidad: 
Reemplazar   en función de E según Ec. 1
Reemplazar   en función de E según Ec. 1
Vmax
a = 1 SITIOS INDEPENDIENTES
SITIOS INDEPENDIENTES CINÉTICA MICHAELIANA
[S]
v HIPÉRBOLA
a ǂ 1 SITIOS COOPERATIVOS
E
S
S
+
Ks
ES
+
S
S
Ks
SE
+
S
aKs
+
S S
S
aKs
SES
a Ks << Ksa << 1 SESCOOPERATIVIDAD POSITIVA
Ec. 1: Constantes de disociación: 
Ec. 3: Balance de conservación de masa:
Ec. 2: Ecuación de velocidad: 
Reemplazar SES  en función de E según Ec. 1
Reemplazar SES en función de E según Ec. 1
v
S
Vmax
𝑚𝑎𝑥ECUACIÓN de HILL
n = nH
nH > 1
Respuesta hiperbólica
Cinética Michaeliana
𝑣 = 
𝑉 . 𝑆
𝐾𝑚 + 𝑆
Respuesta sigmoidea
Cinética NO Michaeliana
1/v
1/S
v
S
K´ = a.Ks2 dímero
K´ = a3.b2.c.Ks4 tetrámero
Respuesta sigmoidea
Cinética NO Michaeliana v
S
Vmax
a = 0,8
a = 0,2
a = 0,05
Vmax
2
S0,5S0,5S0,5
= Ks
v
S
Vmax
Ks = 100 M
Ks = 25 M
Ks = 5 M
Vmax
2
S0,5S0,5
= a
𝑚𝑎𝑥ECUACIÓN de HILL
LINEALIZACIÓN de la ECUACIÓN de HILL
Transponer términos
Aplicar log
𝑚𝑎𝑥
log
𝑣
𝑉𝑚𝑎𝑥 − 𝑣
log 𝑆
n
log 𝑆 . = 
log 𝐾´
𝑛
 
a ǂ 1 SITIOS COOPERATIVOS
a Ks > Ksa > 1 COOPERATIVIDAD NEGATIVA
1/v
1/[S]
Respuesta hiperbólica
Cinética Michaeliana
Respuesta NO hiperbólica
Cinética NO Michaeliana
v
v
[S]
[S]
𝑚𝑎𝑥 0 < nH < 1
MODELO de 
MONOD, WYMAN y CHANGEAUX
SIMETRÍA CONCERTADA 
MODELO de 
KOSHLAND, NEMETHY y FILMER
INTERACCIÓN SECUENCIAL
Lehinger, 3rd Ed
Nelson, D.L., Cox, M.M.
RESUMEN
Enzimas con múltiples sitios catalíticos
INDEPENDIENTES
COOPERATIVOS
[S]
v
Respuesta hiperbólica
Cinética Michaeliana
v
S
a < 1
COOP. +
nH > 1
Cinéticas NO Michaelianas
sigmoidea
a > 1
COOP. -
0 < nH < 1
v
S