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DNA, Replicación y Reparación
El proceso de replicación del dna se produce tanto en células eucariotas como procariotas y el principal objetivo es el aumento en el numero de células, es el mecanismo que permite la proliferación celular.
En el caso de las células procarionte la replicación del dna fundamentalmente involucra al nucleoide (unico cromosoma que se dispone en forma circular única molécula de dna), no esta asociado a proteínas de tipo histona o cromosomicas no histona pero si esta asociado a proteínas relacionadas al proceso de replicación y transcripción. La replicación del cromosoma procarionte da lugar a la duplicación del cromosoma y a la formación de dos células hijas por mecanismo de fision binaria
En el caso de los eucariontes la replicación ocurre en los cromosomas localizados en el núcleo celular, la replicación de las moléculas de dna que forman los cromosomas ocurre en la fase S del ciclo celular eucarionte. La duplicación de las moléculas del dna se acompaña también de la síntesis de las histonas y de las proteínas cromosómicas no histonas, junto con algunas variantes de histonas. (en la fase S el proceso mas importante es la duplicacon del dna pero no es el único proceso que ocurre. 
Principales caracteristicas de la replicación del dna:
La replicación se caracteriza por ser un proceso semiconservativo, ocurre en sentido 5’-3’. El dna es la biomolecular responsable de la información génica consecuentemente debe la célula hija recibir la misma información que la célula madre que la origino por lo tanto durante el proceso de replicación no pueden cometerse errores. Desde el punto de vista energético la replicacion es costosa para la célula, consume moléculas de ATP. Fundamentalmente el responsable macromolecular que dirige el proceso es un complejo macromolecular multiproteico denominado REPLICOSOMA. 
SEMICONSERVATIVA: Se cultivan células procariontes con medio de cultivo que se suplementa con sales de amonio marcada con un isotopo N-15, estas sales van a ser utilizadas para la síntesis, por parte de las bacterias de sus respectivos nucleótidos los cuales van a ser incorporados a las moléculas de DNA. Una vez que todas las bacterias cultivadas realizaron sucesivas divisiones incorporando nucleótidos marcados con el isotopo 15 las sales de amonio van a ser reemplazadas por otras sales de amonio marcadas por el isotopo N-14 (para realizar el cambio de sales centrifugamos las bacterias sacamos las primeras sales, lavamos el pellet y reemplazamos el medio con las segundas sales). Observamos una molécula de dna con todos los N-14 y una moléculas de dna con todos N-15, pero también observamos otras dos moléculas de dna con una cadena de N-14 y una de N-15 (híbridos). Si la replicación fuera de tipo conservativa obtenemos que la molécula de dna completa con N-15 se preserva como tal y se obtiene una nueva molécula completamente sintetizada a partir de nucleótidos marcados con N-14, si la replicación es semi conservativa una de las hebras del N-15 va a servir de guía para la duplicación, entonces se obtiene moléculas de dna hibridas (una hebra parental y una recién sintetizada). Para analizar esto se hace atraves de centrifugación de densidad en gradiente de densidad (se utiliza cloruro de cesio), las bandas que los distintos radioisótopos generan están en diferentes concentraciones, la de N-15 estara mas abajo y mas arriba estará la de N-14. Abajo del tubo aparecen los dna completamente con N-15, en el medio los híbridos y en la supericie los completamente sintetizados con N-14. En el ensayo se obtiene que la división es semiconservativa. (en la actualidad el ensayo se realiza con cromatografía de intercambio ionico)
LA REPLICACION ES EN SENTIDO 5’-3’: Los nucleótidos interaccionan mediante unión fosfodiéster entre el hidroxilo del C3 con el grupo fosfato del C5 de otro nucleótido, ese enlace se establecio a través de un ataque nucleofílico entre el hidroxilo del carbono 3 (de la hebra que esta siendo sintetizada) ,que incorpora por el ataque nucleofílico a un nuevo nucleótido, y el ataque nucleofílico estable el enlace fosfodiéster con el grupo fosfato del nuevo nucleótido que va a enlogar/alargar la hebra que se esta sintetizando. Tenemos una cadena patron o molde en la cual tenemos en el extremo 3’ libre el oxidrilo y en el 5’ el grupo fosfato libre. La cadena que se esta sintetizando (cebadora) es complementaria, por lo tanto tiene en el extemo 5’ el gr fosfato libre, mientras que en el 3’ el oxidrilo esta libre y es el que va a realizar el ataque nucleofílico sobre el grupo fosfato del nucleótido que esta siendo incorporado. El magnesio es muy importante lo que hace es traccionar hacia afuera el proton del grupo hidroxilo del carbono 3’ que facilita el ataque nucleofílico del átomo de oxigeno hacia el fosfato alfa del trifosfato del nucleótido entrante, por otro lado el segundo magnesio interacciona con los otros oxígenos del enlace pirofosfato, favorece la liberación de este enlace pirofosfato, de esta manera se logra enlongar la incorporación en una reacción favorable energéticamente. 
Responsables de catalizar el proceso de síntesis o replicación de dna: son enzimas agrupadas que se conosce como las dna polimerasas. La dna polimerasa presenta diferentes dominios que se dispone en el espacio como una “mano”, en el pulgar y los dedos son dominios que cumplen funciones, en el caso de los dedos es regulatoria y en el caso del pulgar tiene una actividad de corrección, pero la palma de la mano es la que va a sevir como lugar de localización donde se encuentra el sitio de reconocimiento de los sustratos (es el sitio activo), los sustratos van a ser la cadena de dna, tanto la patron como la cebadora. En la palma de la mano ocurre el reconocimiento del sustrato y la catálisis, es decir, el sitio activo que favorece el ataque nucleofílico y consecuentemente la incorporación del nuevo nucleótido con la eliminación del grupo pirofosfato. En la palma de la mano ocurre el proceso de síntesis del dna, observamos que en este caso vamos a requerir diferentes polimerasas, cada enzima tiene un sitio activo donde se va a encontrar el sitio de reconocimiento del sustrato y el sitio catalitico en el caso de la polimerasa están ubicados en el mismo lugar de la palma. Cuando se efectua el proceso de duplicación la molécula de dna tiene que abrirse de manera de permitir el acceso de la dna polimerasa que copie una hebra en sentido 5’-3’ y la complementaria también lo haga en sentido 5’-3’, cuando se abre la molécula de dna se forma la horquilla de replicación. La molécula de dna parental esta siendo abierta por la enzima helicasa (se separa una hebra de la otra), como el sentido de la replicación es en sentido 5’-3’ se establece una hebra conductora que incorpora los nulceotidos en sentido dicho, y la otra hebra que tiene que crecer en el mismo sentido (parece que va en contramano del sentido de la dna polimerasa).tenemos dna polimerasa que reconoce a su sustrato y permite la polimerización en la hebra conductora, y van a tener una afinidad diferente en el espacio a la polimerasa que cataliza la síntesis en la hebra rezagada. Tenemos una dna polimeraza de la hebra conductora (épsilon, dna polimerasa II) y una dna polimerasa que va a conocer a su sustrato en el entorno de la hebra resagada (dna polimerasa delta, dna polimerasa III).
Cada dna polimerasa requieren de un fragmento “cebador” de RNA para poder localizarse sobre la hebra molde que van a tener que copiar, en el caso de la hebra conductora se necesita solo un cebador pero en la hebra rezagada se necesitan múltiples fragmentos cebadores de rna porque allí la dna polimeraza delta realiza una síntesis de manera fragmentada, cada vez que tiene que posicionarse necesita un fragmento de rna cebador. La sintesis del rna cebador la realiza el rna polimerasa o primasa que sintetiza un cebador de alrededor de 10ribonucleotidos que permiten como una plataforma de anclaje a la dna polimerasa épsilon o delta posicionarse sobre la hebra molde o templadoque tiene que copiar. A partir de esos cebadores la dna polimerasa alfa extiende los rna aproximadamente unos 20 nucleotidos mas pero con la característica del dna (desoxiribonucleotidos).
Familia de polimerasas: no todas son iguales aunque catalizan reacciones similares. VER DIAPO 12
La primasa tiene dos dominios uno se encarga de sintetizar los cebadores y en luego la molécula de dna migra al otro dominio que tiene actividad de dna polimerasa. En la polimerasa 2 observamos el dominio exo-pol donde se realiza el proceso de polimerización 5’-3’ y un domino que se denomina pol2 que tiene actividad exonucleotidica con una provera corrección de posibles errores durante el proceso de síntesis del dna, esta actividad en el caso de la polimerasa 3 ocurre tanto la polimerización y el proceso de corrección en el mismo dominio.
Entonces todas las polimerasas tienen una estructura espacial similar pero la función de cada una se especializa para sustratos que están de maneras diferentes. 
Para poder incorporar a los complejos macromoleculares al dna para replicarlo se deben romper los puentes de hidrogeno que hay entre las bases nitrogendas que estabilizaban a la molécula, se necesita una estrategia enzimática con consumo de atp que permita la apertura de la molécula de dna y la obtención de las hebras parentales. La actividad de la ruptura de los pte de H esta a cargo de las HELICASAS (mcm).
Las helicasas son enzimas que tienen afinidad de unión por la cadena de dna simple, por lashebras simples, por lo tanto cuando se desplazan sobre la molécula de dna simple y cada vez que toman interacciones con moléculas de dna de doble cadena, lo que hacen es activar su dominio de atpasa y generar la ruptura de los puentes de hidrogeno que estabilizan a la cadena. Tomar contacto con una hebra doble produce un cambio conformacional que activa su dominio de atpasa lo que provoca la hidrolisis de atp en adp y fosfato que posibilita este consumo energético la ruptura de los dobles enlaces que estabilizan la doble hebra de dna y consecuentemente sigue avanzando sobre una hebra simple.
La polimerasa épsilon (responsable de la síntesis de la hebra conductora), que ocurre en 5’-3’ de manera constante, el proceso de síntesis sobre la hebra rezagada parece que va en contramano del desplazamiento de la helicasa y la hebra conductora. La célula tiene una forma de subsanar el inconveniente y posicionar a la polimerasa delta en el mismo sentido de avance de la orquilla de replicación, lo que hace es disponer a la hebra molde de la cadena resagada en forma de un bucle, de manera tal de orientar a la enzima en el mismo sentido que crece la orquilla de replicación. Cuando se forma esa orquilla que orienta de esa manera a las dos hebras en el mismo sentido y permite la replicación en 5’-3’, el problema es que cuando se forma ese loop de dna simple dispuesta como un bucle en el espacio es posible que esa hebra simple interaccione entre si por complementariedad molecular de sus bases y forme como bucles internos en la cadena simple de dna, lo que constituye un impedimento para el avance de la polimerasa donde esta no pdra conocer su sutrato, por lo tanto para mantener el dna simple de manera lineal y libre la célula sintetiza proteínas de unión a cadenas simples de dna que pueden ser reconocidas como RPA y SSB. Estas proteínas tienen dos dominios que tienen la posibilidad de reconocer la cadena simple de dna interaccionar con estas cadenas pero dejando al descubierto parte de la cadena para poder ser copiada por la dna polimerasa.
Tanto la polimerasa delta como la épsilon tienen que interaccionar con los nucleótidos del molde, pero no pueden interaccionar con muchos puntos de contacto, estableciendo múltiples interacciones que lleven a una fuerte interacción entre la enzima y su sustrato porque no se podría desplazar a lo largo de la hebra parental. Hay que establecer un nivel de interacción que permita el desplazamiento y por otro lado tiene que permanecer unidas a ese templado, para solucionar esto (haya un reconocimiento de la enzima por parte del templado pero que no la frene y le permita el desplazamiento) aparece otra proteína que se llaman abrazaderas deslizantes (PCNA, antigeno nuclear de proliferación celular). La función de estas proteínas es que están siempre asociadas, son dos subunidades que forman como una “dona”, estas dos subunidades encierran la molécula de dna estableciendo una interacción con una molécula de atp a través de un cargador, el cargador tiene un sitio de unión al atp y cuando interacciona el atp permite la apertura de estas dos unidades de la abrazadera deslizante. una vez que se realiza la apertura puede interaccionar con el dna. La presencia de las enzimas dna polimerasa permite un reconocimiento de la polimerasa con el cargador que provoca un cambio conformacional del cargador que se libera de la abrazadera deslizante y posibilita la interacción con la polimeraza. De esta manera la polimerasa queda interaccionando con la abrazadera deslizante próxima a la hebra de dna parental que tiene que copiar sin despegarse. Esto ocurre en la dna polimerasa épsilon y en la delta.
Sobre la hebra resagada la síntesis sobre las hebras hijas que produce de manera fragmentada generando fragmentos de Okazaki, estos fragmentos están formados por un cebador de rna sintetizado por la rna primasa. Lo que ocurre es que exite una rnasa H que va a clivar los fragmentos de rna que van a quedar liberados posibilitando la union a través de un enlace fosfodiéster e cada uno de estos fragmentos de okazakipara constituir una hebra hija continua, la ligasas catalizan la unión de los fragmentos de okasaki para constituir la hebra resagada continua a través del consumo de atp. 
DIP 19 replicosoma todos los actores proteicos que participan en la replicación. La helicassa se ubica en la cadena resagada. 
Tropoisomerasa: surge un inconveniente en el proceso dereplicacion, a medida que la orquilla de replicación avanza con consumo de atp la molécula de dna comienza a aumentar u torsión en el espacio, aumenta la tensión de la molécula, podría resultar en la reptura. Para bajar el proceso de torsion intervienen las topoisomerasaa. 
La topoisomerasa I reconoce en lugares específicos de ruptura (tiene un tirocina con un grupo hidroxilo libre) el grupo hidroxilo establece una unión covalente fosfotirosina entre la enzima entre el sitio activo y la molécula de dna. Se produce una ruptura en la molécula de dna, es una de las hebras, lo que permite que molécula de dna gire sobre si misma aflojando la tensión física, luego que se baja la tensión la misma enzima reestablece el enlace fosfodiéster con la particularidad que la enzima retiene la carga energética en el enlace que establecio con la hebra de dna que luego lo vuelve a utilizar en la formación de fosfodiéster propio de a hebra de dna. La topoisomerasa de tipo I que cortan solo una hebra de la molécula de dna realizan el proceso sin consumo energético.
La topoisomerasa II consumen atp, aquí el proceso de disminución de la tensión que se genera cuando la orquilla avanza es mas complejo, lo que hacen es resolver la formación de nnudos en la molceula de dna, el dna por la tensión forma nudos internos, la topoisomerasa II cliva una parte de molécula de dna donde ubica al nudo en el sitio activo de la topoisomerasa II, cliva directamente las dos hebras de esa molécula de dna en una porción del cromosoma, y luego permite que el fragmento clivado pase a través del rsto de la molécula de dna y se desarme el nudo. 
Las topoisomerasas no forman parte del replicosoma porque actúan por delante o por detrás del proceso de la horquilla de replicación.
DNA, Replicación y Reparación II
Características de la replicación del DNA: donde se inicia el proceso de replicación, característica que tiene el proceso en los extremos telomericos del cromosoma, considerando que la molécula de dna es el reservorio genético no puede incorporar durante el proceso de replicación errores.
Donde se inicia el proceso de la replicacióndel dna: en células procariotas el mecanismo de síntesis se origina en lo que se denomina orígenes de replicación “ORI”, es en donde se lleva a cabo la apertura local de la hélice de dna, es un proceso desde el punto de vista energético costoso porque se tienen que romper los puentes de hidrogeno entre las bases. En este punto de replicación favorecemos el proceso de apertura cuando halla en estas secuencia pares de bases ricas en adenina y timina. En el caso de los procarionetes que tiene un cromosoma único constituido por una única molécula de dna en alfa hélice que se dispone en el espacio de manera circular, una vez realizada la apertura de la hélice de dna, a partir de los puntos de orígenes de replicación -ori-, se va a llevar a cabo la extensión de una de las horquillas de replicación en sentido 5’-3’ al igual que otra horquilla en sentido 5’-3’, a partir de esas dos horquillas de replicación la primasas va a llevar el inicio de la replicación a partir de los cebadores de rna en lo que constituye una burbuja de replicación, es decir, una burbuja formada por dos horquillas de replicación que crece de manera bidireccional. La célula procariota con un solo cromosoma dispuesto de manera circular va a extender esa burbuja de replicación hasta llegar a completar esa única molécula de dna dispuesta de manera circular. Consecuentemente se van a formar nuevas cadenas a partir de las cadenas cebadoras que van a copiar todo el cromosoma, este crecimiento que es bidireccional va a generar una horquilla 1 que va a tener un crecimiento de la hebra conductora y la resagada, y una hrquilla de replicación 2 que tiene una conductora 2 y una resagada 2. 
Los orígenes de replicación además de presentar en su secuencia nucleotídica un fragmento rico en adeninatimina de manera tal de poder ser abierta, romper los dos puentes de hidrogeno y abrir las dos hebras para permitir el acceso de los complejos enzimáticos que llevan adelante la replicación, además los orígenes de repliccion de la célula procariota presentan una secuencia de nucleótidos que interaccionan con proteínas especificas con proteínas denominadas proteinas iniciadoras. Se establece una interacción entre proteínas que van a iniciar el proceso de duplicación, estas proteínas interaccionan con secuencias especificas del origen de replicación son secuencias de dna presentes en el origen de replicación, cuando interaccionan las proteínas iniciadoras con el dna de esa secuencia de reconocimiento este ultimo va a curvarse en el espacio, es decir, que se va a poner de una manera tridimensional diferente en el espacio y ese reordenamiento conformacional, de ese segmento del dna en el cromosoma procariota, lo que va a posibilitar es la interacción con la enzima de helicasa. en particular es la helicasa dna b la que va a participar en la apertura de la hélice de dna. Esta helicasa esta unida a un cargador de helicasa, la unión del cargador helicasa-helicasa evita que tome contacto con el dna, o lo va a poder interaccionar con el dna en el origen de replicación en el punto donde se produjo ese cambio conformacional que desencadeno la unión de las proteínas iniciadoras. 
una vez que se unen las proteínas iniciadoras, el dna adquiere una conformación en el espacio que permite la interacción con la helicasa, helicasa dna b, al interaccionar con esa secuencia de dna dispuesta tridimensionalmente en el espacio tiene mayor afinidad por el dna que por el cargador, el cargador se desprende, la helicasa queda activa para realizar todo su proceso de apertura de la molécula de dna. Permitir el ingreso de la primasa, iniciar el proceso de síntesis a partir de la polimerasa.
Cuantas veces se replica el dna: en el procarionte la replicación tiene que ser una sola vez para permitir que a partir del cromosoma original de la célula madre uno obtenga una copia de ese cromosoma formado por la hebra parental y la hebra recientemente sintetizada y la otra molécula igual, de manera tal que cada célula hija reciba una sola copia de ese cromosoma único (para el caso de las procariontes). Recién sintetizado el cromosoma aparece en sus orígenes de replicación una secuencia que es la secuencia de nucleótidos GATC que es sensible a la metilacion, en el cromosoma paterno vamos a tener secuencias GATC en el origen de replicación metiladas tanto en una como en la otra hebra, cuando se inicia el proceso de duplicación de dna y se vizualisa a partir de la formación de la burbuja de replicacion, la hebra parental superior sigue estando metilada en esta secuencia GATC al igual que la hebra parental inferior, pero esta metilacion no ocurre. A medida que inicia y avanza la replicación las hebras parentales permanecen metiladas mientras que las hebras hijas no, esta hemimetilacion (solo una hebra esta metilada -parental-) lo que hace de manera molecular se marca cual es la hebra parental, esa hemimetilacion permite la interacción de esos restos metilos con una proteína que se denomina seqA y la hemimetilacion interaccionando con esa proteína seqA provoca una inibicion conformacional esterica en el espacio que evita que nuevas proteínas iniciadoras interaccionan con los orígenes de replicación. Si las proteína iniciadora no puede interaccionar con la secuencia de los orignes de replicación no van a poder iniciar nuevas horquilla de replicación y consecuentemente nuevas burbujas de replicación. Es una manera de controlar que la replicación se inicie solo una vez.
Esta hemimetilacion se mantiene por corto tiempo (20min) cuando una enzima que es la dna metiltransferasa (dam) comienza a metilar la hebras hijas, entonces ahora tenemos las dos hebras metiladas dando lugar entonces a la formación de un nuevo origen de replicación. Cada uno de los cromosomas que se origino por duplicacion de una única vez del cromosoma presenta en su origen de replicación secuencia ricas en A-T, secuencias de unión a las proteínas iniciadoras y secuencias que puedan ser metiladas GATC.
Estas secuencias GATC no solo participan en el control por la hemimetilacion del proceso de replicación única del cromosoma procarionte, sino que también están distribuidos por todo el cromosoma y participan en la detección de errores durante el proceso de replicación procariota y la posterior reparación.
*los cromosomas de las células eucariotas son mucho mas que las de procarionte.
EN EL CASO DE LAS EUCARIOTAS: si se realizaría igual que en los procariontas tardaría mas de un mes en replicar el adn, el proceso es diferente para poder disminuir este tiempo. Lo realizan distribuyendo entre 20 a 80 origenes de replicación por cromosoma. En la célula eucarioa estos 20 u 80 origenes de replicación tiene una disposición particular que de alguna manera se activan en grupos para iniciar el proceso de replicación (no se ve que se da de manera secuencial uno atrás de otro ni todos juntos), lo que se determina es la presencia de grupos que se activan a determinados periodos de tiempo dentro de la fase s y estos grupos se llaman unidades de replicación. 
Para evidenciar lo que sucede en las eucariotas trabajamos con un cultivo de células sincronizadas en una fase del ciclo en nuestro caso es en la fase s. para sincronizarlas en el medio de cultivo se las restringe del SFB, al no suplementar con mitógenos (factores de crecimiento, factores de proliferación), los retiro y todas las células van a ir sincronizándose en una etapa del ciclo celular cuando están en esa etapa las llevo a fase s volviéndoles a administrar suero fetal bobino y todas van estar sincronizadas y todas van a estar a partir de fase s. cuando las tengo a todas en fase s voy a hacer pulso de periodos cortos donde al medio de cultivo se le adiciona bromodeoxiuridina (BrdU), que es análogo a la timidina, este bromodeoxiuridina es incorporada durante la replicación en fase s a las nuevas hebras de dna hijas, hacemos pulso corto de brdu lo lavamos incorporamos timidina y dejamos que siga avanzando en la fase s. luego en la fase M donde los cromosomas llegan a su máxima compactación, entoncesen este cromosoma mitótica tratamos de ver la formación de bandas a partir de la complementariedad y van a aparecer una hebra que haya incorporado BrdU y en la otra hebra timidina esas van a ser bandas mucho mas brillantes y las bandas mas opacas serán las bandas que incorporaron las dos hebras BrdU. Esto de agregar el BrdU y la timidina se realiza varias veces entres 0-2hs, 3-5hs y 6-8hs, entonces obtenemos fase s temprana, una fase s media y una fase s tardía. Aparece un patron de bandas brillantes diferentes entre las 3 fases, es decir, que hay grupos de origen de replicación que se activan en la fase s, s-media o en la fases-temprana. Estos grupos de orígenes de replicacion se activan de diferentes maneras a lo largo de la fase s del ciclo de la célula que es cuando se duplica el dna. Particularmente la fase s tardía se caracteriza por activar las unidades de replicación relacionadas a las áreas de heterocromatina (máxima condensación) que corresponden a los telomeros, centrómeros, este es el mismo mecanismo de duplicación mas tardío de todos y son las que corresponde al cromosoma X también. 
la replicación entonces en eucariontes es mas compleja porque la longitud de la molécula de dna supera a la procarionte, lo que requiere entonces la presencia de unidades de replicación integradas por 20 a 80 origenes de replicación por cada cromosoma, estas unidades de replicación agrupan la activación de estos orígenes de replicación y esta activación no es secuencial sino que varia en todo el proceso de síntesis (fase s), e iba a estar relacionado la activacion de aquellas unidades de replicación tardía a aquellos genes que se encuentran tridimensionalmente de manera mas compacta (heterocromatina). 
A lo largo de el proceso de replicación había un remodelamiento de la cromatina, no solamente para permitir el avance del proceso de replicación, sino que también para heredar en células hijas el patron de modificación de histonas que modulaba/controlaba de manera epigenetica la expresión de ese genoma a través de la heterocromatizacion. A medida que avanza la horquilla de replicación, recordemos que las hebras de dna paterno mantenían una asociación con los tetrameros de histonas tipo H3 y H4 mientra los dimeros de H2A y B eran disociados del core del nucleosoma, cuando estos se reensamblaban, tenemos algunas hebras que presenten los tetrameros H3 y H4 y a su vez tenemos otras que incorporen nuevos junto a nuevos dimeros H2A y H2B. nos quedan entonces nucleosomas paternos modificados (metilacion acetilación, etc)que caracterizan al nucleosoma paterno, cuando se produzca la horquilla de replicación y la reformulación de nucleosomas (en algunos se mantendrán los tetrameros y en otros no ) ese patron de modificación van a aparecer tanto en una molécula de dna como en la otra, algunos van a mantener las modificaciones de los nucleosomas paternos y otros no, estas modificaciones que se mantienen pueden ser leídos en los nucleosomas heredados por lectores de histonas los cuales pueden interaccionar con complejos proteicos encargados de activar funciones biológicas. En este caso van a copiar ese patron de modificación de los nucleosomas paterno y extenderlo a todos los nucleosomas de las 2 moleculas de dna que se generaron a partir de los nucleosomas paternos. 
La célula eucariota presenta varios orígenes de replicación que se activan de manera grupal formando estas unidades de replicación. Analizamos cromosoma 3 de la levadura, tiene centrómeros, telomeros y varios ORI si analizamos los ori vemos que en la secuencia de nucleótidos aparece una región fácil de desenrollar por la presencia de A-T, en la parte central del ori aparece la zona de fácil desenrollamiento pero hacia la izquierda hay una secuencia de dna marcada en rojo que es un sitio de unión para la proteína ORC que se conoce como compejo de reconocimiento del origen de replicación, la secuencia en rojo interacciona de manera especifica con las ORC y a su vez el ORI tiene una secuencia de nucleótidos a la derecha en azul que corresponde a una secuencia de reconocimiento de proteínas auxiliares que de alguna manera permiten el inicio de la replicación en la célula eucariota en cada uno de estos orígenes de replicación. 
También surge en el caso de las eucariotas cuantas veces debe duplicarse cada cromosomas, por cada ciclo celular cada cromosoma debe duplicarse en la fase s una sola vez, para asegurarse que el numero de copias que llegue a que cada célula hija sea igual/idéntica al numero de copias (cromosomas) que tiene la célula madre que dio origen. Entonces las células eucariotas deben desarrollar un mecanismo de control que permita que solo se duplique dad mecanismo de control 1 sola vez por ciclo celular.
Mecanismo para que solo se duplique una sola vez: en el cromosoma eucariote donde tenemos l origen de replicación (donde se localiza la secuencia de unión a la proteína ORC, próxima a un sitio de fácil apertura de la molécula de dna donde están las secuencias A-T). cuando el complejo ORC interacciona con la secuencia por complementariedad molecular del dna, este ORC sufre un cambio conformacional donde permite la asociación de dos proteínas cargadoras de helicasa denominadas Cdc6 y Cdt1, esta asociación tiene una disposición tridimensional en el espacio que permite la unión de las dos helicasas (en procarionte mcm), por cada unión de la proteína ORC a su secuencia en el origen de replicación interaccionan la proteínas cargadoras de dos helicasa y esta estructura se denomina complejo pre-replicativo y hay tantos complejos pre-replicativos como orígenes de replicaciones tenga cada cromosoma eucarionte. 
Al no formarse nuevos complejos pre-replicativos la célula se asegura que va a replicar cada cromosoma solo una vez. Cuando se forme la célula hija luego de la mitosis la actividad ahora hace a desfosfatasas que retiren (cliven) ese fosfato y entonces puedan en fase g1 volver a la disposición del complejo pre-replicativo. 
Como la célula resuelve la duplicación de la cadena resagada o retrasada en la zona telomerica (extremos): el extremo 3’ corre siempre el riesgo de perder información porque el extremo 3’en la cadena resagada es muy difícil poder localizar a los cebadores de rna, exsite la posibilidad de perdida de información cuando se esta resintetizando el cebador, se piedan fragmentos. La cadena para que esto no ocurra, los extremos telomericos son mas largos que el resto de la molécula de dna, tenemos una molécula de dna con un extremo de cadena simple que tiene a curvarse y formar un lazo, la extensión se mete dentro del alfahelice formando este lazo. La particularidad química de esa cadena paterna que es mas extendida es la presencia de secuencias tándem ricas en G y T, estas secuencias son reconocidas en el sitio activo de la enzima telomerasa. Las repeticiones del telomero (en esta cadena paterna 3’) resultan un mecanismo que aporta a la célula un sistema de recuento que impide la proliferacion ilimitada de la célula, de alguna manera la longitud del telomero va a controlar el numero de proliferaciones. En células somáticas que nacen y completan un numero de repeticiones de telomeros que va a dar idea de cuantas veces se va dividir. esta restringido y es un numero limitado de divisiones; las células madre a lo largo de la vida retienen una actividad de telomerasa invariable que asegure su sucesivas divisiones; en otros tipos celulares esa actividad de telomerasa disminuye, hay menos actividad a medida que mayores duplicación hizo de ese cromosoma, esto va a determinar cuantas veces se va a dividir este cromosoma. 
Entonces tenemos dos parámetros la longitud por un lado y por otro el nivel o actividad de la telomerasa. Entonces después de muchas generaciones celulares, las células descendientes heredaran cromosomas defectuosos (con menos longitud en el telomero o menor actividad telomerasa) hace que se vaya perdiendo información y los cromosomas heredados serán defectuosos porque sus puntas no se pueden replicar por completo, en consecuenciafrenan su ciclo celular y dejaran de dividirse donde entran en la senescencia celular replicativa. 
Durante la replicación o durante el ciclo celular esta molécula no puede tener errores porque va a ser heredados por las células hijas: habitualmente observamos que exsiten lo que se denomina una inestabilidad en la molécula del dna que provoca lo que se denomina mutaciones puntuales. Una vez replicada la molécula de dna y dividida luego de la mitosis los cromosomas en las células hijas van a sufrir constantemente procesos o agresiones de radiaciones ionizantes, UV o el movimiento de e- en la propia cadena mitocondrial, la agresión de agentes ambientales o la propia oxidación de lípidos en los peroxisomas provocan mutaciones o alteraciones que pueden ser sin sentido, silenciosas, modificar secuencias reguladoras que de alguna manera alteren el control de la transcripción. La célula lo que hace es constantemente va a tratar de prevenir estas mutaciones, prevenir que no se acumulen estas mutaciones puntuales silenciosas y va a poner en marcha mecanismos de reparación del dna, mecanismos que van a poder llevarse a cabo durante el proceso de replicación o luego del proceso de replicación
1er mecanismo de reparación del dna: es el mecanismo de corrección de prueba, ocurre directamente durante el proceso de replicación, en la polimerasa de tipo II y III presentan un dominio de polimerización (donde se producia el ataque nucleofílico y la formación del fosfodiester, además la II presenta otro dominio que tiene actividad exonucleotidica, en el caso de la III tanto el proceso de polimerización como como la actividad de exonucleotidica esta compartida en un único dominio. Cuando crece la cadena cebadora en la dna polimerasa que ocurre en el sitio activo en la enzima que se ubica el sustrato y permite la ubicación el nuevo nucleótido en el dominio de la enzima, se observa que la enzima realiza un cambio conformacional ante de formarse la unión covalente esterdifosfato y este cambio conformacional es producto de un cambio conformacional en las unidades regulatorias de las enzimas, que van a establecer que a traves de una correcta selección del nucleótido incorporado este va a ser complementario a la cadena paterna y es el mas favorable desde el punto de vista energético. Entonces la enzima controla antes del establecimiento de la unión covalente si es el nucleótido adecuado para ser incorporado en la cadena, este control es inherente a la propia enzima mientras esta realizando el proceso de polimerización (extensión de la cadena hija), vamos a tener que en las dna polimerasas existe un dominio de polimerización que chequea si el nucleótido es el adecuado, si no es el correcto porque no es complementario a la cadena proteica lo que hace la enzima es desplazar la cadena hacia el dominio exonucleotidico que es donde se realiza la corrección. En el dominio corrector la enzima tiene una actividad exonucleotidico la enzima rompe, lisa, el extremo de la cadena de dna recientemente sintetizada en la que incorporo el nucleótido inadecuado porque no es complementario y por lo tanto no es favorable energéticamente. Una vez que actúa con la actividad exonucleotidica desplaza denuevo a la cadena hacia el dominio de polimerización para incorporar el nucleótido que corresponde.
Esta corrección de prueba que se produce durante el proceso de la replicación se establece a través de una alta afinidad del nucleótido correcto por la polimerasa en movimiento, es decir, las unidades regulatorias van a censar por la distribución conformacional que el nucleótido incorporado o por incorporar (lo hace antes), hace l comprobación por la correcta interacción a través de las subunidades regulatorias. Si no es correcta la desplaza hacia el dominio exonucleotidico donde la actividad exonucleotiico es en sentido 3’-5’ porque es el ultimo nucleótido incorporado. Esta actividad de corrección de prueba es fundamentalmente importante en la dna polimerasa II y III, pero el dominio exonucleotidico no aparece en la primasa, producto de la actividad inherente de la primasa que no requiere corrección (los arn son inestables, son iniciadores de la duplicación pero luego serán degradados).
Muchas mutaciones espontaneas son puntuales que implican un cambio en un único par de bases de la secuencia de dna, la célula intenta reparar estas mutaciones puntuales luego del proceso de la replicación a partir de un sistema de reparación por escicion. Este sistema puede ser por esicion de bases. La 5metil citocina puede desaminarse y dar desoxirribosa de la timina, una mutación puntual espontanea puede formarse por desaminación de la 5-metil citocina para formar timina. Si el par de bases C-G no se reestablece por un mecanismo de reparación por escicion llevara un cambio permanente de la secuencia (una mutación), porque en lugar de copiarse C-G se copia una forma mutada de dna T-A, la célula debe prevenir esta mala copia en el dna mutante y corregirlo antes de la replicación. Para realizar esta corrección antes de la replicación debe reconocer la distorsión, el apareamiento incorrecto de G-T es reconocido por una dna glucosidasa que proyecta a la timina hacia el exterior de la hélice de la molécula de dna, luego hidroliza el enlace que conecta a la base con el esqueleto azúcar fosfato del dna, una endonucleasa corta a la hebra de dna cerca del sitio sin la base y ahora donde el sitio carece de una base es reemplazada por una citocina mediante una dna polimerasa beta, una vez que se incorpora una nueva citocina se produce ahí la ligason a través de la enzima ligasa que permite el restablecimiento correcto de la secuencia y la estructura de dna. 
*la dna polimerasa beta forma parte de la familia de las dna polimerasas familia de polimerasas de tipo X, la conformación es igual pero la conformación de la molécula dna es diferente que a una horquilla.
La célula también puede reparar el dna luego de la replicación por un sistema de reparación por escicion de nucleótidos: específicamente este sistema de reparacion se produce sobre los aductos o dimeros Timina- timina la radiación uv provoca entre dos timinas próximas en el esqueleto de la molécula de dna la formación de dimeros o aductos (uniones c-c entre las timinas)constituyen una distorsión en la molécula de dna, nuevamente estas distorsiones en la estructura tridimensional de la molécula de dna es reconocida por un complejo de proteínas, particularmente por el factor transcripcional IIH (TFIIH), que va a posibilitar nuevamente la actividad de endonucleasas, va a clivar a todo un fragmento una secuencia nucleotídica que incluye al aducto que se formo y recién ahí que se perdió esa secuencia la polimerasas de dna de reparación va a copiar la hebra parental evitando la formación de los aductos y la ligasa va a sellar esa nueva secuencia recién sintetizada complementaria a la hebra parental (reparando el daño causado por la radiación uv).
Existen también sistemas de reparación del dna que se ponen en marcha cuando se rompen las dos hebras del dna: estos sistemas pueden ser a través de dos mecanimso diferentes, cuando se produce la escicion de las dos hebras de dna en el cromosomma pueden ser sellados sus extremos no homólogos, existen endonucleasas que degradan los extremos dejando extremos romos que pueden unirse por la acción de ligasas. El gran inconveniente de este mecanismo es la perdida de una pequeña secuencia de información de esa molécula de dna (deleción de una secuencia de dna). El otro mecanismo que permite la reparación cuando presenta la dos hebras clivadas, es el mecanismo por recombinación homologa, este mecanismo se puede realacionar con la meiosis porque es muy similar el mecanismo, la célula utiliza el mismo andamiaje molecular para reparar y preservar la información del dna de esa molécula que sufrió una ruptura de las dos hebras.
Recombinación homologa: 
Cuando hay una sola hebra rota: cuand la horquilla de replicación llega al lugar de ruptura colapsa la horquilla de replicación, si no se reparaa ruptura en el esqueleto fosfodiéster de la hebra de dna antes de que pase la horquilla de replicación, la porción replicada de los cromosomas hijos se separara de la helicasa de replicación, cuando llega la ruptura en la hebra parental no habrá enlace covalente entre los dos fragmentos de la hebra parental a cada lado de la horquilla de replicación, que va a dar un cromosoma duplicado donde tengamos una de las moléculas de dna, con una longitud como la original y otra mas corta (tendríamos perdida de información). Para poder subsanar esto, la cromatide que esta involucrando a la hebra parental trata de invadir la comatide intacta y copiarla, como hace esto a través de una primera digestion nucleotídica de ese extremo y entonces ese extremo mas prolongado puede invadir la cromatide intacta porque tiene la misma secuencia. Una ves que se establece el colapso de la horquilla de replicación existe una degradación del extremo 5’ de esa hebra rota a través de la acción de exonucleasas, lo cual libera u fragmento mas largo en posición 3’, ese fragmento de la hebra conductora mas largo en el extremo 3’es una hebra de dna de cadena simple por lo tanto va a tener que interaccionar con proteínas de unión a cadena simple (rec A, Rad1 -dependiendo el organismo-) que van a dirigir la invasión de esa hebra conductora del extemo 3’ mas larga que va a invadir la cromatide intacta para poder copiar la otra horquilla de replicación la secuencia que le falta. Para que se produzca esta reparación homologa que permite la reparación del dna es importante el intrcambio de secuencias de dna prácticamente similares o casi idénticas, un rquerimento del proceso es la necesidad de apareamiento de bases, el tipo de reconocimiento del apareamiento de una de la hebra conductora sobre la otra hebra parental copiada en su hebra hija, los dos duplx de dna que van a sufrir recombinación necesitan chequearse entre si para permitir un cierto apareamiento por complementariedad. La molécula simple que invade porque no puede seguir la hoquilla de replicación, como es dna de cadena simple se va a unir a proteína de unión de cadena simple recA y rad51pero para poder quedar libre y formar esa cadena que pueda invadir el extremo 5’ fue previamente degradado por la acción de exonucleasa. Todo el proceso dirige la invasión del dna simple hacia el duplx de dna para constituir un heteroduplex, la cadena simple de dna busca en el heteroduplx busca la secuencia homologa complementaria y migra. En el heteroduplx que es una región del dna de doble hélice formada por dos cadenas de dna en que la horquilla de replicación formaba parte de dos moléculas de dna diferente, la complementariedad se da entre dos moléculas de dna que formaban parte de dos horquillas de replicación diferente.
Una vez que se detecta el punto de ruptura la actividad de las exonucleasas degrada los extremos 5’, se generan extremos de cadenas simples 3’ que van a ser los que interaccionen con proteínas de unión del tipo simple recA.. estos extremos 3’ unidoas a proteínas de unión a cadena simple van a invadir la otra cromatide hermana complementaria y van a copiar el fragmento de dna complementario que no disponían por esta ruptura, se va a sintetizar la molécula de dna complementaria a la otra cromatide hermana en el heterodupex formando ese heteroduplex, y una vez que se sintetiza el fragmento faltante post la ruptura la acción de ligasas va a permitir la unión de ese fragmento al reto de la hebra parental que tenia esta ruptura de la doble cadena, de esta manera se repara sin perdida de información y se mantiene por recombinación homologa las características estructurales de cada molécula de dna. 
**En el cancer de mama se expresa una mutación en una de las proteínas asociadas a la reparación del dna por recombinación homologa, es el caso de la proteína BRCA1 y BRCA2, en el caso de la ruptura de las dos moléculas de dna, exite un conjunto de proteínas que va a dirigir el proceso de recombinación homologa, en primer lugar la proteína atm que va a reconocer el sitio de ruptura y va a permitir el ensamblaje del complejo proteico muy importante en el cual hay degradación de los extremos 5’ para dar cadenas simples de dna en el extremo 3’ los que se ascosian a la proteína de dna simple RAD51 que posibilita la invasión y guía el proceso de selección de la secuencia homologa y el copiado para la reparación de esa secuencia del duplex que había sido clivada, en el caso del cancer de mama heredado la mutación que se hereda es la proteína BCRA1 y 2 
ParP que realiza la transferencia de adp a ribosil a proteína cuando reconoce un sitio de escicion se auto modifica químicamente se auto adpribosila y esto permite la activación del proceso de reparación por escicion de bases, esto se observa que en alguno tumores (cancer de mama)se observa un aumento de la expresión de esta proteína. 
¿Porque la inhibición de PARP favorece la muerte de las células tumorales?
Transcripción
Miescher descubre en el núcleo de las celulas de los glóbulos blancos, una sustancia de naturaleza acida, rica en fosforo y nitrógeno, compuesta por moléculas muy grandes, a la que nombre nucleína, esta nucleína es lo que conocemos como adn. Griffith demostró que las bacterias eran capaces de transferir información genética mediante un proceso llamado transformación. Levene determina la existencia del adn y arn, formados por 4 bases nitrogenadas un azúcar y un grupo fosfato. Chargoff descubre que las bases de adn siguen ciertas reglas en todas las especies (cantidad de A=T, cantidad de C=G).
Flujo de la información: Crirck establece que a partir de una molécula de adn se puede sintetizar una molécula de arn por unn proceso denominada transcripción que ocurre en el núcleo, y a partir de una molécula de arn se puede sintetizar una molécula de proteína mediante un proceso llamado traducción que ocurre en el citoplasma. Este flujo de la información genética que va del adn al arn y a la proteína es lo que se conoce como dogma central de la biología. 
Baltimore y temin observan en sus experimentos realizados en virus que el flujo de la información genética no era compatible con el dogma central, ven que apartir de una molécula de arn se puede sintetizar una molécula de dna. Dogma central de la biología ampliado
¿Qué es la transcripción?
El proceso mediante el cual se copia un determinado fragmento de nucleótidos de adn a una secuencia de nucleótidos de arn, determinado fragmento del adn que se conoce con el nombre de gen. Copiamos nucleótidos de adn que son desoxirrionucleotidos a nucleótidos de arn que son ribonucleótidos, significa que la forma química es algo diferente. 
Diferencias y semejanzas entre adn y arn:
Los nucleótidos de arn son ribonucleótidos quiere decir que tienen ribosa, esta presenta en el C2 un oxidrilo que hace a la molécula mucho mas reactiva que la desoxirribosa, al ser mas reactiva también es mas labil. 
Los arn contienen uracilo en lugar de timina, si bien los dos son similares en su estructura la timina contiene un grupo metilo del que carece el uracilo.
Entre las semejanzas que tienen las moléculas del adn y arn es que en ambas moléculas los nucleótidos se unen entre si por uniones fosfodiéster. Otra semejanza es que tanto el U como la T se unen por dos enlaces puentes de hidrogeno a la A. las diferencias químicas entre el adn y el arn son mínimas. 
(pte de hidrogeno unión covalente muy débil, estabilizan la molécula)
Adn y arn estructura global: encontramos diferencias significativas el adn es una doble cadena unida por complementariedad molecular que se estabiliza por enlaces pte de h y fdV, esta doble cadena forma una doble hélice en el espacio y tiene una estructura tridimensional que es compleja. En el caso del arn es una caena simple que tiene la capacidad de plegarse sobre si misma, estos plegamientos van a estar estabilizados por enlces pte de h y fdv, le van a otrogar a los distintos tipos de funciones estructurales y catalíticas que los van a diferenciar de otros arn, un arn que puede cumplirfunciones catalíticas son complejos macromoleculares que la cadena esta unida a proteinas 
ARN y función diapo 5
Todos los arn se sintetizan por la transcripción que ocurre en el núcleo 
ARNm: a partir de un fragmenteo de adn (gen/unidad de transcripción), se va a copiar una molécula de arn, esa molécula de arn en este caso codifica para proteína en el citosol posteriormente se va a traducir a proteína. Todos los genes se pueden expresar con diferentes eficiencias y esto va a depender del tipo de tejido en donde se encuentre la celula y de la función que tenga que cumplir ese gen.
Transcripción: lo primero que tiene que suceder es la apertura y desenrollamiento de una pequeña zona de la doble hélice del adn, luego una de las dos cadenas del adn va a actuar como molede para la síntesis de arn, el paso siguiente es que los nucleótidos se van a empezar a incorporar por complementariedad de bases según la cadena molde y luego viene el proceso de elongacion donde una enzima va a catalizar la formación de enlace fosfodiéster entre los nucleótidos para elongar la cadena. Durante la síntesis de la cadena de arn podemos ver que la cadena de arn como es una simple cadena no va a permanecer unida a la hebra molde por enlaces de puente de hidrogeno (en replicación si sucede), por otro lado las moléculas de arn son mas cortas que las de adn (copiamos un fragmento y no toda la molécula). 
Durante el proceso de elongacion de la cadena de arn la formación de los enlaces fosfodiéster esta catalizada por una ezima, llamada arn polimerasa.
La enzima que cataliza la transcripción in vivo es la arn polimeraza va a catalizar la formación de los enlaces fosfodiéster. Esta enzima tiene distintas subunidades en donde podemos encontrar el sitio activo que es donde se va a desenrollar la doble hélice de adn, hay un túnel donde van a ingresarlos ribonucleótidos trifosfato se van a ir añadiendo a medida que avanza la polimerasa, se unen por complementariedad molecular a la cadena molde. La cadena naciente de arn recién sintetizado va a ir saliendo por un canal de salida que también tiene la enzima. La energía necesaria para impulsar la reacción de la formación de los enlaces fosfodiéster lo obtiene atraves de la hidrolisis de alta energía que tiene los grupos fosfatos de los ribonucleosidos trifosfato. 
Arn polimerasa: adn poimerasa 
-cataliza la unión de ribonucleotidos - cataliza unión de desoxirribonucleotidos
-No necesitan cebador -necesitan cebador
-cometen 1 error cada 104 nucleotidos incorporados -cometen 1 error cada 107 nucleotidos inc.
Las enzimas no están estructuralmente relacionadas
La incorporación de nucleótidos se da a través del extremo 3’ donde tenemos un OH que va a atacar al enlace fosfato del grupo que esta en la posición alfa, rompe el enlace (hidrolisis) y se produce energía, esa energía es la que se utiliza para generar el enlace de fosfodiéster. La síntesis de arn se da en sentido 5’-3’ la cadena va creciendo por el OH que esta en el extremo 3’. Le lectura de la cadena molcde es de 3’-5’. Podemos decir que la cadena de arn que esta sintetizándose es complementaria y antipalarera a la hebra molde.
Quien determina el inicio de la transcripción: existen en el adn secuencias especiales (secuencias coseso) que indican el punto de inicio para la síntesis de arn y se las conoce con el nombre de promotores, estas secuencias se encuentran en corriente arriba de la posición mas 1 que es la posición de inicio de la transcripción, la característica que presentan es que es una secuencia de doble cadena, presentan asimetría, orientan a la polimerasa en el sentido que se tiene que realizar la transcripción y también determinan la velocidad de transcripción.
ciclo de transcripción de la arn polimerasa bacteriana: en los procariontes es mas sencillo, tenemos un solo tipo de arn polimerasa la cual se va a ensamblar al promotor ayudada por un factor de inicio de la trancripcion conocido como factor σ, así se va a formar lo que se conoce como complejo de inicio de la transcripción. Se inicia la transcripción con la apertura de la cadena de adn en el sitio activo de la enzima se incorporan los nucleótidos y se comienza la síntesis del fragmento de arn, este fragmento que primero se sintetiza tiene aproximadamente 10 bases y es un proceso sumamente lento porque la polimerasa esta anclada al sitio del promotor. Si la transcripción es eficiente ocurre una perdida de la interacción con el promotor, se desensambla el factor sigma y la polimerasa puede avanzar y continuar con la enlogancion de la cadena. La elongación de la cadena va a continua hasta que en la cadena molde de dna se lea una secuencia de terminación, cuando la polimerasa lee esta secuencia se detiene la trnascripcion y se desprende la cadena de arn de la cadena molde, se da por finalizada la transcripción. 
Transcripción en a células eucariotas: vamos a tener 3 tipos de arn polimerasa que van transcribir a los distintos tipos de arn. En el caso del arn mensajero la polimerasa involucrada es la arn polimerasa II. Vamos a necesitar un conjunto de factores generales de la trancripcion para que esta inicie, también se tiene que resolver el problema del empaquetamiento. 
Los segmentos de adn que no deben transcribirse van a estar enrrollados sobre si mismo en un proceso de condensación de la cromatina, sin embargo aquellas hebras que se están transcribiendo representan las formas de cromatina menos condensada (cromatina laxa). 
Los factores generales de la transcripción ayudan en cada uno de los proceso necesarios durante la transcripción, en general podemos decir que facilitan la colocación correcta de la arn polimerasa II sobre el promotor, ayudan a separar las 2 hebras de adn y liberan a la arn polimerasa del promotor permitiendo la elongación de la cadena.
Hay varios promotores que son reconocidos por la arn polimeras II la mayoría de estos promotores se encuentran corriente arriba del punto de inicio de transcripción, la mas conocida es la caja TATA (ver diapo)
Transcripción de la arn polimerasaII: tenemos nuestro gen que se va a transcribir en donde se puede identificar el sitio de inicio de la transcripción y la zona del promotor (caja tata) una proteína que es de unión a la caja tata, va a reconocer y unirse a otro factor de transcripción que es el factor de la polimerasa IID, este factor de transcripción FTIID junto con la proteína de unión a la caja tata va a reconocer la caja tata y se va a unir a la secuencia promotora que se encuentra en el gen. Esta unión va a producir una distorsión en el adn y esta distorsión va a permitir o facilitar la apertura de la cadena de adn. Luego otra proteína que es otro factor de transcripción llamado FTIIB se va a unir al complejo que se estaba formando en el sitio del promotor y esto va a marcar el sitio de ensamblado del complejo del inicio de la transcripción. La polimeras II se va unir al sitio promotor junto con los otros factores de la transcripción y va a reclutar a mas factores de inicio de la transcripción, como el TFIIF que se va a encargar de estabilizar la interacción entre la polimerasa y los factores de inicio de la transcripion, el TFIIE que va a traer y regular el TFIIH, y el TFIIH es el encargado de desenrollar la cadena de adn en el sitio de inicio de la transcripción (sitio activo de la arn polimerasa II) de esta manera queda formado el complejo de inicio de la transcripción. 
Una vez que se formo el complejo la polimerasa comienza la trasncripcion el factor H va desenrollar al adn en el sitio activo de la polimerasa van a ingresar los nucleótidos y se va a sintetisar la cadena de arn, al principio es un proceso lento porque la polimerasa esta anclada al sitio promotor. Luego el factor H va a fosforilar la cola de la polimerasa y esto permite que se desensamblen lo factores de inicio de la transcripción y la polimerasa pierde la interacción con el promotor quele va a permitir avanzar y elongar la cadena de arn. El dominio C-terminal de la cola de la arn polimerasa son 52 secuencia repetidas en tándem de 7aa cada uno que pueden fosforilarse en la posiciones de las serinas 5 y la serina 2. Estas fosforilaciones además de ser importante para permitir el desensamblaje de los factores de inicio de la transcripción y que la cadena pueda elonganrse, también cumplen un papel importante para dirigir el procesamiento del pre-ARNm que se esta sintetinzando
Procesamiento del pre-ARNm: en procariontes tenemos un gen que se va a transcribir a un ARNm y ese se va a traducir en una proteína. Sin embargo en eucarintes en el gen tenemos intrones y exones (intrones no codificantes) el gen se va a transcribir a ese ARN el que llamaremos transcripto primario (donde se transcriben tanto intrones como exones), pero para tener una proteína que luego sea funcional vamos a necesitar que esos intrones luego sean eliminados. Para tener un ARN maduro al ARNm se le debe hacer procesamientos para que pueda ser traducido a una proteína, se le tiene que adicionar una caperusa en el extremo 5’, se tienen que cortar los intrones y empalmar los exones (splicing) y tiene que sufrir la poliadenilacion en el extremo 3’.
Una diferencia importante entre los arnm de los procariontes y los arnm de los eucariontes es un arnm procarionte puede codificar para diferentes proteínas mientras que los eucariontes solo pueden codificar para una proteína. 
La fosforilación en el dominio C-terminal de la cola de la polimerasa van a orquesatar el procesamiento del pre-arnm, estas fosforilaciones ocurren en cerinas 2 y 5. Si se fosforila las cerinas en la posición 5 se van a reclutar factores necesarios para la adición de la caperusa, si además se fosforila la cerina en la posición 2 se van a reclutar proteínas necesarias para la maduración del arnm (intervienen en el splicing), si se desfosforilan las cerinas que están en posición 5 se van a reclutar proteínas que van a intervenir en el final del procesamiento del extremo 3’, es decir, la poliadenilacion en el extremo 3’. 
1- Adicion de la caperuza en el extremo 5’: la cola de la arn polimeraasa se fosforila en la cerinas de la posición 5 que reclutan a factores necesarios para la adición de la caperuza, el extremo 5’ del arn naciente esta libre, por medio de una fosfatasa se va a escindir un grupo fosfato de ese extremo, por una guanil transferasa se va a añadir una guanosina y por una metiltransferasa a esa guanosina se va a añadir un grupo metilo en la posición 7, de esta manera el extremo 5’ del arn naciente va a incorporar una 7metilguanosina, el tipo de unión entr la guanosina y el transcripto primario va a ser 5’-5’, también a esta 7-metilguanosina se le va a añadir un complejo CBC que es un complejo proteico que se lo conoce como proteína de unión a la caperuza. Esta unión con el complejo CBC va a permitir el correcto procesamiento del arnm y la exportación del arnm al citosol. La adición de la caperuza va a proteger al arnm de la posible degradación por medio de enzimas como exonucleasas, va a indicar cual es el extremo 5’ cuando el arnm llegue al citosol, tiene que ser reconocido e identificado por los ribosomas para poder iniciar así la taduccion de este mensajero, además esta caperuza va a permitir que se distingan arnm de otros tipos de arn
2- Corte y empalme: la cola de la polimerasa se tiene que fosforilar en la cerinas que se encuentran en la posición 2 y 5 que va a reclutar las proteínas necesarias para este proceso. Los intrones son secuencias muy largas no codificantes que cumplen varias funciones, una importantes es que cuando la polimerasa produce la replicación del adn muchos de los errores pueden caer en estas grandes secuncias de intrones y transformarse en mutaciones o de lesiones que son silenciosas, ósea que no van a afectar a obtener una proteína normal; por otro lado también son importantes porque los transcriptos de muchos genes pueden cortar y empalmar de maneras diferentes dando lugar a proteínas distintas de acuerdo a los tejidos que se encuentren y siempre partiendo del mismo gen (alfatropomiosina), esto se conoce como corte y empalme alternativo de arn, aumenta el numero de proteínas expresadas por un único gen eucarionte. En el intrón ocurre un reordenamiento de las bases dejando un aA desapareada que se conoce como punto de ramificación, y va a exponer un oxidrilo que esta en la posición 2, este oxidrilo es muy reactivo y va atacar la unión entre el exón 5’ y el intrón, se produce el corte quedando libre el exón 5’ que va a exponer un OH libre que va a atacar la unión entre el intro y el exón 3’, va a producr el corte y de esa manera se va a desprender en forma de laso el intrón (el cual va a ser degradado), luego el exón 5’ y 3’ se van a empalmar. Para saber cuales son las secuencias que se deben cortar, son secuencias consenso que van a indicar cuales debe ser los sitios de corte entre el exón y el intrón. 
El corte de los intrones y el empalme de los exones esta catalizado por arn, en este caso los ARNsn (pequeños nucleares) son los encargados de catalizar el splicing, estos arnsn se van a unir con proteínas formando lo que se conoce las ribonucleopreoteinas pequeñas nucleares (snRPN) esto va a formar un complejo que se conoce como el espliceosoma, este ultimo es el que va a catalizar el corte de intrones y el empalme de intrones. Esto ocurre porque existe una ribonucleoproteina que es la U1 que va a reconocer el sitio de corte entre el exón 1 y el intrón, se va a unir a este sitio en forma energéticamente favorable (unión por complementariedad de bases), por otro lado hay otra proteína que es la de unión al sitio de ramificación que reconoce la adenina que luego va a quedar desapareada y se une a ese sitio. La U2 desplaza a la proteína de unión del sitio de ramificación y se va a unir en un proceso que es energéticamente desfavorable necesita atp, porque en este proceso se va a desaparear la A. luego se van a unir otras ribonucleo proteína u4 u6 y u5 que van a contribuir para la formación del lazo. Va a quedar así determinado un sitio activo que es la A desapareada y esa adenian va a atacar al sitio de corte entre el exón 5’ y el intrón produciendo el corte, de esa manera queda un OH libre en el 5’ que va a atacar al sitio de unión entre el exón 3’ y el intrón, ahí se produce el corte y luego la otra ribonucleoproteina u5 va a permitir que se acerque los dos exones 5’ y 3’ y por medio de hisdrolisis de atp va a ocurrir la uion de ambos exones, quedando el fragmento de arnm y el lazo de intrones que luego va a se degradado en el núcleo y las ribonucleoproteinas van a ser recicladas. 
Existen dos tipos de proteínas 1 que son proteínas ricas en serina-arginina (SR) que se van a ubicar en los exones (lo reconocen) para evitar que estos sean degradados para protegerlos. Hay unos complejos proteicos que son ribonucleopreoteinas nucleares heterogéneas hnRNP que se van a unir a los intrones, secuencias muy largas que se van a enrrollar y estos complejos lo van a evitar , de esa manera estas proteínas van a indicarle a las ribonucleoproteinas que van a formar parte del espleceosoma donde se tienen que ubicar. 
Durante la maduración del arnm se pueden cometer errores, por ejemplo se puede saltar un exón o se pueden introducir en un exón señales de cortes y por lo tanto tenemos un fragmento de un exón. Todo esto me van a dar proteínas defectuosas que me van a llevar a una patología. 
3- Poliadenilación en 3’: la cola de la arn polimerasa se debe desfosforilar en las serinas de ubicación 5’ que va a reclutar las proteínas necesaria. El arn que se va transcribiendo hacia el final va a tener una secuencia consenso rica en A y U, de 10 a 30 nucleotidos posteriores a esta secuencia presenta una secuencia de corte, es allí donde se va a producir el corte se va a liberar este arn de la polimerasa el cual ya tiene la caperusa para impedir la degradación. En el extremo 3’ una poli a polimersa va a agregar una cola de adenina, y almismo tiempo se van a añadir unas proteínas de unión a la poli a, las cuales van a determinar la longitud de la cola, aproximadamente se van a agregar unas 250ª en el extremo 3’, esto no esta codificado en el genoma pero sirve para proteger el arnm de la acción de exonucleasas. Por otro lado la polimerasa sigue sintetizando arnm porque todavía esta unida al adn, esa cadena de mensajero que sigue sintetizando la polimerasa es rica de A y U y como carce la caperuza va a ser degradad por exonuclesas y eso va a determinar el final de la transcripción, se desensambla el complejo y la polimerasa se va a ir a transcribir otro rna. 
El proceso de transcripción esta muy regulado por proteínas que son mediadoras o activadores, hay algunas que son activadoras que regulan la expresión génica.. etc
Como salen del núcleo los arnm maduros: una vez que el pre-arnm fue procesado correctamente y esta listo para ser exportado al citoplsma este arnm va a salir selectivamente del núcleo a través de un complejo que se conoce como el complejo de poro nuclear, este proceso de exportación del arnm requiere de energía. 
Transcripto primario tiene exones e intrones
Traducción
En el citoplasma ocurre el desensamblaje de la proteína CBC que recubría a la caperuza que estaba en el extremo 5’ gracias a los factores de inicio de síntesis de proteína, luego este arnm va a ser reconocido por el extremo 5’ por el ribosoma y allí va a comenzar el proceso de traducción
La traducción es el proceso mediante el cual se traduce la secuencia lineal de nucleótidos del arn a una secuencia lineal de aminoacidos correspondientes a una proteína, la forma química es diferente y el lenguaje también es diferente.
El arnm esta formado por 4 nucleotidos y con esos 4 se tendrían que producir las combinaciones necesarias para obtener los 20aa que pueden formar parte de una proteína. 
Hipótesis de la secuencia: tenia que haber una relación entre la ordenacion lineal de nucleótidos en el adn y la ordenación lineal de aminoaciodos en los polipéptidos. 
Los investigadores establecieron un código genético en el cual cada aa esta codificado por 3 bases nucleotídicas. 
Podemos definir al código genético como un conjunto de normas por la que la información codificada en el material genético se traduce en proteínas. Este código genético esta formado por un codon (codon triplete de nucleótidos), el codon es un código genético redundante, significa que cada aminoacido esta codificado por un codon o varios codones. Otra característica es que el código genético es que es universal (común a todos los orgaismos), las mitocondrias tienen un código genético propio. 
En el código genético podemos encontrar alguno codones particulares, hay uno que es el codon de inicio, es el codon a partir del cual comienza la síntesis de proteínas el cual tiene que reconocer la subunidad menor del ribosoma para iniciar la síntesis de proteína, es el codon AUG que codifica para metionina en eucariontes y para formilmetionina en procariontes.
También hay otro codon que se lo conoce como codon stop, es el que le indica al ribosoma que se tiene que detener la síntesis de proteína hay tres UAA, UAG, UGA, estos codones no codifican para ningún aminoacido. 
El marco de lectura es como se lee la secuencia de arnm, si tenemos una secuencia la podemos leer desde tres posiciones distintas, pero solo una lectura nos va a dar la proteína correcta, y cada lectura diferente me da una proteína diferente. Entonces para realizar la lectura se comiencza por el codon de inicio, en base a eso siempre obtendremos la proteína correcta. 
El arnm solo no puede traducir que aa se tiene que incorporar en la cadena polipeptídica naciente, para ello necesita una molécula adaptadora o mediadora, esta molécula es el arnt por lo tanto podemos definir al arnt adaptadora o mediadora entre el ernm y el aminacido. El arnt es una molécula de simple cadena formado por 80 nucleotidos, se sintetiza en la transripcion con el arn polimerasa III catalizando la síntesis, el arnt debe sufrir un proceso de maduración para poder salir del núcleo donde se empalman los exones y se cortan los intrones el proceso esta catalizado por distintas enzimas. La molécula simple de ARNt se puede plegar y en ese plegamiento se pueden distinguir 4 zonas son zonas apareadas (De doble cadena que se estabilizan por pte de h y fdV) hay también 4 zonas desapareadas donde podemos identificar el extremo 3’, la zona de anti-codon que es la que se aparea con el codon complementario del arnm, se encuentran otras dos zonas desapareadas que son importantes para estabilizar el plegamiento de la arnt, en estas zonas desapareadas algunas bases pueden sufrir modificaciones covalentes que van a contribuir a el plegamiento del arnt. En dos dimensiones el arnt se asemeja a una hoja de trebol pero en el espacio tiene forma de L. 
El código genético es redundante quiere decir que el mismo aminoacido puede ser codificado por mas de un codon y esto quiere decir que algunoas aminoacidos tienen mas de un ARNt. En todos los aa las dos primeras bases para cada anticodón son iguales lo que significa que las dos primeras bases del anticodón de ese arnt son posiciones restrictivas, si esas bases no son iguales no se pueden unir al codon del arnm, en cambio la tercera base puede ser distintas (base de blanco o tolerancia) a pesar que no sea la base complementaria que esta en ese arnm igual ese anti-codon se puede unir por complementariedad al codon del arnm. 
Código genético no es sinónimo de genoma. El código genético no es mas que un patron/ordenamiento de como cada aa es codificado por sus respectivos codones, en cambio el genoma es la carga genética de un organismo. 
Como elige el arnt al aa que va a incorporar: exite una enzima especifica para cada aa que va a catalizar el proceso de unión del aa con el arnt que le corresponde, esa enzima se llama aminoacil-ARNt sintetasa. Esta enzima cataliza este proceso de incorporación del aa al arnt en dos pasos:
1-activacion: En un primer paso ocurre lo que se conoce la activación del aa con gasto de energía y el aa se une a una adeninaribosafosfato
2-transferencia: Ocurre un segundo paso que es la transferencia del aa al arnt, en ese proceso se rompe el enlace entre el aa y la adenina ribosafosfato, esa energía del enlace que se rompió es la necesaria para producir la síntesis entre el aa y el OH que esta en el extremo 3’ del arnt de esa manera el arnt queda cargado con el aa que le corresponde. 
Cada aa tiene su aminoacil ARNt sintetasa es decir que van a existir 20 de esas enzimas una para cada aa. El reconocimiento de la enzima por el arnt es un reconocimiento especifico porque se da por complementariedad molecular, la incorporación del aa al arnt es también preciso no solo porque existe una enzima para cada aa sino que la enzima también tiene un proceso para la corrección de errores. Este proceso se conoce como edición hidrolítica, la enzima posee dos bolsillos uno donde se produce la unión del aa al arnt y otro bolsillo que se conoce como sitio de corrección, entonces cuando se une el aa al arnt se fuerza a que el aa pase al segundo bolsillo, si el aa que se incorporo al arnt es el correcto no puede pasar al otro bolsillo, pero si es el incorrecto cuando se fuerza a que el aa pase al bolsillo de corrección el aa pasa y cuando pasa ocurre la hidrolisis entre la unión del aa y el arnt, se libera el arnt y este ultimo se puede volver a cargar por el aa correcto. 
El código genético puede ser traducido por dos series de adaptadores que actúan en forma secuencial, uno es la aminoacil ARNt sintetasa que va a permitir la incorporación especifica del aa que le corresponde a ese arnt y la segunda es la unión por complementariedad molecular entre el anticodón y el codon que esta en el arnm.
El encargado de decodificar el mensaje del arnm es el ribosoma, estos últimos son complejos macromoleculares formados por arn ribosomal y proteínas. Palade diferencio a los adn ribosomal por centrifugación diferencial y los nombro de acuerdo consu velocidad de sedimentación. Tanto en procariontes como en eucariontes están formados por dos subunidades una mayor y otra menor. El arn ribosomal que forma parte de estos complejos que forman parte del ribosoma son sitentizados por el proceso de transcripción y en el caso de los eucariontes el proceso ocurre en el núcleo catalizado por la arnpolimerasa I. estos ribozomas son complejos macromoleculares con funciones catalíticas (ribozimas), la sub unidad mayor cataliza los enlaces peptídicos y la subunidad menor sirve como soporte para que se aparee el arnt y el arnm, cuando ambas subunidades se ensamblan encontramos cuatro sitios, un sitio que va a ser el sitio de unión al arnm que esta en la subunidad menor, otro sitio llamado A que es donde se une el arnt cargado con el aa que luego se va a incorporar a la cadena polipeptídica naciente, un sitio P donde vamos a tener el arnt cargado con la cadena polipeptídica naciente y un sitio E que se lo conoce como sitio de expulsión, donde vamos a encontrar al arnt que ya sedio su aa que e va a expulsar del ribosoma para que se vuelva a cargar de otro aa y vuelva a iniciar la síntesis de proteína. 
Traduccion del ARNm: lo primero que pasa es que la subunidad menor del ribosoma va a reclutar un arnt iniciador unido a metionina, también va a reclutar a una proteína que es un factor de inicio de la traducción que tiene actividad de GTPasa este complejo es capaz de reconocer el extremo 5’ del arnm, se une al arnm y comienza a leer la secuencia del mismo. Este complejo lee la secuencia del arnm hasta que encuentra el codon de inicio, cuando llega hasta ahí se une el arnt iniciador se une por complementariedad molecular, se produce la hidrolisis del factor de inicio de la traducción, se libera este factor y esto permite el ensamblaje a la subunidad mayor del ribosoma a la subunidad menor, donde quedan determinadas el sitio A que esta libre, el P que esta unido con el arnt iniciador con la metionina y el sitio E que también esta libre. Luego otro aa que esta unido a un arnt se va a unir al sitio A y se va a fromar el primer enlace peptídico entre ese aa y la metionina que estaba en el sitio P.
Ese primer enlace peptídico se forma con el grupo amino del aa del sitio A atacando el grupo carbonilo del aa del sitio P, se rompe el enlace del carbonilo al oxigeno del arnt del sitio P, quedan unidos los dos aa al arnt del sitio A. los aa siempre se van a añadir por el extremo C-terminal de la cadena polipeptídica en crecimiento. 
El proceso contina con la elongación de la cadena polipeptídica, el ribosoma sigue leyendo el arnm lee el codon siguiente, recluta un nuevo arnt con un aa, ese aa recién incorporado que entra en el sitio a, es el que va a producir el corte entre la cadena polipeptídica y el arnt del sitio P, la cadena polipeptídica se engancha al aminoacido del arnt que esta en el sitio A, luego se produce la traslocación de la subunidad mayor y la traslocación de la subunidad menor, y de esa manera el sitio A queda nuevamente libre, la cedena polipeptídica unido al arnt en el sitio P y en el sitio E queda el arnt vacio que va a ser eliminado. Este ciclo se repite las cantidades de veces necesarias hasta llegar al codon stop.
Tenemos factores de enlogancion que van a controlar todo el proceso: tienen la función de controlar la del aa al ARNt y también chequean la unión del codon con el anticodón. Tenemos un primer factor de elongación que lo que va a hacer es unirse al arnt que va a ingresar en el sitio A que esta cargado con el aa, ese factor de enlogancion tiene actividad de GTPasa, cuando se une el factor de elongacion al arnt cargado con el aa que va a incorporar el el sitio A lo que va a producir es una distorsión en el arnt, y al unirse al sitio A la distorsión aleja al arnt con el aa de la cadena polipeptídica naciente impidiendo de esa manera la síntesis proteica. Luego ocurre el chequeo del factor de elongación para ver si la unión anticodón es correcta y si el aa que esta transportado el arnt es correcto, una vez chequeado se produce la hidrolisis del GTP, esto hace que el factor de elongación cambie la conformación, se disocie del arnt cargado con el aa que va a ser incorporarado en el sitio A y esto produce que se acerque el aa a la cadena polipeptídica naciente, y allí la subunidad mayor del ribosoma puede catalizar la síntesis de la cadena polipeptídica. 
Una vez que se produjo la síntesis del enlace peptídico entre el aa del sitio A y la cadena polipeptídica naciente ocurre la traslocación de la subunidad mayor del ribosoma, en ese momento aparece otro factor de elongación que también tiene actividad de GTPasa y se va a uicar en el sitio A, este factor de elongación lo que va ahacer es hidrolizar el GTP y con esa energía va a impulsar a la suunidad menor para que también trasloque a lo largo de la cadena de arnm, este factor de elongación va a impulsar la traducción, mejora su precisión y aumenta la exactitud del proceso. 
El ribosoma cuando llega a un codon stop la traducción se tiene que detener, el proceso se hace con el ribosoma leyendo el codon stop, como el codon stop no codifica a ningún aa significa que no existe un arnt que se pueda unir por complementariedad a este codon, sin embargo existe una proteína que se llama proteína de unión del factor de liberación al sitio A, que tiene una estructura muy similar al arnt esto le permite a la proteína unirse por complementariedad molecular al codon que esta en el sitio A del ribosoma, y esto permite que se rompa el enlace entre la cadena polipeptídica naciente y el arnt que se encuentra en el sitio P del ribosoma. A pesar que se rompa el enlace la cadena polipeptídica naciente no se puede unir a ningún aa en el sitio A, ya que esta proteína no es ningún arnt que transporta un aa, esto permite que la cadena polipetidica naciente se libere del complejo formado por el ribosoma, se produce entonces la traslocación de la subunidad mayor del ribosoma, cuando trasloca en el sitio P queda la proteína de unión de factor de liberación del sitio A y como no tiene ninguna cadena polipeptídica unida hace que ocurra un cambio conformacional en el complejo que formaban las dos subunidades del ribosoma y permite el desensamblaje de ambas subunidades, esto marca el final de la traducción, se desensambla toda la estructura y se libera al arnm.
Un mismo arnm puede ser traducido simultáneamente por vario s ribosomas donde cada uno va a sintetizar a la misma proteína donde vamos a obtener múltiples unidades de moléculas de proteína y a esto se lo llama polirribosoma. 
Exiten algunos aa que van a estár modificados con es la selenocisteina que se le ha agregado selenio, esta puede formar parte también de la estructura primaria de una prteina, puede formar parte de los sitios activos de algunas enzimas, durante la síntesis proteica debe ser colocada la selenocisteina a la cadena polipeptídica, sin embargo ese implica que tenemos un aa numero 21 y que exite un arnt especifico para la selenocisteina cuyo anticodón es ACU, sin embargo no exite una anzima aminoacil ARNt sintetaza especifica que permita unir selenocisteina a este arnt (solo hay 20 encimas), por ello para poder selenocisteina a esta rnt especifico se va a utilizar la serril-arnt sintetasa que es capaz de catalizar la unión de serina, el arnt se va a unir la serina por esta enzima al arnt y luego por una enzima se convierte la serina en selenocisteina, y así ttenemos el arnt con el aa selenocisteina. El codon del arnt es de estop entonces el ribosoma dependiendo del contexto va a incorporar la selenocisteina o va a finalizar la traducción. 
Como sabe el ribosoma si tiene que incorporar selenocisteina o parar la traducción, si el codon esta codificando para selenocisteina el arnm tiene una señal especifica para el ribosoma que le indica que allí debe incorporar selenocisteina, además ese mensajero va a tener un sitio de unión para un factor de traducción especifico de la selenocisteina que tiene actividad de GTPasa, cuando el ribosoma lee el codon UGA