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Tejidos, órganos y sistemas BBI ¿Qué es un tejido? ¿Qué tipos de tejidos conocen? ¿Dónde los encuentran? ¿Cuáles son sus funciones? Objetivos generales de la unidad ● Clasificar los distintos tipos de tejidos del cuerpo humano e introducirse en el estudio histofisiológico. ● Diferenciar los distintos tejidos que componen los órganos y sistemas del cuerpo humano. Conocer sus características y funciones específicas.. ● Conocer los principios básicos de microscopía y técnicas histológicas. Objetivos específicos. ● Describir los pasos para realizar el procesamiento de una muestra biológica para su observación histológica. ● Conocer los modos de procesamiento del material histológico. ● Definir que es un tejido. Clasificar los tejidos humanos. Ejemplificar funciones biológicas de estos tejidos y relacionarlos con su estructura. ● Conocer las características morfológicas y funcionales de los tejidos epitelial y conectivo. Cúmulo de células organizadas para realizar una o más funciones específicas. Es decir, es un conjunto de células que funcionan de manera colectiva. Los tejidos forman los diversos órganos del cuerpo. TEJIDO ¿Cómo hacen las células para trabajar en conjunto? Uniones intercelulares: Comunicantes, Adherentes, Ocluyentes Receptores específicos de membrana UNIONES ENTRE CÉLULAS Tejidos básicos 1) Epitelial: reviste la superficie del cuerpo, cavidades corporales y forma glándulas. 2) Conectivo/Conjuntivo: subyace y sustenta a los otros 3 tejidos, estructural y funcionalmente. 3) Muscular: compuesto por células contráctiles, responsable del movimiento. 4) Nervioso: recibe, transmite e integra información del medio externo e interno. Controla las actividades del organismo. Todos los órganos están compuestos de estos 4 tejidos básicos. Al conocer cada uno de ellos y sus subtipos es posible apreciar la histología de los diversos órganos y cómo operan como sistemas integrados. TEJIDO EPITELIAL Coexistencia de tejidos ¿Cómo hacemos para poder ver un tejido? ¿ Y por qué lo hacemos? Técnica histológica Es la secuencia de pasos a la que se somete un material orgánico, a fin de posibilitar su estudio al microscopio. 1) Obtención de la muestra 2) Fijación 3) Deshidratación 4) Aclarado 5) Inclusión 6) Cortes 7) Tinción H IS T O Q U IN E T E 1) Obtención de la muestra 1)Necropsia 2)Biopsia ● Incisional ● Escisional (exéresis) ● En sacabocado ● Endoscópica ● Punción: percutánea, aspiración ● Raspado: se extraen capas superficiales. Vaginal, uterino, piel ● Detiene el metabolismo celular ● Evita la acción lisosomal y la autolisis ● Preserva la morfología y la composición química de los tejidos, lo más parecido a su estado in vivo ● Elimina patógenos ● Endurece tejidos y facilita la delgadez de los cortes Cualidades que debe tener un fijador 1. Actuar con rapidez fijando a las células antes de los fenómenos postmortem 2. Poseer alto poder de penetración hasta las capas profundas 3. Conservar los detalles estructurales que presentaban in vivo 4. Permitir el empleo de los procedimientos necesarios para su observación ulterior (ejecución de cortes, coloración) 5. No provocar estructuras artificiales 6. No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos 2) Fijación ● Desecación: reduce la proporción de agua del producto y la proliferación bacteriana. Se usa en frotis y extendidos (FSP, aspirado de MO). En histología deteriora tejidos, disuelve lípidos, coagula proteínas. ● Congelación: Proceso más rápido, y preserva adecuadamente tejidos. Se usa intra quirúrgicamente para determinar presencia de enfermedad, límite de resección. Fijadores físicos Fijadores químicos ❖ Simples - Formaldehido al 37% (formalina/formol) (microscopio óptico): Conserva la estructura general de la célula al reaccionar con los grupos amino de las proteínas. Limitaciones: No reacciona con lípidos: no es buen fijador de membranas. Se pierden sustancias hidrófilas: glucógeno, glucosaminoglucanos, proteoglucanos. Se pierden moléculas pequeñas: iones, glucosa, ácidos nucleicos pequeños (ARN de transferencia). - Glutaraldehido, tetraóxido de osmio (microscopio electrónico). ❖ Compuestos: Líquido de Fleming (cromo, osmio, ácido acético), otros. 3) Deshidratación: alcoholes de concentración creciente para eliminar el agua que contenga ya que la parafina no es miscible con agua. Se utiliza etanol 70%, 80%, 96% y 100%. 4) Aclarado: solventes que producen transparencia en los tejidos, además de solubilizar la parafina. Entre ellos se encuentran el xileno y el tolueno. 5) Inclusión: en PARAFINA. Se sumerge la muestra, se lleva a estufa unos minutos para que la parafina penetre en los tejidos. Luego se enfría bruscamente colocando el recipiente en hielo. Se obtiene el TACO. 6) Cortes Se realizan con micrótomo. Luego se realiza el montaje de las láminas en un portaobjetos. A esta altura el preparado es prácticamente transparente, por lo que debemos colorear. Para ello debemos previamente desparafinar y rehidratar dado que la mayoría de los colorantes son de base acuosa. Desparafinación: Xileno Hidratación: Etanol concentraciones decrecientes (100%, 96%, 80%, 70%). Tacos con tejidos incluidos en parafina y cortes en micrótomo 7) Tinción / Coloración La hematoxilina y la eosina son los colorantes de uso más frecuente. El primero como colorante nuclear y el segundo como colorante de contraste Hematoxilina: colorante básico que tiñe estructuras ácidas (elementos basófilos) Eosina: colorante ácido que tiñe estructuras básicas (elementos acidófilos) Componentes Basófilos (afinidad por lo básico) Ácidos nucleicos (grupos fosfato) ● Núcleo y nucleolo ● Ribosomas ● REG Componentes Acidófilos ( afinidad por lo ácido) Proteínas (grupos amino) ● Citosólicas, de exportación, y extracelulares ● Mitocondrias (elevado contenido proteico) Componentes H-E negativos (neutros) ● Lípidos ● H de C: Aparato de Golgi (glicosilación de proteínas) ● H20 Composición química de las muestras histológicas Los componentes que perduran tras la fijación son principalmente moléculas grandes que no se disuelven con facilidad. ● Nucleoproteínas: ácidos nucleicos unidos a proteínas ● Proteínas intracelulares del citoesqueleto ● Proteínas extracelulares en grandes aglomeraciones insolubles, como las fibras de colágeno. ● Complejo proteína-fosfolípido o carbohidrato de la membrana. Tinciones especiales Hidratos de Carbono: Acido Periodico + reactivo de Schiff (PAS) Lípidos: Tinción de Sudán en cortes por congelación Membrana basal(proteoglucanos) Células intestinales productoras de glucoproteínas Aparato de Golgi Glucocali x H-E H- PAS Microscopía Microscopio óptico (MO) - La luz del foco del MO atraviesa un condensador, encargado de concentrar los rayos luminosos, hacia la muestra. - La luz atraviesa la muestra y luego un juego de lentes (que corresponden a los objetivos y al ocular) desviando la luz de manera que la imagen de la muestra se magnifica cuando se proyecta hacia la retina del observador. - El MO aumenta hasta 1000 veces el tamaño real de un objeto . - Para saber cuántas veces aumenta la imagen del objeto observado, se multiplica el aumento del ocular por el aumento del objetivo que se esté usando. - Por ejemplo: si el aumento del ocular es 10X y el del objetivo utilizado es de 40X, el aumento total es: 10 multiplicado por 40, o sea, 400 veces (400X). Límite de resolución Escala de observación Instrumento que aumenta eltamaño de una imagen para ver estructuras que a simple vista no veriamos, y permite ver más detalles Magnificación: capacidad para aumentar el tamaño Límite de resolución: distancia mínima entre dos puntos para que puedan distinguirse Poder de resolución: capacidad que tiene un instrumento para distinguir dos puntos cercanos como imágenes separadas INVERSAMENTE PROPORCIONALES Microscopio electrónico de transmisión (MET) Microscopio electrónico de barrido (MEB) Microscopio Electrónico Utiliza la interacción de un haz de electrones con la muestra para producir una imagen. Mayor poder de resolución lo que permite ver organelas. Distinta técnica histológica: inclusión en resinas sintéticas. -El haz de electrones atraviesa la estructura -Imagen 2D -El haz de electrones rebota -Imagen 3D Tejido epitelial Describan con sus palabras…¿Qué ven en estas imágenes? ¿Qué les llama la atención? Seguimos observando… Tejido epitelial de revestimiento EPITELIO (epi: sobre, cobertura; telio: papila) ● TAPIZA la superficie del cuerpo. ● RECUBRE las cavidades corporales y los órganos huecos internamente. ● Forma las glándulas. ● En contacto con un LUMEN. Tejido epitelial - Características generales Constituido por células dispuestas en láminas, muy cerca y adheridas entre sí, con ESCASA MATRIZ EXTRACELULAR Diferentes morfologías celulares, en UNA O VARIAS CAPAS Recambio constante: agresión constante Las células epiteliales tienen una POLARIDAD bien definida: región apical, lateral y basal. Estas presentan especializaciones Está sobre una MEMBRANA BASAL: capa que separa el tejido epitelial del conectivo Es AVASCULAR: se nutre y se inerva a través del conectivo subyacente FUNCIONES: Barrera selectiva, protección, secreción, absorción, transporte Tejido epitelial - Clasificación MORFOLOGÍA CELULAR PLANO P CÚBICO CILÍNDRICO NÚMERO DE CAPAS SIMPLE (UNA CAPA): todas las células toman contacto con la MB ESTRATIFICADO (MÁS DE UNA CAPA) ESPECIAL ES PSEUDOESTRATIFICADO DE TRANSICIÓN Esta diversidad en la morfología de los distintos epitelios está en relación con el órgano donde se encuentra y la función que cumple ¿Cómo imaginan esto? Simples Ubicaciones típicas Función principal -Vasos sanguíneos y linfáticos: endotelio -Cavidades corporales: mesotelio -Alveolos pulmonares Intercambio -Conductos pequeños de glándulas exocrinas -Túbulos renales -Superficie del ovario Absorción Secreción Conducción -Estómago -Intestino delgado y grueso -Vesícula biliar Absorción Secreción PLANO (ESCAMOSO) CÚBICO CILINDRICO ( COLUMNAR) Estratificado Según la morfología de las células más superficiales: Plano estratificado ● Cornificado/queratinizado -Piel: Epidermis ● No cornificado/no queratinizado -Esofago -Vagina PIEL Piel gruesa con abundante queratina Plano estratificado no queratinizado Especiales Seudoestratificado ● Todas las células tocan la MB, epitelio simple. ● Se encuentra en cavidad nasal, tráquea, árbol bronquial y en epidídimo. ● Principal función: secreción y conducción (del aire que inspiramos, de líquido seminal). Especiales De transición/ polimorfo (Urotelio) ● Estratificado, con células en cúpula. ● Reviste las vías urinarias, desde los cálices renales hasta la uretra (proximal). ● Características especiales que le permiten distenderse.e Polaridad Región lateral ● Zonula ocluyente ● Zonula adherente ● Macula adherente/desmosoma s ● Uniones comunicantes/ nexo ● Repliegues Región basal ● Hemidesmosomas ● Contacto focal ● Repliegues Región apical ● Microvellosidades 1-2 um ● Estereocilios 10-120 um ● Cilios 5-10 um La más fuerte Región lateral Región basal Microvellosidades ● Las más pequeñas: 1-2 um ● Aumentan la capacidad absortiva ● Citoesqueleto de ACTINA: microfilamento que da rigidez ● Miosina: rompe ATP, capacidad contráctil ● Ancladas a la célula mediante el “velo terminal”: red de actina Túbulo renal. Las microvellosidades más largas: “Ribete en cepillo” Intestino delgado. Microvellosidades más pequeñas: “Chapa estriada” Estereocilios ● Son microvellosidades inmóviles, mucho más grandes: 10-120um ● Aumentan la capacidad absortiva, funcionan como sensores ● Citoesqueleto de ACTINA ● Las encontramos en el epidídimo, oído Cilias Evaginaciones plasmáticas ordenadas (“en corte militar”), de 5-10 um Estructura interna=axonema: microtúbulos dispuestos en dobletes. Se extienden desde los cuerpos basales: centro organizador de microtúbulos, derivado del centriolo . Proteína Dineína ATP asa, une los dupletes Son móviles: líquido y partículas sobre las superficies epiteliales Se encuentra en sistema respiratorio (tráquea, bronquios), en trompas uterinas, conducto colector renal, epitelio del ependimo (cavidades del LCR), epidídimo y otras Variedad: Flagelo, en la cola de los espermatozoides Cuerpos basales Imagenes para fijar Actividad - Casos clínicos epitelial Síndrome de cilios inmóviles: enfermedad autosómica recesiva con mutación del gen de la DINEÍNA. Ausencia de brazos de dineina. Problemas respiratorios con acumulación de moco, obstrucción y sobreinfecciones (disminución del transporte mucociliar). Esterilidad en los hombres. Poliquistosis renal Hidrocefalia: acumulación de líquido cefalorraquídeo. Pénfigo: enfermedad ampollar debido a autoanticuerpos contra los desmosomas, se rompen las uniones célula- célula. Referencia bibliográfica ● Pawlina, W., & Ross, M. H. (2012). Histología: Texto y atlas color con Biología Celular y molecular. Buenos Aires: Médica Panamericana. Capítulos 2,3,4,5 y 6 ● Sanchez Gonzalez, D. Trejo Bahena, N. (2007). Práctica de histologia. DF, México: Alfil. Capítulos 1, 6, 8 y 9 ● Kierszenbaum, A. L. Tres, L.L. (2016.) Histologia y biologia celular. Introducción a la anatomía patológica (4ta ed.) Barcelona, España: Elsevier. Capítulos 1 y 4 ¡MUCHAS GRACIAS!
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