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Marcadores geneticos Marcadores geneticos • Morfologicos • Bioquimicos – Grupos sanguineos – Proteinas plasmaticas • Moleculares – RFLP – Microsatelites – SNPs Marcadores geneticos • Morfologicos aa Aa Aa Marcadores geneticos • Bioquimicos – Grupos sanguineos – Proteinas plasmaticas Grupos Sanguíneos Factores Alelos A Aa, Ab, Ac, Ad, Ae, Af, Ag Aa, Aadf, Aadg, Ab, Abc, A bce, Ac, Acd, Ace, Ae, A- C Ca Ca, C- D Da, Db, Dc, Dd, De, Df, Dg, Dh, Di, Dk, DI, Dm, Dn, Do D adl, D adln, D bcm, D cgm, D cefgm, D cegimn, D del , Ddelo, D dln, D dfki, D dkl ,D dghm, D- K Ka Ka, K- P Pa, Pb, Pc Pa, Pac, Pb, P- Q Qa, Qb, Qc Q abc, Q ac, Qb, Qc, Q- U Ua Ua, U- Tabla 1 Grupos sanguíneos del equino http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/index.php/MMV/article/view/4879/4765 http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/index.php/MMV/article/view/4879/4765 Sistema Locus Alelos Albúmina Al A, B Fosfatasa ácida AP F, S Anhidrasa carbónica CA F, I, L, O, S Catalasa Cat F, S NADH diaforasa Dia F, S Esterasa Es F, G, H, I, S Peptidasa A Pep A F, S Prot. ligante Vit. D Gc F, S Hemoglobina Hb A, BI, BII Postalbúmina Xk F, K, S 6-fosfogluconato dehidrogenasa PGD D, F, S Fosfoglucomutasa PGM F, S, V Fosfohexosa isomerasa PHI F,1, S Inhibidor Proteasa Pi F, G, I, L, N, P, Q, R, S1 S2 T, U, V, W, Z Transferrina Tf D, F1, F2, H, M, O, R http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/index.php/MMV/article/view/4879/4765 Tabla 2 Proteinas plasmaticas en equinos http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/index.php/MMV/article/view/4879/4765 Marcadores geneticos • Moleculares – Polimorfimo de longitud de fragmentos de restriccion (RFLP) – Microsatelites (STR) – Polimorfismos de nucleotide simple (SNP) – Otros: RAPD, AFLP, SCARS, etc. RFLP Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción Moleculares – RFLP Moleculares – RFLP Moleculares – RFLP Marcadores Moleculares • Microsatelites • Son altamente polimórficos • Son muy abundantes y están distribuidos por todo el genoma • Son de herencia codominante (se distinguen todos los homocigotos entre sí y estos de los heterocigotos) • Son muy reproducibles • Se necesita poco ADN para detectarlos • Su automatización es fácil • Alta tasa de mutacion (desventaja) Microsatelites Di-nucleotido: CACACACA Trinucleotido: ATGATGATGATG Alelo A: CACACACA (4 repeticiones de CA) Alelo B: CACACA (3 repeticiones de CA) Alelo C: CACA (2 repeticiones de CA) 8/4 6/6Genotipo Moleculares – STR Marcadores geneticos Figura 2. Lectura del locus YWLL 08 de alpacas para la determinación de parentesco utilizando la técnica de tinción con nitrato de plata (Uso de PCR simple). Lectura del locus YWLL 08 para la obtención de patrones alélicos. MPM = Marcador de Peso Molecular (Eco1471/PvuI) L1 = Blanco, L2 = Patrón alelos 134 y 166, L3 = Alegado Padre 2, L4 = Blanco, L5 = Cría, L6= Madre, L7 = Verdadero Padre y L8 = Patrón alelo 138. Rodriguez y colaboradores (2004) Rodirguez y colaboradores (2004) PCR Múltiple Microsatélites H(o) PIC PE PEa M1 LCA 19 0.702 0.709 0.548 0.9191 YWLL 29 0.787 0.786 0.634 YWLL 40 0.660 0.604 0.408 YWLL 46 0.383 0.307 0.174 M2 LCA 23 0.638 0.779 0.621 0.9286LCA 22 0.511 0.477 0.294 YWLL 36 0.894 0.852 0.733 M3 YWLL 43 0.304 0.639 0.452 0.9637LCA 5 0.809 0.744 0.575 YWLL 08 0.915 0.918 0.844 M1+M2+M3 10 Microsatélites 0.9998 Heterocigocidad observada (H(o)), contenido de información polimórfica (PIC) y probabilidad de exclusión individual (PE) y acumulada (PEa) de microsatélites utilizados para determinar parentesco y paternidad en alpacas Marcadores Moleculares • SNPs • Marcadores muy abundantes- permite un mapeo fino de los caracteres. • SNPs pueden ocurrir dentro de la secuencia de un gen y podria ser la mutacion causal de la variacion fenotipica del caracter. • Co-dominante • Varias tecnologias existen para genotipar los SNP – desde reacciones simples (ABI Taqman) hacia genotipado simultaneo de >50,000 SNPs (Affymetrix) • Gen Chip (SNP portability) • SNPs son los marcadores moleculares modernos. • Bialelicos Polimorfismos de un solo nucleotido SNPs Identificacion y genotipado de SNPs ADN Productos PCR SNP (C/T) Amplicacion especifica-gen Secuenciamiento Frecuencias alelicas x y yx x SNPs con frecuencias alelicas moderadas Genotipado de individuos PCR-RFLP SNPs SNPs
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