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Página Principal / Mis cursos / viro / Duodécima semana / Evaluación de trabajos prácticos Pregunta 1 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 2 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 3 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Comenzado el martes, 8 de diciembre de 2020, 08:00 Estado Finalizado Finalizado en martes, 8 de diciembre de 2020, 08:42 Tiempo empleado 41 minutos 28 segundos Puntos 14,42/15,00 Calificación 9,61 de 10,00 (96%) Comentario - Alcanzó la calificación mínima para aprobar En cuanto al ELISA para la detección del HBsAg (marcar la opción incorrecta): Seleccione una: a. La policubeta de 96 pocillos está recubierta con anticuerpos anti HBs. b. Si la muestra del paciente contiene HBsAg se desarrolla color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reacción. c. Luego del agregado del revelador, e incubación de la placa a temperatura ambiente, se debe realizar un último lavado para eliminar los posibles interferentes de la reacción. Incorrecto. En esta etapa si se elimina el líquido de reacción no se podrá poner en evidencia si la reacción es positiva o negativa. d. Un resultado no reactivo no excluye la posibilidad de infección con el virus de la hepatitis B ya que el Ag puede encontrarse a una concentración inferior a los límites de detección de la técnica. Respuesta correcta La respuesta correcta es: Luego del agregado del revelador, e incubación de la placa a temperatura ambiente, se debe realizar un último lavado para eliminar los posibles interferentes de la reacción. La función de los iones divalentes de magnesio en las reacciones de PCR es: Seleccione una: a. Otorgar densidad a la mezcla de reacción. b. Ser el sustrato de la enzima. c. Ser el cofactor de la enzima ADN polimerasa. d. Mantener el pH adecuado en el medio para el funcionamiento de la ADN polimerasa. Respuesta correcta La respuesta correcta es: Ser el cofactor de la enzima ADN polimerasa. En la técnica de titulación viral por el método de dilución límite y punto final el control que se realiza en la placa de trabajo, para validar los resultados obtenidos, está formada por los siguientes componentes: suspensión celular, medio de cultivo y una alícuota del stock viral sin diluir. Seleccione una: Verdadero Falso La respuesta correcta es 'Falso' https://entornovirtual.unl.edu.ar/ https://entornovirtual.unl.edu.ar/course/view.php?id=418 https://entornovirtual.unl.edu.ar/mod/quiz/view.php?id=299669 Pregunta 4 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 5 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 6 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 El colorante SYBR Safe es un agente que se intercala en las moléculas de ADN. Seleccione una: Verdadero Falso La respuesta correcta es 'Verdadero' Los reactivos provistos por el fabricante de un kit de ELISA para detección de anticuerpos anti HIV-1 y anti HIV-2 son los siguientes (marcar la opción incorrecta): Seleccione una: a. Policubeta sensibilizada con antígenos recombinantes de HIV-1 y HIV-2 b. Buffer de lavado concentrado c. Acido clorhídrico 2N como stopper de la reacción En la reacción de ELISA se utiliza como stopper una solución 2N de ácido sulfúrico. d. TMB, como revelador e. Control negativo f. Control positivo g. Conjugado Respuesta correcta La respuesta correcta es: Acido clorhídrico 2N como stopper de la reacción Para correr los productos de PCR en un gel de agarosa, las muestras se siembran utilizado un buffer de muestra conteniendo glicerol y azul de bromofenol. Indique cuál es la función de cada uno de estos componentes. El azul de bromofenol No corresponde a ninguno de las opciones El glicerol marca el frente de corrida en el gel de agarosa. se intercala entre las hebras de ADN. otorga densidad a la muestra. Respuesta correcta La respuesta correcta es: El azul de bromofenol → marca el frente de corrida en el gel de agarosa., No corresponde a ninguno de las opciones → se intercala entre las hebras de ADN., El glicerol → otorga densidad a la muestra. Pregunta 7 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 8 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 9 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 En el siguiente esquema sobre el método de ELISA para la identificación de Anticuerpos tipo IgM, indique el nombre de cada componente, arrastrando cada cuadro de texto a su ubicación correspondiente. Respuesta correcta Complete la siguiente afirmación, seleccionando la opción correcta en cada caso: Dos cultivos celulares, de igual concentración inicial, de la línea UFL-AG-286 son infectados con un stock del virus de la poliedrosis nuclear múltiple de Anticarsia gemmatalis a diferentes MOI (0,1 y 10 DICC .célula ). Al cabo de 5 días de incubación, se observa que en el cultivo infectado a una menor MOI hay una y de células que presentan efecto citopático. 50 -1 mayor densidad celular menor proporción Respuesta correcta La respuesta correcta es: Complete la siguiente afirmación, seleccionando la opción correcta en cada caso: Dos cultivos celulares, de igual concentración inicial, de la línea UFL-AG-286 son infectados con un stock del virus de la poliedrosis nuclear múltiple de Anticarsia gemmatalis a diferentes MOI (0,1 y 10 DICC .célula ). Al cabo de 5 días de incubación, se observa que en el cultivo infectado a una menor MOI hay una [mayor densidad celular] y [menor proporción] de células que presentan efecto citopático. 50 -1 En caso de que la densidad de un cultivo sea muy elevada, y es prácticamente imposible contabilizar las células sin cometer un error, qué diluyente utilizaría al momento de realizar el recuento celular. Seleccione una: a. Agua filtrada b. Agua de red c. Agua ultra pura d. Medio de cultivo Respuesta correcta La respuesta correcta es: Medio de cultivo Suero: IgM específica para el antígeno Anticuerpo anti IgM humana conjugado a una enzima Fase sólida cubierta con el antígeno Sustrato Pregunta 10 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 11 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Pregunta 12 Parcialmente correcta Puntúa 0,75 sobre 1,00 Pregunta 13 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 Los kits de diagnóstico para la realización de ensayos inmunoenzimáticos deben conservarse a 4°C y pueden ser utilizados inmediatamente sin necesidad llevarlos a temperatura ambiente antes de su uso. Seleccione una: Verdadero Falso La respuesta correcta es 'Falso' La técnica de ELISA para determinar anticuerpos contra el HCV puede presentar resultados falsos positivos cuando en la muestra existen sustancias interferentes en alta concentración. Seleccione una: Verdadero Falso Correcto. La respuesta correcta es 'Verdadero' Cuando se realiza un recuento celular, la muestra conteniendo las células se diluye con . Además, se utiliza el colorante para discernir entre células viables e inviables. Las células inviables se observarán de color , mientras que las viables serán . azul de Trypan azul de Trypan azul incoloras Respuesta parcialmente correcta. Ha seleccionado correctamente 3. La respuesta correcta es: Cuando se realiza un recuento celular, la muestra conteniendo las células se diluye con [PBS]. Además, se utiliza el colorante [azul de Trypan] para discernir entre células viables e inviables. Las células inviables se observarán de color [azul], mientras que las viables serán [incoloras]. Para la detección de virus con genoma , se utiliza una variante de la técnica que es la RT-PCR, en dónde a partir de se sintetiza el que posteriormente será sometido a una PCR convencional para lograr su amplificación. Respuesta correcta La respuesta correcta es: Para la detección de virus con genoma [ARN], se utiliza una variante de la técnica que es la RT-PCR, en dónde a partir de [ARN viral] se sintetiza el [ADNc] que posteriormente será sometido a una PCR convencional para lograr su amplificación. ARN viral ADNc ARN Pregunta 14 Correcta Puntúa 1,00 sobre 1,00 A continuación se detallan los recuentos celularesde un cultivo (tener en cuenta que, previo al recuento, la suspensión celular se diluyó al medio y se utilizó un colorante de exclusión) : células sin color: 85 / 79 / 82 / 80 / 75 / 81 / 79 / 81 células azules: 1 / 0 / 2 / 3 / 0 / 1 / 2 / 1 Calcular la densidad de células totales, células viables y porcentaje de viabilidad presentes en el cultivo. Indicar la opción correcta: Seleccione una: a. 825.000 células totales/ml; 25.000 células viables/ml; 97% viabilidad celular b. 1.800.000 células totales/ml; 1.600.000 células viables/ml; 89% viabilidad viabilidad celular c. 1.650.000 células totales/ml; 1.600.000 células viables/ml; 97% viabilidad celular d. 1.650.000 células totales/ml; 900.000 célulasviables/ml; 55% viabilidad celular Respuesta correcta La respuesta correcta es: 1.650.000 células totales/ml; 1.600.000 células viables/ml; 97% viabilidad celular Pregunta 15 Parcialmente correcta Puntúa 0,67 sobre 1,00 Mediante RT-PCR se realizó la evaluación de dos muestras de suero para el virus de la fiebre amarilla, utilizando primers genéricos que permiten amplificar un fragmento de 863 pb perteneciente al gen que codifica para la proteína no estructural NS5. Las reacciones de PCR se prepararon según lo detallado en el cuadro a continuación: Componentes Calle 1 Muestra 1 Calle 2 Muestra 2 Calle 3 Control (+) Calle 4 Control (–) Buffer (10X) 2,5 μL 2,5 μL 2,5 μL 2,5 μL MgCl (25mM) 1,5 μL 1,5 μL 1,5 μL 1,5 μL dNTPs (10mM) 0,5 μL 0,5 μL 0,5 μL 0,5 μL “Primer Foward”(10µM) 1 μL 1 μL 1 μL 1 μL “Primer Reverse”(10µM) 1 μL 1 μL 1 μL 1 μL Taq Polimerasa (5U/μL) 0,15 μL 0,15 μL 0,15 μL 0,15 μL Agua estéril (c.s.p 50µL) 15,85 μL 15,85 μL 15,85 μL 15,85 μL ADN 2 μL 2 μL 2 μL * 0 μL* * Corresponden a 2 µL de un plásmido que contiene al gen de interés. * No se agrega ADN, en su lugar se utiliza 2 µL de agua ultrapura estéril. Luego de efectuar las reacciones, los respectivos productos se sembraron (en el orden que se establece en el cuadro precedente), en un gel de agarosa al 2% con agregado de SYBR Green (1/10000), y se sometieron a electroforesis. Sabiendo que la positividad de esas mismas muestras fue demostrada previamente, indique cuáles pueden ser las fuentes de error, si al revelar el gel se obtienen las siguientes combinaciones de resultados: -Calle 1: no se observa ninguna banda. -Calle 2: se observa una banda entre 800 y 900 pb. -Calle 3: se observa una banda entre 800 y 900 pb. -Calle 4: no se observa ninguna banda. -Calle 5: Marcador de peso molecular corrió adecuadamente. No corresponde a ninguna de las opciones 2 1 2 1 2 La muestra 1 resulta negativa probablemente porque el operador olvidó incorporar uno de los reactivos de la Es probable que algunos de los reactivos utilizados en la PCR se encuentre en mal estado, ó el termociclador -Calle 1: no se observa ninguna banda. - Calle 2: no se observa ninguna banda. - Calle 3: no se observa ninguna banda. - Calle 4: no se observa ninguna banda. Calle 5: El marcador de peso molecular corrió adecuadamente. Es probable que algunos de los reactivos utilizados en la PCR se encuentre en mal estado, ó el termociclador Respuesta parcialmente correcta. Ha seleccionado correctamente 2. La respuesta correcta es: -Calle 1: no se observa ninguna banda. -Calle 2: se observa una banda entre 800 y 900 pb. -Calle 3: se observa una banda entre 800 y 900 pb. -Calle 4: no se observa ninguna banda. -Calle 5: Marcador de peso molecular corrió adecuadamente. → La muestra 1 resulta negativa probablemente porque el operador olvidó incorporar uno de los reactivos de la reacción de PCR., No corresponde a ninguna de las opciones → El colorante SYBR Green no funciona adecuadamente., -Calle 1: no se observa ninguna banda. - Calle 2: no se observa ninguna banda. - Calle 3: no se observa ninguna banda. - Calle 4: no se observa ninguna banda. Calle 5: El marcador de peso molecular corrió adecuadamente. → Es probable que algunos de los reactivos utilizados en la PCR se encuentre en mal estado, ó el termociclador no funcione correctamente. ◄ Calificación informes T.P. 3 Ir a... Segundo parcial ► https://entornovirtual.unl.edu.ar/mod/resource/view.php?id=301774&forceview=1 https://entornovirtual.unl.edu.ar/mod/quiz/view.php?id=301361&forceview=1
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