Práctica 9 Extracción de ADN - Padilla

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(
División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Departamento de Ciencias de la Salud
Campus Cajeme
Licenciatura en Medicina
“Práctica 9 – Extracción y observación de ácido desoxirribonucleico”
Materia: 
Laboratorio de Fisiología Celular
Maestra: 
Blanca Areli Mondaca Navarro
Alumno: 
Diego Joel Padilla Benítez
Grupo 1
27 de Octubre de 2020
)
OBJETIVO
Práctica 9
Extracción y observación de ácido desoxirribonucleico
 (
Fisiología Celular
)
 (
8
)
Extraer ácido desoxirribonucleico (ADN) de organismos animales con base en sus propiedades fisicoquímicas.
INTRODUCCIÓN
ADN y ARN son los ácidos nucleicos que conforman la base de nuestro genoma. Estas dos biomoléculas determinan lo que somos como especie y en buena medida, lo que somos como individuos. Sin embargo, el reconocimiento del que hoy gozan ADN y ARN llevó décadas de investigación científica. El ácido desoxirribonucleico (ADN) es un ácido nucleico que contiene toda la información genética hereditaria que sirve de “manual de instrucción” para desarrollarnos, vivir y reproducirnos. El ADN se encuentra en el núcleo de las células, aunque una pequeña parte también se localiza en las mitocondrias, de ahí los términos ADN mitocondrial y ADN nuclear. El ADN como ácido nucleico está compuesto por estructuras más simples, las bases nitrogenadas. Universidad Internacional De Valencia. (s. f.).
En 1953, los científicos Francis Crick, de Gran Bretaña, y James Watson, de Estados Unidos, publicaron la famosa estructura de la doble hélice del ADN, en un artículo de apenas una página, en la revista Nature. Se sabía ya que el ADN tiene tres tipos de componentes: fosfatos, azúcares (desoxirribosa) y cuatro bases nitrogenadas (adenina, timina, citosina y guanina, abreviadas como A, T, C y G), y su hallazgo consistió en encontrarles un acomodo específico, que resultó en lo que postularon. Descubrieron que tiene una estructura semejante a una doble escalera de caracol, o doble helicoidal, donde a ambos lados están los fosfatos y los azúcares, mientras que cada “peldaño de la escalera metafórica” está compuesto de dos de las cuatro bases nitrogenadas, según las reglas de su apareamiento: la A con la T y la G con la C. Velázquez (2013).
ADN es el nombre químico de la molécula que contiene la información genética en todos los seres vivos. La molécula de ADN consiste en dos cadenas que se enrollan entre ellas para formar una estructura de doble hélice. Cada cadena tiene una parte central formada por azúcares (desoxirribosa) y grupos fosfato. Enganchado a cada azúcar hay una de de las siguientes 4 bases: adenina (A), citosina (C), guanina (G), y timina (T). Las dos cadenas se mantienen unidas por enlaces entre las bases; la adenina se enlaza con la timina, y la citosina con la guanina. La secuencia de estas bases a lo largo de la cadena es lo que codifica las instrucciones para formar proteínas y moléculas de ARN. National Human Genome Research Institute. (s. f.).
MATERIAL Y REACTIVOS
	Reactivos
	cantidad
	Material
	cantidad
	Equipo
	cantidad
	Agua destilada
	500 mL
	Piseta	con agua destilada
	1 por equipo
	Microscopio óptico
	1 por equipo
	Azul	de metileno
	20 mL
	porta objetos
	4 por equipo
	Mechero bunsen
	1	por
equipo
	etanol	al 96 %
	50 ml
	cubre objetos
	4 por equipo
	Puente	de tinción
	1	por
equipo
	Solución de Cloruro sódico 2M
	50 mL
	Mortero porcelana
	de
	1 por equipo
	
	
	
	
	Vasos de precipitado de 250 mL
	2por equipo
	
	
	
	
	Pipeta volumétrica de 10 mL
	1 por equipo
	
	
	
	
	Probetas
	2 por equipo
	
	
	
	
	Varillas vidrio
	de
	1 por equipo
	
	
	
	
	Vasos de precipitado de 50 ml
	1 por equipo
	
	
	
	
	Guantes latex
	de
	1 par por persona
	
	
	
	
	Arena
	Aproximadamente 50 g
	
	
	
	
	Gasas estériles para filtrar	su muestra
	5 piezas
	
	
	
	
	Jabón líquido para	lavar
platos	(Axion o Palmolive)
	20 mL por equipo
	
	
	
	
	Hígado pollo
	de
	100 gr por quipo
	
	
	
	
	Cutter
	1 por equipo
	
	
	
	
	Jabón	para lavar material
	1 por equipo
	
	
	
	
	Trapo de tela para	limpiar
área	de
trabajo
	1 por equipo
	
	
NOTA: LOS QUE ESTA EN LETRAS ROJAS ES LO QUE NECESITARÁN CADA EQUIPO PARA LA REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA DICHOS MATERIALES NO LO PROPORCIONA LA UNIVERSIDAD POR ESTA RAZÓN ORGANICENSE POR EQUIPO POR FAVOR.
FAVOR DE TRASPORTAR SU MATERIAL GENÉTICO (FRESAS E HÍGADO DE POLLO EN HIELO) PARA NO PERMITIR LA DEGRADACIÓN DEL ADN DE LAS MUESTRAS DE ESTUDIO.
RESULTADO
DISCUSIÓN DE RESULTADOS:
El hígado se tritura para que se incremente el área superficial, esto va a provocar que la superficie de la membrana sea más fácil de disolver y también permite una absorción más efectiva del calor y de las soluciones que se añadirán después. Martínez (2015).
El detergente líquido o el lavavajillas utilizado en el experimento tiene como función destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando. El detergente disuelve las grasas o lípidos, que es el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las células (es el mismo principio por el que el gel limpia la grasa de nuestra piel). Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. López (2018). 
Las membranas de las células están formadas por dos capas de lípidos con proteínas transmembrana a través de estas. El detergente ayuda a romper la bicapa de fosfolípidos de las membranas plasmáticas y la envoltura nuclear. Los lípidos de la membrana se descomponen debido al detergente que deshace las uniones que mantienen la membrana junta. Cuando el detergente se pone en contacto con los lípidos éstos se separan de la membrana rompiéndola. Martínez (2015).
El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse, de ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol, ya que el ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita. Por este motivo, nuestras hebras de ADN comienzan a hacerse visibles en la interfase entre la mezcla y el alcohol. Además de permitirnos distinguirlo, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales quedan en la solución acuosa. López (2018).
CONCLUSIONES:
El ADN es una molécula muy compleja y pequeña, que es un poco difícil de poder observar, pero gracias a la técnica realizada se puede obtener de una manera sencilla y rápida, mostrando buenos resultados para su observación, la utilidad de la extracción de ADN es que en la investigación que realizaremos como médicos, para llegar a un diagnóstico, el ADN lo utilizaremos para analizar y diagnosticar a pacientes con enfermedades neurodegenerativas, cáncer, infecciones, etc.
CUESTIONARIO
(ENTREGAR CUESTIONARIO DENTRO DEL REPORTE DE PRÁCTICA DE LABORATORIO)
1. ¿Qué es el ADN? 
El ácido desoxirribonucleico (ADN) es un ácido nucleico que contiene toda la información genética hereditaria que sirve de “manual de instrucción” para desarrollarnos, vivir y reproducirnos. El ADN se encuentra en el núcleo de las células, aunque una pequeña parte también se localiza en las mitocondrias, de ahí los términos ADN mitocondrial y ADN nuclear. El ADN como ácido nucleico está compuesto por estructuras más simples, las bases nitrogenadas: Timina, Adenina, Guanina y Citosina. 
2. ¿Cómo está formado el ADN?
El ADN tiene tres tipos de componentes: fosfatos, azúcares (desoxirribosa) y cuatro bases nitrogenadas (adenina, timina, citosina y guanina, abreviadas como A, T, C y G), tiene una estructura semejante a una doble escalera de caracol, o doble helicoidal, donde a ambos lados están los fosfatos y los azúcares, mientras que cada “peldaño de la escalera metafórica” está compuesto de dos de las cuatro bases nitrogenadas, según las reglas de su apareamiento: la A con la T y la G con la C.
3. Representa mediante un dibujo o imagen la estructura del ADN
4. ¿Cuál es la importancia biológica del ADN?
 La función principal del ADN es mantener a través del código genético la información necesaria para crear un ser vivo idéntico a aquel del que proviene (o muy similar, en el caso de mezclarsecon otra cadena como es el caso de la reproducción sexual o de sufrir mutaciones).
5. ¿Cuál es la función de la arena, el detergente y el alcohol en el procedimiento de extracción del ADN?
La función de la arena es ayudar a que las membranas se rompan dejando intacto el ADN. El detergente ayuda a romper la bicapa de fosfolípidos de las membranas plasmáticas y la envoltura nuclear. Los lípidos de la membrana se descomponen debido al detergente que deshace las uniones que mantienen la membrana junta. Cuando el detergente se pone en contacto con los lípidos éstos se separan de la membrana rompiéndola. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol, además de permitirnos distinguirlo, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales quedan en la solución acuosa.
REFERENCIAS:
López, J. V. (2018). Extracción casera de ADN - Aula Genyca. Aula Genyca. https://www.aulagenyca.com/extraccion-casera-de-adn/
Martínez. (2015). Extracción de DNA. Universidad Autónoma de Barcelona (UAB). http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%ADnez%20Mart%C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf
National Human Genome Research Institute. (s. f.). ADN (Ácido Desoxirribonucleico) | NHGRI. Genome.gov. https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/ADN-acido-Desoxirribonucleico
Universidad Internacional De Valencia. (s. f.). ADN y ARN concepto, diferencias y funciones | VIU. Recuperado 26 de octubre de 2020, de https://www.universidadviu.com/adn-arn/
Velázquez Arellano. (2013). El descubrimiento de la estructura del ADN, un hito histórico para la ciencia. DGCS UNAM. https://www.dgcs.unam.mx/boletin/bdboletin/2013_364.html
BITÁCORA: