RECONOCIMIENTO, MANEJO, EXACTITUD Y PRECISIÓN DE LAS MICROPIPETAS

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LABORATORIO 3. 
RECONOCIMIENTO, MANEJO, EXACTITUD Y PRECISIÓN DE LAS MICROPIPETAS 
Resultados
Figura 1. Partes de la micropipeta 
- Determinación del porcentaje de exactitud (E%) y el coeficiente de variación (CV%) de la micropipeta
	Micropipeta (μL)
	Revisar volumen (μL)
	Masa esperada (g)
	Peso 1 (g)
	Peso 2 (g)
	Peso 3 (g)
	Peso 4 (g)
	Peso 5 (g)
	Promedio
	1000
	500
	0.5
	 0.490
	0.495 
	0.492
	 0.494
	0.493 
	 0.4928
	
	1000
	1
	0.998 
	0.984 
	0.985 
	0.982 
	 0.987
	 0.9872
	100
	50
	0.05
	 0.049
	0.049 
	0.049 
	0.049 
	0.049 
	 0.049
	
	100
	0.1
	 0.098
	0.100 
	0.099 
	0.099 
	0.099 
	 0.099
	10
	10
	0.01
	 0.010
	0.009 
	0.010 
	0.010 
	0.010 
	 0.0098
- Exactitud para cada medición y precisión por micropipeta con los valores obtenidos.
	Micropipeta (μL)
	Revisar volumen (μL)
	Exactitud
	Precisión
	Exactitud 
(E, %)
	Precisión 
(CV, %)
	
	
	Calculados
	Esperados 
(Fuente: Brand, 2014)
	1000
	500
	 0.8
	0.2
	0.8
	0.3
	
	1000
	 0.6
	 0.3
	0.6
	0.2
	100
	50
	 1.4
	 0
	0.8
	0.4
	
	100
	 0.4
	 0.3
	0.6
	0.2
	10
	10
	 1.4
	 2.3
	1
	0.5
Si los valores calculados de exactitud (E [%]) y coeficiente de variación (CV [%]) son menores o iguales a los valores de tolerancia esperados, entonces la micropipeta está calibrada.
Preguntas
1. ¿Por qué las micropipetas son uno de los instrumentos indispensables en el laboratorio de biología molecular?
Las micropipetas son instrumentos empleados para absorber y transferir pequeños volúmenes de líquidos. En biología molecular son indispensables por la necesidad que hay de medir de manera exacta y reproducible pequeños volúmenes. Presentan una gran ventaja al poder usarse sin necesidad de tener que lavar el aparato, para esto son empleadas puntas desechables de plástico y estériles [1]. 
2. ¿Cómo interpreta usted los valores obtenidos de exactitud y precisión?
Se observa que la micropipeta de 1000 μL es exacta, dado que los porcentajes de exactitud, tanto para las medidas de 500 y 1000 μL, son las esperadas. En cuanto a precisión se observa que el porcentaje en las medidas de 1000 μL es superior al esperado, siendo este un resultado impreciso y el único error en las mediciones de la micropipeta de 1000 μL. En la micropipeta de 100 μL se observa que el porcentaje de exactitud, en las medidas de 50 μL, está por fuera de los valores esperados, sin embargo las mediciones son precisas en este caso y por fuera de los valores esperados en las medidas de 100 μL, pero exacta para estas mismas. En la micropipeta de 10 μL tanto la precisión como la exactitud estuvieron por fuera de los porcentajes esperados. Esto pudo deberse a que la micropipeta está descalibrada o más probablemente a un error accidental ya que dentro de las réplicas sólo un valor fue distinto al valor verdadero. 
3. ¿Cuál es la diferencia entre exactitud y precisión?
La diferencia radica en su definición y determinación. Exactitud es definida como la cercanía del valor de una o más mediciones a un valor real o verdadero, esto determina que entre más cerca esté una medición de un valor real será más exacta. Por otra parte, precisión se define como la cercanía entre sí de dos o más mediciones. Se determina que hay precisión cuando mediciones diferentes son cercanas entre sí [2].
4. Enumere 4 razones por las cuales pueden originarse errores sistemáticos y 4 para errores accidentales durante la manipulación de las micropipetas. 
Los errores sistemáticos pueden ocurrir por: 
1. No calibrar la pipeta en los plazos establecidos.
2. Sumergir excesivamente la punta de la pipeta al aspirar la muestra.
3. No valorar la viscosidad de la muestra. 
4. No realizar un mantenimiento adecuado de las pipetas. 
Los errores accidentales pueden ocurrir por: 
1. Pipetear distintas muestras con la misma punta.
2. Dispensar los reactivos líquidos demasiado rápido.
3. Pipetear desde un ángulo incorrecto.
4. No utilizar las puntas adecuadas [3]. 
Conclusión
Las micropipetas son un elemento fundamental en el laboratorio de biología molecular, ya que permiten tomar muestras muy pequeñas y replicarlas con exactitud y precisión. Las muestras tomadas en la práctica fueron exactas hasta las medidas de 100 μL, los valores inferiores a estos estuvieron por fuera de los porcentajes esperados. Se puede concluir que en volúmenes más pequeños se tiende más al error. 
En el caso de la micropipeta de 100 μL se observó que la precisión fue perfecta para las medidas de 50 μL, ya que todas las medidas fueron iguales, sin embargo no fue exacta, por lo que se puede concluir que la pipeta está descalibrada. 
Con la micropipeta de 10 μL se observó errores tanto en el porcentaje de precisión como de exactitud, lo cual pudo haberse debido a un error accidental, como pipetear incorrectamente, o un error sistemático como no valorar la viscosidad de la muestra. 
Referencias bibliográficas
[1]. Manual de funcionamiento de micropipetas. Recuperado el 27 de Agosto de 2014 en www.brand.de. 
[2]. Ana Zita Fernandes (2018). Exactitud y precisión. Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas. https://www.diferenciador.com/ 
[3]. Errores frecuentes al pipetear y cómo evitarlos. (2018, May 31). Abyntek Biopharma. https://www.abyntek.com/errores-frecuentes-al-pipetear-y-como-evitarlos/