Clase de Ejercicios 10 Fluorimetría - fabricio hurtado

Vista previa del material en texto

Ejercicios de fluorescencia
1. La forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina es una coenzima fluorescente. Tiene un máximo de absorción de 340 nm y un máximo de emisión a 465 nm. Calcule la concentración de dicho dinucleótido para una disolución problema, que posee una intensidad de fluorescencia de 12,16.
Datos para la curva de calibración:
	Concentración de patrón (µM)
	Intensidad de fluorescencia (IF)
	0,1
	2,24
	0,2
	4,52
	0,3
	6,63
	0,4
	9,01
	0,5
	10,94
	0,6
	13,71
	0,7
	15,49
	0,8
	17,91
2. Para la determinación de niveles traza de aluminio en disoluciones de hemodiálisis se aplica un método espectrofluorimétrico sensible y preciso utilizando el agente quelante “Mordant Red 19”. La emisión molecular del quelato fluorescente del metal se midió a 555 nm, y la longitud de onda de excitación fue de 478 nm (máxima absorción). El intervalo de linealidad entre la intensidad de emisión y la concentración de aluminio se encontró de 1 a 20 µg/L (ppb) utilizando disoluciones estándar de aluminio. El aluminio se determinó mediante el método de extrapolación (adición de estándar); para ello se tomaron alícuotas de muestra de 1 mL cada una, se colocaron en cinco matraces aforados de 5 mL y se adicionaron cantidades ascendentes de patrón de aluminio, de forma tal que las concentraciones finales del estándar adicionado, una vez ajustado el pH, adicionado el agente complejante y enrasados los matraces aforados con agua destilada, resultaran: 0, 4, 8 y 16 µg/L. El modelo matemático de la curva de adición de estándar fue: y= 4,87x + 5,75. Calcule la concentración de aluminio en la disolución de hemodiálisis.