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Universidad Veracruzana Laboratorio Clínico Veterinario Leticia Romero Ortiz Practica 9. Determinación de Brúcela con Rosa de Bengala y Huddleson. Alicia de los Ángeles Zamudio Sánchez 02/05/23 Introducción La brucelosis es una patología antropozoonótica de distribución mundial, conocida desde hace muchos años que, sin embargo, continúa siendo un problema sanitario y económico de envergadura. La diversidad de animales portadores de la bacteria responsable complica en gran medida las acciones de lucha contra esta infección, en especial las preventivas, ya que aún hoy no existe un panorama real de su prevalencia ni de los posibles vectores que colaboran con su diseminación. No obstante, los animales aceptados hasta el momento como portadores tienen, en muchos casos, íntimo contacto con el hombre, lo que agregado a las vías conocidas de infección explica la dimensión del problema que plantea esta zoonosis. Además, los productos derivados de los citados animales son objeto de una intensa manipulación por parte del hombre, frecuentemente carente de un adecuado cuidado y prevención. Por otra parte, la brucelosis no presenta un cuadro clínico característico que permita una detección precoz del infectado, lo que favorece la evolución a la cronicidad, complicando las alternativas terapéuticas y la curación definitiva. Fundamento Rosa de Bengala utiliza como antígeno en una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del enfermo. Proporciona una aproximación diagnóstica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta elevado grado de correlación con la seroaglutinación y, por su simplicidad, es muy útil como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos negativos se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado. La reacción de Huddleson es una reacción de aglutinación rápida en placa. Se enfrentan cantidades decrecientes del suero a investigar con cantidades constantes de antígeno y se observa la presencia o no de aglutinación. Objetivo Realizar correctamente las pruebas e identificar los resultados positivos y negativos de las mismas. Material • Muestra de suero. • Pipetas. • Kit Rosa de bengala y Huddleson (placa de prueba, antígeno). Método Rosa de Bengala: 1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero. 2. Adicionar una gota de la muestra en un círculo de la placa. Al igual que con los controles positivo y negativo en otros dos círculos más. 3. Colocar el antígeno Rosa de Bengala en los mismos círculos donde se agregaron muestra y controles. 4. Mezclar. 5. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos. 6. Leer el resultado. Huddleson: • Dejar atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. • Depositar una gota de la muestra a ensayar y una gota de cada control en círculos separados. • Colocar el reactivo en los mismos círculos donde se agregaron muestra y controles. • Mezclar. • Agitar la placa con movimientos rotatorios por 7 minutos. • Leer el resultado. Resultados Rosa de Bengala Huddleson Fuentes bibliográficas • Castro, Hugo Abel, González, Sofía Raquel, & Prat, María Inés. (2005). Brucelosis: una revisión práctica. Acta bioquímica clínica latinoamericana, 39(2), 203-216. Recuperado en 02 de mayo de 2023, de http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325- 29572005000200008&lng=es&tlng=es. • Castro, Hugo Abel, González, Sofía Raquel, & Prat, María Inés. (2005). Brucelosis: una revisión práctica. Acta bioquímica clínica latinoamericana, 39(2), 203-216. Recuperado en 02 de mayo de 2023, de http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325- 29572005000200008&lng=es&tlng=es. • Jose Adserias -webcd@gugu.usal.es-. (s. f.). Diagnóstico serológico de RUBEOLA. http://coli.usal.es/web/abydl/biblioteca/bibelectro.alu/documentos/protocolos 3/brucelosis/brucelosis.html#:~:text=1%20Rosa%20de%20Bengala&text=D etecta%20fundamentalmente%20anticuerpos%20para%20el,con%20el%20 suero%20sin%20diluir.
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