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Universidad Abierta y a Distancia de México División de Ciencias de la Salud, Biológicas y Ambientales Ingeniería en Biotecnología Biología Molecular II Unidad 1 Evidencia de aprendizaje Preparación de la PCR Jessica Verónica Mendoza Prado ES202104539 Grupo BI-BBM2-2203-B1-002 10 de febrero de 2022 Reactivo concentración inicial concentración final Volumen para agregar 1Rx Volumen para agregar 6 Rx Buffer para Taq polimerasa 10x 1 X 2.5Ul 15uL MgCl2 25 mM 2.75 Mm 2.75 uL 16.5uL DNTPs mix 10 mM .3 Mm .75uL 4.5uL Oligonucleotido forward 10 uM .10 uM .25uL 1.5uL Oligonucleotido reverse 10 Um .10 uM .25uL 1.5uL Taq polimerasa 20 U/uL .2 U/uL .25uL .25uL Agua libre de nucleasas - - 18.25 109.5uL Volumen final 25 uL 150 uL Realiza el cálculo de la TM para los siguientes pares de oligonucleótidos 𝑇𝑚 = 2(𝐴 + 𝑇) + 4(𝐶 + 𝐺) F- 5’ GTTACGACGCTTTCTATTG-3’ 𝑇𝑚 = 2(3 + 8) + 4(4 + 4) 𝑇𝑚 = 2(11) + 4(8) 𝑇𝑚 = 22 + 32 𝑇𝑚 = 54°𝐶 R- 5’ GGATCCAAACGATGCCTT- 3’ 𝑇𝑚 = 2(5 + 4) + 4(5 + 4) 𝑇𝑚 = 2(9) + 4(9) 𝑇𝑚 = 18 + 36 𝑇𝑚 = 54°𝐶 F- 5’ACTGGTTCCAATTGGTTAAT- 3’ 𝑇𝑚 = 2(5 + 8) + 4(3 + 4) 𝑇𝑚 = 2(13) + 4(7) 𝑇𝑚 = 26 + 28 𝑇𝑚 = 54°𝐶 R- 5’ GGTTACGACGCTTTGCTTC-3’ 𝑇𝑚 = 2(2 + 7) + 4(4 + 5) 𝑇𝑚 = 2(9) + 4(9) 𝑇𝑚 = 18 + 36 𝑇𝑚 = 54°𝐶 Referencias UnADM (s.f.) Contenido Nuclear Unidad 1. Biología molecular. UnADM. México. Recuperado de https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargable s/BBM2_U1_Contenido.pdf New England Biolabs (2022) TM Calculator. New England Biolabs. Recuperado de NEB Tm Calculator https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargables/BBM2_U1_Contenido.pdf https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargables/BBM2_U1_Contenido.pdf https://tmcalculator.neb.com/#!/main https://tmcalculator.neb.com/#!/main
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