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Universidad Abierta y a Distancia 
de México 
División de Ciencias de la Salud, 
Biológicas y Ambientales 
Ingeniería en Biotecnología 
 
 
Biología Molecular II 
 
 
Unidad 1 
Evidencia de aprendizaje 
Preparación de la PCR 
 
Jessica Verónica Mendoza Prado 
ES202104539 
 Grupo BI-BBM2-2203-B1-002 
 
10 de febrero de 2022 
 
Reactivo concentración 
inicial 
concentración 
final 
Volumen para 
agregar 1Rx 
Volumen para 
agregar 6 Rx 
Buffer para Taq 
polimerasa 
10x 1 X 2.5Ul 15uL 
MgCl2 25 mM 2.75 Mm 2.75 uL 16.5uL 
DNTPs mix 10 mM .3 Mm .75uL 4.5uL 
Oligonucleotido 
forward 
10 uM .10 uM .25uL 1.5uL 
Oligonucleotido 
reverse 
10 Um .10 uM .25uL 1.5uL 
Taq polimerasa 20 U/uL .2 U/uL .25uL .25uL 
Agua libre de 
nucleasas 
- - 18.25 109.5uL 
Volumen final 25 uL 150 uL 
 
Realiza el cálculo de la TM para los siguientes pares de oligonucleótidos 
𝑇𝑚 = 2(𝐴 + 𝑇) + 4(𝐶 + 𝐺) 
F- 5’ GTTACGACGCTTTCTATTG-3’ 
𝑇𝑚 = 2(3 + 8) + 4(4 + 4) 
𝑇𝑚 = 2(11) + 4(8) 
𝑇𝑚 = 22 + 32 
𝑇𝑚 = 54°𝐶 
R- 5’ GGATCCAAACGATGCCTT- 3’ 
𝑇𝑚 = 2(5 + 4) + 4(5 + 4) 
𝑇𝑚 = 2(9) + 4(9) 
𝑇𝑚 = 18 + 36 
𝑇𝑚 = 54°𝐶 
 
F- 5’ACTGGTTCCAATTGGTTAAT- 3’ 
𝑇𝑚 = 2(5 + 8) + 4(3 + 4) 
𝑇𝑚 = 2(13) + 4(7) 
𝑇𝑚 = 26 + 28 
𝑇𝑚 = 54°𝐶 
R- 5’ GGTTACGACGCTTTGCTTC-3’ 
𝑇𝑚 = 2(2 + 7) + 4(4 + 5) 
𝑇𝑚 = 2(9) + 4(9) 
𝑇𝑚 = 18 + 36 
𝑇𝑚 = 54°𝐶 
 
Referencias 
UnADM (s.f.) Contenido Nuclear Unidad 1. Biología molecular. UnADM. México. Recuperado de 
https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargable
s/BBM2_U1_Contenido.pdf 
New England Biolabs (2022) TM Calculator. New England Biolabs. Recuperado de NEB Tm 
Calculator 
https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargables/BBM2_U1_Contenido.pdf
https://dmd.unadmexico.mx/contenidos/DCSBA/BLOQUE1/BI/06/BBM2/unidad_01/descargables/BBM2_U1_Contenido.pdf
https://tmcalculator.neb.com/#!/main
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