BBM2_U3_EA_JEMP

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Universidad Abierta y a Distancia 
de México 
División de Ciencias de la Salud, 
Biológicas y Ambientales 
Ingeniería en Biotecnología 
 
 
Biología Molecular II 
 
 
Unidad 3 
Evidencia de aprendizaje 
Sistemas de recombinación de ADN 
 
Jessica Verónica Mendoza Prado 
ES202104539 
 Grupo BI-BBM2-2203-B1-002 
 
20 de marzo de 2023 
 
Transfección 
Materiales y reactivos 
• Células a transferir ( el protocolo especifica células MCF-7 de cáncer de mama humano) 
suplementadas con L-glutamina, 0.1 Mm Solución MEM de aminoácidos no esenciales y 
10% de suero de feto bovino 
• ADN plásmido de interés >100 ng 
• Reactivo Lipofectamine LTX almacenado a 4°C 
• Medio Opti-MEM I 
• Placas con pozos suficientes 
• Micropipeta 
• Incubadora de CO2 
• Agitador para placa de pozos 
 
Transducción 
Materiales y reactivos 
• Partículas de transducción Lentiviral MISSION shRNA 
• Bromido de hexadimetrina 
• Partículas de control de transducción MISSION Plko.1-puro 
• Partículas de shRNA no target MISSION 
• Partículas de control MISSION TurboGFP 
• Medio esencial mínimo con 10% suero de bovino fetal o medio de crecimiento adecuado 
para la estirpe celular 
• Placa de 96 pozos 
• Células mamíferas para transducir 
 
Cuadro comparativo 
 Transducción Transfección 
Ventajas Usa un vector viral para la 
introducción de ADN o ARN 
El ADN añadido posee mayor 
estabilidad 
Se usa un agente químico 
para introducir RNA o DNA 
dentro de la célula animal 
Es un método de menor costo 
Desventajas Es una técnica más cara por 
el diseño del vector viral 
La célula debe abrir poros de 
forma transitoria para permitir 
la entrada del material 
Es más complejo realizar la 
apertura de los poros 
nucleares 
Produce anormalidades en 
las células objetivo 
 
Referencias 
Invitrogen (2006) Transfecting Plasmid DNA into MCF-7 Cells Using Lipofectamine™ LTX 
Reagent Invitrogen. Recueprado de http://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-
Materials/mcf-7-human-breast-cancer-lipofectamine-protocol.pdf 
http://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/mcf-7-human-breast-cancer-lipofectamine-protocol.pdf
http://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/mcf-7-human-breast-cancer-lipofectamine-protocol.pdf
Merck (2023) Lentiviral Transduction Protocol. Merck. Recuperado de 
https://www.sigmaaldrich.com/MX/es/technical-documents/protocol/genomics/advanced-gene-
editing/lentiviral-transduction