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Valoración de la función renal: EGO y depuración de creatinina. FASE PRE ANALÍTICA Información del paciente FECHA: 24-08-21 PACIENTE: María Luisa Neri Carbajal . Nombres Apellido Paterno Apellido Materno FECHA DE NACIMIENTO: 12-06-00 EDAD: 21 SEXO: F X M EMBARAZO: SI NO X MÉDICO SOLICITANTE: Maricielo Contreras Reynoso HORA DE EXTRACCIÓN: 07:40 h AYUNAS: SI X NO EMAIL: marialu@gmail.com TEL: 722-456-893-4 ANÁLISIS DE ORINA Y DE SANGRE EGO |x| EXAMEN GENERAL DE ORINA CRE |x| CREATININA Condiciones del paciente Paciente: María Luisa Neri Carbajal Nombre (s) Apellido Paterno Apellido Materno Fecha: 21-09-21 Tipo de estudio: Valoración de la función renal Condiciones para las muestras de orina: ● No consumir carne el día anterior. ● Recoger absolutamente toda la orina de 24 horas. ● Seguir las instrucciones para la recolección de la orina limpia y la orina de 24 horas. ● Informar al médico sobre cualquier medicación que se esté tomando, debido a que algunos medicamentos pueden influir en los resultados de la prueba, en este caso, alterar el color de la orina, los cuales pueden ser los siguientes: ○ Cloroquina. ○ Suplementos de hierro. ○ Levodopa. ○ Nitrofurantoína. ○ Fenazopiridina. ○ Fenotiazina. ○ Fenitoína. ○ Riboflavina. ○ Triamtereno. Presentarse al Laboratorio con las siguientes indicaciones para la toma de muestra sanguínea: ● Ayuno mínimo de 4-8 horas antes de realizar la prueba. ● Informar al médico sobre cualquier medicación que se esté tomando, ya que algunos medicamentos pueden influir en los resultados de la prueba. ● Vestir preferentemente playera de manga corta para facilitar la extracción de sangre. ● No consumir bebidas alcohólicas, tabaco o sustancias adulterantes por lo menos 24 horas antes. ● Evitar consumir alimentos altos en grasa 24 horas antes. ● No realizar ejercicio o actividades que puedan alterar las funciones corporales 24 horas antes. ● Evitar estresarse antes y durante la prueba. ● Menú sugerido: ● Cenar una rebanada de pan tostado, una taza de té de su elección, una gelatina de agua y una porción de fruta de su agrado como por ejemplo manzana, pera, papaya. Muestra de orina 1. Brindarle al paciente un recipiente colector de orina de 24 horas, un recipiente para muestra con tapa y toallitas desinfectantes para la muestra de orina limpia. 2. Brindar al paciente una hoja con la siguientes instrucciones para la colecta de la orina durante 24 horas y la orina limpia: Para depuración de creatinina. a. Al levantarse por la mañana, debe vaciar la vejiga, descartar esa orina y anotar la hora. b. Posterior a esa orina descartada, colectar toda la orina durante las siguientes 24 horas. c. Una vez transcurridas las 24 horas, debe vaciar nuevamente la vejiga, añadiendo esta orina al contenedor y anotar la hora. d. Llevar la orina al laboratorio. *(En caso de no poder llevar la orina inmediatamente, colocar el recipiente de orina en una bolsa plástica ponerlo en el refrigerador o en una hielera con hielo hasta que pueda ser entregado al laboratorio). Para EGO (muestra de orina limpia). a. De ser posible, recolectar la orina cuando haya estado en la vejiga durante 2 a 3 horas. b. Lavar sus manos con agua y jabón. Niñas y mujeres. a. Sentarse en el inodoro con las piernas separadas. b. Usar los dedos para separar y abrir los labios. c. Usar la primera toallita desinfectante para limpiar los pliegues internos de los labios. c. Limpiar de adelante hacia atrás. d. Usar la segunda toallita desinfectante para limpiar por encima de la abertura por donde sale la orina (uretra), justo sobre la abertura de la vagina. e. Mantener los labios separados y abiertos, orinar una pequeña cantidad en el inodoro y detener el flujo de orina. f. Sostener el frasco de orina a unos cuantos centímetros de la uretra y orinar hasta que el recipiente esté medio lleno. g. Cerrar el frasco de orina. h. Terminar de orinar en el inodoro. i. Llevar el frasco de orina al laboratorio. *(En caso de no poder llevar la orina inmediatamente, colocar el frasco de orina en una bolsa plástica y ponerlo en el refrigerador o en una hielera con hielo hasta que se pueda hacer la entrega). Niños y hombres a. Limpiar la cabeza del pene con una toallita estéril (si no está circuncidado, retraer primero el prepucio). b. Orinar una pequeña cantidad en el inodoro y detener el flujo de orina. c. Recolectar la muestra de orina dentro del frasco hasta que se encuentre medio lleno. d. Cerrar el frasco de orina. e. Terminar de orinar en el inodoro. f. Llevar el frasco de orina al laboratorio. *(En caso de no poder llevar la orina inmediatamente, colocar el frasco de orina en una bolsa plástica y ponerlo en el refrigerador o en una hielera con hielo hasta que se pueda hacer la entrega). 3. Recibir el contenedor de orina y el frasco de orina que el paciente lleve al laboratorio. 4. Etiquetar el contenedor y el frasco con los siguientes datos: a. Clave del paciente. b. Nombre completo. c. Tipo de muestra. d. Fecha de recolección. 5. Procesar la muestra al área de análisis clínico. Toma de muestra de sangre 1. Recibir al paciente. 2. Llevar al paciente a la zona de toma de muestra. 3. Sentar al paciente en una silla para empezar con el proceso. 4. Pedir permiso al paciente para poder inspeccionar los brazos para determinar cuál es la mejor vena para sacar la sangre. 5. Una vez identificado el brazo y por ende la vena, limpiar la zona ejerciendo un poco de presión con una torunda con alcohol. 6. Colocar el torniquete alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presión en la zona y permitir que la vena se llene de sangre. 7. Introducir la aguja en la vena en un ángulo aproximado de 25°. 8. Colocar los tubos de tapón rojo para empezar a extraer la sangre y retirar el torniquete inmediatamente. En caso de ser con jeringa, extraer la cantidad de sangre necesaria y retirar el torniquete. 9. Una vez obtenida la cantidad de muestra necesaria en los tubos, colocar una torunda en la zona en donde está la aguja y retirar la misma. 10.Pedir al paciente que ejerza un poco de presión con la torunda para que la sangre deje de salir. 11. Colocar un curita en la zona donde se introdujo la aguja. 12.Agradecer al paciente y guiarlo a la recepción. 13.Llevar la muestra a la zona de análisis. *NOTA: Es importante verificar que el paciente se sienta bien al momento de estar realizando la extracción, en caso de que presente mareos detener la toma de muestra, retirar la aguja, brindarle una torunda con alcohol, esperar a que el paciente se recupere y proceder a tomar la muestra en otro brazo o en otra vena* FASE ANALÍTICA Solicitud del paciente FECHA DE RECEPCIÓN: 21-09-21 FECHA ESTIMADA DE ENTREGA DE RESULTADOS : 28-09-21 NOMBRE DE QUIEN LA RECEPCIONA: Sabrina Polo Contreras PACIENTE: María Luisa Neri Carbajal___ Nombres Apellido Paterno Apellido Materno CONTACTO EMAIL: marialu@gmail.com TEL: 722-456-893-4 TIPO DE ENSAYO: Valoración de la función renal TIPO DE MUESTRA CÓDIGO DE MUESTRA NO. DE MUESTRAS FECHA DE TOMA DE MUESTRA ALMACENAMIENTO T ° ORINA EG-02 1 21-09-21 Frascos cerrados y protegidos de la luz. 2-8 ºC ORINA CA-03 1 20-09-21 Frascos cerrados y protegidos de la luz. 15-30ºC SANGRE CA-04 1 21-09-21 Centrifugar y separar el suero Temperatura ambiente por 24 h y posteriorment e 2 - 8°C OBSERVACIONES: __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ Examen General de Orina El Uroanálisis es una parte integral de los exámenes rutinarios en todo Laboratorio Clínico. Su utilidad en la obtención de importante informacióncomo el diagnóstico de enfermedades de los riñones y el tracto urinario, el hígado, desórdenes metabólicos, así como el monitoreo de la efectividad en el tratamiento de problemas crónicos y en la investigación de condiciones asintomáticas, son capacidades y características que le dan un valor incalculable en el cuidado de la salud. (MedlinePlus, 2021) Examen físico Después de la entrega de muestra, esta se analiza de inmediato. - Color: Se observa en el tubo de alícuota con un fondo blanco y se registra en forma descriptiva y sin ningún tipo de clasificación. (Mayoclinic, 2020) - Aspecto: Se observa con un fondo negro opaco y con incidencia angular del rayo de luz, esto permite iluminar y contrastar los elementos disueltos o suspendidos que confieran turbidez a la muestra. Valores normales: - Color: de paja a amarillo, pálido a oscuro. - Aspecto: transparente o ligeramente turbio. (De María y Otegui, 2007) Figura 1.Evaluación del color y aspecto de la orina. Figura 2. El color de la orina y sus posibles causas y significados. - Densidad: En la orina humana, sus valores normales oscilan entre 1,005 g/mL a 1,030 g/mL, siendo sólo ligeramente más densa que el agua. Para la urodensitometría en laboratorios clínicos se utilizan normalmente tres técnicas: A) Urodensitómetro, para el cual se necesita un mínimo de 20 mL de orina donde se deja flotar el densitómetro sin tocar las paredes del tubo. B) Refractómetro que requiere solo una gota de orina, y mide el índice de refracción de la solución con la ayuda de un prisma. C) Tiras reactivas, se basa en el cambio de pKa de determinados polielectrolitos. (Traviezo-Valles, 2020) Tabla 1.Valores de densidad urinaria y sus significados. Densidad urinaria Valores Patologías Densidad baja o Hipostenuria <1005 mg/mL Diabetes insípida, glomerulonefritis, diuréticos. Densidad alta o Hiperestenuria > 1030 mg/mL Diabetes mellitus, fiebre, enfermedades hepáticas, deshidratación. Densidad fija o 1010 mg/mL Daño renal grave Isostenuria Examen químico Comprende la determinación cuantitativa y semicuantitativa de diversos parámetros y sustancias excretadas en la orina. Se realiza mediante reacciones químicas y enzimáticas de química seca, en la cual se impregna una fase sólida con los reactivos respectivos a cada determinación. Las zonas reactivas se presentan en una pequeña tira de material plástico de fácil manejo que sirve como vehículo para la impregnación simultánea de las zonas reactivas respectivas a los 10 parámetros con orina del paciente. Cuando pasa el tiempo necesario para que se completen las reacciones químicas y enzimáticas en cada zona reactiva se desarrollan colores característicos por la presencia de reactivos cromógenos. La interpretación de los colores y su intensidad se puede realizar de dos formas: • Por comparación de los colores desarrollados en las zonas reactivas de la tira de medición con una carta de colores, en la que se presentan los posibles tonos dentro de los límites del rango de medición, junto con la concentración equivalente. • En un lector automatizado; Es un fotómetro de reflexión en el que se emite un haz de luz de determinada longitud de onda dirigido a cada una de las zonas reactivas de la tira, se mide la luz reflejada, se procesa y se convierte en un resultado de concentración por un procesador. 1.- Mojar adecuadamente las zonas reactivas: Se observa la tira reactiva al introducirla en la orina y retirarla cuando se formen burbujas del aire desplazado de la zona reactiva, lo que asegura que se ha mojado por completo. Figura 4.Impregnación de la tira reactiva en la orina. 2.- Secar el exceso de orina de la tira reactiva: de lo contrario se puede correr el color de una zona reactiva a otra, modificando los colores correctos para la interpretación de la prueba. Se recomienda secar la tira en una toalla de papel desechable en tres movimientos: uno por la parte baja, los otros dos por los flancos de la tira. Figura 5. Secado de la tira reactiva. 3.- Cuidar el tiempo de reacción de la tira reactiva: si las reacciones son incompletas la concentración obtenida será menor a la normal y se registrará como un falso negativo. En el caso contrario hay zonas reactivas que desarrollan color pasado el tiempo adecuado de lectura generando falsos positivos (ejemplo: proteínas). 4.- Buena iluminación para la lectura de la tira: se recomienda luz blanca o fría. 5.- Conservar la integridad de la carta de colores: si se acercan demasiado las tiras a la carta de colores y esta se contamina con orina, se deslavan los colores y se modifican imposibilitando su uso posterior. Para evitarlo se recomienda retirar cuidadosamente la etiqueta de un frasco de tiras reactivas, pegarla en una hoja de papel y enmicarla (o plastificarla). Con esto se facilita la comparación de los colores. Para discernir entre dos colores cuando la concentración parece encontrarse intermedia, una distancia de unos 5 cm entre la carta y la tira ayuda a tomar la decisión. Tabla 2. Valores normales Las tiras reactivas cuentan actualmente con 10 parámetros, con los siguientes valores normales: Parámetro Valores normales Densidad 1.005 a 1.025 pH 5.0 a 7.0 Proteínas negativas Glucosa negativa Cuerpos cetónicos negativos Bilirrubina negativa Urobilinógeno 0 a 0.2 mg/dl Hemoglobina negativa Nitritos negativos Leucocitos negativos Interpretar los resultados de la tira reactiva y extrapolarlos al estado de salud del paciente requiere ciertos cuidados y experiencia. Cualquier resultado positivo debe comprobarse por algún método definitivo o al menos, uno más exacto, ya que es inevitable la presencia de falsos positivos para que la prueba sirva como filtro (tamiz o criba). Figura 6. Medición de parámetros en tiras reactivas. Examen microscópico por Sistema KOVA En esta la fase del uroanálisis se identifican y cuentan las diversas partículas insolubles que arrastra la orina en su paso por las vías de formación y excreción de la misma. Proceso: 1. Se llena el tubo con orina homogeneizada hasta la marca superior del tubo (estandariza el volumen en la alícuota) 2. Se trabaja con la tira reactiva 3. Se tapa el tubo y pasa a la centrífuga, donde se debe cuidar la fuerza centrífuga y el tiempo, que dependen del analista y sin los cuales el equipo puede perder su propósito. 4. Se introduce la pipeta para sellar el fondo cónico del tubo y se decanta el resto de orina sobrenadante. De esta forma el sedimento queda resuspendido en un mL de orina, homogeneizándolo con la pipeta (estandariza el volumen en el que se resuspende el sedimento y por tanto el factor de concentración de los elementos suspendidos en la orina nativa). 5. Finalmente se toma sedimento con la pipeta y se llena la cámara de cuenta para realizar la cuenta microscópica (la cuenta de partículas se informa por unidad de volumen) Figura 7. Cuenta microscópica. Identificación de estructuras microscópicas El Grupo Europeo para el Uroanálisis propone la clasificación de los Laboratorios Clínicos en Básicos y Avanzados según su capacidad y por consiguiente su responsabilidad identificando las estructuras microscópicas y sus detalles morfológicos para establecer el diagnóstico. (De María y Otegui, 2007) Figura 8. Identificación de estructuras microscópicas según la Guía Europea para Uroanálisis. Tabla 3. Interpretación de resultados. Resultado Significado clínico sin interpretación morfológica Datos morfológicos observados Significado clínico Leucocitos: 0 a 5 por campo normal Leucocitos centelleantes “piocitos” Pielonefritis Eritrocitos: 0 a 5 por campo normal Eritrocitos dismórficos Daño glomerular Células epiteliales moderadas normal Transicionales, renales, o incluso neoplásicas. Cilindros: 0 a 1 hialino normal 0 a 1 no hialino anormal Con leucocitos Inflamación Epitelial Necrosis tubular Granular, Céreo Insuficiencia renal Con eritrocitos. Daño glomerular Determinación de creatinina. La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del organismocasi exclusivamente por filtración renal. Su determinación en suero, así como la depuración de creatinina endógena constituyen parámetros importantes para el diagnóstico de diversas afecciones renales. (Wiener-lab, 2012) Fundamento del método La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentración de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reacción cinética de primer orden para la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reacción. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina. Reactivos A. Reactivo A: solución de ácido pícrico 12,7 mmol/L y laurilsulfato de sodio 8.4 mmol/L. B. Reactivo B: solución de borato 53 mmol/L e hidróxido de sodio 970 mmol/L. S. Standard*: solución de creatinina 20 mg/l. Calibrador A plus de Wiener lab. Instrucciones para usar Reactivo A: listo para usar. A baja temperatura puede presentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño de agua a 37° C unos minutos antes de usar. Reactivo B: listo para usar. Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar cuatro partes de Reactivo A y una parte de Reactivo B. Rotular y fechar. A baja temperatura puede presentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño de agua a 37° C unos minutos antes de usar. Aparatos y materiales - Espectrofotómetro capaz de leer a 500 ± 10 nm. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. - Cubetas espectrofotométricas. - Baño de agua a 25°C. - Cronómetro. Condiciones de reacción - Longitud de onda: 500 nm - Temperatura de reacción: 25° C El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar entre 22 y 28 ° C. Ver Limitaciones del Procedimiento. - Volumen de muestra: 0.2 mL - Volumen de Reactivo de Trabajo: 1.2 mL - Volumen final de reacción: 1.4 mL Procedimiento de análisis I- Técnica para suero o plasma. Equilibrar el Reactivo de Trabajo a la temperatura de reacción (25°C). Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con agua destilada. En dos cubetas espectrofotométricas marcadas S (Standard) y D (Desconocido), colocar: Mezclar inmediatamente, iniciando al mismo tiempo el cronómetro y proseguir la incubación. A los 30 segundos exactos medir la absorbancia (S1 y D1 ) y continuar la incubación. Medir nuevamente la absorbancia (S2 y D2 ) a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos después de la primera lectura). 2.- Técnica para orina Efectuar una disolución 1:50 de la muestra recolectada en agua desionizada y luego aplicar la técnica 1. Cálculos 1) Creatinina en suero (mg/L) = (D2-D1) x f 2) Creatinina en orina (g/24 hrs) = Siendo: V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs La fórmula surge de: Donde: 0.020 g/L = concentración del Standard 50 = factor de dilución Para expresar la creatinina en orina en “mg/Kg/24 hs”: 3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.): Donde: Para expresar D.C.E. en “mL/min/1.73 m2”: Método de control de calidad Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de creatinina, con cada determinación. Valores de referencia Suero o plasma: Hombre: 7 - 13 mg/L Mujer: 6 - 11 mg/L Orina: Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs Mujer: 11 - 20 mg/Kg/24 hs Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.): Hombre: 94 - 140 mL/min/1.73 m2 Mujer: 72 - 110 mL/min/1.73 m2 Performance a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente: Tabla 4. Reproducibilidad del método para la determinación de creatinina. b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 90 mg/L de creatinina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó 1:4 con solución salina y repetir la determinación. Corregir los cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado. c) Límite de detección: el mínimo cambio de concentración detectable es 4.5 mg/L. (Wiener-lab, 2012) Referencias De Mária, V. y Otegui, C. (2007). Guía práctica para la estandarización del procesamiento y examen de las muestras de orina. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de:https://www.abm.org.ar/docs/campanas/erc/guiapractica_examen_orina.pdf https://www.abm.org.ar/docs/campanas/erc/guiapractica_examen_orina.pdf Lab Tests Online. (2021). Creatinina. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://labtestsonline.es/tests/creatinina Mayoclinic. (2020). Color de la orina. Consultado el 21 de septiembre del 2021. Recuperado de: https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/urine-color/symptoms-causes/ syc-20367333 MedlinePlus. (2021). Análisis de orina. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003579.htm MedlinePlus. (2020). Muestra de orina limpia. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/007487.htm MedlinePlus. (2021). Examen del pH de la orina. Consultado el 21 de septiembre de 2021. Recuperado de:https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003583.htm Traviezo, L. (2020). Densidad de la orina ¿1025 o 1025 g/ml? Consultado el 21 de septiembre del 2021. Recuperado de: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2308-053120200004007 58 Wiener-lab. (2012). Creatinina. Método cinético para la determinación de creatinina en suero, plasma u orina. Consultado el 21 de septiembre del 2021. Recuperado de: https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/cr eatinina_cinetica_aa_liquida_sp.pdf https://labtestsonline.es/tests/creatinina https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/urine-color/symptoms-causes/syc-20367333 https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/urine-color/symptoms-causes/syc-20367333 https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003579.htm https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/007487.htm https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003583.htm http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2308-05312020000400758 http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2308-05312020000400758 https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/creatinina_cinetica_aa_liquida_sp.pdf https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/creatinina_cinetica_aa_liquida_sp.pdf
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