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PLAQUETAS Y COAGULACIÓN. FASE PRE ANALÍTICA Información del paciente FECHA: 16-11-21 PACIENTE: María Luisa Neri Carbajal . Nombres Apellido Paterno Apellido Materno FECHA DE NACIMIENTO: 12-06-00 EDAD: 21 SEXO: F X M EMBARAZO: SI NO X MÉDICO SOLICITANTE: Maricielo Contreras Reynoso HORA DE ANÁLISIS: 07:00 h AYUNAS: SI X NO EMAIL: marialu@gmail.com TEL: 722-456-893-4 PLAQUETAS Y COAGULACIÓN TC |x| TIEMPO DE COAGULACIÓN TP |x| TIEMPO DE PROTROMBINA TS |x| TIEMPO DE SANGRADO TPT |x| TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL PQ |x| PLAQUETAS Condiciones del paciente Paciente: María Luisa Neri Carbajal Nombre (s) Apellido Paterno Apellido Materno Fecha: 16-11-21 Tipo de estudio: Plaquetas y coagulación . ● El conteo de plaquetas generalmente no requiere ninguna preparación especial. ● Tal vez deba dejar de tomar ciertos medicamentos, como aspirina e ibuprofeno, antes de la prueba. ● Ir de preferencia con playera de manga corta para facilitar la extracción de la muestra. TOMA DE MUESTRA 1. Recibir al paciente. 2. Llevar al paciente a la zona de toma de muestra. 3. Sentar al paciente en una silla para empezar con el proceso. 4. Pedir permiso al paciente para poder inspeccionar los brazos para determinar cuál es la mejor vena para sacar la sangre. 5. Una vez identificado el brazo y por ende la vena, limpiar la zona ejerciendo un poco de presión con una torunda con alcohol. 6. Colocar el torniquete alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presión en la zona y permitir que la vena se llene de sangre. 7. Introducir la aguja en la vena en un ángulo aproximado de 25°. 8. Colocar los tubos de tapón lila (con EDTA) y tubos de tapón azul (con Citrato de sodio 3.2%) para empezar a extraer la sangre y retirar el torniquete inmediatamente. En caso de ser con jeringa, extraer la cantidad de sangre necesaria y retirar el torniquete. 9. Una vez obtenida la cantidad de muestra necesaria en los tubos, colocar una torunda en la zona en donde está la aguja y retirar la misma. 10. Pedir al paciente que ejerza un poco de presión con la torunda para que la sangre deje de salir. 11. Colocar un curita en la zona donde se introdujo la aguja. 12. Agradecer al paciente y guiarlo a la recepción. 13. Llevar la muestra a la zona de análisis. *NOTA: Es importante verificar que el paciente se sienta bien al momento de estar realizando la extracción, en caso de que presente mareos detener la toma de muestra, retirar la aguja, brindarle una torunda con alcohol, esperar a que el paciente se recupere y proceder a tomar la muestra en otro brazo o en otra vena* FASE ANALÍTICA Solicitud del paciente FECHA DE RECEPCIÓN: 16-11-21 FECHA ESTIMADA DE ENTREGA DE RESULTADOS : 17-11-21 NOMBRE DE QUIEN LA RECEPCIONA: Sabrina Polo Contreras PACIENTE: María Luisa Neri Carbajal___ Nombres Apellido Paterno Apellido Materno CONTACTO EMAIL: marialu@gmail.com TEL: 722-456-893-4 TIPO DE ENSAYO: Plaquetas y coagulación. TIPO DE MUESTRA CÓDIGO DE MUESTRA NO. DE MUESTRAS FECHA DE TOMA DE MUESTRA ALMACENAMIENTO T ° Sanguínea HEM-001 2 16-11-21 Tubos con anticoagulante EDTA Tubos con anticoagulante TP de Wiener lab o citrato de sodio. Refrigerar a 4 ° C durante un período máximo de 24 h. OBSERVACIONES: __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ PLAQUETAS Y COAGULACIÓN. PLAQUETAS Método. Recuento en cámara de Neubauer o en contador hematológico. El recuento de plaquetas se realiza mediante un método bidimensional midiendo el volumen y la densidad de cada célula. Muestra. Sangre con EDTA. Agitar el tubo inmediatamente ya que una demora puede causar recuentos falsamente bajos por la presencia de agregados plaquetarios. Significado clínico. Las plaquetas son células no nucleadas provenientes de la médula ósea ricas en gránulos que tiene como función mantener la hemostasia e iniciar la reparación del tejido luego de la injuria vascular durante el proceso inflamatorio. Ante una lesión del vaso sanguíneo, el endotelio es el primero en reaccionar produciendo vasoconstricción, a continuación las plaquetas se adhieren y agregan en la zona lastimada para formar el tapón plaquetario. Estas células poseen una vida media de 7-10 días. (Bayer HealthCare, s.f). Material - Pipeta de 2 mL. - Micropipeta de 20 μL. - Puntas de micropipeta. - Guantes. - Cubreobjetos. - Cámara de Neubauer. - Tubo de ensayo. - Capilares de vidrio. - Microscopio óptico. Reactivos. - Sangre anticoagulada con EDTA. - Líquido diluidor de plaquetas. - Agua desionizada. Procedimiento. 1. Con una pipeta agregar en un tubo de ensayo 2 mL de líquido diluidor de plaquetas. 2. Retirar 20 μL del tubo de ensayo con la micropipeta. 3. Adicionar 20 μL de sangre anticoagulada homogeneizada en el tubo, haciendo un factor de dilución de 1/100. 4. Homogeneizar la mezcla. 5. Colocar el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer. 6. Cargar la cámara, por capilaridad, con la micropipeta. 7. Incubar durante 15 minutos en una cámara húmeda. 8. Observar al microscopio, realizando un recuento de plaquetas dentro del cuadro central. (Rodríguez, 2019). Utilidad clínica. - Diagnóstico de trombocitopenias asociadas o no a otras patologías. - Screening prequirúrgico. - Diagnóstico de púrpura mucocutánea (trombocitopénica o no). Exclusión de un desorden hemorrágico. - Monitoreo durante la quimioterapia y durante el tratamiento con heparina. - Evaluación de enfermedades de la médula ósea. - Evaluación de destrucción plaquetaria o consumo de plaquetas. Valores de referencia. 150 000 - 400 000 plaquetas / 𝑚𝑚3 (Bayer HealthCare, s.f). Figura 1. Plaquetas observadas en cámara de Neubauer. Figura 2. Plaquetas vistas al microscopio. TIEMPO DE COAGULACIÓN Método. Coagulométrico. Muestra. Sangre entera venosa. Significado clínico. La sangre al ser extraída sin mayor contaminación con tromboplastina tisular es capaz de coagularse cuando se la deposita en un tubo de vidrio. El tiempo que tarda este proceso está en relación con el sistema de procoagulantes e inhibidores fisiológicos o adquiridos, que influyen en la formación de dicho coágulo. Procedimiento. 1. Obtener aproximadamente 4.5 mL de sangre mediante punción venosa. 2. Desconectar la aguja y vaciar ordenadamente 1 mL de sangre en cada uno de los 4 tubos, previamente colocados en una gradilla a 37 °C o a temperatura ambiente. 3. Poner en marcha el cronómetro al añadir la sangre al primer tubo. Al llegar al cuarto tubo no deben haber transcurrido más de 5 segundos. 4. Inclinar el primer tubo cada 30 s por la misma cara hasta que la sangre coagule, es decir, hasta que deje de escurrir por las paredes del tubo. 5. Inmediatamente comenzar a inclinar el segundo tubo hasta que coagule, luego el tercero y luego el cuarto. 6. Tomar como tiempo de coagulación el valor obtenido en el cuarto tubo. Valores de referencia. - Valor a 37°C: 7-15 minutos. - Valor a temperatura ambiente: 11-19 minutos. Utilidad clínica. - Evaluación global del sistema de coagulación. - Monitoreo de la terapia con heparina. - Screening prequirúrgico. (Farestaie, s.f). TIEMPO DE PROTROMBINA Es el método principal utilizado para la evaluación de desórdenes de la vía extrínseca de la coagulación y así controlar el tratamiento anticoagulante oral. La prolongación del TP depende de la reducción de tres de los factores de coagulación dependientes de la vitamina K (II, VII y X). (Roche, 2021) Fundamento El método se basa en la medición del tiempo de formación del coágulo de fibrina, al agregar una tromboplastina cálcica a un plasma citratado. El resultado se expresa en porcentaje de actividad (tiempoen segundos del paciente comparado con el tiempo del control o normal). Cálculo Los resultados deben ser expresados en INR o RIN (Razón Internacional Normatizada) para independizarse del sistema de medición (reactivo/Instrumento) utilizado, a través de la siguiente fórmula: ISI= índice de sensibilidad internacional de la tromboplastina a calibrar respecto de la referencia. Muestra Plasma citratado. Valores 70 - 120% 10 -14 segundos (rango orientativo - depende del sistema de medición) (WienerLab, 2000) TIEMPO DE SANGRADO Es un test global que evalúa la formación del tapón plaquetario que se forma como resultado de la adhesión de las plaquetas a la pared de los vasos y la subsiguiente agregación. Mide el tiempo que tarda en detenerse la hemorragia provocada por la injuria de los pequeños vasos. El test depende de la función plaquetaria, del adecuado número de plaquetas funcionalmente intactas, de la presencia de proteínas plasmáticas adhesivas que permiten la adhesión de las plaquetas a la pared vascular injuriada y la agregación plaquetaria, y de la integridad de la matriz de la pared vascular. Método de Ivy Se realiza una incisión de profundidad estandarizada (1 mm de profundidad), en la cara interna del antebrazo del paciente. Previamente con un esfingomanómetro se produce una presión constante de 40 mmHg. Se pone en marcha el cronómetro. Durante ese tiempo, se absorbe la sangre cada 30 segundos, con un papel absorbente sin tocar el lugar de la incisión. Se toma el tiempo que transcurre entre el momento en que se realiza la incisión y el que termina de sangrar. El paciente deberá tener un recuento de plaquetas superior a 100.000. Figura 3. Demostración del método de Ivy. Significado clínico ● Un tiempo de sangrado prolongado requiere de futuros análisis y sugiere un desorden de la hemostasia primario que puede ser adquirido, hereditario o inducido por drogas. ● La prolongación del tiempo de sangría con un recuento de plaquetas normal indica la presencia de síndrome de von Willebrand o una disfunción plaquetaria o una hipo o disfibrinogenemia severa. Un tiempo de sangrado normal no descarta un defecto en la hemostasia primario. Muestra Método in vivo. Tiempo de referencia 1 a 5 minutos. (Farestaie, s.f) TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL La prueba del tiempo de tromboplastina parcial (TTP) mide el tiempo que tarda en formarse un coágulo en una muestra de sangre. La capacidad de coagulación es importante para impedir el sangrado excesivo. (Hirsch, 2021) Método: APTTest El ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado, colocando en un baño a 37°C y en presencia de un exceso de cefalina, activador y calcio. Muestra Plasma. Se coloca la sangre recolectada en un tubo con anticoagulante en proporción 9+1, se mezcla suavemente y se centrifuga para separar el plasma antes de los 30 min. Material requerido - Tubos de hemólisis. - Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados. - Baño de agua a 37°C - Cronómetro - Fuente luminosa, para la observación del coágulo. Reactivos - Reactivo A: viales conteniendo cefalina con tierra de diatomeas como activador particulado. - Reactivo B: solución de cloruro de calcio 0.025 mol/l. - Agua bidestilada o desionizada. Procedimiento 1. Precalentar el Reactivo B a 37°C antes de la prueba. 2. En un tubo de hemólisis colocar: - Muestra (plasma). - Reactivo A (homogeneizado). Mezclar e incubar 3 min a 37°C. - Reactivo B (a 37°C). 3. Disparar simultáneamente un cronómetro. 4. Agitar brevemente para homogeneizar el contenido. 5. Mantener el tubo en el baño por 25 segundos. 6. Luego sacar el tubo del baño, inclinar suavemente una vez por segundo y detener el cronómetro en el momento de la formación del coágulo. 7. Tomar nota del tiempo de coagulación. Valores de referencia - El intervalo de valores observados en individuos normales oscila entre 33-48 segundos. - Se consideran fuera de lo normal valores que difieran en más de 6 segundos de un plasma control. Utilidad clínica - Identificar deficiencias de factores procoagulantes de plasma, así como la presencia de ciertos inhibidores de la coagulación. - Detectar anomalías en la vía intrínseca de la coagulación, como son los factores necesarios para la formación del activador intrínseco de la protrombina. - También detecta deficiencias severas de los factores II, V, X - y fibrinógeno. - Control de la terapéutica anticoagulante por heparina. - Identificar rápidamente hemofílicos en potencia. (WienerLab, 2000) Referencias Bayer HealthCare. (s.f). Plaquetas, recuento. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/308.htm Hirsch, L. (2021). Análisis de sangre. Tiempo de tromboplastina parcial (TTP). Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://kidshealth.org/es/parents/test-ptt.html#:~:text=La%20prueba%20del%20tiemp o%20de%20tromboplastina%20parcial%20(TTP)%20mide%20el,que%20la%20sang re%20coagule%20bien. Farestaie. (s.f). Tiempo de coagulación. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/365.htm Farestaie. (s.f). Tiempo de sangría. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/371.htm Roche. (2021). Una breve discusión sobre el tiempo de protrombina. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://diagnostics.roche.com/es/es/article-listing/a-brief-discussion-of-prothrombin-ti me.html Rodríguez, F. (2019). Recuento de plaquetas en cámara de Neubauer. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.franrzmn.com/recuento-de-plaquetas-en-camara-de-neubauer/ WienerLab. (2000). Soluplastin: Tromboplastina cálcica para la determinación del Tiempo de Protrombina en una etapa. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/so luplastin_sp.pdf WienerLab. (2000). APTTest. Para la determinación del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada. Consultado el 16 de noviembre de 2021. Recuperado de: https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/ap ttest_sp.pdf https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/308.htm https://kidshealth.org/es/parents/test-ptt.html#:~:text=La%20prueba%20del%20tiempo%20de%20tromboplastina%20parcial%20(TTP)%20mide%20el,que%20la%20sangre%20coagule%20bien https://kidshealth.org/es/parents/test-ptt.html#:~:text=La%20prueba%20del%20tiempo%20de%20tromboplastina%20parcial%20(TTP)%20mide%20el,que%20la%20sangre%20coagule%20bien https://kidshealth.org/es/parents/test-ptt.html#:~:text=La%20prueba%20del%20tiempo%20de%20tromboplastina%20parcial%20(TTP)%20mide%20el,que%20la%20sangre%20coagule%20bien https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/365.htm https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/371.htm https://diagnostics.roche.com/es/es/article-listing/a-brief-discussion-of-prothrombin-time.html https://diagnostics.roche.com/es/es/article-listing/a-brief-discussion-of-prothrombin-time.html https://www.franrzmn.com/recuento-de-plaquetas-en-camara-de-neubauer/ https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/soluplastin_sp.pdf https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/soluplastin_sp.pdf https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/apttest_sp.pdf https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/apttest_sp.pdf
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