Recuento de aerobios mesofilos

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1. IDENTIFICACIÓN DE LA GUÍA DE APRENDIZAJE : RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS
	PROGRAMA DE FORMACIÓN
	TECNICO EN LABORATORIO INDUSTRIAL
	MÓDULO
	MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
	COMPETENCIA
	Norma de competencia laboral No. 290801084 Determinar contenido de microorganismos del alimento según normativa y técnicas de análisis
	ELEMENTO
	Elemento 02 : Procesar alimentos de acuerdo con la normatividad vigente
	2. INTRODUCCIÓN
	Esta guía nos permitirá cuantificar y clasificar las bacterias mesófilos que nos indicaran el grado de contaminación de los alimentos en la etapa de su producción, alteración de un alimento y su vida útil mediante los ensayos realizados de acuerdo al protocolo establecido, su importancia radica en que nos indica las condiciones de salubridad de un alimento
	3. RESULTADOS DE APRENDIZAJE
	Verificar la condiciones generales del ensayo
Realizar el montaje del ensayo teniendo en cuenta el protocolo estandarizado por el laboratorio
Aplicar las normas ambientales y de bioseguridad en la ejecución de los ensayos
	4. PLANTEAMIENTO DE ACTIVIDADES
	Organiza los materiales y equipos que se utilizaran en el ensayo a realizar. 
 Leer el documento anexo a la guía llamado �RECUENTO DE MESOFILOS� 
Previa explicación del instructor observar y realizar el conteo en la cámara de Thomas cuenta colonias el numero de colonias bacterianas mesófilos encontradas en la placa de agar plate count. 
Multiplique por el factor de dilución que aparezca en la caja de Petri.
Reporte en los registros los resultados de la muestra analizada como UFC/gr o ml (Unidades formadoras de colonias por gramo o ml)
Forme equipos de 4 estudiantes para realizar su análisis y reporte final 
Desarrolla un informe de lo aprendido en la práctica del laboratorio y socialízalo con el resto del grupo con la guía del instructor.
RECOMENDACIONES: 
Utilice la vestimenta indicada para entrar al laboratorio
Todo material y equipo de laboratorio debe mantenerse limpio y estéril
 Mientras esteriliza los medios no debe cambiar de lugar el autoclave ni dejarlo solo
	5. COMPONENTE DISCIPLINAR
	Responda las preguntas planteadas en el desarrollo de la guía de aprendizaje:
Operaciones matemáticas fundamentales en microbiología de alimentos
Sistema internacional de unidades
Preparación de diluciones y medios de cultivo
Teoría de laboratorios
Disposición y organización de los laboratorios
Materiales de laboratorios
Materiales de vidrio
Materiales volumétricos
Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL)
Seguridad e higiene en el laboratorio
Manejo de sustancias peligrosas
Rotulación de muestras y reactivos
	6. COMPONENTE INVESTIGATIVO
	Anexe al taller de guías la siguiente información:
¿Cuáles son las normas de bioseguridad en la técnica de recuento de aerobios mesófilos?
Cuáles son los elementos de protección personal que deben utilizar el técnico de laboratorio al realizar esta técnica de recuento de aerobios mesófilos.
Mencione las ventajas de realizar un recuento de aerobios Mesofilos
Mencione porque es importante realizar la homogenización de la muestra en la técnica de recuento aerobios mesófilos 
5- Indique cuáles son las medidas para la disposición final de los residuos que se generan en esta técnica
	7. COMPONENTE DE PROYECCIÓN SOCIAL
	Con el desarrollo de estas temáticas correspondiente al módulo, el aprendiz estará en condiciones de dar soluciones a las necesidades relacionadas con su entorno laboral contribuyendo de esta manera a minimizar las necesidades de su comunidad y contribuir a la satisfacción de las necesidades en procesos productivos.
	8. INSTRUCCIONES GENERALES
	Tiempo:6 horas
Organización: 5 grupos de 6 alumnos 
Recomendaciones: Socializar antes de la práctica la actividad a realizar.
Fechas de entrega de evidencias. A las 48 horas de realizada la actividad 
Visita institucional: instalaciones del laboratorio
	9. EVALUACIÓN (CRITERIOS)
	
Utiliza la cámara Thomas de recuento de colonias para realizar el conteo de colonias bacterianas de mesófilos
Aplica las normas de bioseguridad como batas, tapabocas, zapatos cerrados
Tiene en cuenta las precauciones para la eliminación de los desechos biológicos 
	10. EVIDENCIAS DE APRENDIZAJE
	DE DESEMPEÑO
	Observar con lista de chequeo el diligenciamiento, manejo de datos y expresión de los 
resultados de los ensayos de laboratorio
	DE PRODUCTO
	 Revisión de Registros de los resultados de la realización de dos ensayos al 
obtener el resultado final del conteo de mesófilos y multiplicados por el factor de dilución
	DE CONOCIMIENTO
	Conocimiento:
Respuestas a preguntas Sobre Tipos de Registros para reporte de recuento de bacterias mesófilos en cámara de recuento , expresión de Resultados como unidades formadoras de colonias
de colonias, Sistema Internacional de Unidades y cálculos Numéricos al multiplicar por los Factores de dilución.
	11. RECURSOS
	ESCENARIOS DE APRENDIZAJE
	Escenarios de aprendizaje: Laboratorios industrial. 
 
	MEDIOS IMPRESOS Y AUDIOVISUALES
	Guía de aprendizaje � Documento fotocopiado anexo. Taller. 
	RECURSOS Y EQUIPOS
	Cámara Thomas cuenta colonias, lápiz de cera, calculadora
- Pizarrón acrílico, Cartelera, Marcadores, cajas de Petri con las muestras de las colonias
	10. BIBLIOGRAFÍA
	-. BIBLIOGRAFÍA : Manual de equipos de laboratorio de Merck
Microbiologia médica, James g, chaffer y Milton golden.
Manual de técnicas de análisis para control de calidad microbiológico de alimentos 
para consumo humano, ministerio de salud: Invima división laboratorio de alimentos y 
bebidas alcohólicas
Documentos de internet. Normas de seguridad en el laboratorio industrial
http://www.foodnewslatam.com/inocuidad/2499-%C2%BFque-son-los-aerobios-mesofilos.html
https://es.wikipedia.org/wiki/Indicadores_de_calidad_microbiol%C3%B3gicos_en_alimentos
https://multimedia.3m.com/mws/media/444944O/petrifilm-aerobic-count-plate-interpretation-guide-spanish.pdf
	INSTRUCTOR: IVONNE OVIEDO HERNANDEZ
	 DOCUMENTO ANEXO RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS
	En el grupo de los mesófilos aerobios se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a 30º C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima la micro flora total sin especificar tipos de microorganismos. Refleja:
La calidad sanitaria de un alimento.
Las condiciones de manipulación.
Las condiciones higiénicas de la materia prima.
DESVENTAJA: Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de patógenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por fermentación, no son recomendables recuentos elevados. 
Un recuento elevado puede significar:
-
Excesiva contaminación de la materia prima
Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
La posibilidad de que existan patógenos, pues estos son mesófilos
La inmediata alteración del producto 
El recuento de mesófilos nos indica las condiciones de salubridad de algunos alimentos
OBJETIVOS. 1-Conocer los métodos para determinar el número de microorganismos viables
2-Realizar un recuento de bacterias mesófilos viables en los alimentos como un indicador microbiano de la calidad del alimento.
Ventajas: 
a-Se realiza un recuento total por que incluye Hongos, levaduras y bacterias.
b-Nos refleja la calidad sanitaria de un alimento.
c-Condiciones de manipulación
d-Condiciones higiénicas de la materia prima
MATERIALES: Medio de cultivo Plate Count
Diluyente: agua peptonada al 0.1%
Cajas de Petri - Tubos de dilución
Frasco Schott - Asa calibrada
Pipetas - Mechero Bunsen
Licuadora - Balanza
Contador de colonias
Espátula de Drigalsky
PROCEDIMIENTO DEL MÉTODO EN PLACA DE PROFUNDIDAD: 
1-Preparar la muestra de alimento traída según su tipo, si es líquido hay que homogenizar.
2-Si es sólido hay que licuar o triturar la mezcal por trituración en unvaso esterilizado de licuadora a una velocidad aproximada de 14.000 rpm y en un tiempo medio de 60-90 segundos.
3-Luego preparamos las diluciones correspondientes, generalmente hacemos 3diluciones (de 10 -1 a 10 -3).
RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS
99 ml de agua peptonada al 0.1% o 0.25% + 11 ml o gr de la muestra
(HOMOGENIZADO)
	1 ml mta	 10-1 
 9 ml de agua peptonada 10-2 	15 ml de apc
 1 ml 
 9 m l de agua peptonada 10-3 
 
	C
	
	
Rotar cada caja 5 veces e incubar a 37ºC a 37ºC por 24-48 horas y realizar el recuento en UFC/g-ml
ADICIONAREMOS 15 ML APROXIMADAMENTE DE AGAR PLATE COUNT A CADA UNA DE LAS CAJAS DE PETRI , (SIEMBRA POR PROFUNDIDAD)
4-Agregar los inóculos, pasamos a agregar a cada placa el agar Plate Count, este debe estar a 45 � 46 ºC (10-15mL por placa).
5-Luego hacemos la mezcla (agar + inóculo).
6- La mezcla se realiza de la siguiente Manera: 
Hacer rotaciones 5 veces sentido de las manecillas del reloj.
5 veces de abajo arriba
5 veces contrario a las manecillas del reloj
5 veces derecha e izquierda.
7-Esperamos que solidifique el medio y luego incubamos a 35 ºC por 48 horas (dejamos una placa control). -
8-Realizamos las lecturas a las 48 h.
-
Se puede realizar un cómputo de recuento estándar en placa o computo estimado de recuento estándar en placa.
CÁLCULO E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS.
1-Seleccionar 2 cajas correspondientes a la misma dilución que presenten entre 30-300 colonias de cada caja
Hallar la media aritmética de los 2 valores y multiplicarla por el factor de dilución.
Ejemplo: Dilución 10-1 : Caja :260 colonias Caja 2: 250 colonias 
250+250 = 255 x 10-1 
 2
Reportar el resultado como 255 UFC x 10-1 g o ml
2- Si las placas no contienen 30 -300 colonias , registrar el numero de colonias contadas y su respectiva dilución e informar como recuento de aerobios en placa
Ejemplo : dilución 10-1 : 26 colonias Dilución 10-1: 20 colonias
26+20 : 23 x 10-1
 2
Reportar el recuento como 23 UFC x 10-1
INVESTIGAR: Cual es la composición del medio de cultivo empleado?