espectrofotometria uv visible

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Mª Luisa Fernández de Córdova
Universidad de Jaén
ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VISIBLE
Mª Luisa Fernández de Córdova
Universidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
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longitud de onda (λ)
1. Propiedades de la luz
λ ν = c
Longitud de onda x Frecuencia = velocidad de la luz
Onda
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Longitud de ondaEnergía
1. Propiedades de la luz
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
Longitud de onda (nm)
Luz visible
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Estado
fundamental
Estados
excitados
ABSORCIÓN
DE RADIACIÓN (hν)
EMISIÓN
DE RADIACIÓN (hν)
2. Absorción de luz
- Cuando una molécula absorbe luz aumenta su energía
- Cuando una molécula emite luz disminuye su energía
En
er
gí
a
2.1. Fenómeno de absorción de radiación
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Energía
2. Absorción de luz
Longitud de onda (nm)
e-
Rotura de enlace
e ionización
excitación
electrónica
vibración
Luz visible
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S0
S1
Niveles rotacionales
Niveles vibracionales
V0
V1
V1
Vo
V2
En
er
gí
a
2. Absorción de luz
Transiciones
electrónicas
2.2. Espectros de absorción molecular
h ν (UV-Vis)
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2. Absorción de luz
Transiciones electrónicas y espectros UV-Visible
en moléculas
Transiciones electrónicas y espectros 
de los átomos
S1
S2
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Universidad de Jaén
Longitud de onda (nm)
200 250 300 350
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
A
Ác. acetilsalicílico
Paracetamol
Cafeína
Propifenazona
2. Absorción de luz
ESPECTRO DE ABSORCIÓN
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2. Absorción de luz
AZUL DE BROMOFENOL (λmax = 614 nm)
Luz blanca Luz azul
*
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2. Absorción de luz
*
*
Espectro de absorción de la clorofila
en la región visible. Obsérvese que
absorbe en las regiones del rojo y del
azul.
Mª Luisa Fernández de Córdova
Universidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
Mª Luisa Fernández de Córdova
Universidad de Jaén
Fuente
de luz
Selector de longitud
de onda
Detector
de luz
b
Io I
Instrumentación para medir absorción de luz
Muestra I ≤ Io
I0 (intensidad radiante) I (intensidad transmitida)
3. Ley de Lambert-Beer
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Io I
b
c
Ley de Lambert-Beer → A = ε b c
ε : coeficiente de absortividad molar (l mol-1 cm-1)
b : espesor de la célula (cm)
c : concentración (moles/l) 
3. Ley de Lambert-Beer
- Transmitancia → T = I / Io
→(fracción de la luz incidente que sale de la muestra)
→ varía entre 0 y 1
- Absorbancia → A = - log T = log (Io / I)
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Universidad de Jaén
1. Propiedades de la luz
2. Absorción de luz
4. Instrumentación
4.1. Fuente de radiación
4.2. Selector de longitud de onda
4.3. Recipientes para muestra
4.4. Detector
2.1. Fenómeno de la absorción
2.2. Espectros de absorción molecular
2.3. Tipos de transiciones electrónicas
3. Ley de Lambert-Beer
Mª Luisa Fernández de Córdova
Universidad de Jaén
4. Instrumentación
Fuente
de luz
Selector de longitud
de onda
Detector
de luz
b
Io I
Instrumento para medir intensidad de radiación
Muestra
Espectrofotómetro
 Fuente de radiación
 Sistema de selección de longitud de onda
 Recipiente para la muestra
 Detector
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MONOCROMADOR
rendija entrada
rendija salida
red o prisma
fuente
espejos
detector
4. Instrumentación
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MONOCROMADOR DE RED 4. Instrumentación
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4.3. Recipientes de muestra
UV : cuarzo
Visible: cuarzo o vidrio
Material
4. Instrumentación
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Macro-células
UV Vis
Células semi-micro
UV Vis
4. Instrumentación
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4. Instrumentación
Esquema de un espectrofotómetro de haz simple
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ESPECTROFOTÓMETROS, FOTÓMETROS, COLORÍMETROS
Espectrofotómetros portátiles
Espectrofotómetro de doble haz
4. Instrumentación
	Número de diapositiva 1
	Número de diapositiva 2
	Número de diapositiva 3
	Número de diapositiva 4
	Número de diapositiva 5
	Número de diapositiva 6
	Número de diapositiva 7
	Número de diapositiva 8
	Número de diapositiva 9
	Número de diapositiva 10
	Número de diapositiva 11
	Número de diapositiva 12
	Número de diapositiva 13
	Número de diapositiva 14
	Número de diapositiva 15
	Número de diapositiva 16
	Número de diapositiva 17
	Número de diapositiva 18
	Número de diapositiva 19
	Número de diapositiva 20
	Número de diapositiva 21
	Número de diapositiva 22