Informe Activacion

Vista previa del material en texto

ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
	
FACULTAD: CIENCIAS PECUARIAS
CARRERA: INGENIERÍA EN INDUSTRIAS PECUARIAS.
GUÍA DE LABORATORIO DE BIOTEGNOLOGÍA II
PARALELO: SEXTO “A”
PRÁCTICA No. 1 – ACTIVACIÓN E INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
1. DATOS GENERALES:
NOMBRE:	 		 CODIGO(S):
YAMILE BRAVO 1457
GRUPO No.: 4
FECHA DE REALIZACIÓN: 	 FECHA DE ENTREGA:
31/10/2018				 05/10/2018
2. OBJETIVO:
GENERAL:
· Observar la activación e inhibición enzimática presente en el tejido animal y vegetal con el peróxido de hidrogeno determinando su reacción. 
ESPECIFICOS:
· Manifestar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.
· Comprobar el efecto de temperatura en la actividad enzimática.
3. MATERIALES
· Tubos de Ensayo
· Mortero
· Pinzas
· Porta objetos 
· Bisturí
· Gotero 
· Gradilla
4. EQUIPOS
· Mechero
5. REACTIVOS
· Peróxido de Hidrogeno 
· Agua Destilada
· Espinaca
· Tomate
· Hígado de pollo
· Seta 
· Papa
6. INSTRUCCIONES
ACTIVACIÓN DE ENZIMAS:
Hígado de pollo y Papa
1. Cortar un pedazo de la muestra finamente en pedazos.
2. Colocar en un tubo de ensayo.
3. Agregar 10 gotas de Peróxido de Hidrogeno.
4. Tapar 1 minuto el ensayo al ver la reacción.
5. Destapar y llevar al fuego.
Espinaca, Seta y Tomate
1. Tomar un poco de la muestra y triturar finamente 
2. Colocar en una placa porta objeto.
3. Agregar 10 gotas de Peróxido de Hidrogeno.
INHIBICION DE ENZIMAS 
Hígado de Pollo, Papa y Seta 
1. Tomar 2 cm de la muestra y cortar finamente 
2. Colocar en un tubo de ensayo
3. Agregar 4 gotas de agua destilada.
4. Llevar al fuego del mechero evitando que se cocine la muestra 
5. Agregar 10 gotas de Peróxido de Hidrogeno 
6. Tapar en 1 minuto y observar la reacción 
7. MARCO TEÓRICO 
ENZIMA CATALASA 
La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos tanto animal y vegetal, y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.
Su función es proteger a las células del efecto tóxico del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) producido en distintas reacciones redox. 
2 H2O2 → 2 H2O + O2
Esta enzima utiliza como cofactor el grupo hemo y al Magnesio.
El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos y tiene entre otras una función protectora contra microorganismos patógenos, principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos. Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su descomposición en agua y oxígeno.
Esta enzima puede actuar como una peroxidasa para muchas sustancias orgánicas especialmente para el etanol que actúa como donante de hidrógeno. Las enzimas de muchos microorganismos, como el Penicillium simplicissimum, que exhiben actividad de catalasa y peroxidasa, son frecuentemente llamadas catalasas-peroxidasas.
La catalasa (peróxido de hidrógeno: peróxido de hidrógeno oxidorreductasa, EC1.11.1.6) es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida en el organismo humano, aunque su actividad varía en dependencia del tejido; ésta resulta más elevada en el hígado y los riñones, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y prácticamente nula en el tejido nervioso. A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol. (Gonzales, 2007)
8. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:
· Leer bien las instrucciones
· Sanitización en el área de trabajo
· Observación y reconocimiento de instrumentos 
· Manejo de instrumentos y equipos
· Análisis e interpretación de resultados.
· Observaciones.
9. RESULTADOS OBTENIDOS
ACTIVACIÓN ENZIMATICA 
Hígado de Pollo 
Con la acción de la temperatura se observó una reacción rápida de la enzima catalasa que se encuentra en el hígado de pollo que catalizo al peróxido de hidrogeno y se evidencia la producción de burbujas o espuma que suben a la superficie inicial debido a la liberación de oxígeno.
Papa
Con la acción de la temperatura se observó una reacción rápida de la enzima catalasa mayor que el de hígado de pollo debido que en el hígado de pollo se da reacciones enzimáticas con otros componentes celulares presentes en el tejido animal por lo tanto la papa tuvo una gran producción de burbujas o espuma que llegaban al inicio del tubo de ensayo debido a la liberación de oxígeno. 
Espinaca 
A temperatura ambiente la espinaca tuvo la reacción poca de la enzima catalasa y la producción de burbujeo debido a la liberación de oxígeno. 
Tomate 
A temperatura ambiente tuvo una reacción nula de enzima catalasa debido que en el tomate no se encuentra esta enzima.
Seta (Hongo)
A temperatura ambiente tuvo una reacción de enzima catalasa de mayor producción de burbujeo que se esparcía en el portaobjetos de manera rápida debido a la liberación de oxígeno, como en el caso de la espinaca se encuentra poca cantidad de la enzima catalasa.
Sangre
A temperatura ambiente tuvo una reacción muy rápida de enzima catalasa debido a que si nos hacemos una herida o un pequeño corte y te aplicas H2O2 verás que salen burbujitas de en la herida. Es el oxígeno que se está desprendiendo por la acción de la catalasa sanguínea y de paso desinfecta.
INHIBICIÓN DE ENZIMATICA 
Hígado de Pollo
Con la acción de la temperatura al hervir el hígado de pollo durante unos minutos se observó la desnaturalización ya que la catalasa químicamente es una proteína y podemos desnaturalizarlo al someterla a altas temperaturas. Al perder su estructura terciaria, perderá también la función catalítica por lo que no podrá descomponer el agua oxigenada y no se observará ningún tipo de reacción. Por lo tanto, el hígado de pollo presento un color verdoso por la eliminación del cofactor del grupo hemo (formado por hierro).
Papa
La enzima catalasa no actúa con el agua oxigenada debido que la papa se coció por las altas temperaturas y se desnaturalizo, por lo tanto, la enzima pierde su actividad catalítica y no realiza ninguna reacción. Se desnaturalizo el cofactor hierro.
Seta (Hongo)
Al cocer la seta la enzima catalasa que se encuentra en la seta se desnaturalizo por las altas temperaturas, por lo tanto, la enzima no tiene la función catalítica. Y se elimino el cofactor de hierro, cobre, magnesio.
10. CONCLUSIONES:
· En la activación enzimática con las muestras de origen animal y vegetal se logró realizar la reacción con el peróxido de hidrogeno y la enzima catalasa que se encuentra en algunas muestras lo cual logro catalizar al peróxido de hidrogeno produciendo burbujas debido al desprendimiento de oxígeno. En el caso de la inhibición se observó que la muestra una vez cocida se desnaturaliza su cofactor por lo que la enzima no tiene la función catalítica sobre el peróxido de hidrogeno.
· La enzima catalasa se encuentra en las células tanto de origen animal y vegetal menos en el tomate ya que al ser la practica esta no reacciono con el peróxido de hidrogeno y las demás sí reaccionaron. La importancia de una enzima es que aceleran las reacciones, en los vegetales las enzimas realizan reacciones indeseables de tipo enzimático lo cual hace que las frutas o vegetales maduren mucho más rápido.
· La temperatura es un factor muy importante en la en la actividad enzimática porque acelera o retarda la acción de las enzimas, como en el caso de la práctica lo que evidencia la producción de burbujas por eso es necesario que la enzima se encuentre a temperatura ambiente u óptima. Las enzimas son biocatalizadores que sirven para acelerar los procesos, son sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones bioquímicas siempre que sea termodinámicamente posible.
11. RECOMENDACIONES
· Tener cuidado con los instrumentos de vidrio.
12. ANEXOS
 
Figura1. Activación Enz. de las muestras Figura 2. Inactivación E. de la papa Figura 3. ActivaciónEnz. Del hígado de pollo
Bibliografía
Gonzales, C. (27 de Abril de 2007). Obtenido de Scribd: https://es.scribd.com/doc/91487011/ENZIMA-CATALASA
	-----------------------------------------------
NOMBRE Y FIRMA DEL DOCENTE DE LA ASIGNATURA