practica 2 electroforesis

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Practica: Electroforesis 
Asignatura: Técnicas Moleculares 
Licenciatura en QFBT 
Periodo 2022-2 
Docente: José De Jesús Rubio Bahena 
Integrantes: Cesia Carolina Castillo Izaguirre 
Fecha de entrega: 01/09/2022 
Investigación Previa: 
Fundamento de la electroforesis de ADN y de proteínas 
La electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida es una de las metodologías más 
utilizadas en el laboratorio en todo lo relacionado con el trabajo con ácidos nucleicos. 
Mediante la electroforesis podemos separar fragmentos de ADN y ARN en función de su 
tamaño, visualizarlos mediante una sencilla tinción, y de esta forma determinar el 
contenido de ácidos nucleicos de una muestra, teniendo una estimación de su 
concentración y grado de entereza. Podemos además extraer del gel los fragmentos de ADN 
que sean de interés, para posteriormente utilizarlos en diferentes aplicaciones. 
La electroforesis de ADN puede realizarse en geles de agarosa o de poliacrilamida. Ambos 
tienen características diferentes en cuanto a sus propiedades y modo de preparación, por 
lo que se utilizará uno u otro en función de la aplicación y objetivos que persigamos. La 
electroforesis en geles de agarosa es el método estándar para separar y purificar 
fragmentos de ADN cuando no requerimos un alto poder de resolución. 
 Por su parte, la electroforesis en geles de poliacrilamida, aunque tiene una mayor 
limitación en cuanto al tamaño de los fragmentos que podemos separar (5-600 pb), posee 
un poder de resolución mucho mayor, permitiendo la separación de moléculas que difieren 
en un sólo par de bases. 
La electroforesis de proteínas es una técnica de laboratorio que permite la separación de 
las proteínas de acuerdo a sus características físicas y al método utilizado. En el suero 
humano se han identificado más de 120 proteínas con un amplio rango de heterogeneidad 
y han sido clasificadas en regiones tales como la albúmina, las α globulinas, las β-globulinas 
y las γ globulinas de acuerdo a su carga eléctrica y a su peso molecular. Esta es la técnica 
más utilizada para estudiar las proteínas en forma integral como una prueba de tamización, 
por lo tanto se requieren estudios adicionales y más específicos para el diagnóstico de las 
alteraciones aquí reportadas. 
Diagrama de flujo 
 
 Cuestionario 
¿Qué es una electroforesis? 
Técnica de laboratorio en la que se usa corriente eléctrica para separar sustancias, como las 
proteínas y los ácidos nucléicos. El tamaño y la carga eléctrica (positiva o negativa) de una 
sustancia determina cuán lejos se desplaza con la corriente. 
¿Qué carga tienen la adn y que carga las proteínas? 
El adn negativas y las proteinas positivas 
 
¿Qué reactivos se usan para hacer una electroforesis de adn? 
El glicerol para aportar densidad a la muestra y facilitar su aplicación a los pocillos. Azul de 
bromofenol (u otro colorante como el xileno-cianol) como marcador del frente de avance 
de la electroforesis. Asimismo, su color es una ayuda visual durante la carga de muestra en 
los pocillos. 
¿Por qué se usa el bromuro de etildio? 
Porque es un agente intercalante (se intercala entre las bases nitrogenadas) que se usa 
como colorante fluorescente para la visualización de ácidos nucleicos en geles de agarosa y 
poliacrilamida. 
¿En qué parte quedan los genes más pesados y en cual los más ligeros? 
Los genes mas ligeros quedan sobrenadando por ende los mas pesados están en la parte de 
abajo 
¿Para qué se utiliza la luz ultravioleta? 
para observar, analizar y tomar fotografías de proteínas, aminoácidos, péptidos, ácidos 
nucleicos en geles de agarosa con colorantes como el bromuro de etidio. 
¿Qué medidas de seguridad se deben utilizar al momento de hacer la 
electroforesis? 
El trabajador se protegerá con bata de laboratorio, guantes desechables por ejemplo de 
nitrilo, gafas de seguridad con protección ultravioleta y, en caso de derrames sólidos, 
mascarilla autofiltrante tipo FFP3 para partículas sólidas.