Biología - Eldra Solomon, Linda Berg, Diana Martin - 9 Edición-comprimido-114

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80 Capítulo 4 
que contiene los siguientes componentes celulares más pesados, por 
ejemplo, las mitocondrias y los cloroplastos. En la centrifugación di-
ferencial, el sobrenadante se centrifuga con rapideces sucesivamente 
mayores, permitiendo la separación de diversos componentes celulares 
en función de la diferencia de tamaño y densidad (FIGURA 4-5b).
Los componentes celulares de los sedimentos resuspendidos se 
pueden además purifi car por medio de centrifugación en un gradiente 
de densidad. En este procedimiento, los tubos de la centrífuga se llenan 
con una serie de disoluciones de densidad decreciente. Por ejemplo, se 
pueden utilizar disoluciones de sacarosa. La concentración de sacarosa 
es más alta en el fondo del tubo y disminuye gradualmente, de modo 
que la concentración más baja está en la parte superior. Cada muestra 
de sedimento resuspendido se coloca sobre la capa superior de un gra-
diente de densidad. Puesto que la densidad de los orgánulos es diferente, 
durante la centrifugación cada tipo de ellos migrará y formará una banda 
El fraccionamiento celular es una técnica para separar (fraccio-
nando) diferentes partes de la célula de modo que se puedan estudiar por 
métodos físicos y químicos. Generalmente, las células se separan en un 
mezclador. La mezcla resultante, llamada homogenizado o extracto ce-
lular, se somete a una fuerza centrífuga en un aparato llamado centrífuga 
(FIGURA 4-5a). Las potentes ultracentrífugas pueden rotar con una rapi-
dez que supera las 100,000 revoluciones por minuto (rpm), generando 
fuerzas centrífugas alrededor de 500,000 × G (una G equivale a la fuerza 
de la gravedad). La fuerza centrífuga separa el extracto en dos fracciones: 
un sedimento y un sobrenadante. El sedimento que se forma en el fondo 
del tubo contiene los materiales más pesados, como los núcleos, muy jun-
tos o empaquetados. El sobrenadante, el líquido que queda por encima del 
sedimento, contiene las partículas más ligeras, moléculas disueltas y iones.
Después de remover el sedimento, el sobrenadante se puede cen-
trifugar de nuevo a mayor velocidad para obtener un nuevo sedimento 
M É TO D O D E I N V E S T I G AC I Ó N
Los microscopios electrónicos tienen un poder de resolución mucho mayor que los microscopios ópticos. Los 
microscopios electrónicos también pueden amplifi car las imágenes mucho más que los microscopios ópticos. 
Microscopio 
óptico
Microscopio 
electrónico 
de transmisión
Microscopio 
electrónico 
de barrido
Cañón de 
electrones
Haz de electrones
Primer condensador 
(electroimán)
Muestra
Proyector 
(electromagnético)
Electrones 
secundarios
Muestra
Película o pantalla
fluorescente
Detector 
de electrones
Segundo 
condensador
Bobina de barrido
Lente final 
(objetivo)
Tubo de rayos catódicos 
sincronizado con el espiral 
o bobina de barrido
Haz de luz
Ocular
Objetivo
Muestra (espécimen)
Condensador
Fuente de luz
100 μm 1 μm 100 μm 
(a) Se puede usar un microscopio óptico de 
contraste de fases para ver células teñidas o 
vivas, pero con una resolución relativamente 
baja.
(b) El microscopio electrónico de transmisión 
(MET) produce una imagen de alta resolución 
que se puede ampliar considerablemente. 
Se muestra un segmento de un corte muy
fino del Paramecium.
(c) El microscopio electrónico de barrido 
(MEB) proporciona una clara visión de las 
características de la superficie.
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En un microscopio electrónico, un haz de electrones se enfoca sobre o a través de la muestra. En lugar de 
lentes de vidrio, se utilizan lentes electromagnéticos para formar la imagen. Aquí se comparan las imágenes 
del protista Paramecium utilizando un microscopio de contraste de fases con las imágenes hechas usando dos 
tipos de microscopios electrónicos. Estos tres microscopios producen imágenes muy distintas de las células.
FIGURA 4-4 Animada Uso de microscopios electrónicos 
¿Por qué se uti l iza?
¿Cómo se hace esto?
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