BIOQUÍMICA PRACTICA N1 FRACCIONAMIENTO CELULAR

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I N F O R M E
P R A C T I C A D E L A B O R A T O R I O
Alumno: Yupanqui Arias Jose
Jhony
Profesor: Suarez Castañeda, Carlos
Edgar
BIOQUIMICA
Guadalupe, 2023
F A C U L T A D D E E N F E R M E R Í A
F I L I A L V A L L E J E Q U E T E P E Q U E
PRACTICA N°1
FRACCIONAMIENTO SUBCELULARFRACCIONAMIENTO SUBCELULAR
Introducción:Introducción:
En este experimento, realizamos el fraccionamiento
subcelular utilizando un hígado de pollo, con el objetivo
de extraer sus biomoléculas y orgánulos celulares. A
los cuales se le aplicaciones se sacarosa para
conservar a los organelos.
Objetivo:Objetivo:
Extraer biomoléculas y los organelos subcelulares por centrifugación diferenciada.
Materiales:Materiales:
Hígado de pollo.
Buffer Fosfato helado.
Tijera.
Jeringa.
Algodón.
Placa Petri.
Vaso de precipitación.
Procedimiento:Procedimiento:
Comenzamos colocando el hígado de pollo en una placa de Petri y procedemos a
realizar los siguientes pasos:
Prefusión: En este paso, inyectamos Buffer fosfato frío en el tejido hepático para eliminar los
nervios, la sangre coagulada y para que el tejido adquiera un color más claro y blanco.
Homogeneizado: A continuación, transferimos el hígado a un mortero y lo trituramos junto
con una pequeña cantidad de Buffer fosfato. Tras mezclar bien, filtramos el homogeneizado
para obtener una pasta uniforme.
Centrifugación diferencial: Tras obtener el homogeneizado, transferimos una porción del
mismo a un tubo de ensayo y lo sometimos a centrifugación a distintas velocidades.
Tubos de ensayo.
Gradilla.
Mortero.
Centrifuga.
Balanza.
Embudo.
Concluciones:Concluciones:
El uso de tejido animal en esta práctica nos permitió observar diferentes fracciones e identificar
las enzimas presentes en cada una de ellas. Mediante este proceso, pudimos obtener del
sobrenadante la fracción soluble o citosol, que se separó de la fracción microsomal. Esto se
consiguió gracias a nuestros conocimientos básicos y al uso de la centrifugación diferencial, que
nos permitió extraer diversas biomoléculas presentes en el plasma sanguíneo. Esta práctica nos
permitió alcanzar nuestro objetivo y conocer mejor la composición del tejido animal.
A partir de la segunda centrifugación, se obtiene la fracción mitocondrial, que contiene enzimas
responsables de la cadena respiratoria, como la citocromo oxidasa y el ciclo de Krebs, así como
de la respiración celular y la síntesis de ATP. Además, el sobrenadante obtenido en este paso se
someterá a una tercera y última centrifugación a 100.000 revoluciones durante 60 minutos. Como
resultado, se obtiene la fracción postmitocondrial, que es la fracción microsomal. Esta fracción
contiene enzimas implicadas en la síntesis de proteínas en el retículo endoplásmico rugoso, y el
citosol puede observarse directamente. Por último, separamos el citosol de la fracción
microsomal, que contiene enzimas responsables de la glucólisis, incluida la lactato
deshidrogenasa.
Resultados :Resultados :
Anexos:Anexos:
Prefusión Triturado del tejido
ResultadosObtención de Fracción Soluble