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39Capítulo Irene de Haro Arteaga Aurora Elvira Candil Ruiz Contenido ■ Introducción ■ Diagnóstico parasitológico ■ Descripción de las técnicas Diagnóstico parasitológico Los exámenes parasitoscópicos se pueden clasifi car según diversos parámetros, y si se toma en cuenta el tipo y proce- dencia del producto biológico en: a) coproparasitoscópicos (CPS) mediante los que se diagnostican las parasitosis intes- tinales y cuyo producto biológico es la materia fecal; b) los de cavidades, en los que los productos biológicos son exuda- dos, y c) los tisulares, en los cuales los productos biológicos pueden ser una biopsia, el raspado de una úlcera, sangre, secreciones de lesiones, etcétera. Exámenes coproparasitoscópicos (CPS) Alude a todas aquellas técnicas en las que se utiliza la mate- ria fecal para realizar el diagnóstico parasitológico. Se cono- cen desde el siglo pasado, no obstante siguen siendo en la actualidad las herramientas más usadas para diagnosticar las parasitosis del aparato digestivo. Se pueden clasifi car se- gún los siguientes aspectos: • De acuerdo con el momento de su realización. Pueden ser inmediatos, como los CPS en fresco, y las mediáti- cas, es decir, que no se realizan de inmediato, utilizan- do o no una solución conservadora. • Según el tipo de procesamiento de la muestra. Pueden ser por examen directo macroscópico o microscópico. Dentro de los estudios microscópicos se encuentran aquellos donde la muestra se estudia directamente (examen directo en fresco) y aquellos donde se realiza Introducción El diagnóstico de las parasitosis es uno de los complementos necesarios para llevar a cabo, en forma adecuada y oportu- na, el tratamiento de las mismas. Entre las técnicas utiliza- das para tal efecto están los métodos directos en los que se identifi ca a los parásitos o fases parasitarias en productos biológicos del paciente y que se conocen como exámenes parasitológicos o parasitoscópicos. Otras técnicas son las que llevan a cabo la identifi cación indirecta de los parásitos; en este inciso estarían la mayoría de las inmunológicas. Por último están las técnicas moleculares. Diagnóstico de las parasitosis Preguntas de evaluación inicial 1. ¿A qué se le llama examen CPS y qué tipo de parasitosis se diagnostica mediante éste? 2 . ¿Qué otros exámenes de laboratorio, que no sean CPS, permi- ten el diagnóstico de parasitosis intestinales? 3 . ¿Qué técnicas CPS cuantitativas se conocen o son las más conocidas? 4 . ¿Qué técnicas permiten el diagnóstico de parasitosis sanguí- neas? 5 . ¿Cómo se dividen las pruebas inmunológicas para diagnósti- co de parasitosis? algún procedimiento para concentrar las formas para- sitarias como la fl otación, sedimentación y tropismo. Otros más son los de dilución, por cultivo, por aclara- miento y por tinción. • Por su expresión numérica pueden ser cualitativos y cuantitativos. • Por la aplicación de colorantes se clasifi can en los que utilizan una preparación húmeda y en los que la tin- ción es más elaborada, pues requiere usar agentes fi ja- dores y deshidratantes de la muestra. Estas técnicas son las ideales para material museográfi co y para con- fi rmar diagnósticos dudosos. • Otro tipo de examen que tiene relación con parásitos del tubo digestivo es el raspado anal y perianal, y otro más es el examen de contenido duodenal obtenido por sondeo o por medio de la cápsula duodenal. Exámenes parasitoscópicos de cavidades En este caso se trata de la obtención de secreciones (vagina- les y uretrales) para las cuales se requiere cierto manejo para la obtención de la muestra, como el espejo para la obtención de secreción vaginal o el masaje prostático para el uretral. Descripción de las técnicas Enseguida se describen en forma somera cada uno de los exámenes utilizados; si desea profundizar en estos temas se pueden consultar libros especializados para diagnóstico en parasitología. En primer lugar se describen dos técnicas empleadas para establecer diagnósticos muy específi cos, y que dentro de la anterior clasifi cación quedan entre los exáme- nes inmediatos porque prácticamente no requieren mayor proceso de la muestra. Tamizado En esta técnica se utilizan tamices de diferentes mallas por las cuales se hace pasar el producto biológico (materia fecal). Bajo el chorro del agua se hace un lavado para liberar los parásitos. Se recomienda para la recuperación de parásitos, como Necator americanus, Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura y Taenia spp, entre otros, en general después del tratamiento, o bien para llevar a cabo el diagnóstico especí- fi co para Taenia spp. Examen CPS directo en fresco El examen CPS directo en fresco tiene dos variantes. En una de ellas se utiliza la solución salina isotónica, y se recomien- da para todos aquellos casos en que se desea identifi car tro- fozoítos de protozoos, como los de Entamoeba histolytica, o larvas de Strongyloides stercoralis. No obstante, se pueden identifi car también otras formas parasitarias. En la otra se usa solución yodo-yodurada (Lugol). Ésta es una excelente técnica para identifi car cualquier forma de parásitos intesti- nales, siempre y cuando se haga una buena homogeneiza- ción de la materia fecal antes de tomar la muestra. Una aplicación más del CPS directo en fresco es que se puede utilizar para informes cuantitativos, siempre y cuan- do se estandarice la cantidad de materia fecal necesaria para efectuar la técnica, y mediante una regla de tres simple se obtiene el número de huevos por gramo de heces que con- tiene la muestra. Por lo regular, la cantidad necesaria para aplicar un método como éste es de 2 a 3 mg de materia fecal para un cubreobjetos de 22 22 mm. Examen de fl otación con salmuera Es una técnica de concentración cualitativa conocida como fl otación de Willis. Es muy antigua, ya que se utiliza desde 1921, y además es ideal para trabajo de campo, pues la solu- ción saturada de NaCl (sal común o de mesa) se puede hacer en cualquier recipiente. La muestra se homogeneiza en una pequeña cantidad de salmuera, enseguida se hace la suspen- sión de tal manera que llegue hasta el borde del frasco, se deja reposar 15 a 30 min y se recolecta el material fl otante con un cubreobjetos, en donde se podrán identifi car las for- mas parasitarias. Es un buen método para el diagnóstico parasitológico, tanto para las protozoosis, como para las helmintiasis, excepto cuando se desea observar trofozoítos. La lectura se debe realizar pasado el tiempo señalado para evitar deformación de las fases de los parásitos. La materia fecal se puede utilizar con soluciones conservadoras o sin ellas. Otra técnica muy utilizada en veterinaria es la fl ota- ción simple en solución saturada de sacarosa (azúcar de mesa), la cual se realiza de manera semejante a la descrita antes. Algunos parasitólogos recomiendan una densidad de la solución de sacarosa de 1.200 °Bé. Esta técnica, como la anterior, también puede provocar la deformación de las for- mas parasitarias, por lo que la lectura se debe hacer 15 a 20 min después de hacer el homogeneizado. También es posi- ble utilizar muestras con diversos conservadores. Examen CPS de concentración por centrifugación fl otación Se conoce como técnica de Faust, ya que fue él quien la diseñó en 1938. Es una de las más populares; se utiliza prácticamen- te en todos los laboratorios del sector salud y privados. Se re- quiere una solución de sulfato de zinc con densidad de 1.180 °Bé; si se carece de densímetro, hay técnicas mediante las cuales se sabe que la cantidad de sal para obtener esa den- sidad, es de 350 g de sulfato por litro de agua, aunque siempre es recomendable ajustar la densidad. La técnica en sí consiste en homogeneizar con agua de la llave una pequeña porción de materia fecal; luego se cen- trifuga y se lava una o dos veces, entre las cuales se decanta Capítulo 39 Diagnóstico de las parasitosis312 el líquido sobrenadante; el último botón se homogeneizacon la solución de sulfato, se vuelve a centrifugar y se toma el sobrenadante con un asa de alambre. Luego se homoge- neiza con Lugol, se cubre y se observa. Se pueden trabajar las muestras de inmediato o utilizar un conservador (formali- na al 5 a 10%). Examen CPS de concentración por sedimentación-centrifugación o de Ritchie Se le conoce en los laboratorios de diagnóstico como técnica del formol éter. Se utiliza una solución de formalina al 10%, la cual sirve para fi jar las formas parasitarias y el éter para liberarlas. Es recomendable la utilización de tubos de cen- trífuga cónicos de 15 ml, lo que hace que la técnica no sea muy popular por la carencia de los mismos. No obstante, es posible utilizar los tubos de 13 100 mm con resultados sa- tisfactorios. La muestra se homogeneiza con solución salina isotónica y se centrifuga, se lava y se obtiene el sedimento, al que se agrega la solución de formalina y enseguida el éter. Luego se agita y se vuelve a centrifugar. En el sedimento fi nal se encuentran las formas parasitarias diagnósticas. Examen CPS de sedimentación simple en copas Es una técnica indicada para los casos en que se requiere diagnosticar fasciolosis, aunque se pueden encontrar otros tipos de huevos de helmintos e inclusive quistes, sin embar- go son más prácticas las técnicas ya descritas. Para su reali- zación se utiliza una solución de detergente y otra de verde de malaquita. El detergente libera los huevos de Fasciola he- patica y el colorante tiñe la materia fecal y artefactos, con excepción de los huevos que permanecen con su color natu- ral. Se puede observar directamente el sedimento en una caja de Petri mediante una lupa, o bien hacer varias prepa- raciones y llevarlas al microscopio utilizando el objetivo de menor aumento (4×). Recuérdese que los huevos de F. hepati- ca miden de 120 a 150 μm. Métodos cuantitativos Son métodos que se utilizan para relacionar la eliminación de huevos de un helminto con la masividad de la parasitosis, la cual se entiende como aquella en la que los signos y sínto- mas son específi cos de la misma. Cuando se describió el CPS directo en fresco se trató también la variante cuantitativa. Examen CPS cuantitativo por dilución Técnica conocida en todo el mundo como técnica de Stoll. En ella se emplea una solución de hidróxido de sodio 0.1 N (déci- mo normal). Originalmente se ideó y diseñó para cuantifi car huevos de Ancylostoma duodenale y Necator americanus; posteriormente se popularizó su uso y, desde 1923, año en que se publicó por primera vez la técnica, se utiliza como mé- todo cuantitativo en las geohelmintiasis. Para su realización se requieren probetas y pipetas calibradas, pues se debe hacer una suspensión de materia fecal-solución de hidróxido de so- dio 1:15; de esta dilución se obtiene un factor por el que se multiplica el número de huevos encontrados para reportarlos como h/ml/h (huevos por mililitro de heces). Método CPS cuantitativo del frote grueso o de Kato-Miura En 1954, Kato y Miura diseñaron este método, en 1966, Ko- miya y Kobayashi lo valoraron, y en 1968, Martin y Beaver lo revaluaron. Desde entonces se sigue utilizando en ciertos laboratorios privados de diagnóstico y en algunas institu- ciones de salud. La técnica original y sus variantes utilizan cubreobjetos de celofán, humedecidos previamente en una solución de verde de malaquita y glicerina, para que se im- pregnen. La glicerina sirve para aclarar los huevos de los parásitos y el verde de malaquita para contrastarlos. La materia fecal que se utilizará debe ser fresca y sin ningún procesamiento previo, pero en la modifi cación pro- puesta por Martin y Beaver se recomienda el uso de una malla de alambre para mosquitero, para pasar la muestra y obtenerla sin detritus grandes. Los cubreobjetos que se uti- lizan en todas ellas son los mismos. Para hacer el informe se plantea una regla de tres simple y se reportan huevos por gramo de heces (h/g/h). Como la cantidad de materia fecal requerida para el frote grueso varía de 30 a 50 mg, es nece- sario hacer varias calibraciones en el laboratorio para estan- darizar la cantidad utilizada y así obtener el factor por el que se multiplicará la lectura en lo sucesivo. Método CPS cuantitativo del frote grueso o Kato-Katz Método que tiene el mismo fundamento que el anterior, sólo que además de la malla de alambre se utiliza un cartón grueso de 3 mm de grosor con un orifi cio de 6 mm de diá- metro, por donde se hace pasar la muestra previamente ta- mizada en la malla de alambre. De esta manera se forma un pequeño cilindro que se coloca sobre un portaobjetos y se cubre con el cubreobjetos de celofán y los valores se dan también de la misma manera que en el método anterior, aunque aquí hay que estandarizar la cantidad de muestra que contiene el cilindro. Métodos diversos A continuación se describen otros exámenes en los que se emplea materia fecal, aunque por la metodología utilizada no corresponden a las clasifi caciones anteriores. Estas técnicas se basan en principios biológicos; para la concentración de lar- vas por termo e higrotropismo, el desarrollo de larvas en pa- pel fi ltro y diversas técnicas de tinción de frote de heces. Descripción de las técnicas 313 Concentración de larvas por termo e higrotropismo En este método se usa un aparato conocido como de Baer- mann, construido con un soporte universal donde se monta un embudo con una tela de alambre y una gasa. El embudo se conecta a una manguera de caucho, y ésta se cierra con una pinza de Mohr. Al embudo se le coloca agua a 40 a 45 °C y la muestra se pone sobre la gasa. Las larvas, al tener termo e higrotropismo positivo, se concentran en el agua, la cual se recolecta en un tubo que se centrifuga y en el sedimen- to se identifi can. Cultivo de heces en papel fi ltro de Harada-Mori Este método se utiliza desde 1955, cuando lo describieron sus autores. Consiste en colocar en tubos de 25 200 mm una tira de papel fi ltro en la que se colocó la muestra a todo lo largo de la misma mediante un aplicador de madera. Se respetan 2 cm en cada extremo del papel. Antes de colocar el papel fi ltro con la muestra en el tubo, se vierten en éste 3 a 5 ml de solución salina. Después se introduce el papel, y por ósmosis se mantiene húmedo. Las larvas se concentran en la solución salina. Las larvas de N. americanus y A. duo- denale requieren mayor tiempo para el desarrollo de las for- mas infectivas que las de Strongyloides stercoralis. Método de la caja de Petri Una variante del método anterior es colocar una tira de pa- pel fi ltro sobre un portaobjetos, en tal forma que lo cubra perfectamente. Enseguida, con la ayuda de un aplicador de madera, se coloca la muestra sobre el papel y se pone el por- taobjetos en forma inclinada en una caja de Petri con agua, de manera que sólo el extremo esté en contacto con el líqui- do; para esto se utiliza una varilla de vidrio. Este método es muy sencillo y se facilita la identifi cación en forma directa en el líquido de la caja de Petri, de las larvas mediante una lupa potente. Cultivo de heces en arena o carbón Método útil para obtener larvas rabditoides y fi lariformes de A. duodenale, N. americanus y S. stercoralis. Consiste en mezclar la materia fecal con una porción aproximadamente igual de arena o carbón en polvo, y colocar todo homoge- neizado con agua en una caja de Petri. Se tapa y se examina el agua de evaporación de la tapa en busca de las larvas. Tinciones Los métodos de tinción del frote de heces son muy útiles cuando se desea corroborar el diagnóstico, de modo especí- fi co para la diferenciación entre E. histolytica y amibas co- mensales. Otra aplicación de estos métodos de tinción es en preparaciones teñidas que permitan aclarar dudas (prepara- ciones museográfi cas). Las tinciones más utilizadas son las de hematoxilina férrica de Heidenhain y la tricrómica de Gomori. Método del raspado perianal con cinta de celofán adhesiva Se conoce comotécnica de Graham. Fue diseñada por este autor en 1941; se describió originalmente para diagnosticar enterobiasis; no obstante, es factible encontrar otros tipos de huevos como los de A. lumbricoides y de Taenia spp. Para este método se utiliza un abatelenguas en donde se coloca la cinta adhesiva con el pegamento hacia el exterior. Se expone la región anal, y mediante este dispositivo se hace un raspa- do de toda la zona. Enseguida se coloca la cinta sobre un portaobjetos y se examina con el microscopio. Es recomen- dable hacer el raspado por la mañana antes de defecar y del baño de aseo. Métodos para diagnosticar parasitosis cavitarias y tisulares En este apartado se describen, también brevemente, los mé- todos empleados para establecer el diagnóstico de las para- sitosis de cavidades y tisulares. Examen en fresco de secreciones de cavidades Este método es útil para la observación de protozoos como Entamoeba gingivalis, Trichomonas tenax y T. vaginalis. Las dos primeras se encuentran como comensales de la cavidad bucal y la última de la vaginal. Los exámenes en fresco se hacen con una suspensión del raspado de la base de los dientes para las dos primeras especies y del exudado vaginal de la última. De la suspen- sión se toma una gota, se cubre y se observa al microscopio a seco fuerte. En algunos casos es necesario tomar la mues- tra para el diagnóstico de tricomoniasis por medio de un espejo en la mujer y con masaje prostático en el varón. Para esta operación se requiere el consultorio, un hospital, o bien un laboratorio con personal califi cado. Frote de secreción vaginal o uretral Método que puede ser utilizado para confi rmar el diagnós- tico de tricomoniasis. Para efectuar esta técnica se requiere exudado vaginal o uretral. Se toma una gota del producto biológico, se coloca en un portaobjetos y se suspende en yodo metaloide previamente colocado en la estufa para que subli- me; la gota suspendida absorbe los vapores, por lo que se fi - jan los trofozoítos de T. vaginalis. Enseguida se coloca una gota de sangre y se homogeneiza con la muestra fi ja y se hace un frote, el cual se tiñe con Giemsa o Wright. Examen en fresco de sangre periférica Este método resulta útil para observar hemofl agelados. Se coloca una gota de sangre obtenida por punción en un dedo, con una lanceta desechable y estéril; se le pone un cubreob- jetos y se examina con seco fuerte. Capítulo 39 Diagnóstico de las parasitosis314 Frote de sangre Método útil para identifi car parásitos en sangre como he- mofl agelados y Plasmodium spp. Se utiliza sangre periférica obtenida mediante punción en el pulpejo con lanceta de- sechable. Por lo regular se obtiene del dedo cordial. Una sola gota basta para hacer el frote; se arrastra la gota extendida por capilaridad utilizando un porta o un cubreobjetos, y deslizándolo suavemente hasta llegar a un límite en que no queden “barbas”, se deja secar. Se fi ja con metanol absoluto y se tiñe con Giemsa o Wright. Gota gruesa Está indicado sobre todo para el diagnóstico de paludismo; la clave de una gota gruesa bien hecha está en la hemólisis completa de los glóbulos rojos para que aparezcan los pará- sitos desnudos. Se requiere una gota o dos de sangre obteni- da por punción; la gota se desfi brina con la misma lanceta con que se hizo la punción o con el ángulo de un portaobje- tos. Luego se deja secar, y enseguida se laquea la sangre con agua de la llave o con solución salina al 0.5% hasta que ya no se vea color y se deja secar. Se fi ja con metanol absoluto y se tiñe con Giemsa o Wright. Concentración de microfi larias Método diseñado por Knott en 1939; es útil para la identifi - cación de microfi larias (Mf) en sangre periférica. Se centri- fuga la sangre a baja velocidad, mezclada previamente con una solución de formalina al 1:6. Se deja reposar 10 min y se centrifuga de nuevo a 1 000 rpm durante dos minutos. Se decanta el sobrenadante, se agregan unas gotas de azul de metileno 1:10 000 y se hacen varias lecturas entre portaobje- tos y cubreobjetos para identifi car las microfi larias. Método de Strout para diagnosticar la enfermedad de Chagas Es una técnica de concentración de hemofl agelados. Me- diante punción venosa se obtienen 5 ml de sangre. Ésta se vacía en un tubo, se deja coagular a temperatura ambiente, se retrae el coágulo, se saca y el suero se centrifuga tres mi- nutos a 500 rpm. Se elimina el sobrenadante y el sedimento se vuelve a centrifugar a 1 500 rpm durante un minuto. Se decanta una vez más y el botón se examina para buscar los tripanosomas. Xenodiagnóstico Procedimiento que, desde el punto de vista etimológico, signifi ca diagnóstico con el extraño o extranjero. Se utiliza fundamentalmente para diagnosticar la enfermedad de Chagas. Consiste en colocar en la espalda o antebrazo del paciente el transmisor, en este caso insectos triatomídeos. Al alimentarse éstos de la sangre del paciente se llevan los tripanosomas, que se multiplicaran de manera activa en el aparato digestivo del insecto. De esta manera, las posibili- dades de encontrar los hemofl agelados en las heces del in- secto aumentan en forma importante. El xenodiagnóstico también se puede aplicar para ca- sos de triquinosis. Se toma una biopsia del paciente sospe- choso, la cual se da a comer a una rata, quien se sacrifi ca después. En la necropsia se buscan las larvas en intestino y músculo. Triquinoscopia Método utilizado sobre todo para regular la parasitosis en rastros. Se usan dos láminas de vidrio de 30 12 cm en donde se encuentran marcadas celdas de 25 25 mm cada una. En cada celda se coloca una pequeña porción de carne de los cerdos sacrifi cados y se comprimen los vidrios por medio de pinzas a uno y otro lados. Luego se observa con la lupa del microscopio. Cuando se trata de una triquinosco- pia con biopsia de un paciente se utilizan dos portaobjetos, los que se someten a compresión. Digestión artifi cial Método para efectuar el diagnóstico de triquinosis. Es exce- lente para liberar las larvas de músculo de rata, cerdo o de una biopsia de humano, con objeto de efectuar la identifi ca- ción precisa de las larvas. Se utiliza jugo gástrico artifi cial, que es una solución al 0.5% de pepsina acidulada con HCl. Biopsias Útiles en aquellas parasitosis tisulares que representan un problema de diagnóstico, como en el caso de leishmaniasis visceral o kala-azar, en que se requiere investigar el parásito en una biopsia de bazo o en una amibiasis hepática en que se necesita una biopsia de la pared de un foco necrótico ante la ausencia de amibas en el contenido del mismo. Método de la biopsia para identifi car microfi larias en la piel En 1922, Macfi e y Corso idearon este método para identifi - car las microfi larias (Mf) de Onchocerca volvulus. Es una técnica sencilla. Se utilizan una hoja de bisturí y unas pin- zas con las cuales se toma una pequeña porción de piel del hombro o de la zona escapular, se jala un poco y se hace un corte superfi cial de manera que no sangre. La biopsia así ob- tenida se macera con solución salina isotónica en un por- taobjetos y se examina en fresco con el microscopio a seco débil y fuerte. O bien con esa pequeña porción de tejido se realizan cortes histopatológicos, con el mismo objetivo. Impronta Impronta en italiano signifi ca “impresión”. Es un método sencillo que debería denominarse mejor frote por aposición. Consiste en utilizar una pequeña porción del tejido por in- vestigar, con el que se hace la impresión en portaobjetos, se deja secar, se fi ja con metanol y se tiñe con Giemsa o Wright. Descripción de las técnicas 315 Cultivos Los métodos de cultivo se utilizan para diversas parasitosis. Existen el axénico, el monoxénico y el huevo-sangre para E. histolytica, el NNN para T. cruzi y Leishmania spp. Así como los cultivos celulares para estas y otras parasitosis. El cultivo en carbón o arena y en papel de fi ltro para uncina- rias (ya descrito). En síntesis, loscultivos se utilizan para todos los casos en que se requiere confi rmar un diagnóstico, o bien para investigación. Diagnóstico inmunológico Las técnicas inmunológicas se pueden clasifi car en dos gru- pos: directas e indirectas. Las directas permiten la identifi - cación de antígenos parasitarios y por medio de las indirectas se determina la presencia de anticuerpos y la respuesta celu- lar del huésped al parásito. Las técnicas son muy variadas y se emplean en muchos laboratorios; entre las más emplea- das esta la reacción de fi jación del complemento que aunque laboriosa, rinde excelentes resultados para el diagnóstico de diversas parasitosis. Otros métodos, como la inmunodifusión (ID), hemaglutinación directa (HAD) e indirecta (HAI), con- trainmunoelectroforesis (CIEF), han sido sustituidas por la inmunofl uorescencia directa (IFD) e indirecta (IFI) o bien por el inmunoensayo enzimático (ELISA) y la inmunoelectro- transferencia, que permiten procesar un número elevado de muestras con alta sensibilidad y especifi cidad y se utilizan actualmente en prácticamente todas las parasitosis. Algu- nas de las técnicas indirectas, como la intradermorreacción de Casoni o la de Bachmann han quedado en desuso, mien- tras que la de Montenegro para la leishmaniasis cutánea si- gue vigente. Diagnóstico molecular La biología molecular revolucionó y amplió los conocimien- tos relacionados con las enfermedades parasitarias y sus agentes etiológicos. Este tipo de diagnóstico se basa en un grupo de técnicas en las que se amplifi ca el DNA correspon- diente a fragmentos de genes o de genes completos. Una de las más empleadas es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), desarrollada por Kary Mullis en 1983. Posterior- mente se han derivado otras, algunas de las cuales quizá en unos años, van a sustituir tanto a las técnicas parasitológi- cas como a las inmunológicas. En la actualidad el diagnós- tico molecular se utiliza principalmente en investigación diagnóstica y estudios epidemiológicos en algunas de las enfermedades parasitarias como es el caso de la amibiasis, giardiasis, ciclosporosis, microsporidiosis, paludismo, toxo- plasmosis, leishmaniasis, tripanosomiasis, fasciolosis, on- cocercosis, estrongiloidosis, hidatidosis y cisticercosis entre otras. Pruebas diagnósticas rápidas También se basan en los avances de la biología molecular y actualmente se usan en algunas enfermedades infecciosas, ya que permiten obtener resultados en un tiempo muy corto en el consultorio y en presencia del paciente. Son muy sen- cillas de realizar por lo que no requieren equipo ni personal especializado, lo que permite tomar decisiones inmediatas con respecto al tratamiento. Problemas de diagnóstico Uno de los centros de referencia a los cuales se puede recu- rrir cuando no se cuente con los recursos para establecer el diagnóstico de cualquier enfermedad parasitaria, es el CDC (Centers for Disease Control) de Atlanta, Georgia, en Esta- dos Unidos. Este centro da servicio a todo el mundo y tiene montadas todas las técnicas conocidas para diagnóstico de las enfermedades infecciosas y parasitarias. Estudios de gabinete Los estudios de gabinete son auxiliares valiosos en algunas parasitosis tisulares, como la cisticercosis o la hidatidosis. Es incuestionable la utilidad de la tomografía axial computari- zada y la resonancia magnética para estos casos. Los exáme- nes con yodo radiactivo para identifi car, por medio de un hepatogammagrama, los focos necróticos. Una serie esofa- gogastroduodenal para identifi car una suboclusión u oclu- sión por áscaris. Una rectosigmoidoscopia servirá no sólo para diagnosticar amibiasis y tricocefalosis, sino para tomar una biopsia de recto para estudio anatomopatológico. Para quienes deseen abundar más en las técnicas trata- das, acuda a la bibliografía presentada en este capítulo, en la que se encuentran detallados todos los métodos que se pue- den emplear para el diagnóstico de las parasitosis. Bibliografía De-Haro-Arteaga I, Salazar-Schettino PM, Cabrera-Bravo M. Diagnóstico morfológico de las parasitosis. 2a ed, Méndez Ed, México. 2002 (Reimpresión). Escobar-Gutiérrez A. Anticuerpos monoclonales, biología mole- cular y bioseguridad. Manual de técnicas de laboratorio, Vol. III. México: INDRE SSA, 1995. Golvan YJ, Drouet E. Exámenes de laboratorio. Técnicas en para- sitología y micología. Barcelona: Ed. Jims, 1977; 407. Melvin DM, Brooke MM. Laboratory procedures for the diagnosis of intestinal parasites. USA: HHS Publication No. (CDC) 80-8282. 1980:199. (Reimpresión.) Capítulo 39 Diagnóstico de las parasitosis316 1. Son aquellos estudios donde se utiliza materia fecal con la fi na- lidad de identifi car parásitos y/o fases para el diagnóstico de las parasitosis que afectan el tracto digestivo. 2 . Técnica de Gram, tamizado de heces, cultivo de Harada-Mori, técnica de Baerman. 3 . Técnicas de Kato-Miura, Kato-Katz, Stoll. 4 . Frote de sangre, gota gruesa, Strout. 5 . Pruebas directas (búsqueda de antígenos) e indirectas (bús- queda de anticuerpos). Respuestas a las preguntas de evaluación inicial 1. ¿Las técnicas moleculares podrán sustituir con el tiempo a las pruebas directas como los CPS, para confi rmar el diag- nóstico parasitológico? 2. ¿En qué casos se recomienda emplear una prueba serológica y una molecular para el diagnóstico de alguna parasitosis? 3. ¿Que factores infl uyen, desde el punto de vista de la com- plejidad estructural del parásito, en la especifi cidad y sensi- bilidad de las técnicas indirectas? Preguntas para refl exionar Shore-García L, Ash LR. Diagnóstico parasitológico. Manual de laboratorio clínico. 2a ed, México: Ed Médica Panameri- cana, 1983:157. Hernández-Hernández F, Rodríguez MH. Avances biotecnológi- cos en el diagnóstico de enfermedades infecciosas. Salud Pública de México, 2009; vol.51(sup3):424-438 Respuestas a las preguntas de evaluación inicial 317 Capítulo 39. Diagnóstico de las parasitosis
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