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Biotecnología I Unidad VI Carrera: LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGIA Trayecto curricular: Ciclo de Formación Inicial Período: 2º Cuatrimestre – 2019 Animales de importancia económica Animales de importancia económica Animales criados como fuente de alimento Mamíferos rumiantes (bovinos, ovinos, caprinos) Mamíferos monogástricos (porcinos, conejos y aves) En menor medida: peces, crustáceos y mariscos Animales criados para práctica de deportes y como mascotas caballos Perros, gatos, pájaros y peces MAMIFEROS RUMIANTES CARACTERÍSTICAS DE LOS RUMIANTES - Son herbívoros cuyo principal alimento son las plantas que contienen carbohidratos fibrosos. - Su estómago posee cuatro divisiones. - Primero consumen los alimentos y luego realizan la rumia. - Son los únicos capaces de aprovechar la celulosa. - Poseen, en las primeras semanas de vida, la Gotera esofágica, pliegue de la mucosa que permite que los líquidos que ingiere puedan evadir la acción bacteriana. - Al ir agregando alimento fibroso se estimula el desarrollo de su estómago. ¿QUÉ ES LA RUMIA? Es la regurgitación del alimento, seguida de una remasticación, una reensalivación y una nueva deglución. • FASES: –El alimento cortado, pero no bien triturado, pasa a la panza –Por las contracciones peristálticas de la panza, el alimento vuelve a la boca para ser masticado (rumiar) e insalivado formándose el bolo alimenticio, –Vuelve por el esófago a la redecilla, y de ella, al libro y al cuajar, donde tiene lugar la acción del jugo gástrico. –De aquí pasa al intestino, donde se termina la digestión. –Por la acción de los microorganismos que hay en la panza se producen ácidos grasos de corta cadena (ácido acético, láctico, etc.) que son absorbidos por la pared de la panza y pasan a la circulación general. RUMIANTES: Bovidae Mamíferos que tienen como característica en común que son estrictamente herbívoros. Algunos de ellos son rumiantes como… • Subfamilia Antilopinae antílopes •Subfamilia bovinae búfalos Vacas y toros RUMIANTES: Bovidae •Género ovis u ovino oveja y carnero Además de ser clasificado como rumiante, es también considerada fermentadora intestinal •Género Connochaetes ñu negro ñu azul Subfamilia Caprinae Cabras Son animales adaptados a comer arbustos y matas correosas al contrario que sus próximos parientes, las ovejas RUMIANTES: Cervidae Entre los rumiantes pertenecientes a esta familia están … Gamo Ciervo o venado Muntiaco Corzo Alce Reno RUMIANTES: Giraffidae Rumiantes de esta familia… jirafa Emparentada con cérvidos y bóvidos, tiene la lengua y el aparato digestivo adaptado para permitirle alimentarse con vegetales espinosos okapi RUMIANTES: Camelidae Son rumiantes… camello dromedario llama vicuña HERBÍVOROS NO RUMIANTES Algunos de los mamíferos grandes que pastan, como los canguros y los caballos no son rumiantes, pero tienen adaptaciones similares para sobrevivir con cantidades grandes de alimento de calidad inferior. HERBÍVOROS NO RUMIANTES Otros animales herbívoros no rumiantes son: conejo chigüire hamster hipopótamo Cuy Cebra APARATO DIGESTIVO DE LOS RUMIANTES ORGANOS DEL APARATO DIGESTIVO • Boca: Degradación física o mecánica (masticación)•Lubricación del bolo alimenticio (saliva) Lengua Órgano muscular epitelio escamoso estratificado Papilas gustativas ,filiformes fungiformes cincunvaladas. Labios y rodete dentario superior Las glándulas salivares · parótidas · submaxilar (mandibular) · sublingual. Las glándulas salivares • Saliva: grandes cantidades(80 lt) con pH cercano a 8 Funciones: Colabora con la masticación y la deglución. Faringe • Conducto común: alimento + aire • •Comunicaciones: • •naríz • •oído -> trompas de Eustaquio • •alimento -> válvula (epiglotis) -> impide paso al tubo respiratorio (tráquea). Esófago • Función: • Conducción del bolo alimenticio. • peristaltismo BOCA: dientes • Las cabras, presentan un movimiento lateral de las mandíbulas, que aumenta acción de molienda de los dientes. La mandíbula superior es más ancha que la inferior. Su función es la molienda de partículas grandes de los alimentos en partículas más pequeñas La mandíbula no presenta dientes incisivos superiores ni caninos, presenta una almohadilla dental superior BOCA: glándulas salivares Se diferencian por el tipo de secreción que producen: - parotidas: abundante suero y acuosa - submaxilar (mandibular): mezcla seromucosa - sublingual: carácter mucoso predominantemente Es muy importante la secreción de bicarbonato porque, junto al fosfato, permiten neutralizar cantidades masivas del ácido producido. BOCA: Saliva •Es una mezcla de líquido de seroso y mucoso •Se libera desde cinco pares de glándulas por el estímulo de masticar •Posee un amortiguador que es utilizado para mantener el pH apropiado. •Ayuda en la masticación y deglución •Contribuye a la fermentación del rumen •Proporciona alimentos nutritivos (nitrógeno, fósforo, y sodio) a los microorganismos del rumen •Posee propiedades anti-espumantes. FARINGE • Es el corredor común para el alimento y el aire • Conecta la cavidad oral y el esófago. • Sus músculos son voluntarios estriados (esqueléticos) ESÓFAGO • Es un largo tubo músculo-membranoso, compuesto de fibras musculo-esqueléticas estriadas • Se encarga de conducir los alimentos durante la deglución (paso final en la digestión pregástrica) • Presenta un canal esofágico que conecta la faringe al rumen • Conecta los sacos ruminales con la cavidad bucal • Sus dos capas de músculo ayudan, al relajarse y contraerse, al movimiento del bolo alimenticio (perístalsis) • Se cierra por la parte la parte superior (esfínter esofageal superior) y por la parte final de estómago (esfínter esofageal inferior o cardias). PRE-ESTOMAGOS SON AGLANDULARES 3/4 de la cavidad abdominal • lado IZQUIERDO por completo, y también se extienden sobre el lado derecho, aunque sin ocuparlo totalmente -Retículo redecilla o red -Rumen panza o herbario -Omaso (librillo) ESTOMAGO VERDADERO O GLANDULAR -Abomaso o cuajar El desarrollo del aparato digestivo se produce a los 2 a 3 meses de vida. En el adulto el rumen representa aproximadamente el 30 % del peso vivo. En la etapa de pre-rumiante funciona la gotera esofágica por lo que el animal se comporta como lactante hasta las 3 semanas, luego pasa por un período de transición hasta las 8 semanas cuando comienza a ingerir alimento sólido. RUMIANTE NO RUMIANTE Digestión: proceso fisiológico que comprende la liberación de nutrientes y la expulsión de residuos indigestibles del alimento Requiere de distintos mecanismos: Acción mecánica: -Masticación -Contracciones estomacales -Peristalsis -Rumia Acción microbiológica (rumen y red) Acción química o enzimática (ID) Acción mecánica Masticación. Movimientos que permiten el mezclado y progresión del contenido, la rumia y la eructación. Rumia La finalidad de este mecanismo es reducir el tamaño del alimento y favorecer el ataque microbiano. La rumia se estimula por la estructura física del alimento, períodos de reposo y oscuridad. Regurgitación: reflujo del contenido ruminal hacia la boca. Por contracciones antiperistálticas en el esófago, el bolo asciende a la boca donde será remasticado y reinsalivado para ser luego redeglutido. AMBIENTE RUMINAL Anaerobiosis Concentración continua de sustrato Cambio en el tamaño de partícula Control de pH Provisión de nutrientes (urea y fosfatos) Fermentación Microorganismos Microorganismos ruminales Los microorganismos responsables de la digestión fermentativa incluyen bacterias, protozoos y hongos. Bacterias: Degradan la pared celular. Celulosa y hemicelulosa Utilizan nitrógeno proteico y también NH3. Alta densidad que se incrementa en forma directa con la concentración de nutrientes. Protozoarios: Utilizan proteína del alimento y de bacterias.Consumen bacterias amilolíticas y engloban trozos de almidón que pasan al intestino y evitan la fermentación ruminal, proveyendo de esa forma una fuente directa de glucosa para el animal. No utilizan nitrógeno no proteico para sintetizar proteína. Aumentan el valor biológico de la proteína. Hongos: Contribuyen con un 8% a la masa microbiana. Son en general levaduras transitorias Poseen una importante actividad celulolítica Dos grandes grupos de microorganismos Celulolíticos Fermentan carbohidratos estructurales. Utilizan amoníaco como fuente nitrogenada. Dentro del rango fisiológico, desarrollan mejor en el extremo menos ácido (6,0 a 6,9). Amilolíticos Fermentan carbohidratos no estructurales Crecen más rápido Usan amoníaco, aminoácidos y péptidos como fuente nitrogenada. Les es favorable el extremo más ácido (5,5 a 6,0). Esquema de digestión de hidratos de carbono Celulosa hemicelulosa almidón AZ.Simples pectinas AC.LACTICO AC ACETICO AC FORMICO H+ PROPIONICO BUTIRICO CO2 CH4 GLUCOSA PIRUVATO DIETA Y TIPO DE FERMENTACION Dieta rica en fibra Dieta rica en granos Mayor tiempo de rumia Menor tiempo de rumia Mayor insalivación Menor insalivación pH ruminal (6.5 a 6.8) pH más bajo Mediana a baja producción de AGV (ácidos grasos volátiles) Alta producción de AGV Baja velocidad de absorción de AGV Alta velocidad de absorción de AGV Condiciones favorables para la digestión de FDN (Fibra detergente neutro). Condiciones favorables para la digestión de almidón 65% acético 25% propiónico 10% butírico 40% acético 40% propiónico 15% butírico Absorción Absorción: entrada del nutriente al epitelio, transporte y liberación al torrente sanguíneo. • Los mecanismos de absorción pueden ser con o sin gasto de energía EPITELIO RUMINAL: • AGV, NH3, minerales • Mecanismo de absorción: difusión pasiva • A pH más ácido: mayor absorción de AGV y menor de NH3 EPITELIO INTESTINAL: glucosa, ácidos grasos, minerales y aa. También AGV y NH3 que escapen del rumen. • Transporte activo. • La absorción es por etapas, competencia por transportadores, interconversiones, oxidación. Transporte • En general luego de la absorción casi todos los nutrientes pasan al sistema portal y van al hígado y luego a músculo, glándula mamaria, útero y tejido adiposo.(eficiencia de absorción) • Los nutrientes absorbidos y transportados son transformados en hígado. • Los ácidos grasos de cadena larga son tomados directamente por el tejido adiposo • Los sitios metabólicos compiten por la captación de nutrientes lo que depende del balance hormonal, dieta y estado fisiológico. Alimento Nutriente Síntesis de macromoléculas Carne leche Absorción Transporte interconversiones oxidación ATP Calor CO2 O2 HÍGADO • Es la glándula más grande del cuerpo. • Elimina el exceso de ácidos grasos. • Almacena y forma glucógeno y urea. • Segrega bilis que contiene los ácidos biliares que se encargan de… • Emulsifionar lípidos: descomponen la grasa lo que supone un aumento en la superficie de contacto • Solubilizar y transportar lípidos formando micelas. PÁNCREAS • Es de forma cuadrilátera irregular • Es un órgano exócrino y endócrino • Segrega: – Jugo pancreático- compuesto de enzimas digestivas y bicarbonato – Enzimas- que son vaciadas al duodeno. – Insulina y glucagon- esenciales en el metabolismo de carbohidratos y lípidos. INTESTINO DELGADO • Sus glándulas ayudan en la digestión: – Glándulas de Brunner- • producen la amilasa • Secretan un líquido alcalino – Criptas de Lieberkuhn- • producen enzimas y moco – Parches de Peyer- • Controlan a poblaciones de bacterias • producen anticuerpos • ayudan en la filtración líquida • Es un largo tubo cilíndrico en espiral • Conecta el estómago con el ciego • Posee gran superficie de absorción para absorver agua, minerales y productos de digestión (glucosa, aminoácidos y ácidos grasos) • Presenta tres partes: – duodeno secreta sus propias enzimas para la digestión de proteínas, carbohidratos y lípidos – yeyuno – Ileon INTESTINO GRUESO –CIEGO: •en el empalme del intestino delgado con el grueso •participa en la absorción de ácidos grasos volátiles •poca importancia (en los rumiantes) –COLON (ascendente, transverso y descendente) –RECTO •segmento terminal •numerosos pliegues y color rosado. •en el bacinete pélvico •termina en el ano. –ANO •abertura posterior del tubo digestivo •Se compone de dos esfínteres y un músculo retractor •Se comunica con el intestino delgado por la válvula ileocecal, •Estructura: •mucosa en su cara interna •musculosa en el esfínter Aplicación de la biotecnología en la cría de ganado Alimentación Conservación de la salud de los animales Control de la reproducción Aceleración de la selección genética Uso de animales como bioreactores. Biofármacos Dependiendo de la región, parte de los cultivos de cereales (maíz) y leguminosas (de soja, algodón, canola y girasol) se utiliza como ración, para suplir las necesidades proteicas y energéticas (3 a 10 kg de granos para obtener 1 kg de carne). Como el valor nutricional de los granos es variable, deben agregarse suplementos nutricionales. Cría y engorde de ganado Pasturas (Argentina, Australia, Brasil o Nueva Zelanda). El alimento básico del ganado son las plantas forrajeras (Ej. alfalfa), en cantidades que varían de acuerdo con las estaciones del año. El número de cabezas depende de la disponibilidad de alimento. Durante el período en que faltan las forrajeras se suplementa la dieta con heno (forraje seco), silaje (forraje y granos fermentados), granos, o concentrados y residuos agroindustriales. Regímenes de semiconfinamiento o confinamiento. Más tarde, Europa comenzó a importar granos para la alimentación animal. En 1973, debido a escasez mundial de granos, los europeos incrementaron las raciones con harina de carne. Para abaratarlas, se dejaron de extraer las grasas con solvente y se modificaron las condiciones de esterilización. Suplementos nutricionales En 1865 Liebig inventó un procedimiento industrial que convierte los restos de los animales en extracto de carne para la alimentación humana, y en harina de carne para fortificar las raciones animales (entre el 2 y 5% del total). La inclusión de restos de animales enfermos, inicialmente ovejas con scrapie, haya contaminado a las vacas provocando el brote de una variante de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, que afecta al hombre causándole daños neurológicos graves (enfermedad de la vaca loca). En 1988 se prohibió la harina de carne en la alimentación del ganado bovino y ovino. La epidemia provocó el sacrificio de buena parte de los rebaños del Reino Unido y de otros países de Europa, poniendo en discusión la composición de las raciones animales y la cantidad y calidad de los suplementos de granos y forrajeras. Enfermedad de la vaca loca -Harina de carne o leche descremada en polvo o harina de pescado. - Biomasa microbiana seca (Fuente alternativa de proteínas. Obtenida de: Saccharomyces cerevisiae - subproducto en las destilerías de alcohol; Candida utilis y Torula - se multiplican sobre los efluentes de la industria de papel o de las queserías; Methylophilus methylotropus crece sobre el metanol obtenido del gas del Mar del Norte. -Antibióticos - protegen las raciones de la acción bacteriana. -Probióticos - modifican el ambiente gastrointestinal, estimulando la multiplicación de ciertos tipos bacterianos en detrimento de otros. - Enzimas (proteasas, celulasas, amilasas, etc.) - aumentan la digestibilidad de las raciones. La composición de las raciones La inserción de un gen bacteriano que codifica para la fitasa originó el cerdo Enviropig, que produce esta enzima en la saliva, disminuyendo en el 60% la concentración de fósforo en el estiércol con respecto a los cerdos convencionales. Enviropig El uso de granos produjo introducción de ácido fítico en la dieta de los animalesmonogástricos, el cual no es asimilado. Se elimina agregando la enzima fitasa en el alimento. Mejora la nutrición de los animales y se disminuye la cantidad de fósforo excretado al ambiente. Las raciones representan hasta el 70% de los costos de la cría de animales. Toda tentativa de abaratar las raciones sería bienvenida pero, debido a los precedentes desastrosos y la desconfianza de algunos sectores, las raciones de origen transgénico tuvieron que ser analizadas exhaustivamente en diversos tipos de animales. Las raciones transgénicas No se evidenciaron señales de toxicidad con soja, maíz, algodón, papa, canola y otros cultivos en ratones, conejos y otros animales de experimentación. Tampoco se observaron cambios morfológicos o reproductivos o alteraciones en las características de los cueros, tejidos, carnes, huevos, leche, etc., de los animales alimentados con derivados de plantas transgénicas. Maíz Bt. : gen de resistencia al ataque de insectos. Se observó una reducción sustancial en el nivel de micotoxinas en los granos. Al disminuir el ataque de insectos, hay menos lesiones que permitan la infección y el crecimiento de hongos. Las micotoxinas son muy peligrosas para los animales que ingieren los granos contaminados, causándoles hemorragias, daños hepáticos y renales, diarreas y cáncer. Se ha incorporado el gen de la fitasa de Aspergillus nigri a la canola, la alfalfa y el arroz, produciendo niveles altos de la enzima en la semilla. Los granos de estas plantas podrán usarse directamente en la ración, ya que no presentan efectos adversos y no requieren del agregado de fitasa. Están siendo estudiadas plantas con mayor digestibilidad, como una alfalfa transgénica con menos lignina. Se observó aumento de peso y buen crecimiento de la lana en ovejas alimentadas con lupino, transformado genéticamente para sintetizar una proteína de girasol, con alto contenido de metionina. Beneficios de las raciones transgénicas Existen hoy más de 5.000 razas de ganado, resultantes de muchos años de adaptación a diferentes condiciones ambientales. MEJORAMIENTO GENÉTICO DEL GANADO Objetivos del mejoramiento genético: 1) Aumentar la eficiencia de la conversión alimentaria, incrementando la tasa de crecimiento corporal. 2) Aumentar la productividad (leche, huevos) 3) Modificar la composición de la res, incrementando la cantidad de proteína (carne y leche) en detrimento de la grasa En los animales domésticos el mejorador lidia con caracteres multigénicos y enfrenta grandes dificultades técnicas. La larga duración de los ciclos de vida (Ej. bovinos, cuatro años entre generaciones) hace más lenta la recuperación de las inversiones, lo que torna al sector poco atractivo para las grandes empresas privadas, con la excepción de la producción de pollos. Así, el mejoramiento genético se encuentra en las manos de los ganaderos y pequeños emprendimientos privados. Estos últimos son responsables por más del 80% de la investigación y desarrollo en el área pecuaria de los países desarrollados. Los pollos de tipo parrillero (broiler), por ejemplo, se han transformado en un alimento común y barato. Estos pollos han sido seleccionados a lo largo de 50 generaciones, y crecen cuatro o cinco veces más rápido que sus antepasados. Sin embargo, han aparecido algunos efectos indeseados, como el aumento del tenor graso, la fertilidad baja y la presencia de anormalidades esqueléticas. Por otro lado, las gallinas seleccionadas como ponedoras desarrollaron osteoporosis, al desviar el calcio del esqueleto para la construcción de la cáscara de los huevos. Ejemplo de mejoramiento genético – Pollos broiler Tecnologías reproductivas El control de la reproducción de los animales permite la expansión rápida de los stocks. El proceso comienza con la selección de las hembras y machos reproductores, elegidos por sus características genéticas relacionadas con la productividad y la salud. La inseminación artificial se practica desde mediados del siglo XX en el ganado bovino, ovino, caprino, porcino y en aves. Como una única eyaculación de un toro produce aproximadamente 100 dosis de semen, considerando que un animal llega a producir 4.000 dosis por año y que la eficiencia de la inseminación es del 50%, el método permite obtener aproximadamente 2.000 crías por reproductor por año. Se puede usar tanto el semen fresco como el conservado, lo que posibilita también la conservación de la biodiversidad de razas en peligro de extinción. Normalmente, las vacas producen una cría por año, pero si se las trata con hormonas que inducen la superovulación, y se las insemina artificialmente, se consiguen hasta cinco embriones por vez que pueden recolectarse por lavaje uterino y transferirse a vacas receptoras o ser criopreservados. Entre el 25 y el 50% de los embriones congelados podrán originar animales vivos. Como el proceso completo (superovulación + inseminación + transferencia de los embriones) puede repetirse cuatro veces por año, a pesar de las limitaciones técnicas, una vaca podrá producir 10 crías por año. Otra variante consiste en extraer los ovocitos de las vacas superovuladas o de los ovarios de los animales sacrificados, y proceder a una fecundación artificial antes de reimplantar los embriones en las receptoras. El número de embriones puede aumentarse mediante la bipartición de estos en el estado de blastocisto (64 a 128 células) por micromanipulación. Las pruebas genéticas se pueden aplicar tanto en los padres como en los embriones, antes de la reimplantación, permitiendo una selección más precisa de la descendencia. Debido al costo que representa para el productor, la técnica es más utilizada con el ganado lechero, que tiene un precio más alto por cabeza que el ganado de corte. En este caso, se complementa la inseminación artificial con el sexado previo del semen, para elegir los espermatozoides que originarán hembras. Inseminación artificial – Sexado de semen Hay una diferencia importante e identificable en el contenido de ADN de X versus Y Diferencia en el contenido de ADN entre las razas bovinas Sexado de semen Método más exitoso Separación basada en “citometría” Lawrence Johnson (1992) Este método consigna un 90% de seguridad en el sexado de semen y se basa en la diferencia en el contenido de ADN entre los cromosomas X e Y. Sexado de semen Para arrancar con el proceso en cuestión (“citometría”), el semen tiene que ser teñido con un colorante fluorescente, el cual se unirá a cada espermatozoide individualmente según su contenido de ADN. Se hacen pasar luego los espermatozoides a la manera de una corriente o flujo muy delgado a través de la máquina separadora, misma que utiliza un rayo láser, cuya función esencial es iluminar el colorante. Ahora bien, como el espermatozoide “X” contiene mayor cantidad de ADN, éste atrapa más colorante y hace que resplandezca más brillantemente. Posteriormente, una computadora clasifica a los espermatozoides en tres grupos: 1) Los portadores del cromosoma X 2) Los portadores del cromosoma Y 3) Los que no pudieron ser clasificados Aquel flujo fino de espermatozoides se fracciona entonces en gotitas conteniendo un espermatozoide cada una de ellas, pasando las mismas por un dispositivo que les asigna una carga eléctrica positiva o negativa, según la clasificación previa efectuada por la computadora. Se les hace pasar luego por un campo magnético donde aquellas con carga positiva son atraída hacia el lado negativo y viceversa. Proceso de separación de semen Una vez que los espermatozoides han sido separados, el semen fresco deberá usarse dentro de las siguiente 24 horas. Es posible también su congelación para ser utilizado en posterioridad. El semen se congela en nitrógeno líquido y el recipiente dónde se los conserva es lo que se denomina Banco de Semen. Metodología de selección de esperma Desventajas del sexado de semen Limitante: el semensexado es destinado a vacas novillonas que no han sido previamente gestantes. Esto debido al bajo porcentaje de preñez que el semen sexado ofrece, además de que en vacas ya experimentadas, la suciedad del lugar de concepción no permitiría que el espermatozoide llegara a fecundar el óvulo con facilidad. Todo esto reduce la posibilidad de quedar gestante y producirá un costo mayor, ya que el semen sexado es relativamente caro. El estudio del genoma de los animales domésticos ofrece herramientas precisas y eficientes para la selección de algunos caracteres. Objetivo: Correlacionar los genes con secuencias no funcionales que, distribuidas a lo largo del genoma, cumplirán el papel de marcadores moleculares. Se han identificado centenas de estas secuencias en vacas, cerdos, pollos, cabras, ovejas, salmones, camarones, etc. Se trata de micro y minisatélites (secuencias cortas de ADN repetidas un número variable de veces, que se transmiten de una generación a otra y pueden ser identificadas por electroforesis). Cuando el gen responsable por un carácter de interés está asociado a un determinado marcador, ambos serán seleccionados juntos. Con caracteres monogénicos, los resultados se obtienen rápidamente; con caracteres poligénicos hay que elegir los genes que contribuyen sustancialmente en la variación. El análisis de marcadores también se utiliza en la determinación del parentesco (pedigrí) y en la identificación de los animales, tanto en el campo como en los productos derivados. Genotipificación de animales domésticos • GENOTIPIFICACIÓN ANIMAL Corresponde al análisis de marcadores genéticos de tipo Microsatélites (STR’s) o SNP’s (Single Nucleotide Polymorphism) en una muestra biológica de origen animal con el fin de obtener la huella o perfil genético del individuo garantizando su identidad. Una vez obtenida la genotipíficación del ejemplar es posible hacer pruebas de filiación y verificar la trazabilidad de sus productos. •FILIACIÓN BIOLÓGICA Corresponde a la determinación de consanguinidad entre dos o más individuos utilizando marcadores genéticos de tipo Microsatélites (STR’s) o SNP’s. La prueba está disponible para bovinos, equinos, caninos y porcinos. Nuevas tecnologías de mejoramiento genético del ganado La clonación Por partición embrionaria o transferencia nuclear (oveja Dolly). La clonación se aplica a los animales fundadores, porque los beneficios justifican el costo del procedimiento. Algunos ejemplos son: Bull 86 Squared, clon de un toro resistente a la brucelosis, salmonelosis y tuberculosis; Full Flush, toro clonado para atender a la demanda del mercado de semen; Annabell Zeta, vaca Holstein especial para la producción de manteca y clonada con éxito por presentar problemas de fertilidad; Second Chance, toro que participó en rodeos y películas. La tecnología también se desarrolló en Argentina y Brasil. En ambos países existen empresas privadas especializadas en la clonación comercial de bovinos y equinos, en emprendimientos ligados a universidades o institutos de investigaciones agronómicas (BioSidus, ARG Natural Beef; Vitrogen, Geneal). La clonación también se utiliza para animales de élite enfermos o accidentados. Se estima en unos US$ 20.000 el precio de un ternero clonado en los Estados Unidos. También fueron clonados equinos. Sin embargo, el futuro de la clonación de equinos parece limitado, porque la inseminación artificial y los tratamientos de fertilidad están prohibidos en los caballos de carrera. La clonación también puede usarse para la conservación de especies en riesgo de extinción y para la propagación rápida de algunos organismos transgénicos. Continuará en la Unidad 7… La transgénesis El primer ratón transgénico nació en 1981. A partir de 1988 comenzaron a generarse vacas, cabras, conejos, ovejas, pollos, cerdos y peces transgénicos. Una de las preocupaciones existentes se relaciona con el riesgo de escape de un animal transgénico y la posibilidad de que el transgén se propague en las poblaciones naturales. Este riesgo depende de algunas características del animal, especialmente su movilidad y su capacidad de escapar del cautiverio y de volver al estado salvaje . La comercialización de animales transgénicos o de sus productos avanza muy lentamente, no solo por el alto costo demandado como por el tiempo necesario para responder al proceso regulatorio y a la resistencia eventual de los consumidores. Continuará en la Unidad 7… Ejemplo 1: - hormonas bST (somatropina bovina) y pST (somatropina porcina). Las hormonas estimulan el crecimiento en terneros y cerdos y su uso generó polémicas, prohibiéndose en algunos países de Europa. MEJORAMIENTO DE LA PRODUCCIÓN Carne Modificadores metabólicos Incremento de producción y de la relación carne/grasa. Ejemplo 2: - hormona de crecimiento humana. Obtención del cerdo Beltsville pig, que presentó problemas de diversa índole: dificultades respiratorias, artritis, letargia, etc. El fracaso suscitó varios cuestionamientos éticos en relación al tratamiento infringido a los animales. Hay experimentos de transgénesis que pretenden mejorar la calidad de la leche de vaca modificando las proteínas (leche humanizada para lactantes) o reduciendo la lactosa (para las personas con intolerancia). En Nueva Zelanda y Estados Unidos se obtuvieron vacas que producen leche con más caseína, una característica interesante para la industria de quesos. Leche Lana - Se hicieron algunos intentos de transgénesis con ovejas para mejorar la producción de fibras sin que sea necesario agregar suplementos de aminoácidos en la dieta. El objetivo es modificar la estructura de las fibras de lana y de cashmere de manera de facilitar el teñido y disminuir el encogimiento del tejido. - Las propiedades de la seda se podrán alterar por transgénesis del gusano de seda. - A partir de una proteína de araña, sintetizada por una cabra transgénica, se desarrolló y patentó el Biosteel, una fibra muy resistente que puede tener diversos usos, inclusive militares. Algunos peces, como carpas y tilapias, no exigen ninguna complementación de la ración. Pero el camarón y el salmón son criados con alimentos balanceados, cuya composición incluye harina de pescado. ¿Cuáles serían las ventajas de la acuicultura si hubiera que extraer peces para la preparación de las raciones? La cría de peces y mariscos es una actividad empresarial que crea empleos, demanda pocos insumos y genera un producto de alto valor agregado. Sin embargo, tiene algunos problemas, como la distancia a los mercados de destino y la contaminación de las aguas costeras, dificultando la cría de mariscos filtradores de plancton y favoreciendo el florecimiento de algas. Acuicultura Así tiñen los acuicultores a los salmones de granja… Solo hay un tipo de salmón cuya carne es rosa anaranjada de manera natural, y es el salmón pescado en su propio hábitat. Durante su ciclo vital, los salmones se alimentan de camarones, pequeños crustáceos y kril. Esa alimentación es rica en una sustancia llamada ASTAXANTINA. Este compuesto es el que, al acumularse en los tejidos del animal, proporciona ese vivo color rosado. ¿Qué ocurre con los salmones en las piscifactorías? Su dieta no incluye crustáceos, por ende la carne de los salmones de piscifactoría es de un color gris claro. El color rosa lo elige la empresa que cría a los peces mediante suplementos alimenticios a base de astaxantina, los que representan entre un 10-15% del costo del producto final. La astaxantina para suplemento alimenticio se puede obtener de: - Cáscaras pulverizadas de crustáceos. - Procesamiento industrial de microalgas cultivadas. La empresa AquaBounty transfirió al salmón del Atlántico un “casete” de expresión, denominado AquAdvantage, con dos genes para una proteína anticongelante y una hormona de crecimiento del salmón del Pacífico. El pez resultante consume 250% más de comida, pero crece rápidamente en condicionescomerciales, alcanzando el tamaño equivalente a un salmón convencional en menos tiempo (18 meses en lugar de 24 o 30). Según el Protocolo de Cartagena, los peces transgénicos deben criarse exclusivamente en confinamiento. Por eso, la explotación comercial de salmones transgénicos no podrá hacerse como hasta ahora, en jaulas marinas. Se calcula que actualmente habría unas 30 variedades de peces transgénicos, en laboratorios de todo el mundo. Se está tratando de desarrollar otros productos, como una trucha con más ácidos grasos Omega 3 y camarones desprovistos de la proteína responsable del 80% de las alergias. Acuicultura LA SALUD DE LOS ANIMALES DOMÉSTICOS La selección genética de animales resistentes es una forma de reducir el perjuicio debido a las enfermedades, estimado entre el 10 y el 20% de la producción. En el Reino Unido, la resistencia al scrapie, por ejemplo, se transformó en una condición indispensable para la entrada de cualquier ovino en un programa de mejoramiento. Resistencia a las enfermedades El mapeo del genoma de los animales domésticos facilitará la tarea de seleccionar animales resistentes a enfermedades, como pollos resistentes a la enfermedad de Marek y a la salmonelosis. En Francia, la transgénesis se está usando para la obtención de truchas resistentes al VSH (virus de la septicemia hemorrágica), responsable de la pérdida de un cuarto de la producción. En otros países, se investiga la introducción de genes que confieran resistencia a enfermedades que afectan al ganado, como la tripanosomiasis africana o la aftosa. Prevención y tratamiento de enfermedades Las prácticas intensivas favorecen la transmisión de enfermedades entre los animales. Los principales productos desarrollados para la salud animal son: -Las vacunas -Los kits de diagnóstico -Los tratamientos (medicamentos como antibióticos y antiparasitarios) -Los suplementos (hormonas). Algunos animales domésticos constituyen un reservorio de enfermedades que pueden ser transmitidas al hombre. Al preservar la salud de los animales se disminuye el riesgo de contagio. Ej. vacuna contra la leishmaniasis canina que limita la transmisión de la enfermedad del perro al hombre. Muchos trabajos apuntan actualmente a la producción de vacunas formadas por unos pocos antígenos, en plantas modificadas genéticamente que puedan ser administradas en el alimento. También se está desarrollando una vacuna que permitiría inmunizar a los animales contra una hormona reproductiva (gonadotrophin-release hormone), como una alternativa para la castración de toros y cerdos. Vacunas La fiebre aftosa es una endemia que afecta la producción de carne y leche. Es una enfermedad viral, altamente contagiosa, que se manifiesta por fiebre alta y por el desarrollo de aftas en la boca. Es fundamental el desarrollo de nuevas vacunas, más eficientes y fáciles de aplicar, en las regiones donde la enfermedad no fue totalmente erradicada y donde cada tanto aparecen brotes: Argentina, Brasil, Colombia, México, Paraguay y Uruguay. Vacuna contra la fiebre aftosa Las vacunas DIVA (del inglés, differentiating infected from vaccinated animals) permiten distinguir animales infectados de animales vacunados. Se estudia también la sustitución da la vacuna actual de virus desactivado por alfalfa transgénica que exprese algunas proteínas del virus de la aftosa (plant pharming). Los análisis de ADN permiten la tipificación de los agentes patogénicos y los estudios epidemiológicos. Los ensayos inmunoenzimáticos (Kits de ELISA) se usan para el diagnóstico de varias patologías y también para el reconocimiento de diversos tipos de contaminación en los productos (Salmonella, Escherichia coli, Listeria). Kits de diagnóstico Actualmente se producen medicamentos para unas 200 enfermedades animales diferentes. En América Latina hay numerosas empresas del sector privado que elaboran medicamentos, vacunas y pruebas de diagnóstico para la salud animal. Entre las principales: Biogénesis y Bagó (Argentina) Tratamientos - Medicamentos Por otro lado, la acuicultura abre un espacio para las empresas productoras de pruebas de diagnóstico y vacunas para los patógenos que afectan a los criaderos. Empresas argentinas y chilenas (Tecnovax, Recalcine, AquaGestión) desarrollaron una vacuna contra el virus de la anemia infecciosa del salmón. http://www.biogenesisbago.com/ar/ Modelos de estudio para enfermedades humanas NUEVOS USOS DE LOS ANIMALES DOMÉSTICOS La transgénesis de ratas, ratones, conejos y monos les confiere características que permiten su empleo como modelos de enfermedades humanas.. 1ero 1988: Se trasplantaron tejidos del sistema inmune de un feto humano a ratones genéticamente inmunodeficientes, obteniéndose animales con un sistema inmune humano. También en 1988 se obtuvo el oncomouse, un ratón con un gen para el cáncer de mama que permite evaluar tanto el efecto cancerígeno de algunas sustancias como la acción terapéutica de otras. A partir de ese momento, se rediseñaron varios animales para servir como modelos: conejos con diferentes genes para lipoproteínas humanas que resultan sensibles o resistentes a regímenes ricos en colesterol; ratones modificados genéticamente para estudiar la epilepsia, la obesidad, etcétera El cerdo es considerado el donante ideal para los trasplantes, porque el tamaño y función de sus órganos son equivalentes a los humanos. Las válvulas cardíacas humanas pueden ser sustituidas por las de cerdo, después de destruir las células porcinas. Para evitar el rechazo de un órgano de cerdo trasplantado, habrá que modificar algunas moléculas de las células del donante, aunque persiste uno de los mayores riesgos de los xenotrasplantes, que es la transmisión de virus de una especie a otra. Xenotrasplantes Se puede transformar genéticamente a un animal y convertirlo en un biorreactor que produzca la proteína de interés en la leche, la sangre, la orina o los huevos. De hecho, se necesita de dos a tres veces menos de capital inicial y el costo de la proteína recombinante cae de cinco a diez veces. Los animales como biorreactores La autorización comercial de ATryn, una antitrombina con propiedades antiinflamatorias y anticoagulantes, en Europa (2006) y en Estados Unidos (2009), modificó el mercado de factores de coagulación recombinantes. La empresa responsable, GTC Biotherapeutics, tiene en el pipeline más de 60 proteínas recombinantes de uso terapéutico, producidas en cabras y vacas. -En Escocia, PPL Therapeutics cría 200 ovejas que producen AAT (antitripsina), una proteína que se encuentra en ensayos clínicos para el tratamiento de enfisema hereditario y fibrosis quística. -En Holanda, Pharming BV obtuvo vacas productoras de lactoferrina humana, una proteína con propiedades antimicrobianas. -En Argentina Biosidus desarrolló un tambo farmacéutico, con dos dinastías de vacas: Pampa, productora de hormona de crecimiento, y Patagonia, productora de insulina. -En Brasil, la Universidad de Ceará mantiene un rebaño de cabras transgénicas que produce en la leche el factor estimulante de colonias de granulocitos humanos (hG-CSF). Otros ejemplos… - En Estados Unidos, Hematech mantiene un rebaño en el que los genes bovinos fueron removidos (knock out) y sustituidos (knock in) por genes humanos. Una vez inmunizados, los animales producen anticuerpos policlonales humanos que pueden ser utilizados para combatir infecciones o para tratar personas que tengan el sistema inmune comprometido o con enfermedades autoinmunes (artritis rematoidea). - Anticuerpos humanos (Origen Therapeutics) e interferón (AviGenics) también son producidos en huevos de aves transgénicas. - Hay otras experiencias en marcha: la producción de anticuerpos monoclonales para la artritis reumatoide en la leche de rumiantes, y la generación de vacas lecheras resistentes a la mastitis, porque expresan una proteína antibiótica que mata a Staphylococcus aureus.También se están generando productos para hacer frente a un eventual brote de bioterrorismo, como por ejemplo, anticuerpos humanos contra el ántrax, la viruela y el botulismo, en vacas transgénicas (TransOva); o antídotos contra armas químicas como el gas sarín, en cabras (Nexia). Otros ejemplos… El marco conceptual de “las tres R” El uso de animales en experimentos ha suscitado numerosos debates relativos al sufrimiento que se les infringe y a la dificultad de extrapolar al hombre la información obtenida en esas investigaciones. En 1959, Russell y Burch establecieron un marco conceptual conocido hoy como “las tres R”: reemplazar, reducir y refinar. Las tres R dieron lugar a una reflexión ética sobre la experimentación con animales. A pesar de discutirse hasta qué punto debe ser restringida la experimentación en animales, se admite que hay límites que deben ser respetados. Cabe a los comités de Ética de las instituciones de investigación analizar estos aspectos en cada proyecto que involucre a seres vivos, evitando el conflicto entre el bienestar de los seres humanos y el de los animales. Utilización de animales de laboratorios en investigación científica El marco conceptual de “las tres R” El bienestar de los animales domésticos es una responsabilidad humana, que debe brindarles calidad de vida y minimizar el sufrimiento y el dolor. Las mascotas, sometidas a procesos de selección diversos, sufren algunas consecuencias negativas como la sordera, que afecta a casi el 10% de los dálmatas. Los animales como mascotas El mercado es propicio para la clonación de las mascotas y algunas empresas ya están probando esta tecnología, que hasta ahora parece ser más fácil para los gatos (Copy Cat) que para los perros. En 2010 se gastaron US$ 11 mil millones en productos de salud para los pets norteamericanos. Se trata de vacunas (rabia, hepatitis, leucemia felina, etc.) y medicamentos (artritis, parásitos, alergias, problemas dentarios, enfermedades cardíacas, fallas renales, ansiedad de separación, síndrome de disfunción cognitiva, etcétera). El desarrollo de Night Pearls, un pez transgénico que brilla en la oscuridad, costó US$ 2,9 millones. Inicialmente diseñado para monitorear la calidad del agua, se transformó luego en mascota. Existen variedades con fluorescencia verde (TK-1), roja (TK-2) y con una combinación de ambos colores (TK-3) a un precio de lanzamiento en Taiwán, en 2003, de US$ 17,40. Night Pearls – Pez transgénico que brilla en la oscuridad
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