CARACTERIZACION Y CUANTIFICACION DE PROTEINAS

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HANS POMA MOLLEAPAZA
PRACTICA N° 7 CARACTERIZACION Y CUANTIFICACION DE PROTEINAS.
Las proteínas son biomóleculas formadas básicamente por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Pueden contener azufre y en algunos tipos de proteínas, fósforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos. Pueden considerarse polímeros de unas pequeñas moléculas que reciben el nombre de aminoácidos y serían por tanto los monómeros unidad. Se encuentran entre las moléculas de mayor tamaño y comparten junto con los ácidos nucleicos el poseer una gran variedad y diversidad, prácticamente no existen dos seres que sean idénticos en lo que se refiere a sus proteínas. Las proteínas forman la base de moléculas que cumplen funciones específicas en el organismo, como la hemoglobina, encargada del transporte de gases en sangre; el fibrinógeno plasmático, fundamental en la coagulación sanguínea; los anticuerpos, que son la base de la inmunidad, además de muchas hormonas y todas las enzimas. Los aminoácidos están unidos mediante enlaces peptídicos. La unión de un bajo número de aminoácidos da lugar a un péptido; si el n: de aa. que forma la molécula no es mayor de 10, se denomina oligopéptido, si es superior a 10 se llama polipéptido y si el n: es superior a 50 aa. se habla ya de proteína.
LOS AMINOÁCIDOS Los aminoácidos se caracterizan por poseer un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (-NH2). Las otras dos valencias del carbono se saturan con un átomo de H y con un grupo variable denominado radical R.
COMPORTAMIENTO QUÍMICO En disolución acuosa, los aminoácidos muestran un comportamiento anfótero, es decir pueden ionizarse, dependiendo del pH, como un ácido liberando protones y quedando (-COO'), o como base, los grupos -NH2 captan protones, quedando como (-NH3+ ), o pueden aparecer como ácido y base a la vez. En este caso los aminoácidos se ionizan doblemente, apareciendo una forma dipolar iónica llamada zwitterion
EL ENLACE PEPTÍDICO Los péptidos están formados por la unión de aminoácidos mediante un enlace peptídico. Es un enlace covalente que se establece entre el grupo carboxilo de un aa. y el grupo amino del siguiente, dando lugar al desprendimiento de una molécula de agua. El enlace peptídico se comporta como un enlace doble, es decir, presenta una cierta rigidez que inmoviliza en un plano los átomos que lo forman
 Dipéptidos.- si el nº de aminoácidos es 2. 
 Tripéptidos.- si el nº de aminoácidos es 3. 
 Tetrapéptidos.- si el nº de aminoácidos es 4. etc. 
 Oligopéptidos.- si el nº de aminoácidos es menor de 10.
 Polipéptidos o cadenas polipeptídicas.- si el nº de aminoácidos es mayor de 10.
ESTRUCTURA DE LAS PROTEÍNAS La organización de una proteína viene definida por cuatro niveles estructurales denominados: estructura primaria, estructura secundaria, estructura terciaria y estructura cuaternaria. Cada una de estas estructuras informa de la disposición de la anterior en el espacio.
ESTRUCTURA PRIMARIA La estructura primaria es la secuencia de aa. de la proteína. Nos indica qué aas. componen la cadena polipeptídica y el orden en que dichos aas. se encuentran. La función de una proteína depende de su secuencia y de la forma que ésta adopte.
ESTRUCTURA SECUNDARIA La estructura secundaria es la disposición de la secuencia de aminoácidos en el espacio.Los aas., a medida que van siendo enlazados durante la síntesis de proteínas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una disposición espacial estable, la estructura secundaria. Existen dos tipos de estructura secundaria: la a(alfa)-hélice la conformación beta. Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente sobre sí misma la estructura primaria. Se debe a la formación de enlaces de hidrógeno entre el -C=O de un aminoácido y el -NH- del cuarto aminoácido que le sigue. En esta disposición los aas. no forman una hélice sino una cadena en forma de zigzag, denominada disposición en lámina plegada.
ESTRUCTURA TERCIARIA La estructura terciaria informa sobre la disposición de la estructura secundaria de un polipéptido al plegarse sobre sí misma originando una conformación globular. es la estructura primaria la que determina cuál será la secundaria y por tanto la terciaria.. Esta conformación globular es la que facilita la solubilidad en agua
Esta conformación globular se mantiene estable debido a la existencia de enlaces entre los radicales R de los aminoácidos. Aparecen varios tipos de enlaces: el puente disulfuro entre los radicales de aminoácidos que tiene azufre. los puentes de hidrógeno los puentes eléctricos las interacciones hifrófobas.
Inicio de proteínas
ESTRUCTURA CUATERNARIA Esta estructura informa de la unión , mediante enlaces débiles ( no covalentes) de varias cadenas polipeptídicas con estructura terciaria, para formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptídicas recibe el nombre de protómero.
PROPIEDADES DE PROTEINAS Especificidad. La especificidad se refiere a su función; cada una lleva a cabo una determinada función y lo realiza porque posee una determinada estructura primaria y una conformación espacial propia; por lo que un cambio en la estructura de la proteína puede significar una pérdida de la función. Además, no todas las proteínas son iguales en todos los organismos, cada individuo posee proteínas específicas suyas que se ponen de manifiesto en los procesos de rechazo de órganos transplantados. La semejanza entre proteínas son un grado de parentesco entre individuos, por lo que sirve para la construcción de "árboles filogenéticos" Desnaturalización. Consiste en la pérdida de la estructura terciaria, por romperse los puentes que forman dicha estructura. Todas las proteínas desnaturalizadas tienen la misma conformación, muy abierta y con una interacción máxima con el disolvente, por lo que una proteína soluble en agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita. La desnaturalización se puede producir por cambios de temperatura, ( huevo cocido o frito ), variaciones del pH. En algunos casos, si las condiciones se restablecen, una proteína desnaturalizada puede volver a su anterior plegamiento o conformación, proceso que se denomina renaturalización.
PROTEÍNAS FUNCIONALES Defensa Anticuerpos: se unen a moléculas extrañas al organismo: inmunoglobulinas Toxinas: elaboradas por algunas bacterias para su propia defensa. Transporte Hemoglobina y mioglobina: Se une al O2 y lo transporta a los tejidos. Transportadores específicos de iones o moléculas a nivel de la membrana plasmática. Receptores: son proteínas insertas en la membrana celular que reconocen las moléculas mensajeras. Reguladoras de pH: por su capacidad de ceder y captar H+. Función hormonal: Las hormonas son compuestos producidos por las glándulas endocrinas o de secreción interna y que entregan esta secreción directamente a la sangre. No todas son de naturaleza proteica, pero existen muchas que son aminoácidos (tiroxina), polipéptidos (oxitocina) o proteínas (insulina). Función enzimática: Las enzimas son catalizadores biológicos de naturaleza proteica que ponen en marcha las reacciones que se producen en los organismos. Todas las enzimas son proteínas. Ejemplo: Las que participan en reacciones de oxidación se llaman oxidasas, las que participan en reacciones de hidrólisis, se llaman hidrolasas.
PARTE EXPERIMENTAL
Experimento N°1 DETERMINACION DEL PUNTO ISOELECTRICO Y SOLUBILIDAD DE LA CASEINA
Material
-tubos de ensayo 				-pipetas
-gradillas 					-solucion de caseína al 0.5% en acetato de sodio 0.1 N 
-Ácido acético 1 N				- Ácido acético 0.01 N
- Ácido acético 0.1 N		
Fundamento
La leche contiene vitaminas (principalmente tiamina, riboflavina, ácido pantotéico y vitaminas A, D y K), minerales (calcio, potasio, sodio, fósforo y metales en pequeñas cantidades), proteínas (incluyendo todos los aminoácidos esenciales), carbohidratos (lactosa) y lípidos. Los únicos elementos importantes de los que carece la leche son el hierro y la vitamina C. 
Las proteínas se pueden clasificar de manera generalen proteínas globulares y fibrosas. Las proteínas globulares son aquellas que tienden a agregarse en formas esferoidales y no establecen interacciones intermoleculares como son los puentes de hidrógeno (característicos de las proteínas fibrosas) siendo solubilizadas en suspensiones coloidales. En la leche hay tres clases de proteínas: caseína, lacto albúminas y lacto globulinas (todas globulares). 
La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la leche por acidificación y forma una masa blanca. Las fosfoproteínas son un grupo de proteínas que están químicamente unidas a una sustancia que contiene ácido fosfórico. En la caseína la mayoría de los grupos fosfato están unidos por los grupos hidroxilo de los aminoácidos serina y treonina. La caseína en la leche se encuentra en forma de sal cálcica (caseinato cálcico). La caseína representa cerca del 77% al 82% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7% en composición de la leche líquida. 
La caseína está formada por alpha(s1), alpha(s2)-caseína, ß-caseína y kappa-caseína formando una micela o unidad soluble. Ni la alfa ni la beta caseína son solubles en la leche, solas o combinadas. Si se añade la kappa caseína a las dos anteriores o a cada una de ellas por separado se forma un complejo de caseína que es solubilizado en forma de micela. Esta micela está estabilizada por la kappa caseína mientras que las alfa y beta son fosfoproteínas que precipitan en presencia de iones calcio.
Datos experimentales
	TUBO N°
	1
	2
	3
	4
	5
	6
	7
	8
	9
	AGUA DESTILADA
	8.38
	7.15
	8.75
	8.5
	8.0
	7.0
	5.0
	1.0
	7.4
	AC. ACETICO 0.01 N
	0.62
	1.75
	-
	-
	-
	-
	-
	-
	-
	AC. ACETICO 0.1 N
	-
	-
	0.25
	0.5
	1.0
	2.0
	4.0
	8.0
	-
	AC. ACETICO 1.0 N
	-
	-
	-
	-
	-
	-
	-
	-
	1.6
	CASEINA 1%
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	1.0
	TUBO N°
	1
	2
	3
	4
	5
	6
	7
	8
	9
	Ph teorico
	5.97
	5.52
	5.36
	5.06
	4.76
	4.46
	4.16
	3.86
	3.56
	Tubidez inmediata
	0
	+
	++
	++
	+++
	+++
	++++
	++
	+
	Tubidez a los 10 min
	0
	-
	++++
	++++
	++++
	+++
	++
	++
	+
	Tubidez a los 20 min 
	0
	0
	++++
	+++
	+++++ 
	+++
	++
	++
	+
	Tubidez y precipitado después de calentar
	0
	0
	+
	++
	+++
	++++
	+++
	++
	+
 
Resultados: 
Discusión: Verificamos que el ácido acético contenido en el vinagre desnaturaliza las proteínas de la leche y por acción de la centrifugación separa la parte sólida de la líquida. Al colocar el ácido acético en la caseína, esta se torna insoluble en el agua sin embargo al colocar hidróxido a la misma la reacción se torna reversible; es decir se solubiliza en agua. 
Conclusiones:
Se realizó la precipitación de la caseína por efecto del Punto Isoeléctrico, adicionando ácido acético.
La caseína al ser una proteína se desnaturalizo ya que perdió su estructura nativa por efecto de la variación del pH ya que pasó de un pH de 6.4 que es el de la leche a un pH de 4.6 que es el de la caseína. Se obtuvo un valor de 4,76 correspondiente al pH del punto isoeléctrico de la proteína presente en la leche, la caseína.
 Bibliografía:
Caseína
http://www.quiminet.com/articulos/caseina-una-proteina-de-la-leche-13367.htm
Punto Isoeléctrico
http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/biotec_FQbiomol/Practica3FQB.pdf
Experimento N°2 DESNATURALIZACION DE PROTEINAS
Materiales
Tubos de ensayo			Baño maría
Pipetas 					Solución de albumina de huevo al 1%
Gradillas 				Acido acetico
Acido clorhídrico concentrado		nitrato de plata y de potasio
Fundamento 
Cuando la proteína no ha sufrido cambio en su interacción con el disolvente, se dice que presenta una estructura nativa. Se llama desnaturalización de las proteínas a la perdida de las estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), quedando la cadena poli peptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.
Cualquier factor que modifique la interacción de la proteína con el disolvente disminuirá su estabilidad en disolución y provocara la precipitación. Así, la desaparición total o parcial de la envoltura acuosa, la neutralización de las cargas eléctricas de tipo repulsivo o la ruptura de los puentes de hidrogeno facilitara la agregación intermolecular y provocara la precipitación. La precipitación suele ser consecuencia del fenómeno llamado desnaturalización y se dice entonces que la proteína se encuentra desnaturalizada.
Datos experimentales…Resultados
DESNATURALIZACION POR ACCION DEL pH
La muestra de clara de huevo se precipitó al momento de adicionar ácido clorhídrico. A partir de esto, por el carácter acido del reactivo se presentó un cambio abrupto en las cargas formales de los grupos esenciales de las proteínas presentes, esto afectó las interacciones de la estructura terciaria, produciendo la desactivación y posterior degradación de las proteínas. Esto se puede explicar de otra forma: Las proteínas en un pH Isoeléctrico se precipitan, debido a que en este punto la carga neta es cero y se eliminan las interacciones electrostáticas, lo que permiten la separación selectiva de estas.
	TUBO
	OBSERVACION
	PRUEBA DE BIURET
	1 ALBUMINA + HCl
	
	POSITIVO
	2 ALBUMINA + CH3COOH
	
	POSITIVO
	3 ALBUMINA + AGUA DESTILADA
	
	POSITIVO
 
DESNATURALIZACION POR ACCION DE METALES PESADOS
Las sales de metales pesados precipitan las proteínas porque el ion del metal pesado muy probablemente se combina con la forma aniónica de la proteína. La proteína en el lado alcalino de su punto isoeléctrico existe como ión negativo y así al combinarse con el ión del metal o catión, formará proteínatos tales como proteinato de mercurio, de plomo, de plata, etc. En cambio los reactivos alcaloidales precipitan las proteínas al combinarse el radical acídico del reactivo alcaloidal con la forma catiónica de la proteína que predomina en él lado ácido del punto isoeléctrico. Se forma entonces precipitados que podríamos llamar por ejemplo tanato de proteína, fosfomolibdato de proteína, etc.
	TUBO
	OBSERVACION
	PRUEBA DE BIURET
	1 ALBUMINA + NITRATO DE PLATA
	
	POSITIVO
	2 ALBUMINA + NITRATO DE POTASIO
	
	POSITIVO
	3 ALBUMINA + AGUA DESTILADA
	
	POSITIVO
DESNATURALIZACION POR ACCION LA TEMPERATURA
La mayoría de las proteínas globulares incrementan su solubilidad al aumentar la temperatura, dentro de un rango de 0 a 40ºC. A temperaturas mayores de 40 a 50ºC, la mayoría de las proteínas son inestables y comienzan a desnaturalizarse. Se produce perdida de solubilidad en la zona de pH neutro, y puede precipitar separándose completamente del líquido donde se encuentra disuelta. La sensibilidad de las proteínas a la desnaturalización térmica, depende de numerosos factores tales como la naturaleza y concentración de la proteína, actividad del agua, pH, fuerza iónica, naturaleza de los iones presentes.
	TUBO
	OBSERVACION
	PRUEBA DE BIURET
	1 ALBUMINA + CALOR
	
	POSITIVO
Discusión: La leche se desnaturalizó y con el ácido sulfúrico se pudo ver el cambio de color al reaccionar hasta llegar a un café. Esta desnaturalización también es irreversible.
El huevo se desnaturalizó luego del baño maría haciéndose una mezcla más consistente con partes blancas. (Ver foto) Esta desnaturalización es irreversible porque no volvió a su estado natural luego de colocarle solución salina.
Conclusiones: La mayoría de las proteínas pierden su función biológica cuando están desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad catalítica, porque los sustratos no pueden unirse más al centro activo, y porque los residuos del aminoácido implicados en la estabilización de los sustratos no están posicionados para hacerlo. Es decir, la desnaturalización es irreversible
Bibliografía:
-Alejandro Fukusaki Y. Pedro Cueva). Juan León.
Manual de Laboratorio de Química. Perú.2 biblioteca nacional del Perú. 2013. 102pp
Experimento N°3 PRECIPITACION POR SALES DE METALES PESADOS E IONES NEGATIVOS.
Material:
Tubos de ensayo		Solde caseína al 1
Pipetas 				sol de ovoalbúmina al 1%
Gradillas 			cloruro de mercurio al 5%
Acetato de plomo al 10%	ácido acético al 5%
Ac tricocloroacetico al 10%		
Fundamento
Este reactivo está formado por una mezcla de nitrito y nitrato mercúrico disuelto en ácido nítrico. Esta reacción se lleva a cabo con residuos fenólicos, es decir proteínas que contienen tirosina para la formación de nitrotirosina. Las proteínas se precipitan por acción de los ácidos inorgánicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente rojo al calentar por formación de una sal mercúrica. Preparar 3 tubos de ensayo agregar 15 gotas de millón, 3 gotas de solución de sulfato cúprico al 1% llevar a baño maria y dejarlo por 10 minutos observamos la reacción
Datos experimentales…Resultados
	 
	1
	2
	3
	4
	5
	6
	7
	8
	9
	10
	CASEINA 0.5%
	2.0
	2.0
	2.0
	2.0
	2.0
	-
	-
	-
	-
	-
	OVOALBUMINA 1%
	-
	-
	-
	-
	-
	2.0
	2.0
	2.0
	2.0
	2.0
	CLORURO DE MERCURIO 5%
	0.5
	-
	-
	-
	-
	0.5
	-
	-
	-
	-
	ACETATO DE PLOMO 10%
	-
	0.5
	-
	-
	-
	-
	0.5
	-
	-
	-
	AC. ACÉTICO 5%
	-
	-
	0.5
	-
	-
	-
	-
	0.5
	-
	-
	FERROCIANURO DE POTASIO 10%
	-
	-
	-
	0.5
	-
	-
	-
	-
	0.5
	-
	AC. TRICLOROACETICO 10%
	-
	-
	-
	
	0.5
	-
	-
	-
	-
	0.5
	
	Caseína
	ovoalbúmina
	NaOH
	CLORURO DE MERCURIO
	
	
	
	ACETATO DE PLOMO
	
	
	
	FERROCIANURO DE POTASIO
	
	
	
	ACIDO ACÉTICO
	
	
	
	AC. TRICLOROACETICO
	
	
	
Discusión: El índice de saponificación representa el peso en miligramos de hidróxido de potasio necesarios para saponificar completamente un gramo de grasa o aceite; este índice es inversamente proporcional al peso molecular promedio de los ácidos grasos libres. Se analizó el aceite de soya en un aceite vegetal comestible, obteniéndose un índice de saponificación de 169.2370 (ver cálculos en anexos). Dicho resultado indica que, para saponificar un gramo del aceite, se necesitó 169.2370 mg de álcali (KOH). En el cuadro 1 se muestran los diferentes índices de saponificación para el aceite de soya en la literatura.
Conclusiones: 
En la presente práctica se logró determinar el índice de saponificación del aceite de soya, obteniéndose por debajo a los valores marcados en las diferentes literaturas y normatividad. Se realizó la investigación pertinente para hacer las comparaciones entre los valores teóricos y experimentales, cumpliendo el objetivo planteado de la práctica.
Bibliografía:
-Alejandro Fukusaki Y. Pedro Cueva). Juan León.
Manual de Laboratorio de Química. Perú.2 biblioteca nacional del Perú. 2013. 102pp
-Barboza, Eleazar .Ortiz, Guadalupe. Manual de Prácticas de Bioquímica. UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO. Campus Irapuato-Salamanca. División Ciencias de la Vida
Experimento N°4 ESTIMACION CUANTITATIVA Y CUALITATIVA DE PROTEINAS. DETERMINACION DE PROTEINAS POR EL METODO DE BIURET.
Material:
Tubos de ensayo		NaOH 1N
Pipetas 			 	estándar de proteinas
Gradillas 			reactivo de biuret
Espectofotometro		
Fundamento
Absorbancia ultravioleta (UV) a 280 nm (rango: 0.1-100 ug/ml)
Los aminoácidos aromáticos tirosina y triptófano confieren a las proteínas su característico espectro de absorción ultravioleta (UV) a 280 nm. La fenilalanina y los puentes disulfuro también pueden contribuir a la absorción en esa longitud de onda, aunque ligeramente. Este método es simple y requiere de un volumen de muestra extremadamente pequeño ya que los nuevos espectrofotómetros emplean un sistema de retención de muestra durante la medición. Sin embargo, la muestra proteica debe ser pura y no contener componentes no proteicos con el mismo espectro de absorción, tales como ácidos nucleicos contaminantes. Se debe conocer la secuencia exacta de los aminoácidos de la proteína analizada y calcular el coeficiente de absorción específico de esa proteína previo a la determinación de la concentración en solución. Este método es el más rápido, pero propenso a errores.
	ensayo
	absorción
	mecanismo
	límite de detección
	ventajas
	desventajas
	absorción UV
	280 nm
	absorción de tirosina y triptófano
	0.1-100 ug/ml
	pequeño volumen de muestra, rápido, económico
	incompatible con detergentes y agentes desnaturalizantes, alta variabilidad
	ácido bicinconínico
	562 nm
	reducción de cobre (Cu2+ a Cu1+), Reacción del BCA con Cu1+
	20-2000 ug/ml
	compatible con detergentes y agentes desnaturalizantes, baja variabilidad
	compatibilidad con agentes reductores baja o nula
	Bradford o azul brillante de Coomassie
	470 nm
	formación de complejo entre el colorante azul brillante de Coomassie y las proteínas
	20-2000 ug/ml
	compatible con agentes reductores, rápido
	incompatible con detergentes
	Lowry
	750 nm
	reducción de cobre por proteínas, reducción de Folin Ciocalteu por el complejo de cobre con proteína
	10-1000 ug/ml
	alta sensibilidad y precisión
	incompatible con detergentes y agentes reductores, procedimiento largo
Procedimiento
a) Determinación cualitativa de proteínas
b) Curva estándar para proteínas
	TUBOS
	PROTEINA
mg/ml
	ab
	fc
	BI
	-
	
	
	1
	2
	
	
	2
	4
	
	
	3
	6
	
	
	4
	8
	
	
	5
	10
	
	
c) Determinación cuantitativa de proteínas 
Datos experimentales…Resultados
	TUBOS
	1
	2
	3
	CASEINA
	1.0
	-
	-
	OVOALBUMINA
	-
	1.0
	-
	AGUA DESTILADA
	-
	-
	1.0
	NaOH 40%
	1.0
	1.0
	1.0
	ACETATO DE PLOMO
	0.5
	0.5
	0.5
Bibliografía
-Alejandro Fukusaki Y. Pedro Cueva). Juan León.
Manual de Laboratorio de Química. Perú.2 biblioteca nacional del Perú. 2013. 102pp
-Barboza, Eleazar .Ortiz, Guadalupe. Manual de Prácticas de Bioquímica. UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO. Campus Irapuato-Salamanca. División Ciencias de la Vida
Cuestionario 
1.- AL TITULAR 2.0 ml DE UNA SOLUCION DE PROTEINA AL 7% ENTRE pH 11.5 Y 13.5 SE GASTARON 1.8 ml DE NaOH 0.001N ESTIMAR EL NUMERO DE RESIDUOS DE ARGININA QUE TIENE DICHA PROTEINA, SABIENDO QUE SU PESO MOLECULAR ES DE 93.330
2.- QUE pH ELEGIRIA PARA SEPARAR MEDIANTE ELECTROFORESIS UNA MEZCLA DE LAS SIGUIENTES PROTEINAS:
MEZCLA A:UREASA (pl=5.0) Y SEROALBUMINA(pl=4.9)
MEZCLA B: MIOGLOBINA (pl=7.0) Y CITOCROMO C (pl=10.6)
3.-LA INSULINA ES SINTETIZADA EN LAS CELULAS b DEL PANCREAS A PARTIR DE LA PROINSULINA, QUE ES UN POLIPEPTIDO DE UNA SOLA CADENA, SEÑALE LOS METODOS QUE UD. UTILIZARIA PARA REALIZAR LA SEPARACION DE AMBAS PROTEINAS, TENIENDO EN CUENTA LOS SIGUIENTES DATOS FISICO QUIMICOS.
INDIQUE LOS RESULTADOS QUE ESPERARIA ENCONTRAR AL USAR CADA UNO DE LOS METODOS QUE PROPONE. PROINSULINA: PM= 6000, pl=5.3; INSULINA: PM=9000, pl=6.4
4.-UNA MUESTRA DE SUERO SANGUINEO TIENE 6.7g DE PROTEINAS TOTALES. MEDIANTE LA ELECTROFORESIS EN PAPEL SE ANALIZAN SUS FRACCIONES PROTEICAS Y SE ENCUENTRAN LOS SIGUIENTES PORCENTAJES: ALBUMINA 55%, ALFA 1 GLOBULINA 9%, BETA GLOBULINA 11% Y GAMA GLOBULINA 19% ENCONTRAR EL CONTENIDO DE CADA FRACCION PROTEICA EN G%. DETERMINE SI EXISTE ALTERACION EN LA CONCENTRACION DE CADA UNA DE ESTAS PROTEINAS.
5.- AL HIDROLIZAR UN PÉPTIDO X SE OBTUVO LA SIGUIENTE COMPOSICION LIS HIS ASP GLU 2 ALA PRO VAL TIR…
6.- CALCULAR LAS CONCENTRACIONES DE LAS ESPECIES IONICAS DE UNA SOLUCION DE HISTIDINA 0.25 M AL PH 2