Medidas microscópicas

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Medidas microscópicas
Aumento total
El aumento total del microscopio se puede calcular fácilmente multiplicando el aumento 
del objetivo por el aumento del ocular:
Aumento microscopio = Aumento objetivo × Aumento ocular
Por ejemplo combinando un objetivo con un aumento de 60x con un ocular de 10x se 
obtiene un aumento total de 600x.
El aumento de una imagen debe ir siempre asociado con una buena resolución, de lo 
contrario obtenemos una imagen aumentada en la que no se pueden apreciar los 
detalles. La resolución obtenida mediante una lente viene definida por su apertura 
numérica. Para observar una muestra con buena resolución se debe observar con 
un aumento que esté entre 500 y 1000 veces la apertura numérica del objetivo. 
Este rango de aumento se conoce como aumento útil. Si se sigue aumentando la 
imagen por encima de este rango la imagen aparecerá borrosa sin ganancia de 
resolución. En este caso el aumento se conoce como aumento vacío.
Una manera sencilla de calcular el aumento útil de un juego de objetivo + ocular es 
multiplicando la AN del objetivo por 1000. La cifra obtenida es el aumento total que 
debe tener la imagen cuando se multiplica el aumento del objetivo por el aumento del 
ocular, por ejemplo si se tiene un objetivo de 100x que posee una AN=1.25 el aumento 
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máximo que debe presentar la imagen para ofrecernos la mayor cantidad de detalles es 
aquel que resultaría de multiplicar 1.25 x 1000 = 1250 aumentos, por lo tanto si el 
objetivo es de 100 ampliaciones debemos usar un ocular de por lo menos 12x, si 
usamos un ocular de 15x la ampliación de la imagen nos estaría dando un aumento 
vacío.
Al contrario, si empleamos un ocular de 5x = 500x, estaríamos frente a un caso de 
subutilización del poder de resolución del objetivo pues no se lograría el aumento 
necesario para lograr observar los detalles de la imagen que el objetivo empleado ha 
logrado resolver. Los límites que existen para que un objetivo pueda ofrecer al 
observador un adecuado poder de resolución oscilarían entre las cifras que señalan un 
máximo poder de resolución equivalente a multiplicar la AN del objetivo utilizado 
por 1000, y un mínimo poder de resolución útil equivalente a multiplicar la AN del 
objetivo por 500.
La máxima apertura numérica de los objetivos está limitada a valores de 
aproximadamente 1.50 (utilizando objetivos de inmersión). Por este motivo, el máximo 
aumento útil que se puede obtener con un microscopio óptico es 1500 (1.50 x 
1000). Este es un dato importante porque existen microscopios que se anuncian con un 
aumento de 2000x. Hay que tener en cuenta que cualquier valor de aumento superior a 
1500 se refiere a aumento vacío y es por lo tanto inútil en cuanto a la información que 
aporta.
La siguiente tabla muestra el aumento total de un microscopio para distintos valores 
estándar del aumento de los objetivos y del ocular. Los valores que corresponden a un 
aumento útil están resaltados en color verde, mientras que la zona de aumento vacío 
está indicada en color rojo. Solo se indican aquellos aumentos contenidos entre 500 y 
1000 veces la apertura numérica. El valor entre paréntesis en la columna de los 
objetivos es la apertura numérica habitual correspondiente al número de aumentos.
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Diámetro de campo
Una técnica rápida, sencilla y sobre todo fácil para obtener una idea de las dimensiones 
de los objetos que observamos al microscopio es comenzar por delimitar el diámetro 
del campo visual. Esto nos ayuda a saber un tamaño aproximado de las estructuras 
que estamos observando en las muestras, tanto para fines diagnósticos como 
académicos.
Una manera de hacerlo manualmente es con papel milimetrado. Haga un montaje 
húmedo de un cuadrito de papel milimetrado de aproximadamente 5mm de lado. 
Coloque el explorador en posición de uso. Observe por el ocular y mueva la 
preparación hasta que una de las líneas pase por el centro del campo, dividiéndolo en 
dos partes iguales. Contando cuantas divisiones atraviesan esa línea, la cual señala el 
diámetro del campo, usted podrá saber cuántos milímetros mide éste.
Los cuadros pequeños en el papel milimetrado representan 1 mm, lo que corresponde 
a 1000μm. En el campo visual del objetivo 4x se pueden apreciar un poco más de 4 de 
estos cuadros, por lo que estimamos que el diámetro de este campo es superior a 
4,000μm o 4 mm.
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En estos ejemplos observamos que el campo visual del objetivo 10x corresponde 
aproximadamente a 1.8 mm, es decir 1800 μm. y que usando el objetivo 40x no se 
alcanzan a ver dos bordes paralelos juntos, por lo que el campo visual es menor que 
1mm, aproximadamente 500 μm.
Es recomendable que el observador memorice los tamaños de ciertas células o 
estructuras conocidas, para así poder confirmar estas medidas por su cuenta, y en la 
práctica poder hacer estimaciones rápidas de estructuras adyacentes, o 
identificaciones más precisas. Por ejemplo, el rango de tamaño de los eritrocitos va de 
6.5 a 8.4 μm, y el de los mácrófagos de 10 a 30 μm. Significa que tomando un diámetro 
promedio de 20μm para los macrófagos, podríamos imaginar  
que en un campo visual del objetivo 40x cabrían alrededor de 25 de estas células una 
al lado de la otra de lado a lado del campo.
A partir de 400x se necesita emplear cálculos matemáticos para poder determinar el 
diámetro de campo, siguiendo las mediciones tomadas anteriormente. Se usa la 
siguiente fórmula: A1/A2=D2/D1 siendo asi:
A1, el aumento menor de referencia.
A2, segundo aumento de referencia, mayor que A2.
D1, diámetro de A1.
D2, diámetro de A2, el cual intentamos calcular.
Asi, D2=A1xD1/A2.
Tomemos el siguiente ejemplo:
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