Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas en perfiles bioquímicos sanguíneos de vacas lecheras

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RESUMEN 
Objetivo. El objetivo del estudio fue determinar la asociación, sensibilidad (Se) y especificidad (Es) 
de las enzimas glutamato deshidrogenasa (GDH, EC: 1.4.1.3), aspartato aminotransferasa (AST, EC: 
2.6.1.1) y g-glutamil transpeptidasa (GGT, EC: 2.3.2.2) como indicadores de daño hepático en perfiles 
bioquímicos sanguíneos de vacas lecheras. Materiales y métodos. Se analizaron los valores de la 
actividad plasmática de GDH, AST y GGT, obtenidos de 1566 vacas correspondientes a 112 perfiles 
bioquímicos realizados en rebaños lecheros. Se determinó la asociación entre la actividad de las 
enzimas y el área bajo la curva (ABC) y la Se y la Es mediante curva ROC considerando la presencia 
de daño hepático cuando GDH>30 U/L o GGT>39 U/L. Resultados. La AST presentó mayor asociación 
con la GDH (r=0.55) que la GGT (r=0.44), así como una mayor ABC (p=0.01) al utilizar GDH>30 U/L 
para indicar daño hepático. El grado de asociación entre AST y GGT fue de r=0.42. La sensibilidad de 
la AST para detectar daño hepático, utilizando el punto de corte de referencia del laboratorio (>150 
U/L), fue inferior que al emplear GGT (>39 U/L). El punto crítico de máxima Se y Es de la curva ROC 
para daño hepático se obtuvo con AST>110 U/L, valor que incrementó la concordancia diagnóstica 
con la GDH (Kappa >0.300), pero no con la GGT. Conclusiones. La actividad plasmática de AST en 
vacas lecheras se asocia mayormente con la de GDH que con la de GGT y su límite de referencia para 
predecir daño hepático correspondería a >110 U/L.
Palabras clave: Enzimas hepáticas, perfiles sanguíneos, vacas lecheras (Fuente: CAB).
Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas en perfiles 
bioquímicos sanguíneos de vacas lecheras
Diagnostic assessment of liver enzymes in blood profiles from 
dairy cows
Mirela Noro,1* Ph.D, Pía Cid T,2 Esp, Catalina Wagemann F,2 M.Sc, Verónica Arnés V,2 Tec Med, 
Fernando Wittwer M,2 M.Sc.
1Universidade Federal do Pampa, UNIPAMPA, Curso Medicina Veterinaria. Uruguaiana, Brasil. 
2Universidad Austral de Chile, UACh, Instituto Ciencias Clínicas Veterinarias. Casilla 567, Valdivia, 
Chile. Correspondencia: mirelanoro@gmail.com
Recibido: Marzo de 2012; Aceptado: Diciembre de 2012.
Rev.MVZ Córdoba 18(2):3474-3479, 2013.
ORIGINAL
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ABSTRACT 
Objective. The aim of this study was to establish the association, sensibility (Se) and specificity (Sp) 
of the plasmatic activity of glutamate dehydrogenase (GDH, EC: 1.4.1.3), aspartate aminotransferase 
(AST, EC: 2.6.1.1) and g-glutamil transpeptidase (GGT, EC: 2.3.2.2) as liver damage markers in blood 
profiles of dairy cows. Materials and methods. The records of the plasma activity for GDH, AST 
and GGT obtained from blood profiles taken from 1566 cows from 112 dairy herds. The association 
between enzymatic activity, area below the curve (ABC), and Se and Sp using a ROC curve were 
determined, considering liver damage when GDH >30 U/L or GGT >39 U/L. Results. The AST was 
more likely associated to GDH (r=0.55) than to GGT (r=0.44). AST also had a higher ABC (p=0.01) 
when using GDH >30 U/L as an indicator of liver damage. The correlation between AST and GGT was 
of r=0.42. AST Se to detect liver damage with a cut-off level of >150 U/L was lower than the Se of 
GGT. The critical point for maximum Se and Sp of the ROC curve was obtained with AST>110 U/L 
and an increase in the diagnostic concordance with GDH (Kappa>0.300), was obtained using this 
value. Conclusions. Plasma activity of AST is more associated to GDH than to GGT in dairy cows. The 
cut-off level of plasma activity of AST for liver damage prediction in dairy cows would be >110 U/L.
Key words: Dairy cow, liver enzymes, blood profile (Source: CAB).
INTRODUCCIÓN
El hígado es un órgano vital para el metabolismo 
al ser responsable de la gluconeogénesis, 
ureagénesis, metabolismo de lípidos y procesos 
de detoxificación (1). En los sistemas de 
producción láctea la vaca debe sostener una alta 
exigencia productiva donde el hígado cumple un 
rol metabólico fundamental, estando sujeto a 
la presentación de trastornos metabólicos (2) y 
tóxicos (3); consecuentemente para mantener 
el estatus sanitario y productivo del rebaño, es 
fundamental monitorear su integridad en los 
programas de salud y nutrición.
El examen directo del hígado no es realizable en 
rumiantes siendo necesario recurrir a pruebas 
complementarias para detectar lesiones o 
disfunciones discretas, cuya magnitud no 
culmina en una alteración clínica. Ningún 
analito es específico de enfermedad hepática, 
si bien diversos constituyentes sanguíneos son 
modificados cuantitativamente en alteraciones 
del hígado. Las enzimas hepáticas están 
presentes en los hepatocitos o en el epitelio 
de los canalículos biliares, de modo que su 
lesión condiciona un aumento en la circulación 
sanguínea; por ello, el incremento de su 
actividad plasmática es indicativo de pérdida en 
la integridad celular hepática o de colestasis (4). 
Entre las enzimas hepáticas utilizadas en 
el diagnóstico cl ínico de enfermedades 
hepatocelulares o colestasis en rumiantes 
están la glutamato deshidrogenasa (GDH, EC: 
1.4.1.3), la aspartato amino transferasa (AST, 
EC: 2.6.1.1) y la g-glutamil transpeptidasa (GGT, 
EC: 2.3.2.2), las cuales permiten diagnosticar la 
presencia de daño hepático y orientar la ubicación 
de la lesión (1,5). La GDH y GGT se consideran 
órgano-específicas, la primera es hepatocelular 
y la segunda canalicular, mientras que la AST 
siendo hepatocelular también se ubica en células 
musculares y otras (5,6). 
En el sur de Chile la presentación de trastornos 
hepáticos, diagnosticada mediante el aumento 
de la actividad plasmática de las enzimas AST 
y GGT, incrementó en el período entre los años 
de 2003 a 2010 comparado con 1986 a 2002 
(7), resultado atribuible a una intensificación 
en los sistemas productivos con presentación 
de trastornos metabólicos como la lipidosis 
hepática (2) y el uso de alimentos conservados 
contaminados con micotoxinas (3). Por otro lado, 
en los exámenes bioquímicos los valores de las 
diferentes enzimas no siempre se asocian en 
cuadros de alteración hepática, situación que 
dificulta la interpretación de los resultados. Este 
hecho se atribuye a las diferencias en la ubicación 
de las enzimas, la etiología, severidad y curso 
del daño hepático, así como a los intervalos de 
referencia utilizados. Para comparar diferentes 
pruebas diagnósticas, así como su exactitud, se 
determina el área bajo la curva ROC (ABC) y se 
estima su sensibilidad (Se) y especificidad (Es) 
(8), es así que disponer de datos de asociación 
y de sensibilidad entre pruebas diagnósticas es 
imprescindible para un diagnóstico certero y 
ajuste de los intervalos de referencia.
El objetivo del estudio fue determinar la 
asociación, la Se y la Es de las enzimas GDH, 
AST y GGT como indicadores de daño hepático 
en perfiles bioquímicos sanguíneos de vacas 
lecheras. 
Noro - Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas 
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MATERIALES Y MÉTODOS
Fuentes de información. Se analizaron 
los valores de la actividad plasmática de las 
enzimas hepáticas GDH, AST y GGT obtenidos 
de 1566 vacas correspondientes a 112 perfiles 
bioquímicos sanguíneos realizados a rebaños 
lecheros ubicados entre las regiones del Bío Bío 
y Los Lagos, Chile. Cada perfil estuvo constituido 
por un grupo de 7 a 28 vacas lecheras; en ellos 
estuvieron disponibles los valores de dos o de las 
tres enzimas evaluadas en el estudio. Los análisis 
fueron realizados en el Laboratorio de Patología 
Clínica Veterinaria de la Universidad Austral de 
Chile entre enero de 2008 y junio de 2011. 
Análisis de laboratorio. La actividad de GDH 
(Diasys®, Ref. 124119910021), AST (Human®, 
Ref. 12021) y GGT (Human®, Ref. 12013) se 
determinó en muestras de plasma heparinizado 
en un autoanalizador Metrolab 2300® (Wiener 
Lab) a 37ºC. 
Análisis estadístico. Se utilizaron modelos 
univariadosconsiderando que no todos los 
perfiles contaban con los datos de las 3 enzimas. 
La asociación entre las actividades enzimáticas 
fue determinada mediante correlación de 
Spearman en el programa IBM SPSS 19; los datos 
se graficaron mediante regresión lineal con un 
intervalo de confianza (IC) del 95%. El ABC, la 
Se y Es se determinaron mediante una curva ROC 
considerando daño hepático el límite superior de 
referencia de la enzima GDH (>30 U/L) (9-10) o 
GGT (>39 U/L) (10). Se comparó el ABC entre los 
analitos utilizando un método de comparaciones 
para curvas ROC independientes en el programa 
MedCalc 11.6.1.0 (8). La presentación de daño 
hepático para cada enzima se contrastó en un 
tabla de contingencia 2x2 mediante la prueba 
de Chi-cuadrado y cuando p<0.05 se realizó el 
análisis de concordancia del índice de Kappa en 
el programa IBM SPSS 19. 
RESULTADOS 
Los resultados obtenidos de las 1566 vacas 
lecheras se indican en la figura 1, observándose 
que la actividad plasmática de las enzimas 
estudiadas presentó una alta dispersión de datos. 
Se apreció que el 37, 14 y 30% de las 1566 
vacas tenían valores superiores a los límites de 
referencia establecidos por el laboratorio para 
GDH, AST y GGT, respectivamente (10). 
La actividad plasmática de AST presentó mayor 
asociación con la de GDH (r=0.55; Figura 2a) que 
la GGT (r=0.44; Figura 3a), así como una mayor 
ABC (p=0.01; Figura 2b y 3b), al utilizar GDH 
>30 U/L para indicar daño hepático (Tabla 1). 
Figura 1. Actividad plasmática de GDH y AST (a), 
GDH y GGT (b) y GGT y AST (c) en perfiles 
bioquímicos de vacas lecheras. En el gráfico 
de caja y bigotes: += media; • indica outliers.
La Se de la AST fue baja (28.2%), presentando 
una alta Es (94.8%) al utilizar el límite de 
referencia entregado por el laboratorio como 
punto de corte (AST<150 U/L) (Tabla 1). La 
máxima Se y Es de la actividad plasmática de AST 
para detectar daño hepático en la curva ROC fue 
cuando su valor alcanzó >110 U/L, logrando una 
Se de 70.3% y un incremento en la concordancia 
diagnóstica con la GDH (>0.300 en Kappa).
De las 697 vacas con valores de GDH y AST, el 
35.6 y el 13.4%, respectivamente, tuvieron la 
actividad plasmática de dichas enzimas sobre 
sus valores de referencia. De los animales con 
GDH>30 U/L sólo un 27% tenían AST>150 U/L, 
porcentaje que se eleva al 43.7% al disminuir el 
punto de corte de AST a >110 U/L. 
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Tabla 1. Área bajo la curva (ABC), sensibilidad (Se), 
especificidad (Es) y concordancia (Kappa) 
de la actividad plasmática de GDH, AST y 
GGT en vacas lecheras con daño hepático 
diagnosticado cuando GDH >30 U/L y GGT 
>39 U/L.
GDH >30 U/L GGT >39 U/L
AST >150 
U/L
AST >110 
U/L*
GGT >39 
U/L
AST >150 
U/L
AST >110 
U/L*
n=1287 n=1287 n=418 n= 697 n=697
ABC 0.778 0.779 0.708 0.714 0.714
IC ABC 0.75-0.80 0.75-0.80 0.66-0.75 0.68-0.75 0.68-0.75
Se (%) 28.2 70.3 51.4 41.0 75.7
IC Se 24.1-32.5 65.9-74.5 43.8-59.0 34.7-47.5 69.8-81.0
Es (%) 94.8 71.1 77.8 85.2 52.6
IC Es 93.1-96.2 67.8-74.1 72.0-82.8 81.6-88.3 47.9-57.3
Kappa 0.267 0.394 0.299 0.282 0.245
*Punto crítico de máxima sensibilidad y especificidad.
Noro - Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas 
En los perfiles analizados 418 vacas tenían 
valores de GDH y GGT, entre ellas el 41.9 
y 34.4% presentaron valores de GDH y GGT, 
respectivamente, sobre el límite superior de 
referencia. El 50.4% presentó valores de GGT >39 
U/L cuando el de GDH fue >30 U/L. Además, la GGT 
presentó una mayor Se y concordancia diagnóstica 
para detectar daño hepático que la AST >150 U/L 
e inferior que la AST >110 U/L (Tabla 1). 
El grado de asociación entre AST y GGT fue de 
r=0.42 (Figura 4a). AST >150 U/L presentó 
una baja Se para detectar daño hepático. Sin 
embargo, incrementó su Se al emplear como 
punto de corte AST >110 U/L, correspondiente 
al punto de máxima Se y Es de la curva ROC 
(Figura 4b), si bien se redujo la concordancia 
diagnóstica con GGT (Tabla 1). 
Figura 3. Regresión lineal (IC 95%) entre la actividad plasmática de GGT y GDH (a) y curva ROC (IC 95%) de 
la actividad plasmática de GGT en vacas lecheras con daño hepático diagnosticado cuando GDH >30 
U/L (b). En a, - - - - indica límite superior de referencia.
Figura 2. Regresión lineal (± 95% IC) entre las actividades plasmáticas de AST y GDH (a) y curva ROC (± 95% IC) 
de la actividad plasmática de AST en vacas lecheras con daño hepático diagnosticado cuando GDH >30U/L 
(b). En a, - - - indica límite superior de referencia.
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DISCUSIÓN
Las actividades plasmáticas aumentadas de 
las enzimas GDH, AST y GGT observadas en 
un elevado porcentaje de las vacas indican 
que estos animales cursaban con algún grado 
de daño hepático, hepatocelular o canalicular, 
al momento de obtenerse la muestra para los 
perfiles bioquímicos (1). La mayor asociación 
de la AST con la GDH, así como la mayor ABC 
de la curva ROC para detectar daño hepático, 
en comparación con la GGT, se atribuye a la 
ubicación hepatocelular de las dos primeras, 
no así la GGT que es canalicular (5,6). La GDH 
plasmática es considerada específica del hígado, 
motivo por el cual se considera como prueba 
de oro para el diagnóstico de daño hepático, 
y por su ubicación mitocondrial, mayormente 
en la zona 3 del hígado (centrolobular), está 
incrementada en procesos agudos y tóxicos. 
Además, el incremento de la actividad plasmática 
de la GDH se produce con anterioridad al de 
la GGT, retornando a valores fisiológicos más 
precozmente por su corta vida media (3), no 
encontrándose por ello aumentada en procesos 
crónicos (4,11). 
La GGT presenta muy buena Es para detectar 
daño hepático, incrementando su actividad 
plasmática por daño canalicular, en casos 
de colestasis, hiperplasia de ductos biliares, 
cirrosis y colangiocarcinoma (1,4-6). Por ello, su 
actividad plasmática está aumentada en vacas 
con fasciolosis, intoxicación por alcaloides de la 
pirrolizina y aflatoxinas (4,12). 
La AST presentó una baja concordancia 
diagnóstica con la GDH cuando se empleó como 
punto de corte el límite superior de referencia 
utilizado por el laboratorio (>150 U/L) (10). 
Resultado atribuible a la inespecíficidad de 
la AST al estar presente, en sus isoformas 
citosólica y mitocondrial, en diversos órganos, 
además de hígado, como eritrocitos, músculos 
esquelético y cardíaco y limitando su especificidad 
para diagnosticar alteraciones hepáticas (5). 
La actividad plasmática de AST aumenta 
rápidamente, de 6 a 8 horas posterior al daño 
hepático y habitualmente su incremento es 
proporcional a la severidad del daño celular, 
retornando a valores fisiológicos en pocos 
días. Por ello, su actividad plasmática aumenta 
de forma marcada en enfermedades agudas, 
mientras que un aumento leve pudo indicar 
enfermedades hepáticas crónicas (4,6). La 
actividad plasmática de AST elevada se observa 
en vacas con hepatitis infecciosa y tóxica, 
cirrosis, colestasis y lipidosis hepática; también 
se observó liberación de AST desde el hepatocito 
durante estadios de recuperación de injurias 
hepáticas (6). 
El empleo de muestras con hemólisis in vitro 
u obtenidas de vacas que cursaban con daño 
muscular explicarían la baja concordancia entre 
GDH y AST (5,6). Es por eso que frente a la 
sospecha de una alteración muscular se indica 
determinar la actividad de la creatina quinasa 
(CK), la cual está aumentada en daño muscular 
y no en daño hepático (5,6). A la vez, como la 
mayor concordancia y punto de máxima Se y Es 
de la AST en la curva ROC fueron obtenidos con 
una actividad plasmática de AST mayor a 110 
U/L, se infiere que el límite superior de referencia 
de esta enzima debería ser ajustado a este valor. 
Las distintas afecciones hepáticas afectan de 
forma diversa el comportamiento de liberación 
enzimática. Por ejemplo, en la lipidosis hepática la 
actividad plasmática de GDH se incrementa más 
Figura 4. Regresión lineal (IC 95%) entre las actividades plasmáticasde AST y GGT (a) y curva ROC (IC 95%) de 
la actividad plasmática de AST en vacas lecheras con daño canalicular diagnosticado cuando GGT>39 
U/L (b). En a, - - - - indica límite superior de referencia.
3479Noro - Valoración diagnóstica de enzimas hepáticas 
intensamente que las de GGT y AST (2). Por otro 
lado, en cabras intoxicadas experimentalmente 
con esporodesmina, toxina del hongo Pithomyces 
chartarum que produce el eczema facial, se 
observó un incremento de las actividades 
plasmáticas de la AST y GDH a los 7 días con un 
pico a los 14 ó 21 días, retornando a sus valores 
fisiológicos a los 28 y 35 días, respectivamente, 
mientras que la GGT incrementó desde el día 10 
hasta el día 42 con valores máximos al día 28 y 
35 (13). Finalmente, la infestación por Fasciola 
hepática incrementó la actividad plasmática de 
GDH y AST desde la 3a semana posterior a esta, 
asociado a la migración parasitaria, mientras que 
la GGT aumentó desde la 8a semana, cuando el 
parásito adulto se ubicó en el canalículo biliar (14). 
En conclusión, la actividad plasmática de AST en 
vacas lecheras se asocia mayormente con la de 
GDH que con la de GGT y su valor con máxima Se 
y Es para predecir daño hepático correspondería 
a >110 U/L.
Agradecimientos
A Helga Böhmwald Tecnóloga Medica, por su 
cooperación en los análisis bioquímicos.
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