Aislamiento de bacteriofagos

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Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
Aislamiento de 
Bacteriófagos
Grupo 2752
Equipo 8
 El alumno al término de la práctica sabrá el
manejo y el aislamiento de bacteriófagos.
 El alumno sabrá que es un bacteriófago, un
virus y el efecto de parasitismo intracelular
que producen en una célula huésped.
 El alumno sabrá las etapas de la multiplicación
de los bacteriófagos.
Son los seres más simples y pequeños
que se conocen.
 Básicamente son moléculas de ácido
nucleico envueltas por una cubierta
proteica.
Son acelulares, (no tienen organización
celular).
Propiedades definitivas de virus:
Son parásitos intracelulares obligados,
carecen de enzimas con las que
desarrollar su propio metabolismo,
siendo su única función transportar el
ácido nucleico viral de una célula
hospedadora a otra.
El genoma viral será solamente ADN ó
ARN, pero no ambos.
Se miden en nanómetros y van de 25 a
300nm.
ADN virus ARN virus
 Tipo de material genético
 Forma
 Si son desnudos o envueltos
 Tamaño
Familia Envoltura Simetría de la 
cápside
Tamaño (nm) Estructura 
DNA
Virus 
humanos 
importantes
Parvovirus No Icosaédrico 22 TS lineal Virus B19
Papovavirus No Icosaédrico 55 TD circular Virus 
papiloma
Adenovirus Si Icosaédrico 75 TD lineal Adenovirus
Herpesvirus Si Icosaédrico 100 o mas TD lineal Herpes, 
Varicela 
Zoster
Poxvirus Si Compleja 250 a 400 TD lineal Virus Viruela
Adenovirus
Virus de la viruela
Varicela Zoster
Familia Envoltura Simetría de la 
cápside
Tamaño (nm) Estructura 
DNA
Virus 
humanos 
importantes
Picornavirus No Icosaédrico 28 TS lineal Polio virus
Calicivirus No Icosaédrico 38 TS lineal Hepatitis E
Reovirus No Icosaédrico 75 TS lineal Rotavirus
Flavivirus Si Icosaédrico 45 TS no 
segmentado
Fiebre 
Amarilla y 
Dengue
Togavirus Si Icosaédrico 60 TS lineal Rubeóla
Familia Envoltura Simetría de la 
cápside
Tamaño (nm) Estructura 
DNA
Virus 
humanos 
importantes
Picornavirus Si Icosaédrico 100 TS lineal VIH
Calicivirus Si Helicoidal 80 a 120 TS lineal (8 
segmentos)
Influenza
Reovirus Si Helicoidal 150 TS lineal Sarampión
paperas 
Flavivirus Si Helicoidal 15 x 180 TS lineal Rabia
Togavirus Si Helicoidal 80 TS lineal Ébola 
Virus fiebre amarilla
Rubeola
Virus del Ebola
Influenza aviar
Hepatitis A 
Influenza porcina 
 Los virus exóticos, se conocen así debido a que su
morbilidad y mortalidad es difícil de estudiar.
 En general pertenecen a los siguientes géneros:
 Filovirus: Ébola, Marburg
 Poxvirus:Viruela
 Arenavirus: Fiebre Hemorrágica
 Arbovirus: Dengue, Fiebre Amarilla
 Hantavirus: FSR; SPH
 Herpesvirus: Epstein-Barr
 Los bacteriófagos son virus que
infectan bacterias.
 Su ácido nucleico puede ser ADN o
ARN
 La mayoría de los fagos están entre
un rango de 24-200 nm de longitud.
 Se agrupan en dos categorías:
 Bacteriófagos virulentos
 Bacteriófagos temperados
Estos bacteriófagos lisan a la bacteria
hospedera.
El fago T2 es un virus que infecta a la
bacteria Escherichia coli, descubierto en
1950. Se trata de un virus complejo de
DNA lineal bicatenario
Ensayos para determinar fagos líticos
 Ensayo en placa.- Los fagos líticos se cuentan
mediante ensayos de formación de placas. Una
placa se define como el área clara que resulta
de la lisis de bacterias. (Cada placa se origina
de un solo fago infeccioso). A la partícula
infecciosa que da origen a la placa se le llama
una unidad formadora de placa.
 Estos bacteriófagos tienen un ciclo de
replicación no lítico (lisogénico).
 El genoma del fago puede integrase en el ADN
cromosómico de la bacteria hospedadora,
replicándose a la vez que lo hace la bacteria o
bien puede mantenerse estable en forma de
plásmido, replicándose de forma
independiente a la replicación bacteriana.
La cepa bacteriana inocua Vibrio cholerae, la
cual, por acción de un fago, se transforma en una
cepa tremendamente virulenta que es la
causante del cólera
Adhesión Penetración
Replicación 
del Ac. 
nucleico 
Síntesis de 
proteínas 
estructurales
EnsambladoLiberación
Ciclo de vida del fago y el huésped
1) Ciclo vital de la bacteria no infectada
Una bacteria no infectada puede reproducirse por
fisión binaria, no mostrando infección por el fago
2) Adsorción del fago libre
Cuando la infección tiene lugar, el fago es
adsorbido sobre la superficie celular y el ácido
nucleído del mismo penetra en la célula. En ese
estadio el ácido nucleído del fago es llamado
“fago vegetativo”
3) Infección lítica
El material del fago vegetativo inyectado puede
ser reproducido, formándose muchas replicas.
Estos elementos maduran por la adquisición de
cubiertas proteicas , después de lo cual las células
de huésped experimentan lisis y el fago libre es
expuesto en libertad
4) Reducción del fago vegetativo a profago
Muchos fagos llamados “moderados” son capaces
de reducción a profago como alternativa a la
producción de infección lítica. La bacteria es ahora
lisogénica, después de un numero indeterminado
de divisiones celulares, un elemento de la
progenie puede presentar lisis y poner en libertad
el fago infectante
5) Perdida del profago:
Ocasionalmente una bacteria lisogénica puede
perder su profago, permaneciendo viable como
una célula no infectada. Se desconoce la causa de
esta perdida espontaneas
 Importantes en el estudio de la genética
bacteriana.
 Identificación de especies y subespecies
de bacterias, como Staphylococcus
aureus y distintas salmonellas, por su
patrón de sensibilidad.
Se tiene interés en emplear
bacteriófagos con fines terapéuticos.
Algunas toxinas
bacterianas son
codificadas por
profagos (fagos de
ciclo lisogénico)
Algunos pueden
interferir en
procesos
industriales.
 Flint, S. Krug, R. et. al. Principles of Virology. Molecular
biology, pathogenesis, and control. Ed. ASM. Washington,
2000
 Duerden, B. Reid, T. et. al. Microbiología de enfermedades
infecciosas. Ed. Limusa. México, 1993
 Tay Z. Jorge. Microbiología y Parasitología Medicas.
Méndez Editores. México 1994