COCOS Y BACILOS BRUCELLA

Vista previa del material en texto

Cocos y Bacilos Gram negativos aerobios:
Familia Brucellaceae
Género Brucella.- Clasificación
▪ Dominio : Bacteria
Filo : Proteobacteria
Clase : Alfa Proteobacteria
Orden : Rhizobiales
Familia : Brucellaceae
Género : Brucella
Especie : B. abortus
B. canis
B. melitensis
B. neotomae
B. ovis
B. suis
B. pinnipediae
B. cetaceae
B. microti
Género: Brucella
▪ Se conocen pocas especies de Brucella, y se diferencian ligera-
mente en la especificidad de huésped:
▪ B. melitensis infecta cabras y ovejas, 
▪ B. abortus infecta vacas, 
▪ B. suis infecta cerdos, 
▪ B. ovis infecta ovejas,
▪ B. neotomae
▪ B. pinnipediae, recientemente descubierta en mamíferos marinos
▪ La brucelosis, es una enfermedad zoonotica
▪ Es transmitida por:
▪ Ingestión de comida infectada, 
▪ Contacto directo con un animal infectado
▪ Por inhalación de aerosoles.
▪ Por exposición ocupacional: exposición al ganado, ovejas, cerdos, pero
también por el consumo de productos lácteos no pasteurizados
Transmisión de Brucella
Género 
Brucella
Gram 
negativos
0,5-0,7 por 
0.6-1.5 µm
Cocobaci-
los
Inmóviles, 
no 
capsulado
s
Aerobios 
estrictos
parejas o 
cadenas 
cortas
Catalasa 
y oxidasa 
positivos
Algunas 
especies 
requieren 
CO2
Reducen 
los 
nitratos
Ferm. 
escasos 
carbohidr
atos
Multiplica-
ción
intracelular
T° óptima 
37C
Colonias 
lisas circu-
lares,Con-
vexas,Tran
s-parentes
Características del Género Brucella
A la luz reflejada las colonias 
son brillantes, ligeramente 
opalescentes y de color gris 
azulado
Colonias de Brucella 
melitensis-Agar sangre
http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://staff.vbi.vt.edu/pathport/pathinfo_images/Brucella_abortus/Brucella_melitensis_colonies.JPG&imgrefurl=http://ci.vbi.vt.edu/pathinfo/pathogens/abortus.html&usg=__IHkmYbVKLoTj5AM5N3v1rqWnB4E=&h=514&w=693&sz=71&hl=es&start=5&um=1&tbnid=k6yPzN-JRVmHsM:&tbnh=103&tbnw=139&prev=/images%3Fq%3DBrucella%26um%3D1%26hl%3Des%26sa%3DN
http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://patric.vbi.vt.edu/organism/overview/images/1.jpg&imgrefurl=http://patric.vbi.vt.edu/organism/overview.php%3ForganismId%3D1&usg=__637umkig_uVxIxm2EWS0hzsY6NE=&h=275&w=349&sz=81&hl=es&start=3&um=1&tbnid=ihCrFDSJpvayeM:&tbnh=95&tbnw=120&prev=/images%3Fq%3DBrucella%26um%3D1%26hl%3Des%26sa%3DN
Continúa
▪ En Agar sangre no produce hemólisis, en agar Mac Conkey
crecen poco y no fermentan la lactosa.
▪ Las cepas rugosas (R), en TSA, producen colonias semejantes
en la forma pero varían considerablemente en tamaño, color,
consistencia y textura
▪ En Medio TSI- hay ausencia de ácido y gas
▪ En agar Citrato, no emplea este substrato como fuente de
carbono, por lo que no se modifica el color verde
▪ En Medio de SIM.- se observa la inmovilidad de las brucelas y la 
ausencia de indol y H2S
▪ En medio urea se mide el tiempo en que vira el medio a rojo,
debido a la producción de ureasa.
Brucella suis produce la mayor cantidad de ureasa en un
tiempo muy corto comparada con las demás especies que
producen menor cantidad.
▪ Crecimiento en presencia de colorantes: tionina y fucsina básica
Estructura y composición química
▪ La estructura celular de Brucella es semejante a la estructura
clásica de las bacterias Gram negativas. Al microscopio electrónico
se distinguen, de fuera hacia dentro:
La envoltura celular, integrada por:
▪ La membrana externa,
▪ El espacio periplásmico
▪ La membrana citoplasmática rodea al citoplasma, es una
bicapa de fosfolípidos y proteínas de diversos tipos, es muy
vulnerable a los cambios osmóticos del medio ambiente.
▪ Entre la membrana citoplásmica y la membrana externa se
encuentra el espacio periplásmico y la capa de peptidoglucano.
La región apolar (hidrofóbica) de la membrana con un grosor de
4.5 nm, forma una barrera estructural y funcional entre el
periplasma y el exterior de la célula.
Pared celular de Brucella
Continúa
▪ La supervivencia de la bacteria ya sea en el medio ambiente o
en el huésped, depende de la integridad de su membrana
externa ya que si ésta sufriera algún daño, la bacteria no
sobreviviría por mucho tiempo.
▪ En la membrana externa (ME) de Brucella, se encuentra el
lipopolisacárido (LPS), abundante y antigénico, y se le conoce
también como endotoxina
▪ Las propiedades bioquímicas y biológicas de la célula son
diferentes a las del resto de bacterias Gram negativas,
especialmente en cuanto al contenido de ácidos grasos del
lípido A de la membrana extena. La endotoxina de Brucella
presenta baja actividad endotóxica aunque conserva sus
propiedades inmunogénicas.
Continúa
▪ Las cepas de B. melitensis, B. abortus, B. suis y las brucelas
marinas en fase lisa (S), poseen el S-LPS que está constituido de un
lípido A, formado de diferentes ácidos grasos; una región central
(núcleo) que contiene el ácido 2-ceto 3-desoxioctulosónico, glucosa,
manosa y quinovosamina; y una cadena O, proyectada hacia el
exterior de la ME, constituida de un homopolímero de alrededor de
100 unidades de 4-formamido-4,6-didesoximanosa (perosamina)
▪ La estructura del LPS de cepas rugosas (R-LPS), es básicamente
similar al S-LPS, excepto por la cadena O, que está ausente o
reducida a unos pocos residuos. Por lo que, la especificidad del R-
LPS estará determinada por el polisacárido del núcleo. La falta de
cadena O modifica la superficie bacteriana de tal modo que las
brucelas no forman suspensiones estables y autoaglutinan
Continúa
▪ La existencia de otros polisacáridos: el hapteno nativo (HN) y el
polisacárido B (PB). Los antígenos polisacarídicos de impor-
tancia serológica en Brucella son: los polisacáridos A y M y la
forma libre de la cadena O.
▪ Las proteínas de membrana externa (OMPs) son de gran interés 
porque las han relacionado con la protección.
Estructura antigénica
▪ Brucela, aglutina con sueros monoespecíficos.- Se emplean el suero
monovalente A y monovalente M. El R se utiliza solo cuando se
sospecha de B. canis o de otra especie rugosa natural. Al realizar esta
prueba es muy importante tomar en consideración lo siguiente:
• B. abortus, puede contener antígeno A (biovar 1,2,3 y 6) o antígeno
M (biovares 4, 5 y 9) en forma de antígenos dominantes o ambos
antígenos A y M ( biotipo 7 ) en forma igualmente dominante.
• B. suis, puede tener antígeno A (biotipos 1, 2 y 3) como antígeno
dominante o ambos A y M (biotipo 4).
• B. melitensis, puede tener antígeno M (biotipo 1) o antígeno A (bio-
tipo 2) como antígenos dominantes o ambos A y M (biotipo 3). Por
consiguiente, cualquier cepa que aglutine con suero mono específico
M, no es necesariamente B. melitensis; éste es un error que frecuen-
temente se comete, por desconocer la composición antigénica de los
diferentes biovares de Brucella.
MEDIOS DE CULTIVO Y CONDICIONES 
PARTICULARES DE CULTIVO
▪ Como son bacterias intracelulares, necesitan requerimientos nutri-
cionales complejos para crecer. Hay Brucellas que se van a desa-
rrollar bien en medios clásicos como AS y ACH.
▪ Los medios de cultivo utilizados son:
▪ Medios líquidos: Caldo tripcasa-soja; Caldo Brucella.
▪ Medios sólidos: Agar tripcasa-soja; Agar Brucella.
▪ Medios selectivos (contienen antibióticos) : Modificado Thayer-
Martin.
▪ A todos los enfermos sospechosos de infección por Brucella se les
debe realizar hemocultivos seriados,
▪ Las técnicas de hemocultivo son:
▪ Técnica de Castañeda: Se utiliza un medio bifásico (liquido-
solido) en el mismo frasco. El medio liquido permite el enrique-
cimiento de las Brucellas que se encuentran en la sangre y el
medio sólido sirve para las resiembras
Factores de Patogenicidad
▪ Las especies de Brucella son patógenas intracelulares facultativas,
su virulencia está relacionada con la capacidad que poseen para:
▪ Adherirse, penetrar y multiplicarse en una gran variedad de
células eucarióticas,
▪ Resistir el efecto bactericida de los componentes del suero
normal tanto fagocíticas como no fagocíticas.
▪ La localización intracelular las mantiene protegidas de los antibióti-
cos y de factoresbactericidas del plasma como complemento y
anticuerpos, lo que determina la naturaleza crónica de la infección.
▪ La capacidad de producir ureasa aparentemente juega un papel en
la colonización del huésped. La enzima degrada la urea modifican-
do el pH en el sitio en donde se encuentre la bacteria
Continúa
▪ Brucella se adhiere con cierta facilidad a la superficie de las
mucosas debido a su gran hidrofobicidad, ya que no posee ni
fimbrias ni cápsula; ambas características favorecerían la
colonización y la generación de la enfermedad.
▪ Alguno de sus componentes celulares con función de adhesina,
promovería específicamente la adherencia a receptores
moleculares específicos de la célula del huésped (FcR, C3bR y
manosa). La unión sería necesaria para inducir una serie de
señales Intracelulares, que faciliten la colonización e invasión
celular, en este fenómeno estarían involucradas la actina y los
microtúbulos. En el caso de los linfocitos humanos, Brucella se
une a la membrana celular a través de moléculas semejantes a
lectinas.
Continúa
▪ Cuando son fagocitadas por células polimorfonucleares (PMN) o por
células fagocíticas mononucleares, las brucelas se multiplican dentro de
fagosomas, en el interior de los cuales, despliegan diversos
mecanismos que bloquean o suprimen la respuesta bactericida de estas
células.
▪ B. abortus escapa a la muerte dentro de los PMN, al producir gua-
nosina 5’ monofosfato (GMP) y adenina que inhiben la fusión fago-
lisosoma, la desgranulación y la activación del sistema mieloperoxidasa
y la producción del factor de necrosis tumoral. Además, Brucella
produce Cu-Zn superoxido dismutasa, que probablemente participa en
las fases tempranas de la infección intracelular.
▪ Dentro del macrófago, la bacteria debe de enfrentarse a condiciones
adversas como el pH, falta de nutrientes y presencia de intermediarios
reactivos del oxígeno. Brucella debe resistir estas condiciones de estrés,
para poder establecerse en el retículo endoplásmico
Infección de macrófago
Continúa
▪ La supervivencia de Brucella dentro del macrófago, se ha
asociado con la síntesis de enzimas antioxidantes (KatE y SodC)
y proteínas de variados pesos moleculares: 17, 24, 28, 60 y 62
kDa.
▪ La mayoría de los casos de brucelosis humana, están
relacionados al consumo de leche, queso fresco, crema y otros
derivados sin pasteurizar. El periodo de incubación suele ser
variable, en general, de 2 a 3 semanas, aunque puede
prolongarse hasta algunos meses. éste depende de: la virulencia
de la cepa de Brucella, la dosis y del estado nutricional e inmune
del individuo.
▪ Capacidad de vivir dentro de las células.
	Diapositiva 1: Cocos y Bacilos Gram negativos aerobios: Familia Brucellaceae
	Diapositiva 2: Género Brucella.- Clasificación
	Diapositiva 3: Género: Brucella
	Diapositiva 4: Transmisión de Brucella
	Diapositiva 5
	Diapositiva 6
	Diapositiva 7
	Diapositiva 8: Continúa
	Diapositiva 9: Estructura y composición química 
	Diapositiva 10: Pared celular de Brucella
	Diapositiva 11: Continúa
	Diapositiva 12: Continúa
	Diapositiva 13: Continúa
	Diapositiva 14: Estructura antigénica
	Diapositiva 15
	Diapositiva 16: MEDIOS DE CULTIVO Y CONDICIONES PARTICULARES DE CULTIVO 
	Diapositiva 17: Factores de Patogenicidad
	Diapositiva 18: Continúa
	Diapositiva 19: Continúa
	Diapositiva 20: Infección de macrófago
	Diapositiva 21: Continúa