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Metabolismo bacteriano Nutrición • Nutrientes. Sustancias químicas del ambiente utilizadas por las bacterias en el catabolismo y anabolismo. Ele- mento Fuente Función en el metabolismo Zn Zn2+ Componente de las enzimas alcóholica deshidrogenasas, fosfatasa alcalina, aldolasa, ARN y ADN polimerasa. Mn Mn2+ Presente en superóxido dismutasa; cofactor de las enzimas PEP carboxicinasa, isocitrato sintetasa. Mo MoO4 2- Presente en nitrato reductasa, nitrogenasa, xantina deshidrogenasa y formato deshidrogenasa. Se SeO3 2- Componente de la glicina reductasa y formato deshidrogenasa. Co Co2+ Elemento necesario en las enzimas que contienen coenzima B12 (glutamato mutasa, metilmalonil-CoA mutasa). Cu Cu2+ Presente en citocromo oxidasa y nitrito reductasa. Ni Ni2+ Presente en ureasa, hidrogenasa y factor F430 Micronutrientes Ele- mento Fuente Función en el metabolismo C O H N Compuestos orgánicos (glucosa), CO2 O2, H2O, compuestos orgánicos H2, H2O, compuestos orgánicos NH3, NH4 +, NO3 -, N2, compuestos orgánicos Componentes principales del material celular. S SO4 2-, HS-, S, compuestos de azufre orgánico Constituyentes de los aminoácidos con azufre cisteína, metionina, pirofosfato de tiamina, coenzima A, biotina y ácido alfa-lipoico. P PO4 3- Constituyentes de los ácidos nucleicos, fosfolípidos, nucleótidos. K K+ Principal catión inorgánico, cofactor (p. ej., piruvato cinasa) Mg Mg2+ Cofactor de muchas enzimas (p. ej., cinasas); componente de paredes celulares, membranas, ribosomas y ésteres de fosfato. Ca Ca2+ Componente de exoenzimas (amilasas, proteasas) y paredes celulares; componente principal de las endosporas como Ca-dipicolinato. Fe* Fe2+, Fe3+ Presente en citocromos, ferredoxinas y otras proteínas con hierro-azufre; cofactor (deshidratasas). Na Na+ Transporte de iones. Cl Cl- Importante anión inorgánico. Macronutrientes Metabolismo Celular • Algunos nutrientes sirven para generar energía en las vías catabólicas. • Otros nutrientes son incorporados directamente en las reacciones de biosíntesis. Reacciones catabólicas • Los nutrientes son transformados en metabolitos precursores, ATP y Fuerza Reductora en forma de NADH, (nicotinamidaadenindinucleotido) y • NADPH Vías catabólicas de óxido-reducción • Glucólisis • Derivación de la pentosa-fosfato (vía del 6-fosfo-gluconato). • Ciclo de Krebs (ciclo de los ácidos tricarboxílicos). Generación de una fuerza motriz protónica • En 1961 Peter Mitchell, un bioquímico escocés, siguió una línea de razonamiento: si las cadenas de transporte de electrones están embebidas en las membranas, la síntesis de ATP sólo podrá tener lugar cuando las membranas plasmáticas están intactas. Si esto era cierto, quizás el transporte de electrones podría establecer un gradiente de concentración de protones a través de la membrana, y el mismo conducir los protones de vuelta al interior de la célula; la entrada de protones podría tener lugar a través del canal de la ATPasa y esto convertiría el ADP en ATP. • Los científicos fueron reticentes a aceptar la propuesta radical de Mitchell (que él llamó quimiósmosis), pero incluso el más escéptico se convenció cuando una simple membrana vacía, pero intacta, fue capaz de convertir el ADP en ATP en un medio ácido (el medio ácido establecía un gradiente artificial de protones a través de la membrana). Mitchell fue galardonado en 1978 con el Premio Nobel por su gran descubrimiento. Quimiósmosis La quimiósmosis es un proceso de formación de ATP en dos etapas: • (1) generación de un gradiente de protones. • (2) utilización del mismo para sintetizar ATP. M em b ran a p lasm ática Algunos aceptores finales de las cadenas de transporte de electrones de las bacterias Tipo de respiración Aceptor final de electrones Producto reducido Respiración aeróbica Oxígeno (O2) Agua (H2O) Respiración anaeróbica Reducción de sulfato Reducción de nitrato Reducción de fumarato Desnitrificación Reducción del óxido de N-trimetilamina Sulfato (SO4 2-) Nitrato (NO3 -) Fumarato (HOOC – CH = CH – COOH) Nitrato (NO3 -) Óxido de N-trimetilamina Sulfuro de hidrógeno (H2S) Nitrito (NO2 -) Succinato (HOOC – CH2 – CH2 – COOH) Gas nitrógeno (N2) Trimetilamina Derivados Tóxicos del Oxígeno. Enzimas que convierten los compuestos tóxicos a formas no tóxicas. • FPH2 + O2 → FP + H2O2 (flavoproteínas) catalasa • 2H2O2 2H2O + O2 peroxidasa • NADH + H+ + H2O2 NAD + + 2H2O superóxido dismutasa • O2 - + O2 - + 2H+ H2O2 + O2 TIPOS DE FERMENTACIÓN CH3CH2COOH Ácido propiónico CO2 HOOCCH2CH2COOH Ácido succínico +2[H] +2[H] HOOCCCH2COOH || O Ácido oxalacético CH3CHO Acetaldehído +2[H] CH3CHOH Etanol CH3COOH Ácido acético CH3CH2OH Etanol CH3CCH2COOH || O Ácido acetoacético +n[H] Ácido butírico Butanol Acetona Isopropanol CH3-C-CH-CH3 || | O OH Acetoína ( acetilmetil-carbinol) +2[H] CH3CHCHCH3 | | OH OH Butanediol (2,3-butilenglicol) CH3CHCOOH || O Ácido pirúvico +2[H] HCOOH CH3CHCOOH | OH Ácido láctico 1CO2 2 CO2 6 ADP ATP -2[H] ½ Hexosa C3 – (P) 4 HCOOH Ácido fórmico + O || CH3CS(CoA) Acetil-CoA (CoA)SH +CO 2 3 +4[H] 5 H2+CO2 (pH bajo) < 6 1. láctica (Streptococcus. Lactobacillus); 2. alcohólica (la mayoría de las levaduras, pero tan sólo algunas bacterias); 3. ácida mixta (la mayoría de las enterobacteriáceas); 4. butilenglucólica (Enterobacter); 5. butírica (Clostridium), 6. propiónica (Propionibacterium). División celular por fisión binaria Replicación cromosómica Factores ambientales que influyen en el crecimiento de las bacterias • Temperatura Mesófilas Temperatura óptima entre 25 y 45ºC • Requerimiento de oxígeno (O2) Aerobias obligadas Requieren O2 para generar energía. Respiración aeróbica. Micrococcus Anaerobias obligadas No pueden multiplicarse en presencia de O2, por sus derivados tóxicos. Fermentación, respiración anaeróbica. Bacteroides. Anaerobias facultativas Crecen mejor en presencia de O2, también en su ausencia. E. coli. Respiración aeróbica, fermentación o respiración anaeróbica. Microaerófilas Requieren pequeñas cantidades de O2 (2 a 10%). Helicobacter pylori. Respiración aeróbica. Anaerobia aerotolerantes Son indiferentes al O2: S.pyogenes. Fermentación. Neutro Crecen, se multiplican a pH cerca de lo neutral 7,0 Ácido Crecen, se multiplican a pH menor de 5,5 Alcalino Crecen, se multiplican a pH arriba de 8,5 • pH Biosíntesis • Etapa donde los intermediarios precursores se transforman en las subunidades básicas de las macromoléculas (p. ej., Aminoácidos para formar determinada proteína). • Ensamblaje de las macromoléculas para formar las estructuras celulares mediante reacciones catalizadas por enzimas (p. ej., PBPs, proteínas de unión a las penicilinas). • Reacciones que utilizan energía ATP. Curva de crecimiento Fases de la curva de desarrollo bacteriano en medio líquido. Cultivo de Bacterias en el Laboratorio Diapositiva 1: Metabolismo bacteriano Diapositiva 2: Nutrición Diapositiva 3 Diapositiva 4: Metabolismo Celular Diapositiva 5 Diapositiva 6: Reacciones catabólicas Diapositiva 7: Generación de una fuerza motriz protónica Diapositiva 8: Quimiósmosis Diapositiva 9: Algunos aceptores finales de las cadenas de transporte de electrones de las bacterias Diapositiva 10: Derivados Tóxicos del Oxígeno. Enzimas que convierten los compuestos tóxicos a formas no tóxicas. Diapositiva 11 Diapositiva 12: División celular por fisión binaria Replicación cromosómica Diapositiva 13: Factores ambientales que influyen en el crecimiento de las bacterias Diapositiva 14 Diapositiva 15: Curva de crecimiento Diapositiva 16: Cultivo de Bacterias en el Laboratorio
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