Biologia de los microorganismos-1068 (77)

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28 L O S F U N D A M E N T O S D E L A M I C R O B I O L O G Í A
Históricamente, los mayores avances de la microbiologíahan coincidido con el desarrollo de nuevas herramientas 
y mejora de las tradicionales existentes para el estudio de los 
microorganismos. El microscopio es el instrumento más anti-
guo y más básico para el estudio de las estructuras microbianas. 
Existen muchos tipos de microscopios, y algunos de ellos son 
extremadamente potentes. Por tanto, como preludio de nuestro 
estudio de las estructuras celulares revisaremos algunas de las 
herramientas habituales para visualizar las células con el fin de 
entender cómo funcionan y qué pueden enseñarnos.
2.1 El descubrimiento de la estructura 
celular: el microscopio óptico
Para ver microorganismos se necesita un microscopio, ya sea 
óptico o electrónico. En general, los microscopios ópticos se 
usan para examinar células a relativamente pocos aumentos, y 
los electrónicos para examinar células y estructuras celulares a 
muchos aumentos.
Todos los microscopios utilizan lentes que amplifican la ima-
gen. No obstante, el aumento no es el factor limitante en nues-
tra capacidad para ver objetos pequeños; es la resolución —la 
capacidad para identificar dos objetos adyacentes como dis-
tintos e independientes— lo que regula nuestra habilidad para 
ver lo muy pequeño. Si bien los aumentos se pueden aumentar 
prácticamente sin límite, con la resolución no ocurre lo mismo, 
ya que es una función de las propiedades f ísicas de la luz.
Para empezar estudiaremos el microscopio óptico, cuyo 
límite de resolución es, aproximadamente, de 0,2 μm (μm es 
la abreviatura de micrómetro, 10−6 m). A continuación segui-
remos con el microscopio electrónico, cuya resolución es con-
siderablemente mayor.
El microscopio óptico compuesto
El microscopio óptico utiliza la luz visible para iluminar las 
estructuras celulares. En microbiología se usan distintos tipos 
de microscopios ópticos: de campo claro, contraste de fases, con-
traste por interferencia diferencial, campo oscuro y fluorescencia.
Con el microscopio de campo claro, las muestras se visuali-
zan por las pequeñas diferencias de contraste que existen entre 
ellas y el medio que las rodea, y estas diferencias son debidas a 
que las células absorben o dispersan la luz en distinto grado. El 
microscopio óptico compuesto moderno consta de dos lentes, 
objetivo y ocular, que actúan combinadas para formar la ima-
gen. La fuente de luz se enfoca sobre la muestra mediante el 
condensador (Figura 2.1). Normalmente las células bacterianas 
son dif íciles de observar con el microscopio de campo claro, 
porque no tienen un contraste significativo con el medio cir-
cundante. Al observarlas con un tipo de microscopio óptico lla-
mado de contraste de fases (Sección 2.2; véase la Figura 2.1), se 
evita el problema. Los microorganismos pigmentados son una 
excepción, porque el propio color del organismo añade con-
traste, lo que lo hace más fácil de visualizar mediante la óptica 
de campo claro (Figura 2.2).
I Microscopía
Figura 2.1 Microscopio. (a) Microscopio óptico compuesto (la inserción es una micrografía de células sin teñir tomada a través de un microscopio óptico de
contraste de fases). (b) Trayectoria de la luz a través de un microscopio óptico compuesto. Además de la lente de 10 aumentos, existen lentes oculares de 15-30 
aumentos. En la Figura 2.5 se comparan células visualizadas con las técnicas de campo claro y contraste de fases.
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