MICROBIOLOGIA DE LAS LESIONES PULPARES

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MICROBIOLOGIA DE LAS LESIONES PULPARES 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
CAMILO ANDRES CORREDOR BUSTAMANTE 
ALBEIRO FERNANDO TORRES ABRIL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA 
FACULTAD DE CIENCAS 
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL 
MICROBIOLOGIA AGRICOLA Y VETERINARIA 
Bogotá D.C. 16 de febrero de 2009 
 
 
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MICROBIOLOGIA DE LAS LESIONES PULPARES 
 
 
 
 
 
 
 
 
CAMILO ANDRES CORREDOR BUSTAMANTE 
ALBEIRO FERNANDO TORRES ABRIL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Trabajo de grado 
Presentado como requisito parcial 
Para optar al título de 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
MICROBIOLOGO AGRICOLA Y VETERINARIO. 
MICROBIOLOGO INDUSTRIAL. 
 
 
 
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NOTA DE ADVERTENCIA: 
Artículo 23 de la resolución No.13 julio de 1946. 
“la universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus 
alumnos en sus trabajos de tesis. Solo velará por que no se publique nada 
contrario al dogma y a la moral católica y por que las tesis no tengas ataques 
personales contra persona alguna, antes bien se vea en ellos el anhelo de 
buscar la verdad y la justicia”. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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MICROBIOLOGIA DE LAS LESIONES PULPARES 
 
 
 
 
 
 
 
CAMILO ANDRES CORREDOR BUSTAMANTE 
ALBEIRO FERNANDO TORRES ABRIL 
 
 
 
 
 
 
 
APROBADO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
_ 
 
________________________ 
Dra. Margarita Chaves Clavijo 
Bacterióloga MSc 
Directora. 
 
 
 
______________________ ______________________ 
Dr. Fredy Gamboa Dra. Mery Santaella 
Bacteriólogo Ph. D. Bacteriòloga 
Jurado. Jurado. 
 
 
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MICROBIOLOGIA DE LAS LESIONES PULPARES 
 
 
 
 
 
 
 
CAMILO ANDRES CORREDOR BUSTAMANTE 
ALBEIRO FERNANDO TORRES ABRIL 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
APROBADO 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
__________________________ ______________________ 
 Ingrid Schuler. Janeth Arias 
 Bióloga Ph. D. Bacterióloga M.Sc=M. Ed 
 Decana Académica. Directora de carrera 
 
 
 
 
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AGRADECIMIENTOS 
 
 
Especialmente a nuestros padres, hermanas y amigos que apoyaron nuestro 
trabajo a través de nuestra carrera. 
 
A la Dra. Margarita Chaves Clavijo por su paciencia, dedicación y apoyo por 
todo el largo proceso de finalización de nuestra carrera y por hacernos 
excelentes personas y alcanzar la meta de ser excelentes profesionales. 
 
 
 
 
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����. Principales géneros y especies de microbiota oral………37�
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������!. Microorganismos referentes en el estudio bibliográfico……… 100 
 
������"��Tipos de Medios de Cultivo………………………………………. 101 
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�������#. Tecnica Reaccion en Cadena de Polimerasa (PCR)………..112 
 
 
 
 
 
 
 
 
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La pulpa es un tejido blando de origen mesenquimatoso con células 
especializadas, los odontoblastos, que se colocan periféricamente en 
contacto directo con la matriz dentinal. La íntima relación entre los 
odontoblastos y la dentina es una de las razones por la que la dentina y la 
pulpa deben considerarse como una entidad funcional, a vecesdenominada 
complejo dentino pulpar. (Cohen, 2006). 
La pulpa constituye un sistema microcirculatorio cuyos componentes 
vasculares más grandes son las arteriolas y las vénulas. Ninguna arteria o 
vénula sale o entra de la pulpa. El tejido pulpar está protegido en su parte 
externa por el esmalte y la dentina y la dentina a nivel coronal, a nivel 
radicular por la dentina y cemento. Cuando algún agente externo genera una 
lesión a estos tejidos puede comprometer la integridad de la pulpa y 
ocasionar cambios inflamatorios o degenerativos a nivel de este tejido que 
puede variar en magnitud y severidad (Rodríguez ����� 2008) 
Según Bascones ����� (1995) y Brau ������
 (1995) la caries dental es la razón 
fundamental por la que la pulpa se ve afectada por procesos infecciosos, 
aunque también se pueden producir colonizaciones bacterianas a través de 
los márgenes de obturación o por fracturas dentarias, así mismo, los 
procesos periodontales pueden ser el camino por el que lleguen bacterias a 
la pulpa. Otras causas que motivan una afectación pulpar pueden ser 
iatrogénicas, y en concreto la manipulación dental con instrumental rotatorio 
sin la adecuada refrigeración o la aplicación de fármacos cavitarios o 
materiales de restauración, que son procedimientos que, por la frecuencia de 
su empleo, se encuentran entre las causas más frecuentas de patología 
pulpar. 
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La pulpitis hace referencia a un estado inflamatorio de la pulpa que puede ser 
agudo o crónico y en distintas formas evolutivas según criterios clínicos o 
histopatológicos (Regezi �����, 2000) 
La gran variedad anatómica y tisular existente en la cavidad oral, entre otros 
factores, hace posible la convivencia de diferentes ecosistemas microbianos, 
cada uno con características metabólicas y nutricionales específicas y todos 
ellos conviviendo dentro de un delicado equilibrio ecológico (Gutiérrez, et al 
2004) 
Ahora bien como comenta Rodríguez ��� ��, (2008) ante el hallazgo de 
muerte pulpar y posterior daño a tejidos del periápice se cuestiona el origen 
de estos mismos a partir de factores iatrogénicos bacterianos o químicos, por 
tanto ellos determinaron cuales son los microorganismos que se hallan en 
estos dientes y pudiendo establecer su procedencia. Por esto mismo es de 
vital importancia y de conocimiento, saber que son propios de la enfermedad 
pulpar microorganismos que se ven vinculados en la etiología tales como: 
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����� y muchos otros. 
La naturaleza polimicrobiana de las infecciones en la cavidad oral, permite 
que se produzcan fenómenos de simbiosis y de sinergia bacteriana. Hasta el 
inicio de la pulpitis, las bacterias implicadas serán principalmente aerobias; 
sin embargo su proliferación originará condiciones de anaerobiosis y la 
necrosis vasculonerviosa pulpar, creándose así condiciones favorables para 
el crecimiento de bacterias anaerobias facultativas y, posteriormente, de 
anaerobias estrictas principales responsables de los procesos infecciosos 
(Gutiérrez, ����� 2004). 
El número de bacterias que colonizan la pulpa o el periápice es directamente 
proporcional a la magnitud de la puerta de entrada de las mismas. Cuanto 
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más importante sea la invasión bacteriana, en poco intervalo de tiempo, 
mayor será la respuesta inflamatoria reactiva. Sin embargo, más que el 
número, tiene mayor relevancia la capacidad que tengan las bacterias de 
multiplicarse (Canalda=Brau, 2006); Por tanto las bacterias pueden utilizar 
diversas puertas de entrada hacia la cavidad pulpar. En función de su 
magnitud y proximidad, la patología se instaura rápidamente o de forma 
prolongada. 
 
Así desde que se demostró que la invasión microbiana de la pulpa casi 
siempre cursaba con una respuesta inflamatoria pulpar, se han abierto 
numerosas líneas de investigación dirigidas a identificar los ecosistemas 
bacterianos de la cavidad pulpar. 
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Realizar una revisión bibliográfica del tema: “Microbiología en lesiones 
pulpares”, y las metodologías aplicadas para la identificación de estos 
microorganismos relacionados en esta patología. 
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� Revisar las especies de microorganismos más frecuentes en lesiones 
pulpares. 
 
� Describir las características microbiológicas y ecológicas de los 
microorganismos presentes en lesiones pulpares. 
 
� Analizar las técnicas utilizadas en la determinación de la flora 
microbiológica de las lesiones pulpares. 
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La cavidad oral se compone de un conjunto de tejidos, asociados a 
numerosos microorganismos constituyendo ecosistemas, con modificación 
constante. Según la composición de la microbiota y los tejidos se dividen en 
saliva, superficie epitelial del surco crevicular, superficie dental del surco 
crevicular, dorso de la lengua y epitelio bucal. Cuando este sistema ecológico 
esta en equilibrio se denomina eubiosis, y cuando se altera dicho equilibrio 
se conoce como disbiosis, correspondiendo a una boca enferma a partir de la 
cual puedan iniciarse procesos que desencadenen la destrucción del diente y 
o sus tejidos de soporte. (Fraile, 2003). 
 
En la cavidad oral se pueden aislar más de 500 especies de 
microorganismos; la mayoría corresponde a la microbiota transitoria o de 
paso, quedando como microbiota residente o habitual unas 20 especies y 
predominado entre ellas la microbiota Gram positiva, principalmente los 
estreptococos del grupo �������� componiendo el 90% de la microbiota oral. 
El resto de microorganismos presentes se distribuyen entre cocos Gram 
negativos como $��������; bacilos Gram positivos anaerobios ramificados 
como #����
�����!� bacilos Gram positivos como� � %���
��������� y 
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���������; bacilos Gram negativos anaerobios como &�����
����, 
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��������� etc. Aunque en menor proporción, podemos 
encontrar en la cavidad oral normal espiroquetas, comensales y hongos 
como ����������������. (Fraile, 2003). (Tabla 1) 
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La flora bacteriana se instala en la cavidad oral en forma progresiva desde el 
nacimiento. El niño nace con una cavidad oral estéril y la primera 
contaminación se produce en el parto por las bacterias de la flora vaginal. 
Los siguientes microorganismos que colonizan son los que se encuentran en 
el ambiente en estado libre o que se trasmiten al niño por personas más 
cercanas a él. A los tres meses de vida aun se pueden encontrar 
������
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���� en el 95% de la población. Con la erupción de los primeros 
dientes aparecen también nuevos hábitats para la colonización, como el 
esmalte dental y el surco gingival. Esto permite la aparición de nuevas 
bacterias como ���
���������!�#����
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�����. En esta etapa los 
anticuerpos maternos ya han desaparecido del suero del niño y este empieza 
a crear sus propias defensas inmunológicas, constituidas por 
inmunoglobulinas séricas IgA secretadas en la saliva. Cuando se produce la 
erupción de dientes permanentes, el período de recambio se acompaña de 
fenómenos inflamatorios, que permite que se favorezca la colonización de 
bacterias potencialmente patógenas. La conformación de la flora oral 
definitiva se concreta desde la adolescencia, en donde los cambios 
hormonales permiten el crecimiento de la mayoría de &�����
����
� La 
prevalencia de ����
������ ���������� y "���
����� ������
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especialmente elevada, pero la prevalencia de #
������
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������ y 
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���� ����������! se mantienen bajas. La totalidad de factores 
habitacionales del ecosistema oral se establecen completamente en la edadadulta y comprende una amplia diversidad de microorganismos. (Liébana, 
1997). 
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La pulpa dental es el tejido blando localizado en el centro del diente; forma, 
soporta y está rodeado por dentina. En general, se considera a la pulpa como 
un tejido blando laxo especializado. La pulpa dental alberga un gran número 
de elementos titulares, incluido los nervios, el tejido vascular, fibras de tejido 
conectivo, sustancia fundamental, líquido intersticial, los odontoblastos, los 
fibroblastos y otros componentes celulares menores. (Walton, 1996). 
 
La función primaria de la pulpa es formativa, debido a que de ahí surgen los 
odontoblastos que forman la dentina. En el desarrollo temprano del diente, 
los odontoblastos también interactúan con las células del epitelio dental para 
formar esmalte. Después de la formación dental la pulpa proporciona varias 
funciones secundarias relacionadas con la sensibilidad, hidratación y defensa 
del diente. (Walton, 1996). 
 
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Durante toda su vida la pulpa lleva a cabo cinco funciones: 
 
� Inducción: 
La pulpa participa en la inducción y el desarrollo de odontoblastos y dentina, 
que cuando se forman inducen a la formación de esmalte. Estos procesos 
tienen actividades interdependientes, de tal manera que los ameloblastos 
influyen en la diferenciación de odontoblastos, y los odontoblastos y la 
dentina en formación de esmalte. Esta interacción epitelial mesenquimatosa 
es la esencia de la formación dental. (Walton, 1996). 
 
 
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� Formación 
Los odontoblastos forman dentina; estas células altamente especializadas 
participan en la formación de dentina de tres maneras: a) al sintetizar y 
secretar matriz orgánica; 2) al transportar de manera inicial componentes 
inorgánicos a la matriz de nueva formación. 3) al crear un ambiente que 
permita la mineralización de la matriz. Durante el desarrollo temprano del 
diente, la dentogènesis primaria por lo general es un proceso rápido después 
de completar la maduración dental, la formación de dentina continúa de una 
forma mucho más lenta y en un patrón menos simétrico. (Walton, 1996). 
 
� Nutrición 
Por medio de los túbulos dentinarios, la pulpa suministra nutrientes que son 
esenciales para la formación de dentina e hidratación. (Walton, 1996). 
 
� Defensa 
 Los odontoblastos forman dentina en respuesta a la lesión, en particular 
cuando el grosor original de la dentina está afectado por caries, desgaste, 
traumatismo o procedimiento de restauración. Los odontoblastos (o sus 
células de reemplazo) también tienen la capacidad de formar dentina en 
sitios donde se perdió la continuidad (exposición pulpar), por medio de la 
diferenciación de nuevos odontoblastos o células parecidas a los 
odontoblastos en el sitio de exposición. Sin embargo, la cantidad de dentina 
producida en respuesta a la lesión no es la misma que se produce de manera 
fisiológica ni proporciona el mismo grado de protección al tejido pulpar 
subyacente. (Walton, 1996). 
 
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La pulpa también tiene la capacidad de producir una respuesta inflamatoria e 
inmunológica en un intento por neutralizar o eliminar la invasión de la dentina 
por microorganismos causantes de caries y sus productos. (Walton, 1996). 
 
� Sensibilidad 
A través del sistema nervioso la pulpa trasmite las sensaciones mediadas por 
el esmalte o dentina a los centros nerviosos más altos, estos estímulos se 
expresan a nivel clínico como dolor, aunque estudios fisiológicos y 
psicofisiológicos indican que la pulpa también siente temperatura y tacto. 
También trasmite sensaciones de dolor profundo causado por enfermedad, 
principalmente de tipo inflamatorio. (Walton, 1996) 
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La exposición pulpar directa, sea de origen traumático, como la fractura 
coronaria o iatrogénica causada por procedimientos operatorios, rompe la 
barrera física impuesta por las estructuras dentarias, poniendo la pulpa en 
contacto con el ambiente séptico de la cavidad oral (Estrela, 2005) 
 
Debido a la exposición de la pulpa a la flora oral, ésta y su dentina 
circundante 
Pueden dar asilo a las bacterias y a sus productos derivados. Dependiendo 
de la virulencia de las bacterias, la resistencia del huésped, la cantidad de 
flujo sanguíneo y el grado de drenaje, el tejido pulpar puede permanecer 
inflamado durante un largo periodo de tiempo o necrotizarse rápidamente. 
Tras la necrosis pulpar, todo el sistema de canal radicular se infecta con 
distintas especies de bacterias, las cuales pueden extenderse desde este 
sistema hacia el ligamento periodontal a través del foramen apical o de los 
canales laterales. La presencia de bacterias en el sistema del canal radicular 
�
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suele dar a lugar al desarrollo de lesiones perirradiculares y, en ocasiones 
laterales. (Cohen, 1999) 
 
Si la pulpa queda expuesta, como ocurre por ejemplo en la caries esta queda 
expuesta a toda flora oral. Los estreptococos alfa=hemolíticos, los 
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�����. Son los que se encuentran con más 
frecuencia. A medida que aumenta el espesor de la pulpa necrótica, se 
establece un mayor número de especies anaeróbicas obligadas, entre las 
cuales se incluyen los cocos anaeróbicos Gram positivos y los bacilos Gram 
negativos, que son favorecidos por la baja concentración de oxigeno 
existente en las zonas necróticas de la pulpa (Cohen, 2002) 
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Se producen a través de la interface existente entre el material de 
restauración y el diente. Errores en la técnica operatoria, como adaptaciones 
inadecuada en los márgenes de la corona a la línea de terminación del 
tallado, errores en el manejo de los materiales de obturación, o la fatiga o 
alteraciones de los mismos que se produce con el paso del tiempo, pueden 
dar lugar a discrepancias significativas en el material de restauración y la 
estructura dentaria restaurada. (Liébana, 2002). 
 
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La infección de la pulpa dental puede acontecer a consecuencia de procesos 
infecciosos adyacentes, las alteraciones óseas como la osteítis y la 
osteomielitis y la presencia de quistes en áreas apicales en el propio diente 
conducen con frecuencia a la necrosis pulpar. (Liébana, 2002). 
 
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Independientemente de las vías de entrada, una vez que han penetrado en el 
tejido pulpar, las bacterias colonizan, se multiplican y contaminan todo el 
sistema radicular. Dependiendo del nivel de la concentración de oxigeno y de 
la presencia o ausencia de los nutrientes esenciales en el sistema radicular, 
existen grupos específicos de bacterias que sobreviven y forman la flora de 
los canales radiculares infectados.�(Adriaens, 1988) 
 
Las bacterias anaerobias producen ácidos grasos de cadena corta, como el 
ácido propiónico, butírico e isobutírico. Estos son factores de virulencia que 
afectan la quimiotaxis de los neutrófilos y la fagocitosis. Estas bacterias 
están en un estado dinámico influido por la interacción entre las bacterias y el 
hospedero. Aunque esta microbiota es menos compleja que la microbiota 
subgingival, se produce una serie de relaciones ecológicas interbacterianas. 
(Walton, 1996). 
 
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El acceso de microorganismos a la estructura pulpar se puede dar 
básicamente por el acceso vía túbulos dentinarios y a través de vías 
periodontal y hematógenas. 
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�������//'-*�6'3��+('�(;
��*-�3'+(�+���*-�
 
Como consecuencia de la pérdida del esmalte o del cemento, los túbulos 
dentinales están expuestos a las bacterias presentes en la cavidad oral. Los 
túbulos dentinales se extienden desde la pulpa hasta las uniones esmalte 
dentina y cemento dentina. Debido al tamaño y el número de túbulos en la 
dentina, los microorganismos pueden penetrar, multiplicarse e invadir los 
�
�
numerosostúbulos expuestos. La lentitud de la invasión de la dentina viable 
por las bacterias pueden deberse a la presencia de factores de resistencia 
naturales en la dentina y tejido pulpar. (Liébana, 2002). 
 
Hoshino ��
�� (1992) utilizaron procedimientos anaeróbicos para comprobar la 
rápida invasión bacteriana de las pulpas dentales no expuestas, las cuales se 
cubrían con dentina clínicamente sana por debajo de las lesiones producidas 
por caries. Seis de cada nueve dientes sufrían invasión bacteriana, siendo 
los organismos predominantes los anaerobios obligados. 
 
La presencia de bacterias, de sus productos derivados y de otros irritantes en 
los túbulos dentinales suelen generar respuestas inflamatorias en el tejido 
pulpar. La inflamación de la pulpa también puede producirse cuando los 
túbulos dentinales transportan sustancias irritantes desde las caries 
incipientes a la pulpa o cuando los túbulos contienen y permiten el paso de 
los microorganismos existentes bajo los materiales dentales de restauración 
o cerca de las bolsas periodontales. (Cohen, 2006). 
 
La eliminación del cemento durante el tratamiento periodontal puede exponer 
numerosos túbulos dentinales a la flora oral, lo que en ocasiones permite que 
los microorganismos penetren el tejido pulpar. La producción de un barrillo 
dentinario durante la manipulación de la raíz, así como los iones de calcio y 
fósforo de la saliva, pueden retardar la invasión de los túbulos dentinales por 
los microorganismos orales. (Cohen, 2006). 
 
Sen ��� ��
 (1995) definen el barrillo dentinario como una capa de material 
amorfo, irregular y granular, compuesta por dentina, restos de tejido pulpar y 
procesos odontoblásticos y, en ocasiones, por bacterias. Cuando los canales 
�
�
radiculares se instrumentan durante el tratamiento endodóntico, siempre se 
forma esa capa en las paredes del canal. 
 
La mayoría de autores opinan que las bacterias productoras de ácido 
invaden los túbulos y desmineralizan las paredes. Las especies proteolíticas, 
que actúan sobre la matriz orgánica, la cual es denudada en los túbulos 
dentinales ensanchados, los ácidos, metabolitos y productos tóxicos se 
difunden más rápidamente que las bacterias, con lo cual los odontoblastos 
resultan afectados y, posiblemente, destruidos. Si las bacterias pueden ser 
eliminadas en su avance, es posible conseguir la curación. La caries dental 
es la causa más común de las lesiones pulpares, y muchas reacciones de la 
pulpa pueden ser infecciones prolongadas de los túbulos dentinales, que se 
originan desde el fondo de la cavidad y las paredes como consecuencia de la 
filtración de materiales de relleno. Si no se tratan, las bacterias acaban por 
afectar el tejido pulpar y dan lugar a la inflamación. El número de bacterias 
aumenta, los leucocitos neutrófilos polimorfonucleares se infiltran y se forma 
un absceso, provocando la muerte del tejido pulpar. (Cohen, 2006) 
 
A partir de la expansión de la lesión cariosa en sentido centrípeto o durante 
intervenciones odontológicas, los microorganismos pueden utilizar esta vía 
para llegar a la pulpa; es la vía más comúnmente utilizada, siendo la lesión 
de caries la fuente más frecuente de infección (Estrela, 2005) además 
Dahlen=Moller (1991) y Siqueira (1997) a partir de sus estudios llegaron a la 
conclusión que esa invasión solamente ocurre cuando el grosor de la 
dentina alcance como máximo 0.2 mm entre los limites cariosos y pulpar, y 
que es garantizada gradualmente por el proceso de división celular, 
favorecida, a veces, por el efecto mecánico de la masticación. 
 
 
�
�
�������//'-*�%0��7'��*3*+(����
 
Muchas veces tenemos una injuria y/o compromiso pulpar en dientes con 
ausencia de caries (coronas íntegras) y con presencia de restauraciones. Las 
piezas dentarias comprometidas periodontalmente, suelen sufrir una invasión 
microbiana proveniente de microorganismos presentes en las bolsas 
periodontales y que tiene acceso a la pulpa mediante los conductos laterales, 
conductos accesorios y a través del delta apical, (De Lorenzo 2004., Liébana, 
1997). 
 
Existen múltiples anastomosis entre vasos sanguíneos y linfáticos de la pulpa 
y del periodonto, lo que facilita el pasaje de los microorganismos.� (Liébana 
1997). 
 
Adriaens �����
 (1988) examinaron la presencia de bacterias en la dentina de 
dientes con complicaciones periodontales y las comparó con la dentina de 
dientes sanos, encontrando más microorganismos en la dentina y pulpa de 
los dientes con compromiso periodontal. La eliminación del cemento durante 
un tratamiento periodontal puede exponer numerosos túmulos dentinarios a 
la flora oral, permitiendo que los microorganismos penetren hasta la pulpa. 
 
Estrela ��� ��
 (2005) y a partir de estudios realizados por Dahlen=Moller 
(1991) comentan que esa vía puede ser facilitada a los microorganismos, 
por ejemplo, durante la realización de una profilaxis dentaria, y a 
consecuencia de una luxación y, más significativamente, a partir de la 
migración de la inserción epitelial durante el establecimiento de una bolsa 
periodontal. En relación con esa vía, es pertinente considerar que la 
capacidad de locomoción de ciertos microorganismos periodontopatógenos, 
�
�
como (
�������� �� �����
�
���, les garantiza las condiciones ecológicas 
para llegar hasta la pulpa y eventualmente colonizarlas. 
 
Existe una relación causa=efecto entre la infección del canal radicular, 
lesiones perirradiculares o laterales y la penetración de las bacterias en la 
dirección opuesta (hacia la pulpa). Teóricamente, los canales laterales 
limpios y el foramen apical adyacente a las bolsas periodontales deberían 
proporcionar el acceso a los microorganismos orales al sistema del canal 
radicular. Cuando se infecta la pulpa a través del foramen apical, un requisito 
previo parece ser siempre la existencia de un mal estado de la pulpa para 
que se produzca la infección. Grossman (1967) aplico ��������������������
sobre la encía labial de dientes de perros y monos, y los traumatizo con una 
pesa metálica. Al encontrar este microorganismo en el tejido pulpar, llego a la 
conclusión de que el ligamento periodontal proporcionaba una vía para el 
paso de estos organismos hacia el tejido pulpar. (Cohen, 1999) 
�
������%0��<'6�(5�'+��
 
La infección vía hematógena es rara. Esta vía de infección está dada por el 
fenómeno de la anacoresis, que se define como la atracción positiva de los 
microorganismos presentes en la circulación sanguínea hacia los tejidos 
inflamados o necróticos durante una bacteremia. Se considera así pues, que 
para que se dé una instalación de bacterias circulantes en el torrente 
sanguíneo, generalmente se requiere una inflamación o necrosis previa de la 
pulpa. La detección de microorganismos que no pertenecen a la microbiota 
normal de la cavidad oral, nos sugiere una infección por esta vía. Otra 
manera de que la pulpa se infecte es la presencia de un foco infeccioso 
adyacente.�(Adriaens, 1988) 
 
�
�
Cuando la pulpa se infecta a través de cualquiera de los mecanismos 
explicados, el mal estado de ésta es prerrequisito para que se produzca 
dicha infección. Cuando tienen lugar infecciones retrógradas, generalmente 
están involucradas pocas especies bacterianas��(Liébana, 2002).�
 
En los casos de necrosis asépticas (que se puede producir por la supresión 
de la irrigación sanguínea) motivada por un traumatismo, el tejido necrótico 
se mantendrá libre de bacterias hasta su posterior infección, la cual se puede 
dar por cualquiera de las vías antes ya expuestas.�(Adriaens, 1988) 
�
������7�.'��3'��*-�6�/�**���+�-6*-�'+����.�(*�*�0��.��.��� 
Ha sido reconocido ampliamente que los microorganismos juegan un papel 
fundamental en el desarrollo y mantenimiento de las patologías pulpares y 
periapicales. Normalmente la pulpa dental es un tejido estéril y está 
principalmente involucradaen la producción de dentina y en la sensibilidad 
del diente. (Kettering J, 1999). 
Cualquier lesión de la pulpa puede desencadenar una respuesta inflamatoria 
de la misma. Si bien los irritantes pueden ser de naturaleza física, térmica o 
química, los microorganismos son considerados el principal agente 
etiológico. Las patologías pulpares y periapicales suelen ser un resultado 
directo o indirecto de la presencia de bacterias y otros microorganismos en el 
medio bucal. (Dahlen �����
 2000). 
 Dado que los microorganismos desempeñan un papel primordial en la 
patogénesis de las lesiones pulpares y perirradiculares es preciso manejar 
los fundamentos de la microbiología endodóntica para entender el papel que 
desempeñan en estas afecciones, las vías de difusión de la infección pulpar y 
�
�
periapical, las respuestas de los tejidos ante estos agresores y los métodos 
utilizados para controlar y erradicar las infecciones del sistema de conductos 
radiculares. (Love �����. 2002). 
La pulpa y la dentina forman un complejo funcional el cual es protegido tanto 
por sustancias exógenas de la cavidad bucal como por estructuras dentarias 
(el esmalte y el cemento). Cuando el complejo dentino=pulpar es infectado, 
los tejidos reaccionan en contra de los microorganismos invasores a fin de 
erradicarlos. La capacidad de este complejo de realizar esta función no ha 
sido subestimada, ya que los tejidos están dotados con procesos 
inmunocompetentes. Sin embargo, en términos clínicos, si la infección no es 
erradicada a través de esos procesos naturales o procedimientos 
operatorios, los microorganismos invaden el complejo dentino=pulpar 
venciendo las defensas y causando la enfermedad pulpar, e infectando la 
cámara pulpar y el sistema de conductos radiculares. (Love������. 2002). 
El sistema de conductos radiculares está en abierta comunicación con los 
tejidos periapicales (ligamento periodontal, cemento y hueso alveolar) por las 
vías del foramen apical, conductos laterales y accesorios. Los metabolitos y 
productos tóxicos son producidos principalmente por las bacterias presentes 
dentro del sistema de conductos radiculares y se difunden a los tejidos 
periapicales desencadenando la respuesta inflamatoria (periodontitis apical), 
la cual se caracteriza por resorción del hueso alveolar. La enfermedad 
periapical inducida por microorganismos por lo general comienza como una 
inflamación de tipo crónico y se manifiesta histopatológicamente como un 
granuloma. (Love �����
 2002). 
La invasión de los túbulos dentinarios por microorganismos ocurre cuando la 
dentina está expuesta al medio bucal. Esto puede ocasionarse por lesiones 
�
�
de caries, procedimientos restauradores o periodontales, fisuras de esmalte o 
dentina, o traumatismo dental. (Peters ��� ��. 1995). El avance de las 
bacterias del proceso carioso traerá como consecuencia la infección de la 
pulpa dental y del sistema de conductos radiculares y el consecuente 
desarrollo de lesión perirradicular. Sin embargo, las bacterias asociadas a la 
caries dental difieren de las asociadas a la infección pulpar. (Love �����. 2002) 
������
�2����������=������
 
El medio endodóntico es un sistema complejo y dinámico. Complejo, púes 
tenemos el conducto radicular, con sus características particulares en cuanto 
a forma y a distribución (conductos amplios, atrésicos, curvos, rectos, 
bifurcados, conductos accesorios, conductos laterales, deltas apicales) 
conforman una red amplia de “microambientes” de difícil acceso y que 
favorecen (por contener tejido necrótico como fuente de nutrientes) el 
crecimiento de microorganismos. Dinámico, pues los microorganismos 
implicados en una lesión inicial de la pulpa no serán los mismos que se 
encuentren en una necrosis pulpar, en la que se forma un ecosistema 
radicalmente diferente. En este medio ambiente particular, que es el 
endodóntico, cobra importancia el concepto de sucesión microbiana 
(Liébana, 1997). 
 
La sucesión microbiana es el proceso mediante el cual se produce una 
variación o un cambio de microorganismos condicionado por alteraciones en 
el hábitat. Es lógico, por tanto, esperar un cambio en cuanto a la composición 
de la flora bacteriana, pues se produce una alteración radical del medio 
ambiente endodóntico. De pulpas recientemente infectadas, son aisladas 
mayores proporciones de bacterias Gram positivas, anaerobias facultativas y 
sacarolíticas, tales como %���
�����������#����
���������. (Liébana, 1997). 
�
�
Con la evolución del proceso infeccioso, estas bacterias van consumiendo 
gradualmente el oxígeno presente en el medio y las condiciones en el interior 
del conducto se van paulatinamente alterando, favoreciendo el desarrollo de 
bacterias anaerobios estrictos, siendo la mayoría de éstas Gram negativas y 
proteolíticas. (De Lorenzo 2004, Kawashima, 1996). 
 
La particularidad de estas bacterias, tales como: ����
�����! �
�����
�
����
�� ���
���������, es su ubicación inicial en el periápice, región de la cual 
pueden obtener fácilmente el exudado rico en contenido proteico y en donde 
las condiciones de anaerobiosis son las más propicias. Con el desarrollo de 
la necrosis, éste exudado pasa a todo el canal, aportando el contenido 
proteico y permitiendo el predominio de estas bacterias a lo largo de todo el 
sistema endodóntico. (De Lorenzo 2004, Kawashima, 1996). Toda infección 
endodóntica es de carácter polimicrobiana.�(Brook �����. 1996). 
 
Los anaerobios no son encontrados en cultivos puros porque su naturaleza 
sinérgica requiere de nutrientes específicos para su crecimiento, los mismos 
que son aportados por otro tipo de microorganismos. (Sundqvist, 1992). 
�
�
�
�
�
�
����>����2�������7�������7��=�����������������
Para que un microorganismo logre su objetivo deben darse ciertos 
requerimientos: 
� Los microorganismos deben estar presentes en cantidades 
suficientes para iniciar y mantener una lesión periapical 
� Poseer factores de patogenicidad, que puedan expresarse durante el 
proceso infeccioso 
�
�
� Deben localizarse espacialmente en el canal radicular para que sus 
factores de patogenicidad alcancen los tejidos periapicales 
� El canal radicular debe permitir la supervivencia y crecimiento de los 
microorganismos. 
� Las relaciones antagónicas entre los microorganismos no deben 
darse o presentarse en baja proporción. 
� El huésped debe defenderse, inhibiendo la diseminación de la 
infección, éste proceso puede resultar en daño del tejido periapical. 
(Siqueira �����. 2002). 
Los microorganismos que componen la microflora oral, coexisten en 
ecosistemas primarios que están regulados por una serie de factores 
conocidos como determinantes ecológicos que son de cinco tipos: (Liébana, 
1997). 
� Fisicoquímicos 
� De adhesión, agregación y coagregación 
� Nutricionales 
� Protectores del huésped 
� Antagónicos interbacterianos 
���������-�/*4�06�/*-,�
a) Humedad 
Las bacterias dependen de ella para el intercambio de nutrientes, para las 
reacciones metabólicas y para la eliminación de productos inhibidores de 
desecho. (Liébana, 1997). 
 
�
�
b) pH 
En la cavidad oral en condiciones normales oscila entre 6.7 y 7.5, pero 
constantemente esta sometido a variaciones que afectan el metabolismo 
bacteriano. (Liébana, 1997). 
c) Temperatura 
La temperatura oral está próxima a los 37º C pero tiende a variar 
transitoriamente por la ingesta de alimentos calientes o fríos por lo que se 
eliminan microorganismos de forma transitoria. (Liébana 1997). 
 
d) Potencial de óxido=reducción 
El hábitat de los gérmenes anaerobios tiene una baja tensión de oxígeno y 
un potencial de óxido reducción disminuido, resultado de la actividad 
metabólica de los microorganismos que consumen oxígeno mediante su 
respiración. (Liébana 1997). 
��������/(*�'-�3'��3?'-�5+@����'��/�5+�A��*���'��/�5+�
a) �3?'-�5+�
Es la interrelación quese da entre los microorganismos y el huésped, 
lo que permite la colonización de los tejidos. 
b) ���'��/�5+�A��*���'��/�5+�
Unión entre bacterias de la misma o diferente especie 
respectivamente que les permite acumularse y formar colonias. 
(Liébana 1997). 
Entre las especies mas comunes en los canales radiculares necróticos, se 
encuentra, ���
�������������������, el cual muestra una alta habilidad para 
�
�
coagregarse ��� ����
 con la mayoría de las bacterias orales (Sundqvist G. 
1992). 
���������(��/�*+��'-�
La microbiota oral obtiene sus nutrientes de tres fuentes distintas: de los 
tejidos o secreciones del huésped (fuentes endógenas), de otros 
microorganismos (fuentes interbacterianas) y de la dieta alimentaría (fuentes 
exógenas). (Liébana, 1997) 
�������7�*('/(*�'-�3'��?�B-.'3�
Son todos aquellos factores que limitan por parte del huésped el ingreso 
penetración y colonización bacteriana tales como: Integridad de mucosas y 
del tejido dental, masticación, deglución, tejidos linfoides, y la saliva por su 
acción mecánica, química e inmunitaria. (Liébana, 1997). 
��������+(��5+�/*-��+('�6�/�*
��+*-�
A nivel microbiano se dan relaciones entre especies bacterianas que 
determinan la supervivencia de unas y la eliminación de otras lo cual llega a 
establecer un tipo de microflora determinado. (Liébana, 1997). 
���� ��2*3'�*-�3'��'��/�5+�6�/�*
��+��
Un ecosistema oral, constituye una comunidad microbiana que habita en la 
cavidad oral, y como comunidad existen relaciones entre las diferentes 
especies allí presentes. Las relaciones que se dan entre las bacterias, 
tienden a dividirse en relaciones positivas, neutras y negativas. (Liébana, 
1997). 
 
�
�
a) �'��/�*+'-�.*-�(�)�-�
�
�on relaciones en que dos microorganismos obtienen ventaja de la 
asociación. Entre las relaciones positivas destaca el mutualismo o simbiosis. 
(Liébana, 1997).�
b) �'��/�*+'-�+'�(��- 
 
En esta relación, ninguna de las especies se ve afectada, se puede obtener 
ventaja de una de ellas pero sin perjudicar a la otra. Entre ellas el 
comensalismo, en la que se destaca la presencia de anfibiontes, los cuales 
son microorganismos que mantienen una relación comensal con otro, pero 
que en determinadas condiciones , como por ejemplo una disminución en la 
capacidad de defensa del hospedador, pueden llegar a establecer una 
relación de parasitismo.(Liébana,1997). 
c)���'��/�*+'-�+'��(�)�-��
�
Se dan cuando uno de los microorganismos se ve perjudicado por la relación 
con otro microorganismo. La principal relación negativa es la antibiosis o 
antagonismo que se da cuando un microorganismo impide el crecimiento de 
otro, obteniéndose de esta forma una ventaja ecológica ya que se disminuye 
la competencia. Esto se da por la producción de bacteriocinas que son 
sustancias inhibitorias del crecimiento de otras bacterias, entre las que se 
pueden citar las mutacinas que son bacteriocinas producidas por algunas 
cepas de ������
�
����������� orales. (Liébana, 1997). 
La depredación es otro tipo de relación negativa en que uno de los 
microorganismos mata al otro y se alimenta de él. Otra relación negativa es 
�
�
el parasitismo en que una de las especies vive en o sobre la otra obteniendo 
beneficio del hospedador a costa del perjuicio de éste. Un ejemplo de 
relación negativa es la que se da cuando determinadas especies de 
estreptococos orales que producen peróxido de hidrógeno, ejercen una 
acción tóxica sobre otras bacterias que carecen de sistemas detoxicantes. 
(Liébana,1997). 
 
Los lactobacilos y los estreptococos son importantes productores de 
bacteriocinas, que juegan un papel muy importante en la ecología de la 
microflora de la mucosa oral. Esta producción de bacteriocinas puede inhibir 
el acceso de bacterias exógenas a la cavidad oral y al tracto respiratorio. 
(Sundqvist G. 1992). 
 De esta forma se ha observado que, las interacciones microbianas tanto 
positivas como negativas, pueden regular significativamente la presencia de 
diferentes especies microbianas en un mismo nicho (Sundqvist G. 1992). 
Se han reportado varias asociaciones bacterianas en conductos radiculares 
de dientes necróticos, entre ellos: ���
���������� ��������� con 
����
������
�
���������
�, �����
�
�������������!�������
������������� y 
�
�����
�
���� ���
�
������. ����
������ ���������� es afín a 
����
������
�
����� ����
�!� ����
������
�
����� �����
���� y ������������
���; mientras que se ha observado que �
�����
�
�������
�
������ inhibe 
el crecimiento de ����
����������������. (Sundqvist G. 1992). 
 Algunas combinaciones de bacterias resultan más potentes que otras, por 
ejemplo, la unión entre ����
�����!� �
�����
�
���!� ���
��������� y 
����
������
�
����, incrementan el grado de destrucción periapical. 
Experimentalmente la inducción de infecciones radiculares en monos 
�
�
utilizando únicamente �����
�
����� �������, indujo una modesta destrucción 
periapical en comparación con la combinación entre �����
�
���� �������!�
������
�
����� ������� y ����
������ �
���, que demostró ser mas agresiva. 
(Liébana, 1997). 
�
����!���/(�)�3�3��+C�6D(�/��	�/('���+���
 
Hoy en día se asume que la microbiota endodóntica está representada, 
principalmente, por microorganismos Gram negativos, los cuales viven, se 
multiplican y eventualmente mueren en el conducto radicular infectado, 
liberando en este proceso endotoxinas. La actividad endotóxica está 
fuertemente relacionada con la presencia y el número de bacterias Gram 
negativas en el canal radicular (Pajari �����
 1993) éstas en un determinado 
momento, pueden superar el foramen apical e iniciar una lesión a ese nivel. 
(Dalby, 2000). 
 
Las endotoxinas contenidas en la pared celular de las bacterias Gram 
negativas son las sustancias responsables de los mecanismos inflamatorios 
que se desencadenan a nivel pulpar. Son liberadas al medio después de la 
desintegración de la bacteria, lo que produce diversos efectos biológicos, 
como fiebre o estimulación de la actividad linfocítica. (Dalby, 2000). 
 
Las endotoxinas están presentes en altas concentraciones en conductos 
radiculares de dientes con necrosis pulpar sintomática y son antígenos no 
específicos que pueden desencadenar reacciones inflamatorias específicas e 
inespecíficas, donde intervendrán células fagocitarias de defensa (linfocitos, 
macrófagos y neutrófilos), las cuales liberarán diferentes sustancias químicas 
que actuarán como potenciadores, mediadores o inhibidores de la patología 
pulpar y periapical.�(Jawetz �����.1999). 
�
�
Algunos microorganismos anaerobios producen enzimas extracelulares como 
colagenasas y proteasas que al parecer estimulan la invasión bacteriana de 
los tejidos. (Dalby, 2000). 
�
���� 2�����������2��� 2E�� ����������� ���������� �� 
���
��������7�
7������
�
�������������	
���
�����
�	�
���
Son bacterias pleomorfas que aparecen con formas muy variables: en huso, 
globulosas, redondeadas, finas, etc. Son moderadamente sacarolíticas, 
aunque sintetizan material de reserva intracelular a expensas de polímeros 
de glucosa. Sus fuentes nutricionales y energéticas mas importantes 
provienen del catabolismo de péptidos y aminoácidos, elaborando como 
producto metabólico final especialmente acido butírico. A diferencia de otros 
bacilos Gram negativos anaerobios estrictos son resistentes al verde 
brillante. Puede aislarse como hábitat primario en la cavidad oral y además 
aislarse del intestino, vías respiratorias aunque se encuentra por lo general 
en el surco gingival. (ANEXO 1) (Liébana 2002). 
 
Aun así, ��� ���
, los factores de virulencia de �
� ���������� no están 
claramente definidos, su poder patógeno se relaciona con la endotoxina, 
leucotoxina, compuestos solubles que inhiben la quimiotaxis de los 
neutrófilos, fosfatasas, etc. Si parece importante su capacidad de 
coagregarse con otras bacterias favoreciendo los procesos de colonizacióny 
formación de placas. También se sabe que los ácidos grasos de cadena 
corta (especialmente el ácido butírico) y el amoniaco obtenido a partir de 
aminoácidos (p. ej. cisteína o metionina) pueden comportarse como tóxicos 
tisulares, igualmente, producen dos compuestos malolientes que están 
implicados en la halitosis (SH, metilmercaptano). (Liébana, 2002) 
�
�
��������������
���������������,��
Comprende bacterias asacarolíticas, es decir que no metabolizan los hidratos 
de carbono ni por la vía de Embden=Meyerhof=Parnas (glucólisis) ni por la 
ruta pentosa de fosfatos, debido a que carecen de enzimas como la glucosa=
6=fosfato deshidrogenasa y gluconato=6=fosfato=deshidrogenasa. Emplean 
compuestos nitrogenados como fuentes energéticas, no se desarrollan en 
presencia de bilis al 20%. Este microorganismo se encuentra en el surco 
gingival, de forma especial cuando hay lesiones periodontales avanzadas; 
mas raramente puede detectarse, quizás a modo de reservorio, en el dorso 
de la lengua, amígdalas y saliva. No se le considera como parte integrante de 
la microbiota oral normal sino como un patógeno exógeno ausente en 
individuos sanos. Se le relaciona con multitud de procesos patológicos: 
gingivitis, pulpitis, abscesos periodontales y periapicales. Para su 
aislamiento, los medios de cultivo deben incluir vitamina K y de forma 
especial, por su dependencia del hierro, hemina o sangre, habitualmente a 
de carnero lacada, esto es, congelada y descongelada para que, al romperse 
la membrana de los hematíes, se liberen mejor los nutrientes. Para hacer los 
medios selectivos se añaden antibióticos no activos sobre �
�����������)� es el 
caso de kanamicina, tobramicina, acido nalidíxico, colistina o bacitracina 
(medio preconizado por Hunt). Las colonias, claramente diferenciadas, 
aparecen tras una incubación de al menos 48 horas a 36 +/= 1 °C; muestran 
la típica pigmentación marrón oscura o negra y no fluorescente bajo una luz 
ultravioleta. Las características �������
 para su identificación, son aparte de 
las del género, la producción de indol a partir del triptófano y el hecho de 
poseer una enzima proteolítica semejante a la tripsina que hidroliza un 
sustrato incoloro, la Benzoil.D=L= arginina=B –naftilamida (BANA) dando 
origen a un compuesto coloreado (B=naftilamida). (Liébana, 2002). 
Sus factores de virulencia: 
�
�
Capsula: es de naturaleza polisacárida que aparte de permitir la subdivisión 
de la especie en seis serotipos, tiene una acción antifagocitaria por su efecto 
antiopsónico. 
Membrana externa: tiene gran interés fisiopatológico por poseer proteínas 
que se comportan como adhesinas que participan en fenómenos de adhesión 
y coagregacion bacteriana y, por tanto, en la colonización de células 
epiteliales y fibroblastos y en la formación y mantenimiento de la placa 
subgingival. Con respecto a esto ultimo cabe destacar los procesos 
coagregativos de �
����������� con ���
����������������������#����
�������
����������
 (Liébana, 2002). 
 
La endotoxina asociada al lipopolisacárido (LPS) cuya actividad endotóxica, 
con respecto a otras bacterias Gram negativas, no parece muy importante. 
Formar vesículas superficiales que se liberan con facilidad del resto del soma 
celular; dichas vesículas atraviesan barreras impermeables a la célula 
completa y transportan, de esta forma, factores de virulencia que serian 
trasladados a distancia. (Liébana, 2002). 
 
Fimbrias: como las proteínas de la membrana externa y con sus mismas 
consecuencias, se comportan como adhesinas e intervienen en fenómenos 
de coagregacion y adhesión a superficies epiteliales y dentales, en este caso 
con la mediación de la saliva. (Liébana, 2002). 
 
Proteasas*����
����������� produce una amplia gama de enzimas proteolíticas; 
algunas se asocian a la membrana externa y otras se liberan al exterior o son 
transportadas a distancia por las vesículas superficiales. El efecto destructivo 
de estas enzimas se extiende también a elementos del sistema inmunitario, 
permitiendo la evasión bacteriana de la respuesta del hospedador. Se 
comprende que estas proteasas, al comportarse como agresinas e 
�
�
impedinas, desempeñan un papel importante en el surco gingival para 
producir periodontitis. (Liébana, 2002). 
 
Otros compuestos proteicos: es el caso de la superóxido dismutasa, que 
permite a �
����������� resistir la acción oxidante de los radicales superoxido 
generados en el interior de los leucocitos polimorfonucleares. Otras 
exoenzimas que también contribuyen al daño tisular como hialuronidasa, 
fosfatasa alcalina; y una exotoxina del tipo epiteliotoxina de gran importancia 
en el proceso penetrante de los tejidos. (Liébana, 2002). 
 
Metabolitos tóxicos tisulares: son ácidos grasos de cadena corta, amoniaco, 
compuestos azufrados volátiles, metilmercaptano, que aumenta la 
permeabilidad de la mucosa oral. (Liébana, 2002). 
 
Moléculas antibacterianas: muchos de los metabolitos citados ejercen un 
efecto competitivo con otras bacterias; a ellos hay que añadir la producción 
de bacteriocinas por parte de algunas cepas de �
� ����������. Todas estas 
moléculas están implicadas en las amplias interrelaciones que las bacterias 
establecen en la cavidad oral. (ANEXO 2) (Liébana, 2002). 
�
��������
��	
���������
Comprende bacterias moderadamente sacarolíticas por la vía Embdem 
Meyerhof Parnas pero no metabolizan los glúcidos por la vía de las pentosas 
fosfato ya que carecen de las enzimas glucosa=6 –fosfato deshidrogenasa y 
gluconato=6 –fosfato= deshidrogenasa. No se desarrolla en presencia de bilis 
al 20%. Son resistentes a la vancomicina. 
Especies pigmentadas: 
�
��������
������!��
�����������!��
�����������!��
��
��
���!��
��
�������!��
�
�������!��
�������
�� (algunas de cuyas cepas no son pigmentadas). Se les 
�
�
relaciona con mayor o menor grado con multitud de procesos, como 
infecciones pulpares, absceso periapical, alveolitis, etc. En la mayoría de los 
casos su patogenicidad no es muy bien conocida, de forma que participarían 
en estos procesos unidas a otras bacterias de carácter sinérgico. Con 
respecto a las enfermedades periodontales la mas implicada son �
�
��������������
����������� cuyas colonias al contrario de �
�����������, emiten 
fluorescencia; la primera especie esta presente en el surco gingival en una 
de cada dos personas con buena salud periodontal y su prevalencia pasa a 
tres de cada cuatro sujetos con problemas de gingivitis o periodontitis; por 
ello resulta difícil atribuirle un papel claro como periodontopatogena; con 
respecto a �
����������� se aísla aun con mayor frecuencia en individuos 
sanos. �
�����������!��
��������
������!��
��
������� se han descrito fimbrias 
como adhesinas y residuos proteicos y glucoproteicos superficiales, pueden 
actuar como receptores de otras adhesinas. También se ha comprobado la 
capacidad para degradar inmunoglobulinas, su acción toxica sobre los 
fibroblastos y su actividad fibronolítica. La boca es un reservorio habitual para 
estas bacterias. Especies no pigmentadas (Koneman. 1999). 
 
Son �
� ������!� �
� ��������!� �
� 
���!� �
� 
��
���!� �
� ���
������ �� �
�
+

���
 
����!� �� �������� �� �
� ��
���
 La mayoría de ellas tienen como 
hábitat primario el surco gingival, algunas especies son más abundantes en 
las enfermedades periodontales aunque su grado patógeno real se 
desconoce. (ANEXO 3) (Liébana, 2002). 
�
�������
�	��	�
�	�������������
��
�� cocos de cadenas cortas o emparejados Gram positivos, no 
formadores de esporas, anaerobios su factor de virulencia está en la enzima 
de la colagenasa y betalactamasa. Se aíslan frecuentemente en procesos 
infecciosos supurados que tienen carácter mixto y polimicrobiano: en el 
�
�
cerebro y los senos, pleuropulmonares, peritoneales, etc. También se 
detectan con el mismo carácter con lesiones de caries de dentina, formas 
avanzadas de periodontitis,abscesos de origen dental, conductos radiculares 
infectados, etc. Ante una identificación preliminar de cocos Gram positivos 
anaerobios, la sensibilidad mediante la técnica de disco=placa a polianetol 
sulfonato sódico (SPS) indica la identificación de ����
������
�
�����
�����
����� �� ��,� la fácil diferenciación de este último por su morfología 
microscópica (tamaño) y porque se identifica muy bien con los micrométodos 
que detectan enzimas preformados, un cromatograma abigarrado, incluyendo 
hasta ácido isocaproico en los productos finales del metabolismo. 
Únicamente en el caso de �
������
���� la cromatografía separa un género y 
una especie concreta, en el resto, y según los últimos cambios taxonómicos, 
los productos finales del metabolismo son los mismos para los distintos 
géneros. Aquí se da la paradoja de que con los caracteres fenotípicos 
usualmente estudiados, hay que llegar al diagnóstico de especie para poder 
llegar al género adecuado. Cuando esto no sea posible, quizás sea bueno 
conocer en que grupo se está. (ANEXO 4) (Alcalá �����, 2004). 
 
�
�������	�
�	��������
�	����
Se aísla en el 70.90% de la población no desdentada y resistente a la caries 
(portadores). En individuos con caries activa o especialmente predispuestos 
su cantidad aumenta significativamente. Se considera el microorganismo 
cariogeno por excelencia. Por su especial capacidad de colonizar superficies 
duras se aísla en la cavidad oral, sobre todo a partir de placa 
supragingivales, radiculares y saliva, en cuyo caso su origen es secundario a 
la localización en las placas. Igualmente su papel es importante en las 
endocarditis subagudas, representando entre el 7.14% de todas las 
originadas por los estreptococos. (ANEXO 5) (Liébana, 2002). 
�
�
Sus colonias en agar sangre son α y γ hemolíticas y excepcionalmente β=
hemolíticas. En su estructura antigénica hay que destacar que poseen los 
polisacáridos parietales c, e y f, y, proteínas asociadas a la mureina 
conocidas como antígenos I y II estas proteínas u otras similares participan 
en procesos adhesivos: a) como adhesinas interactuando con receptores de 
la película adquirida, tales como proteínas ricas en prolina. b) como 
glucosiltransferasas y receptoras de glucano en fenómenos agregativos y 
coagregativos entre bacterias que colonizan los dientes. (Liébana, 2002). 
 
Los factores de virulencia a destacar son: 
a) Síntesis de polisacáridos intracelulares. 
b) Síntesis de polisacáridos extracelulares de tipo glucano insolubles y 
solubles y fructanos 
c) Movilización de polisacáridos intracelulares por glucógeno fosforilasa y 
extracelulares solubles por dextranasas y fructanasas. 
d) Poder acidogeno, acidofilo y acidurico, inicio de crecimiento a pH 5 y 
corto efecto post=pH. 
e) Importante capacidad adhesiva por las proteínas parietales, que 
facilitan su adhesión en superficies duras en ausencia de glucanos, 
agregativa y coagregativa, a través de glucanos y proteínas receptoras 
de glucanos. 
f) Producción de bacteriocinas con actividad sobre otras bacterias Gram 
positivas que podrían tener una significación ecológica, aunque no 
esta demostrada ��� ���
 su importancia como factor selectivo de la 
microbiota. (Liébana, 2002). 
�
�
�
�
�
��������	
�������������
Pertenecen a este genero numerosas especies, la mas frecuente en 
patología humana es �����
�
����� �������, seguida de �����
�
�����
 ������. Se asocian en parejas y cadenas cortas; en cultivo son muy 
parecidas a los estreptococos. Pertenecen al serogrupo D pero fueron 
separadas de los estreptococos por carácter quimiogénico. Sus factores de 
virulencia no son muy bien conocidos. Su hábitat es el intestino. Producen 
una gran variedad de procesos infecciones extraorales que plantean un 
problema particular de tratamiento antibiótico. Por su metabolismo anaerobio 
son intrínsecamente resistentes a los aminoglucósidos que, sin embargo 
pueden penetrar si se unen a otros compuestos que inhiben la síntesis del 
peptidoglucano al ingresar en el interior de las bacterias, pero aun así no 
serán útiles si las cepas muestran altos niveles de resistencia por la 
producción de enzimas inactivantes; por otra parte, las cefalosporinas no son 
eficaces por la baja afinidad de sus PBP a las misma. (Koneman, 1999). 
 
�����
�
����� �������: Coco anaerobio facultativo Gram positivo que habita 
el tracto gastrointestinal y genitourinario femenino. La mayoría de sus cepas 
son homofermentativas, no producen gas, no poseen enzimas citocrómicas y 
se obtiene ácido láctico por fermentación de la glucosa. En su pared celular 
poseen antígenos del grupo D y un acido lipoteicoico intracelular asociado a 
la membrana citoplasmática. Puede crecer en temperaturas entre 10o y 450 C. 
Es un microorganismo oportunista, causa infecciones nosocomiales en 
diferentes grados de compromiso. Crece con facilidad en medios difíciles con 
poca cantidad de oxigeno y nutrientes y forma biopeliculas entre si o con 
microorganismos de otras especies. Otro factor que favorece su crecimiento, 
es el potencial de oxido reducción elevado. (ANEXO 6) (Liébana, 2002). 
Se asocia fuertemente a casos de fracaso de tratamientos de conductos, 
aunque eventualmente, se ha visto en presencia de lesiones primarias de 
�
�
origen pulpar. �����
�
����� �������� se puede encontrar asociado a�
������
�
����!�%���
���������y otras bacterias facultativas así como bacterias 
anaerobias lo que puede crear una flora mixta aun más virulenta. (Liebana 
2002). 
�
�
�������������������������
Las especies���������crecen como células de levaduras típicas de 4=6 [m 
redondas u ovaladas con gemación en la mayoría de las condiciones y en 
casi todas las temperaturas, crecen en condiciones de anaerobiosis en 
medios de cultivo a pH con rango entre 2,5 y 7,5 y la temperatura oscila entre 
20o y 38o, el crecimiento de colonias se puede detectar entre 48 y 72 horas 
después de la siembra. (Liébana, 2002).�
 
Los microorganismos del genero ������� son oportunistas se encuentran 
como comensal en la cavidad bucal, intestino, vagina, secreción bronquial y 
piel del hombre. Las colonias de esta especie se observan 
macroscópicamente: color crema cerosa, húmedas, redondas. Y 
microscópicamente son blastosporas redondas u ovales. (Liébana, 2002). 
 
�������� �������� a lo largo de la historia ha sido causante de diferentes 
enfermedades en humanos, las cuales generalmente se produce por tres 
mecanismos: por invasión de cepas colonizantes del tracto gastrointestinal o 
la piel; como consecuencia de transmisión vertical en el neonato o en raras 
ocasiones por trasmisión horizontal además esta especie puede llegar a 
producir infección cuando el hospedero tiene algún factor predisponente y de 
esta manera ocasionar un grupo de manifestaciones clínicas que pueden 
presentarse en la zona cutánea, mucocutánea o de formas sistemáticas 
(Castrillon. �����
 2005). �
��������� tiene varios atributos de virulencia para 
�
�
colonizar el hospedero y ocasionar daños de forma directa al activar, resistir 
o desviar los mecanismos de defensa del mismo. Estos atributos que 
contribuyen a la patogénesis de �
� �������� incluye la morfogénesis 
(transición entre las células levaduras unicelulares y las formas de 
crecimiento filamentosas), las enzimas secretadas aspartil proteasas (SAP) y 
fosfolipasas y las biomoléculas de reconocimiento del hospedero 
(adhesinas), que le permiten iniciar el proceso de formación de biopeliculas. 
Así mismo, el cambio de fenotipo se acompaña por alteraciones en la 
expresión de antígenos, morfología colonial afinidades de �
��������� a los 
tejidos. (Castrillon et al 2005) 
 
���������������� es un microorganismo muy versátil, por su capacidad para 
sobrevivir como comensal en varios sitios anatómicamente distintos como la 
piel, intestino, cavidad vaginal y oral. En el esputo expectorado y en la vejigaurinaria de los pacientes con catéteres a permanencia; ya que en promedio 
del 25 al 30% de los individuos son portadores de C. albicans en estas 
cavidades. Además de el reservorio endógeno (cavidades naturales del 
hombre), también se puede adquirir de fuentes exógenas y se aíslan de 
superficies ambientales. (ANEXO 7) (Bonardello �����
 1999). 
�
���������� ��	���������,�
Es un bacilo, no esporulado, anaeróbico obligado, Gram negativo, las 
células miden de 0.4=0.7 [m de ancho por 1.5=7.0 [m de largo. Tienen forma 
cónica redondeada. Algunas cepas han demostrado algún tipo de movilidad 
esto sin observar flagelo alguno. Las colonias en agar sangre son pequeñas 
puntiformes con 1.0 mm de diámetro. Son circulares, convexos, lisas, 
translucidas a transparentes, brillantes y no hemolíticos. (Siqueira=Rocas, 
2003). Los principales productos metabólicos en caldo de glucosa son 
pequeños a moderadas cantidades de butirato y acetato. Con abundante H2 
�
�
que puede ser detectado como halos alrededor, estos es, cuando hay 
suficiente crecimiento. Las cepas de estas especies muestran un mínimo 
crecimiento y no reaccionan a pruebas bioquímicas y es muy utilizado para 
la diferenciación de otras especies de ���
���������� a partir de determinar 
las proteínas celular solubles por electroforesis y por el contenido de G+C de 
ADN. El principal hábitat de �
���
��� aparecen en el surco gingival y estudios 
ha demostrado que está envuelta en la patogénesis de la periodontitis. 
Debido al escaso crecimiento que tiene este microorganismo y los métodos 
de identificación bioquímica no son suficientes y lo hace más difícil detectar y 
relacionar con enfermedades endodónticas. Su detección se hace más 
eficiente con métodos moleculares como el PCR. (Tabla 1) (Siqueira=Rocas, 
2003). 
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
7��+/�.��'-��B+'�*-�A��-.'/�'-�3'����2�/�*
�*(������
�
�
Tabla 1. Principales géneros y especies de microbiota oral��C&.+������55�D�
�
�
���� 2�����������2��� 7���� ����������� ��� 
��������
7�
7�����
 
Se han realizado estudios que revelan la presencia de otros microorganismos 
poco comunes entre ellos se encuentra �
-������ ��������� y según 
Abuodharam ����� (2002), además de su detección pudo corroborar la teoría 
�
�
de la colonización de la pulpa dental a partir de la invasión del torrente 
sanguíneo en ausencia de inflamación (anacoresis) Bajo este reporte se 
pudo sustentar con resultados que por primera vez la colonización por �
�
�������� en la pulpa dental por vía sanguínea es un hecho. Su trabajo fue 
desarrollado en inicio con la inoculación intraperitoneal en conejillos de indias 
y posteriormente con la técnica de amplificación PCR y secuenciación 
directa, �
��������� fue recuperada hasta en un 50 % de los animales. 
 
.��������� �����
������ es un bacilo no fermentativo, anaeróbico, Gram 
negativo, que crece en agar sangre formando colonias pequeñas, circulares, 
transparentes, lisas, y brillantes. Se ha recuperado de la profundidad de la 
cavidad periodontal y se ha relacionado la enfermedad periodontal con el 
microorganismo, Doan, ������(2000),� hace referencia a la identificación por la 
técnica de PCR a partir de la muestra periodontal. Cabe destacar que 
previamente al realizar pruebas bioquímicas no hay consistencia para la 
identificación de .��������� �����
������� � además que no es frecuente 
encontrar tal microorganismo en la placa subgingival ya que es muy poco lo 
reportado. Por esto Doan� y colaboradores dieron a conocer una 
identificación definitiva de� .
� �����
������� � como un organismo que se 
encuentra en muestras de placa subgingival, así como desarrollar un método 
de detección PCR para .
������
������� y comparar la eficacia entre los 
métodos de detección entre medios de cultivo y PCR. 
 
Otro tipo de microorganismo rara vez encontrado en lesiones pulpares es 
/�������� ������ en un plano histórico Drancourt ��� �� (1998) identificaron 
ADN de /�������������� en pulpa dental de hace 400 años lo que evidencia su 
presencia y esto gracias a la durabilidad de la pulpa dental así como también 
mantenerse una esterilidad natural en ella. Cabe mencionar que fueron 
recolectadas las muestras de dos esqueletos del siglo 16 que se suponen 
�
�
que murieron por la “plaga dental” de la época. El uso de PCR para la 
extracción de ADN antiguo e incorporación de primers específicos para el 
gen humano beta=globina demostró la ausencia de inhibidores. La 
incorporación de primers específicos para /
������� ��
& (el gen codificante 
de la subunidad=beta para la ARN polimerasa) y asociado a la virulencia (gen 
codificante para la activación del plasminógeno) con esto se logro obtener 
una indistinguible secuencia de nucleótidos para su identificación de la 
bacteria. También dedujeron los autores que a partir de la pulpa dental 
promete ser un blanco atractivo para determinar la etiología de 
enfermedades septicémicas ancestrales. (Drancourt �����.1998). 
�
Otros microorganismos son:� &� ��
���������� ���!� %���
��������� ���!�
0
������������ ���!� %���
���������� ���!� #���������������
�����
��������
������!�0��������������!�%���
���������������!������
����
���������!� ��������� ����������!� 1������� ���!� "���������� 
����������
�
2#$�34��5 
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�
�� ��2'3�*-�3'�/��(�)*�
 
Son preparados que intentan reproducir artificialmente las condiciones del 
hábitat natural de los agentes bacterianos. Sus componentes deben cubrir 
todas las necesidades nutricionales de las bacterias que se van a estudiar y 
deben incorporarse en una mezcla justa y equilibrada. (Liébana, 2002) 
Clasificación de los medios de cultivo se hace en función de su contenido, de 
su estado y de su utilidad, según Liébana (2002) 
�
1. Según su contenido. 
 
a.) Definidos o sintéticos: Se conoce perfectamente la composición 
química, ya que se elaboran añadiendo productos puros e 
individualizados. 
 
b.) No sintéticos o empíricos: No se conoce la composición exacta; se 
prepara con extractos de carne, de levadura, peptonas etc. su empleo 
se basa en la experiencia y son los medios más utilizados (ej., agar 
cerebro corazón o agar Mueller Hilton) 
 
2. Según su estado. 
 
a.) Líquidos: Son llamados caldos (ej., caldo tioglicolato, caldo cerebro 
corazón) los constituyentes están disueltos en el agua sin sustancias 
solidificantes. Se utilizan sobre todo para inocular muestras o cuando 
se cultiva un único microorganismo, para obtener una masa 
microbiana u observar las características de crecimiento. 
 
�
�
b.) Semisólidos: Contienen agar en escasa proporción (menos del 1%) se 
utilizan como medios para analizar alguna característica especial de 
las bacteria, como por ejemplo la movilidad o la capacidad oxidativa 
fermentativa. También se emplean como medios de transporte de 
muestras clínicas (ej., medio Stuart) 
 
c.) Sólidos: Se obtienen agregando agar al medio liquido en una cantidad 
suficiente para que solidifiquen, según su utilización, se distribuyen en 
tubos o platos de petri, se utilizan principalmente para pruebas de 
identificación bioquímica (ej., bilis esculina agar) 
�
3. Según su utilización: 
 
a.) Básicos o comunes: Son aptos para las bacterias no exigentes y 
contienen los nutrientes mínimos para el desarrollo. 
 
b.) Enriquecidos: Son medios básicos que se suplementan con sustancias 
muy nutritivas para bacterias exigentes, como la sangre, el suero, etc. 
 
c.) Selectivos: Estos medios permiten el crecimiento de algunas bacterias 
e inhiben el de otras se utilizan en casos que interese recuperar 
ciertos tipos de microorganismos y se desee impedir el crecimiento de 
otros. 
 
d.) Diferenciales: Estos medios llevan incorporados determinadas 
sustancias que pondrán de manifiesto visualmente la presencia de 
alguna característica bioquímicade la bacteria. 
 
�
�
Cada microorganismo requiere una variedad de condiciones especiales para 
su crecimiento. Para conseguir su desarrollo, es fundamental otorgarle tanto 
condiciones físico=químicas óptimas como un medio de cultivo que contenga 
los nutrientes necesarios para su multiplicación. (ANEXO 9) (Liébana 2002). 
�
�� ����+D��-�-�2�/�*
�*�5��/* 
 
Reconociendo la evidencia de la participación de los microorganismos en el 
establecimiento y manutención de los procesos en el conducto radicular y en 
la región periapical, el análisis microbiológico como recurso de la 
determinación del efecto terapéutico no se constituye en técnica de rutina en 
las clínicas de endodoncia y en instituciones académicas (Siqueira, 1997). 
Los procedimientos microbiológicos, relativos a la recolección, transporte, 
siembra e incubación, con el objeto de preservar y propagar los 
microorganismos anaerobios presenta poca practicidad, son costosos y 
consumidores de tiempo; las técnicas genéticas presentan restricciones a 
nivel de la practica y evaluaciones clínicas; el resultado negativo puede 
expresar falta de sensibilidad de la técnica; el uso de eficientes sustancias 
antimicrobianas durante el tratamiento químico=mecánico y en la medicación 
intracanal optimizan el control microbiano. Aun con aquellas limitaciones, 
actualmente el análisis microbiológico con base en el cultivo de 
microorganismos oriundos del conducto radicular parece constituirse en 
recursos de laboratorio valioso en el contexto de la técnica endodóntica. 
(Estrela 2005). 
 
En la investigación, su importancia es significativa una vez que permite el 
estudio de la etiopatogenia del proceso; soporta la evaluación de la 
efectividad antimicrobiana de sustancias usadas en el tratamiento; y por 
consiguiente, contribuye para el perfeccionamiento de la técnica endodóntica. 
�
�
Finalmente el análisis microbiológico de los conductos radiculares es útil en 
la evaluación y acompañamiento de los casos recidivantes, porque permite, 
por ejemplo, el aislamiento de microorganismos de los géneros 
�����
�
����!� #����
����� y ��
��
����������� (originalmente #�������) 
(Molander ��� ��. 1998), facilitando su identificación y posteriormente 
permitiendo la determinación de su perfil de sensibilidad a antibióticos y/o 
quimioterápicos (Molander �����. 1998). 
 
El protocolo para el ensayo microbiológico de naturaleza cultivable, concluido 
el tratamiento químico=mecánico, consisten lo siguiente: 
a. Adición de la solución de muestreo, haciendo movimientos de 
introducción y retirada con la ayuda de una lima. 
b. Repetición del procedimiento 
c. Retirada del material adherido a las paredes del conducto con 
lima endodóntica y, en la secuencia, su corte en el segmento 
activo, con subsiguiente inmersión del mismo en medio de 
transporte 
d. Homogenización de la mezcla y transferencia del segmento de 
la lima para el medio de cultivo correspondiente y/o repique de 
la suspensión microbiana 
e. Incubación 
f. Lectura e interpretación de los resultados. 
 
Es importante destacar que lo referido anteriormente debe ser realizado 
integralmente en condiciones asépticas, evitando que microorganismos 
contaminantes interfieran en el resultado. De la misma manera, el uso de 
sustancias neutralizantes del agente antimicrobiano utilizado durante el 
tratamiento provoque resultados falsos negativos. (Estrela 2005). 
 
�
�
Los medios de transporte tienen por finalidad la preservación de los 
microorganismos, eventualmente generados en el material clínico, desde su 
recolección hasta el adecuado procesamiento en laboratorio. Por su 
composición y características esos medios tienen acción ��6����! impidiendo, 
de ese modo, que ocurran alteraciones en la proporción original de los 
microorganismos, así como condiciones capaces de proteger la microbiota 
endodóntica de los efectos tóxicos del oxigeno molecular; el uso de esos 
medios actualmente constituyen un recurso universal a medida que los 
microorganismos conservan su viabilidad en los mismos. Entre los medios de 
transporte comúnmente recomendados, se encuentran: Medio de Transporte 
Reducido (RTF), Medio III Microbiostatico de Viabilidad y Mantenimiento 
(VMGA III) y el Caldo Tioglicolato (THM). (Siqueira, 1997). 
 
La etapa correspondiente al cultivo exige la utilización de medios de cultivos 
líquidos, semisólidos y/o sólidos, dependiendo del propósito del estudio. Esos 
medios deben ser ricos en sustancias nutritivas, de modo que soporten el 
crecimiento y multiplicación de la gama variada de microorganismos 
endodónticos, abarcando aquellos con gran capacidad de síntesis y también 
aquellos exigentes de sustancias nutritivas más complejas. Las sustancias 
enriquecedoras son hemina y vitamina K, complementariamente, en medio 
sólido, debe ser adicionada sangre desfibrinada de carnero. (Siqueira, 1997). 
 
Entre los medios líquidos, se destacan el Caldo Tripticasa Soya (TSB) y 
Caldo Infusión Cerebro Corazón (BHI). En el caso de utilizarse medios 
semisólidos, la selección recae en el Caldo Tioglicolato (THM), ya que 
presenta excelente desempeño como medio de transporte y como medio de 
cultivo para los microorganismos oriundos de conductos radiculares 
infectados (Carlsson �����, 1980). El medio sólido mas utilizado parece ser el 
Agar Brucella que, enriquecido con algunas sustancias, soporta el 
�
�
aislamiento de los principales microorganismos de las lesiones pulpares. 
(Estrela, 2005). 
 
La incubación del material debe priorizar los microorganismos anaerobios, 
considerando que la presencia de microorganismos aerobios estrictos es 
fugaz o inexistente. La incubación debe ser realizada en anaerobiosis, 
alcanzada por medio físico (vacuo e insuflación con una mezcla con el 80% 
de N2 el 10% H2 y el 10% de CO2) o medio químico (sistema Gazpak o 
Anaerobac). El tiempo de incubación varía entre 3, 6 y 14 días. (Molander ���
��, 1998). 
 
En el medio líquido o semisólido, la lectura tiene como referencia la 
presencia o ausencia de turbidez del mismo, indicativa, o no, del crecimiento 
y multiplicación de microorganismos. El medio sólido va a permitir el 
aislamiento de microorganismos, la determinación de su capacidad 
hemolítica, la obtención de cultivo puro y subsecuentemente, su 
caracterización morfológica, fisiológica y/o genética y, cuando es necesario, 
el análisis de sensibilidad a antimicrobianos. (Siqueira, 1997). 
�
��! �F�������2�
���
���� 
 
La introducción de técnicas para la manipulación del ADN �������
 ha tenido 
un enorme impacto en el progreso de cada una de las áreas de la 
investigación biológica. El primer reporte de la aplicación de la genética 
molecular en estreptococos se obtuvo alrededor de 1980, y en la actualidad 
se cuenta con más de 40 genes del ������
�
����� ������ que han sido 
clonados y secuenciados. (Liébana, 1997 ) 
 
�
�
Recientemente, la metodología molecular de identificación microbiana 
(reacción de la cadena de polimerasa (PCR), sondas genómicas de ADN y 
técnicas de hibridación molecular ADN=ADN) han permitido, por un lado, 
obtener muestras positivas casi en un 100 % de los casos de identificación 
de especies bacterianas que, hasta el momento, no habían sido 
relacionadas con la patología periapical. (Canalda=Brau, 2006) 
 
En los últimos años se han implementado nuevas técnicas de identificación 
microbiana de base molecular, como por ejemplo, la reacción de cadena 
polimerasa (PCR). Estos métodos han demostrado una ventaja considerable 
para la identificación de microorganismos y ya han sido aplicados para 
analizar la flora endodóntica (Chaves, 2005) sin embargo, uno de los 
problemas mas resaltantes que acarrea la aplicación de dichas técnicas 
moleculares en la microbiología endodóntica es que muchos de los 
microorganismos que son identificados por medio de estos métodos no 
pueden