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Plantas aromáticas y medicinales tropicales con potencial actividad antimicrobiana. Edición digital. Plantas aromáticas y medicinales tropicales con potencial actividad antimicrobiana. Edición digital. Judith Espinosa Moreno Dora Centurión Hidalgo Alberto Mayo Mosqueda José Rodolfo Velázquez Martínez UNIVERSIDAD JUÁREZ AUTÓNOMA DE TABASCO Universidad Juárez Autónoma de Tabasco Dr. José Manuel Piña Gutiérrez Rector Dra. Dora María Frías Márquez Secretaria de Servicios Académicos C.D. Arturo Díaz Saldaña Secretario de Investigación, Posgrado y Vinculación M.A. Rubicel Cruz Romero Secretario de Servicios Administrativos L.C.P. Marina Moreno Tejero Secretaria de Finanzas Plantas aromáticas y medicinales tropicales con potencial actividad antimicrobiana. Edición digital. I Judith Espinosa Moreno [y otros tres].-- primera edición. -- Villahermosa, Tabasco: Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, 2017. VII, 74 páginas: ilustración. - (Colección: José N. Rovirosa. Biodiversidad, Desarrollo Sustentable y Trópico Húmedo). Incluye referencias bibliográficas (p. 59-74) ISBN de la edición impresa: 978-607-606-385-9 ISBN de la edición electrónica 978-607-606-386-6 1. Botánica media \ 2. Plantas aromáticas. l. Espinosa Moreno, Judith, autor \ Centurión Hidalgo, Dora, autor \ Mayo Mosqueda, Alberto, autor \ Velázquez Martínez, José Rodolfo, autor. L.C. S8293 P53 2017 Elaboró: Guadalupe Trinidad Morales Aguilar. Primera edición, siete de abril de 2017 D.R. © Universidad Juárez Autónoma de Tabasco Av. Universidad s/n Zona de la Cultura, Centro Villahermosa, Tab. C.P. 86000 Para su publicación esta obra ha sido dictaminada por el Sistema Académico de “pares ciegos”, de una comisión interinstitucional de evaluadores, así como por el Consejo Editorial Divisional de Ciencias Agropecuarias de la UJAT. Los juicios expresados son responsabilidad de los autores. Queda prohibida su reproducción total sin contar previamente con la autorización expresa y por escrito del titular, en términos de la Ley Federal de Derechos de Autor. Se autoriza su reproducción parcial siempre y cuando se cite a la fuente. ISBN de la edición impresa: 978-607-606-385-9 ISBN de la edición electrónica: 978-607-606-386-6 Diseño de portada: José Alberto García Centurión Diseño de interiores: Judith Espinosa Moreno Fotografías: Dora Centurión Hidalgo, Judith Espinosa Moreno, Jaime G. Cázares Camero Revisión de la edición: Judith Espinosa Moreno. Responsable de la edición: Julio Cámara Córdova. Compilado y hecho en Villahermosa, Tabasco, México. i ÍNDICE Página Indice de Cuadros ii Índice de Figuras iii Prefacio v Presentación vii 1. Introducción 1 2. Enfermedades transmitidas por los alimentos 5 3. Propiedades de las plantas 7 4. Extractos de plantas 33 5. Actividad antimicrobiana 43 6. Componentes de los aceites esenciales 53 Reflexiones 56 Referencias bibliográficas 57 Los autores 73 ii ÍNDICE DE CUADROS Página Cuadro 1. Especies a las que se les han estudiado su bioactividad. 8 Cuadro 2. Solventes usados para la extracción de compuestos activos. 34 Cuadro 3. Principales métodos de extracción de aceites esenciales, ventajas y limitaciones. 38 Cuadro 4. Rendimientos de los extractos crudos obtenidos con etanol y hexano. 39 Cuadro 5. Rendimiento promedio de los extractos liofilizados. 39 Cuadro 6. Rendimiento (%) de aceites esenciales. 40 Cuadro 7. Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de extractos etanólicos crudos (mg mL-1) 45 Cuadro 8. Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de extractos hexánicos crudos (mg mL-1). 46 Cuadro 9. Actividad antimicrobiana (AAM, mm) y Concentración Mínima Inhibitoria (CMI, mg mL-1) de extractos acuosos liofilizados. 48 Cuadro 10. Concentración Mínima Inhibitoria de aceites esenciales (mg mL-1). 49 Cuadro 11. Concentración Mínima Bactericida de aceites esenciales (mg mL-1). 50 Cuadro 12. Compuestos activos de los aceites esenciales de siete plantas estudiadas. 53 iii ÍNDICE DE FIGURAS Página Figura 1. Aguacate, Persea americana 9 Figura 2. Albahaca de la tierra, Ocimum micranthum 11 Figura 3 Ciruela, Spondias purpurea 12 Figura 4. Chapaya, Astrocarym mexicanum 13 Figura 5. Chichimecate, Tynanthus guatemalensis 14 Figura 6. Guaya de cerro, Chamaedorea alternans 15 Figura 7. Guayaba agria, Psidium friedrichsthalianum 16 Figura 8. Guayaba criolla, Psidum guajava 17 Figura 9. Guayita de río, Chamaedorea cataractarum 19 Figura 10. Matalí, Tradescantia zebrina 20 Figura 11. Nance, Byrsonima crassifolia 21 Figura 12. Oreganón, Plectranthus amboinicus 23 Figura 13. Palo de sangre, Pterocarpus hayesii 25 Figura 14. Perejil, Eryngium foetidum 25 Figura 15. Pimienta, Pimenta dioica 27 Figura 16. Pitaya, Hylocereus undatus 29 Figura 17. Siricote, Cordia dodencandra 30 Figura 18. Tulipancillo, Malvaviscus arboreus 31 Figura 19. Halos de inhibición obtenidos por la técnica de difusión en agar 42 v PREFACIO La presente obra es producto del trabajo de investigación realizado, dentro de la Línea de Generación “Rescate y Revaloración de Recursos Genéticos Tropicales”, por los integrantes del Cuerpo Académico “Recursos Genéticos y Sustentabilidad” de la División Académica de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco. Compendia los resultados de los estudios etnobotánicos sobre plantas con uso tradicional en el estado de Tabasco y particularmente, las de uso medicinal. Los autores Villahermosa, Tabasco, México. Febrero de 2017. La edición impresa fue financiada con recursos PROFOCIE 2014: Objetivo OP/PROFOCIE-2014- 27MSU0018V-04-02: Mejorar el desarrollo de los cuerpos académicos y mantener la calidad de la planta académica, la Meta Académica 1: Mejorar el nivel de habilitación de tres cuerpos académicos… y la Acción 1.3: Apoyo para publicar artículos científicos en revistas indizadas, libros científicos y manuales derivados de los proyectos de investigación, Rubro 2: Servicio de publicación de libros científicos con ISBN y temática agropecuaria. vii PRESENTACIÓN En esta obra se describen los resultados de dos proyectos denominados “Estudio de la actividad antimicrobiana de recursos fitogenéticos subexplotados en el Estado de Tabasco, sobre microorganismos patógenos de incidencia alimentaria” apoyado por el Programa de Fomento a la Investigación y Consolidación de los Cuerpos Académicos (PFICA) de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco con la clave UJAT-2007-C03-23 y “Caracterización de propiedades de antimicrobianos de extractos de plantas alimentarias tropicales” apoyado el Fondo Mixto CONACYT–Gobierno del Estado de Tabasco con la clave FOMIX-2009-C17-120880. Está estructurado incluyendo una breve revisión del estado del arte de las enfermedades trasmitidas por los alimentos, descripción de las propiedades de las plantas aromáticas y medicinales estudiadas por el grupo de trabajo y los métodos de obtención de extractos de plantas. Finalmente, se incluyen los resultados obtenidos de la evaluación de la actividad antimicrobiana y el acercamiento a las sustancias con actividad antimicrobiana encontradas en algunas de las especies estudiadas. 1 1. INTRODUCCIÓN Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los países en desarrollo. El conocimiento de ellas, basado en las creencias y experiencias, ha sustentado a la medicina tradicional que, en la actualidad, es ampliamente usada en el mundo. El uso de plantas medicinales en México está ampliamente difundido y muchas de ellas son objeto de un activo comercio a nivel nacional e internacional1. Se han utilizadocomo materia prima para la elaboración de preparaciones tradicionales (infusiones, tés o jugos), con la finalidad de controlar la prevalencia de ciertas enfermedades infecciosas, resolver problemas de resistencia de los microorganismos y los efectos colaterales de algunos antimicrobianos sintéticos2. Aunque no existen datos precisos para evaluar la extensión del uso global de plantas medicinales, la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación (FAO) han estimado que más del 80% de la población mundial (aproximadamente 4 mil millones de personas) utiliza, rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atención primaria de salud y que gran parte de los tratamientos tradicionales se basa en el uso de extractos de plantas o sus principios activos3. Las plantas constituyen una fuente natural en la búsqueda de compuestos con actividad farmacológica. Mediante técnicas microbiológicas se ha demostrado que una gran cantidad de extractos y compuestos provenientes de plantas tienen actividad sobre microorganismos asociados a enfermedades infecciosas4. La OMS define a la planta medicinal como cualquier especie vegetal que contiene sustancias que puede ser empleada para propósitos terapéuticos o cuyos principios activos pueden servir de precursores para la síntesis de nuevos fármacos. Estas plantas también tienen importantes aplicaciones en la medicina moderna. Entre otras, son fuente directa de agentes terapéuticos, se emplean como materia prima para la fabricación de medicamentos semi-sintéticos más complejos, la estructura química de sus principios activos puede servir de modelo para la elaboración 2 de drogas sintéticas y tales principios se pueden utilizar como marcadores taxonómicos en la búsqueda de nuevos medicamentos5. Como las plantas aromáticas son las que concentran una mayor cantidad de compuestos volátiles o aromáticos constituyen la materia prima para su obtención; también pueden aportar más de un producto comercialmente importante, dependiendo de factores relativos a la especie, del medio ambiente o de los procesos de extracción empleados6. En los últimos años, el renovado interés por lo natural y lo orgánico ha propiciado el resurgimiento de los extractos naturales. Estos se obtienen directamente de las partes no leñosas de plantas, en especial de las hojas, la flor o la raíz. Se han demostrado que los compuestos de las plantas comestibles, aromáticas y medicinales poseen funciones antimicrobianas y podrían servir como fuente de agentes contra patógenos alimentarios7. Entre otras de las propiedades atribuidas a los compuestos presentes en las plantas pueden señalarse efectos antioxidantes, regulación del sistema hormonal, actividad antibacteriana y antiviral8. Los principales extractos vegetales con actividad antimicrobiana son los aceites esenciales y las oleorresinas. Los primeros son fracciones líquidas volátiles que contienen las sustancias responsables del aroma de las plantas, son mezclas complejas de hasta 100 componentes. Los segundos son líquidos muy viscosos o sustancias semisólidas9. Los aceites esenciales son obtenidos a partir de diferentes partes de las plantas como flores, yemas, semillas, hojas, ramas, corteza, hierbas, madera, frutos y raíces10. La fuente y parte de la planta, época de cosecha o estado de desarrollo, técnica de extracción, material seco o fresco, microorganismo probado y metodología usada, son factores que influyen en la actividad antimicrobiana11. El Cuerpo Académico “Recursos Fitogenéticos y Sustentabilidad” de la División Académica de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco ha realizado por más de quince años estudios etnobotánicos en varias regiones del estado, principalmente en la sierra del mismo, recuperando los usos de los recursos vegetales tropicales, con especial énfasis en el alimentario y en el medicinal. En las comunidades 3 rurales del estado de Tabasco exiten, entre muchas otras, 18 especies de plantas pertenececientes a trece familias botánicas importantes, que son usadas para el tratamiento contra enfermedades gastrointestinales y otras infecciones. Los lugareños recurren a ellas como parte de su cultura tradicional alimentaria y medicinal. Sin embargo, existen pocos estudios científicos que corroboren las propiedades curativas que los tabasqueños les atribuyen, por lo que se ha iniciado con los estudios básicos para comprobar el potencial antimicrobiano de esas especies y un acercamiento a la composición química de los extractos más comúnmente usados. El presente libro reporta los resultados de estos estudios, así como un avance del estado del arte de cada especie. 5 2. ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR LOS ALIMENTOS La Enfermedad Transmitida por los Alimentos (ETA) ha sido definida por la Organización Mundial de la Salud (OMS) como “una enfermedad de carácter infeccioso o tóxico causada por el consumo de alimentos o de agua”. La mayoría de estas enfermedades son de origen microbiano y tal vez sean el problema más extendido en el mundo contemporáneo y una causa importante de la reducida productividad económica12. De acuerdo al Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica (SINAVE), las ETA’s son consideradas enfermedades de carácter relevante para la salud pública en México debido a que generan costos substanciales para los enfermos, los productores de alimentos y la economía nacional, por lo cual son constantemente monitoreadas13. Las enfermedades que son transmitidas a través de los alimentos y las posibles causas de estas enfermedades se deben a factores que pudieran ser de origen físico, químico o biológico, siendo los factores biológicos los de mayor incidencia y reconocidos como microorganismos de vital importancia para la salud pública. La transmisión al hombre de bacterias patógenas se puede realizar a través del consumo de los alimentos. Este grupo de bacterias, debido a su amplia distribución, se ha constituido en el blanco de acción de muchas industrias alimentarias. Estos microorganismos llegan a los alimentos mediante agua contaminada, tierra, aire, fauna nociva, entre otros, tales como Aeromonas hidrophila aislada de alimentos frescos como pescado, carne, leche fresca, hortalizas y agua; Brucella ha sido relacionada con el consumo de carne procedente de un animal infectado así como leche y derivados de esta; Bacillus cereus se puede encontrar en productos desecados tales como cereales y harinas; Campylobacter jejuni es asociado con alimentos como carne, leche, mariscos y setas; Clostridium botulinum se encuentra presente en productos enlatados así como en el pescado y sus derivados; Clostridium perfringens puede encontrarse en carnes crudas, pescados, sopas y salsas deshidratadas, leche, gelatina, pasta, harina, soja, vegetales crudos y especias; Escherichia coli se encuentra en hortalizas, 6 ensaladas de papas, sushi y quesos madurados; Listeria monocytogenes se relaciona con el consumo de alimentos contaminados con este microorganismo como hortalizas crudas y productos lácteos; la carne, leche y aves de corral son los vehículos principales de Salmonella spp; Shigella se transmite por consumir alimentos como coctel de camarón, ensaladas de atún y alimentos no cocidos; Staphylococcus aureus principalmente se encuentra en alimentos enlatados, carne y sus derivados y productos lácteos; Vibrio es el principal microorganismo causante del cólera que es considerada principalmente una infección transmitida por alimentos que han estado en contacto con agua contaminada así como otros alimentos entre ellos frutas y hortalizas 12,14,15. Por otro lado, la seguridad o inocuidad de los alimentos es un requisito al que deben conceder la máxima prioridad tanto lasinstituciones públicas como las industrias alimentarias16 debido al aumento de la densidad poblacional genera una mayor dependencia de la producción de alimentos y por lo tanto se incrementa la probabilidad de registrar casos de brotes de ETA’s, las cuales tienen graves consecuencias en la salud, causando principalmente trastornos en el tubo intestinal, dolores abdominales, diarrea y vómito17. Las ETA´s se dividen en dos categorías: las enfermedades ocasionadas por la ingestión de bacterias vivas en una dosis propicia para el crecimiento y multiplicación en el alimento, y las enfermedades ocasionadas por la absorción de toxinas sintetizadas por microorganismos durante su crecimiento sobre un alimento18. Sin embargo, no se conoce la incidencia exacta de las ETA´s debido a las limitaciones inherentes de los sistemas de información epidemiológica. Recientemente, ha aumentado el interés, por parte de instituciones de investigación y compañías farmacéuticas, en el estudio de productos naturales con actividad antimicrobiana19. Este interés se debe a los crecientes reportes sobre la resistencia de los microorganismos a los fármacos utilizados, cuyo problema genera cuantiosos gastos a la salud pública, así como a la economía del país o región que los sufre20. 7 3. PROPIEDADES DE LAS PLANTAS Las plantas constituyen un recurso valioso en los sistemas de salud de los países en desarrollo. La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que más del 80% de la población mundial utiliza, rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades y que gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios activos5. Algunas especies vegetales comestibles son empleadas en el tratamiento de infecciones gastrointestinales (dolor de estómago, diarrea, disentería) a través del conocimiento empírico de la población. Las plantas aromáticas y medicinales constituyen un grupo de interés debido a los principios activos presentes en ellas los cuales les confieren propiedades antimicrobianas21. Las especies que se incluyen en la presente obra son dieciocho, las cuales pertenecen a trece familias botánicas y dieciseis géneros. La lista completa se muestra en el Cuadro 1 donde se reporta el nombre común, el nombre científico y la familia a la que pertenece cada una. A continuación, se describen brevemente las características de cada especie y de su bioactividad de acuerdo a lo reportado en la bibliografía consultada. Aguacate, Persea americana Es un árbol, nativo de Centroamérica, cultivado en climas tropicales y subtropicales alrededor del mundo, pertenece a la familia Lauraceae, es ampliamente usado en la medicina tradicional Ayurveda (originaria de la India) para el tratamiento de varias enfermedades tales como menorragia, hipertensión, dolor de estómago, bronquitis, diarrea y diabetes22. Las semillas tostadas y la ceniza disuelta en agua se han utilizado para curar la diarrea. La cáscara del fruto es antibiótica y se emplea como vermífugo y contra la disentería. 8 Cuadro 1. Especies a las que se les han estudiado su bioactividad. NOMBRE COMÚN NOMBRE CIENTÍFICO FAMILIA Aguacate Persea americana Mill. Lauraceae Albahaca de la tierra Ocimum micranthum Mill. Lamiaceae Ciruela Spondias purpurea L. Anacardiaceae Chapaya Astrocarym mexicanum L. Arecaceae Chichimecate Tynanthus guatemalensis Donn.Sm. Bignoniaceae Guaya de cerro Chamaedorea alternans L. Arecaceae Guayaba agria Psidium friedrichsthalianum L. Myrtaceae Guayaba criolla Psidum guajava L. Myrtaceae Guayita de río Chamaedorea cataractarum Mart. Arecaceae Nance Byrsonima crassifolia (L.) Kunth. Malpighiaceae Matalí Tradescantia zebrina Boss. Commelinaceae Oreganón Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng. Lamiaceae Palo de sangre Pterocarpus hayesii Hemsl. Fabaceae Perejil Eryngium foetidum L. Apiaceae Pitaya Hylocereus undatus (Haw.) Birtt. & Rose Cactaceae Pimienta Pimenta dioica L. Merr. Myrtaceae Sibil, Tulipancillo Malvaviscus arboreus Cav. Malvaceae Siricote Cordia dodencandra L. Boraginaceae El jugo de las hojas se emplea como antibiótico, y la decocción se toma contra la diarrea, dolor de garganta y hemorragias23. En México se utiliza en infusión la cáscara de la semilla, del fruto o la hoja como vermífuga y antidiarréica24. Se ha probado la actividad antibiótica del extracto de semillas preparado con éter de petróleo frente a las especies de bacterias Staphylococcus aureus y Sarcina lutea y del extracto etanólico contra Salmonella enteritidis, Citrobacter freundii, Pseudomonas aeruginosa y Enterobacter aerogenes25. http://www.ipni.org/ipni/idPlantNameSearch.do?id=259265-2&back_page=%2Fipni%2FeditSimplePlantNameSearch.do%3Ffind_wholeName%3DTynanthus%2Bguatemalensis%26output_format%3Dnormal http://www.cicy.mx/sitios/flora%20digital/indice_tax_generos.php?familia=Bignoniaceae http://www.ipni.org/ipni/idPlantNameSearch.do;jsessionid=D03767D4EA5685B75E1E801FD3772DC9?id=516478-1&back_page=%2Fipni%2FeditSimplePlantNameSearch.do%3Bjsessionid%3DD03767D4EA5685B75E1E801FD3772DC9%3Ffind_wholeName%3DPterocarpus%2Bhayesii%26output_format%3Dnormal 9 Figura 1. Aguacate, Persea americana El extracto acuoso del mesocarpo mostró actividad antifúngica contra Microsporum canis y M. gypseum con zonas de inhibición de 40.5 y 31.2 mm de diámetro, respectivamente26. La infusión de la cáscara seca presentó un contenido total de compuestos fenólicos de 123.57±4.64 mg EAG L-1 y 14.09±2.71 meq QE L-1 de flavonoides27. En un estudio fitoquímico de las hojas se demostró la presencia de alcaloides, taninos y glucósidos que han mostrado actividad antimicrobiana28. Albahaca de la tierra, Ocimum micranthum Es una planta herbácea, perteneciente a la familia Lamiaceae, originaria de las regiones tropicales y subtropicales de América, cultivada con fines ornamentales y/o medicinales. Las hojas son la parte de la planta más utilizada y la infusión es la forma de preparación más común para tratar enfermedades de tipo gastrointestinal como úlceras, gastritis, fiebre intestinal, inflamación; disentería, empacho, vómito, inflamación y dolor de estómago; también se usa como vermífugo y antiemético29,30. 10 Figura 2. Albahaca de la tierra, Ocimum micranthum La albahaca también se utiliza para contrarrestar el resfriado; el principal uso es como remedio contra gusanos que algunas veces parasitan las fosas nasales de la gente de los trópicos; para esto, las hojas se pulverizan y colocan dentro de la nariz y así las larvas salen. Se utiliza con fines ceremoniales y religiosos y para aliviar inflamaciones en los animales. También se cultiva como hierba de olor31. Conocida mundialmente como “basil”, es usada en ceremonias rituales y medicina tradicional y contiene componentes activos que pueden tener actividad antimicrobiana, insecticida, nematicida, fungística y antioxidante29. El extracto etanólico de las hojas mostró actividad antibacteriana contra E. coli y S. aureus32. De las hojas con tallos de O. micranthum se ha extraído un aceite esencial en el que se identificaron los monoterpenos canfeno, cineol, linalol, mirceno, cistransocimeno, alfa- y beta-pineno y alfa-terpineol; los sesquiterpenos aromandreno, beta cariofileno, beta-, delta y gamma- 11 elemeno, alfa-humuleno y neridol; y liganano eugenol29. Los principales compuestos de O. americanum furos (Z)-metil cinnamate, 1,8-cineole, linalool y α-terpineol33. Caamal-Herrera et al.34 encontraron tres aceites esenciales principales en O. micrantum: cariofileno (27%), metileugenol (14%) y eugenol (12%); también se han reportado al eugenol (60.37%), como compuesto mayoritario, además de eucaliptol (12.09%), cis-β- terpineol (4.25%) y α-terpineol (4.43%) en la misma especie35,36.Ciruela, Spondias purpurea El nombre común del fruto comestible es ciruela, pertenece a la familia Anacardiaceae. Las hojas se utilizan en el tratamiento del salpullido37. Es una planta de origen americano de uso muy antiguo. Se indicaba en el siglo XVI contra afecciones de la piel, en particular para curar la sarna. Hoy en día, se sigue recomendando contra ciertas afecciones de la piel y, puesto que se ha detectado una actividad antibiótica en sus extractos, esto valida hasta cierto punto tal uso24. Con la fruta se prepara un jarabe para curar la diarrea crónica. La decocción astringente de la corteza se usa como remedio para la sarna, úlceras, disentería y para hinchazón causado por gas intestinal en bebés23. La infusión de hojas se usa para lavar heridas, inflamaciones y quemaduras; el extracto de la corteza cocida es un remedio para la roña, disentería y para la flatulencia infantil; la savia de la corteza se usa para tratar estomatitis en infantes; el extracto del fruto se utiliza para sanar inflamaciones y como jarabe se usa para curar diarrea crónica. La corteza y la hoja son antipiréticos y antidiarréicos. Se ha reportado que además se utiliza para enfermedades del intestino y la vejiga, así como remedio contra la sarna38. Engels et al.39 analizaron la cáscara liofilizada de la fruta y encontraron más de 20 compuestos fenólicos Principalmente ácido gálico y galoil glucosa), flavonoles (quercetina, ramnetina, kampferol), quercetin glucósidos, derivados de kampferol y derivados de ramnetina. http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=salpullido 12 Figura 3. Ciruela, Spondias purpurea Chapaya, Astrocarym mexicanum Pertenece a la familia Arecaceae. La inflorescencia de la palma es comestible, con alto contenido de fibra dietaria. Se conoce comúnmente como chapaya, chapay, chichón. Es una inflorescencia que se asa o se cuece antes de prepararla con huevo; también se usa como sustituto de carne en platillos que se preparan en la época de cuaresma40. Quero41 la reportó como una especie del género Astrocaryum que crece en México, muy abundante en los trópicos, en estrato medio de la selva alta perennifolia y semiperennifolia en diferentes regiones, principalmente en Chiapas, Tabasco, Oaxaca y Veracruz. Esta inflorescencia también ha sido reportada como comestible en Los Tuxtlas, Veracruz y es comercializada en los mercados locales en los meses de abril a mayo en donde es conocida comúnmente como chocho42. 13 Figura 4. Chapaya, Astrocarym mexicanum Chichimecate, Tynanthus guatemalensis Es un bejuco que pertenece a la familia Bignonaceae y se utiliza como infusión de las hojas contra la diarrea en Tabasco y posee un olor característico a eugenol37. Se ha reportado su eficacia en el tratamiento de la diabetes, basada en información etnobotánica de curanderos Mayas en la región de Mesoamérica. Tal actividad la confirmaron por medio de pruebas in vitro que evaluaron la inhibición de la formación de productos finales de glucación avanzada (endproducts glycation advanced, AGE), substancias consideradas como importantes mediadores patogénicos de complicaciones diabéticas43. El extracto hexánico de las hojas mostró actividad antimicrobiana contra Bacillus ceresus reportando saponinas, antocianinas y flavonoides como principales compuestos presentes en el tallo44. 14 Figura 5. Chichimecate, Tynanthus guatemalensis Guaya de cerro, Chamaedorea alternans En los estados de Puebla y Veracruz, México, se prepara una infusión de las hojas para el tratamiento de la tos y la neumonía. No habían sido reportados estudios químicos biológicos de esta planta perteneciente a la familia Arecaceae. Sin embargo, Jiménez et al.45 estudiaron el fraccionamiento químico del extracto de hoja con hexano y aislaron dos triterpenoides, un sesquiterpenoide y un éster metilo un ácido graso y algunos de ellos parecen ser los responsables activos contra Mycobacterium tuberculosis. Los extractos de las hojas de Chamaedorea tepejilote, tanto en hexano como en metanol, fueron evaluados para detectar la actividad antimicobacteriana y encontraron que la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) fue de 200 μg ml-1 para el extracto de hexano y >200 μg ml-1 para el extracto de metanol46. 15 Figura 6. Guaya de cerro, Chamaedorea alternans Guayaba agria, Psidium friedrichsthalianum Pertenece a la familia botánica Myrtaceae. El fruto de esta planta es comestible y de sabor muy ácido; en la medicina tradicional de la zona de la sierra del estado de Tabasco se utilizan principalmente la hoja y la corteza en infusión contra la diarrea37. Guayaba criolla, Psidium guajava Pertenece a la familia Myrtaceae y se cultiva en zonas tropicales. Su origen es incierto, pero se le ubica en Mesoamérica. En México se encuentra silvestre desde el Sur de Tamaulipas, Este de San Luis Potosí, al Norte de Puebla hasta Veracruz y en la Península de Yucatán en la vertiente del Golfo de México, de Sonora hasta Chiapas en la vertiente del Pacífico47. Su fruta es utilizada para hacer bebidas, dulces, jalea, pasta o para consumirla en fresco; contiene más del doble de vitamina C que la naranja y puede contener entre 486 mg y 871 mg por 100 g de fruto fresco, dependiendo de la variedad. La hoja es usada para curar enfermedades gastrointestinales, escalofríos y dolor de estómago24. 16 Figura 7. Guayaba agria, Psidium friedrichsthalianum Las hojas de guayaba son empleadas tradicionalmente en Cuba y en otros países del continente americano para tratar la diarrea aguda simple48. Moron et al.49 validaron el efecto antidiarreico de la tintura de hojas de guayaba al 20% encontrando que disminuyó significativamente y de manera dosis dependiente el tránsito intestinal. Los Aztecas y los Mayas preparaban una decocción de hojas y corteza para tratar problemas gastrointestinales. Actualmente la infusión que se obtiene del cocimiento de las hojas se toma como remedio para la diarrea, dolores estomacales, úlceras y disentería23. En México, las hojas de Psidium guajava se han usado extensivamente para parar la diarrea50 y en Tabasco se usa para combatir enfermedades gastrointestinales, principalmente la diarrea37. La planta tiene las siguientes propiedades y acciones: febrífuga, antisecretoria, antimicrobiana, bactericida, cicatrizante, emenagoga, hipoglicémica, laxativa, nutritiva, espasmolítica. Tiene un uso muy antiguo y http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=diarrea 17 actualmente es importante para tratar casi medio centenar de padecimientos en casi todo el país. En la región del sureste se emplea en cocimiento para tratar la debilidad y vómito y la cocción de las hojas sirve para la disentería y los cólicos en la zona de la Huasteca. En padecimientos de la piel, las hojas solas o mezcladas con otras hierbas, se ponen a hervir y después se aplican de forma local en lavados o cataplasmas. El fruto fresco es laxante y tiene propiedades hipoglicémicas38. Figura 8. Guayaba criolla, Psidium guajava Asimismo, se ha detectado la actividad antibacteriana in vitro contra Shigella dysenteriae, Escherichia coli, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis, Candida albicans y los extractos liposoluble y metanólico de las hojas inhiben el crecimiento in vitro de Plasmodium falciparum. Las hojas contienen un aceite esencial rico en cariofileno, nerolidiol, 3-bisaboleno, aromandreno y para-selíneno. También se han 18 detectado beta-sitosterol, los triterpenoides: ácidos oleanólico, ursólico, catególico y guayavólico; 10% de taninos derivados del ácido elágico y los flavonoides quercetina y quercetín-3-arabinósido. En la raíz se han detectado leucocianidinas, esteroles y ácido gálico24. Se ha reportadola presencia de flavonoides en guayaba, pero Flores et al.51 reportaron por primera vez a miricetin-3-O-arabinosido, miricetin-3-O-xilosido e isorhamnetin-3-O-galactopiranosido como componentes de esta especie. Guayita de río, Chamaedorea cataractarum Es una especie de la familia Arecaceae. Generalmente crece a orillas de los ríos, de donde proviene su nombre38. La inflorescencia es comestible en la zona de la sierra del estado de Tabasco y es consumida por su sabor amargo por el que se le atribuyen propiedades medicinales. Ocampo52 reportó que las palmas (arecaceas) poseen un grupo característico de principios activos con algunas propiedades medicinales, en particular, de sus componentes fitoquímicos, tales como alcanos, alcoholes, carbohidratos, aminoácidos, cumarinas, cicliotoles, flavonoides, cetonas, hormonas sexuales, saponinas, esteroides, polifenoles, pigmentos y triterpenos. Matalí, Tradescantia pendula var. zebrina Pertenece a la familia Commelinaceae, de la que se han realizado estudios detallados de sus géneros utilizados como plantas de ornato, debido a los colores intensos que presentan en sus hojas y flores. Es originaria de México, El Caribe y Centroamérica. La infusión de esta planta se usa contra trastornos digestivos o para controlar la Diabetes Mellitus Tipo 253, aunque en dosis altas (750 mg kg-1 día-1) se produce un porcentaje bajo de alteraciones hepáticas, en específico, tumefacción celular54. 19 Figura 9. Guayita de río, Chamaedorea cataractarum Se han realizado estudios fitoquímicos a Tradescantia zebrina encontrando que los extractos hexánico y clorofórmico de la parte aérea (400 µg mL-1) mostraron actividad antiparasitaria inhibiendo el crecimiento de Leishmania infantum y Trypanosoma cruzi en 93.5±0.4% y 95±1.0%1.0, respectivamente55. Tan et al.56 reportaron el contenido total de compuestos fenólicos (620.9±39.7 mg GAE 100 g-1), taninos 57.6±3.5 mg TAE 100 g-1) y flavoniodes (906.5±88.2 mg AA100 g-1) en extracto metanólico de las hojas. Las propiedades que se asumen a la hoja son antihelmíntica, antipirética, diurética, emenagoga y ecbólica. Los principales componentes de las hojas son los flavonoides zebrinín y el compuesto mono-decafeilado24. Se encontró en Tabasco que la concentración final de fenoles totales en infusiones de hojas secas de matalí (Tradescantia spathacea) a los 5 minutos fue de 120.54 mg EAG (equivalentes de ácido gálico) 100 g-1, 98.59 mg EAG 100 g-1 a los 10 minutos de extracción y 219.35 mg EAG g-1 a los 15 minutos57. 20 Figura 10. Matalí, Tradescantia pendula var. zebrina Nance, Byrsonima crassifolia Dentro de los nombres comunes por el cual se le conoce destacan: maricao, manteco, chi, maricao verde, nance, nance agrio, nance verde, nanche. Pertenece a la familia Malpighiaceae y es originario de Mesoamérica58. El uso medicinal que se da con mayor frecuencia a esta planta es contra la diarrea, aunque también se indica en otros desórdenes de tipo digestivo como disentería, dolor de estómago, empacho, falta de digestión. En el tratamiento de estos padecimientos se emplea la corteza en cocimiento, por vía oral, presentando propiedades antipiréticas y astringentes. Entre los compuestos antidiarréicos se encuentran el triterpeno beta-amirina24. En la medicina tradicional, la infusión de hojas de esta especie es empleada contra infecciones cutáneas, para corregir desórdenes gastrointestinales, es digestivo, emenagogo, febrífugo, vulnerario y se recomienda para tratar la leucorrea y problemas de las encías, mientras que http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=diarrea http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=disentería http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=dolor%20de%20estómago http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=empacho 21 su corteza tiene propiedades astringentes y la infusión de la misma es empleada como antidiarreico, inflamaciones de la vejiga, contra la sarna y en la cicatrización de heridas40. Por otro lado, Martínez et al.59 mencionan que se utiliza para la afección de los riñones, úlceras, encías flojas, caries, tos. Esta especie ha sido usada para tratar resfriados, hongos en la piel, diarrea, fiebre, indigestión, tuberculosis y mordeduras de serpiente23. Figura 11. Nance, Byrsonima crassifolia La parte más usada en la medicina popular es la corteza, ya que por sus propiedades astringentes se emplea en cocimiento como antidiarréico, para infecciones en la matriz e inflamación en los ovarios y otros tipos de desórdenes digestivos como disentería y dolor de estómago; para curar afecciones de la piel como sarna, salpullido y heridas. Toda la planta es antitusiva, antimicrobiana, antibacteriana, antifúngica y antifebrífuga, así 22 como desinflamante y para tratar la disentería y diarrea. La infusión del tallo y la raíz presentaron actividad antibacteriana sobre Klebsiella pneumoniae, Staphyllococcus aureus, S. epidermis, S. pneumoniae, Micrococus luteus, Escherichia coli, Salmonella typhi, Pseudomonas aeruginosa, Shigella flexnerii, Bacillus subtilis38. De la corteza de esta planta se obtienen fibras muy resistentes que contienen de 17-28% de taninos y 3% de ácido oxálico; las flores son una importante fuente de néctar para las abejas y sus frutos son ricos en vitamina C (90-240 mg 100 g-1), éstos se consumen crudos o cocidos y a veces se dejan reposando en distintos tipos de licor para incrementar su sabor58. El extracto acuoso al 10% de la raíz inhibió el crecimiento de Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa con halos de inhibición de 8.6, 5.2 y 8.2 mm, respectivamente59. Oreganón, Plectranthus amboinicus Se denomina comúnmente como orégano francés y orégano de la tierra60. La especie es nativa de Asia Oriental y se encuentra distribuida en América Tropical61. Pertenece a la familia Lamiaceae. La infusión de la hoja (soasada) se administra vía oral contra el asma. Las hojas constituyen un condimento de consumo humano relativamente extendido62. Es ampliamente utilizado como condimento en los alimentos y se recomienda como medicinal contra catarro y cefalea, como expectorante, antiasmático, antimicrobiano y antiepiléptico. Los ensayos fitoquímicos de taninos, o grupos amino esteroides triterpénicos y aceites esenciales han demostrado que el carvacrol es el compuesto predominante con un 43.1%63. Por otro lado, Shubha y Bhatt64 demostraron la presencia de compuestos fenólicos totales (313 mg GAE g-1) y flavonoides (243 RE g-1); dentro del contenido fenólico encontraron ácidos: gálico, clorogénico, caféico y coumárico así como rutina en el extracto caliente de las hojas. Los compuestos fenólicos de la fracción etil acética de hoja, tallo y raíz de P. amboinicus fueron identificados como 3-metoxi genkwanina, crisimaritina, ácido p-coumárico, ácido caféico, taxifolina, ácido rosmarínico, 23 apigenina y 5-O-metil-luteolina, encontrándose la mayor concentración de fenólicos totales en el tallo seguida de la hoja y la raíz (9.6, 8.4 y 5.4 mg g-1 de equivalentes de ácido gálico, EAG, respectivamente) mientras que la raíz registró el mayor contenido de taninos seguido por la hoja y el tallo (126, 90 y 81 μg g-1 de equivalente de ácido tánico, EAT, respectivamente). Los diferentes extractos de los tres órganos vegetales mostraron actividades antioxidante, anti-inflamatoria, analgésica, diurética, citotóxica y antimicrobiana con diferente potencia65. Figura 12. Oreganón, Plectranthus amboinicus En un estudio para comprobar la actividad antimicrobiana del extracto hidroalcohólico y la fracción etil-acetato (EA) y sus subfracciones contra los aislados de MRSA (meticilina- resistente Staphylococcus aureus, de abscesode piel), se encontró que la fracción EA y sus subfracciones presentaron las más bajas concentraciones mínimas inhibitorias (MIC, 0.25 24 a 0.5 mg mL-1). Las muestras vegetales fueron bacteriostáticas a 2 y 4 veces la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y bactericidas a 100 mg mL-1. La fracción EA presentó sinergismo con vancomicina y un efecto aditivo con ciprofloxacina66. La CMI y CMB del aceite esencial fue la misma (0.09±0.01%) para Klebsiella pneumoniae y al analizar el aceite esencial de las hojas se encontró al carvacrol como el principal componente67. Por otro lado, la CMI del aceite esencial fue de 128 µg mL contra E. coli encontrando a germacreno-D como el principal metabolito secundario (38.60%) del aceite esencial68. Palo de sangre, Pterocarpus hayesii Se conoce en el dominio público como árbol palo de sangre debido a que la resina es de color rojizo y en las comunidades de zona sierra del estado de Tabasco utilizan la corteza preparada en un extracto hidroalcohólico contra infecciones de la piel37. En Costa Rica encontraron que el extracto fresco de la corteza de esta especie presentó mayor actividad antimalárica en ratones (CI50 de 172 mg kg-1) que el que fue sometido a desecación69. Se aplica como bálsamo o ungüento para infecciones de la piel y se ingiere para diarreas23. Perejil, Eryngium foetidum Pertenece a la familia botánica Apiaceae. Es utilizado ampliamente como medicinal, sobre todo contra infecciones respiratorias y fiebres. Además, tiene reputación como estimulante del apetito. Las hojas contienen cantidades considerables de vitaminas A, B1, B2 y C, riboflavina, carotenos, calcio y hierro31. Su principal uso medicinal es para resolver varios problemas del aparato digestivo como diarrea, disentería, meteorismo y como estimulante del apetito24. 25 Figura 13. Palo de sangre, Pterocarpus hayesii Figura 14. Perejil, Eryngium foetidum 26 Las hojas se utilizan para el asma, diarrea, dolor de estómago70. La decocción de la hoja se usa tradicionalmente por vía oral contra el dolor de pecho y ataques, palpitaciones y cansancio, gripe, flatulencia, vómito, fiebre62. La hoja de perejil constituye un condimento de consumo humano relativamente extendido; en forma de té, se utiliza contra vómitos, diarrea, gripe, fiebre, estreñimiento y diabetes, mientras que la decocción de la raíz se usa para las hemorragias uterinas71. Lingaraju et al.72 reportaron que el extracto de etilacetato presentó actividad antibacteriana y antifúngica con halos de inhibición de 20 mm en P. aeruginosa, 25 mm en S. aureus y 28 mm en Candida albicans. Las hojas y flores contienen un aceite esencial en el que se han detectado los componentes fenólicos 4-hidroxi-3-5-dimetil-acetofenona, 2-4- 5-trimetil-benzadehído y ácido 3-4-dimetil-benzoico; los monoterpenos para- cimeno, y alfa-pineno y un ácido graso raro conocido como ácido cáprico73. Contiene ácido ascórbico, hierro y sales orgánicas, limpia el estómago y estimula la producción de jugo gástrico, alivia la hidropesía, ictericia, hipertensión arterial, afecciones hepáticas, afecciones de las vías urinarias, gota, reumatismo y menstruación dolorosa71. En el estudio fitoquímico prelimiar del extracto de etilacetato de hoja se encontró glucósidos, flavonoides, triterpenos, esteroles y taninos72. Pimienta, Pimenta dioica Pertenece a la familia Myrtaceae, es nativa de la región del Caribe especialmente de países como México, Cuba y Jamaica74, también se le puede identificar (sinonimia botánica) como Pimenta officinalis Lindl, Myrtus dioica L.; Myrtus pimenta L. Esta especie aromática es importante en la industria alimentaria, farmacéutica y de cosméticos. El aceite esencial se usa como aditivo alimentario y como antioxidante facilitando la conservación de la carne. Las semillas contienen entre un 3 y 4% de aceites esenciales, así como resinas, taninos, azúcar y gomas75. En el campo medicinal se ha usado como anestésico y en perfumería se usa el aceite esencial de hoja o de fruto debido a su característico aroma76. El fruto y las semillas contienen 27 un aceite esencial que se usa como aromatizante y como estimulante en medicina casera. También se emplea como antiséptico y carminativo23. Es popularmente usado para diversos fines como analgésico, antibacteriano, antiinflamatorio, antipirético, espasmolítico (in vitro) y repelente de insectos, así como actividad antioxidante y antirradicales libres74. Dentro del saber tradicional popular se emplea para combatir el vómito que implica administrar por vía oral la decocción, con sal, de la semilla en asociación con la corteza de la canela (Cinnanomum verum)62. Figura 15. Pimienta, Pimenta dioica Su aprovechamiento tradicional incluye tanto de la hoja como el fruto para tratar el dolor de estómago y cólicos menstruales, diarreas, disentería, tos, aborto, detención de la menstruación y para apresurar el parto. Se ha reportado que el aceite esencial ha presentado actividad antifúngica (hojas y frutos) y los extractos solubles en éter de petróleo y metanólico- clorofórmico preparados con los frutos, presentaron actividad antioxidante. El fruto contiene un aceite esencial en el que se ha identificado el http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=dolor%20de%20estómago http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=diarrea http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=disentería http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=tos http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=parto 28 componente fenólico coniferaldehído. Otros componentes del fruto incluyen los flavonoides ramnósido y xilósido de quercetín e isoquercetín y el componente ferúlico eugenol24. Estudios recientes han mostrado que dos de los compuestos conocidos aislados de la pimienta, eugenol y ácido gálico, tienen propiedades selectivas antiproliferativas y anti-tumorales en células cancerosas humanas y sus modelos animales77,78. La actividad antifúngica del aceite esencial de la pimienta se investigó en 75 aislados de Candida albicans y otras especies de Candida, encontrándose que el aceite inhibió el crecimiento de todas las cepas con zonas de inhibición de 24 a 44 mm y con una concentración mínima inhibitoria para C. albicans de 0.98 µL mL-1 (v/v) y 1.14 µL mL-1 (v/v) para micro- y macro dilución en caldo, respectivamente79. Pitaya, Hylocereus undatus Pertenece a la familia Cactaceae y es un fruto nativo de México y Centro y Sur América80. Su principal uso es como diurético24. El fruto se utiliza contra la disentería70. Mello et al.81 extrajeron betalaínas de la cáscara de la pitaya encontrando que la cáscara fresca contiene altos niveles de compuestos fenólicos (40.68 mg EAG 100 g-1) y presentó mayor actividad antioxidante cuando se analizó por el método DPPH (reducción del radical estable DPPH, 177.14 μmol AEAC (ascorbic acid equivalent antioxidant capacity, equivalente de capacidad antioxidante del ácido ascórbico) 100 g-1 que cuando se analizó por el método de FRAP (potencial antioxidante reductor de hierro, ferric reducing/antioxidant power, 109.29 μmol AEAC 100 g-1). Nurmahani et al.82 estudiaron la actividad antibacteriana de extractos etanólico, clorofórmico y hexánico de pitaya de cáscara roja (H. polyrhizus) y pitaya de cáscara blanca (Hylocereus undatus) contra nueve patógenos encontrando que los extractos clorofórmicos de la cáscara de ambas especies mostraron buena actividad antibacteriana contra casi todos los 29 patógenos estudiados (Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Yersinia enterocolitica, con excepción de Campylobacter jejuni),mostrando zonas de inhibición de 7-9 mm contra S. aureus, L. monocytogenes, E. faecalis, S. typhimurium y Y. enterocolitica. Los resultados de la concentración mínima inhibitoria (MIC) mostraron que todos los extractos inhibieron el crecimiento bacteriano en un rango de 1.25-10.00 mg mL-1 para todas las bacterias mientras que sus concentraciones mínimas bactericidas (MBC) fueron el doble de las concentraciones MIC excepto para Bacillus cereus, Listeria monocytogenes y Campylobacter. jejuni. Figura 16. Pitaya, Hylocereus undatus Por otro lado, Li et al.83 compararon la actividad antioxidante de la flor de Hylocereus undatus proveniente de dos localidades de China donde es usada comúnmente como alimentaria y medicinal. La diferencia en los niveles de la actividad antioxidante correspondió con las diferencias en el contenido químico (incluyendo fenoles totales, flavonoides totales, kaempferol y quercetina) entre ambas muestras. La habilidad antioxidante de la flor parece atribuirse a los fenoles totales (principalmente flavonoides totales) siendo el kaempferol uno de los principales componentes bioactivos. 30 Siricote, Cordia dodencandra Pertenece a la familia Boraginaceae. Tiene usos medicinales, para lo cual la infusión de la corteza y el tallo se aprovecha para tratar la diarrea y la disentería84. Una decocción de la madera o corteza se usa en México como remedio contra gripes, tos y catarro23. Además, se prepara un jarabe de la corteza como remedio anticatarral popular24 y la infusión de la madera se usa para combatir las afecciones respiratorias y gastrointestinales; sin embargo, estos usos medicinales no han sido comprobados científicamente85. Figura 17. Siricote, Cordia dodencandra 31 Tulipancillo, Sibil, Malvaviscus arboreus Pertenece a la familia Malvaceae. Es una planta nativa de México y Brasil, que se caracteriza por poseer una flor roja muy llamativa. En la sinonimia popular se le conoce como chocho, manzanilla, manzanita de pollo, manzanito, monacillo, tulipán, tulipán de monte, tulipancillo, tulipancillo de monte; mientras que en la sinonimia botánica destacan: Malvaviscus acapulcensis Kunth y Malvaviscus mollis DC. Etnobotánicamente, es una especie empleada en México por grupos indígenas, principalmente grupos Mayas, para aliviar trastornos gastrointestinales como disentería, diarrea y dolor de estómago86.87. El fruto es comestible y la infusión de las hojas se usa para lavar el pelo y dejarlo lustroso y suave89 y también es utilizado para la tosferina; su raíz se usa como antiséptico urinario, enfermedades del riñón y como diurético. La flor o tallo y hojas macerados se aplican localmente contra el sarampión90. En las flores se ha identificado el flavonoide pelargonidín y en la raíz el esterol beta-sitosterol, además de la presencia de taninos24. Figura 18. Tulipancillo, Malvaviscus arboreus http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/termino.php?l=1&t=diarrea 33 4. EXTRACTOS DE PLANTAS La NORMA Oficial Mexicana (NOM-139-SCFI-2012) define al extracto como el producto obtenido de los vegetales por maceración, percolación, destilación u otros procedimientos que permitan extraerles los principales saboreadores y aromatizantes91. Los extractos vegetales se encuentran dentro del grupo de aditivos clasificados como “sustancias aromáticas y saborizantes”, en el que se incluyen todos los productos naturales. Estos compuestos, también llamados fitoquímicos, son sustancias naturales presentes en el metabolismo secundario de las plantas que tienen funciones en los sistemas de defensa contra insectos y microorganismos fitopatógenos92; además, algunos de estos compuestos son caracterizados por sus propiedades bioactivas, lo que hace posible su uso en aplicaciones farmacológicas, químicas e industriales93. La composición química de los extractos aislados de plantas aromáticas que son volátiles depende, entre otras variables, del método de extracción que se emplee (con solventes, por infusión, hidrodestilación, fluidos supercríticos) ya que unos favorecen la volatilidad y solubilidad de determinada clase de compuestos presentes en el material botánico (hoja, tallo, raíz, flor, corteza) que se investiga94. Los métodos de extracción de compuestos fitoquímicos deben obedecer a la información de la naturaleza química de las sustancias presentes en la planta y al propósito de la investigación95. Extracción con solventes volátiles o maceración El material debe de ser previamente molido, macerado o picado, para permitir mayor área de contacto entre el sólido y el solvente96. Los materiales vegetales son sumergidos y agitados en un solvente en donde se obtienen otras sustancias hidrofóbicas o solubles en grasas como ceras, pigmentos y resinas97. Durante el proceso, el sólido, el líquido o ambos, deben estar en movimiento continuo (agitación), para lograr mejor eficiencia en la operación. 34 Se realiza preferiblemente a temperatura y presión ambiente. Los solventes más empleados son: etanol, metanol, isopropanol, hexano, ciclohexano, tolueno, xileno, éter de petróleo, éter etílico, éter isopropílico, acetato de etilo, acetona, cloroformo; no se usan clorados ni benceno por su peligrosidad a la salud96. Frecuentemente, se usa la extracción con solventes orgánicos (alcohol, acetato de etilo) de bajo punto de ebullición y de baja reactividad. Algunas veces es conveniente desengrasar el material vegetal con éter de petróleo (extracto etéreo) o hexano. Los extractos son evaporados bajo presión reducida o liofilizados, en el caso de extracción con agua95. Las evaluaciones iniciales de la planta con potencial actividad antimicrobiana comienzan con los extractos acuosos o etanólicos crudos y puede continuar con diferentes métodos de extracción orgánica. Los compuestos excepcionales solubles en agua, tales como polisacáridos, son comúnmente más efectivos como inhibidores de la adsorción de patógenos (generalmente virus) y no pueden ser identificados con las técnicas de exploración comúnmente utilizadas. Los taninos y terpenoides son encontrados en la fase acuosa, pero son más frecuentemente obtenidos por tratamiento con solventes menos polares (Cuadro 2). Para la extracción inicial a partir de una planta, se trata de separar un grupo de componentes con alguna propiedad fisicoquímica y la más utilizada es la solubilidad98. Un extracto acuoso extrae todos los compuestos hidrosolubles (antocianinas, almidón, taninos, saponinas, terpenoides, polipéptidos y lecitinas), un extracto hexánico separa todo lo liposoluble (terpenoides y lactonas), con el extracto etanólico se obtienen taninos, polifenoles, esteroles y alcaloides; con éter se extraen alcaloides, terpenoides, cumarinas y ácidos grasos92. En el Cuadro 2 se enlistan ejemplos de solventes usados en la extracción y los compuestos activos resultantes. Para la extracción con alcohol, el material vegetal es deshidratado, molido y macerado en metanol o etanol de 24 a 48 h. El filtrado es secado a presión reducida y rehidratado en alcohol para la determinación de su 35 concentración. Cuando el agua es utilizada para la extracción, las plantas son generalmente maceradas en agua destilada con agitación y después filtrada99. Cuadro 2. Solventes usados para la extracción de compuestos activos. Fuente: Cowan92. Para el extracto con solventes, se pesan 5 g de muestra, se coloca en un matraz Erlenmeyer de 500 ml y se le adicionan 200 ml de etanol al 95 % o hexano al 98.5%. Se mantiene la muestra en agitación a temperatura ambiente por 24 h en un agitador orbital continuo a 100 rpm; después se filtra a través de papel filtro, con la ayuda de presión reducida (vacío), separando los sólidos. El siguiente paso consiste en eliminar el solvente en unrotavapor con presión reducida y a 43±2ºC hasta concentrar el sobrenadante hasta aproximadamente 5 ml de extracto. Finalmente, se Solvente Compuestos activos Agua Antocioninas, Almidones, Taninos, Saponinas, Terpenoides, Polipéptidos y Lectinas. Etanol Taninos, Polifenoles, Poliacetilenos, Flavonol, Terpenoides, Esteroles, Alcaloides y Propolis. Metanol Antocioninas, Terpenoides, Saponinas, Taninos, Xantoxilinas, Totarol, Cuasinoides, Lactonas, Flavonas, Fenonas y Polifenoles. Cloroformo Terpenoides y Flavonoides. Diclorometanol Terpenoides. Éter Alcaloides, Terpenoides, Cumarinas y Ácidos grasos. Acetona Flavonoles. Hexano Terpenoides y Lactonas. 36 coloca la muestra en la estufa de vacío a 45°C por 48 h hasta secarla completamente46. Los solventes se recuperan por destilación y pueden ser reutilizados96. Extracción por infusión Para los extractos obtenidos por infusión, el material de cada especie vegetal es lavado y escurrido por medio de una centrífuga manual de vegetales; se pesan 100 g y se colocan en 500 mL de agua destilada a 100 ºC dejando 10 min en ebullición. Se filtra en papel filtro Whatman Nº 4100,101. El filtrado se somete a liofilización102. Extracción por hidrodestilación La extracción del aceite esencial se realiza por hidrodestilación. Para ello, se requiere de un sistema de refrigeración para condensar el vapor producido por la ebullición de la muestra con agua. Se colocan 200 g de la muestra en el matraz balón, se le agregan 500 ml de agua destilada. Se calienta el agua con la muestra a 100°C y cuando el vapor de agua empieza a condensar se mantiene la extracción durante cuatro horas. Las muestras se recolectan en un matraz Erlenmeyer que se coloca sobre una base de hielo para evitar que se pierdan los compuestos volátiles. Al extracto obtenido se le adiciona hexano en un embudo de separación, agregando el solvente en la misma proporción del volumen de muestra obtenida, con la finalidad de eliminar el agua que pudiera existir en el extracto, lo cual permite que el extracto forme dos fases: el aceite esencial en la primera fase y la acuosa en la segunda; a la fase acuosa separada se le agrega de nuevo hexano, realizando esta operación por triplicado. El solvente residual se elimina a presión reducida en un rotavapor y el extracto crudo obtenido se almacena en un vial ámbar103. La muestra agua-aceite es condensada y 37 luego separada empleando un embudo de separación, el aceite obtenido se seca con sulfato de sodio anhidro94. Estos sistemas son muy utilizados en el campo, son fáciles de instalar, se pueden llevar de un sitio a otro, son baratos, seguros, fáciles de operar y presentan un consumo energético bajo. Los aceites producidos son más coloreados, que los obtenidos por arrastre con vapor propiamente dicho y tienden a presentar un cierto olor a quemado. Por lo anterior, estos aceites siempre van a requerir una etapa posterior de refinación96. Extracción por arrastre de vapor La destilación por arrastre de vapor de agua es el método más usado a nivel comercial para obtener compuestos aromáticos contenidos en los aceites esenciales. El material vegetal molido se calienta en agua hasta ebullición para posteriormente condensar los vapores97. El principio básico de la destilación de dos líquidos heterogéneos, como el agua y un aceite esencial, es que cada uno ejerce su propia presión de vapor como si el otro estuviera ausente, cuando las presiones de vapor combinadas alcanzan la presión en el recipiente. Por efecto de la temperatura del vapor del agua (100 ºC) el tejido vegetal se rompe liberando el aceite esencial104. Extracción por Fluidos Supercríticos En este proceso se utiliza dióxido de carbono (CO2) líquido como solvente de extracción a altas presiones y a temperatura ambiente97. No es tóxico, ni explosivo, ni incendiario, es bacteriostático y es clasificado por la FDA (Food and Drug Administration, Agencia de Drogas y Alimentos de Estados Unidos) como GRAS (Generally Recognized As Safe), que significa Generalmente Reconocido Como Seguro para la salud96. Este gas es ideal ya que es fácil de remover de los productos extraídos. Este procedimiento 38 presenta múltiples ventajas, entre las cuales sobresalen su alto rendimiento, reciclaje del solvente y ausencia de contaminación ambiental94. El punto crítico corresponde a las condiciones de temperatura y presión, para un gas o un vapor, por encima de las cuales la sustancia ya no puede ser “licuada” por incremento de presión. Adicionalmente, las propiedades de la fase líquida y/o vapor son las mismas, es decir, no hay diferenciación visible ni medible entre gas y líquido. La inversión inicial para estos procesos es alta, aún para equipos en pequeña escala, debido a la tecnología involucrada, a los costos de materiales y de construcción96. Las ventajas y limitaciones de los diferentes métodos de extracción de aceites esenciales se enlistan en el Cuadro 3. Rendimiento de los extractos crudos obtenidos de las plantas estudiadas En este apartado se reporta el rendimiento de los extractos obtenidos por los métodos de extracción de las plantas en estudio. En el Cuadro 4 se reporta el rendimiento de los extractos crudos obtenidos por maceración en etanol y en hexano. El mayor rendimiento se obtuvo con etanol de Persea americana (6.579 ± 0.388%) y con hexano de Cordia dodecandra (4.140 ± 0.054%). El rendimiento de los extractos acuosos obtenidos por infusión y posteriormente liofilizados se reporta en el Cuadro 5, donde se muestra que el extracto de Pimenta dioica obtuvo el mayor rendimiento promedio con 3.46 %, seguido de Malvaviscus arboreus que obtuvo un rendimiento de 1.50 %, mientras que el menor rendimiento fue para Tradescantia zebrina con 0.96 %. 39 Cuadro 3. Principales métodos de extracción de aceites esenciales, ventajas y limitaciones. Método Ventajas Limitaciones Arrastre con vapor Buenos rendimientos en aceite extraído. Obtención del aceite puro, libre de solvente. Bajo costo. Procesos colaterales de polimerización y resinificación de terpenos o hidrólisis de ésteres. Destrucción térmica de algunos componentes. Extracción líquido- líquido (solventes volátiles) Uso de temperaturas bajas. No provoca termodestrucción ni alteración química de los aceites. Costoso, contaminante, riesgo de incendio y explosión. Difícil separar completamente el solvente. Extracción con fluido supercrítico CO2 Alto rendimiento. No contamina. Se puede reciclar el solvente. No hay alteración química del aceite. Ácidos grasos, pigmentos y ceras también pueden ser extraídos junto con los aceites esenciales. Alta inversión inicial. Maceración (solventes no volátiles y Enfleurage) No hay destrucción térmica y deterioro químico de los compuestos. Extracción de esencias de flores delicadas (rosa, jazmín, azahar, etc.). Poco rendimiento del aceite esencial. Difícil separación del solvente Fuente: Gil y Saéz105. 40 Cuadro 4. Rendimientos de los extractos crudos obtenidos con etanol y hexano. Planta Rendimiento con etanol (%) Rendimiento con hexano (%) Cordia dodecandra 1.241 ± 0.169 4.140 ± 0.054 Hylocereus undatus 1.140 ± 0.054 1.132 ± 0.023 Persea americana 6.579 ± 0.388 3.838 ± 0.021 Psidium friedrichsthalianum 0.995 ± 0.039 1.208 ± 0.008 Fuente: Montejo y Hernández106. Cuadro 5. Rendimiento promedio de los extractos acuosos. Planta Rendimiento (%) Malvaviscus arboreus 1.50 + 0.2 Pimenta dioica 3.46 + 0.9 Tradescantia zebrina 0.96 + 0.2 Fuente: Montero107. El rendimiento del aceite esencial obtenido por hidrodestilación, arrastre de vapor y fluido supercrítico se muestra en el Cuadro 6, en el cual se observa que el aceiteesencial con mayor pureza es por el de hidrodestilación, se utilizó el método de arrastre por vapor para aumentar el rendimiento y, finalmente, se utilizó el fluido supercrítico aumentó el rendimiento en todos los casos a excepción del aceite de pimienta. 41 Cuadro 6. Rendimiento (%) de aceites esenciales. Planta Hidrodestilación Arrastre de vapor Fluido supercrítico Byrsonima crassifolia 0.004 - - Cordia dodecandra 0.128 - - Eryngium foetidum - 0.027 0.63 Hylocereus undatus 0.012 - - Malvaviscus arboreus 0.043 - - Ocimum micranthum - 0.351 0.569 Persea americana 0.032 - - Pimenta dioica 0.027 0.829 0.815 Plectranthus amboinicus - 0.236 0.253 Psidium friedrichsthalianum 0.018 - - Psidium guajaba 0.011 - - Fuente: Montejo y Hernández106; Reyes y Zarrabal108; Vázquez109. 43 5. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA La actividad antimicrobiana de los extractos vegetales y productos naturales ha revelado el potencial de las plantas superiores como fuente de agentes anti-infectivos, permitiendo de esta manera un avance al uso empírico de las especies vegetales medicinales con una base científica110. Ésta actividad se mide in vitro para determinar la potencia de un agente antimicrobiano en solución, su concentración en los líquidos del cuerpo o en los tejidos y la sensibilidad de un microorganismo dado a concentraciones conocidas del medicamento. Las sustancias antimicrobianas son compuestos químicos que retardan el crecimiento (microstáticos) o causan la muerte de microorganismos (microcidas). Los sistemas antimicrobianos naturales pueden clasificarse por su origen en: animal, microbiano y vegetal. Este último incluye compuestos fenólicos provenientes de la corteza, tallo, hoja o flor de las plantas111. Los métodos que se utilizan para evaluar la actividad de los antimicrobianos se pueden dividir en pruebas in vitro y pruebas de aplicación. En las primeras, el compuesto se aplica directamente al producto y con ellas se determinan la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y la Concentración Mínima Bactericida (CMB). Las últimas, también conocidas como métodos de barrido, pueden incluir cualquier prueba en el que el compuesto no se aplica directamente al producto y proveen información preliminar para determinar la eficacia del compuesto112. Pruebas de la actividad antimicrobiana in vitro Entre los factores que pueden influir en los ensayos de la actividad antimicrobiana están: la fuente botánica, la procedencia de las plantas, el desarrollo y/o tiempo de cosecha, el estado del material fresco o deshidratado, las técnicas de extracción, los microorganismos ensayados y la metodología utilizada112, así como del volumen del inóculo, de la fase de crecimiento del microorganismo, del medio de cultivo usado, del pH del 44 medio y del tiempo y temperatura de incubación113. Las pruebas de actividad antimicrobiana pueden ser clasificadas como métodos de difusión, bioautografía y métodos de dilución. Las dos primeras son conocidas como técnicas cualitativas que dan solamente una idea de la presencia o ausencia de sustancias con actividad antimicrobiana y el método de dilución está considerado como ensayo cuantitativo114. Técnica de difusión en agar Esta técnica de actividad antimicrobiana consiste en aplicar una cantidad determinada del extracto en estudio en un disco de papel sobre la superficie de la placa con medio de cultivo y donde se ha distribuido el inóculo del microorganismo prueba, es el primer estudio que se realiza normalmente. La sensibilidad del microorganismo al extracto se relaciona con el tamaño de la zona de inhibición del crecimiento bacteriano9. Figura 19. Halos de inhibición obtenidos por la técnica de difusión en agar. 45 Método de dilución en medio de cultivo y en agar Se obtienen datos cuantitativos pues el extracto se incorpora al medio. Para lograr el rango de dilución deseado, se prepara una serie de placas con diferentes concentraciones del extracto. Los resultados se expresan como Concentración Mínima Inhibitoria (CMI), es decir, la menor concentración del extracto que produce el 90% de reducción de crecimiento de las colonias, o como Concentración Mínima Bactericida (CMB), la mínima concentración del extracto que produce al menos un 99% de reducción en el crecimiento de las colonias9. Bioautografía Consiste en sembrar una placa cromatográfica con cada uno de los extractos previamente corridos con un sistema de solventes, dependiendo si el extracto es polar, medianamente polar o no polar. Se coloca cada una de las placas en contacto con la caja que contiene la suspensión bacteriana y el agar específico previamente solidificado para el tipo de microorganismo, de tal forma que la sílica gel con el extracto corrido queda en contacto con el agar110. La presencia de bacterias vivas se observa por la coloración con la solución cloruro de 2,3,5-trifenil-2H-tetrazolio al 1% y se evalúa la presencia de los halos de inhibición registrando los valores de referencia frontal (Rf) de las zonas presentes en cada extracto115. Bioensayos in vitro El bioensayo es la técnica que cuantifica la relación concentración- efecto de compuestos químicos conocidos o mezclas complejas, por medio de respuestas biológicas medidas bajo condiciones controladas y estandarizadas. Celikel y Kavas116 propusieron que se considerara al microorganismo, de acuerdo al diámetro del halo inhibición del crecimiento, como no sensible si el diámetro total es menor de 8.0 mm, sensible para diámetros entre 9 y 14 mm, muy sensible para diámetros de 15 a 19 mm y extremadamente sensible para diámetros de inhibición mayores de 20 mm. 46 En este trabajo se describen los bioensayos realizados con extractos crudos de especies vegetales reportadas con uso medicinal tradicional en Tabasco, donde se determinó la actividad antimicrobiana de diversos extractos contra bacterias patógenas generalmente presentes en los alimentos y que pueden causan enfermedades gastrointestinales. Extractos etanólicos Se realizaron bioensayos de extractos etanólicos crudos de diez especies (Cuadro 7) y se encontró que la actividad de la hoja de P. friedrichsthalianum medida por el halo de inhibición fue de 23 y 22 mm para Bacillus cereus y Salmonella typhimurium, respectivamente. Las bacterias usadas resultaron extremadamente sensibles a este extracto pues la CMI que presentaron fue de 1.92 mg mL-1 para B. cereus y 7.5 mg mL-1 tanto para Staphylococcus aureus como para S. typhimurium. Por otro lado, B. cereus fue el más sensible a los extractos etanólicos de P. friedrichsthalianum, S. purpurea y P. americana. En bioensayos realizados por Salinas et al.117 sobre la actividad antimicrobiana de plantas medicinales en el estado de Morelos, encontraron que los extractos crudos son promisorios cuando presentan una Concentración Mínima Inhibitoria entre 2.5 a 8.0 mg mL-1. Por lo tanto, con los valores encontrados para estas cuatro especies, se pueden considerar a sus extractos etanólicos con potencial antimicrobiano. Extractos hexánicos La bacteria más sensible fue B. cereus pues siete de los extractos hexánicos crudos mostraron actividad antimicrobiana de 2.5 a 7.5 mg mL-1 (Cuadro 8) y las especies con mayor actividad fueron P. friedrichsthalianum que inhibió el crecimiento de las tres especies bacterianas estudiadas mientras que P. hayesii, T. guatemalensis, P. americana, H. undatus, C. dodecandra y C. cataractarum fueron más efectivas para B. cereus. 4 7 Cuadro 7. Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de extractos etanólicos crudos (mg mL-1). Nombre común Nombre científico Salmonella typhimurium Bacillus cereus Stahylococcus aureus Guayaba agria, hoja Psidium friedrichsthalianum 7.5 1.92 7.5 Ciruela Spondias purpurea>60 3.85 15.0 Palo de sangre Pterocarpus hayesii >60 >60 30 Chichimecate Tynanthus guatemalensis >60 >60 30 Aguacate, hoja Persea americana 20 5 20 Pitaya Hylocereus undatus 20 20 20 Siricote Cordia dodecandra 20 20 20 Guayita de río Chamaedorea cataractarum >60 >60 >60 Chapaya Astrocarym mexicanum >60 >60 >60 Guaya de cerro Chamaedorea alternans >60 >60 >60 Fuente: López y Vera118; Montejo y Hernández106. 48 Cuadro 8. Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de extractos hexánicos crudos (mg mL-1). Nombre común Nombre científico Salmonella typhimurium Bacillus cereus Stahylococcus aureus Guayaba agria Psidium friedrichsthalianum 1.9 2.5 1.3 Ciruela Spondias purpurea >60 15 >60 Palo de sangre Pterocarpus hayesii 30 7.5 30 Chichime cate Tynanthus guatemalensis 30 3.9 15 Aguacate Persea americana 20 5.0 20 Pitaya Hylocereus undatus 10 2.5 20 Siricote Cordia dodecandra 20 5.0 20 Guayita de río Chamaedorea cataractarum 15 3.9 30 Chapaya Astrocarym mexicanum 30 30 30 Guaya de cerro Chamaedorea alternans 15 15 30 Fuente: López y Vera118; Frías119; Montejo y Hernández106. 49 Extracto acuoso El extracto liofilizado de Tradescantia zebrina obtenido por infusión presentó actividad antimicrobiana determinada por el método de bioautografía donde se encontraron dos sustancias activas. Por otro lado, la Concentración Mínima Inhibitoria fue de 4.7 a 8.0 mg mL-1 para las bacterias S. aureus, B. cereus, S. typhimurium y E. coli y, aunque presentó halos de inhibición de 2.0 a 3.3 mm de diámetro (Cuadro 9), es un extracto promisorio para continuar su estudio. El extracto acuoso de P. dioica presentó halos de inhibición de 3.7 a 12.0 mm de diámetro para las cuatro especies bacterianas probadas (Cuadro 9), siendo consideradas sensibles en la prueba de actividad antimicrobiana por difusión en agar. Además, la CMI de P. dioica fue de 1.7 a 4.0 mg mL-1 para las cuatro bacterias por lo que se considera un extracto muy promisorio para continuar el estudio de sus efectos antimicrobianos. Por otro lado, el extracto acuoso de M. arboreus presentó también actividad antimicrobiana con halos de inhibición de 1.7 a 5.0 mm para las cuatro bacterias y una CMI de 5.3 y 8.7 mg mL-1 para B. cereus y S. typhimurium, respectivamente. Extractos crudos de aceites esenciales Para los aceites esenciales extraídos por el método de arrastre de vapor, se encontró una substancia con zona de inhibición y un Rf de 0.509 por bioautografía con el extracto crudo de aceites esenciales de Ocimum micranthum para S. aureus; además, la CMI fue de 12.5 mg mL-1 para esta misma bacteria (Cuadro 10). Por otro lado, el aceite de Plectranthus ambonicus fue activo con un Rf de 0.545 para S. aureus en la bioautografía y la CMI fue de 6.25 mg mL-1; el extracto de Eryngium foetidum presentó dos Rf: 0. 454 y 0.636 por bioautografía para S. aureus con una CMI de 12.5 mg mL-1; el aceite de Pimenta dioica presentó también dos Rf: 0.363 y 0.454 con una CMI de 0.39 mg mL-1 por lo que se puede considerar un aceite esencial con gran potencial antimicrobiano. 5 0 Cuadro 9. Actividad antimicrobiana (AAM, mm) y Concentración Mínima Inhibitoria (CMI, mg mL-1) de extractos acuosos liofilizados. Nombre común Nombre científico Salmonella typhimurium Bacillus cereus Staphylococcus aureus Escherichia coli AAM CMI AAM CMI AAM CMI AAM CMI Sibil Malvaviscus arboreus 4.7 8.7 2.7 5.3 1.7 12.0 5.0 >16 Pimienta Pimenta dioica 3.7 4.0 12.0 1.7 11.3 2.3 3.7 3.3 Matalí Tradescantia zebrina 3.0 7.0 2.0 5.7 3.3 4.7 2.7 8.0 Control positivo Amikasina (1 %) 9.3 15.3 17.0 9.3 Fuente: Montero107. 51 Cuadro 10. Concentración Mínima Inhibitoria de aceites esenciales (mg mL-1). Nombre común Nombre científico Staphyloccus aureus Albahaca de la tierra Ocimum micranthum 12.5 Perejil Eryngium foetidum 12.5 Oreganón Plectranthus ambonicus 6.25 Pimienta Pimenta dioica 0.39 Fuente: Reyes y Zarrabal108. Con respecto a la actividad antimicrobiana del extracto de aceite esencial de P. dioica extraído por el método de hidrodestilación y determinada por bioautografía, se encontraron dos fracciones con valores de Rf de 0.34 y 0.42 para S. aureus y uno (0.42) para S. typhimurium y B. cereus. Además, se encontraron tres fracciones con Rf (0.5, 0.56 y 0.68) para P. guajava106. Por otro lado, el microorganismo más susceptible fue B. cereus que presentó una CMB fue 2.5 y 5 mg mL-1 para los aceites esenciales de P. dioica y P. guajava, respectivamente (Cuadro 11), corroborando con estos datos que al menos un compuesto presenta actividad y considerando a ésta bacteria como muy sensible para estos aceites esenciales. Finalmente, los aceites esenciales que presentaron una acción bactericida fueron los de P. dioica y P. guajava frente a S. aureus y B. cereus y el de M. arboreus frente a S. typhimurium y B. cereus. La acción de los otros aceites esenciales fue bacterióstática109. 52 Cuadro 11. Concentración Mínima Bactericida de aceites esenciales (mg mL-1). Nombre común Nombre científico Salmonella typhimurium Bacillus cereus Staphylococcus aureus Pimienta P. dioica 20 2.5 10 Nance B. crassifolia 20 20 20 Guayaba criolla P. guajava 20 5 10 Sibil M. arboreus 20 20 5 Fuente: Vázquez109. 53 6. COMPONENTES DE LOS ACEITES ESENCIALES Los principales grupos de compuestos antimicrobianos de las plantas son principalmente metabolitos secundarios que las plantas utilizan como mecanismos de defensa contra microorganismo depredadores, insectos y herbíveros. Entre los fenoles y polifenoles, se encuentran fenoles simples y los fenoles ácidos como el catecol y epicatequina así como los ácidos cianámico, cafeíco y gálico. Entre las quinonas están la quinona e hipericina y los flavones y flavonoides incluyen la catequina, quercetina y absinona. Entre los flavonoles está el totarol, entre los taninos la elagitanina y, finalmente, entre las cumarinas están cumarina y warfina. Por otro lado, los terpenoides son estructuras de isopreno llamadas terpenos y cuando contienen oxígeno son denominados terpenoides. Todos estos compuestos son activos contra bacterias, hongos, virus y protozoarios92. Entre los diferentes factores que pueden alterar la composición del aceite esencial, se puede citar a la variedad genética y el estado de desarrollo de la planta o sus órganos, factores geográficos y ambientales como la temperatura, luminosidad, humedad relativa, composición del suelo, prácticas culturales, corte, operaciones postcosecha y método de extracción97. Los aceites esenciales son volátiles y es necesario almacenarlos en contenedores oscuros para prevenir el cambio en la composición (Burt, 2004). Sin embargo, un factor que puede ser considerado cuando se investigan los aceites esenciales es que, al estar compuestos de componentes volátiles, los compuestos antimicrobianos pueden finalizar su vida útil y evaporarse120. Los principales componentes de los aceites esenciales pueden constituir hasta el 85 % del aceite y el resto de los compuestos se encuentran en pequeñas cantidades o trazas97. Se ha reportado que fitoquímicos como el eugenol han presentado actividad antimicrobiana7,121,122. Otras sustancias con actividad antimicrobiana son el α-terpineol, 4-terpinol, cariofileno, 54 curcumeno, óxido de cariofileno123 y 8-cineol, también conocido como eucaliptol124. En el Cuadro 12 se enlistan los compuestos de los aceites esenciales de siete de las especies vegetales estudiadas por los autores y que han sido reportados con actividad antimicrobiana. Entre los más importantes, se encontró al eugenol que está presente en el aceite
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